Reaccin de Molish: Todos los carbohidratos tanto los monosacridos como los
disacridos y polisacridos reaccionan con -naftol, en presencia de cido sulfrico para
formar sustancias complejas coloreadas. Esta reaccin se utiliza para la identificacin en
general de los carbohidratos. El proceso se fundamenta en la deshidratacin que
experimentan los carbohidratos en presencia de cidos minerales fuertes, como el cido
sulfrico y el cido clorhdrico. Despus de deshidratado el carbohidrato se forma el
complejo coloreado, porque el grupo carbonilo, del carbohidrato, se polariza produciendo
un carbocatin que se estabiliza con los pares electrnicos libres del oxigeno del -naftol.
Vase a continuacin la descripcin de la reaccin.
C C
HO OH
H H
H H
C C
HO
C
C HO
OH
O
H
2. Las flechas sealan cmo se rompen los enlaces de los grupos -OH y de los hidrgenos. Ruptura
catalizada por el cido sulfrico. Se liberan tres molculas de H-OH
H H H H
C C
C C
HO OH H2SO4
H
3 H-OH + HO C C
H
H H C C
H H
C C
HO H O O
C
C HO
OH O
H
HC C CH
HC C CH
CH CH
CH CH
1
Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
Reaccin de Seliwanoff
Esta reaccin comprende la deshidratacin del carbohidrato con cido clorhdrico (cido
mineral fuerte) y la posterior reaccin con el resorcinol para formar el complejo coloreado,
como se muestra en la reaccin presentada a continuacin. Es una reaccin que ocurre
rpidamente con las cetosas, por lo que se utiliza para su identificacin.
C C
HO OH
H H
O
C C C
H HO C H
OH
H
OH
2. Las flechas sealan cmo se rompen los enlaces de los grupos -OH y de los hidrgenos. Ruptura
catalizada por el cido clorhdrico. Se liberan tres molculas de H-OH
H H H H
C C
C C
HO OH HCl
3 H-OH + C C
O
H H H C
O
C C C
O C H
H HO
H
OH C H OH
H
OH
H H H H OH
OH C C
C C
H
O
O
+
C C
C C H C
H C O
HO
O O C H
C H
H H OH
HO
2
Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
H
+
R
R O R' R O R'
O + HO R C C
H
H O H O H
La mayora de los hemiacetales de cadena abierta no pueden aislarse porque son muy
inestables. Pero la mayora de los hemiacetales y hemicetales cclicos con anillos de cinco y
de seis miembros son estables y los azcares simples presentan stas formas, debido a una
reaccin intramolecular del grupo aldehdo o cetona con el hidroxilo del penltimo
carbono.
OH
H OH
O OH
O
HO H
H H HO
HO H
H
OH OH
H OH
OH H
Dglucopiranosa D-frutofuranosa
hemiacetal cclico hemicetal cclico
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
O
OH
H H OH OH
H
O HO H
HO H O
HO H HO H
H H OH HO H OH
OH H OH
H OH
H OH H
OH
D-(+)-glucosa
HCl CH3OH
OH
H H OH
O O
HO H HO
HO H H
H HO H O
OH OH H CH3
H H
O
CH3
Papel del cido clorhdrico: Acta como un catalizador: 1) protona el hidroxilo de la glucosa, unindose a los
pares electrnicos libres de oxigeno. En el producto de la reaccin, se observa el oxgeno protonado,
soportando una carga positiva. Como el oxgeno es muy electronegativo, el enlace carbono oxgeno se debilta:
OH OH
H H
O O
HO HO -
HO H
H
H + H Cl HO H
H
H + Cl
OH OH +
H OH H O
H H
2. Al debilitarse el enlace oxgeno-carbono, se rompe para estabilizar el oxgeno y produce agua. El metanol
estabiliza al carbocatin, unindose a travs de los pares electrnicos libres del oxgeno y se regenera el HCl,
que intervino en el proceso, para facilitar la reaccin, pero al finalizar la misma aparece sin cambio.
OH
H OH
H
O Cl
-
catalizador
HO
HO H
H + H3C O
HO H
O
+ H Cl
H H
H HO
OH +
H +
H O OH
H H H O O H
CH3
H
4
Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
OH
H
O
HO H
H
OH
HO O
OH
H H
carbohidrato aglicona
-
H O H O
H O H O
OH OH HO H
H OH H OH
OH HO H HO H HO H
HO H
H OH H
+
H OH
+ H OH
OH
H OH
H OH H OH H OH
H OH
OH OH OH
OH
H OH OH
H OH
H H OH
O
HO H Tautomerizacin OH
HO H
H OH
H OH
H OH H OH
OH OH
D-fructosa Enediol
5
Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
Reacciones con los reactivos de Tollens, Fehling, Benedict. Las aldosas y las cetosas frente a
agentes oxidantes como: los reactivos de Tollens (Ag (NH32NO3)/-OH), Fehling
(Cu+2/-OH/tartrato de sodio y potasio) y Benedict (Cu+2/-OH/citrato de sodio) se
oxidan y generan productos oxidados muy variables, debido a la isomerizacin de stos
carbohidratos en medio alcalino. El ion cprico, CU+2, se reduce hasta xido cuproso,
Cu2O, de color rojo. Los carbohidratos que dan sta prueba positiva, se
clasifican como carbohidratos reductores (azcares reductores). Los glucsidos no
dan la prueba, tampoco reaccionan aquellos carbohidratos donde el carbono anomrico
presenta un enlace con molculas diferentes, por ejemplo en la salicina.
