ELABORADO POR:
PROFESORES DE LABORATORIO:
II SEMESTRE - 2017
1
SUMILLA
I. OBJETIVOS
Generales:
Conocer en detalle los alcances de las tcnicas Instrumentales a utilizar en el
anlisis, poniendo nfasis en su fundamento, descripcin del instrumento y
aplicacin.
Especficos:
Lograr que el estudiante aprenda los principios sobre los cuales se basan los
mtodos del anlisis instrumental.
Mostrar el diseo y los principios de los instrumentos usados y su funcin.
Estudiar la aplicacin analtica experimental en el Laboratorio para facilitar la
comprensin prctica.
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Determinacin de metanol en bebidas alcohlicas
III. METODOLOGIA
El curso se realizar mediante exposiciones dirigidas por el profesor, de
los fundamentos tericos, previo conocimiento del instrumento a utilizar,
antes del trabajo experimental. Posteriormente el alumno preparar el
informe correspondiente.
Nota Laboratorio=Prom.Informes+1Examen+2Examen+SustentacinTrabajo
4
3
La asistencia a las prcticas es obligatoria.
V. BIBLIOGRAFA
1. Harris Daniel, Quantitative Chemical Analysis, 9 Edicin, Ed. Reviews,
2015.
2. Harris Daniel, Solution Manual for Quantitative Chemical Analysis, 9
Edicin, Ed. Reviews 2015.
3. Palo, Fundamentos de Cromatografa, 1 Edicin. Ed. Dextra, Espaa. 2015.
4. Harris Daniel C., Anlisis Qumico Cuantitativo, 3 Edicin, Ed. Revert,
2007.
5. Skoog D., West D.M. y Crouch S.R. Fundamentos de Qumica Analtica, 8
Edicin, Ed. Thomson, Madrid, 2004.
6. Owen Tony, Fundamentos de la Espectroscopia UV-Visible Moderna,
Copyright Agilent. 2000.
7. Skoog D., Douglas A. Cengage Learning, Principios de Anlisis
Instrumental. cop. 2008 / McGraw-Hill, D.L. 2000.
8. Skoog D. Holler. Nieman T. Principios de Anlisis Instrumental. 5 Ed. Mc.
Graw Hill. Espaa 2001
9. Rubinson J.F. y Rubinson K.A., Qumica Analtica Contempornea, 1
Edicin, Ed. Pearson Education, Mjico, 2000.
10. Valcarcel M. Principios de Qumica Analtica, 1 Edicin, Ed. Springer,
1999.
11. Williard H., Merrit J. Mtodos Instrumental de Anlisis. Editorial
interamericano, Mjico D.F., 1991.
12. Skoog D. Leray J. Anlisis Instrumental. Ed.Mc. Graw Hill, Mxico 1994
13. Skoog D. West D. Analisis Instrumental Edit. Mc. Graw Hill Mxico 1992.
14. Alpizar J. Albertus F., Fundamentos de los Mtodos Electroqumicos de
Anlisis Edit. Enpes. La Habana 1980.
15. Vogel A. Qumica Analtica Cuantitativa Vol. II Edit., Kapeluz Buenos Aires
1960.
16. Ayres G. Anlisis Qumico Cuantitativo Editorial Iberoamericana, Mxico
1992.
17. Harris D. Anlisis Qumico Cuantitativo. Ed. Iberoamericana. Mxico 1992.
18. Sandell E. Colorimetric Determination of traces of metals. Interscience
Publisher. USA 1965.
19. AOAC. Official Methods of Analysis 15th Fed. USA. 1990.
20. ASTM American Standards of Testing Materials, 1999.
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FUNDAMENTO TERICO DE LAS PRCTICA N 1 Y N 2
ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCIN MOLECULAR
ULTRAVIOLETA VISIBLE
Fundamento
h.c
E h.
ABSORCIN DE LA RADIACIN
Al pasar R.E.M. por una capa transparente de un slido, lquido o gas, pueden
eliminarse selectivamente ciertas frecuencias como consecuencia del proceso
llamado absorcin. En este caso la E.R. se transfiere a los tomos o molculas
que constituyen la muestra, como resultado de ello estas partculas pasan del
estado de menor energa a estados de mayor energa o estados excitados.
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ABSORCIN MOLECULAR
Espectro de absorcin
Tanto las molculas como los tomos tienen un nmero limitado de niveles o
estados energticos cuantizados.
