INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

Casillas Ramos Guillermo Arturo, Morales Alonso Dulce Deyadira
Orta Camargo Berenice
Equipo: 3 Grupo: 6FV1

PRCTICA 3: EXTRACCIN EN FASE SLIDA. SEPARACIN DE COLORANTES SINTTICOS

INTRODUCCIN.

La extraccin en fase slida es una tcnica preparativa que se utiliza para limpiar o purificar la muestra previa a la
cuantificacin y/o para futura concentracin del analito que est presente en la muestra. El trmino extraccin en fase
slida es debido a que el material de soporte utilizado es un slido, a travs del cual pasa un lquido o un gas. Los
analitos son absorbidos en el soporte y luego eluidos de acuerdo a sus diferentes afinidades entre el material
absorbente y la fase mvil utilizada. Esta tcnica consta de los siguientes pasos: Acondicionamiento, en la cual se lleva a
cabo la activacin del adsorbente, se pasa un disolvente polar como el metanol para asegurarnos de (homogeneizar la
superficie del adsorbente) Carga de muestra, aqu se aplica la muestra en la parte superior del lecho de adsorbente. Los
contaminantes de matriz pueden pasar por la columna sin ser retenidos, y otros componentes de la matriz pueden
retenerse ms o menos fuertemente en la superficie del adsorbente, Etapa de lavado, el cual permite la eliminacin de
cualquier resto de compuestos que puedan interferir manteniendo los analitos en el lecho de adsorbente, se pueden
usar solventes o mezcla de solventes de diferente tipo para mejorar la eficacia del lavado y en la Etapa de elucin, los
compuestos adsorbidos por la slice gel son eluidos con una mezcla de disolventes de tal manera que se vaya
incrementando la polaridad.

RESULTADOS:

Tartrazina:

2.7/3.8= 0.71

Rojo n.3:

3.4/3.8= 0.89

Estndar:

Amarillo: 3.4/3.8= 0.89

Rojo: 1.2/3.8= 0.31

DISCUSIONES.

Se llev a cabo la tcnica de extraccin en fase slida para la separacin de una mezcla de colorantes utilizados en la
industria alimentaria, tartrazina y rojo No 3, primero acondicionamos la superficie para propiciar las interacciones de
igual forma en la slice esto mediante la adicin a travs de la columna 5 mL de etanol y al terminar y sin dejar secar se
adicion 5 ml de agua destilada (desechamos aluatos), posteriormente hicimos la aplicacin de la muestra, 0.3 mL de la
mezcla de colorantes rojo No 3 y tartrazina esto con el fin de que hubieran interacciones entre las molculas de los
colorantes y de la fase estacionaria, se retuvieron molculas de dichos colorantes en la fase estacionaria, para la etapa
de lavado se adicion agua destilada hasta que el aluato se vea incoloro esto para eliminar los compuestos no
adsorbidos y finalmente en la etapa de elucin los compuestos retenidos en la fase estacionaria se eluyeron con un
gradiente de metanol/agua primero 5 mL de metanol al 10% seguidos de 15 mL de metanol al 50% y finalmente 20 mL
de metanol R.A y se colectaron los eluatos, de esta manera se fue aumentando la polaridad de la mezcla de disolventes
para extraer los colorantes.

En la cromatografa en capa fina observamos que el rf de la tartrazina es de 0.71, lo que quiere decir que esta
interaccionando dbilmente con la fase estacionaria que es polar, mientras que el rf del rojo n. 3 es de 0.89, esto nos
indica que interacciona ms dbilmente con la fase mvil que debe ser de baja polaridad y por eso el corrimiento es
menor. Por otra parte al observar la placa cromatografica se observan dos manchas en la aplicacin de tartrazina
mientras que en la aplicacin de rojo n.3 solo se observa 1, lo que nos indica que no se separ con eficiencia la mezcla
de colorantes.

CONCLUSIN.

Se logr sin complicaciones la separacin de los colorantes tartrazina y rojo No 3 mediante la tcnica de
extraccin en fase slida
Se demostr que la tartrazina es menos polar que el rojo No 3

CUESTIONARIO.

a) Definir los siguientes conceptos:

Eluir: Arrastrar mediante un lquido o fluido sustancias adheridas o absorbidas en una columna cromatogrfica

Eluyente: Tambin llamado fase mvil es la sustancia que se aade en un columna cromatogrfica para hacer eluir
(mover) el producto de inters

Eluato: Cada una de las sustancias que migran a travs del lecho de la fase estacionaria (impulsadas por la fase mvil)
dentro de un sistema de separacin cromatogrfico.
Adsorcin: Proceso por el cual tomos, iones o molculas de gases, lquidos o slidos disueltos son atrapados o
retenidos en una superficie,

Particin: Es el reparto de los solutos entre una fase mvil y una fase estacionaria que est retenida en un soporte

Exclusin: Exclusin por tamao o de gel es un tipo de cromatografa de lquidos en la que la fase estacionaria es un
material poroso que permite la elucin diferencial de los solutos en funcin de sus tamaos moleculares. No hay
interaccin qumica o fsica entre los analitos y la fase estacionaria.

Intercambio inico: Operacin de separacin basada en la transferencia de materia fluido-slido, ocurre una reaccin
qumica en la que los iones mviles hidratados de un slido son intercambiados por iones de igual carga de un fluido,
Este proceso consiste en pasar el fluido sobre un intercambiador catinico y/o aninico slido, reemplazando los
cationes y/o aniones por el ion hidrgeno (H+) y/o el ion hidroxilo (OH-) respectivamente

Fluido supercrtico: cualquier sustancia que se encuentre en condiciones de presin y temperatura superiores a su punto
crtico

b) Discutir con base en las estructuras de los colorantes, el orden de elucin esperado de los mismos en la
cromatografa en columna y en la cromatografa en placa fina

Por la estructura de la tartrazina este presenta mayor momento dipolar en comparacin con el rojo No 3 y por lo tanto
es ms polar, es decir en la fase normal de la placa fina la elucin primero sera del rojo No 3 y despus la tartrazina y de
lo contrario en la fase inversa por cromatografa en columna primero eluir la tartrazina y despus el rojo No 3

c) Explicar si la relacin de polaridades utilizada para la fase estacionaria y para fase mvil corresponde a la
cromatografa en columna en fase normal o en fase reversa
Este corresponde a una fase reversa porque se utilizan disolventes polares, en este caso metanol/agua ya que en la fase
normal se utilizaran mezclas de disolventes no polares ya que la fase estacionaria es polar

d) Explicar qu se entiende cuando la columna de cromatografa empacada con gel de slice de fase reversa lleva
en su etiqueta C12 o C18

Hace referencia a que en la columna tiene en sus partculas cadenas de 12 0 18 carbonos respectivamente, es decir son
modificadas, se vuelven matrices no polares.

BIBLIOGRAFA.

Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Facultad de Qumica, Qumica Analtica Instrumental II Tcnicas
Cromatogrficas, Diciembre 2007, [fecha de consulta: 24-09-17], disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf
Skoog, Daniel A. Holler, James F Nieman, Timothy A, Analisis instrumental 5 edicin Mc Graw Hill