MEDIO DE ACUERDO A SU
CULTIVO COMPOSICIN
QUMICA
Placas preparadas: EMB Selectivo Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de utilizado para el aislamiento
color prpura. Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo selectivo de bacilos Gram
de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La negativos de rpido
diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o desarrollo y escasas
La esterilizacin del sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los exigencias nutricionales.
medio de cultivo indicadores eosina y azul de metileno; stos ejercen un efecto Permite el desarrollo de todas
reduce el azul de inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de las especies de la familia
metileno al color Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un caracterstico brillo Enterobacteriaceae.
naranja. El color metlico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con
prpura se restaura periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son
por agitacin. La incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como
presencia de un colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el
precipitado en el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en
medio esterilizado es este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que
normal y no debe ser Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de
removido, ya que es color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean
parte esencial del capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la
mismo. incorporacin de azul de metileno a sus membranas. En este medio se
obtiene adems, un buen desarrollo de especies de Salmonella y
Shigella.
Medio preparado: rojo Mac Conkey diferenial En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios Este medio se utiliza para el
prpura para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono aislamiento de bacilos Gram
fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los negativos de fcil desarrollo,
agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora aerobios y anaerobios
Gram positiva. facultativos. Permite
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la diferenciar bacterias que
colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo utilizan o no, lactosa en
neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales muestras clnicas, de agua y
biliares. alimentos. Todas las especies
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias de la familia
incoloras. Enterobacteriaceae
desarrollan en el mismo.
Medio preparado: rojo Sal y manitol Diferencial selectivo Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin Medio de cultivo selectivo y
salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol diferencial, utilizado para el
acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona aislamiento y diferenciacin
amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos, presentan de estafilococos.
colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias Es recomendado para el
sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio aislamiento de estafilococos
para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa. patognicos a partir de
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, muestras clnicas, alimentos,
constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el productos cosmticos y otros
manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que materiales de importancia
se encuentra en alta concentracin) es el agente selectivo que inhibe el sanitaria.
desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de Tambin, este medio puede
pH. utilizarse para el cultivo de
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y especies halfilas de Vibrio, si
fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH no se dispone de medios
del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. apropiados (TCBS Medio,
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no Medio Marino, etc.), aunque
fermentar el manitol. algunas especies pueden no
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se desarrollar.
visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo
color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como
colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o prpura.
Medio preparado: S-110 selectivo Staphylococcus aureus es un microorganismo que puede causar Es un medio selectivo para el 1-Fermentacin de manitol: agregar unas gotas de prpura de bromocresol a las zonas donde se
mbar claro, intoxicacin alimentaria, y para su aislamiento, pueden usarse aislamiento y diferenciacin encuentran las colonias sospechosas y en una zona de la placa donde no hay desarrollo bacteriano.
opalescente con distintos medios slidos selectivos: Baird Parker Medio (B02-141- presuntiva de estafilococos, Comparar el color desarrollado entre estas dos zonas.
precipitado. 05/06), Manitol Salado Agar (B02-118-05/06), o Estafilococo Medio 110 en base a la produccin
(B02-105-05/06). de pigmentos, la Prueba positiva: cambio de color del indicador del medio en la zona de crecimiento bacteriano. El medio sin
En el medio de cultivo, el extracto de levadura y la triptena aportan fermentacin de manitol y la desarrollo de microorganismos permanece sin cambio.
los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. La gelatina es el hidrlisis de gelatina, a partir
sustrato de la enzima gelatinasa. La lactosa y el manitol son los de alimentos y otras Prueba negativa: no hay diferencias de color entre las zonas de crecimiento bacteriano y la zona sin
hidratos de carbono fermentables. El cloruro de sodio, se encuentra en muestras. inocular.
alta concentracin, para inhibir el desarrollo de la flora acompaante
excepto Staphylococcus spp., logrndose as un medio selectivo para el 2-Hidrlisis de la gelatina: cubrir la placa 5 ml de una solucin saturada de sulfato de amonio y colocar en
desarrollo de estos microorganismos. estufa, a 35-37 C, en aerobiosis durante 10 minutos.
Las ventajas de este medio por sobre los otros mencionados
anteriormente, es que permite, en la misma placa, Positiva: halo transparente alrededor de las colonias.
obtener pruebas de identificacin presuntiva de especie como ser:
desarrollo de pigmentos, fermentacin de manitol e hidrlisis de la Negativa: ausencia de halo transparente alrededor de las colonias
gelatina.
Algunas cepas de Enterococcus faecalis, fermentadoras de manitol, pueden desarrollar en este medio.
-Para realizar la prueba de la coagulasa, se aconseja subcultivar las colonias sospechosas en medios slidos
o lquidos no selectivos, por ejemplo: Agar Nutritivo, Infusin Cerebro Corazn, Triptosa Fosfato Caldo,
debido a que si se realiza directamente de este medio de cultivo, puede afectarse la deteccin por el alto
contenido de cloruro de sodio.
Medio preparado: rojo SS Selectivo y diferencial Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. Medio de cultivo utilizado
naranja. Salmonella La selectividad, esta dada por la sales biliares y el verde brillante, que para el aislamiento de
Shigella Agar. inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayora de los Salmonella spp. y de algunas
coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. especies de Shigella spp. a
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin partir de heces, alimentos y
de cido sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio. otros materiales en los cuales
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de se sospeche su presencia.
desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de
pH, obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de
lactosa, crecen bien en el medio de cultivo, y producen colonias
transparentes.
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con
centro negro debido a la formacin de sulfuro de hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la
muestra en Selenito caldo
Medio preparado: AN Basico Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el Medio de cultivo utilizado Bueno
mbar claro a medio Agar Nutritivo cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos para propsitos generales, Excelente
ligeramente nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La para el aislamiento de
opalescente. pluripeptona es la fuente de carbono y nitrgeno para el desarrollo microorganismos poco
bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento exigentes en lo que se refiere
con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de a requerimientos nutritivos.
microorganismos exigentes. Su uso est descripto en
muchos procedimientos para
el anlisis de alimentos, aguas
y otros materiales de
importancia sanitaria.
Estas bacterias
necesitan factores de
crecimiento, como
el NAD y hematina,
componentes que
podemos encontrar
dentro de los
glbulos rojos; por lo
tanto, un
prerrequisito lgico
para el crecimiento
es la lisis de los
glbulos rojos. El
agar se llama as
debido a su parecido
con el chocolate,
pero no contiene
nada de este.