Mungkin kita akan tahu kebanyakan fungsi dari produk protoonkogen adalah untuk
faktor pertumbuhan atau reseptor faktor pertumbuhan karena mereka dipelajari jauh sebelum
kita mengetahui adanya protoonkogen. Sebagai contoh, dengan menganggap bahwa reseptor-
reseptor faktor pertumbuhan dikode oleh c-erbB dan c-fms. Mereka mengikat faktor
pertumbuhan pada site pengikatan dan mengirimkan sebuah sinyal, barangkali lewat sebuah
peralihan alosterik, menuju site intaseluler protein kinase. Demikian, pada gilirannya, harus
mengaktifkan kinase dan menginduksi fosforilasi kunci protein intraseluler. Pengaktifan site
tirosin kinase mungkin terlibat dalam autofosforilasi, karena reseptor protein kinase ini
diperlihatkan untuk menjalani autofosforilasi balik dari residu tirosin khusus dekat COOH
akhir dari protein. Reseptor faktor pertumbuhan epidermal juga diketahui untuk menjalankan
fosforilasi oleh protein kinase sel lain (seperti protein kinase C) dan untuk interaksi dengan
protein faktor lainnya mengatur aktivitas itu.
c-src protein dan produk beberapa protogen yang berkaitan juga mempunyai kegiatan
protein kinase khusus tirosin. Meskipun demikian, protein kinase ini bukanlah protein
transmembran, tetapi cukup diasosiasi dengan permukaan sitoplasma dari membran plasma.
Barangkali, protein kinase ini juga terlibat dalam tranduksi sinyal, tetapi kita tidak tahu
apakah sinyal-sinyal yang mereka respon atau bagaimana sinyal ini ditransmisikan. Sebagai
sebuah model kerja, hal itu kelihatan beralasan untuk mengasumsikan bahwa fosforilasi dari
kunci protein target intraseluler adalah cara yang paling mungkin dari aksi produk
protoonkogen ini.
pjun dan pfos Sebagai Aktivator dari Transkripsi Gen
Produk dari dua protoonkogenes, yaitu c-jun dan c-fos, baru-baru ini ditunjukkan
identik dengan protein yang sebelumnya telah dibuktikan komposisi kompleks nuklir yang
mengaktifkan transkripsi gen spesifik. Produk c-jun sekarang dikenal sebagai faktor
transkripsi AP-1, yang pertama kali diidentifikasi sebagai faktor nuklir yang diperlukan untuk
transkripsi yang diinduksi oleh senyawa tumor tertentu. Hal itu telah ditunjukkan untuk
mengikat secara khusus elemen enhancer dalam genom virus simian 40 dan pada gen IIA
manusia. Pengikatan situs DNA untuk pjun memiliki urutan konsensus inti TGACTGA.
Bahkan lebih baru, produk dari c-fos protooncegenes telah ditunjukkan untuk membentuk
kompleks ringan dengan produk gen-c-jun.
Sebuah model untuk modus tindakan dari kompleks produk yang mengandung protein
c-jun dan c-fos adalah diketahui bahwa produk-produk ini biasanya ditunjukkan oleh
protooncegenes hanya sebagai c-jun dan c-fos. Trans-aktivasi transkripsi dari gen responder
oleh kompleks c-jun/c-fos kini telah ditunjukkan di beberapa laboratorium. Penelitian ini
diarahkan pada pengidentifikasian lebih dari gen yang diatur oleh kompleks c-jun/c-fos dan
menentukan faktor apa yang mengatur ekspresi c-Jun dan c-Fos tersebut.
Onkogen yang ada di dalam sel kanker mungkin dapat diidentifikasi oleh kemampuan
mereka untuk mengubah sel tumbuh dalam situasinya ke keadaan neoplastik dengan cara
eksperimen transfeksi. Genom pada vertebrata terdiri dari tiga bagian, tetapi mereka erat
terkait dengan protooncegenes ras. c-H-ras dan c-K-ras, yang erat terkait dengan onkogen v-
ras dari strain Harvey dan Kirsten, yang berhubungan dengan virus sarcoma pada tikus.
Selanjutnya yang ketiga, N-ras, yang belum memiliki gen homolog dalam setiap genom
retroviralnya. Ketiga ras protooncegenes selular dikenal untuk mengkodekan GTP-binding
protein dengan aktivitas GTPase. Sayangnya, fungsi dari protein ras masih belum diketahui
dengan jelas.
