UJI EFEK HIPOGLIKEMIK EKSTRAK ETANOL GAMBIR

(Uncaria gambir, Roxb) PADA TIKUS PUTIH JANTAN DENGAN

METODE INDUKSI ALOKSAN DAN TOLERANSI GLUKOSA

Skripsi
Disusun untuk melengkapi syarat-syarat
guna mendapatkan gelar sarjana farmasi (S.Far)

Oleh :
HENI MAIELA SARI
NIM : 105102003368

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
1430 H / 2010 M
 LEMBAR PERSETUJUAN SKRIPSI

NAMA : HENI MAIELA SARI

NIM : 105102003368
JUDUL : UJI EFEK HIPOGLIKEMIK EKSTRAK ETANOL
GAMBIR (Uncaria gambir, Roxb) PADA TIKUS PUTIH
JANTAN DENGAN METODE INDUKSI ALOKSAN DAN
TOLERANSI GLUKOSA

Disetujui oleh :

Pembimbing I Pembimbing II

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt Yardi, M.Si. Apt

NIP. 195601061985101001 NIP. 150408684

Mengetahui,
Ketua Program Studi Farmasi FKIK
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc. Apt

NIP. 195601061985101001
 Skripsi dengan judul

UJI EFEK HIPOGLIKEMIK EKSTRAK ETANOL GAMBIR (Uncaria

gambir, Roxb) PADA TIKUS PUTIH JANTAN DENGAN METODE
INDUKSI ALOKSAN DAN TOLERANSI GLUKOSA

Telah diperiksa, disetujui, dan dipertahankan dihadapan penguji oleh

HENI MAIELA SARI

NIM 105102003368

Pembimbing

Drs.M.Yanis Musdja, M. Sc, Apt Yardi, M. Si, Apt

Pembimbing I Pembimbing II

Penguji

Nelly Suryani, M. Si, Apt Nurmeilis, M. Si, Apt

Penguji I Penguji II
Farida Sulistiawati, M. Si, Apt
Penguji III

Mengetahui,
Ketua Program Studi Farmasi
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M.Sc, Apt

Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta

Prof. DR. (hc). dr. M.K. Tadjudin, Sp. And

Tanggal lulus : 28 Januari 2010

 LEMBAR PERNYATAAN

DENGAN INI SAYA MENYATAKAN BAHWA SKRIPSI INI BENAR-

BENAR HASIL KARYA SENDIRI YANG BELUM PERNAH DIAJUKAN
SEBAGAI SKRIPSI ATAU KARYA ILMIAH PADA PERGURUAN TINGGI
ATAU LEMBAGA MANAPUN.

Penulis

Heni Maiela Sari

105102003368
 KATA PENGANTAR

Puji syukur atas rahmat dan karunia Tuhan Yang Maha Esa, penulis dapat

menyelesaikan penulisan skripsi dengan judul Uji Efek Hipoglikemik dan

Toleransi Glukosa Ekstrak Etanol Gambir (Uncaria gambir, Roxb) Pada Tikus

Putih Jantan Yang Diinduksi Aloksan.

Penulis menyadari sepenuhnya, keberhasilan ini adalah karunia Allah

SWT dan bantuan dari semua pihak. Oleh karena itu penulis menyampaikan

ucapan terima kasih kepada :

1. Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta Prof.DR (hc). Dr. M. K.Tadjudin, SpAnd

2. Ketua Program Studi Jurusan Farmasi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Drs. M. Yanis Musdja, M. Sc, Apt

3. Pembimbing Bapak Drs. M. Yanis Musdja, M. Sc, Apt, dan Bapak Yardi,

M. Si, Apt yang selalu membimbing saya dengan sabar, serta penguji.

4. Dosen-dosen prodi farmasi dan FKIK yang telah memberi ilmu tak ternilai

kapada penulis.

5. Kedua Orang tua ku Drs. H. Marsidik Syariep Hidayat dan Hj. Hawaina,

S. Pd yang dengan senang hati terus menerus berdoa agar anak

pertamanya ini lulus tepat waktu, serta adik-adikku Dessy Septiani dan

Salsa Nida Ulya, dan segenap keluarga besar yang selalu memberikan

dorongan moril, materil, spiritual hingga selesainya skripsi ini.

6. Teman satu perjuangan farmasi angkatan 2005.

 7. Pak Zam-zami dan Mba Pia yang telah banyak membantu dalam hal

administrasi.

8. Fadhli Ahmad Syaroni, SE yang telah banyak membantu, memberikan

semangat serta menemani baik dalam suka maupun duka selama penelitian

dimulai sampai sidang akhir.

9. Semua pihak yang terlibat baik langsung maupun tidak langsung yang

namanya tidak tersebutkan.

Dengan segala kerendahan hati, penulis menyadari sepenuhnya bahwa

masih banyak kekurangan dan keterbatasan dalam penyusunan skripsi ini. Oleh

karena itu dengan penuh keterbukaan penulis mengharapkan kritik dan saran yang

sifatnya membangun dari pembaca untuk kesempurnaan dalam penulisan skripsi

ini. Harapan penulis, semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan

khususnya dibidang farmasi dan kepustakaan di FKIK UIN Syarif Hidayatullah

Jakarta.

Jakarta, Januari 2010

Penulis
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................i

DAFTAR ISI .........................................................................................................iii
DAFTAR TABEL ..................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................vi
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................vii
ABSTRAK ..........................................................................................................viii
ABSTRACT ..........................................................................................................ix

I. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ...............................................................................1
1.2 Rumusan Masalah..................................................................... ..4
1.3 Pembatasan Masalah................................................................. ..4
1.4 Hipotesis................................................................................... ..4
1.5 Tujuan Penelitian ...................................................................... ..4
1.6 Manfaat Penelitian .................................................................... ..4

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Gambir ..................................................................................... ..5
2.1.1 Klasifikasi.............................................................................. ..5
2.1.2 Nama Daerah ......................................................................... ..5
2.1.3 Deskripsi................................................................................ ..6
2.1.4 Khasiat................................................................................... ..6
2.1.5 Kandungan Kimia .......................................................................6
2.2 Hewan Uji ......................................................................................7
2.3 Aloksan .................................................................................... ..7
2.4 Glibenklamid ............................................................................ ..8
2.5 Akarbose ........................................................................................9
2.6 Simplisia ......................................................................................10
2.6.1 Definisi Simplisia ................................................................. 10
2.6.2 Proses Pembuatan Simplisia .................................................. 10
2.7 Ekstrak .................................................................................... 11
2.7.1 Definisi Ekstrak .................................................................... 11
2.7.2 Metode Ekstraksi .................................................................. 13
2.8 Diabetes Mellitus ..................................................................... 20
2.8.1 Jenis-jenis Diabetes ............................................................... 23
2.8.2 Obat-obat Diabetes ............................................................... 26
2.9 Hipoglikemia ........................................................................... 31
2.10 Metode Pengujian .................................................................... 32
2.10.1 Metode Uji Efek Antidiabetes ............................................... 32
2.10.2 Metode Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah .......................... 34
III KERANGKA KONSEP
3.1 Kerangka Konsep ..................................................................... 36

IV METODOLOGI PENELITIAN, BAHAN DAN ALAT

4.1 Tempat dan Waktu Penelitian ........................................................ 37
4.2 Bahan dan Alat .............................................................................. 37
4.3 Cara Kerja ..................................................................................... 38
4.3.1 Determinasi Tanaman............................................................. 38
4.3.2 Uji Penapisan Fitokimia ......................................................... 38
4.3.3 Pembuata Simplisia ................................................................ 42
4.3.4 Pembuatan Ekstrak Kental Gambir ......................................... 42
4.3.5 Pengujian Karakteristik Ekstrak.............................................. 42
4.3.6 Persiapan Hewan Uji ............................................................. 44
4.3.7 Pembuatan Aloksan ................................................................ 46
4.3.8 Penetapan Dosis ..................................................................... 47
4.3.9 Uji Efek Hipoglikemik ........................................................... 48
4.3.10 Uji Toleransi Glukosa Pada Tikus Diabetes Aloksan ........... 49
4.3.11 Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah ...................................... 50
4.3.12 Pengolahan Data................................................................... 50

V. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

5.1 Hasil Penelitian
5.1.1 Determinasi Tanaman............................................................. 52
5.1.2 Karakteristik Ekstrak .............................................................. 52
5.1.3 Penapisan Fitokimia ............................................................... 53
5.1.4 Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Induksi
Aloksan ................................................................................. 53
5.1.5 Hasil Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah
Induksi Aloksan .................................................................... 54
5.1.6 Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah
Toleransi Glukosa .................................................................. 54
5.1.7 Hasil Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah
Toleransi Glukosa .................................................................. 55
5.2 Pembahasan ................................................................................... 56

VI. KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan ................................................................................... 64
6.2 Saran ............................................................................................. 65

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 66

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. 69
 DAFTAR TABEL

Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa dengan metode enzimatik
sebagai patokan penyaring dan diagnosa Diabete Mellitus (mg/dl) ...21
Tabel 2. Kelompok Perlakuan Tikus Uji Efek Hipoglikemik.......................... 45
Tabel 3. Kelompok Perlakuan Tikus Uji Toleransi Glukosa ............................46
Tabel 4. Pengujian Karakteristik Ekstrak ....................................................... 52
Tabel 5. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Gambir......................................... 53
Tabel 6. Hasil Rata-rata Kadar Glukosa Darah Induksi Aloksan ................ 53
Tabel 7. Hasil Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah
Induksi Aloksan ............................................................................... 54
Tabel 8. Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Toleransi
Glukosa ...............................................................................................54
Tabel 9. Hasil Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah
Toleransi Glukosa ...55
Tabel 10. Obat-obat diabetes ..............................................................................75
Tabel 11. Conversion of animal doses to HED based on BSA .......................... 79
Tabel 12. Berat Badan Tikus ........................................................................... 80
Tabel 13. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Uji Hipoglikemik......................... 81
Tabel 14. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Toleransi Glukosa ....................... 83
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur Kimia Aloksan ................................................................. 7

Gambar 2. Simplisia Gambir ........................................................................ 70
Gambar 3. Ekstrak Kental Gambir ................................................................ 70
Gambar 4. Timbangan .................................................................................. 70
Gambar 5. Neraca Analitik ........................................................................... 70
Gambar 6. Rotary Vacum Evaporator ........................................................... 71
Gambar 7. Eksikator ..................................................................................... 71
Gambar 8. Oven ........................................................................................... 71
Gambar 9. Furnace ....................................................................................... 71
Gambar 10. Gluko Test................................................................................... 71
Gambar 11. Suntikan ...................................................................................... 71
Gambar 12. Tikus Putih Jantan ....................................................................... 72
Gambar 13. Kandang Tikus ............................................................................ 72
Gambar 14. Penyuntikan Secara Intraperitoneal.............................................. 72
Gambar 15. Pelaksanaan Sonde Oral Hewan Uji............................................. 72
Gambar 16. Kerangka Kerja (Pembuatan Ekstrak) .......................................... 76
Gambar 17. Kerangka Kerja (Uji Efek Hipoglikemik Pada Tikus Diabetes
Aloksan)...................................................................................... 77
Gambar 18. Kerangka Kerja (Uji Toleransi Glukosa Pada Tikus Diabetes
Aloksan) ..................................................................................... 78
Gambar 19. Kurva Rata-rata Penurunan Glukosa Darah ................................. 82
Gambar 20. Kurva % Penurunan Glukosa Darah ........................................... 82
Gambar 21. Kurva Penurunan Rata-rata Toleransi Glukosa ........................... 84
Gambar 22. Kurva Persentase Penurunan Rata-rata Toleransi Glukosa .......... 84
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Gambar Gambir (Uncaria gambir, Roxb) .................................. 70

Lampiran 2. Alat Penelitian........................................................................... 70
Lampiran 3. Perlakuan Hewan Uji ................................................................ 72
Lampiran 4. Hasil Determinasi Gambir (Uncaria gambir, Roxb) .................. 73
Lampiran 5. Sertifikat Pengujian Glibenklamid ............................................. 74
Lampiran 6. Obat-obat Diabetes ......................................................................75
Lampiran 7. Rumus Perhitungan Dosis Hewan.............................................. 79
Lampiran 8. Berat Badan Tikus Selama Perlakuan Pada
Metode induksi Aloksan............................................................ 80
Lampiran 9. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Metode Induksi Aloksan ....... 81
Lampiran 10. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Metode Toleransi Glukosa .... 83
Lampiran 11. Hasil Statistik Uji Hipoglikemia dengan Metode Induksi
Aloksan ....................................................................................... 85
Lampiran 12. Hasil Statistik Uji Hipoglikemia dengan Metode Toleransi
Glukosa ....................................................................................... 94
 ABSTRAK

JUDUL : UJI EFEK HIPOGLIKEMIK EKSTRAK ETANOL

GAMBIR (Uncaria gambir, Roxb) PADA TIKUS PUTIH
JANTAN DENGAN METODE INDUKSI ALOKSAN DAN
TOLERANSI GLUKOSA

Gambir (Uncaria gambir, Roxb), salah satu tumbuhan yang ada di

Indonesia dan sering digunakan manusia untuk pengobatan berbagai penyakit,
salah satu kandungan kimia Gambir adalah Flavonoid yang berkhasiat sebagai
alternatif obat antidiabetes. Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh ekstrak
gambir (Uncaria gambir, Roxb) terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus
diabetes yang diinduksi Aloksan dengan dosis 100 mg/kgBB secara
intraperitoneal. Pemberian ektrak etanol gambir diberikan dengan variasi dosis
yaitu 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, dan 400 mg/kgBB serta Glibenklamid 1,0278
mg/kgBB sebagai kontrol positif. Pada toleransi glukosa, tikus putih jantan
diinduksi aloksan terjadi hiperglikemia kemudian diinduksi dengan larutan
glukosa oral 2 g/kgBB. Pemberian ekstrak etanol gambir dengan dosis tinggi 400
mg/kgBB dan Akarbose 5,139 mg/kgBB sebagai kontrol positif. Hasil kadar
glukosa dianalisis dengan uji ANOVA, dan uji Kruskal Willis. Jika ada perbedaan
bermakna dilanjutkan uji BNT. Dari hasil analisis menunjukan ekstrak etanol
gambir memberikan efek penurunan kadar glukosa darah pada metode induksi
aloksan dengan variasi dosis yaitu 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, dan 400 mg/kgBB
pada hari ke-9 sebesar 36,25%, 41,17%, dan 28,27%. Pada toleransi glukosa
dengan dosis sedang 200mg/kgBB memberikan penurunan secara signifikan
dengan persentase penurunan pada menit 60, 90, 120, 150, dan 180 adalah
35,68%, 41,57%, 48,08%, 54,24% dan 59,19%. Pada uji ANOVA menunjukan
tidak adanya perbedaan bermakna antara setiap dosis ekstrak dengan kontrol
normal, pada kontrol pembanding dengan dosis rendah dan sedang tidak berbeda
secara bermakna, sedangkan seluruh kelompok dengan kontrol negatif berbeda
secara bermakna pada taraf uji 0,05 ( P 0,05 ).

Kata Kunci : Gambir (Uncaria gambir, Roxb), Aloksan, Glukosa Darah,

Diabetes Mellitus, Hipoglikemia
 ABSTRACT

TITLE : EFFECT HIPOGLYCEMIC ASSAYS ETHANOL EXTRACT

OF GAMBIR (Uncaria gambir, Roxb) TO A MALE WHITE
RAT WITH ALLOXAN INDUCTION METHOD AND
GLUCOSE TOLERANCE

Gambir (Uncaria gambir, Roxb) is kind of plant in Indonesia and useful

human for medicine any diseases. One of Componen Gambir is flavonoid its use
for alternatif medicine of diabetes. Objective of the study was to figure out the
repercussions of gambir extract (Uncaria gambir, Roxb) over declining glucose
level in diabetic mouses blood, which was intraperitoneally inducted with alloxan
as much as 100 mg/kgBB. The ethanol extract was administered in various doses:
100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, and 400 mg/kgBB as well as 1.0278 mg/kgBB of
Glibenclamid as positive control agent. On the procedure of oral glucose
tolerance, the alloxan-inducted white male mouse experienced a hyperglycaemia,
which was then inducted by 2 g/kgBB of glucose solution orally. The ethanol
extract was administered with middle dose of 200 mg/KgBB as well as 5.139
mg/kgBB of Acarbose as positive control agent. The result of blood glukose
tolerance level was analysed with ANOVA test and Kruskal Willis test. If there
was significant difference, it was continued by BNT test. From the analysed
result, betel extract gives the effect to the decrease of blood glucose content to
aloxan induction method various doses in number of 36,25%, 41,17%, and
28,27%. In glucose tolerance test, it does not give the significant decrease, the
decrease precentage in 60, 90, 120, 150, and 180 minute is 35,68%, 41,57%,
48,08%, 54,24% and 59,19%. In the test ANOVA indicates the absence of a
significant difference, between the ethanol extract of gambir with the normal
control, and indicates the absence of a significant difference between the low
ethanol extract gambir and the middle ethanol extract gambir with positive
control, while the negative control which means there is a difference in the test
stage 0.05 ( P 0,05 ).

Keywords : Gambir (Uncaria gambir, Roxb), Aloxan, Blood Glucose,

Diabetes Mellitus, Hypoglicemia
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 LATAR BELAKANG

Indonesia telah lama dikenal sebagai salah satu negara kepulauan

yang memiliki hutan tropis terbesar di dunia, kaya akan penyebaran

tumbuhan yang memiliki khasiat sebagai obat, penyebaran tumbuhan

tersebut dimanfaatkan dengan baik dalam kehidupan manusia. Beberapa

tumbuhan obat tidak diketahui oleh manusia sehingga tidak terawat dengan

baik dan menjadi tanaman liar. Secara umum, informasi kegunaan tumbuhan

obat diketahui dari kandungan kimianya dan pendekatan farmakologi (Arief

Hariana H, 2004).

Salah satu tumbuhan yang ada di hutan Indonesia dan sering

digunakan manusia untuk pengobatan berbagai penyakit adalah gambir

(Uncaria gambir Roxb) dari familia Rubiaceae. Gambir termasuk suku kopi-

kopian, bentuk keseluruhan tanaman ini seperti pohon bougenvil, yaitu

merambat dan berkayu. Tanaman ini umumnya tumbuh baik pada ketinggian

200 - 800 meter diatas permukaan laut yang ditemukan tumbuh liar di hutan-

hutan Sumatera, Kalimantan dan Semenanjung Malaya terutama dari genus

Uncaria yang mempunyai + 34 spesies, dimana 1 spesies terdapat di Afrika,

2 spesies di Amerika dan selebihnya terdapat di Asia terutama di Indonesia.

1
 Jenis yang terdapat di Malaysia, Jawa dan Maluku yaitu jenis

Uncaria acida Roxb, sedangkan di Papua New Guinea terdapat jenis

Uncaria bernaysii Fv.M, namun spesies yang terbaik adalah Uncaria

gambir Roxb dimana daunnya lebih besar dan lebar, tahan terhadap hama,

bunganya sedikit dan getahnya banyak (Balittro, 2004).

Di Indonesia gambir pada umumnya digunakan untuk menyirih,

yang sudah dikenal masyarakat kepulauan Nusantara, dari Sumatra hingga

Papua sejak + 2500 tahun yang lalu. Diketahui, gambir merangsang

keluarnya getah empedu sehingga membantu kelancaran proses di perut dan

usus. India mengimpor 68% gambir dari Indonesia dan menggunakannya

sebagai bahan campuran menyirih. Fungsi lain gambir adalah sebagai

campuran obat untuk luka bakar, obat sakit kepala, obat diare, obat disentri,

obat kumur-kumur, obat sariawan, serta obat sakit kulit untuk dibalurkan

(Balittro, 2004).

Diabetes mellitus (DM), penyakit gula atau kencing manis adalah

suatu gangguan kronis yang khususnya menyangkut metabolisme glukosa

didalam tubuh. Tetapi metabolisme lemak dan protein juga terganggu (Tan

Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000). Diabetes mellitus, istilah kedokteran

yang berasal dari bahasa yunani, diabetes yang artinya mengalir dan mellitus

artinya madu. Jadi istilah ini menunjukkan tentang keadaan tubuh penderita

dengan adanya cairan manis yang mengalir terus (Depkes RI, 2006).

