Anlisis Cualitativo de Sales biliares

De Gracia, Carolina 4-786-1387

Romero, Gnesis 4- 788-2060
Montezuma, Rodrigo 4-799-17

Curso de Bioqumica (QM 106), Escuela de Enfermera, Facultad de

Enfermera, Universidad Autnoma de Chiriqu, David, Chiriqu, Republica de
Panam. e-mail Carolina23-26@hotmail.es

Resumen
En la prctica realizada para el laboratorio de anlisis cualitativo de sales biliares, se
utilizaron muestras de bilis de cerdo, aceite de oliva extra virgen, HNO3 entre otros, para a
obtencin de los resultados experimentales. Al momento de realizar de prueba de Gmelin, se
tuvo que filtrar la bilis de la vescula biliar para colocarla en papel filtro y as obtener una
mejor vista de los resultados, en donde se comprob lo que deca la teora con los resultados
obtenidos. Para la prueba de Pettenkofer, se procedi a aadir un pequea muestra de
sacarosa ms cido sulfrico, dando asi una formacin de capas, en la prueba de Hay se
observa que el azufre se va al fondo dando as una prueba positiva ya que hay presencia de
cidos biliares, y finalizando con la prueba de emulsificacion de la bilis, en esta se form una
emulsin en cada muestra, concluyendo as que las sales biliares forman parte de la digestin
en nuestro organismo ayudando a una mejor absorcin de los alimentos en nuestro cuerpo.

Objetivos: Palabras claves: Bilis,

Aplicar algunos ensayos para
la deteccin de pigmento y
sales biliares
Reconocer las propiedades
emulsificante de las sales
biliares.
emusilsificacion, cidos biliares,
vescula.
Marco terico
La bilis en un lquido amarillento, dorado
debido a la presencia de la bilirrubina, esta
secrecin es producida por el hepatocito,
tiene una densidad aproximada de 1,01; un
pH comprendido entre 5 a 7-8, y un
contenido de solidos que vara del 2-3%
segn se trate de bilis heptica o bilis
concentrada de la vescula biliar. El color
de la bilis recin producida se torna
verdoso al encontrase en la vescula,
debido a la oxidacin de la bilirrubina en
biliverdina. Al almacenarse la bilis, todos
los pigmentos presentes en ella oscurecen
a mediada que van sido oxidados, pasando
del amarillo verde al azul y finalmente al
color caf.
Los principales componentes de la bilis
son: Lecitina PC, como el fosfolpido ms
abundante; colesterol libre; iones sodio,
potasio, calcio y cloro; cidos biliares
conjugados en forma de sales biliares; todo
en presencia de pequeas cantidades de
bilirrubina y albumina y algunas enzimas
entre otras a la fosfatasa alcalina.
La lecitina es el fosfolpido principal de la
bilis, posee dos cidos grasos de cadena
largo con carcter hidrofbico; adems de
la fosforilcolina, hidroflico; no posee gran
capacidad de solubilizacin pero si es
posible que se renan varias molculas que
oponen sus grupos hidrofbicos e
hidroflicos y dada la capacidad de estos
de hidratarse se logra la consistencia de un
gel, por la formacin de un cristal lquido.
El colesterol compuesto con la estructura
del ciclopentano pehidrofenantreno, es
hidrofbico en la mayor parte de su