Ketiga protooncogen ras seluler ini telah terbukti mengalami mutasi terhadap turunan
onkogenik yang dapat dideteksi melalui eksperimen transfeksi dengan menggunakan DNA
genomik dari tumor induksi spontan atau karsinogen. Faktanya, sebagian besar sel NIH 3T3
yang mentransformasikan onkogen yang telah terdeteksi pada sel tumor manusia ternyata
merupakan varian dari salah satu dari tiga protooncogen ras seluler. Oncogene seluler
pertama yang dicirikan secara rinci berasal dari karsinoma kandung kemih manusia yang
disebut EJ. Bila onkogen seluler hadir di sel tumor kandung kemih EJ ini diklon dan
diurutkan, itu ditemukan menjadi turunan dari protooncogen c-H-ras. Anehnya, onkogenisitas
gen mutan EJ c-H-ras ditemukan akibat substitusi pasangan basa tunggal. Artinya, perbedaan
pasangan basa tunggal ditunjukkan berkorelasi dengan kemampuan atau ketidakmampuan
kedua gen untuk mengubah sel NIH 3T3 yang tumbuh dalam kultur. Onkogen dihasilkan dari
protooncogene dengan transversion GC TA. Mutasi ini menghasilkan substitusi raline
untuk glisin yang ada sebagai asam amino bobot pada protein c-H-ras normal.
Setelah karakterisasi onkogen c-H-ras hadir dalam garis karsinoma EJ kandung kemih
manusia, varian onkogenik dari tiga ras protooncogen gen telah terdeteksi dan ditandai dalam
sejumlah besar garis sel kanker mamalia yang berbeda. Ini termasuk sel-sel dari berbagai
macam kolon paru-paru, tumor mammae dan kandung kemih plus neuroblastomas,
fibrosarcomas. sebuah teratocarcinoma, melanoma dan leukemia promyelictic. Ketika
onkogen yang ada dalam sel kanker ini diklon dan diurutkan, semuanya ditemukan sebagai
varian salah satu dari tiga protooncogen c-ras. Selain itu, semua varian alel ras dengan
potensi onkogenik yang diuji oleh eksperimen transfeksi NIH 3T3 menghasilkan substitusi
asam amino pada satu dari tiga posisi asam amino dalam produk gen ras. Semua mutasi yang
mengandung onkogenisitas pada gen ras melibatkan satu atau lebih dari tiga kodon: kodon
nomor 12, 59, dan 61. Seperti yang diharapkan, banyak alel mutan dihasilkan dari substitusi
pasangan nukleotida yang menghasilkan perubahan asam amino dasar menjadi asam amino
netral atau asam atau sebaliknya dan dengan demikian mengubah muatan produk gen ras
mutan.
Meskipun kita tidak tahu bagaimana mutasi gen c-ras ini menimbulkan
onkogenisitasnya, kita dapat sangat yakin bahwa hal itu melibatkan aktivitas yang bergantung
pada asam amino yang ada pada posisi 12, 59, dan 61 pada ras polipeptida. Menariknya,
mutasi ini tampaknya tidak mengubah sifat pengikat GTP protein ras, namun mengurangi
atau menghilangkan aktivitas GTPase dari protein ini. Namun, GTP yang terikat pada protein
G kemudian dihidrolisis oleh aktivitas GTPase sekitar, mengembalikan protein ke keadaan
tidak aktif. Jika protein ras bertindak dengan mekanisme yang sama, kehilangan mutasi
aktivitas GTPase dapat mengunci protein ras dalam bentuk aktif, yang dapat memicu
pembelahan sel terus-menerus dan pembentukan tumor. Apapun fungsi ini, tampaknya aman
untuk menyimpulkan bahwa produk gen cras memainkan peran kunci dalam pengendalian
pembelahan sel.
Translokasi Breakpoint pada Lokus Protoonkogen
Translokasi (kerusakan dan transfer sebagian kromosom untuk kromosom
nonhomolog) dan penghapusan atau defisiensi (kerusakan atau hilangnya bagian kromosom)
melibatkan kromosom spesifik yang sering terjadi di breakpoint pada posisi yang sama pada
kromosom, yang telah diamati pada jenis tertentu dari sel kanker. Contoh paling terkenal
yang disebut kromosom "Philadelphia", perubahan kromosom 22 yang berupa kehilangan
segmen besar dari lengan panjang. Kromosom abnormal ini telah ditemukan dalam studi
hingga 90% dari pasien yang menderita jenis kanker tertentu yang disebut leukimia
myelogenous kronis. Sekarang lokasi kromosom beberapa protodiogen seluler manusia telah
ditentukan (Gambar 17.7), korelasi mencolok terlihat antara lokasi mereka dan titik
pemaparan kromosom translokasi dan kekurangan yang diamati pada jenis sel kanker
tertentu.
