Prinsip uji Barfoed berdasarkan pada uji untuk membedakan antara

monosakarida dengan disakarida.Adanya pereaksi Barfoed dapat menunjukkan

bahwa terbentuk kupro oksida lebih cepat terbentuk oleh monosakarida daripada
disakarida. Pada percobaan ini, diperoleh data bahwa suatu monosakarida dapat
dibedakan dengan disakarida yang dapat diamati dari terbentuknya endapan merah
bata pada senyawa glukosa dan sukrosa sedangkan pada zat uji lainnya tidak
terbentuk endapan merah bata, sehingga dianggap sebagai disakarida. Sama
halnya dengan pereaksi Benedict, pereaksi Barfoed ini juga mereduksi ion Cu 2+
menjadi ion Cu+ . Pada dasarnya, monosakarida dapat mereduksi lebih cepat
dibandingkan dengan disakarida.
Namun, pada hasil yang didapatkan yang terbentuk endapan merah
bata hanya pada larutan Fruktosa sedangkan pada laktosa, glukosa, maltosa,
sukrosa dan pati tetap berwarna biru sama seperti larutan disakarida yang lain. Hal
ini disebabkan karena pada proses pemanasan tidak merata sehingga larutan
laktosa masih tetap berwarna biru.
Berdasarkan teori yang ada larutan glukosa tetap masuk kedalam
golongan monosakarida sedangkan larutan lain termasuk disakarida dan
polisakarida, karena golongan disakarida polisakarida memerlukan waktu yang
lebih lama untuk memecah dua atau lebih gugus monosakarida.