molcula, a excepcin del carbono 3 que
posee un OH y por ende en esa regin esta
molcula es hidroflica. Los cidos biliares
derivados del colesterol por
modificaciones en la cadena lateral:
disminuye su longitud, carboxilacion de
esta y saturacin del ncleo esteroide, los
que para su utilizacin en la bilis son
transformados por el hgado, al conjugarse
con taurina y glicina y dan lugar a las sales
biliares, los cidos tauroclico y gliclico,
que se encuentran en relacin de 3:1 entre
ellos y tienen una funcin antiptica, pues
poseen una parte de la molcula hidroflica
y otra hidrofbica, condicin que les
permite ser hidrosolubles y con capacidad
emulsificante. Durante la emulsificacin
disminuye la tensin superficial de los
lpidos, se fragmentan, fsicamente en
pequeas partculas, aumentan
considerablemente su superficie expuesta
y de esta manera se facilita su accin
enzimtica.
Las sales biliares luego de ser sintetizadas,
son secretadas por el canalculo biliar,
almacenada por la vescula biliar, pasan al
intestino para iniciar la digestin, transitan
por el intestino y posteriormente son
transportadas de nuevo por la vena porta al
hgado y ser secretados de nuevo por la
bilis estableciendo esto la circulacin
enteroheptica que permite que las sales
biliares sirvan de vehculo de algunos
cidos grasos facilitando su transporte. Las
sales biliares constituyen tambin en
balancear junto con las lecitinas, el
equilibro de mantener disuelto el
colesterol libre y con ello evitar la litiasis.
(Herreras, Daz y Jimnez; 1996).
Materiales y Reactivos
Equipo
Equipo cantidad capacidad
Probeta 1 50 mL
Balanza 1 250 g
Matraz 3 100, 250 y
aforado 500 mL
cuchara 1 -
 Materiales Cantidad Ingestin: puede
destruir los tejidos
bilis - gastrointestinales.
vesicular Produce salivacin, sed
intensa, dificultad para
Aceite de -
tragar, dolor y shock.
oliva
Sacarosa -
H2SO4 Inhalacin: causa
al 5% usualmente dolor de
garganta y tos. Puede
Reactivos: producirse un desarrollo
rpido de dificultades
Reactivo Toxicidad respiratorias con dolor
Sacarosa En contacto en el pecho, disnea,
con ojos: espasmos larngeos, y
causa edema pulmonar. La
irritacin. lesin de los pulmones
En contacto puede progresar a lo
con la piel: largo de varias horas,
puede causar fallo
causa irritacin
respiratorio.
leve.
Contacto con los ojos:
Ingestin: causa quemaduras
podra causar graves y prdida de
vmitos, visin.
diarrea, Contacto con la piel:
deshidratacin causa quemaduras
y problemas de profundas en la piel y en
tensin las membranas mucosas.
sangunea. Ingestin: Causa dao
inhalacin: corrosivo grave de las
puede ser membranas mucosas de
nocivo u la garganta y del
causar esfago.
irritacin leve. Azufre
HNO3 Inhalacin:
Destruccin de las
membranas nasales,
asfixia.
Contacto con los ojos: Parte experimental
Conjuntivitis temporal,
ceguera. A. Prueba de Gmelin
Contacto con la piel:
Irritacin, quemaduras
 Espolvorear una Si el azufre se
pequea deposita en el
cantidad de fondo del tubo,
azufre sobre la hay presencia de
bilis diluida. acidos biliares.