O
H OH
HO H
H OH Ag(NH3)2NO3
H OH - Ag + NH3 + H2O + productos de oxidacin
OH
OH
H OH -
OH/citrato de sodio
H OH
OH
una cetosa
(1): los productos de oxidacin corresponden a la oxidacin en el carbohidrato, del grupo aldehido a
grupo cido carboxlico, pero por el medio alcalino, las aldosas y cetosas han experimentado
isomerizacin, entonces se obtiene una mezcla de stos ismeros oxidados.
Reacciones con agua de bromo. El agua de bromo es una solucin oxidante, ligeramente cida
(pH 6), por lo que los monosacridos no experimentan reacciones de isomerizacin. El
reactivo en referencia, oxida selectivamente el grupo aldehdo, -CHO, de las aldosas a
grupo COOH, formando los cidos adnicos (gluconicos, galactonicos, otros).
Experimentalmente se ha demostrado que el agua de bromo oxida especficamente a el
anmero , formando inicialmente una -aldonolactona. Este compuesto se hidroliza a
cido adnico el cual experimenta a continuacin el cierre del anillo para formar la -
aldonolactona. Ejemplo de la reaccin para la -dgalactopiranosa:
O
carbono
HO OH HO OH H OH
H O
O
H O Br2 H O HO H
-H2O OH H
HO HH OH HO H
H
O
HO H
OHH H OH HO H HO
H H2O H OH +H2O OH
OH
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
Reacciones con cido ntrico. El HNO3 concentrado, otro oxidante ms fuerte que el agua
de bromo, oxida los dos extremos del carbohidrato (la aldosa), formando los cidos aldricos
(glucarico, galactarico, entre otros). Ejemplo de la oxidacin de la glucosa:
O HO O
H OH H OH
HO H HO H
HNO3
H OH H OH
H OH concentrado H OH
OH O OH
D-glucosa Acido-D-glucrico
Con cido ntrico diluido se oxida solamente el extremo inferior de la molcula y se forman
los cidos urnicos (glucurnico, galacturnico, otros).
O O
H OH H OH
HO H HO H
HNO3 H OH
H OH
H OH diluido H OH
OH O OH
D-glucosa Acido-D-glucurnico
Con cido peridico, HIO4, en los carbohidratos ocurre una particin oxidativa. Por cada
enlace C-C, que se rompe se forma un enlace C-O en cada carbono. Cada uno de los
grupos internos H-C-OH, del carbohidrato se transforman en cido frmico y cada uno de
los grupos H2COH, se transforman en formaldehido. Los grupos C=O de las cetosas se
transforman en CO2. En la oxidacin del gliceraldehido con HIO4, se generan por
ejemplo dos equivalentes molares de cido frmico y un equivalente molar de
formaldehdo en cambio en la dihidroxiacetona se forman dos equivalentes de
formaldehdo y un equivalente de CO2 :
O
H O H acido frmico
OH
-------- O
H OH H cido frmico
--------- OH
H OH O
H formaldehido
H H
D-gliceraldehido
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
O
formaldehido
OH H
H
- - - - - - - - - - -- O
O O dixido de carbono
- - - - - -- - - -- - - --
H OH O
H formaldehido
H H
dihidroxiacetona
H 1 5
N 6
5
NO2
H N 6
H 4
O H
C O
C 2,4-DNFH 2,4-DNFH C
1 3
5 C N N 5
NO2 2
NO2
H C OH 6 H 6
4 4
HO C H
HO C H NO2
HO C H 1 3 3
H2N NH 2 H2N NH
1 HO C H
2
H C OH
H C OH NO2 NO2
H C OH
H C OH
H C OH H C OH
CH2
CH2
OH CH2
OH
OH
D-glucosa D-manosa
2,4-dinitrofenilosazona de la glucosa
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
Los cidos fuertes como el HCl y el H2SO4, concentrados hidrolizan a los polisacridos
hasta monosacridos y sobre estos ltimos actan deshidratndolos. El producto de
deshidratacin es un derivado del furfural que forma fcilmente complejos coloreados con
el naftol y con el resorcinol (reaccione de Molish y Seliwanoff). Estas reacciones se utilizan
para la identificacin cualitativa de los carbohidratos.