Fenmeno de absorcin
A = abC A = bC
Donde: A = Absorbancia
a = Absortividad = Absortividad molar
b = Espesor de la celda o paso de luz (cm)
C = Concentracin (g/L)
C= Concentracin (moles/ litro)
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AT = A1+A2++An
AT = 1bc1 + 2bc2 ++ nbcn
qumico;
instrumental.
a) Desviaciones qumicas
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Un ejemplo tpico se observa con soluciones de dicromato potsico no
amortiguadas, en las que existen los siguientes equilibrios:
A casi todas las longitudes de onda los valores de del ion dicromato y las dos
especies de cromato son muy diferentes.
b) Desviaciones instrumentales
El requisito bsico para el cumplimiento de la Ley de Beer es
que la radiacin incidente sea monocromtica. Dependiendo de
Radiacin las caractersticas tecnolgicas del sistema ptico del
policromtica: instrumento ser ms o menos accesible poder utilizar en
forma prctica una radiacin limitada a una sola longitud de
onda.
La radiacin dispersa suele diferir considerablemente en
Radiacin longitud de onda con respecto a la radiacin principal; adems
dispersa: puede alcanzar el detector sin haber pasado a travs de la
muestra.
M + h. M*
M* => M + calor
Aplicacin analtica
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Especies absorbentes
Los electrones , y .
Los electrones d y f.
Los electrones de transferencia de carga.
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Transiciones electrnicas entre orbitales , , y .
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REGIONES ESPECTRALES:
Ultravioleta lejano : 10 200 nm
Ultravioleta cercano : 200 400 nm
Visible : 400 750 nm
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Diagrama de bloques de diferentes tipos de instrumentos de medicin de
la absorcin molecular
Anlisis cualitativo
Las aplicaciones cualitativas no ofrecen una herramienta muy til, ya que con
estos espectros existe un nmero relativamente escaso de mximos y mnimos.
Sin embargo el anlisis cualitativo es una excelente herramienta cuando va
precedido de algn mtodo de separacin.
Anlisis cuantitativo
a) Aplicacin:
Compuestos
Aldehdos y cetonas
orgnicos:
Aromticos
Medicamentos y Drogas
Vitaminas, etc
Compuestos
(especies absorbentes)
inorgnicos:
Compuestos no absorbentes Derivatizacin
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b) Principales caractersticas:
Alta sensibilidad.
Absortividades molares 105
Intervalos de concentracin 10-4 a 10-6M.
Selectividad: seleccin de la longitud de onda en la que el nico
componente absorbente de una muestra sea la sustancia que se determina.
Precisin y exactitud: dependiendo del nivel de concentracin es posible
lograr valores menores que 1% de error relativo.
Referencias bibliogrficas.
Mtodos normalizados.
CURVA DE CALIBRACIN
Y = Ax + B
donde: A = pendiente ()
B = intercepto
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PRCTICA N 1
EQUIPOS Y MATERIALES
Reactivos
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Nombre Pictograma Riesgo Primeros auxilios
Inhalacin e Inhalacin:
(re HCl Ingestin: Ventilacin,
Irritacin al tracto suministrar oxgeno.
y respiratorio o Ingestin: Lavar la
y y digestivo, dao boca con abundante
HNO3 corrosivo con agua, no inducir al
(reactivos quemaduras. vmito.
controlados) Puede producir .
edema pulmonar.
CORROSIVOS
HNO3
Contacto con piel Contacto con ojos y
y ojos:Severas piel: Lavar con
CORROSIVO y irritaciones con abundante agua, por
COMBURENTE quemaduras que 20 a30, o ducharse,
pueden derivar en no aplicar ningn tipo
ceguera de sustancia.
Atencin mdica
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la luz (indicada por la flecha en el equipo) pase a travs de las paredes
claras. Oprimir 0Abs/100%T para configurar el blanco a 0 de A o 100 % T.
g) Retirar el blanco, limpiar la celda que contiene la muestra con papel tis e
insertar en el portaceldas, ubicarla como se indica en (f). La medicin de la
muestra aparece en la pantalla.
h) Retirar la muestra, seleccionar la nueva a trabajar, insertar el blanco en el
portaceldas, repetir (g) y (h).
Procedimiento
Procedimiento
Procedimiento
a) MUESTRA PROBLEMA.- Pesar 0,1200 g de la muestra de acero, pasarlo a
un vaso de 250 mL.
b) PREPARACIN DE PATRONES.- Pesar por cuadruplicado, 0,2000 gramos de
sal de Mohr y llevar cada uno de ellos a vasos de 250 mL.
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c) SOLUCIN PATRN DE MANGANESO.- 200 ppm Mn (0,2 mg de manganeso
por mL).
PRACTICA N2
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ANLISIS POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA
ANLISIS DE NITRATOS EN AGUAS
1. SELECCIN DE MTODO
La determinacin de nitrato (NO3-) es difcil debido a los procedimientos
relativamente complejos que se precisan, la elevada probabilidad de que
se hallen sustancias interferentes y los rangos limitados de concentracin
de las diferentes tcnicas.