2
 Menurut data WHO, Indonesia menempati urutan ke-4 terbesar

dalam jumlah penderita diabetes mellitus di dunia. Pada tahun 2000, terdapat

sekitar 5,6 juta penduduk Indonesia yang mengidap diabetes. Namun, pada

tahun 2006 diperkirakan jumlah penderita diabetes di Indonesia meningkat

tajam menjadi 14 juta orang, dimana baru 50 persen yang sadar

mengidapnya dan diantara mereka baru sekitar 30 persen yang datang

berobat secara teratur (Depkes RI, 2006).

Pengujian antidiabetes yang tepat harus dilakukan melalui penelitian

farmakologi dengan tahap pengujian secara sistemik, supaya hasilnya dapat

dipertanggungjawabkan secara ilmiah dan dapat menjadi acuan untuk

penelitian-penelitian selanjutnya yang bermanfaat bagi masyarakat. Dalam

penelitian farmakologi ini menggunakan bahan tumbuhan gambir (Uncaria

gambir, Roxb) karena salah satu kandungan kimianya adalah flavonoid yang

berkhasiat sebagai antidiabetes dan menggunakan hewan uji tikus putih

jantan dengan metode uji antidiabetes praklinis yaitu metode uji diabetes

aloksan dan metode toleransi glukosa yang mendekati penderita diabetes

sebenarnya.

3
1.2 PERUMUSAN MASALAH

Apakah ekstrak etanol 70% gambir (Uncaria gambir Roxb)

memiliki efek hipoglikemik terhadap kadar glukosa darah yang diinduksi

aloksan dan kadar glukosa darah yang diberi glukosa secara oral pada tikus

putih jantan.

1.3 HIPOTESIS

Ekstrak etanol 70% gambir (Uncaria gambir Roxb) memiliki

efek hipoglikemik terhadap kadar glukosa darah yang diinduksi

aloksan dan kadar glukosa darah yang diberi glukosa secara oral pada tikus

putih jantan.

1.4 TUJUAN PENELITIAN

Untuk menguji apakah ekstrak etanol 70% gambir (Uncaria

gambir Roxb) memiliki efek hipoglikemik terhadap kadar glukosa

darah yang diinduksi aloksan dan kadar glukosa darah yang diberi

glukosa secara oral pada tikus putih jantan.

1.5 MANFAAT PENELITIAN

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang

efek hipoglikemik ekstrak etanol 70% gambir (Uncaria gambir Roxb)

terhadap kadar glukosa darah yang diinduksi aloksan dan kadar glukosa

darah yang diberi glukosa secara oral pada tikus putih jantan.
 4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 GAMBIR (Uncaria gambir Roxb) (Balittro, 2004).

2.1.1 Klasifikasi

Berdasarkan ilmu taksonomi, klasifikasi tanaman gambir

adalah sebagai berikut :

Sinonim : Uncaria gambir Roxb

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Gentianales

Familia : Rubiaceae

Genus : Uncaria

Spesies : Uncari gambir Roxb (Balittro, 2004).

2.1.2 Nama Daerah

Sumatra : Aceh : Gain

Batak : Sontang

Lampung : Pangilom, Sepelet

Dayak : Kelare

Tidore : Gabi (Balittro, 2004).

5
 2.1.3 Deskripsi

Habitus : Ketinggian tanaman gambir bisa mencapai 10 meter

Tumbuhan : Perdu merambat dengan percabangan memanjang

Daun : Oval, memanjang, ujung meruncing, tangkai pendek

Bunga : Putih tunggal tumbuh diujung tangkai dan berbuah

Buah : Berupa kapsula dengan dua ruang (Balittro, 2004).

2.1.4 Khasiat

Khasiat gambir sebagai komponen menyirih, yang telah

dikenal masyarakat kepulauan Nusantara sejak + 2500 tahun yang

lalu. Diketahui, gambir merangsang keluarnya getah empedu

sehingga membantu kelancaran proses di perut dan usus. Fungsi lain

adalah sebagai obat luka bakar, sakit kepala, disentri, kumur-kumur,

sariawan, serta sakit kulit untuk dibalurkan (Balittro, 2004).

2.1.5 Kandungan Kimia

Kandungan yang utama adalah flavonoid (terutama

gambiriin), catekin (polifenol)suatu bahan alami bersifat antioksidan,

zat penyamak (22-50%), serta sejumlah alkaloid (gambirtannin dan

turunan dihidro- dan okso-nya). Kandungan gambir lain adalah asam

catechutannat, guersetin, catechu merah, gambir fluoresein, abu,

asam lemak, lilin, alkaloid tanin (Balittro, 2004).

2.2 HEWAN UJI

6
 Hewan uji adalah tikus putih jantan galur Sparague Dawley sebanyak 42

ekor tikus dengan berat sekitar 150-200 gram dan brumur + 2-3 bulan yang

diperoleh dari Parasitologi IPB Bogor.

2.3 ALOKSAN

Aloksan (2,4,5,6-tetraoksipirimidin; 5,6-dioksiurasil) merupakan

senyawa hidrofilik dan tidak stabil (Gambar 1). Waktu paruh pada suhu

37C dan pH netral. Sebagai diabetogenik, aloksan dapat menyebabkan

kerusakan sel pankreas dan dapat digunakan secara intravena,

intraperitoneal dan subkutan. Dosis intravena yang digunakan biasanya 65

mg/kg BB, sedangkan intraperitoneal dan subkutan adalah 2-3 kalinya

(Agung Endo Nugroho, 2006).

Gambar 1. Struktur kimia aloksan

Aloksan secara cepat dapat mencapai pankreas, aksinya diawali oleh

pengambilan yang cepat oleh sel Langerhans. Pembentukan oksigen

reaktif merupakan faktor utama pada kerusakan sel tersebut. Pembentukan

oksigen reaktif diawali dengan proses reduksi aloksan dalam sel

Langerhans.

7
 Aloksan dapat meningkatkan konsentrasi ion kalsium bebas sitosolik

pada sel Langerhans pankreas. Aloksan juga diduga berperan dalam

penghambatan glukokinase dalam proses metabolisme energi. Mekanisme

kerja aloksan agen sitotoksiknya dengan cepat terikat sekaligus merusak sel

pankreas dalam memproduksi insulin atau efek diabetogen (Agung Endo

Nugroho, 2006).

2.4 GLIBENKLAMID

Derivat-klormetoksi ini adalah obat pertama dari antidiabetika oral

generasi ke-2 dengan khasiat hipoglikeminya yang kira-kira 100 kali lebih

kuat dari pada tolbutamid. Risiko hipo lebih besar dan lebih sering terjadi.

Pola kerjanya berlainan dengan sulfonilurea lain, yaitu dengan single-dose

pagi hari mampu menstimulasi sekresi insulin pada setiap pemasukan

glukosa (selama makan). Dengan demikian selama 24 jam tercapai regulasi

darah optimal yang mirip pola normal (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja,

2000).

Mekanisme kerja glibenklamid mengurangi gula darah dengan

menstimulasi pelepasan insulin dari pankreas, mengurangi produksi glukosa

hati dan meningkatkan respon insulin. Secara umum glibenklamid

menstimulasi sel-sel beta dari pulau langerhans, sehingga sekresi insulin

ditingkatkan (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

8
 Resorpsinya dari usus praktis lengkap, kerjanya dapat bertahan

sampai 24 jam. Dalam hati zat ini dirombak menjadi metabolit kurang aktif,

yang disekresikan sama rata lewat kemih dan tinja (Tan Hoan Tjay dan

Kirana Rahardja, 2000).

2.5 AKARBOSE

Senyawa tetra-maltosa ini berasal dari kuman, berbeda cara kerjanya

dengan antidiabetik lain. Dalam duodenum zat ini berkhasiat menghambat

enzim glucosidase (maltase, sukrase, glukoamilase) yang perlu untuk

perombokan di/polisakarida dari makanan menjadi monosakarida. Dengan

demikian pembentukan dan penyerapan glukosa diperlambat, sehingga

fluktuasi gula darah menjadi lebih kecil dan nilai rata-ratanya menurun.

Mekanisme kerja ini mirip dengan efek serat gizi. Resorpsinya dari usus

buruk dan naik sampai kurang lebih 35% setelah dirombak secara enzimatis

oleh kuman usus. Eksresinya berlangsung cepat lewat kemih. Efek

sampingnya yang tersering berupa terbentuknya banyak gas di usus dan

kejang usus. Selain itu diare pada dosis lebih tinggi dan digunakan bersama

dengan gula. Interaksi yang ditimbulkan jika makanan yang berisi gula

meningkatkan risiko efek samping. Obat-obat lambung dapat mengurangi

daya kerja akarbose seperti (antasida, enzim cerna, adsorbensia), laksansia

dan kolestiramin (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

9
2.6 SIMPLISIA

2.6.1 Definisi Simplisia

Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai

obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali

dikatakan lain, berupa bahan yang telah dikeringkan (Gunawan,

Didik dkk, 2004).

Simplisia dibedakan menjadi simplisia nabati, simplisia

hewani, simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati yang akan

digunakan pada penelitian kali ini. Simplisia nabati adalah simplisia

yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat

tumbuhan. Eksudat tumbuhan ialah isi sel yang secara spontan keluar

dari tumbuhan atau sel dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya.

Eksudat tanaman dapat berupa zat-zat atau bahan-bahan nabati

lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan atau diisolasi dari

tanaman (Gunawan, Didik dkk, 2004).

2.6.2 Proses Pembuatan Simplisia

Proses pembuatan serbuk simplisia kering (penyerbukan).

Dari simplisia dibuat serbuk simplisia dengan peralatan tertentu

sampai derajat kehalusan tertentu. Proes ini dapat mempengaruhi

mutu ekstrak dengan beberapa hal sebagai berikut (Depkes RI, 2000)

10
 1) Makin halus serbuk simplisia, proses ekstraksi makin efektif dan

efisien, namun makin halus serbuk, maka makin rumit secara

teknologi peralatan untuk tahapan filtrasi.

2) Selama penggunaan peralatan penyerbukan dimana ada gerakan

dan interaksi dengan benda keras (logam dll) maka akan timbul

panas (kalori) yang dapat berpengaruh pada senyawa kandungan.

2.7 EKSTRAK

2.7.1 Definisi Ekstrak

Pengertian ekstrak menurut Farmakope Indonesia Edisi III

dan Edisi IV ialah :

Farmakope Indonesia Edisi III

Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dari

simplisia nabati atau simplisia hewani yang diolah dengan cara yang

tepat, diluar pengaruh cahaya matahari langsung. Untuk ekstrak

kering harus mudah digerus menjadi serbuk.

Farmakope Indonesia Edisi IV

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan

mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia

hewani menggunakan pelarut yang sesuai dan hampir semua pelarut

diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sama

hingga memenuhi standar baku yang telah ditetapkan.

11
 Sedangkan ekstrak cair adalah sediaan cair dari simplisia

nabati yang mengandung etanol sebagai pelarut atau sebagai

pengawet atau sebagai pelarut dan pengawet. Jika tidak dinyatakan

lain pada masing-masing monografi, tiap ml ekstrak mengandung

senyawa aktif dari 1 g simplisia yang memenuhi syarat.

Faktor yang berpengaruh pada mutu ekstrak :

1. Faktor Biologi

Mutu ekstrak dipengaruhi oleh bahan asal yaitu bahan

tumbuhan obatnya dan khusus ditinjau dari segi biologi. Faktor

biologi, baik untuk bahan dari tumbuhan obat hasil budidaya

(kultivar) ataupun dari tumbuhan liar (wild crop) yang meliputi

beberapa hal, seperti : identitas jenis tumbuhan (spesies), lokasi

tumbuhan asal, periode permanen hasil tumbuhan, penyimpanan

bahan tumbuhan dan umur tumbuhan serta bagian yang

digunakan (Depkes RI, 2000).

2. Faktor Kimia

Mutu ekstrak dipengaruhi oleh bahan asal yaitu tumbuhan

obatnya, khususnya ditinjau dari segi kandungan kimianya.

Faktor kimia, baik untuk bahan tumbuhan obat hasil budidaya

(kultivar) maupun dari tumbuhan liar (wild crop), meliputi

beberapa hal (Depkes RI, 2000) :

12
 a. Faktor internal

1) Jenis senyawa aktif dalam bahan

2) Komposisi kualitatif senyawa aktif

3) Komposisi kuantitatif senyawa aktif

4) Kadar total rata-rata senyawa aktif

b. Faktor eksternal

1) Metode ekstraksi

2) Perbandingan ukuran alat ekstraksi (diameter dan tinggi

alat)

3) Ukuran, kekerasan dan kekeringan bahan

4) Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi

5) Kandungan logam berat

6) Kandungan pestisida

2.7.2 Metode Ekstraksi

Metode ekstraksi merupakan tahap awal yang penting dalam

suatu proses senyawa dari tumbuhan dan biasanya dipilih

berdasarkan beberapa faktor, seperti sifat dari bahan mentah obat dan

daya penyesuaian dengan macam-macam metode ekstraksi dalam

memperoleh ekstrak yang sempurna atau yang mendekati sempurna

dari obat (Depkes RI, 2000).

13
A. Proses Pembuatan Ekstrak

1. Cairan Pelarut

Cairan pelarut dalam proses pembuatan ekstrak adalah

pelarut yang baik (optimal) untuk senyawa kandungan yang

berkhasiat atau aktif, dengan demikian senyawa tersebut

dapat terpisahkan dari bahan dan dari senyawa kandungan

lainnya (Depkes RI, 2000).

Serta ekstrak hanya mengandung sebagian besar

senyawa kandungan yang diinginkan. Dalam hal ekstrak

total, maka cairan pelarut dipilih yang melarutkan hampir

semua metabolit sekunder yang terkandung. Fakor utama

untuk pertimbangan pada pemilihan cairan penyari adalah

sebagai berikut (Depkes RI, 2000) :

1) Selektivitas

2) Kemudahan bekerja dan proses dengan cairan tersebut

3) Ekonomis

4) Ramah lingkungan

5) Keamanan

2. Separasi dan Pemurnian

Tujuan dan tahapan ini adalah menghilangkan

(memisahkan) senyawa yang tidak diinginkan semaksimal

mungkin tanpa berpengaruh pada senyawa kandungan yang

diinginkan, sehingga diperoleh ekstrak yang lebih murni.

14
 Proses-proses pada tahapan ini meliputi pengendapan,

pemisahan cairan tak campur, sentrifugasi, dekantasi, filtrasi

serta proses adsorbsi dan penukaran ion (Depkes RI, 2000).

3. Pemekatan/Penguapan (vaporasi dan evaporasi)

Pemekatan berarti peningkatan jumlah senyawa

terlarut (partial solute) secara penguapan kondsi pelarut tidak

menjadi kering sepenuhnya, ekstrak hanya menjadi

kental/pekat (Depkes RI, 2000).

4. Pengeringan Ekstrak

Pengeringan berarti menghilangkan pelarut dari bahan

sehingga menghasilkan serbuk, massa kering rapuh,

tergantung proses dan peralatan yang digunakan. Ada

beberapa proses pengeringan ekstrak yaitu dengan cara

(Depkes RI, 2000) :

1) Pengeringan Evaporasi

2) Pengeringan Vaporasi

3) Pengeringan Sublimasi

4) Pengeringan Konveksi

5) Pengeringan Kontak

6) Pengeringan Radiasi

7) Pengeringan Dielektrik

15
 5. Rendemen

Rendemen adalah perbandingan antara ekstrak yang

diperoleh dengan simplisia awal (Depkes RI, 2000).

B. Ekstraksi Dengan Menggunakan Pelarut

1. Cara dingin

a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia

menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan

pada temperatur ruangan. Sampel yang sudah dihaluskan,

direndam dalam bejana tertutup dan terlindungi cahaya

matahari langsung selama + 1-2 hari (Depkes RI,2000).

Perendaman biasanya dilakukan sebanyak dua kali

pengulangan, dimaksudkan agar proses perendaman dapat

membantu mencari kandungan kimia tumbuhan,

kemudian diamati secara visual, ekstrak yang telah jernih

menandakan proses ekstraksi telah selesai (Depkes RI,

2000).

b. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang

selalu baru sampai sempurna yang umumnya dilakukan

pada temperatur ruangan.

16
 Proses perkolasi terdiri dari beberapa tahapan seperti :

tahap pengembangan bahan, tahap maserasi, tahap

perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak),

dilakukan terus-menerus sampai diperoleh ekstrak

(perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan (Depkes RI,

2000).

2. Cara panas

a. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada

temperatur titik didih, selama waktu tertentu dan jumlah

pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya

perbandingan balik. Umumnya dilakukan proses

pengulangan pada residu pertama sebanyak 3-5 kali

sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna

(Depkes RI, 2000).

b. Soxhlet

Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut

yang selalu baru dan umumnya dilakukan dengan alat

khusus sehingga terjadi ekstraksi berlanjut dengan jumlah

pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik

(Depkes RI, 2000).

17
 c. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan

pengadukan berlanjut) pada temperatur yang lebih tinggi

dari temperatur ruangan (kamar), biasanya pada suhu

antara 40o-50o C (Depkes RI, 2000).

d. Infus

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada

temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam

penangas air mendidih, temperatur terukur 96o-98o C)

selama waktu tertentu (15-20 menit) (Depkes RI, 2000).

e. Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama

(> 30o C) dan temperatur sampai titik didih air (Depkes

RI, 2000).

C. Destilasi Uap

Destilasi uap adalah ekstraksi senyawa kandungan

menguap (minyak atsiri) dari simplisia segar dengan uap air

berdasarkan tekanan parsial senyawa menguap dengan fase uap

air sampai sempurna diakhiri dengan kondensasi fase uap

campuran (senyawa kandungan menguap ikut terdestilasi)

menjadi destilat air bersama senyawa kandungan yang memisah

sempurna atau memisah sebagian (Depkes RI, 2000).

18
D. Cara Ekstraksi Lainnya

1. Ekstraksi berkesinambungan

Ekstraksi berkesinambungan adalah proses ekstraksi

yang dilakukan dengan pelarut yang berbeda atau resirkulasi

cairan pelarut dan prosesnya tersusun berurutan beberapa

kali. Proses ini dilakukan untuk meningkatkan efisien (jumlah

pelarut) dan dirancang untuk bahan dalam jumlah besar yang

terbagi dalam beberapa bejana ekstraksi (Depkes RI, 2000).

2. Superkritikal karbondioksida

Penggunaan prinsip superkritikal untuk ekstraksi

serbuk simplisia dan umumnya digunakan gas

karbondioksida. Dengan variable tekanan dan temperatur

akan diperoleh spesifikasi kondisi polaritas tertentu yang

sesuai untuk melarutkan golongan senyawa kandungan

tertentu. Penghilangan cairan pelarut dengan mudah

dilakukan karena karbondioksida menguap dengan mudah,

sehingga hampir langsung diperoleh ekstrak (Depkes RI,

2000).

3. Ekstraksi ultrasonik

Getaran ultrasonik (> 20.000 Hz) memberikan efek

pada proses ekstrak dengan prinsip meningkatkan

permeabilitas dinding sel, menimbulkan gelembung spontan

(cavitation) sebagai stres dinamik serta menimbulkan fraksi

19
 interfase. Hasil ekstraksi tergantung pada frekwensi getaran,

kapasitas alat dan lama proses ultrasonik (Depkes RI, 2000).

4. Ekstraksi energi listrik

Energi listrik digunakan dalam bentuk medan listrik,

medan magnet serta electric-discharges yang dapat

mempercepat proses dan meningkatkan hasil dengan prinsip

menimbulkan gelembung spontan dan menyebarkan

gelombang tekanan berkecepatan ultrasonik (Depkes RI,

2000).

2.8 DIABETES MELLITUS

Diabetes mellitus (DM) yang umumnya dikenal sebagai kencing

manis didefinisikan sebagai suatu penyakit atau gangguan metabolisme

kronis dengan multi etiologi yang ditandai dengan tingginya kadar gula

darah disertai dengan gangguan metabolisme karbohidrat, lipid dan protein

sebagai akibat insufiensi fungsi insulin. Insufiensi fungsi insulin dapat

disebabkan oleh gangguan atau defisiensi produksi insulin oleh sel-sel beta

Langerhans kelenjar pankreas, atau disebabkan oleh kurang resfonsifnya sel-

sel tubuh terhadap insulin (Depkes RI, 2006).

Penyebabnya adalah kekurangan hormon insulin, yang berfungsi

memanfaatkan glukosa sebagai sumber energi dan mesintesa lemak.

