La deficiencia de G6PD reduce la energa disponible para mantener la integridad de la

membrana del eritrocito, lo que acorta su supervivencia.

La hemlisis afecta selectivamente a eritrocitos ms antiguos en los sujetos afectados de raza

negra y en la mayora de los de raza blanca. La hemlisis suele producirse despus de fiebre,
infecciones virales o bacterianas agudas, y acidosis diabtica. Con menor frecuencia, se
observa hemlisis despus de la exposicin a frmacos o a otras sustancias que producen
perxido y causan oxidacin de la Hb y la membrana de los eritrocitos. Estos frmacos y
sustancias son primaquina, salicilatos, sulfamidas, nitrofuranos, fenacetina, naftaleno, algunos
derivados de la vitamina K, dapsona, fenazopiridina, cido nalidxico, azul de metileno y, en
algunos pacientes blancos, habas. Que el uso continuado del frmaco nocivo cause un estado
hemoltico compensado o hemlisis letal depende del grado de deficiencia de G6PD y del
potencial oxidante del frmaco. Algunas personas de raza blanca presentan hemlisis
congnita crnica (sin uso de frmacos). Como en los negros hay destruccin selectiva de las
clulas ms viejas, la hemlisis suele ser autolimitada y afecta < 25% de la masa eritroctica. En
los blancos, la deficiencia es ms grave, y la hemlisis profunda puede inducir hemoglobinuria
e insuficiencia renal aguda.

ASPECTOS BIOQUMICOS MOLECULARES DE LA DEFICIENCIA DE G6PD

Equilibrio Redox en el Eritrocito. La G6PD es la primera enzima de la va de las pentosa-fosfato,

una va metablica altamente conservada responsable de la produccin de una variedad de
molculas fundamentales, incluyendo precursores de nucletidos y NADPH (28). En la primera
reaccin de la fase oxidativa de la va de las pentosas fosfato, la G6PD cataliza la conversin de
glucosa-6-fosfato (G6P) a 6-fosfogluconolactona con la produccin concomitante de una
molcula de NADPH. Cuando el 6-fosfogluconato se convierte en ribulosa-5-fosfato por la 6-
fosfogluconato deshidrogenasa (6PGD), se produce una segunda molcula de NADPH. Es
importante sealar que en el eritrocito, la va de las pentosas fosfato es la nica responsable de
la produccin de NADPH en respuesta al estrs oxidativo, actuando as como guardin del
potencial redox en esta clula . El NADPH est implicado en al menos tres vas antioxidantes:
los ciclos del glutatin, de la tiorredoxina y de la glutarredoxina. En el primer ciclo, el NADPH se
encarga de regenerar el glutatin (GSH) por la glutatin reductasa (GR). Los electrones del
NADPH se donan durante la reaccin catalizada por la GR, en el que el glutatin oxidado (GSSG)
se reduce para liberar dos molculas de GSH. En el eritrocito, el GSH es esencial para la
reduccin del perxido de hidrgeno y los radicales libres. Por otra parte, la glutatin
peroxidasa (GPX) elimina el perxido de los eritrocitos, el GSH sirve como sustrato de esta
enzima mientras que el NADPH se requiere para reducir el GSSG y los grupos sulfhidrilos
oxidados de algunas protenas. La fisiopatologa molecular de la deficiencia de G6PD ayuda a
entender la correlacin observada entre la distribucin geogrfica de la deficiencia de G6PD
con las zonas endmicas de malaria. Diversos estudios apoyan la evidencia de que la malaria es
un factor de seleccin que ha incrementado la prevalencia de la deficiencia de G6PD como un
carcter favorable que confiere resistencia a la infeccin por Plasmodium falciparum . A este
respecto, se proponen varios mecanismos a nivel molecular que podran explicar esta
resistencia, por ejemplo, la disminucin de la proliferacin de P. falciparum en los eritrocitos
deficientes de G6PD como resultado de la acumulacin intracelular de sustancias oxidadas
txicas para el parasito, o la destruccin acelerada y selectiva de los eritrocitos deficientes e
infectados.