Una tcnica con luz ultravioleta (UV) que mide la absorbancia de NO3- a 220
nm es adecuada para el estudio de aguas no contaminadas (con bajo
contenido en materias orgnicas).
Fundamento
REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analtico.
1) Agua exenta de nitrato.
2) KNO3 p.a.
3) Cloroformo, CHCl3. (reactivo controlado), para mantener la solucin patrn
de KNO3 por 6 meses.
4) HCl. (reactivo controlado)
Soluciones
1. Solucin patrn primario de nitrato (100 ppm NO3-N): Colocar en un crisol
de porcelana aproximadamente 0,3 g de KNO3 y secar en estufa a 105C
durante 24 horas. Retirar y enfriar en el desecador.
Pesar 0,1805 g de KNO3 disolver en agua, agregar 2 mL de CHCl3 y diluir
a 250 mL en fiola, enrazar y homogenizar la solucin por inversin; 1,00 mL
= 100 g NO3--N. Esta solucin es estable durante 6 meses.
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3. Soluciones para la curva de calibracin: Preparar soluciones de
calibracin en el rango de 0,1- 0,2- 0,3- 0,4- 0,5 ppm de NO3-N,
diluyendo las alcuotas de solucin patrn 5 ppm NO3-N, antes de
enrazar a 50 mL, aadir 1 mL de HCl 1N, homogenizar la solucin por
inversin.
TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
Procedimiento
En una fiola de 50 mL, aadir 1 mL 2 mL 5 mL 10 mL, segn sea el
contenido de nitrato de la muestra transparente, filtrada si fuera preciso y
antes de enrazar, aadir 1 mL de la solucin de HCl 1N, mezclar bien y
completar a 50 mL con agua destilada, homogenizar la solucin por inversin.
5. CLCULOS
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PRCTICA N 4
FUNDAMENTO
En estos espectros aparece una radiacin continua o fondo doble debido a los
slidos incandescentes.
Tiene gran sensibilidad y fcil manejo, se puede utilizar para gran cantidad de
muestras lo que hace que sea una de las principales herramientas analticas
utilizada en la industria Qumica.
Este mtodo est basado en la propiedad de los tomos, conocida desde los
primeros tiempos de la espectroscopia y que dice el tomo al estado libre o
atmico solo absorbe radiacin electromagntica que es capaz de emitir. Esta
radiacin emitida, formada de diversas longitudes de onda constituye lo que
se llama la radiacin caracterstica y da lugar al espectro caracterstico de los
tomos o espectro atmico del elemento en cuestin.
En la aplicacin analtica, los tomos de un metal en solucin, son vaporizados
para llevarlos al estado libre o atmico, situacin en la que absorben
fuertemente la radiacin caracterstica emitida por el mismo metal colocado en
una fuente apropiada de excitacin. Esta absorcin produce una disminucin
de la intensidad de radiacin emitida, la cual medida
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convenientemente permite determinar la concentracin del metal que se
analiza.
Esto significa que para realizar el anlisis de algn elemento se requiere de una
lmpara de emisin por cada elemento a analizarse, as por ejemplo, si se va a
determinar sodio, se necesita una lmpara de sodio para la emisin de la
radiacin que ser absorbida por los tomos de sodio de la solucin problema;
si se va a determinar potasio en la misma muestra ser necesario cambiar la
lmpara de sodio por una de potasio y as sucesivamente.
INSTRUMENTACIN
COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN ATMICA
Fuente de luz.
ptica en la Unidad de Atomizacin.
Unidad de Atomizacin.
Monocromador.
Detector.
Unidad Convertidor de Respuesta.
Pantalla de presentacin de datos.
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5) Sistema de presentacin de los resultados, en la cual la intensidad
medida se expresa en trminos de absorcin. Esta absorcin por medio
de un grfico se relaciona con concentraciones conocidas, el que permite
determinar la concentracin del desconocido.
APLICACIONES
2.0
1.60
A
1.20
0.8
0.4
0
0.4 0.8 1.20 1.60 2.0
2.0
1.50
A
1.0
0.5
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DETERMINACIN DE HIERRO EN JARABE ANTIANMICO
EQUIPOS Y MATERIALES
REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analtico.
SOLUCIONES
Procedimiento
TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
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NOTA
BIBLIOGRAFA
1. Mtodos Instrumentales de Anlisis.- Por H.H. Williard L.L. Merrit J.A. Dean
Nueva edicin revisada corregida y aumentada.