Akibatnya ialah glukosa bertumpuk didalam darah (hiperglikemia) dan

akhirnya diekskresikan lewat kemih tanpa digunakan (glycosuria). Karena

20
itu, produksi kemih sangat meningkat dan pasien harus sering kencing,

merasa amat haus, berat badan menurun dan berasa lelah (Tan Hoan Tjay

dan Kirana Rahardja, 2000).

Diagnosa diabetes dapat dipastikan dengan penentuan kadar glukosa

darah dan dengan adanya gejala klinis atau komplikasi diabetes yang khas

(misalnya retinopati) ditambah hasil pemeriksaan glukosa darah sewaktu >

200 mg/dl atau glukosa darah puasa > 126 mg/dl sudah cukup untuk

menegakkan diagnosa Diabetes Mellitus (Mansjoer Arif, dkk., 2001). Nilai

diatas 7.8 mmol/l (pada lambung kosong) pada dua hari berlainan dianggap

positif (WHO). Begitu pula post-load diatas 11.1 mmol/l, yaitu 2 jam setelah

pembebanan glukosa 75 gram (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa dengan metode

enzimatik sebagai patokan penyaring dan diagnosa Diabete
Mellitus (mg/dl).
Belum pasti Diabetes
Bukan DM
DM Mellitus
Kadar glukosa darah sewaktu

Plasma vena < 110 mg/dl 110 199 > 200

Darah kapiler < 90 mg/dl 90 199 > 200

Kadar glukosa darah puasa

Plasma vena < 110 mg/dl 110 125 > 126

Darah kapiler < 90 mg/dl 90 109 > 110

21
 Kriteria baru (1997) dari ADA (America Diabetes Association)

menurunkan nilai batas (lambung kosong) sampai 7.0 mmol/l. Kriteria

ditiadakan karena tes toleransi glukosa dalam praktek adakalanya tidak

dapat dilakukan. Nilai antara 6.1-7 mmol/l menunjukkan toleransi glukosa

yang terganggu (Moore P. US guidelines for diagnosis of diabetes updated.

Lancet 1997). Menurut perkiraan WHO akan mengikuti kriteria baru ini

(Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Gejala diabetes mellitus ditandai gejala 3P, yaitu poliuria (banyak

berkemih), polidipsia (banyak minum) dan polifagia (banyak makan), yang

dapat dijelaskan sebagai berikut, disamping naiknya kadar gula darah, gejala

kencing manis bercirikan adanya gula dalam kemih (glycosuria) dan banyak

berkemih karena glukosa yang diekskresikan mengkat banyak air.

Akan timbul rasa sangat haus, kehilangan energi dan turunnya berat badan

serta rasa letih. Tubuh mulai membakar lemak untuk memenuhi kebutuhan

energinya, yang disertai pembentukan zat-zat peombakan, antara lain aseton,

asam hidroksibutirat dan diasetatyang membuat darah menjadi asam.

Keadaan ini yang disebut ketoacidosis, amat berbahaya karena akibatnya

dapat menyebabkan pingsan (coma diabeticum). Napas penderita yang

sudah menjadi sangat kurus sering kali juga berbau aseton (Tan Hoan Tjay

dan Kirana Rahardja, 2000).

22
2.8.1 Jenis-jenis Diabetes

Ada dua jenis diabetes berdasarkan waktu dimulainya

penyakit, yakni tipe-1 dan tipe-2 (Tan Hoan Tjay dan Kirana

Rahardja, 2000) :

a. Tipe-1, IDDM atau jenis remaja (juvenile).

Pada tipe-1 terdapat destruksi dari sel-sel beta pankreas,

sehingga tidak memproduksi insulin lagi akibatnya sel-sel tidak

bisa menyerap glukosa dari darah. Karena itu kadar glukosa

darah meningkat diatas 10 mmol/l yakni nilai ambang ginjal,

sehingga glukosa berlebihan dikeluarkan lewat urin bersama

banyak air (glycosuria). Dibawah kadar tersebut, glukosa ditahan

oleh tubuli ginjal. Tipe ini menghinggapi orang-orang dibawah

usia 30 tahun dan paling sering dimulai pada usia 10-13 tahun.

Penderita senantiasa membutuhkan insulin maka tipe-1 juga

disebut IDDM (Insulin Dependent Diabete Mellitus). Penyebab

diabetes tipe-1 ini disebabkan oleh suatu infeksi virus yang

menimbulkan reaksi auto-imun berlebihan untuk menanggulangi

virus. Akibatnya sel-sel pertahanan tubuh tidak hanya membasmi

virus, melainkan juga turut merusak atau memusnahkan sel-sel

langerhans (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Dalam waktu satu tahun sesudah diagnosa, 80-90%

penderita tipe-1 memperlihatkan antibodies sel beta didalam

darahnya. Faktor keturunan juga memegang peranan, virus yang

23
 dicurigai adalah virus Coxsackie-B, Epstein-Barr, morbilli

(measless) dan virus parotitis (bof). Pengobatan satu-satunya

untuk tipe-1 ini adalah pemberian insulin seumur hidup.

Berhubungan IDDM merupakan penyakit auto-imun, maka

imunosupresiva, seperti azatioprin dan siklosporin, berdaya

menghambat jalannya penyakit, tetapi hanya untuk sementara

(Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

b. Tipe-2, jenis dewasa (maturity onset) atau tipe NIDDM.

Lazimnya tipe-2 ini menyerang orang-orang mulai diatas

40 tahun dengan insidensi lebih besar pada orang gemuk

(overweight, dengan Q.I.>27) dan pada usia lebih lanjut. Orang-

orang yang hidupnya makmur, culas dan kurang gerak badan

lebih besar lagi resikonya. Menurut perkiraan 5-10% orang-orang

diatas 60 tahun mengidap diabetes tipe-2. Mulainya berangsur-

angsur dengan keluhan ringan yang sering kali tidak tidak

dikenali (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Tipe-2 bersifat menyesatkan karena dalam kebanyakan

hal baru menjadi manifes dengan tampilnya gejala stadium

lanjut. Bahkan bila sudah terjadi komplikasi, misalnya infark

jantung atau gangguan penglihatan. Penyebabnya akibat proses

menua banyak pasien jenis ini mengalami penyusutan sel-sel beta

yang progresif serta penumpukan amiloid sekitar sel-sel beta. Sel

beta yang tersisa pada umumnya masih aktif, tetapi sekresi

24
insulinnya semakin berkurang. Selain itu kepekaan reseptornya

menurun. Hipofungsi sel-sel beta ini bersama resistensi insulin

yang meningkat mengakibatkan gula darah meningkat

(hiperglikemia). Mungkin juga sebabnya berkaitan dengan suatu

infeksi virus pada masa muda. Diperkirakan bahwa pada

penderita tanpa overweight (tidak kegemukan) resistensi insulin

tidak berperan. Tipe NIDDM (Non-Insulin Dependent Diabetes

Mellitus) yang artinya tidak bergantung pada insulin dan dapat

diobati dengan antidiabetik oral. Faktor keturunan memegang

peranan besar (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Adapun jenis Diabetes Melitus Gestasional (GDM)

adalah keadaan diabetes atau intoleransi glukosa yang timbul

selama masa kehamilan dan biasanya berlangsung hanya

sementara atau temporer. Sekitar 4-5% wanita hamil diketahui

menderita GDM dan umumnya terdeteksi pada atau setelah

trisemester kedua. Diabetes dalam masa kehamilan, umumnya

akan pulih beberapa saat setelah melahirkan (Depkes RI, 2006).

Wanita yang pernah menderita GDM akan lebih besar

resikonya untuk menderita diabetes lagi di masa depan dan

kontrol metabolisme yang ketat dapat mengurangi resiko tersebut

(Depkes RI, 2006).

25
2.8.2 Obat-obat Antidiabetes

Antidiabetika Oral. Pada tahun 1954 karbutamida

diperkenalkan sebagai obat diabetes oral pertama dari kelompok

sulfonilurea yang struktur dan efek sampingnya mirip sulfonamida.

Beberapa tahun kemudian disintesa derivatnya, yaitu tolbutamida

dan klorpropamida tanpa efek sulfa, yang selanjutnya disusul oleh

banyak turunan lain dengan adanya kerja lebih kuat (Tan Hoan Tjay

dan Kirana Rahardja, 2000).

Sementara itu sekitar tahun 1959 ditemukan senyawa lain

dengan daya antidiabetes, yakni kelompok biganida (metformin).

Akhirnya pada tahun 1990, dipasarkan kelompok penghambat enzim

(akarbose miglitol) yang cara kerjanya sangat berlainan dengan

kedua jenis lainnya.

Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-obat hipoglikemia

oral dibagi menjadi 3 golongan, yaitu :

a) Obat-obat yang meningkatkan sekresi insulin, seperti golongan

sulfonilurea, contoh senyanya adalah gliburida/glibenklamid,

glipizida, glikazida, glimepirida, dan glikuidon.

b) Sensiter insulin (obat yang dapat meningkatkan sensitifitas sel

terhadap insulin), meliputi golongan biguanida dan tiazolidindon.

c) Inhibitor katabolisme karbohidrat, antara lain alfa-glukosidase,

contoh senyawanya acarbose dan miglitol.

26
 Ada lima kelompok obat antidiabetika oral seperti

sulfonilurea, biguanida, glukosidase-inhibitors, thiazolidindon dan

miglitinida. Antidiabetika oral umumnya diberikan bila diet (selama

minimal 3 bulan), gerak badan dan upaya penurunan berat badan

tidak (cukup) menurunkan kadar gula yang tinggi (Tan Hoan Tjay

dan Kirana Rahardja, 2000).

1. Sulfonilurea : tolbutamida, klorpropamida, tolazamida

(Tolinase), glibenklamida, gliklazida, glipzida dan glikidon.

Empat obat terakhir dinamakan obat-obat generasi ke-2,

yang daya kerjanya atas dasar bobot 10-100x lebih kuat daripada

ketga obat pertama yang termasuk obat-obat generasi ke-1 (Tan

Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Sulfonilurea menstimulasi sel-sel beta dari pulau

langerhans, sehingga sekresi insulin ditingkatkan. Disamping itu

kepekaan sel-sel beta bagi kadar glukosa darah juga diperbesar

melalui pengaruhnya atas protein transpor glukosa. Obat ini

hanya efektif pada penderita NIDDM yang tidak begitu berat,

yang sel-sel betanya masih bekerja cukup baik.

Ada indikasi bahwa obat-obat ini juga memperbaiki

kepekaan organ tujuan bagi insulin dan menurunkan absorpsi

insulin oleh hati. Obat generasi ke-2 terbaru (1996) adalah

glimeprida. Resorpsinya dari usus umumnya lancar dan lengkap,

sebagian besar terikat pada protein, antara lain 90-99%. Plasma

27
 t1/2-nya berkisar antara 4-5 jam (tolbutamisa, glipizida), 6-7 jam

(glibenklamida) sampai 10 jam (gliklazida) atau lebih dari 30 jam

(klorpropamida). Efek sampingnya yang terpenting adalah

hipoglikemia dapat terjadi secara terselubung dan adakalanya

tanpa gejala khas, khususnya pada derivat kuat seperti

glibenklamda (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

2. Biguanida : metformin.

Berbeda dengan sulfonilurea, obat-obat ini tidak

menstimulasi pelepasan insulin dan tidak menurunkan gula darah

pada orang sehat. Zat ini juga menekan nafsu makan (efek

anorexia) hingga berat badan tidak meningkat, sehingga tidak

layak diberikan pada penderita overweight. Penderitaini

biasanya mengalami resistensi insulin, sehingga sulfonilurea

tidak kurang efektif. Mekanisme kerja bukan akibat stimulasi

sekresi insulin, mungkin berdasarkan peningkatan kepekaan

reseptor insulin, sehingga absorpsi glukosa di jaringan perifer

meningkat (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Efeknya ialah turunnya kadar insulin yang terlalu kuat

dan penurunan berat badan, kemungkinan lain adalah

penghambatan gluconoegenesis dalam hati dan peningkatan

penyerapan glukosa di jaringan perifer. Efek sampingnya yang

paling sering terjadi berupa gangguan lambung-usus (mual,

28
 anorexia, sakit perut, diare) tetapi umumnya bersifat sementara.

Yang lebih serius adalah asidosis asam laktat dan angiopati luas,

terutama pada manula dan insufiensi hati atau ginjal (Tan Hoan

Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

3. Glukosidase-inhibitors : acarbosedan miglitol.

Obat-obat ini termasuk kelompok obat baru yang

berdasarkan persaingan inhibisi enzim alfa-glukosidase di

mukosa duodenum, sehingga reaksi penguraian di polisakarida-

monosakarid dihambat.dengan demikian glukosa dilepaskan

lebih lambat dan absorpsinya kedalam darah juga kurang cepat,

lebih rendah dan merata, sehingga memuncaknya kadar gula

darah dihindarkan. Kerja ini mirip dengan efek dari makanan

yang kaya akan serat gizi. Tidak ada kemungkinan hipoglikemia

dan terutama berguna pada penderita kegemukan, untuk siapa

tindakan diet yang tidak menghasilkan efek. Kombinasi dengan

obat-obat lain memperkuat efeknya (Tan Hoan Tjay dan Kirana

Rahardja, 2000).

4. Thiazolidindon : troglitazon.

Adalah kelompok obat baru pada tahun 1996 dipasarkan

di AS dan Inggris. Kegiatan farmakologinya luas dan berupa

penurunan kadar glukosa dan insuln dengan jalan meningkatkan

29
 kepekaan bagi insulin dari otot,jaringan lemak dan hati. Efek

sampingnya penyerapan glukosa kedalam jaringan lemak dan

otot meningkat (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

Begitu pula menurunkan kadar trigliserida/asam lemak

bebas dan mengurangi gluconeogenesis dalam hati. Zat ini tidak

mendorong pankreas untuk meningkatkan pelepasan insulin

seperti sulfonilurea. Disamping itu troglitazon bekerja

antihipersensitif, yaitu dapat menurunkan tekanan darah

sistolisdan diastolis (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

5. Miglitinida : repaglinida (Novonorm).

Kelompokobat terbaru ini (1999) bekerja menurut

mekanisme khususnya, yakni mencetuskan pelepasan insulin dari

pankreas segera sesudah makan. Miglitinida harus diminum tepat

sebelum makan dan karena resorpsinya cepat, maka mencapai

kadar darah puncak dalam 1 jam. Insulin yang dilepaskan

menurunkan glukosa darah secukupnya. Ekskresinya juga cepat

sekali, dalam waktu 1 jam sudah dikeluarkan dari tubuh (Tan

Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

30
2.9 HIPOGLIKEMIA

Hipoglikemia adalah komplikasi yang paling lazim terjadi pada

terapi dengan insulin dan disebabkan oleh turunnya kadar gula darah terlalu

drastis. Hal ini lebih jarang terjadi dengan antidiabetik oral. Keadaan

berbahaya ini dapat disebabkan oleh overdose obat, kurang atau tidak

makan sesudah injeksi atau karena absorpsi insulin yang lebih lancar

berhubung lokasi injeksi berlainan ataupun karena kerja fisik berat atau

olah raga. Lokasi injeksi juga turut menentukan kecepatan resorpsi,

misalnya penyuntikan di perut dan lengan atas masing-masing 2 dan 2.5 x

lebih cepat dari pada injeksi di paha (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja,

2000).

Gejala hipoglikemia. Bila kadar glukosa menurun dibawah ca 3.3

mmol/l timbul gejala otonom akibat dari stimulasi susunan saraf adrenerg.

Misalnya berkeringat, gemetar, muka pucat dan jantung berdebar-debar, rasa

lapar dan kesemutan sekitar mulut dan lidah. Bila kadar gula turun lebih

lanjut dibawah 2.8 mmol/l akan terjadi gejala khas akibat kekurangan

glukosa diotak yang mengakibatkan gangguan konsentrasi dan penglihatan,

pusing, termangu-mangu dan mengantuk, bahkan koma (Tan Hoan Tjay dan

Kirana Rahardja, 2000).

Hipo ringan,sebaiknya diatasi dengan segera memberikan gula

seperti perasan jeruk, sirup kental atau makanan apapun. Hipo hebat

dengan berkurangnya kesadaran atau pingsan adalah keadaan yang sangat

berbahaya, karena bisa mengakibatkan kerusakan otak.

31
 Oleh karena itu harus segera diobati dengan injeksi iv larutan glukosa 40-

50% atau im glukagon 1 mg,penderita akan pulih kesadarannya sesudah 10-

15 menit (Tan Hoan Tjay dan Kirana Rahardja, 2000).

2.10 METODE PENGUJIAN

2.10.1 Metode Uji Efek Antidiabetes

A. Metode uji toleransi glukosa oral

Toleransi glukosa adalah kemampuan tubuh untuk

menggunakan glukosa dalam tubuh. Kadar glukosa darah akan

naik dengan pemberian glukosa 1 g/kgBB secara oral, tetapi tetap

dalam keadaan normal tidak pernah melebihi 10 sampai 170

mg/100 ml. Puncak kadar glukosa dalam atau 1 jam dan

kembali normal setelah 2-3 jam (Depkes RI, 2000).

Prinsip toleransi glukosa ialah hewan uji yang telah

dipuasakan selama + 16 jam, kemudian diambil darahnya melalui

vena ekor dari masing-masing tikus sebanyak 0.5 ml sebagai

kadar glukosa awal lalu diberikan bahan uji obat antidiabetes dan

larutan glukosa peroral. Pengambilan darah vena ekor diulangi

setelah interval waktu yang ditentukan (Depkes RI, 2000).

Evaluasi

32
 Rumus untuk perhitungan kadar glukosa darah adalah

sebagai berikut :

At
Kadar glukosa darah = ------ x 100 mg/dl
As

Di mana : A = serapan pada panjang gelombang maksimum

At = serapan larutan uji

As = serapan larutan baku (larutan glukosa standar)

Dengan rumus diatas dapat diketahui penurunan kadar

glukosa darah pada kelompok uji diketahui dengan

membandingkan hasil yang diperoleh dengan hasil dari

kelompok kontrol positif. Semua data dimuat dalam tabel dan

dievaluasi secara statistik dengan menggunakan ANOVA dan uji

t. Dapat dibuat kurva dosis respons kadar gula darah sebagai

fungsi dosis dan waktu penentuan kadar gula darah (Depkes RI,

2000).

B. Metode uji aloksan diabetes

Keadaan diabetes dapat diinduksi pada hewan percobaan

dengan cara pankreatektomi dan juga secara kimia. Zat-zat kimia

sebagai induktor (= diabetogen) dapat digunakan zat-zat kimia

seperti aloksan yang pada umumnya diberikan secara parenteral.

33
 Aloksan mampu menginduksi diabetes secara permanen dimana

terjadi gejala hiperglikemia dan sebagai diabetogen yang lazim

digunakan, karena obat ini cepat menimbulkan hiperglikemia

yang permanen dalam waktu 2-3 hari (Depkes RI, 2000).

Prinsip uji aloksan diabetes ialah induksi diabetes

dilakukan pada hewan uji yang diberi suntikan aloksan secara

intravena pada ekor dengan dosis 100 mg/kgBB. Dan hewan uji

yang berbeda lainnya dengan kondisi yang berbeda akan

menghasilkan dosis yang berbeda pula. Pemberian obat

antidiabetik secara oral dapat menurunkan kadar glukosa darah

dibandingkan terhadap hewan uji normal (Depkes RI, 2000).

2.10.2 Metode Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah

Pemeriksaan kadar glukosa darah dapat dilakukan dengan

empat macam metode, yaitu : metode enzimatik, metoda glukosa

test, metode kondensasi, metode oksidasi reduksi (Lucie, dkk.

1997).

a. Metode Enzimatik

Glukosa dapat ditentukan secara enzimatik, misalnya

dengan penambahan enzim glukosa oksidase (GOD). Dengan

adanya oksigen atau udara, glukosa dioksidasi oleh enzim

menjadi asam glukuronat disertai pembentukan H2 O2.

34
 Dengan adanya enzim peroksidase (POD), H2 O2 akan

membebaskan O2 yang mengoksidasi aseptor kromogen yang

sesuai serta memberikan warna yang sesuai pula. Kadar

glukosa darah ditentukan berdasarkan intensitas warna yang

terjadi, diukur secara spektrofotometri (Lucie, dkk. 1997).

b. Metode Kondensasi Gugus Amin

Prinsip metode kondensasi gugus amin ini adalah

Aldosa dikondensasi dengan orto toluidin dalam suasana asam

dan menghasil larutan berwarna hijau setelah

dipanaskan. Kadar glukosa dan dapat ditentukan sesuai

dengan intensitas warna yang terjadi, diukur secara

spektrofotometri (Lucie, dkk. 1997).

c. Metode Pemisahan Glukosa

Glukosa dipisahkan dalam keadaan panas dengan

antron atau timol dalam suasana asam sulfat pekat.

