UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Facultad de Qumica e Ingeniera Qumica

E.A.P Ingeniera Qumica

I. INTRODUCCIN

CROMATOGRAFA
Es una tcnica muy
verstil que presenta
distintas variantes.

Se puede
realizar con dos Hay dos fases y
objetivos stas cumplen la ley
diferentes del reparto.
(preparativo y
analtico) que no
son excluyentes.

ESTACIONARIA
MVIL Si el componente se
PREPARATIVO La fase mvil se encuentra la mayor
ANALTICO mueve respecto de
Separa los parte en esta fase, el
Identifica y la estacionaria. El producto queda
componentes de una cuantifica las producto se mueve
mezcla. retenido y su salida es
distintas sustancias rpidamente. mucho ms lenta.
que la componen.

CROMATOGRAFA
CROMATOGRAFA EN COLUMNA
PLANA Se sita dentro de una
Se sita sobre una columna. Segn el
superficie plana. fluido:
1) C. en papel 1) C. de lquidos
2) C. en capa fina 2) C. de gases
3) C. de fluidos
supercrticos

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II. PARTE TERICA

La cromatografa es una tecina de anlisis qumico utilizada para separar, purificar y

determinar sustancias puras de mezclas complejas. La cromatografa es probablemente
la ms verstil de las tcnicas de separacin pues es aplicable a cualquier mezcla soluble
o voltil.
Una clase especial de cromatografa, es el mtodo de la cromatografa de papel, que
resulta especialmente adecuada para la separacin de aminocidos. Como soporte de
la fase acuosa acta la celulosa en forma de papel de filtro especialmente preparado,
que puede aceptar humedad en un 6 o un 7 por ciento. Una gota de la mezcla de
sustancias disueltas se sita cuidadosamente en la parte inferior del papel y se seca. El
papel se somete, en una cubeta cerrada pues este tipo de cromatografa se utiliza para
la separacin de sustancias muy polares que requieren el uso de eluyentes como son
mezclas de agua, alcoholes, cido actico, hidrxido de amonio u otros disolventes de
polaridad semejante. Como consecuencia de la actividad capilar del papel de filtro, se
absorbe la disolucin y la mezcla de sustancias se separa en una direccin (cronograma
unidimensional). En el caso de que este proceso no sea suficiente para la separacin, se
repite la misma operacin con el mismo disolvente en una direccin perpendicular a la
primera (cronograma bidimensional). La relacin entre la distancia recorrida por la
sustancia desde el punto de partida y la distancia recorrida por el frente del disolvente
se denomina valor Rf. Este valor depende de distintas variables, como temperatura,
composicin de ambas fases, composicin del papel, etc.
Otra clase de cromatografa es la cromatografa en columna, en la cual el adsorbente
se halla en el interior de la columna de vidrio, metal o plstico. Los adsorbentes ms
comunes son la almina y el gel de slice, pero se han empleado a su vez materiales tales
como arcilla, carbn vegetal, almidn o azcar. Las bases tericas de la separacin de
mezclas por cromatografa en papel son las mismas que las de la cromatografa en
columna. As, los compuestos menos polares se unen (adsorben) con menos fuerza al
adsorbente (fase estacionaria) que los ms polares, por lo tanto, se mueven ms
rpidamente cuando la mezcla se eluye con algn disolvente (fase mvil). Los disolventes
polares movern los componentes de la mezcla ms rpidamente que los disolventes
menos polares. Si la polaridad de los disolventes es demasiado alta, todos los
componentes se arrastrarn con el disolvente y no habr separacin.

La principal diferencia de las cromatografas en papel con la cromatografa en columna

es que, en este mtodo, el adsorbente se usa como una capa delgada sobre un soporte
(vidrio, aluminio, plstico, etc. O papel); como resultado, slo puede separase una
cantidad pequesima de mezcla, aunque, por otra parte, la separacin puede ser ms
eficaz, ya que la relacin de cantidad de absorbente/muestra es mucho mayor. Debido
a esto, la cromatografa en columna es preparativa (permite separar cantidades
apreciables de los componentes), mientras que la cromatografa en papel es ms bien un
mtodo analtico. Otra diferencia importante es que mientras que la fase mvil desciende
por gravedad en la cromatografa en columna, en las de capa delgada y en papel
asciende por capilaridad.