Formacin de steres. El grupo hidroxilo de los azucares se acopla con distintos cidos y
forma steres de importancia biolgica, como los esteres fosforilados. Los azucares deben ser
fosforilados para que la maquinaria metablica de las clulas logre su oxidacin. Otros
steres se forman con facilidad por la reaccin de los azucares con el anhdrido actico en
presencia de piridina y a 0C. Ejemplo de la fosforilain de la galactosa:
OH OH
HO HO
O O
H H H
H
H ATP ADP HO H H
HO H
OH OH
H OH Kinasa H O O
P
-
O
-
O
D-galactopiranosa D-galactopiranosa-1P
Reduccin. Las aldosas y las cetosas se reducen con hidrgeno en presencia de Nquel o
de Platino y tambin con otro reductor como el borohidruro de sodio, naBH4 para formar
alditoles (compuestos polihidroxidados), a partir de la glucosa se obtiene el glucitol.
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
Primera etapa:
El grupo carbonilo de la arabinosa (- C = O), se polariza (los electrones pi se
deslocalizan sobre el oxgeno). Es importante considerar que ste carbono con
hibridacin sp2, tiene una geometra plana y en consecuencia puede
experimentar reaccin con la misma probabilidad, por el lado derecho que por el
lado izquierdo.
Se producen dos moles, una donde el hidroxilo (del carbono sobre el cual ocurre
la reaccin) se encuentra a la derecha y otra donde el hidroxilo se encuentra a la
izquierda. Observe que ste tomo ya no posee doble enlace y queda cargado
positivamente (carbocatin)
H O H + OH HO +
C C C H
HO C H HO C H HO C H
H C OH + 2 H C N H C OH + H C OH + C N
H C OH H C OH H C OH
C C N
C C
H OH H OH H OH
H H H
Segunda etapa:
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
+ +
H C OH HO C H
HO C H HO C H
H C OH + C N + H C OH + C N
H C OH H C OH
C C
H OH H OH
H H
C N C N
H C OH HO C H
HO C H HO C H
H C OH H C OH
H C OH H C OH
C C
H OH H OH
H H
Tercera etapa:
Los nitrilos se oxidan fcilmente con hidrxido de bario, Ba (OH)2, en medio cido,
produciendo los adnicos correspondientes:
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
C N C N
H C OH HO C H
HO C H HO C H
H C OH H C OH
H C OH H C OH
C C
H OH H OH
H H
Ba(OH)2 H+
HO O
C HO O
C Estos hidroxicidos, en presencia
H C OH del cido mineral (catalizador),
HO C H experimentan con facilidad la
HO C H reaccin intramolecular, para
HO C H formar las -lactonas (steres
H C OH cclicos).
H C OH
H C OH El hidroxilo del carbono delta,
H C OH dona el protn a el oxigeno del
C grupo carbonilo y se forma el
H OH C carbocatin.
H H
H
OH El oxgeno que queda negativo,
+ estabiliza el carbocatin, cerrando
H el ciclo.
HO + H H
C O HO +
C O
H C OH
HO C H El ciclo formado, lactona,
HO C H alcanza el equilibrio con
HO C H la forma abierta
H C OH
H C OH
-
H C O -
H C O
C
H OH C
H H OH
H
H2C OH
CH2 OH
C O
C O H
H H
H C C O
C C O OH OH
OH H OH
OH C C
C C
H H
H OH
-glucolactona -manolactona
Cuarta etapa:
Los hidroxicidos de la etapa anterior, se reducen en presencia de una amalgama de
sodio, agua y un pH de 3,5. De sta forma finaliza la reaccin y se obtienen los
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
HO O HO O
C C
H C OH HO C H
HO C H HO C H
Na-Hg pH = 3,5
H2O
H O
H O C
C
HO C H
H C OH
HO C H
HO C H
H C OH
H C OH
H C OH
H C OH
C
C H OH
H OH H
H
D-glucosa D-manosa
DEGRADACION DE RUFF
REDUCCION DE LA CADENA DE CARBOHIDRATOS
Etapa Uno:
El carbohidrato se oxida con agua de bromo (Br2/H2O).
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
H O HO O
C C
H C OH H C OH
H C OH Br2 H C OH
H C OH H2O H C OH
C C
H OH H OH
H H
D-ribosa Acido-D-ribnico
(una aldopentosa) (un cido aldnico)
Etapa dos
El cido D-ribnico, en presencia de sulfato frrico (Fe2 (SO4)3), perxido de hidrgeno
(H2O2) y agua experimenta dos procesos:
1. Se descarboxila, pierde el grupo carboxlico como CO2
2. El carbono vecino al grupo cido se oxida hasta aldehdo, generndose el nuevo
azcar.
grupo carboxlico
HO O
C carbono vecino al grupo
carboxlico H O
H C OH C
H C OH
Fe+3, H2O2 H C OH
H C OH
CO2 + H C OH
C H2O
C
H OH H OH
H
H
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Elaborado por Berta Ins Delgado Fajardo
BIBLIOGRAFIA
Mathews C., Van Holden K., Aheom K. Bioqumica. Addison Wesley. ISBN:
8478290532. ISBN-139788478290536. US New York. 2002.
Macarulla J.M. y Goi F.M. Bioqumica Humana. Curso bsico. Editorial Revert.
ISBN: 8429155538. ISBN-13: 9788429155532. Espaa. 1994.
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