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PRCTICA N 5
FUNDAMENTO
a) Principio:
Se pueden determinar cantidades traza de potasio por espectrofotometra
de emisin de llama a una longitud de onda de 766,5 nm .Se pulveriza la
muestra en una llama de gas y la excitacin se realiza en condiciones
controladas y reproducibles. La lnea espectral se selecciona a 766,5 nm y
es aproximadamente proporcional a la concentracin del elemento. La curva
de calibracin puede ser lineal, pero muestra una tendencia a la
horizontalidad en concentraciones superiores.
b) Interferencia:
No hay interferentes significativos.
2.- INSTRUMENTAL
a) Espectrofotmetro de absorcin atmica en la modalidad de emisin de
llama.
b) Material de vidrio: Enjuguese todo el material de vidrio con HNO3 (1+15)
y a continuacin con varias porciones de agua destilada y desionizada.
3.- REACTIVOS
Con objeto de hacer mnima la adsorcin de potasio, conviene almacenar
todas las soluciones en botellas de plstico. Utilizar recipientes pequeos
para reducir la cantidad de elemento seco que puede quedar en las paredes
de la botella cuando se vierta la solucin.
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PROCEDIMIENTO
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TCNICA: CURVA DE CALIBRACIN:
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25. Clic en STD CONCENTRATION, completar los datos solicitados (solo
indicar estndares con sus concentraciones, ejemplo ap1 - 0 ppm) y
cerrar.
26. FILE, SAVE AS, en METHOD y CLICK EN OK.
27. Llenar 2(*) vasos con agua destilada, 1 y 2. Colocar el capilar, en el
primero, encender la llama en ON, luego el segundo, y a continuacin
el Blanco en el capilar, esperar drenar dos veces, en cada caso.
28. Presionar CONTINNUOS GRAPHICS, el equipo solicita el standard de
ms alta concentracin. Aspirar esta solucin, drenar 2 veces y clic
en OK. Esperar que aparezca la seal de emisin de radiacin. Cuando
llega la curva al eje Y, colocar el vaso 1 con agua destilada el vaso 2 y
el blanco; esperar drenar dos veces en cada caso. Presionar
AUTOZERO. Si se desea cambiar lmites, clic en APPLY. Cerrar.
Nota (*): Se recomienda usar 2 vasos con agua destilada, para prevenir la
contaminacin del agua de lavados por el contenido de patrones y muestras
adherido a la parte externa del capilar.
El agua del vaso 1 sirve para lavar el capilar y la del vaso 2 se conserva limpia
y se usa a continuacin para asegurar la limpieza del sistema antes de pasar
la siguiente solucin.
6.-BIBLIOGRAFA
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PRCTICA N 6
CROMATOGRAFA DE GASES
1.- Introduccin.
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Diagrama de un cromatgrafo de gases.
45
portador. Cuando la seal del detector es constante (sin ruidos la lnea base)
se hace la inyeccin de la muestra.
2.- Las muestras se inyectan en cantidades inferiores a 1 l cuando son
lquidas y sobre 1 ml si son gaseosas; se introducen en la cmara de
inyeccin, donde se vaporizan, y son arrastradas hasta la cabeza de la
columna.
3.- Los componentes se fijan en una pequea zona de la columna; por
equilibrios sucesivos entre la fase mvil y la estacionaria, cada componente
se desplaza por la columna a velocidades diferentes.
4.- Finalmente, los solutos que salen de la columna, pasan al detector y se
obtiene el cromatograma.
Los parmetros que definen una separacin cromatogrfica gas-lquido son, tipo
de gas portador y caudal del mismo; columna y dimensiones de la misma; fase
estacionaria; tipo de detector; temperatura del puerto de inyeccin, de la columna
y del detector.
3.-Fase mvil
4.-Sistema de inyeccin
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aislamiento trmico que permita mantener una temperatura constante, 50C por
encima del punto de ebullicin del analito.
5.-Tipos de columnas
Existen dos tipos de columnas, principalmente, de relleno y capilares o
semicapilares. Contiene la fase estacionaria y en ella tiene lugar la separacin
cromatogrfica.
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Las columnas de relleno suelen ser de cobre, acero inoxidable, aluminio, vidrio y
tefln; con un dimetro interior entre 2 y 4 mm y una longitud entre 2 y 3 m. La
eficacia est en torno a 1.000-2.000 (platos tericos/m). Suelen emplearse para
muestras poco complejas, mximo 10 componentes.
La columna est rellena de un material slido (soporte), finamente dividido y
homogneo; recubierto, por una capa de 0,05-1 m de espesor, de fase
estacionaria lquida. Est configurada en forma helicoidal, con un dimetro de
unos 15 cm, para poder ser instalada en el horno termostatizado.