Filtrar 1 o 2 Doble el
ml de bilis Cuidadosa papel filtro D-Prueba de emulsificacion de la bilis
vesicular mente y observar
diluida. colocar los circulos
Quitar el media gota concentrado
papel filtro de HNO3 s Aadir 5 gotas de
del embudo concentrado coloreados Aadir una gota bilis al tubo #1; 5
y colocarlo sobre el que rodean de aceite de oliva gotas de la
invertido vertice del el centro a 3 ml de agua solucion de sales
sobre la cono. del papel contenidos en biliares al tubo
mesa. filtro. cada uno de los #2 y 5 gotas de
tubos de ensayo. bilirrubina al
tubo #3.

Observar cuando
agitar bien cada se forma la
tubo. emulsion en cada
B. Prueba Pettenkofer tubo.

Agregar una
pequea Resultados:
porcion de esta Cuadro 1
A 1 ml de bilis mezcla sobre
diluida aadir 5 una pequea Prueba de Gmelin
gotas de cantidad de
solucion al 5% Acido Sulfurico Material +/- Observacin
de sacarosa. concentrado, de
tal manera que Biis + Se observa coloracin verde-
se formen 2 diluida azulada
capas.

Cuadro 2
Prueba De Pettenkofer
La aparicion de
un anillo rojo Material +/- Observacin
No agitar.
indica sales
biliares. Biis + Se observa la presencia de dos
diluida capas.
+ azufre

C- Prueba de Hay
 Cuadro 3
Prueba de Hay
Material +/- Observacin
Biis + Se observa claramente
diluida como el azufre se
mantiene en el fondo.
Cuadro 4
Prueba de Emulsificacion de la bilis
Material +/- Observacin
Biis + Se observa emusilsificacion
diluida en la bilis diluida y la otra.
Discusiones
a- En la prueba de Gmelin pudimos
observar que la muestra de bilis
diluida a la cual se le aadi HNO3
al una coloracin azul-verdosa
dando positiva la prueba. Es
probable la presencia de lutena. Si
el lquido contiene bilis
concentrada, se observa una
coloracin violeta.
Esta prueba a su vez es de gran nos permite
determinar la presencia de sales biliares en
lquidos como la orina, en donde la
presencia de estas sales y pigmentos
biliares representa la presencia de alguna
anormalidad en la reabsorcin de los
mismos y por lo tanto la mayor excrecin
de estos compuestos.
b- La Prueba de Pettenkofer se utiliza
para probar la presencia de sales
biliares. En esta prueba pudimos
observar que se form un anillo
rojo entre ambas capas (muestra a
analizar arriba y abajo el cido
sulfrico aadido), la formacin de
este anillo indica la presencia de
sales biliares en la muestra de bilis
que se utiliz. Esto se debe a que la
sal biliar reacciona con el
hidroximetilenofurfural y forma
una solucin de color rojo. El
hidroximetilenofurfural se forma
del azcar que deshidrata con
cido sulfrico. El cido actico, y
aquellas sustancias que se
convierten en azcar mediante
cido sulfrico, cumplen la misma
funcin que el azcar. Al igual que
tambin es notable como el azufre
se va al fondo del vaso.
c- En la prueba del poder de
emulsificante de la bilis, En el tubo
1 se pudo observar que al aadir
bilis a un volumen igual de agua,
esta primera fue soluble en agua.
Esto se debe a que la bilis es una
disolucin polar; puesto, que en su
composicin se encuentran cidos
biliares y sus conjugados, sales
biliares, que le transmiten cierta
polaridad a la bilis; formando estos
compuestos enlaces por puentes de
hidrgeno con el agua y de esta
manera siendo solubles en ella.
En el tubo al cual se le aadi al cierta
cantidad aceite de oliva. Se pudo observar
que estos formaron una mezcla insoluble,
esto se debe a que el agua es un compuesto
no polar mientras que el aceite es un
compuesto no polar.
En el tubo al cual se le aadi a un
volumen de bilis, un volumen igual de
aceite; se pudo observar la formacin de
pequeas gotas dispersas de aceites a esto
se le llama emulsin. Una emulsin,
cientficamente es la dispersin o mezcla
de dos lquidos inmiscibles, en la cual la
fase interna, en este caso el aceite, se
mezcl en forma de gotitas con la fase
externa, el agua.
La bilis, es una sustancia liberada por el Clnicas de la Universidad de
hgado, y participa en la digestin. Iowa, Iowa City, recuperado el 26
Tambin tiene una funcin emulsionante de junio de 2014 en:
como el detergente en el tubo 2. La bilis s3.gi.org/patients/gihealth/pdf/bili
emulsiona los cidos graos o lpidos, ary_sp.pdf
convirtindolos en gotitas permitiendo su
absorcin. Entonces, si nuestro
experimento fuera una parte del proceso de
digestin, el detergente sera la bilis, y
emulsionara las grasas, en este caso,
ejemplarizadas por el aceite.
Conclusiones
La prueba de gamelin permite
identificar la presencia de sales
biliares, en donde las muestran se
observa un coloracin azul verdosa
que indica que esta es positiva.
La bilis cuyos componentes
principales son las sales biliares y
cidos biliares, cumplen la funcin
de emulsionar grasas durante la
digestin.
La bilis juega un papel importante
en nuestro organismo permitiendo
que esta ayude en el proceso de los
alimentos, para un mejor
aprovechamiento del cuerpo
humano.
Bibliografa
Tratado De Hepatologa, J. M.
Herreras Gutirrez, A. Daz.
Belmont y M. Jimnez Senz,
Tomo Ll 1996, Pag 150-151.
(1) TRASTORNOS DEL
TRACTO BILIAR,
TRASTORNOS DE LA
VESCULA BILIAR Y
PANCREATITIS POR
CLCULOS BILIARES; escrito
por los doctores Young Choi y
William B. Silverman de la
Divisin de Gastroenterologa y
Hepatologa de los Hospitales y