Glukosajuga dapat dipisahkan secara kromatografi, tetapi

pemisahan glukosa ini jarang dilakukan (Lucie, dkk. 1997).

d. Metode Reduksi

Prinsip: Kadar glukosa darah ditentukan secara

reduksi dengan menggunakan suatu oksidan ferisianida yang

direduksi menjadi ferosianida oleh glukosa dalam suasana basa

dengan pemanasan. Kemudian kelebihan garam feri dititrasi

secara iodometri (Lucie, dkk. 1997).

35

36
 BAB III

KERANGKA KONSEP

Simplisia (Gambir)

Ekstraksi
(Maserasi dengan etanol 70%)

Induksi Aklimatisasi Toleransi

aloksan tikus Glukosa

Tikus dibuat diabetes

Pengukuran kadar glukosa darah hiperglikemia awal

Pemberian ekstrak uji atau pembanding

Pemberian
glukosa

Pengukuran kadar glukosa darah

Untuk uji efek Untuk uji toleransi glukosa

hipoglikemik pada hari ke pada menit ke 30, 60, 90, 120,
3, 6, 9 150 dan 180
Pengolahan data ANOVA satu arah
 BAB IV

METODELOGI PENELITIAN

4.1 TEMPAT DAN WAKTU PENELITIAN

4.1.1 Tempat : Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kimia Jurusan

Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan

Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.

4.1.2 Waktu : Penelitian berlangsung dari bulan Mei sampai bulan Juli

2009.

4.2 BAHAN DAN ALAT

4.2.1 Bahan

Bahan tanaman yang digunakan adalah : Gambir (Uncaria gambir,

Roxb) yang telah dideterminasi. Bahan kimia yang digunakan adalah

Acarbose, Aquadest, Aloksan monohidrat, Etanol 70%,

Glibenclamid, Glukosa 10%, NaCl 0.9%, Na CMC dan Ammoniak,

Kloroform, HCl, H 2SO 4, FeCl3, NaOH, dan Pereaksi Dragendroff,

Mayer, Liberman-Burchad. Hewan yang digunakan adalah tikus

putih jantan Galur Sprague Dawley sebanyak 42 ekor dengan berat

sekitar 150-200 gram dan berumur + 2-3 bulan yang diperoleh dari

laboratorium Parasitologi IPB Bogor.

37
 4.2.2 Alat

Alat yang digunakan seperti : Kandang tikus dengan tempat

makan dan minum, Timbangan tikus, Alat-alat gelas (pipet tetes,

corong pisah, erlenmeyer), Destiller (alat destilasi uap), Glukometer,

Jarum suntik, Sonde oral, Test strip, Timbangan analitik, dan Vacum

rotari evaporator.

4.3 CARA KERJA

4.3.1 Determinasi Bongkahan Gambir

Bahan yang digunakan untuk penelitian adalah bongkahan

gambir yang diperoleh dari Departemen Pertanian Payakumbuh

Sumatera Barat.

4.3.2 Uji Penapisan Fitokimia

a. Identifikasi golongan alkaloid

Dilembabkan gambir sebanyak + 5 gram dengan 5 ml

ammoniak 25% digerus, ditambahkan kloroform digerus lagi,

disaring, dipisahkan filtrat berupa larutan organik sebanyak 10

ml (sebagai larutan A) diekstraksi dengan 10 ml larutan HCl 1:10

dengan pengocokan didalam tabung reaksi, diambil larutan

bagian atasnya (sebagai larutan B). Larutam A diteteskan

beberapa tetes pada kertas saring dan ditetesi dengan pereaksi

Dragendroff, terbentuk warna merah atau jingga pada kertas

saring menunjukkan adanya senyawa alkaloid.

38
 Larutan B dibagi dalam 2 tabung reaksi, ditambahkan pereaksi

Dragendroff pada 1 tabung reaksi, jika terbentuk endapan merah

bata dan ditambah pereaksi Mayer pada tabung reaksi yang

satunya, jika terbentuk endapan putih, menunjukkan adanya

senyawa alkaloid (Depkes RI, 1996).

b. Identifikasi Golongan Flavonoid

Serbuk simplisia sebanyak + 10 gram ditambahkan air

panas sebanyak 100 ml, dididihkan selama 5 menit, disaring,

diambil filtrat, dimasukkan larutan kedalam tabung reaksi

sebanyak 5 ml, ditambahkan serbuk magnesium secukupnya,

HCl pekat 1 ml, amil alkohol 2 ml, dikocok dengan kuat, biarkan

hingga memisah, jika terbentuk warna dalam larutan amil alkohol

menunjukkan adanya senyawa flavonoid (Depkes RI, 1996).

c. Identifikasi Golongan Saponin

Dimasukkan serbuk sampel kedalam tabung reaksi,

ditambahkan air panas sebanyak 10 ml, didinginkan kemudian

dikocok kuat secara vertikal selama 10 kali kocokan, jika

terbentuk busa stabil dalam tabung reaksi menunjukkan adanya

senyawa saponin, bila ditambahkan HCl 1% encer sebanyak 1

tetes busa tetap stabil (Depkes RI, 1996).

39
d. Identfikasi Golongan Tanin

Dimasukkan serbuk sampel kedalam tabung reaksi,

ditambahkan air panas sebanyak 10 ml, dididihkan selama 10

menit diatas hot plat, disaring dengan kertas saring. Diambil

filtrat yang didapat ditambah larutan FeCl3 1% secukupnya, jika

terbentuk warna biru tua atau hijau atau hitam menunjukkan

adanya senyawa golongan tanin (Depkes RI, 1996).

e. Identifikasi Golongan Kuinon

Dipanaskan dalam air + 1 gram serbuk selama 5 menit,

disaring dan diambil filtrat yang didapat ditambah larutan NaOH

1 N beberapa tetes, jika terbentuk warna merah menunjukkan

adanya senyawa golongan kuinon (Depkes RI, 1996).

f. Identifikasi Golongan Steroid dan Triterpenoid

Dimaserasi serbuk simplisia + 5 gram dengan eter

sebanyak 20 ml selama 2 jam (dalam wadah dengan penutup

rapat), disaring dan diambil filtratnya, diuapkan filtrat pada

cawan penguap sampai kering hingga diperoleh residu/sisa,

ditambahkan pereaksi Liberman-Burchad yaitu komplikasi antara

asam asetat anhidrat sebanyak 2 tetes dan asam sulfat pekat 1

tetes kedalam residu, jika terbentuk warna hijau atau merah

menunjukkan adanya senyawa golongan steroid dan triterpenoid

(Depkes RI, 1996).

40
g. Identifikasi Golongan Minyak Atsiri

Dimasukkan serbuk simplisia kedalam tabung reaksi + 2

gram, ditambahkan pelarut petroleum eter sebanyak 10 ml dan

dipasang corong (yang diberi lapisan kapas yang sudah dibasahi

dengan air pada mulut tabung), dipanaskan selama 10 menit

kemudian didinginkan, disaring dengan kertas saring, diuapkan

filtrat pada cawan penguap sampai kering, residu dilarutkan

dengan pelarut etanol 95% sebanyak 5 ml lalu saring dengan

kertas saring. Filtratnya diuapkan dengan cawan penguap, residu

berbau aromatik atau menyenangkan menunjukkan adanya

senyawa golongan minyak atsiri (Depkes RI, 1996).

h. Identifikasi Golongan Kumarin

Dimasukkan serbuk simplisia kedalam tabung reaksi

sebanyak + 2 gram, ditambahkan pelarut kloroform sebanyak 10

ml. Dipasang corong (yang diberi lapisan kapas yang sudah

dibasahi dengan air pada mulut tabung), dipanaskan diatas

penangas air selama 30 menit, dinginkan, disaring, diuapkan

filtrat pada cawan penguap, residu ditambah air panas sebanyak

10 ml, didinginkan, dimasukkan larutan ketabung reaksi,

ditambah larutan amonia 1% 0.5 ml, diamati dibawah sinar UV

pada panjang gelombang 365 nm, jika terjadi fluoresensi warna

biru atau hijau, menunjukkan golongan kumarin (Depkes RI,

1996).

41
4.3.3 Pembuatan Simplisia

Pembuatan simplisia yang baik dan memenuhi syarat terdiri

dari beberapa tahap seperti : sortasi, pencucian, perajangan,

pengeringan, penggilingan, dan pengayakan.

4.3.4 Pembuatan Ekstrak Kental Gambir

Diblender bongkahan gambir sebanyak 5 kg. Direndam

serbuk dengan etanol 70% sebanyak 500 ml. Perendaman awal

dilakukan selama 24 jam. Disaring dan ampasnya direndam kembali

dengan etanol 70% secukupnya selang 1 jam didalam erlenmeyer

menggunakan stirer dan hot plate. Dikumpulkan maserat cair yang

didapat didalam labu evaporator, kemudian diuapkan dengan

menggunakan rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental.

4.3.5 Pengujian Karakteristik Ekstrak

Pengujian karakteristik Ekstrak mencakup uji parameter non

spesifik yang dilakukan meliputi susut pengeringan dan kadar air

dengan tujuan memberikan batasan maksimal (rentang) tentang

besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan dan

besarnya kandungan air didalam bahan.

42
a. Susut pengeringan dan kadar air

Ekstrak ditimbang sebanyak 1 g sampai 2 g dimasukkan

kedalam botol timbang dangkal bertutup yang sebelumnya telah

dipanaskan pada suhu 105oC selama 30 menit dan telah ditara.

Ekstrak yang ditimbang diratakan dalam botol timbang

kemudian dimasukkan ke dalam ruang pengering, dibuka tutupnya,

dikeringkan pada suhu 105oC hingga bobot tetap. Sebelum setiap

pengeringan, botol dibiarkan dalam keadaan tertutup mendingin

dalam eksikator hingga suhu kamar (Depkes RI, 2000).

Rumus susut pegeringan dan kadar air sebagai berikut :

Berat awal berat akhir x 100%

Berat awal

b. Kadar Abu

Ditimbang ekstrak sebanyak 2 g sampai 3 g dimasukkan ke

dalam krus silikat yang telah dipijarkan dan ditara. Dipijarkan

perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan, dan ditimbang hingga

diperoleh bobot tetap (Depkes RI, 2000).

Hitung kadar abu dengan rumus sebagai berikut :

% Kadar abu = 1- (A - B) x 100%

43
4.3.5 Persiapan Hewan Uji

Diaklimatisasi hewan uji selama dua minggu dengan tujuan

agar hewan uji beradaptasi dengan lingkungan barunya dan diberi

makan pelet. Pembagian jumlah tikus untuk uji hipoglikemik tiap

kelompok (n = 6) dihitung berdasarkan rumus Federer :

(n-1)(t-1) > 15

Keterangan :

t = jumlah kelompok perlakuan

n = jumlah ulangan dari tiap perlakuan

Rumus Federer untuk Metode Induksi Aloksan

(n-1) (t-1) 15

(n-1) (6-1) 15

n > 4

Rumus Federer untuk Metode Toleransi Glukosa

(n-1) (t-1) 15

(n-1) (4-1) 15

n > 6

44
 Tikus dibagi menjadi 6 kelompok yang masing-masing

kelompok terdiri dari 6 ekor tikus dengan perincian sebagai berikut :

Tabel 2. Kelompok Perlakuan Tikus Uji Efek Hipoglikemik

Banyaknya
Kelompok Perlakuan
Tikus

1 6 Kontrol normal, diberi air suling

Kontrol negatif, dibuat diabetes, diberi air

2 6
suling

Kontrol positif, dibuat diabetes, diberi

3 6
suspensi Glibenklamid

Kelompok perlakuan 1, dibuat diabetes,

4 6 diberi sediaan ekstrak gambir dosis rendah

100 mg/kgBB

Kelompok perlakuan 2, dibuat diabetes,

5 6 diberi sediaan ekstrak gambir dosis

sedang 200 mg/kgBB

Kelompok perlakuan 3, dibuat diabetes,

6 6 diberi sediaan ekstrak gambir dosis tinggi

400 mg/kgBB

45
 Tabel 3. Kelompok Perlakuan Tikus Uji Toleransi Glukosa

Banyaknya
Kelompok Perlakuan
Tikus

1 6 Kontrol normal, diberi air suling

Kontrol negatif, dibuat diabetes, diberi air

2 6
suling dan larutan glukosa 10%

Kontrol positif, dibuat diabetes, diberi

3 6
akarbose dan larutan glukosa 10%

Kelompok perlakuan, dibuat diabetes,

4 6 diberi sediaan ekstrak gambir dosis sedang

200 mg/kgBB dan larutan glukosa 10%

4.3.7 Pembuatan Larutan Aloksan

Dilarutkan aloksan monohidrat dalam Natrium Klorida 0.9%

dengan dosis 100 mg/kgBB.

46
4.3.8 Penetapan Dosis

a) Dosis aloksan

Aloksan diberikan dalam dosis 100 mg/kgBB tikus secara

intraperitoneal (Nurmeilis, dkk, 2001).

b) Dosis glibenklamid

Dosis Glibenklamid diberikan dalam bentuk larutan suspensi

dengan dosis 10 mg kemudian dihitung berdasarkan tabel

faseb diperoleh dosis 1,0278 mg/kgBB (Katzung, B.G, 2002).

c) Dosis ekstrak gambir

Dosis rendah = 100 mg/kgBB

Dosis sedang = 200 mg/kgBB

Dosis tinggi = 400 mg/kgBB (Arambewela, dkk, 2005).

d) Dosis glukosa

Dosis glukosa yang biasa digunakan adalah glukosa 10%

dengan dosis 2 g/kgBB (Yulinah dkk, 2001).

e) Dosis acarbose

Dosis akarbose yang biasa digunakan manusia adalah 50 mg.

Kemudian dikonversikan berdasarkan konversi Faseb yaitu 5,139

mg/kgBB.

47
4.3.9 Uji Efek Hipoglikemik Pada Tikus Diabetes Dengan Aloksan

a. Disuntikkan larutan aloksan secara intraperitoneal dengan dosis

100 mg/kgBB tikus pada 5 kelompok yang masing-masing terdiri

dari 6 tikus sehat. Setelah disuntikkan, tikus diberi makan dan

minum seperti biasa.

b. Diamati keadaan tikus pada hari keenam dan dilakukan

pengukuran kadar glukosa hipoglikemia awal yang sebelumnya

tikus telah dipuasakan selama 16 jam.

c. Diberi larutan uji (ekstrak gambir) untuk semua kelompok dan

pembanding glibenklamid, kecuali kelompok normal.

d. Pemberian larutan bahan uji, pembanding, dan air suling

dilakukan setiap hari.

e. Pada hari ke 3, 6 dan 9 setelah pemberian larutan bahan uji,

diambil cuplikan darah pada semua tikus melalui ekor, kemudian

ditentukan kadar glukosa darahnya. Setiap kali pengambilan

darah tikus harus dipuasakan sebelumnya selama 16 jam dengan

terus diberi minum.

48
4.3.10 Uji Toleransi Glukosa Pada Tikus Diabetes Aloksan

a. Disuntikkan larutan aloksan secara intraperitoneal dengan dosis

100 mg/kgBB tikus pada tiga kelompok yang masing-masing

terdiri dari 6 tikus sehat, yaitu kelompok kontrol negatif,

kelompok dosis 200 mg/kgBB, dan kelompok pembanding yang

diberi acarbose 5,139 mg/kgBB. Setelah disuntik, tikus diberi

makan dan minum seperti biasa.

b. Dilakukan pengukuran kadar glukosa darah hiperglikemia yang

sebelumnya tikus telah dipuasakan selama 16 jam kemudian

diberikan ekstrak gambir dengan dosis 200 mg/kgBB melalui

rute oral. Dua jam kemudian diberikan larutan glukosa 10% pada

dosis 2 g/kgBB secara oral.

c. Dilakukan pengukuran kadar glukosa darah setelah 2 jam

pemberian glukosa 10%, pada menit ke 30, 60, 90, 120, 150 dan

180.

49
4.3.11 Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah

Pemeriksaan kadar glukosa darah dilakukan pada 6 kelompok

yang masing-masing terdiri dari 6 ekor tikus dengan prosedur

sebagai berikut :

a. Dipuasakan tikus selama 16 jam.

b. Diambil darah melalui ekor dengan menusuk ekor tikus

menggunakan gunting (digunting sedikit ujung ekor tikus).

c. Diteteskan darah yang keluar dari ekor tikus pada glukotes

(glukometer) sampai menutupi seluruh permukaan sensor pada

strip glukosa kemudian ditunggu selam 3 menit maka kadar

glukosa darah tikus akan terukur.

d. Diberi alkohol ekor tikus yang telah ditusuk jarum untuk

menghentikan darah dan mencegah infeksi.

4.3.12 Pengolahan Data

Hasil percobaan dihitung dan diolah secara statistik untuk

menentukan kadar glukosa darah awal antar kelompok yang terlebih

dahulu diuji homogenitasnya dan kenormalan distribusinya dengan

menggunakan uji Kalmigorof-Smirnov kemudian dilanjutkan

dengan uji analisis varians (ANOVA) satu arah kemudian uji LSD

untuk melihat adanya perbedaan kadar glukosa darah tikus putih

antar kelompok yang berarti.

50
 Persentase penurunan kadar glukosa darah dengan rumus

sebagai berikut :

% penurunan glukosa darah : (Go-Gt) x 100%

Go

Keterangan :

Go : Gula darah puasa sebelum diberikan bahan uji

Gt : Gula darah puasa setelah diberikan sediaan uji

51
 BAB V

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

5.1. HASIL PENELITIAN

5.1.1. Determinasi Bongkahan Gambir

Determinasi bongkahan gambir telah dilakukan di

laboratorium Herbarium LIPI Bogor, Jawa Barat. Hasil determinasi

telah menunjukkan bahwa bongkahan gambir yang menjadi sampel

adalah Uncaria gambir, Roxb atau lebih dikenal dengan sebutan

gambir dari familia Rubiaceae.