Las columnas capilares tienen un dimetro interior inferior a 1 mm (320-250 m)
y una longitud de 5 a 50 m. Suelen construirse con slice fundida que le dan gran
resistencia fsica y flexibilidad. Alcanzan una eficacia hasta de 4.000 (platos
tericos/m) y se usan para muestras complejas. La fase estacionaria se
depositada sobre las paredes interiores del tubo capilar.
Otro tipo de columnas capilares son con soporte recubierto, en la que la
superficie interna del capilar est recubierta de una capa de material de soporte
(tierras de diatomeas) de 30 m, lo que permiten una mayor cantidad de fase
estacionaria y por tanto de muestra.
Las columnas semicapilares tienen un dimetro interior de 530 m que admiten
cantidades de muestra similares a las columnas de relleno, y proporcionan mayor
eficacia que stas.
Una de las variables importantes en el desarrollo cromatogrfico, como se indic
con anterioridad, es la temperatura de la columna; temperatura ptima es funcin
de los puntos de ebullicin de los componentes de la muestra y del grado de
separacin deseado.
En muestras de parecidos puntos de ebullicin la temperatura ptima es
ligeramente superior al punto de ebullicin medio de los componentes de la
muestra. En el caso de muestras complejas, en la que los puntos de ebullicin de
los distintos componentes son muy diferentes, se recomienda emplear una
programacin de temperatura, aumentando sta continuamente a medida que
avanza la separacin. El aumento de la temperatura reduce los tiempos de
retencin.
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La separacin en cromatografa gas-lquido se debe a los diferentes coeficientes
de reparto del analito entre la fase mvil y la fase estacionaria y tiene que haber
un cierto grado de solubilidad de los compuestos con la fase estacionaria. Por
ello, una caracterstica muy importante de la fase estacionaria es la polaridad.
Siguiendo el principio de semejantes disuelven a semejantes los solutos se
retienen ms en las fases lquidas de polaridad parecida, lo que permiten obtener
mejores separaciones.
Las fases estacionarias compuestas de hidrocarburos y de dialquilsiloxanos son
poco polares, las compuestas por polister son muy polares. En cuanto a
posibles compuestos objeto de separacin, los alcoholes, cidos y aminas son
polares; los steres cetonas y aldehdos tienen polaridades intermedia; y son de
baja polaridad los hidrocarburos saturados.
Otro factor a tener en cuenta son los lmites de temperatura que puede soportar
la fase estacionaria, el lmite inferior ser el punto de fusin o temperatura a la
que la viscosidad de la fase lquida es muy elevada, lo que hara disminuir la
eficacia. El lmite superior es la temperatura a la que la presin de vapor de esta
fase sea 0,1 mm Hg (250oC inferior al punto de ebullicin) por encima de esta
temperatura se produce arrastre de la fase lquida, lo que lleva consigo efectos
en el detector (ruido, suciedad), interferencias con los solutos y en suma, deterioro
de la columna.
En una fase lquida cualquiera, una serie homloga se eluye segn orden
creciente de nmero de tomos de carbono. Si la fase es no polar, los solutos no
polares eluyen segn orden creciente de punto de ebullicin. En una fase polar
se retendrn ms los solutos polares que los no polares a igualdad de puntos de
ebullicin.
Otro aspecto a desarrollar, relacionado con la fase estacionaria, es el soporte
slido empleado en las columnas de relleno; el objetivo es el de proporcionar una
superficie elevada donde depositar la fase lquida en forma de pelcula muy fina
para proporcionar una mayor superficie de contacto entre fase mvil y fase
estacionaria.
Las caractersticas de los soportes slidos son, una elevada superficie especfica
(1m2/g); una superficie homognea; estabilidad trmica; geometra adecuada;
baja dispersin de tamao de las partculas, en torno a 150-250 m; dureza
mecnica; inercia qumica y naturaleza porosa.
Los soporte, ms generalizados, son los de slice como las tierras de diatomeas
o sintticos; de vidrio y de polifluorocarbonados (tefln). Los soportes de
diatomeas estn constituidos por residuos de algas unicelulares diatomceas
que se unen formando filamentos.
Hay unas 10.000 especies de diatomeas con esqueletos diferentes, pero parecida
estructura. Tienen una superficie especfica de 1 m2/g. El constituyente
mayoritario es de anhdrido silcico SiO2 (90%), tratado con un fundente alcalino
a 1.600oC , se obtiene el producto comercial conocido como Chromosorb W de
una superficie poco adsorbente por lo que es muy til para separar compuestos
polares. Otro soporte es el de polvo de ladrillo refractario conocido como
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Chromosorb P, C-22 y Sterchomel, tiene mayor resistencia mecnica y superficie
especfica que el anterior, pero es muy activo y no se puede utilizar con
compuestos polares.
