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2. Concepto de radical libre y especies reactivas:
Radicales libres:
Desde el punto de vista qumico los radicales libres son todas aquellas
especies qumicas, cargadas o no, que en su estructura atmica presentan
un electrn desapareado en el orbital externo, dndole una configuracin
espacial que genera gran inestabilidad.
Son muy reactivos, tienen una vida media corta, por lo que actan cercano al sitio
en que se forman y son difciles de dosificar. Desde el punto de vista molecular
son pequeas molculas ubicuitarias y difusibles que se producen por diferentes
mecanismos entre los que se encuentran la cadena respiratoria mitocondrial, la
cadena de transporte de electrones a nivel microsomal, en los cloroplastos, y las
reacciones de oxidacin, por lo que producen dao celular (oxidativo), al
interactuar con las principales biomolculas del organismo.
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Dicho mecanismo genera que la produccin de radicales libres sea una reaccin
en cadena, ya que al reaccionar un radical libre con una molcula no radical
inevitablemente esta ltima pasa a ser un radical libre. Dicha reaccin en cadena
solamente se detendr cuando dos radicales libres se encuentren y reaccionen
entre s.
Clasificacin:
Radical Libre
Oxgeno singlete
Anin superxido Perxido de
Radical hidrxilo Carbono hidrgeno
xido ntrico Nitrgeno cido Hipocloroso
Oxgeno Peroxinitrito
Azufre Hidroperxidos
orgnicos.
Especies reactivas:
El trmino especies reactivas hace referencia a dos tipos de molculas: los
radicales libres y los no radicales: Este conjunto de molculas se forma como
resultado del metabolismo celular y se encuentran representados dentro de los
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sistemas biolgicos por las especies reactivas de oxgeno (ROS) y por las
especies reactivas de nitrgeno (RNS), que se originan tanto en procesos
fisiolgicos normales como en procesos patolgicos. Sin excluir que tambin
existen especies reactivas procedentes de otros elementos como cloro (RClS) y
Bromo (RBrS).
Las especies reactivas del oxgeno (EROS) pueden participar en reacciones que
llevan a la elevacin de los agentes prooxidantes.
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microambiente (membrana plasmtica, citosol, ncleo o lquido extracelular). La
accin del antioxidante es de sacrificio de su propia integridad molecular
para evitar alteraciones de molculas (lpidos, protenas, ADN, etc.)
funcionalmente vitales o ms importantes. Su accin la realizan tanto en
medios hidroflicos como hidrofbicos.
Enzimas antioxidantes:
H2O2 2H2O + O2
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se encuentran en el citosol y en el espacio intermembranoso mitocondrial;
Mn-SOD: contiene manganeso y se localiza en la matriz mitocondrial; Fe-
SOD: contiene hierro y se localiza en el espacio periplasmtico de la E.
Coli. Estas enzimas dismutan el oxgeno para formar perxido de
hidrgeno y su principal funcin es la proteccin contra el anin
superxido.
Otros antioxidantes:
4. Reaccin de Fenton
Henry John Horstman Fenton (1894): Se produce al catalizar el perxido de
hidrgeno con metales de transicin, generalmente hierro, dando como resultado
la generacin de radicales altamente reactivos del hidroxilo (OH-).
Este ltimo radical es altamente oxidante.
Su uso prctico est en el tratamiento de contaminantes del tipo de los fenoles, el
formaldehdo, el BTEX, los pesticidas, etc.
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Tcnica Felton?
Surge como una forma adecuada de tratar una gran variedad de efluentes1
industriales muy contamiantes. Hasta ahora su aplicacin en la industria era
limitada debido a que resultaba un porceso costoso para el tratamiento de
residuos.
La tcnica es un proceso de oxidacin avanzado que consiste en la
descomposicin cataltica de agua oxigenada en presencia de sales de hierro en
un medio cido. Los radicales libres generados en la descomposicin, son los
encargados de degradar los contamianates presentes en las aguas residuales.
El proceso Fenton supone una alternativa eficiente y rentable para el tratamiento
de efluentes industriales, de cara a reducri tanto el contenido en materia orgnica
como su toxicidad.
El proceso como tal, trata la carga contamianate con una combinacin de
perxido de hidrgeno y sulfato ferroso (reactivo de Felton), a presin
atmosfrica, temperatura entre 20-40C y en condiciones cidas.
ATENCIN!
5 FRMULAS BSICAS EXPLICAN EL PROCESO COMPLETO:
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se oxida./ Reaccin 2: describe la recuperacin de hierro usando el mismo
perxido de hidrgeno y produciendo un radical.