5.1.2. Karakterisrik Ekstrak

Tabel 4. Pengujian Karakteristik Ekstrak

Karakteristik Ekstrak Hasil Syarat

Warna : Coklat

Organoleptis Bau : Khas _

Bentuk : Bongkahan
gambir

(MMI ed. V, 1989; Standar Nasional Indonesia (SNI 01-3391-1994))

52
 5.1.3. Penapisan Fitokimia

Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang telah dilakukan

pada gambir (Uncaria gambir, Roxb) diperoleh beberapa golongan

senyawa kimia yang hasilnya dapat dilihat dibawah ini :

Tabel 5. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Gambir

Hasil Penapisan
Golongan Senyawa
Serbuk simplisia Ekstrak kental
Alkaloid + +
Flavonoid + +
Saponin + +
Steroid - -
Triterpenoid + +
Tanin + +
Kuinon - -
Minyak Atsiri + +
Kumarin - -

5.1.4. Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada Metode

Induksi Aloksan Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 6. Rata-rata Kadar Glukosa Darah Pada Metode Induksi

Aloksan
Rata-rata Kadar Glukosa Darah
Kelompok Glukosa
Hiperglikemia
Perlakuan Darah Hari ke-3 Hari ke-6 Hari ke-9
Awal
Normal

Kontrol Negatif 76 6,5 127,25 2,7 137 5,83 147,5 10,2 179,5 21,4
Kontrol Positif 91 6,3 141,25 4,8 116,75 5,6 111,25 5,6 84,5 11,2
Ekstrak 100mg/kgBB 103 6,8 145,5 5,6 117,5 8,2 108,5 3,3 92,75 6,0
Ekstrak 200 mg/kgBB 97,5 2,3 144,5 3,6 119 5,4 95 5,7 85 10,2
Ekstrak 400 mg/kgBB 102,75 5,3 154,75 7,5 133,25 3,9 122 8,2 111 12,9

53
 5.1.5. Hasil Rata-rata Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Metode Induksi Aloksan Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 7. Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada

Metode Induksi Aloksan
Kelompok % Penurunan
Perlakuan 3 hari 6 hari 9 hari
Kontrol Negatif -7,66 -15,91 -41,06
Kontrol Positif 17,34 21,23 40,17
Dosis Rendah 100 mg/kgBB 19,24 25,43 36,25
Dosis Sedang 200 mg/kgBB 17,65 34,26 41,17
Dosis Tinggi 400 mg/kgBB 13,89 21,16 28,27

5.1.6. Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada

Toleransi Glukosa Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 8. Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada Metode

Toleransi Glukosa
Rata-rata Penurunan
Waktu
Kontrol Negatif Kontrol Positif Ekstrak 200 mg/kgBB

0 151 10,7 147,3 9,7 135 6,9

30 menit 217,8 17,2 177,3 8,9 222,5 29,6

60 menit 209,5 10,9 127,8 6,6 143,1 12,6

90 menit 196,5 7,4 113 9,4 130 8,8

120 menit 182,7 6,1 97,2 13,5 115,5 7,09

150 menit 173,2 5,3 87,2 7,3 101,8 6,9

180 menit 169 8,9 82,3 13,4 90,8 7,4

54
 5.1.7. Hasil Rata-rata Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Toleransi Glukosa Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 9. Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Toleransi Glukosa
Kelompok Rata-rata % Penurunan

Perlakuan 30 60 90 120 150 180

Kontrol Negatif 30,67 3,81 9,78 16,11 20,47 22,4

Kontrol Positif 16,69 27,9 36,3 45,2 50,8 53,6

Ekstrak 200 mg/kgBB 39,32 35,68 41,57 48,08 54,24 59,19

55
5.2. PEMBAHASAN

Penelitian ini menggunakan ekstrak kental gambir (Uncaria gambir,

Roxb), bongkahan gambir diperoleh dari Departemen Pertanian 50 Kota

Sumatera Barat. Untuk memastikan kebenaran bongkahan dan

mengidentifikasi jenis maka dilakukan determinasi bongkahan dan hasilnya

menunjukkan bahwa bongkahan yang digunakan adalah Gambir (Uncaria

gambir, Roxb) dari famili Rubiaceae (Lampiran 1). Ekstrak kental gambir

diperoleh dari proses ekstraksi yang merupakan penarikan kandungan kimia

yang terdapat pada simplisia. Salah satu kandungan kimia yang terdapat

pada gambir (Uncaria gambir, Roxb) yaitu flavonoid diduga mampu

menrunkankan gula darah tubuh. Proses ekstraksi meliputi pembuatan

serbuk, pembasahan, penyarian, dan pemekatan. Pembuatan serbuk

dilakukan dengan cara gambir diblender sampai menjadi serbuk.

Pembasahan dan penyarian merupakan salah satu cara ekstraksi yaitu

maserasi. Maserasi adalah proses pengekstrakkan simplisia dengan

menggunakan pelarut beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada

temperatur ruangan (kamar), dan pengulangan penambahan pelarut setelah

dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya bertujuan agar dapat

menarik semua zat aktif yang terkandung. Proses maserasi ekstrak etanol

gambir dilakukan dengan cara merendam simplisia dalam pelarut selama

24 jam dan dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan

penyaringan maserat pertama dan seterusnya. Metode ini digunakan karena

merupakan metode yang sederhana, mudah dilakukan dan baik untuk

56
senyawa-senyawa yang tidak tahan panas. Sedangkan pemilihan pelarut

etanol 70% didasarkan karena pelarut ini bersifat lebih polar karena terdiri

atas komponen etanol dan air, dan senyawa yang terkandung dalam

simplisia dapat tersaring secara maksimal karena sebagian ada yang tertarik

dalam etanol dan sebagian dalam air. Kemudian dilakukan pemekatan

dengan alat Rotary vacum evaporator untuk memperoleh ekstrak kental

gambir. Dilakukan uji penapisan fitokimia untuk mengetahui kandungan

kimia dari gambir, hasil yang diperoleh adalah gambir memiliki kandungan

kimia flavonoid, tanin, triterpenoid, minyak atsiri, alkaloid, saponin dan

kuinon baik dalam serbuk simplisia maupun dalam ekstrak etanol gambir

(Tabel 5). Untuk memeriksa kualitas ekstrak yang digunakan dilakukan uji

mutu dan pemeriksaan karakteristik ekstrak yang meliputi pemeriksaan

susut pengeringan, kadar air dan kadar abu, hasil yang diperoleh adalah

ekstrak gambir yang digunakan memiliki kualitas yang baik karena hasilnya

memenuhi syarat yang tertera di materi medika jilid V dan SNI 01-3391-

1994 dan dapat digunakan untuk uji efek antidiabetes dengan menggunakan

dua metode yaitu metode induksi aloksan dan toleransi glukosa.

Penelitian ini menggunakan hewan percobaan berupa tikus putih

jantan galur Sprague Dawley (SD), alasan digunakannya tikus jantan karena

ia memiliki aktivitas hormonal yang lebih stabil dibandingkan dengan tikus

betina. Pemilihan penggunaan tikus karena sifat tikus tidak terlalu fotofobik

seperti mencit. Diaklimatisasi tikus selama 2 minggu sebelum digunakan

57
dengan tujuan agar tikus dapat beradaptasi dengan lingkungan barunya

seperti kandang, makanan, minuman, dan sekitarnya.

Pada proses aklimatisasi dan selama penelitian berlangsung, tikus selalu

ditimbang, diberi makan dan minum sesuai dengan takaran agar berat badan

bertambah tiap minggu. Setelah aklimatisasi tikus dikelompokkan, dan

dipuasakan terlebih dahulu untuk menentukan gula darah awal.

Digunakan dua metode pada penelitian ini yaitu metode induksi

aloksan dan metode uji toleransi glukosa oral. Pertama metode induksi

aloksan adalah induksi hewan percobaan dengan aloksan agar menjadi

diabetes, aloksan bekerja pada pankreas dengan cara merusak sel-sel pulau

langerhans sehingga pankreas menghasilkan sedikit insulin dan terjadi

hiperglikemia, metode ini digunakan pada uji efek hipoglikemik dengan

enam kelompok uji yang terdiri dari kontrol normal, kontrol negatif, kontrol

positif dengan bahan uji suspensi glibenklamid, dan kelompok perlakuan

dosis rendah 100 mg/kgBB, dosis sedang 200 mg/kgBB, dan dosis tinggi

400 mg/kgBB. Diinduksi masing-masing kelompok kecuali kontrol normal

dengan aloksan 100 mg/kgBB yang dilarutkan dalam NaCl 0,9% dan

diberikan secara intraperitoneal selama 6 hari. Hewan percobaan

hiperglikemia dapat dilihat dengan ciri-ciri seperti kadar glukosa tinggi,

berat badan tikus turun (Lampiran 8), polidipsi, polifagi, dan poliuri. Dan

dapat juga dilihat dari keadaan kandang yang lembab dan berbau tidak sedap

dibandingkan dengan kontrol normal. Setelah hewan percobaan mengalami

hiperglikemia kemudian diberikan bahan uji pembanding berupa

58
glibenklamid sebanyak 1,0278 mg/kgBB untuk kontrol positif dan bahan uji

berupa ekstrak kental gambir (Uncaria gambir, Roxb) dengan variasi dosis

rendah 100 mg/kgBB, dosis sedang 200 mg/kgBB, dan dosis tinggi 400

mg/kgBB. Pemberian bahan uji pembanding dan bahan uji dengan dosis

bervariasi sebanyak satu kali sehari selama 9 hari secara peroral

menggunakan sonde lambung. Lalu diukur glukosa darah sebelum dan

sesudah induksi aloksan dengan menggunakan alat glukosa test dengan cara

mengambil darah tikus yang sebelumnya telah dipuasakan selama 16 jam.

Hasil pengukuran kadar glukosa darah dicatat (Lampiran 9), kadar glukosa

darah yang diperoleh dari masing-masing kelompok dihitung dalam persen

(Tabel 7) agar diketahui berapa persen ekstrak gambir yang diberikan untuk

menurunkan gula darah dengan bertambahnya waktu pemberian ekstrak.

Kelompok tikus kontrol positif yang diberi Glibenklamid 1,0278 mg/kgBB,

menunjukkan penurunan persen yang stabil dengan bertambahnya hari

perlakuan, dari hari ke-3, hari ke-6 sampai hari ke-9. Kelompok tikus

kontrol negatif yang diberi Na CMC 0,5% secara oral menunjukkan

peningkatan kadar glukosa darah tiap harinya. Kelompok tikus dengan dosis

rendah 100 mg/kgBB dan dosis sedang 200 mg/kgBB, terjadi perubahan

persen yang stabil pada hari ke-3, hari ke-6 sampai hari ke-9. Dari hasil

penurunan kadar glukosa darah menunjukkan bahwa ketiga dosis tersebut

tidak memiliki nilai perbedaan bermakna, hal ini mungkin dikarenakan

variasi dosis tidak berbeda jauh. Hasil presentase penurunan kadar glukosa

darah setelah diberikan bahan uji hari ke-9 yaitu : dosis 100 mg/kgBB

59
sebesar 36,25%, 200 mg/kgBB sebesar 41,17%, dan 400 mg/kgBB sebesar

28,27% menunjukkan tiap dosis yang berbeda memiliki penurunan yang

hampir sama. Data yang diperoleh dianalisa secara statistik menggunakan

metode analisa varian (ANOVA) satu arah. Metode ini digunakan untuk

melihat kesamaan atau perbedaan rata-rata penurunan persentase kadar

glukosa darah pada kelompok perlakuan. Jika terdapat perbedaan maka

dilanjutkan uji normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov dan

homogenitasnya dengan metode Levene kemudian dilakukan uji LSD.

Untuk uji hipoglikemik metode induksi aloksan, dilakukan analisa awal

yaitu uji normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov untuk melihat

distribusi data kadar glukosa darah tikus pada hari ke-0 (sebelum perlakuan),

Hiperglikemia hari ke-6, hari ke-3, ke-6, dan ke-9 bahan uji (Lampiran 11)

menunjukkan semua kelompok tikus terdistribusi normal dan tidak berbeda

secara bermakna kecuali hari ke-9 (p 0,05). Kemudian dilanjutkan uji

homogenitas dengan metode Levene untuk melihat data kadar glukosa tikus

homogen atau tidak, hasil menunjukkan syarat normalitas dan

homogenitasnya telah terpenuhi (p 0,05), sedangkan data kadar glukosa

darah hari ke-9 dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis karena syarat

normalitas dan homogenitasnya belum terpenuhi. Apabila hasil pengujian

menunjukkan adanya perbedaan nilai secara bermakna maka dilanjutkan ke

uji BNT dengan metode LSD tujuannya untuk menentukan kelompok mana

yang memberikan nilai berbeda secara bermakna dengan kelompok lainnya.

Hasil tersebut menunjukkan pada hari ke-9 setelah pemberian ekstrak, kadar

60
glukosa darah antara dosis rendah, dosis sedang, dan dosis tinggi tidak

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal, kadar glukosa darah antara

dosis rendah dan sedang tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

positif. Sedangkan seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

Kedua uji toleransi glukosa, metode toleransi glukosa adalah induksi

hewan percobaan diabetes dengan glukosa yang diberikan secara oral,

glukosa dapat meningkatan kadar gula darah (hiperglikemia) dan disertai

glikosuria serta metabolisme lemak yang ikut berubah karena berkurangnya

ketahanan tubuh terhadap glukosa yang disebabkan oleh sekresi insulin

semakin berkurang. Pada uji toleransi glukosa ini menggunakan empat

kelompok tikus yaitu terdiri dari kontrol normal, kontrol negatif, kontrol

pembanding dengan bahan uji suspensi acarbose, dan kelompok perlakuan

dosis sedang ekstrak gambir 200 mg/kgBB. Untuk kelompok tikus kontrol

normal diinduksi dengan glukosa dan kelompok hewan percobaan lainnya

dibuat diabetes (hiperglikemia) kemudian dilihat efeknya setiap 30 menit

selama 180 menit dengan pengambilan sampel darah. Hal ini dilakukan

untuk mengetahui kemampuan tubuh mentoleransi pada pemberian larutan

glukosa sehingga dapat diketahui adanya pengaruh pemberian bahan uji

dengan melihat kurva toleransi glukosa.

Untuk kelompok tikus kontrol negatif diinduksi aloksan kemudian diinduksi

dengan larutan glukosa 10% dengan dosis 2 g/kgBB, diukur pada menit 30

terjadi peningkatan kadar glukosa darah yang sangat tinggi, pada menit ke-

61
60, 90, 120, 150, dan 180 mengalami penurunan secara perlahan karena

larutan glukosa telah disekresikan didalam tubuh tikus (Lampiran 12).

Tetapi penurunan kadar glukosa darah ini masih dalam keadaan diabetes.

Untuk kelompok tikus kontrol pembanding yang diberi acarbose dengan

dosis 5,139 mg/kgBB, dan kelompok dosis sedang 200 mg/kgBB pada menit

ke-30 mengalami peningkatan kadar glukosa darah kemudian pada menit ke-

60 sampai menit ke-180 mengalami penurunan kadar glukosa darah yang

stabil dan nyata (Lampiran 12). Hal ini menunjukkan kemampuan

pembanding dan bahan uji mampu mereduksi larutan glukosa sehingga

dapat mengalami penurunan hingga mencapai kadar glukosa darah menjadi

normal. Pada presentase penurunan kadar glukosa darah dari dosis sedang

200 mg/kgBB menit ke-60, 90, 120, 150, dan 180 adalah sebesar 35,68%,

41,57%, 48,08%, 54,24%, dan 59,19% sedangkan pada kontrol negatif

sebesar 3,81%, 9,78%, 16,11%, 20,47%, dan 22,4%. Berdasarkan uji

normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov menunjukkan bahwa

seluruh kelompok hewan uji terdistribusi normal kecuali kadar glukosa

darah menit ke-150 sedangkan uji homogenitas menunjukkan menit ke-30,

dan 60 tidak terdistribusi homogen maka dilanjutkan uji Kruskal Willis pada

menit 30 dan menit ke 60. Selanjutnya dilakukan uji BNT dengan metode

LSD (Lampiran 12). Pada menit ke-30 seluruh kelompok berbeda secara

bermakna dengan kontrol normal dan kontrol pembanding, kontrol normal

dan kontrol positif berbeda secara bermakna, sedangkan dosis sedang

tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

62
Pada menit ke-60 seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal, kontrol pembanding, dan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

Uji ANOVA pada menit ke-90 kontrol negatif dan dosis sedang berbeda

secara bermakna, sedangkan kontrol positif tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol normal. Kontrol negatif dan dosis sedang berbeda secara

bermakna sedangkan kontrol normal tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol positif. Seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-120 kontrol pembanding

dan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna, sedangkan kontrol negatif

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal. Kontrol negatif dan dosis

sedang berbeda secara bermakna, sedangkan kontrol normal tidak berbeda

secara bermakna dengan kontrol pembanding. Seluruh kelompok berbeda

secara bermakna dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-

150 kontrol negatif dan kontrol pembanding berbeda secara bermakna,

sedangkan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

normal. Seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan kontrol positif

dan kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-180 seluruh kelompok

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal. Kontrol normal dan

kontrol negatif berbeda secara bermakna, sedangkan dosis sedang tidak

berbeda secara bermakna pada kontrol pembanding. Seluruh kelompok

berbeda secara bermakna pada kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

63
 BAB V

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

5.1. HASIL PENELITIAN

5.1.1. Determinasi Bongkahan Gambir

Determinasi bongkahan gambir telah dilakukan di

laboratorium Herbarium LIPI Bogor, Jawa Barat. Hasil determinasi

telah menunjukkan bahwa bongkahan gambir yang menjadi sampel

adalah Uncaria gambir, Roxb atau lebih dikenal dengan sebutan

gambir dari familia Rubiaceae.

5.1.2. Karakterisrik Ekstrak

Tabel 4. Pengujian Karakteristik Ekstrak

Karakteristik Ekstrak Hasil Syarat

Warna : Coklat

Organoleptis Bau : Khas _

Bentuk : Bongkahan
gambir

(MMI ed. V, 1989; Standar Nasional Indonesia (SNI 01-3391-1994))

52
 5.1.3. Penapisan Fitokimia

Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang telah dilakukan

pada gambir (Uncaria gambir, Roxb) diperoleh beberapa golongan

senyawa kimia yang hasilnya dapat dilihat dibawah ini :

Tabel 5. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Gambir

Hasil Penapisan
Golongan Senyawa
Serbuk simplisia Ekstrak kental
Alkaloid + +
Flavonoid + +
Saponin + +
Steroid - -
Triterpenoid + +
Tanin + +
Kuinon - -
Minyak Atsiri + +
Kumarin - -

5.1.4. Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada Metode

Induksi Aloksan Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 6. Rata-rata Kadar Glukosa Darah Pada Metode Induksi

Aloksan
Rata-rata Kadar Glukosa Darah
Kelompok Glukosa
Hiperglikemia
Perlakuan Darah Hari ke-3 Hari ke-6 Hari ke-9
Awal
Normal

Kontrol Negatif 76 6,5 127,25 2,7 137 5,83 147,5 10,2 179,5 21,4
Kontrol Positif 91 6,3 141,25 4,8 116,75 5,6 111,25 5,6 84,5 11,2
Ekstrak 100mg/kgBB 103 6,8 145,5 5,6 117,5 8,2 108,5 3,3 92,75 6,0
Ekstrak 200 mg/kgBB 97,5 2,3 144,5 3,6 119 5,4 95 5,7 85 10,2
Ekstrak 400 mg/kgBB 102,75 5,3 154,75 7,5 133,25 3,9 122 8,2 111 12,9

53
 5.1.5. Hasil Rata-rata Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Metode Induksi Aloksan Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 7. Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada

Metode Induksi Aloksan
Kelompok % Penurunan
Perlakuan 3 hari 6 hari 9 hari
Kontrol Negatif -7,66 -15,91 -41,06
Kontrol Positif 17,34 21,23 40,17
Dosis Rendah 100 mg/kgBB 19,24 25,43 36,25
Dosis Sedang 200 mg/kgBB 17,65 34,26 41,17
Dosis Tinggi 400 mg/kgBB 13,89 21,16 28,27

5.1.6. Hasil Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada

Toleransi Glukosa Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 8. Rata-rata Penurunan Kadar Glukosa Darah Pada Metode

Toleransi Glukosa
Rata-rata Penurunan
Waktu
Kontrol Negatif Kontrol Positif Ekstrak 200 mg/kgBB

0 151 10,7 147,3 9,7 135 6,9

30 menit 217,8 17,2 177,3 8,9 222,5 29,6

60 menit 209,5 10,9 127,8 6,6 143,1 12,6

90 menit 196,5 7,4 113 9,4 130 8,8

120 menit 182,7 6,1 97,2 13,5 115,5 7,09

150 menit 173,2 5,3 87,2 7,3 101,8 6,9

180 menit 169 8,9 82,3 13,4 90,8 7,4

54
 5.1.7. Hasil Rata-rata Persentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Toleransi Glukosa Ekstrak Etanol Gambir yaitu :

Tabel 9. Rata-rata Presentase Penurunan Kadar Glukosa Darah

Pada Toleransi Glukosa
Kelompok Rata-rata % Penurunan

Perlakuan 30 60 90 120 150 180

Kontrol Negatif 30,67 3,81 9,78 16,11 20,47 22,4

Kontrol Positif 16,69 27,9 36,3 45,2 50,8 53,6

Ekstrak 200 mg/kgBB 39,32 35,68 41,57 48,08 54,24 59,19

55
5.2. PEMBAHASAN

Penelitian ini menggunakan ekstrak kental gambir (Uncaria gambir,

Roxb), bongkahan gambir diperoleh dari Departemen Pertanian 50 Kota

Sumatera Barat. Untuk memastikan kebenaran bongkahan dan

mengidentifikasi jenis maka dilakukan determinasi bongkahan dan hasilnya

menunjukkan bahwa bongkahan yang digunakan adalah Gambir (Uncaria

gambir, Roxb) dari famili Rubiaceae (Lampiran 1). Ekstrak kental gambir

diperoleh dari proses ekstraksi yang merupakan penarikan kandungan kimia

yang terdapat pada simplisia. Salah satu kandungan kimia yang terdapat

pada gambir (Uncaria gambir, Roxb) yaitu flavonoid diduga mampu

menrunkankan gula darah tubuh. Proses ekstraksi meliputi pembuatan

serbuk, pembasahan, penyarian, dan pemekatan. Pembuatan serbuk

dilakukan dengan cara gambir diblender sampai menjadi serbuk.