7.- Detectores
Un detector es todo dispositivo capaz de medir una propiedad fsica del gas
portador, la cual vara con la presencia de pequeas cantidades de analito; debe
reunir una serie de caractersticas,
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SiHCl3, SiF4. Por otra parte, posee una elevada sensibilidad (10-13 g soluto/ml)
y es destructivo
8.-Aplicaciones analticas
La aportacin analtica de la cromatografia de gases al anlisis qumico tiene dos
vertientes, la primera es su capacidad en la separacin de compuestos
(orgnicos, inorgnicos, bioqumicos, etc.). La segunda es emplear los tiempos
o volmenes de retencin para la identificacin cualitativa, mientras que el rea
de los picos proporciona informacin cuantitativa.
A. ANLISIS CUALITATIVO
El anlisis cualitativo se efecta comparando los tiempos de retencin o
volmenes de retencin de la nuestra problema, con los tiempos o volmenes
de retencin de un patrn.
Los tiempos de retencin se miden desde el punto de inyeccin de la muestra,
hasta la altura mxima de los picos.
Como parmetro cualitativo se encuentra el tiempo de retencin (tR) o el
volumen de retencin (VR); sin embargo, su dependencia de variables tales
como temperatura de la columna, velocidad de flujo y composicin de la fase
51
estacionaria, le hace poco fiable. Pese a ello, si se observan tiempos de
retencin muy parecidos para un patrn (sustancia conocida) y una muestra
problema cuando cambian las condiciones de operacin, las probabilidades
de que ambas sean la misma sustancia aumentan.
Otro parmetro cualitativo es la retencin relativa que requiere un patrn
interno B que permite obtener un valor de que sirve como ndice para
identificar un compuesto A.
B. ANLISIS CUANTITATIVO
En el anlisis cuantitativo se mide el rea de los picos. Para determinar el rea
de los picos se debe hacer uso de la aproximacin triangular de la curva
gaussiana, midiendo la altura y dividiendo entre la mitad del ancho de la base.
Para los picos ms amplios debe determinarse el rea bajo la curva. Cuando
los picos son precisos y angostos, el error al medir solamente la altura, es
mnimo. En el anlisis cuantitativo existen varios factores importantes:
Introduccin de cantidad exacta de la muestra, exactitud al medir el rea de los
picos, factores de sensibilidad de cada compuesto, linealidad de los detectores
y columnas que dan picos bien resueltos.
MTODOS DE CALIBRACIN.- Existen varios mtodos de calibracin
citaremos algunos de ellos:
A. rea de Normalizacin.- Este mtodo es realmente un clculo del porcentaje
de rea, asumiendo que es igual al porcentaje del peso conocido.
A X x 100
A 1
% REA X
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D. Mtodo de adicin de estndar.- El estndar tambin se aade a la muestra.
El principio de este mtodo es que el incremento adicional producido por la
adicin del estndar es proporcional a la cantidad de estndar aadido, y
este proporcionalmente puede ser usado en la determinacin de la
concentracin del analito en la muestra original. El estndar debe contener
al analito.
Procedimiento
A. ANLISIS CUALITATIVO:
Reactivos:1) Etanol absoluto
2) n-butanol
3) Metanol
Nombre Pictograma Riesgo auxilios
Inhalacin:
Inhalacin: Irrita Ventilacin,
vas suministrar
respiratorias oxgeno.
vrtigo, Ingestin: Lavar la
somnolencia, boca con
nuseas, abundante agua,
prdida de no inducir al
n- butanol conocimiento. vmito, ni
C4H9OH Ingestin: administrar nada
Vmito, dolor por la boca a la
abdominal. persona
Contacto con inconsciente.
piel y ojos: Contacto con ojos
riesgo ocular y piel: Lavar con
grave, dolor. abundante agua o
ducharse por
varios minutos.
Atencin mdica.
Inhalacin:
Inhalacin: Irrita Ventilacin,
vas suministrar
respiratorias oxgeno.
vrtigo, Ingestin: Lavar la
somnolencia, boca con
nuseas, abundante agua,
prdida de no inducir al
metanol conocimiento. vmito, ni
CH3OH Ingestin: administrar nada
Vmito, dolor por la boca a la
abdominal. persona
Contacto con inconsciente.
piel y ojos: Contacto con ojos
riesgo ocular y piel: Lavar con
grave, dolor. abundante agua
por varios
minutos o
ducharse.
Atencin mdica.
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Columna Capilar: SPB - 608
1. Preparacin de soluciones:
2. Datos obtenidos:
Pico 2
Pico 3
ANLISIS CUANTITATIVO
Procedimiento
Mtodo: Adicin de estndar Interno (n-butanol)
Reactivos:
1. Etanol grado cromatogrfico ( = 0,7893)
2. Estndar interno: 386uL de n-butanol, llevar a fiola de 25 mL y
enrasar con etanol al 40%, homogenizar la solucin por
inversin.