Biologa molecular de la G6PD. El gen de la G6PD se localiza en la regin sub-telomrica del

brazo largo del cromosoma X en el locus Xq28; por lo tanto, la deficiencia de esta enzima es
una enfermedad hereditaria ligada al cromosoma X . La secuencia completa del gen de la G6PD
presenta un tamao de 18,5 Kb y est conformado por 12 intrones y 13 exones que codifican
para un producto de 1545 pb. De manera inusual, las primeras 600 pb de la regin 5 del gen
G6PD, correspondiente al exn 1 y parte del exn 2, no se traducen; por lo que el ATG de inicio
se encuentra en la base 115 de las 127 pb que forman el exn 2. Esta secuencia no traducida
inusualmente larga del extremo 5 contiene codones ATG fuera del marco de lectura y presenta
2 subregiones constituidas en un 80% por guaninas y citosinas, caracterstica comn entre los
genes con expresin constitutiva. En cuanto a la regin promotora del gen, se han sealado
varias caractersticas interesantes i) su alto contenido en GC (ms del 70%), ii) la ausencia del
elemento CAAT ubicado frecuentemente en la posicin -70 a -90 de diversos genes eucariotes
(sitio esencial para el proceso de transcripcin), iii) la sustitucin de la clsica caja TATA por la
secuencia ATTAAAT ubicada a -202 pb del codn de inicio y que, por analoga con la de otros
genes, comparte la misma funcin, y iv) la presencia de por lo menos 9 sitios de tipo CCGCCC,
los cuales parecen estar involucrados en la regulacin del gen. El anlisis de la secuencia
gentica mostr una fuerte correlacin entre el grado de conservacin de los aminocidos
mutados con el cuadro clnico de la enfermedad; esto es, las mutaciones ms graves ocurren
en los aminocidos ms conservados. Este mismo anlisis demostr que de manera
consistente, las mutaciones que causan deficiencia clase I (grave) estn agrupadas en el exn
10, el cual codifica la regin de la interface involucrada en la formacin de la estructura
dimrica de la enzima. En este mismo sentido, la gran mayora de las mutaciones encontradas
hasta la fecha consisten en sustituciones sencillas que modifican la codificacin de un solo
aminocido (mutaciones missense), siendo poco comn la presencia de una segunda mutacin
en el mismo gen (con excepcin de la variante A- y algunas otras muy poco frecuentes). Hasta
el momento, no existen reportes de mutaciones en la regin promotora

Bioqumica de la G6PD. La G6PD es una enzima ubicua que se encuentra presente en todas las
formas de vida desde procariotes a animales . El alineamiento mltiple de ms de 100
secuencias de la G6PD de diferentes organismos, identific tres secuencias altamente
conservadas en todo el espectro filogentico: la primera secuencia de 9 residuos (198-
RIDHYLGKE-206, numeracin correspondiente a la G6PD humana) contiene la lisina 205, la cual
est implicada en la unin de la G6P y es esencial para la catlisis. La segunda secuencia (38-
GxxGGDLA-44) es parte del sitio de unin a la coenzima; mientras que la ltima (170-EKPxG-
174) contiene a la Pro172 la cual est involucrada en el correcto posicionamiento de los sitios
de unin del sustrato y la coenzima. La G6PD humana consta de 515 aminocidos y presenta
una masa molecular de 59.25 kDa; es una protena citoslica que se expresa en todas las
clulas de manera constitutiva pero cuyos niveles de expresin pueden diferir en un rango de
hasta dos rdenes de magnitud en diferentes tejidos. La estructura secundaria de esta protena
se forma por un total de 15 regiones -hlices y 15 hebras- que se arreglan en un dominio de
unin de coenzima con un plegamiento tipo Rossmann y una extensa regin de interface
formada por la asociacin de dominios + pertenecientes al extremo C-terminal de cada
subunidad. En la enzima humana, cada uno de estos dominios estructurales presenta un sitio
de unin a ligando , el dominio tipo Rossmann contiene el sitio activo de la enzima que une la
G6P y el NADP cataltico, mientras que un segundo sitio de unin a NADP se encuentra cerca de
la regin de la interface de la protena. Este segundo sitio de unin a la coenzima se encuentra
al parecer conservado slo en organismos superiores y esta implicado en la dimerizacin y la
estabilidad de la enzima , de hecho, mutaciones localizadas cerca del sitio estructural
promueven la disminucin de la estabilidad de la enzima causando fenotipos severos de
deficiencia (variantes clase I). En solucin, la G6PD existe en un equilibrio dmero-tetrmero el
cual es afectado por el pH y la fuerza inica; a pH alcalinos y alta fuerza inica el equilibrio se
desplaza hacia el dmero, mientras que en condiciones de pH cido y baja fuerza inica se
favorece el tetrmero. Dado que ambas especies oligomricas presentan actividades catalticas
similares, el significado fisiolgico de esta interconversin no se comprende. El mecanismo
cintico de la G6PD humana sigue un modelo de orden aleatorio en equilibrio rpido; esto es,
cualquiera de lo dos sustratos pueden unirse independientemente a la enzima antes del evento
cataltico, que es el paso ms lento de la reaccin. Las constantes cinticas calculadas para la
enzima recombinante son kcat 161 s-1, Km G6P 6,76 mM y Km NADP 54,8 mM