Pembasahan dan penyarian merupakan salah satu cara ekstraksi yaitu

maserasi. Maserasi adalah proses pengekstrakkan simplisia dengan

menggunakan pelarut beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada

temperatur ruangan (kamar), dan pengulangan penambahan pelarut setelah

dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya bertujuan agar dapat

menarik semua zat aktif yang terkandung. Proses maserasi ekstrak etanol

gambir dilakukan dengan cara merendam simplisia dalam pelarut selama

24 jam dan dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan

penyaringan maserat pertama dan seterusnya. Metode ini digunakan karena

merupakan metode yang sederhana, mudah dilakukan dan baik untuk

56
senyawa-senyawa yang tidak tahan panas. Sedangkan pemilihan pelarut

etanol 70% didasarkan karena pelarut ini bersifat lebih polar karena terdiri

atas komponen etanol dan air, dan senyawa yang terkandung dalam

simplisia dapat tersaring secara maksimal karena sebagian ada yang tertarik

dalam etanol dan sebagian dalam air. Kemudian dilakukan pemekatan

dengan alat Rotary vacum evaporator untuk memperoleh ekstrak kental

gambir. Dilakukan uji penapisan fitokimia untuk mengetahui kandungan

kimia dari gambir, hasil yang diperoleh adalah gambir memiliki kandungan

kimia flavonoid, tanin, triterpenoid, minyak atsiri, alkaloid, saponin dan

kuinon baik dalam serbuk simplisia maupun dalam ekstrak etanol gambir

(Tabel 5). Untuk memeriksa kualitas ekstrak yang digunakan dilakukan uji

mutu dan pemeriksaan karakteristik ekstrak yang meliputi pemeriksaan

susut pengeringan, kadar air dan kadar abu, hasil yang diperoleh adalah

ekstrak gambir yang digunakan memiliki kualitas yang baik karena hasilnya

memenuhi syarat yang tertera di materi medika jilid V dan SNI 01-3391-

1994 dan dapat digunakan untuk uji efek antidiabetes dengan menggunakan

dua metode yaitu metode induksi aloksan dan toleransi glukosa.

Penelitian ini menggunakan hewan percobaan berupa tikus putih

jantan galur Sprague Dawley (SD), alasan digunakannya tikus jantan karena

ia memiliki aktivitas hormonal yang lebih stabil dibandingkan dengan tikus

betina. Pemilihan penggunaan tikus karena sifat tikus tidak terlalu fotofobik

seperti mencit. Diaklimatisasi tikus selama 2 minggu sebelum digunakan

57
dengan tujuan agar tikus dapat beradaptasi dengan lingkungan barunya

seperti kandang, makanan, minuman, dan sekitarnya.

Pada proses aklimatisasi dan selama penelitian berlangsung, tikus selalu

ditimbang, diberi makan dan minum sesuai dengan takaran agar berat badan

bertambah tiap minggu. Setelah aklimatisasi tikus dikelompokkan, dan

dipuasakan terlebih dahulu untuk menentukan gula darah awal.

Digunakan dua metode pada penelitian ini yaitu metode induksi

aloksan dan metode uji toleransi glukosa oral. Pertama metode induksi

aloksan adalah induksi hewan percobaan dengan aloksan agar menjadi

diabetes, aloksan bekerja pada pankreas dengan cara merusak sel-sel pulau

langerhans sehingga pankreas menghasilkan sedikit insulin dan terjadi

hiperglikemia, metode ini digunakan pada uji efek hipoglikemik dengan

enam kelompok uji yang terdiri dari kontrol normal, kontrol negatif, kontrol

positif dengan bahan uji suspensi glibenklamid, dan kelompok perlakuan

dosis rendah 100 mg/kgBB, dosis sedang 200 mg/kgBB, dan dosis tinggi

400 mg/kgBB. Diinduksi masing-masing kelompok kecuali kontrol normal

dengan aloksan 100 mg/kgBB yang dilarutkan dalam NaCl 0,9% dan

diberikan secara intraperitoneal selama 6 hari. Hewan percobaan

hiperglikemia dapat dilihat dengan ciri-ciri seperti kadar glukosa tinggi,

berat badan tikus turun (Lampiran 8), polidipsi, polifagi, dan poliuri. Dan

dapat juga dilihat dari keadaan kandang yang lembab dan berbau tidak sedap

dibandingkan dengan kontrol normal. Setelah hewan percobaan mengalami

hiperglikemia kemudian diberikan bahan uji pembanding berupa

58
glibenklamid sebanyak 1,0278 mg/kgBB untuk kontrol positif dan bahan uji

berupa ekstrak kental gambir (Uncaria gambir, Roxb) dengan variasi dosis

rendah 100 mg/kgBB, dosis sedang 200 mg/kgBB, dan dosis tinggi 400

mg/kgBB. Pemberian bahan uji pembanding dan bahan uji dengan dosis

bervariasi sebanyak satu kali sehari selama 9 hari secara peroral

menggunakan sonde lambung. Lalu diukur glukosa darah sebelum dan

sesudah induksi aloksan dengan menggunakan alat glukosa test dengan cara

mengambil darah tikus yang sebelumnya telah dipuasakan selama 16 jam.

Hasil pengukuran kadar glukosa darah dicatat (Lampiran 9), kadar glukosa

darah yang diperoleh dari masing-masing kelompok dihitung dalam persen

(Tabel 7) agar diketahui berapa persen ekstrak gambir yang diberikan untuk

menurunkan gula darah dengan bertambahnya waktu pemberian ekstrak.

Kelompok tikus kontrol positif yang diberi Glibenklamid 1,0278 mg/kgBB,

menunjukkan penurunan persen yang stabil dengan bertambahnya hari

perlakuan, dari hari ke-3, hari ke-6 sampai hari ke-9. Kelompok tikus

kontrol negatif yang diberi Na CMC 0,5% secara oral menunjukkan

peningkatan kadar glukosa darah tiap harinya. Kelompok tikus dengan dosis

rendah 100 mg/kgBB dan dosis sedang 200 mg/kgBB, terjadi perubahan

persen yang stabil pada hari ke-3, hari ke-6 sampai hari ke-9. Dari hasil

penurunan kadar glukosa darah menunjukkan bahwa ketiga dosis tersebut

tidak memiliki nilai perbedaan bermakna, hal ini mungkin dikarenakan

variasi dosis tidak berbeda jauh. Hasil presentase penurunan kadar glukosa

darah setelah diberikan bahan uji hari ke-9 yaitu : dosis 100 mg/kgBB

59
sebesar 36,25%, 200 mg/kgBB sebesar 41,17%, dan 400 mg/kgBB sebesar

28,27% menunjukkan tiap dosis yang berbeda memiliki penurunan yang

hampir sama. Data yang diperoleh dianalisa secara statistik menggunakan

metode analisa varian (ANOVA) satu arah. Metode ini digunakan untuk

melihat kesamaan atau perbedaan rata-rata penurunan persentase kadar

glukosa darah pada kelompok perlakuan. Jika terdapat perbedaan maka

dilanjutkan uji normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov dan

homogenitasnya dengan metode Levene kemudian dilakukan uji LSD.

Untuk uji hipoglikemik metode induksi aloksan, dilakukan analisa awal

yaitu uji normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov untuk melihat

distribusi data kadar glukosa darah tikus pada hari ke-0 (sebelum perlakuan),

Hiperglikemia hari ke-6, hari ke-3, ke-6, dan ke-9 bahan uji (Lampiran 11)

menunjukkan semua kelompok tikus terdistribusi normal dan tidak berbeda

secara bermakna kecuali hari ke-9 (p 0,05). Kemudian dilanjutkan uji

homogenitas dengan metode Levene untuk melihat data kadar glukosa tikus

homogen atau tidak, hasil menunjukkan syarat normalitas dan

homogenitasnya telah terpenuhi (p 0,05), sedangkan data kadar glukosa

darah hari ke-9 dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis karena syarat

normalitas dan homogenitasnya belum terpenuhi. Apabila hasil pengujian

menunjukkan adanya perbedaan nilai secara bermakna maka dilanjutkan ke

uji BNT dengan metode LSD tujuannya untuk menentukan kelompok mana

yang memberikan nilai berbeda secara bermakna dengan kelompok lainnya.

Hasil tersebut menunjukkan pada hari ke-9 setelah pemberian ekstrak, kadar

60
glukosa darah antara dosis rendah, dosis sedang, dan dosis tinggi tidak

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal, kadar glukosa darah antara

dosis rendah dan sedang tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

positif. Sedangkan seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

Kedua uji toleransi glukosa, metode toleransi glukosa adalah induksi

hewan percobaan diabetes dengan glukosa yang diberikan secara oral,

glukosa dapat meningkatan kadar gula darah (hiperglikemia) dan disertai

glikosuria serta metabolisme lemak yang ikut berubah karena berkurangnya

ketahanan tubuh terhadap glukosa yang disebabkan oleh sekresi insulin

semakin berkurang. Pada uji toleransi glukosa ini menggunakan empat

kelompok tikus yaitu terdiri dari kontrol normal, kontrol negatif, kontrol

pembanding dengan bahan uji suspensi acarbose, dan kelompok perlakuan

dosis sedang ekstrak gambir 200 mg/kgBB. Untuk kelompok tikus kontrol

normal diinduksi dengan glukosa dan kelompok hewan percobaan lainnya

dibuat diabetes (hiperglikemia) kemudian dilihat efeknya setiap 30 menit

selama 180 menit dengan pengambilan sampel darah. Hal ini dilakukan

untuk mengetahui kemampuan tubuh mentoleransi pada pemberian larutan

glukosa sehingga dapat diketahui adanya pengaruh pemberian bahan uji

dengan melihat kurva toleransi glukosa.

Untuk kelompok tikus kontrol negatif diinduksi aloksan kemudian diinduksi

dengan larutan glukosa 10% dengan dosis 2 g/kgBB, diukur pada menit 30

terjadi peningkatan kadar glukosa darah yang sangat tinggi, pada menit ke-

61
60, 90, 120, 150, dan 180 mengalami penurunan secara perlahan karena

larutan glukosa telah disekresikan didalam tubuh tikus (Lampiran 12).

Tetapi penurunan kadar glukosa darah ini masih dalam keadaan diabetes.

Untuk kelompok tikus kontrol pembanding yang diberi acarbose dengan

dosis 5,139 mg/kgBB, dan kelompok dosis sedang 200 mg/kgBB pada menit

ke-30 mengalami peningkatan kadar glukosa darah kemudian pada menit ke-

60 sampai menit ke-180 mengalami penurunan kadar glukosa darah yang

stabil dan nyata (Lampiran 12). Hal ini menunjukkan kemampuan

pembanding dan bahan uji mampu mereduksi larutan glukosa sehingga

dapat mengalami penurunan hingga mencapai kadar glukosa darah menjadi

normal. Pada presentase penurunan kadar glukosa darah dari dosis sedang

200 mg/kgBB menit ke-60, 90, 120, 150, dan 180 adalah sebesar 35,68%,

41,57%, 48,08%, 54,24%, dan 59,19% sedangkan pada kontrol negatif

sebesar 3,81%, 9,78%, 16,11%, 20,47%, dan 22,4%. Berdasarkan uji

normalitas dengan metode Kalmogorof-Smirnov menunjukkan bahwa

seluruh kelompok hewan uji terdistribusi normal kecuali kadar glukosa

darah menit ke-150 sedangkan uji homogenitas menunjukkan menit ke-30,

dan 60 tidak terdistribusi homogen maka dilanjutkan uji Kruskal Willis pada

menit 30 dan menit ke 60. Selanjutnya dilakukan uji BNT dengan metode

LSD (Lampiran 12). Pada menit ke-30 seluruh kelompok berbeda secara

bermakna dengan kontrol normal dan kontrol pembanding, kontrol normal

dan kontrol positif berbeda secara bermakna, sedangkan dosis sedang

tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

62
Pada menit ke-60 seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal, kontrol pembanding, dan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

Uji ANOVA pada menit ke-90 kontrol negatif dan dosis sedang berbeda

secara bermakna, sedangkan kontrol positif tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol normal. Kontrol negatif dan dosis sedang berbeda secara

bermakna sedangkan kontrol normal tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol positif. Seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-120 kontrol pembanding

dan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna, sedangkan kontrol negatif

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal. Kontrol negatif dan dosis

sedang berbeda secara bermakna, sedangkan kontrol normal tidak berbeda

secara bermakna dengan kontrol pembanding. Seluruh kelompok berbeda

secara bermakna dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-

150 kontrol negatif dan kontrol pembanding berbeda secara bermakna,

sedangkan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

normal. Seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan kontrol positif

dan kontrol negatif pada taraf uji 0,05. Pada menit ke-180 seluruh kelompok

berbeda secara bermakna dengan kontrol normal. Kontrol normal dan

kontrol negatif berbeda secara bermakna, sedangkan dosis sedang tidak

berbeda secara bermakna pada kontrol pembanding. Seluruh kelompok

berbeda secara bermakna pada kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

63
 DAFTAR PUSTAKA

Andyana, I Ketut dkk. 2004. Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Buah
Mengkudu (Morinda Citrifolia L.). Diakses tanggal 15 Maret 2009, pukul
09.07 WIB.

Arambewela L.S.R., Arawwawala L.D.A.M., Ratnasooriya W.D. 2005.

Antidiabetic activities of aqueous and ethanolic extracts of Piper betle
leaves in rats. Journal of ethnopharmacology. hal 239-240.
www.sciencedirect.com. Diakses tanggal 19 Maret 2009, pukul 13.45.

Balitro. 2004. Ekspos Teknologi Gambir, Kayu Manis dan Atsiri (dukungan
teknologi gambir, kayu manis dan atsiri dalam menunjang agribisnis
komoditas perkebunan). Pusat penelitian perkembangan perkebunan.
Bogor. Hal 15-17.

Dalimartha, Setiawan. 2004. Ramuan Tradisisonal Untuk Pengobatan Diabetes

Mellitus. Depok : Penebar Swadaya. Hal : 3.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1993. Metode Penapisan

Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik Pengembangan
dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. Jakarta. Hal 15-17.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1996. Materia Medika Indonesia.

Jilid. VI. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta. Hal
118-123, 334.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2000. Parameter Standar Umum

Ekstrak Tumbuhan Obat. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan
Makanan. Jakarta. Hal 5, 7-12.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2006. Pharmaceutical Care Untuk

Penyakit Diabetes Mellitus. Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan
Klinik. Jakarta. Hal 4-12.

66
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1993. Farmakope Indonesia. Edisi
IV. Jakarta.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2006. Farmakope Indonesia. Edisi

III. Jakarta. Hal 9.

Endo Nugroho, Agung. 2006. Hewan Percobaan Diabetes Mellitus : Patologi Dan
Mekanisme Aksi Diabetogenik (Adobe Reader). Fakultas Farmasi
Universitas Gajah Mada. Diakses Tanggal 27 April 2009. Jam 12.45 pm.

Gunawan, Didik dkk. 2004. Ilmu Obat Alam Farmakognosi Jilid I. Penebar
Swadaya. Jakarta. Hal : 9.

Hariana, H Arief. 2004. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Seri I. Penebar

Swadaya. Jakarta. Hal 1-2.

Katzung, B.G. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik. Buku 2, Edisi 8,

diterjemahkan oleh Sjabana, D., Isbandiati, E., Basori, A., Soedjak, M.,
Uno, I., Ramadhani, dan Zakaria, S., Salemba Medika, Jakarta. Hal : 665.

Maulana, Mirzan. 2008. Mengenal Diabetes Mellitus, Panduan Praktis

Menangani Penyakit Kencing Manis. Yogyakarta. Katahati. Hal : 33-34,
44-46.

Nurmeilis., Sunaryo., Hadi., Dewi, Komala. 2007. Uji Efek Antidiabetes Ekstrak
Etanol Herba Meniran (Phyllantus niruri Linn) pada tikus diabetes yang
diinduksi aloksan. Fakta Vol.3 No.3. Hal : 111-113.

Santoso, Singgih. 2004. SPSS Versi 10 Mengolah Data Statistik Secara

Profesional. Jakarta. Hal 261-281, 389-393, 452-459.

Sri, Endang., Djatmika., Sri Retno. 2007. Pengaruh pemberian infusa umbi
gadung (Dioscorea hispida Dennst) terhadap penurunan kadar glukosa
darah tikus putih jantan diabetes yang diinduksi aloksan. Majalah Farmasi
Indonesia, Vol.18 No.1. Hal : 30.

67
Studiawan, Herra dan Hadi Santosa, Mulja. 2005. Uji Aktivitas Penurun Kadar
Glukosa Darah Ekstrak Daun Eugenia polyantha pada Mencit yang
Diinduksi Aloksan. Media Kedokteran Hewan. Diakses tanggal 15 Maret
2009, pukul 09.24 WIB.

Suharmiati. 2003. Pengujian Bioaktivitas Anti Diabetes Mellitus Tumbuhan Obat.

Cermin Dunia Kedokteran No.14. Hal 9-13.

Szkudelski, T. 2001. The Mechanism Of Alloxan And Streptozotocin Action In

Cells Of The Rat Pancreas, Physiology Research, 50: 536-54.

Tjay, Tan Hoan dan Rhardja, Kirana. 2002. Obat-obat penting Edisi Kelima.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Departemen
Kesehatan RI. PT. Elex Media Komputindo. Jakarta. Hal 693-713.

Widowati, Lucie., Zulkarnain, B., Saroni. 1997. Tanaman Obat untuk Diabetes
Mellitus. Cermin dunia kedokteran, No.116. Hal : 54-55.

Windolz, M., Budavari, S., Blumerti, RF., Otterbein, ES., editor. 1983. The Merck
Index an Encyclopedia of Chemicals, Drug and Biologicals. 8th ed. USA.
Pulished by Merck & Co, Inc. Hal 43-44.

Yulinah, Elin., Sukrasno dan Anom Fitri, Muna. 2001. Aktivitas Antidiabetika
Ekstrak Etanol Herba Sambiloto (Andrographis paniculata Nees
(Acanthaceae)). JMS Vol. 6 No. 1. Hal 13-20.