3. Solucin stock: 127uL (127mL) de metanol, llevar a fiola de 100
mL y enrasar con etanol al 40% homogenizar la solucin por
inversin.
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Preparacin de estndares:
Estndar 1:
Medir 5 mL de la solucin stock y llevar a fiola de 50mL; antes de enrasar
aadir 800 L de solucin estndar interno, enrasar la fiola con etanol al
40% V/V, homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr 100 ppm de MeOH.
Estndar 2:
Medir 5 mL de la solucin stock y llevar a fiola de 25mL; antes de enrasar
aadir 400 L de solucin estndar interno; enrasar la fiola con etanol al
40%, homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr aproximadamente 200 ppm de MeOH.
Estndar 3:
Medir 10 mL de solucin stock en fiola de 25 mL; antes de enrasar aadir
400 L de solucin estndar interno; enrasar la fiola con etanol al 40%
homogenizar la solucin por inversin.
Esta solucin tendr aproximadamente 400 ppm de MEOH.
Preparacin de la muestra:
Preparacin de soluciones:
Sol.
Solucin Stock STD Interno Volumen % MeOH MeOH
(MeOH) (n-butanol) final (mL) (v/v) (mg/L)
Std1
Std2
Std3
Muestra
55
1. Parmetros Cromatogrficos:
2. Datos obtenidos:
Std1
Std2
Std3
Muestra
- Graficar A MeOH/A n-butanol vs. Conc. MeOH con los datos obtenidos
para los estndares.
56
PRCTICA N 7
TCNICAS ELECTROMTRICAS
Fundamento
57
AMPLITUD DE APLICACIN
58
Curva de valoracin potenciomtrica de E/V vs Volumen del titulante
59
VmL
E mV E/V V mL 2 E/V2 V mL
titulante
0 E1
E2 E1 03
A VA
3 E2 30 2
B -A
M V A VB
E3 E2 36 VB V A VM
B VB 2
6 E3 6-3 2
VB V C
E4 E3 69 C-B VN
C VC N 2
9 E4 96 2 VC - V B
INSTRUMENTO:
Potencimetro Beckman 300.
Electrodo Mixto de Pt, Ag/AgCl.
Reactivos
1. Solucin de K2Cr2O7 0,1N.
2. . H2SO4 2N.- Verter el cido sobre el agua, enfriando el recipiente con
chorro de agua
60
Procedimiento
1) Verificar el funcionamiento adecuado del instrumento (ver manual).
Procedimiento
61
PRCTICA N 8
ANLISIS POTENCIOMTRICO CON ELECTRODO SELECTIVO DE
IONES
1. Introduccin
Mtodo potenciomtrico de anlisis es la medida de un potencial con el fin de
conocer la actividad (concentracin) de una sustancia en disolucin. El objetivo
de una medicin potenciomtrica es obtener informacin acerca de la
composicin de una disolucin mediante el potencial que aparece entre dos
electrodos. La medicin del potencial se determina bajo condiciones reversibles,
en forma termodinmica, y esto implica que se debe dejar pasar el tiempo
suficiente para llegar al equilibrio, extrayendo la mnima cantidad de intensidad,
para no influir sobre el equilibrio que se establece entre la membrana y la
disolucin muestra.
2. Principios bsicos
La tcnica conocida con el nombre de potenciometra directa, consiste en la
medida de la actividad (o concentracin) de una especie qumica, midiendo
directamente el potencial con el que est directamente relacionada, mediante una
conocida funcin logartmica conocida como ecuacin de Nernst.
E = E0 + 2,3 (RT/nF) log ai
62
Para obtener mediciones analticas vlidas en potenciometra, uno de los
electrodos deber ser de potencial constante y que no sufra cambios entre uno y
otro experimento. El electrodo que cumple esta condicin se conoce como
electrodo de referencia. Debido a la estabilidad del electrodo de referencia,
cualquier cambio en el potencial del sistema se deber a la contribucin del otro
electrodo, llamado electrodo indicador o de trabajo.
El potencial registrado es en realidad la suma de todos los potenciales
individuales, con su signo correspondiente, producidos por los electrodos,
indicadores y referencia. La modificacin del transporte de materia debido a la
presencia de la membrana puede dar lugar a diferencias de potencial
electrosttico; estos potenciales de membrana son funcin de la composicin de
las disoluciones y pueden por tanto relacionarse con las actividades de los iones
de las mismas.