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III. PARTE EXPERIMENTAL

A. MATERIALES , REACTIVOS Y MUESTRA

VASOS DE PAPEL DE MORTERO

PRECIPITADO FILTRO EN CON PILLN
TIRAS

LUNA DE BALANZA COLUMNA DE

RELOJ VIDRIO

CINTA
PROBETA ADHESIVA

cido metanlico cido Actico

Flores secas

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B. PROCEDIMIENTO
B.1. CROMATOGRAFIA DE PAPEL

- Se calent las flores en una luna de reloj para secarlas y despus triturarlas
con el mortero hasta obtener polvos.

Figura a.- Secado de la muestra

- Se pes la muestra triturada y se le agrego 2 mL de cido clorhdrico

metanlico 1%.
- Se presion la muestra triturada hasta que el lquido quede fuertemente
coloreado.

Figura b.- Muestra coloreada

- Cortar un papel filtro con las dimensiones adecuadas para entrar en la

probeta; dibujando una lnea a 3 cm del extremo superior y una lnea a 1.5
cm del extremo inferior.
- Se humedeci la punta de un lpiz con el fin de agregar una mancha del
lquido en el punto medio de la lnea inferior del papel filtro.

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Figura c.- Tira de papel manchada

- Se agreg cierta cantidad de cido actico en la probeta, teniendo en cuenta

que no debe llegar a humedecer la lnea inferior del papel.

Figura d.- Tira de papel en probeta

- Finalmente se introdujo la tira de papel filtro en la probeta y se sell la

probeta con cinta scotch.

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B.2. CROMATOGRAFIA DE COLUMNA

- Se sell el extremo inferior de la columna de vidrio con algodn, y se llen de

azcar fina hasta el tope.
- Se sujet la columna a un matraz universal, quedando en posicin vertical.
- Se agreg la muestra con el lquido en el tope agregndole el reactivo BAW,
esperando finalmente que caiga una gota por la parte inferior.

Figura e.- Columna de vidrio tomando coloracin

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IV. CLCULOS EXPERIMENTALES Y RESULTADOS

IV.I. CROMATOGRAFIA EN PAPEL:

Se obtuvo una coloracin verdosa dbil en el papel filtro.

Distancia recorrida por el compuesto orgnico: 4.3 cm.
Distancia recorrida por el solvente: 6.2 cm.
Calculando el Rf:

4.3
= = 0.69
6.2

IV.II. CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

En la cromatografa de columna, se puede notar una coloracin verde muy dbil sobre
el azcar. No se obtuvieron datos puesto que el lquido no baj por el extremo inferior
de la columna.

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V. DISCUSIN DE RESULTADOS

- En un principio se tuvieron flores purpuras; sin embargo, al calentarlas demasiado,

estas perdieron esa coloracin. Esto simplemente alter la visibilidad de la muestra,
pues an se mantena el pigmento verde caracterstico de las plantas, lo que dio una
coloracin ms dbil y poco visible en la cromatografa en papel y en la
cromatografa en columna.
- En el papel de cromatografa se puede notar una desviacin del compuesto problema.
Esto se debe a que se verti el lquido coloreado fuera del punto de la lnea inferior
del papel filtro.

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VI. CONCLUSIONES

1) Como hubo un error al adicionar cido actico en la columna de vidrio en vez de

HCl metanlico, la experiencia quedara perjudicada ya que el cido actico se
evapora rpidamente al contacto con el medio externo.
2) Al momento de pintar la tira (papel de filtro) con los pigmentos orgnicos hubo un
error al colocar los pigmentos en las partes externas del centro (punto marcado con
el lpiz) esto trae consigo que el Rf no se pueda determinar con exactitud.

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VII. RECOMENDACIONES

1. Como las flores deben estar bien secas; si fuera el caso de que la estufa se
encontrar en mal estado, para secar las flores se puede llevarlas al microondas por
un tiempo determinado o calentarlas en una cocinilla, teniendo en cuenta que no debe
haber un contacto directo pues las flores terminaran quemndose.
2. En la campana extractora, se debe prestar mucha atencin al reactivo el cual se
necesita, ya que se puede confundir los recipientes en los cuales est cada uno (en
este caso las probetas, que nos ayudan a medir el volumen pedido de cada reactivo)
y as malograr la experiencia.

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VIII. BIBLIOGRAFA

1. John McMurry, QUMICA ORGNICA, 7. Edicin.

2. Editorial Lumbreras, Qumica. Tomo II.

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