68

69
LAMPIRAN
 70

Lampiran 1. Gambar Gambir (Uncaria gambir, Roxb)

Gambar 2. Bongkahan gambir Gambar 3. Ekstrak kental gambir

Lampiran 2. Alat Penelitian

Gambar 4. Timbangan Gambar 5. Neraca analitik

 71

Gambar 6. Rotary vacum evaporator Gambar 7. Eksikator

Gambar 8. Oven Gambar 9. Furnace

Gambar 10. Glukosa test Gambar 11. Suntikan

 72

Lampiran 3. Perlakuan Hewan Uji

Gambar 12. Tikus putih jantan

Gambar 13. Kandang tikus

Gambar 14. Penyuntikan secara Gambar 15. Pelaksanaan sonde oral hewan
intraperitoneal uji
 73

Lampiran 4. Hasil Determinasi Gambir (Uncaria gambir, Roxb)

 74

Lampiran 5. Sertifikat Pengujian Glibenklamida

 75

Lampiran 6. Tabel 10. Obat-obat diabetes

Rekomendasi Dosis awal Perbandingan

Dosis
Nama Generik Dosis ( mg/hari ) Dosis Durasi
Maksimum
(Y: yes, N: No) (mg) Dewasa Tua Terapeutik (jam)
(mg/hari)
(mg)
Sulfonilurea
Acetohexamide (Y) 250;500 250 125-250 500 1500 12-18
Klorpropamide (Y) 250 250 100 250 500 24-72
Tolazamide (Y) 100;250;500 100-250 100 250 1000 12-24
Tolbutamide (Y) 250;500 1000-2000 500-1000 1000 3000 6-12
Glipizide (Y) 5;10 5 2,5-5 5 40 20
Glyburide (Y) 1,25;2,5;5 5 1,25-2,5 5 20 24
Glyburide, 1,5;3;6 3 1,5-3 3 12 24
Micronized 1;2;4 1-2 0,5-1 2 8 24
Glimepiride (N)
Short acting insulin
secretagogues
Nateglinide (N) 60;120 120 dengan 120 dengan NA 120 mg 3 dd 4
makan makan
Repaglinide (N) 0,5;1;2 0,5-1 dengan 0,5-1dengan NA 16 4
makan makan
Biguanides
Metformin (Y) 500;850;1000 500 mg 2 dd Perhatikan NA 2550 24
fungsi renal
Metformin extended 500;750 500-1000 mg Perhatikan NA 2550 24
release (N) dengan makan fungsi renal
Thiazolidinedione
Pioglitazone (N) 15;30;45 15 15 NA 45 24
Rosiglitazone (N) 2;4;8 2-4 2 NA 8 mg/hari atau 24
4 mg 2 dd
-Glucosidase
inhibitors
Acarbose (N) 25;50;100 25 mg 1-3 25 mg 1-3 NA 25-100 mg 1-3
kali/hari kali / hari 3 dd
Miglitol (N) 25;50;100 25 mg 1-3 25 mg 1-3 NA 25-100 mg 1-3
kali/hari kali / hari 3 dd

Combination
products
Glyburide/ 1,25/250 2,5-5/500 2 dd 1,25/250 NA 20 pada Kombinasi
Metformin (Y) 2,5/500 2 dd; glyburide, 2000 pengobatan
5/500 Perhatikan pada metformin
fungsi ginjal 20 pada
Glipizide/ 2,5/250 2,5-5/500 2 dd 2,5/250; NA glyburide, 2000 Kombinasi
Metformin (N) 2,5/500 Perhatikan pada metformin pengobatan
5/500 fungsi renal 8 pada
rosiglitazon;
Rosiglitazon/ 1/500 1-2/500 2 dd 1/500 2 dd NA 2000 pada Kombinasi
Metformin (N) 2/500 metformin pengobatan
4/500
 76

Gambar 16. Kerangka Kerja (Pembuatan Ekstrak)

Gambir Determinasi
(sampel) gambir

Blender
Uji penapisan fitokimia
1. Uji Alkaloid 5. Uji Minyak Atsiri
Serbuk
halus 2. Uji Flavonoid 6. Uji Saponin
3. Uji Kuinon 7. Uji Steroid & Terpenoid
4. Uji Kumarin 8. Uji Tanin

Maserasi
etanol 70%

Ampas Filtrat 1

Maserasi
ulang

Filtrat 2
Evaporasi

Ekstrak
kental

Ekstrak Uji 100, 200, 400 mg/KgBB

Uji efek hipoglikemik Uji toleransi glukosa

 77

Gambar 17. Kerangka Kerja (Uji Efek Hipoglikemik Pada Tikus Diabetes
Aloksan)
Masing-masing tikus
dipuasakan selama 16 jam

Kelompok Kontrol Kontrol Kelompok I Kelompok Kelompok

Normal Negatif Positif II III

Pengukuran kadar glukosa darah

Tanpa Induksi Induksi Induksi Induksi Induksi

perlakuan Aloksan Aloksan Aloksan Aloksan Aloksan

Pengukuran kadar glukosa darah hiperglikemia awal

Enam hari

Tanpa Tanpa Uji Uji dosis Uji dosis Uji dosis

perlakuan perlakuan Glibenklamid rendah sedang tinggi

Hari Ke-3, 6, 9*

Pengolahan data ANOVA satu arah

Keterangan :
* pengukuran kadar glukosa darah
 78

Gambar 18. Kerangka Kerja (Uji Toleransi Glukosa Pada Tikus Diabetes
Aloksan)
Masing-masing tikus
dipuasakan selama 16 jam

Kontrol Kontrol Kontrol Kelompok I

Normal Negatif Positif

Pengukuran kadar glukosa darah awal

Tanpa perlakuan Induksi aloksan

Pengukuran kadar glukosa darah hiperglikemia awal

Tanpa Kontrol Acarbose Uji dosis ekstrak

perlakuan Negatif 5,139 mg/kgBB 200 mg/kgBB

Pemberian larutan glukosa 10%

Pengukuran kadar glukosa darah pada menit ke 30, 60, 90, 120, 150 dan 180

Pengolahan data ANOVA satu arah

 79

Lampiran 7. Rumus Perhitungan Dosis Hewan (Reagan-Shaw, Shannon,. Nihal,

Minakashi and Ahmad, Nihal. 2008)

Tabel 11. Conversion of animal doses to HED based on BSA

Species Weight (kg) BSA (m2) Km factor

Human
Adult 60 1.6 37

Child 20 0.8 25

Baboon 12 0.6 20

Dog 10 0.5 20

Monkey 3 0.24 12

Rabbit 1.8 0.15 12

Guinea pig 0.4 0.05 8

Rat 0.15 0.025 6

Hamster 0.08 0.02 5

Mouse 0.02 0.007 3

 80

Lampiran 8. Perhitungan Dosis (dan literaturnya).

1. Aloksan 100 mg/kgBB

Jurnal : Nurmeilis., Sunaryo., Hadi., Dewi, Komala. 2007. Uji Efek

Antidiabetes Ekstrak Etanol Herba Meniran (Phyllantus niruri Linn)

pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan. Fakta Vol.3 No.3. Hal :

111-113.

2. Glibenklamid 10 mg

Dosis oral umum untuk menurunkan gula darah antara 5 15 mg.

Jurnal : Katzung, B.G. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik. Buku 2, Edisi

8, diterjemahkan oleh Sjabana, D., Isbandiati, E., Basori, A.,

Soedjak, M., Uno, I., Ramadhani, dan Zakaria, S., Salemba Medika,

Jakarta. Hal : 665.

Penetapan dosis Glibenklamid 10 mg (berdasarkan jurnal, vao glibenklamid

yang umum digunakan untuk penelitian 1 mg/kgBB).

Rumus : HED (mg/kg) = Animal dose (mg/kg) x Animal Km

Human Km

10 mg / 60 kg = a x 6
37
10 x 37 = 6a
60
a = 1.0278 mg/kgBB.

3. Ekstrak Gambir, dosis rendah 100 mg/kgBB, sedang 200 mg/kgBB, dan tinggi

400 mg/kgBB.

Jurnal : Arambewela L.S.R., Arawwawala L.D.A.M., Ratnasooriya W.D.

2005. Antidiabetic activities of aqueous and ethanolic extracts of

 81

Piper betle leaves in rats. Journal of ethnopharmacology. hal 239-

240. www.sciencedirect.com.

4. Glukosa 10% dosis 2 g/kgBB

Dosis yang biasa digunakan pada penelitian adalah 10% dengan dosis 2

g/kgBB.

Jurnal : Yulinah, Elin., Sukrasno dan Anom Fitri, Muna. 2001. Aktivitas

Antidiabetika Ekstrak Etanol Herba Sambiloto (Andrographis

paniculata Nees (Acanthaceae)). JMS Vol. 6 No. 1. Hal 13-20.

Penetapan dosis Glukosa 10% dosis 2 g/kgBB (berdasarkan jurnal, vao

glukosa yang umum digunakan pada penelitian 1 5 ml).

Contoh : BB tikus 200 g.

Rumus : VAO = Dosis x BB tikus 2 g x 200 g

1000 g 1000 = 0.4 g
100 mg/kgBB 100 mg/kgBB
= 400 mg
100 mg/ml
= 4 ml.

5. Acarbose 50 mg

Dosis yang biasa digunakan manusia adalah 50 mg

Penetapan dosis Acarbose 50 mg.

Rumus : HED (mg/kg) = Animal dose (mg/kg) x Animal Km

Human Km

50 mg / 60 kg = a x 6
37
50 x 37 = 6a
60
a = 5.139 mg/kgBB.
 82

Lampiran 9. Perhitungan larutan uji fraksi etanol gambir.

1. Dosis 100 mg/kgBB

CMC Na 1 g ditaburkan diatas air panas sejumlah 20 kalinya, biarkan sampai

mengembang lalu gerus homogen, kemudian ditambahkan ekstrak 2000
mg/kgBB, ditambahkan aquadest hingga 100 ml, jadi konsentrasi sediaan 20
mg/ml.
Rumus : VAO = BB x Dosis
[ ]
= 0.2 g x 100 mg/kgBB
20 mg/ml
= 1 ml.

2. Dosis 200 mg/kgBB

CMC Na 1 g ditaburkan diatas air panas sejumlah 20 kalinya, biarkan sampai

mengembang lalu gerus homogen, kemudian ditambahkan ekstrak 4000
mg/kgBB, ditambahkan aquadest hingga 100 ml, jadi konsentrasi sediaan 40
mg/ml.
Rumus : VAO = BB x Dosis
[ ]
= 0.2 g x 200 mg/kgBB
40 mg/ml
= 1 ml.

3. Dosis 400 mg/kgBB

CMC Na 1 g ditaburkan diatas air panas sejumlah 20 kalinya, biarkan sampai

mengembang lalu gerus homogen, kemudian ditambahkan ekstrak 8000
mg/kgBB, ditambahkan aquadest hingga 100 ml, jadi konsentrasi sediaan 80
mg/ml.
Rumus : VAO = BB x Dosis
[ ]
= 0.2 g x 400 mg/kgBB
80 mg/ml
= 1 ml.
 83

Lampiran 10. Berat Badan Tikus Selama Perlakuan Pada Metode Induksi

Aloksan

Tabel 12. Berat Badan Tikus

Berat Badan (Kg)

Kelompok Hiperglikemia Hari Hari Hari Hari Hari Hari Hari Hari Hari
0 (Hari ke-6) ke-1 ke-2 ke-3 ke-4 ke-5 ke-6 ke-7 ke-8 ke-9
167 162 160 158 157 155 152 150 149 146 145
Kontrol 158 155 151 150 146 145 143 140 142 143 140
Negatif 160 156 153 149 145 143 140 138 139 141 134
159 152 148 147 144 142 139 137 140 136 137
147 143 139 141 143 145 147 150 149 152 154
Kontrol 143 140 137 139 142 143 148 151 147 155 154
Positif 149 145 142 144 146 147 149 152 148 156 157
141 137 135 138 141 142 144 147 149 151 153
Dosis 182 160 154 161 163 160 163 167 173 176 179
Rendah 190 150 147 151 152 150 157 157 168 170 173
100 204 171 168 166 169 168 173 173 184 188 191
mg/kkgBB 207 173 170 169 169 165 170 170 182 183 188
Dosis 214 206 189 185 191 182 192 178 180 177 181
Sedang 223 216 211 197 201 200 206 204 205 201 206
200 229 219 211 210 215 203 214 200 202 198 201
mg/kgBB 235 229 192 188 196 186 210 202 205 200 206
237 222 212 218 232 227 236 238 236 233 238
Dosis
249 229 224 228 251 243 245 246 247 246 250
Tinggi 400
254 249 264 252 259 248 238 244 241 236 239
mg/kgBB
265 236 249 251 260 250 259 252 252 250 252
 84

Lampiran 11. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Metode Induksi Aloksan

Tabel 13. Kadar Glukosa Darah

Kelompok Glukosa Darah Puasa Awal

93 mg/dl
97 mg/dl
Kontrol Normal
98 mg/dl
101 mg/dl

Waktu (Hari)
Kelompok Hiperglikemia
Hari ke-3 Hari ke-6 Hari ke-9
0 (Hari ke-6)
80 126 136 146 181
67 130 145 162 208
Kontrol Negatif
73 124 131 138 157
84 129 136 144 172
Rata-rata 76 127,25 137 147,5 179,5
Standar deviasi 6,5 2,7 5,83 10,2 21,4
83 140 113 109 87
97 145 120 113 92
Kontrol Positif
89 135 111 105 91
95 145 123 118 68
Rata-rata 91 141,25 116,75 111,25 84,5
Standar deviasi 6,3 4,8 5,6 5,6 11,2
93 148 128 112 98
Dosis Rendah 107 148 112 109 95
100 mg/kkgBB 108 149 120 109 94
104 137 110 104 84
Rata-rata 103 145,5 117,5 108,5 92,75
Standar deviasi 6,8 5,6 8,2 3,3 6,0
99 141 115 96 95
Dosis Sedang 98 146 117 94 80
200 mg/kgBB 94 142 117 88 73
99 149 127 102 92
Rata-rata 97,5 144,5 119 95 85
Standar deviasi 2,3 3,6 5,4 5,7 10,2
96 162 130 113 93
Dosis Tinggi 109 151 135 117 110
400 mg/kgBB 103 160 138 130 121
103 146 130 128 120
Rata-rata 102,75 154,75 133,25 122 111
Standar deviasi 5,3 7,5 3,9 8,2 12,9
 85

Gambar 19. Kurva Rata-rata Penurunan Glukosa Darah

200
180
160
140
120
a
k dar glukosa darah ()mg/dl 100

80
60
40
20
0
Hiperglikemia 3 6 9
Kontrol Negatif 127.25 137 147.5 179.5
Kontrol Positif 141.25 116.75 111.25 69
Dosis Rendah 100 mg/kgBB 145.5 117.5 108.5 92.75
Dosis Sedang 200 mg/kgBB 144.5 119 95 85
Dosis Tinggi 400 mg/kgBB 154.75 133.25 122 111

Gambar 20. Kurva Persentase Penurunan Glukosa Darah

45
40
35
30
% eP nurunan Glukosa Darah Kontrol Positif
25
Dosis Rendah 100 mg/kgBB
20
Dosis Sedang 200 mg/kgBB
15
Dosis Tinggi 400 mg/kgBB
10
5
0
3 6 9

Kontrol Positif 17.34 21.23 40.17

Dosis Rendah 100 mg/kgBB 19.24 25.43 36.25
Dosis Sedang 200 mg/kgBB 17.65 34.26 41.17
Dosis Tinggi 400 mg/kgBB 13.89 21.16 28.27
 86

Lampiran 12. Hasil Pengukuran Glukosa Darah Metode Toleransi Glukosa

Tabel 14. Kadar Glukosa Darah

Kelompok Glukosa Darah Puasa Awal

107 mg/dl
105 mg/dl
110 mg/dl
Kontrol Normal
106 mg/dl
104 mg/dl
103 mg/dl

Waktu (Menit)
Kelompok
0 30 60 90 120 150 180
144 205 211 208 190 178 165
141 236 212 200 182 175 156
152 223 215 198 187 169 178
Kontrol Negatif
157 200 197 189 182 167 175
169 239 225 196 183 180 177
143 204 197 188 172 170 163
Rata-rata 151 217,8 209,5 196,5 182,7 173,2 169
Standar deviasi 10,7 17,2 10,9 7,4 6,1 5,3 8,9
151 170 132 117 97 82 79
146 187 138 125 116 100 108
143 174 129 104 79 87 77
Kontrol Positif
141 169 126 100 87 79 69
165 190 122 119 108 90 84
138 174 120 113 96 85 77
Rata-rata 147,3 177,3 127,8 113 97,2 87,2 82,3
Standar deviasi 9,7 8,9 6,6 9,4 13,5 7,3 13,4
135 233 130 123 112 105 98
140 242 147 132 125 103 91
Dosis tinggi 200 146 223 150 143 121 109 97
mg/kgBB 132 179 141 129 117 107 95
130 260 162 135 113 91 79
127 198 129 118 105 96 85
Rata-rata 135 222,5 143,1 130 115,5 101,8 90,8
Standar deviasi 6,9 29,6 12,6 8,8 7,09 6,9 7,4
 87

Gambar 21. Kurva Penurunan Rata-rata Toleransi Glukosa

250

200

150 Kontrol Negatif

Kadar Glukosa Darah (mg/dl )
100 Kontrol Positif
Dosis Sedang
50

0
0 30 60 90 120 150 180
Kontrol Negatif 151 217.8 209.5 196.5 182.6 173.2 169
Kontrol Positif 147.3 177.3 127.8 113 97.2 87.2 82.3
Dosis Sedang 135 222.5 143.1 130 115.5 101.8 90.8

Gambar 22. Kurva Persentase Penurunan Rata-rata Toleransi Glukosa

70
60
50
40 Kontrol Positif
% Penurunan GD
30 Kontrol Negatif
20 Dosis Sedang
10
0
30 60 90 120 150 180
Kontrol Positif 30.67 3.81 9.78 16.11 20.47 22.4
Kontrol Negatif 16.9 27.9 36.3 45.2 50.8 53.6
Dosis Sedang 39.32 35.68 41.57 48.08 54.24 59.19
 88

Lampiran 13. Hasil Statistik Uji Hipoglikemia dengan Metode Induksi Aloksan

1. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov dan Uji Homogenitas Levene terhadap

kadar glukosa

a. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov

Tujuan : Untuk melihat distribusi data kadar glukosa darah tikus

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tidak terdistribusi normal

Ha : Data kadar glukosa darah tidak terdistribusi normal

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak

One Sample Kolmogorov-Smirnov Test

GDO GDH GD3 GD6 GD9

N 24 24 24 24 24
Mean 94.58 135.08 120.13 113.58 108.33
Normal Parametersa,,b
Std. Deviation 10.656 19.662 14.094 18.925 35.461
Absolute .191 .182 .104 .179 .290
Most Extreme Differences Positive .088 .126 .079 .179 .290
Negative -.191 -.182 -.104 -.097 -.129
Kolmogorov-Smirnov Z .935 .892 .509 .877 1.422
Asymp. Sig. (2-tailed) .346 .404 .958 .426 .035

a. Test distribution is Normal

b. Calculated is Normal

Keputusan : Uji normalitas kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

terdistribusi normal kecuali kadar glukosa darah hari ke-9 (p0,05)

 89

b. Uji homogenitas Levene

Tujuan : Untuk melihat data kadar glukosa darah tikus homogen atau tidak

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tikus bervariasi homogen

Ha : Data kadar glukosa darah tidak bervariasi homogen

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.
GDO 1.441 5 18 .258
GDH 2.302 5 18 .088
GD3 1.246 5 18 .329
GD6 1.777 5 18 .168
GD9 1.754 5 18 .173

Keputusan : Uji homogenitas kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

bervariasi homogen (p0,05)

Kesimpulan : Data seluruh kelompok dapat dilanjutkan dengan ANOVA karena

syarat normalitas dan homogenitasnya telah terpenuhi, sedangkan data kadar

glukosa darah hari ke-9 dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis karena syarat

normalitas dan homogenitasnya belum terpenuhi.

 90

2. Uji Kruskal Wallis dan BNT (Beda Nyata Terkecil) terhadap kadar glukosa

darah kelompok hewan uji

Tujuan : Untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan data kadar glukosa

darah tikus untuk data yang tidak memenuhi syarat pengujian ANOVA

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tidak berbeda secara bermakna

Ha : Data kadar glukosa darah berbeda secara bermakna

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak

Test Statisticsa.b
GD9
Chi-Square 17.593
df 5
Asymp. Sig. .004

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable : Kelompok Tikus

Keputusan : Data kadar glukosa darah tikus hari ke-9 berbeda secara bermakna

(p 0,05) maka dilanjutkan dengan uji BNT menggunakan metode LSD. Uji BNT

merupakan uji lanjutan yang dilakukan apabila hasil pengujian menunjukkan

adanya perbedaan nilai secara bermakna. Tujuannya adalah untuk menentukan

kelompok mana yang memberikan nilai yang berbeda secara bermakna dengan

kelompok lainnya.
 91

Uji BNT (LSD) Hiperglikemia Hari ke-9

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound
*
KONTROL NEGATIF -82.250 8.695 .000 -100.52 -63.98
KONTROL PEMBANDING 12.750 8.695 .160 -5.52 31.02
KONTROL
NORMAL DOSIS RENDAH 4.500 8.695 .611 -13.77 22.77
DOSIS SEDANG 12.250 8.695 .176 -6.02 30.52
DOSIS TINGGI -13.750 8.695 .131 -32.02 4.52
*
KONTROL NORMAL 82.250 8.695 .000 63.98 100.52
*
KONTROL PEMBANDING 95.000 8.695 .000 76.73 113.27
KONTROL *
DOSIS RENDAH 86.750 8.695 .000 68.48 105.02
NEGATIF
*
DOSIS SEDANG 94.500 8.695 .000 76.23 112.77
*
DOSIS TINGGI 68.500 8.695 .000 50.23 86.77
KONTROL NORMAL -12.750 8.695 .160 -31.02 5.52
*
KONTROL NEGATIF -95.000 8.695 .000 -113.27 -76.73
KONTROL
DOSIS RENDAH -8.250 8.695 .355 -26.52 10.02
PEMBANDING
DOSIS SEDANG -.500 8.695 .955 -18.77 17.77
*
DOSIS TINGGI -26.500 8.695 .007 -44.77 -8.23
KONTROL NORMAL -4.500 8.695 .611 -22.77 13.77
*
KONTROL NEGATIF -86.750 8.695 .000 -105.02 -68.48
DOSIS RENDAH KONTROL PEMBANDING 8.250 8.695 .355 -10.02 26.52
DOSIS SEDANG 7.750 8.695 .385 -10.52 26.02
DOSIS TINGGI -18.250 8.695 .050 -36.52 .02
KONTROL NORMAL -12.250 8.695 .176 -30.52 6.02
*
KONTROL NEGATIF -94.500 8.695 .000 -112.77 -76.23
DOSIS SEDANG KONTROL PEMBANDING .500 8.695 .955 -17.77 18.77
DOSIS RENDAH -7.750 8.695 .385 -26.02 10.52
*
DOSIS TINGGI -26.000 8.695 .008 -44.27 -7.73
KONTROL NORMAL 13.750 8.695 .131 -4.52 32.02
*
KONTROL NEGATIF -68.500 8.695 .000 -86.77 -50.23
*
DOSIS TINGGI KONTROL PEMBANDING 26.500 8.695 .007 8.23 44.77
DOSIS RENDAH 18.250 8.695 .050 -.02 36.52
*
DOSIS SEDANG 26.000 8.695 .008 7.73 44.27

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

 92

Kesimpulan : Kadar glukosa darah antara dosis rendah, dosis sedang, dan dosis

tinggi dengan kontrol normal tidak berbeda secara bermakna, pada kontrol

pembanding dengan dosis rendah dan sedang tidak berbeda secara bermakna.