Una de las principales ventajas de este tipo de electrodos es que pueden
construirse, en principio, para cualquier especie inica, aunque las dificultades
de la obtencin de un electrodo especfico provienen de las tcnicas que se
necesiten para su preparacin. Constituyen una herramienta importante para la
determinacin de iones, debido a la capacidad que tienen para obtener selectiva
y de forma continua la actividad de un ion en disolucin.
3. Instrumentacin
Los componentes que integran el sistema de medicin son:
El electrodo selectivo de iones.
El electrodo de referencia.
El equipo medidor, potencimetro.
63
Si los aniones y cationes del electrolito de referencia tienen distintas
movilidades, se difunden a diferentes velocidades a travs del diafragma. Esto
produce una separacin de carga local en el diafragma y por tanto una
diferencia de potencial.
64
Un electrodo selectivo es un dispositivo que responde a ciertas sustancias
(iones o gas disuelto) en solucin. Puede emplearse para medir el nivel de
sustancias de inters en presencia de otras sustancias disueltas. El primer
electrodo selectivo que se hizo fue el de pH, sensible a los iones de hidrgeno
y que se usa para medir los niveles de hidrgeno e hidrxido en solucin
acuosa.
1. Cristal nico
Ejemplo: LaF3 para F-
1. Vidrio.
2. Lquido
2+
Ejemplos: lquidos intercambiadores de iones para Ca y transportadores
+
neutros para K
65
ELECTRODOS COMERCIALES DE ESTADO SLIDO.
66
3.2.2. Electrodo selectivo de vidrio
Se emplean para determinar pH y Na. Es un tipo de electrodo de membrana
slida no cristalina, pero se suele considerar como un tipo particular. Es el
primer tipo de electrodo selectivo que se desarroll. Consiste en un electrodo
de vidrio que al sumergirse en una disolucin, absorbe agua, de modo que se
forma una capa de hidratacin sobre su superficie. La superficie del electrodo
est construida a base de silicatos con modificadores inicos. Existen dos
grandes tipos:
Na2O-CaO-SiO2 (22:6:72) %
Li2O-Cs2O2-BaO-La2O3-SiO2 (28:2:4:3:63) %
Electrodo de pH
67
3. Variables que afectan a la medida
4.1. Temperatura
De la ecuacin de Nernst se deduce que el potencial desarrollado por el
sistema es directamente proporcional a la temperatura. Si se representan
distintas rectas de calibrado a distintas temperaturas, se observa que todas
stas se cruzan en un mismo punto, el punto isopotencial. Una de las normas
del anlisis con electrodos selectivos es que todos los patrones y muestras
han de analizarse a la misma temperatura.
4.2. Contaminacin
Hay sustancias que pueden formar depsitos insolubles en la superficie de la
membrana del electrodo, el cual evita el contacto entre sta y la muestra,
reduciendo la sensibilidad del electrodo. Las pelculas de aceite, los depsitos
de grasa y las protenas son un ejemplo, y la solucin es limpiar el electrodo
con HCl, o HNO3 durante media hora.
4.3. Envejecimiento
A medida que se va usando el electrodo, aumenta la resistencia de la
membrana y va perdiendo sensibilidad. Las causas son la prdida de iones de
la membrana, y la disminucin progresiva de la entropa, ambos efectos
acumulativos.
I = ci zi2
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Donde ci es la concentracin del ion y zi su carga.
Las soluciones con igual fuerza inica, idntica composicin de los iones
mayoritarios, la misma temperatura y disolvente tienen igual coeficiente de
actividad. Para la realizacin de las medidas, interesa obtener coeficientes de
actividad similares en patrones y muestras, lo que se consigue aadiendo una
sal concentrada no interferente, que es el tampn de ajuste de la fuerza inica,
al que se denomina ISA (Ionic strength adjustor).
4.6. pH de la muestra
Los iones H+ y los iones OH- pueden reaccionar con las especies de la muestra
y disminuir la cantidad de iones libres medidos por el electrodo, originando
errores en las medidas.
4.7. Interferencias
Una interferencia de electrodo es cualquier sustancia en una solucin
problema que pueda alterar el potencial medido por un electrodo selectivo de
iones (Ver tablas 10.5 y 10.6).
5.1. Aplicaciones
69
ANLISIS POTENCIOMTRICO CON ELECTRODO ION SELECTIVO
(ELECTRODO DE VIDRIO)
Fundamento
El concepto de pH fue introducido al estudio de la Qumica Analtica por Sorensen
(1,909) y se defini como el logaritmo de la inversa de la concentracin de los
iones hidrgeno en la solucin.
APLICACIN
Reactivos
Procedimiento
70
Cercano al volumen terico en unos 2 mL el agregado debe hacerse en
porciones de 0,2 mL cada vez, realizando sus respectivas lecturas de pH,
hasta despus de 3 mL de haber pasado el volumen terico.
Procedimiento
71