Reacciones de 3 a 5: describen un proceso adicional al de la frmula 2 en
el cual el hierro oxidado est reducido usando radicales orgnicos.
La reaccin de Fenton funciona mejor a un pH menor de 3 porque a
este nivel el hierro funciona mejor como cataltico y a niveles
superiores el hierro empieza a precipitar como Fe(OH)3.
El radical de hidroxilo tiene una alta capacidad oxidativa (2.80 V) y puede romper
fcilmente enlaces de molculas. Esta capacidad oxidativa es ms elevada que la
de muchos otros oxidantes como cloro, oxgeno o perxido de hidrgeno y le
facilita a degradar muchos compuestos orgnicos y inorgnicos.
5. Concepto de peroxidacin de lpidos:
La peroxidacin lipdica representa un mecanismo importante de dao tisular
asociado al envejecimiento y enfermedades asociadas. Es en general, el producto
del ataque de los EROS a los cidos grasos polinsaturados que dorman parte de
los fosfolpidos de la membrana celular. Los objetivos de este proceso son:
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Desarrollo:
Tres etapas:
1. Iniciacin de la peroxidacin lipdica, en la que un radical libre ataca a un
carbono de la cadena aliftica de un cido graso, ocurre la abstracin de
hidrgeno del grupo metileno (-CH2-) unido a un carbono flanqueado por
dobles enlaces de un cido graso poliinsaturado, con la formacin de una
especie radiclica (radical alqulico: L). El hecho de que exista un doble
enlace, debilita los enlaces carbono-hidrgeno del tomo de carbono
adyacente a dicho doble enlace. Los radicales formados se estabilizan por
resonancia con el doble enlace.
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intervienen el ascorbato y el glutatin reducido que permiten la regeneracin de la
vitamina E.
1. Fase de terminacin o descomposicin, en la que hidroperxidos formados
se descomponen en etano, pentano, aldehdos reactivos y cetonas. Los
aldehdos formados, como el malonildialdehdo y el 4-hidroxinonenal,
pueden reaccionar con protenas y cidos nucleicos, lo que determina
efectos citotxicos, genotxicos y mutagnicos, as como un papel
patognico en varias enfermedades .
Libro = Repetto pginas 182 - 187
6. Importancia de la solubilidad de los antioxidantes en agua y metanol en
funcin del procedimiento experimental, prestar particular atencin a las
tablas 2 y 5:
Los antioxidantes se clasifican ms a fondo como solubilidad en el agua
(hidroflica) o en los lpidos (hidrofbicos). Los antioxidantes solubles en agua
reaccionan con los oxidantes en el citosol de la clula y el plasma de sangre. Por
otra parte los antioxidantes lpido-solubles protegen las membranas celulares
contra la peroxidacin del lpido.
Antioxidantes a utilizar:
cido felrico = poco soluble en agua pero muy soluble en alcoholes.
Alopurinol = posee poca solubilidad en alcoholes y agua.
Vainillina = posee una solubilidad en agua de 1g / 100 mL pero soluble en
alcoholes ( 1 g / 3 mL).
BHT(butilhidroxitolueno) = este antioxidante es insoluble en agua, pero
soluble en metanol.
7. Analice las reacciones planteadas en el siguiente diagrama y describa o
complete lo solicitado en los incisos 7a 7c:
a. Completar la longitud de onda a la que absorben las especies
qumicas que se determinan espectofotometricamente en las
pruebas de inhibicin de la Xantina Oxidasa y de captura del radical
superoxido, respectivamente:
b. Propsito de la adicin secuencial de xantina, EDTA, solucin
amortiguadora de carbonatos pH 10.2, nitroazul de tetrazolio, XO y
Cu(NO3)2 en las pruebas de inhibicin de la Xantina Oxidasa y de
captura de radical superoxido.
c. Identificar las especies reactivas de oxgeno, indicando si son
radicales o no.
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8. Analice las reacciones planteadas en el siguiente diagrama y describa lo
solicitado en los incisos 9a 9c:
a. Propsito de la adicin de Naranja de Xilenol y H2SO4 en el reactivo
de FOX2.
b. Propsito de la adicin de cido hexenico en los tubos de captura
de radical OH-
c. Proposito de la adicion de H2O2
d. Identifique la reaccin de Fenton en el diagrama.
http://ehscc.umich.edu/wp-content/uploads/OxidativeStressSPN.pdf
http://bvs.sld.cu/revistas/mil/vol31_2_02/MIL09202.pdf
http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v10n18/v10n18a08.pdf
file:///Users/MariaLucila/Downloads/pdf928.pdf
http://www.medigraphic.com/pdfs/endoc/er-2006/er064c.pdf
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