Sedangkan seluruh kelompok uji dengan kontrol negatif berbeda secara bermakna.

3. Uji Analisa Varians (ANOVA) satu arah dan Beda Nyata Terkecil (BNT)

terhadap kadar glukosa darah kelompok hewan uji.

Tujuan: Untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan data kadar glukosa tikus

Hipotesis

Ho: Data kadar glukosa darah tikus tidak berbeda secara bermakna

Ha: Data kadar glukosa darah tikus berbeda secara bermakna

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi 0,05, maka Ho diterima

Jika nilai signifikansi 0,05, maka Ho ditolak

a. Uji ANOVA satu arah terhadap kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

hari ke-3 sebelum perlakuan

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 3999.375 5 799.875 25.292 .000
Within Groups 569.250 18 31.625
Total 4568.625 23

Keputusan : Kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji hari ke-3 setelah

perlakuan berbeda secara bermakna

 93

Uji BNT (LSD) hari ke-3

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound
*
KONTROL NEGATIF -39.750 3.976 .000 -48.10 -31.40
*
KONTROL PEMBANDING -19.500 3.976 .000 -27.85 -11.15
KONTROL *
NORMAL DOSIS RENDAH -20.250 3.976 .000 -28.60 -11.90
DOSIS SEDANG -21.750* 3.976 .000 -30.10 -13.40
*
DOSIS TINGGI -36.000 3.976 .000 -44.35 -27.65
*
KONTROL NORMAL 39.750 3.976 .000 31.40 48.10
*
KONTROL PEMBANDING 20.250 3.976 .000 11.90 28.60
KONTROL *
DOSIS RENDAH 19.500 3.976 .000 11.15 27.85
NEGATIF
*
DOSIS SEDANG 18.000 3.976 .000 9.65 26.35
DOSIS TINGGI 3.750 3.976 .358 -4.60 12.10
*
KONTROL NORMAL 19.500 3.976 .000 11.15 27.85
*
KONTROL NEGATIF -20.250 3.976 .000 -28.60 -11.90
KONTROL
DOSIS RENDAH -.750 3.976 .853 -9.10 7.60
PEMBANDING
DOSIS SEDANG -2.250 3.976 .578 -10.60 6.10
*
DOSIS TINGGI -16.500 3.976 .001 -24.85 -8.15
*
KONTROL NORMAL 20.250 3.976 .000 11.90 28.60
*
KONTROL NEGATIF -19.500 3.976 .000 -27.85 -11.15
DOSIS
KONTROL PEMBANDING .750 3.976 .853 -7.60 9.10
RENDAH
DOSIS SEDANG -1.500 3.976 .710 -9.85 6.85
*
DOSIS TINGGI -15.750 3.976 .001 -24.10 -7.40
*
KONTROL NORMAL 21.750 3.976 .000 13.40 30.10
*
KONTROL NEGATIF -18.000 3.976 .000 -26.35 -9.65
DOSIS
SEDANG KONTROL PEMBANDING 2.250 3.976 .578 -6.10 10.60
DOSIS RENDAH 1.500 3.976 .710 -6.85 9.85
*
DOSIS TINGGI -14.250 3.976 .002 -22.60 -5.90
*
KONTROL NORMAL 36.000 3.976 .000 27.65 44.35
KONTROL NEGATIF -3.750 3.976 .358 -12.10 4.60
*
DOSIS TINGGI KONTROL PEMBANDING 16.500 3.976 .001 8.15 24.85
*
DOSIS RENDAH 15.750 3.976 .001 7.40 24.10
*
DOSIS SEDANG 14.250 3.976 .002 5.90 22.60

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

 94

Kesimpulan :

1. Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal pada taraf uji 0,05.

2. Kadar glukosa darah dosis rendah dan dosis sedang tidak berbeda secara

bermakna, sedangkan kontrol normal, kontrol negatif dan dosis tinggi tidak

berbeda secara bermakna dengan kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

3. Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna, sedangkan

dosis tinggi tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol negatif pada taraf

uji 0,05.
 95

Uji BNT (LSD) hari ke-6

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) KELOMPOK (J) KELOMPOK Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound
*
KONTROL NEGATIF -50.250 4.653 .000 -60.03 -40.47
*
KONTROL PEMBANDING -14.000 4.653 .008 -23.78 -4.22
KONTROL *
NORMAL DOSIS RENDAH -11.250 4.653 .026 -21.03 -1.47
DOSIS SEDANG 2.250 4.653 .635 -7.53 12.03
*
DOSIS TINGGI -24.750 4.653 .000 -34.53 -14.97
*
KONTROL NORMAL 50.250 4.653 .000 40.47 60.03
*
KONTROL PEMBANDING 36.250 4.653 .000 26.47 46.03
KONTROL *
DOSIS RENDAH 39.000 4.653 .000 29.22 48.78
NEGATIF
*
DOSIS SEDANG 52.500 4.653 .000 42.72 62.28
*
DOSIS TINGGI 25.500 4.653 .000 15.72 35.28
*
KONTROL NORMAL 14.000 4.653 .008 4.22 23.78
*
KONTROL NEGATIF -36.250 4.653 .000 -46.03 -26.47
KONTROL
DOSIS RENDAH 2.750 4.653 .562 -7.03 12.53
PEMBANDING
*
DOSIS SEDANG 16.250 4.653 .003 6.47 26.03
*
DOSIS TINGGI -10.750 4.653 .033 -20.53 -.97
*
KONTROL NORMAL 11.250 4.653 .026 1.47 21.03
*
KONTROL NEGATIF -39.000 4.653 .000 -48.78 -29.22
DOSIS RENDAH KONTROL PEMBANDING -2.750 4.653 .562 -12.53 7.03
*
DOSIS SEDANG 13.500 4.653 .010 3.72 23.28
*
DOSIS TINGGI -13.500 4.653 .010 -23.28 -3.72
KONTROL NORMAL -2.250 4.653 .635 -12.03 7.53
*
KONTROL NEGATIF -52.500 4.653 .000 -62.28 -42.72
*
DOSIS SEDANG KONTROL PEMBANDING -16.250 4.653 .003 -26.03 -6.47
*
DOSIS RENDAH -13.500 4.653 .010 -23.28 -3.72
*
DOSIS TINGGI -27.000 4.653 .000 -36.78 -17.22
*
KONTROL NORMAL 24.750 4.653 .000 14.97 34.53
*
KONTROL NEGATIF -25.500 4.653 .000 -35.28 -15.72
*
DOSIS TINGGI KONTROL PEMBANDING 10.750 4.653 .033 .97 20.53
*
DOSIS RENDAH 13.500 4.653 .010 3.72 23.28
*
DOSIS SEDANG 27.000 4.653 .000 17.22 36.78

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

 96

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna,

sedangkan pada dosis sedang tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

normal pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna,

sedangkan dosis rendah tidak berbeda secara bermakna dengan kontrol

pembanding pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 97

Lampiran 14. Hasil Statistik Uji Hipoglikemia dengan Metode Toleransi Glukosa

1. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov dan Uji Homogenitas Levene terhadap

kadar glukosa

a. Uji Normalitas Kolmogorof-Smirnov

Tujuan : Untuk melihat distribusi data kadar glukosa darah tikus

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tidak terdistribusi normal

Ha: Data kadar glukosa darah tidak terdistribusi normal

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak

One-Sample Kolmogorov_Smirnov Test

GD0 GD30 GD60 GD90 GD120 GD150 GD180
N 24 24 24 24 24 24 24
a,,b Mean 134.79 180.88 146.58 136.33 125.29 117.00 112.00
Normal Parameters
Std. Deviation 19.642 50.542 40.396 37.273 35.337 34.312 35.699
Absolute .148 .170 .183 .223 .259 .331 .272
Most Extreme Differences Positive .147 .170 .183 .223 .259 .331 .272
Negative -.148 -.157 -.144 -.167 -.157 -.177 -.141
Kolmogorov-Smirnov Z .726 .831 .895 1.091 1.271 1.621 1.334
Asymp. Sig. (2-tailed) .668 .495 .400 .185 .079 .010 .057

a. Test distribution is Normal

b. Calculated from data

Keputusan : Uji normalitas kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

terdistribusi normal kecuali kadar glukosa darah menit ke 150

 98

b. Uji homogenitas Levene

Tujuan : Untuk melihat data kadar glukosa darah tikus homogen atau tidak

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tikus bervariasi homogen

Ha : Data kadar glukosa darah tidak bervariasi homogen

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak Test

of Homogenity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
menit0 2.335 3 20 .105
menit30 6.366 3 20 .003
menit60 3.286 3 20 .042
menit90 2.044 3 20 .140
menit120 2.829 3 20 .065
menit150 1.792 3 20 .181
menit180 2.197 3 20 .120

Keputusan : Uji homogenitas kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

bervariasi homogen (p0,05) kecuali kadar glukosa menit ke-30 dan 60

Kesimpulan : Data kadar glukosa darah seluruh kelompok uji yang syarat

homogenitasnya belum terpenuhi.

 99

2. Uji Kruskal Wallis dan BNT (Beda Nyata Terkecil) terhadap kadar glukosa

darah kelompok hewan uji

Tujuan : Untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan data kadar glukosa darah

tikus untuk data yang tidak memenuhi syarat pengujian ANOVA

Hipotesis

Ho : Data kadar glukosa darah tidak berbeda secara bermakna

Ha : Data kadar glukosa darah berbeda secara bermakna

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho diterima

Jika nilai signifikansi maka 0,05 Ho ditolak

Test Statisticsa.b
menit30 menit60
Chi-Square 18.758 20.673
df 3 3
Asymp. Sig. .000 .000

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variabel: Kelompok

Keputusan : Data kadar glukosa darah tikus menit ke-30, dan 60 berbeda secara

bermakna (p 0,05) maka dilanjutkan dengan uji BNT menggunakan metode

LSD. Uji BNT merupakan uji lanjutan yang dilakukan apabila hasil pengujian

menunjukkan adanya perbedaan nilai secara bermakna. Tujuannya adalah untuk

menentukan kelompok mana yangmemberikan nilai yang berbeda secara

bermakna dengan kelompok lainnya.

 100

Uji BNT (LSD) menit 30

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound
*
Kontrol negatif -112.000 10.246 .000 -133.37 -90.63
Kontrol normal *
Kontrol pembanding -71.500 10.246 .000 -92.87 -50.13
*
Dosis sedang -116.667 10.246 .000 -138.04 -95.29
*
Kontrol normal 112.000 10.246 .000 90.63 133.37
*
Kontrol negatif Kontrol pembanding 40.500 10.246 .001 19.13 61.87
Dosis sedang -4.667 10.246 .654 -26.04 16.71
*
Kontrol normal 71.500 10.246 .000 50.13 92.87
Kontrol *
Kontrol negatif -40.500 10.246 .001 -61.87 -19.13
pembanding
*
Dosis sedang -45.167 10.246 .000 -66.54 -23.79
*
Kontrol normal 116.667 10.246 .000 95.29 138.04
Dosis sedang Kontrol negatif 4.667 10.246 .654 -16.71 26.04
*
Kontrol pembanding 45.167 10.246 .000 23.79 66.54

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah kontrol normal dan kontrol pembanding berbeda

secara bermakna, sedangkan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 101

Uji BNT (LSD) menit 60

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound

Kontrol negatif -103.667* 5.225 .000 -114.57 -92.77

Kontrol normal Kontrol pembanding -22.000* 5.225 .000 -32.90 -11.10

Dosis sedang -37.333* 5.225 .000 -48.23 -26.43

Kontrol normal 103.667* 5.225 .000 92.77 114.57

Kontrol negatif *
Kontrol pembanding 81.667 5.225 .000 70.77 92.57

*
Dosis sedang 66.333 5.225 .000 55.43 77.23

Kontrol normal 22.000* 5.225 .000 11.10 32.90

Kontrol
*
Kontrol negatif -81.667 5.225 .000 -92.57 -70.77
pembanding
*
Dosis sedang -15.333 5.225 .008 -26.23 -4.43

Kontrol normal 37.333* 5.225 .000 26.43 48.23

Dosis sedang *
Kontrol negatif -66.333 5.225 .000 -77.23 -55.43

*
Kontrol pembanding 15.333 5.225 .008 4.43 26.23

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna

dengan kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 102

3. Uji ANOVA satu arah dan BNT terhadap kadar glukosa darah kelompok

hewan uji

Tujuan: Untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan data kadar glukosa tikus

Hipotesis

Ho: Data kadar glukosa darah tikus tidak berbeda secara bermakna

Ha: Data kadar glukosa darah tikus berbeda secara bermakna

Pengambilan keputusan

Jika nilai signifikansi 0,05, maka Ho diterima

Jika nilai signifikansi 0,05, maka Ho ditolak

a. Uji Anova Satu Arah terhadap kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

menit ke-90

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 30809.000 3 10269.667 179.487 .000

Within Groups 1144.333 20 57.217

Total 31953.333 23

Keputusan : kadar glukosa darah awal seluruh kelompok hewan uji berbeda secara

bermakna
 103

Uji BNT (LSD) menit 90

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound

Kontrol negatif -90.667* 4.367 .000 -99.78 -81.56

Kontrol normal Kontrol pembanding -7.167 4.367 .116 -16.28 1.94

Dosis sedang -24.167* 4.367 .000 -33.28 -15.06

*
Kontrol normal 90.667 4.367 .000 81.56 99.78

Kontrol negatif *
Kontrol pembanding 83.500 4.367 .000 74.39 92.61
*
Dosis sedang 66.500 4.367 .000 57.39 75.61

Kontrol normal 7.167 4.367 .116 -1.94 16.28

Kontrol
*
Kontrol negatif -83.500 4.367 .000 -92.61 -74.39
pembanding
Dosis sedang *
-17.000 4.367 .001 -26.11 -7.89

Kontrol normal 24.167* 4.367 .000 15.06 33.28

Dosis sedang *
Kontrol negatif -66.500 4.367 .000 -75.61 -57.39
*
Kontrol pembanding 17.000 4.367 .001 7.89 26.11

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah kontrol negatif dan dosis sedang berbeda secara

bermakna, sedangkan kontrol pembanding tidak berbeda secara bermakna

dengan kontrol normal pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah kontrol negatif dan dosis sedang berbeda secara

bermakna, sedangkan kontrol normal tidak berbeda secara bermakna dengan

kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 104

b. Uji Anova Satu Arah terhadap kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan

uji menit ke-120

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 27344.458 3 9114.819 132.435 .000

Within Groups 1376.500 20 68.825

Total 28720.958 23

Keputusan : kadar glukosa darah awal seluruh kelompok hewan uji berbeda secara
bermakna

Uji BNT (LSD) menit 120

95% Confidence Interval

Mean Difference
(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J)
Lower Bound Upper Bound

Kontrol negatif -76.833* 4.790 .000 -86.82 -66.84

Kontrol normal Kontrol pembanding 8.667 4.790 .085 -1.32 18.66

Dosis sedang -9.667 4.790 .057 -19.66 .32

*
Kontrol normal 76.833 4.790 .000 66.84 86.82

Kontrol negatif Kontrol pembanding 85.500* 4.790 .000 75.51 95.49

Dosis sedang 67.167* 4.790 .000 57.18 77.16

Kontrol normal -8.667 4.790 .085 -18.66 1.32

Kontrol *
Kontrol negatif -85.500 4.790 .000 -95.49 -75.51
pembanding

Dosis sedang -18.333* 4.790 .001 -28.32 -8.34

Kontrol normal 9.667 4.790 .057 -.32 19.66

*
Dosis sedang Kontrol negatif -67.167 4.790 .000 -77.16 -57.18

Kontrol pembanding 18.333* 4.790 .001 8.34 28.32

 105

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah kontrol pembanding dan dosis sedang tidak berbeda

secara bermakna, sedangkan kontrol negatif berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah kontrol negatif dan dosis sedang berbeda secara

bermakna, sedangkan kontrol normal tidak berbeda secara bermakna dengan

kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 106

c. Uji Anova Satu Arah terhadap kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan uji

menit ke-150

Uji BNT (LSD) menit 150

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound

Kontrol negatif -67.333* 3.370 .000 -74.36 -60.30

Kontrol normal Kontrol positif 18.667* 3.370 .000 11.64 25.70

Dosis sedang 4.000 3.370 .249 -3.03 11.03

*
Kontrol normal 67.333 3.370 .000 60.30 74.36

Kontrol negatif Kontrol positif 86.000

*
3.370 .000 78.97 93.03
*
Dosis sedang 71.333 3.370 .000 64.30 78.36

Kontrol normal -18.667* 3.370 .000 -25.70 -11.64

Kontrol positif Kontrol negatif -86.000
*
3.370 .000 -93.03 -78.97
*
Dosis sedang -14.667 3.370 .000 -21.70 -7.64

Kontrol normal -4.000 3.370 .249 -11.03 3.03

Dosis sedang *
Kontrol negatif -71.333 3.370 .000 -78.36 -64.30
*
Kontrol positif 14.667 3.370 .000 7.64 21.70

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

1) Kadar glukosa darah kontrol negatif dan kontrol positif berbeda secara

bermakna dengan kontrol normal, sedangkan dosis sedang tidak berbeda

secara bermakna pada taraf uji 0,05.

2) Kadar glukosa darah seluruh kelompok uji berbeda secara bermakna dengan

kontrol positif pada taraf uji 0,05.

3) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.

 107

d. Uji Anova Satu Arah terhadap kadar glukosa darah seluruh kelompok hewan

uji menit ke-180

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 27691.000 3 9230.333 113.884 .000

Within Groups 1621.000 20 81.050

Total 29312.000 23

Keputusan : kadar glukosa darah awal seluruh kelompok hewan uji berbeda secara

bermakna

Uji BNT (LSD) menit 180

Mean Difference 95% Confidence Interval

(I) kelompok (J) kelompok Std. Error Sig.
(I-J) Lower Bound Upper Bound

Kontrol negatif -63.167* 5.198 .000 -74.01 -52.32

Kontrol normal Kontrol pembanding 23.500* 5.198 .000 12.66 34.34

Dosis sedang 15.000* 5.198 .009 4.16 25.84

*
Kontrol normal 63.167 5.198 .000 52.32 74.01

Kontrol negatif *
Kontrol pembanding 86.667 5.198 .000 75.82 97.51

*
Dosis sedang 78.167 5.198 .000 67.32 89.01

Kontrol normal -23.500* 5.198 .000 -34.34 -12.66

Kontrol
*
Kontrol negatif -86.667 5.198 .000 -97.51 -75.82
pembanding
Dosis sedang -8.500 5.198 .118 -19.34 2.34

*
Kontrol normal -15.000 5.198 .009 -25.84 -4.16

Dosis sedang *
Kontrol negatif -78.167 5.198 .000 -89.01 -67.32

Kontrol pembanding 8.500 5.198 .118 -2.34 19.34

 108

Keterangan : * berbeda secara bermakna pada taraf uji 0,05

Kesimpulan :

4) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol normal pada taraf uji 0,05.

5) Kadar glukosa darah kontrol normal dan kontrol negatif berbeda secara

bermakna, sedangkan dosis sedang tidak berbeda secara bermakna dengan

kontrol pembanding pada taraf uji 0,05.

6) Kadar glukosa darah seluruh kelompok berbeda secara bermakna dengan

kontrol negatif pada taraf uji 0,05.