Jenis kanker lain yang secara konsisten (> 80 persen) terkait dengan jenis translokasi
tertentu adalah limfoma Burkitt, kanker antibodi yang memproduksi limfosit B. Limfoma ini
sangat umum terjadi di daerah tertentu di Afrika dan sering berkembang pada individu yang
terinfeksi virus Epstein-Barr. Translokasi yang diamati pada sel B pasien limfoma Burkitt
selalu melibatkan kromosom 8 dan satu dari tiga kromosom (2, 14, dan 22) yang membawa
gen yang mengkodekan rantai antibodi (lihat Bab 16). Translokasi yang melibatkan
kromosom 8 dan 14 adalah yang paling umum, kromosom 14 membawa gen antibodi rantai
berat. Limfoma sel B ini umumnya mensekresikan antibodi, sehingga gen antibodi rantai
berat diekspresikan dalam sel tumor ini.
Kejadian translokasi kromosom lainnya juga telah terdeteksi dengan frekuensi tinggi
pada jenis sel kanker lainnya, walaupun tidak ada yang setinggi kejadian karena translokasi
yang terkait dengan leukemia myelogenous kronis dan limfoma Burkitt. Untuk pembahasan
tentang penyimpangan kromosom yang terdeteksi pada berbagai jenis sel kanker, pembaca
dirujuk ke review yang sangat bagus oleh Le Beau dan Rowley (lihat Ref. Erences).
Para ilmuwan telah mengetahui lebih dari satu dekade bahwa virus tumor RNA adalah
dua jenis yang berbeda: (1) virus transformasi akut seperti virus sarkoma Rous yang
membawa onkogen seperti v-arc dan (2) pelepas cairan yang lambat yang tidak membawa
onkogen dan menginduksi transformasi sel ke keadaan neoplastik hanya setelah
diperpanjang. periode laten (biasanya beberapa bulan). Pertanyaan kunci adalah bagaimana
retrovirus yang tidak membawa onkogen ini dapat menyebabkan transformasi neoplastik.
Bukti luas sekarang menunjukkan bahwa virus yang mentransformasi lambat paling sering
menginduksi kanker dengan mengintegrasikannya sebagai provirus yang berdekatan dengan
protooncogen dan, dengan melakukan hal tersebut, mengaktifkan protooncogen ini ke
keadaan "overexpressed" (gambar 17.10). Terminal Iong mengulangi (LTRs) dari bentuk
provirus DNA dari virus tumor RNA (lihat Bab 9 Gambar 9.13) mengandung elemen
penambah / promotor yang sangat kuat, dan integrasi prowirus ini dapat menyebabkan
peningkatan tingkat transkripsi gen yang berdekatan.
Salah satu contoh aktivasi retroviral yang paling terkenal protooncog seluler normal
melibatkan limfoma sel B yang diinduksi oleh virus avian leukosis (ALV). Genom ALV
tidak mengandung onkogen. Namun, ALV adalah patogen serius pada ayam: ini
menghasilkan banyak jenis kanker pada kawanan yang terinfeksi, dengan limfoma menjadi
yang paling umum. Analisis molekuler DNA genom dalam limfoma ini menunjukkan bahwa
dalam banyak kasus, provirus ALV telah terintegrasi berdekatan dengan protoocongene c-
myc dan memiliki ac transkripsi bertenaga sehingga tingkat transkrip c-myc 30 sampai 100
kali lipat lebih tinggi daripada sel normal. Selain itu, transkrip ini ditunjukkan mengandung
rangkaian ALV LTR di ujung 5 ', yang menunjukkan bahwa transkripsi dimulai dari
promotor LRT proviral (Gambar 17,10). Hasil ini sangat menunjukkan bahwa limfoma
diakibatkan oleh berlebihnya c-myc yang disebabkan oleh integrasi LTRs prowiral.
dengan enhancer / promotor kuat yang berdekatan dengan c-myc.