Formulasi dan In Vitro-In Vivo Korelasi Timolol maleat

Ocular Insert
Sunil Thakral1, Roshan
1
Issarani2, Badri P.

Nagori2

Akal College of Pharmacy dan Pendidikan

Teknis, Mastuana Sahib, Sangrur, Punjab,
India
2
Teknologi,
Jodhpur, India
Abstrak

Konsep in-vitro dan in-vivo studi korelasi digunakan dalam penelitian farmasi karena
sederhana in-vitro rilis studi pada produk obat tidak akan cukup untuk memprediksi efisiensi
terapeutik.
Oleh karena itu, korelasi antara perilaku rilis in-vitro obat dan yang penyerapan dalam-vivo
pada kelinci
harus dibuktikan secara eksperimental untuk mereproduksi respon terapi. Tujuan dari
penelitian ini adalah untuk mempelajari in vitro dan in vivo evaluasi dan korelasi timolol
insert mata maleat. Timolol sisipan mata maleat disiapkan dengan metode pengecoran pelarut
menggunakan guar gum dalam proporsi yang berbeda (0,25% b / v, 0,50% b / v, 0,75% b / v,
dan 1,0% w / v). Dalam vitro transcorneal studi permeasi dilakukan pada kornea kambing
menggunakan dimodifikasi sel difusi Franz. Studi in vivo dilakukan dengan menggunakan
New Zeland albino kelinci dan in vitro invivo korelasi (IVIVC) ditentukan dengan memplot
grafik in vivo pelepasan obat diplot terhadap rilis in vitro untuk menentukan korelasi.
Kumulatif rilis% obat dari formulasi berkisar antara 50,22 1,41-97,72 0.67over periode
24 jam. Dalam rilis vivo dari timolol maleat dari mata dioptimalkan menyisipkan F2, melalui
konjungtiva cul-de-sac kelinci adalah 76,03 1,43 pada akhir 24 jam. Nilai tinggi dari
koefisien korelasi (r2 = 0,9965) menyarankan korelasi yang baik antara in vitro-in vivo data
yang timolol insert mata maleat.
Katakunci:karet Guar,IVIVC, in vitro transcorneal studi perembesan, insert okular, timolol

maleat

Pengantar
Pengiriman obat untuk mata manusia adalah bagian integral dari perawatan medis.
Pengiriman obat ke lokasi aksi telah dipraktekkan sejak zaman kuno, yang berturut-turut
maju dalam berbagai mata dosis forms.1 Dalam desain sistem pengiriman obat untuk mata
keseimbangan harus dicapai antara keterbatasan yang ditetapkan oleh sifat fisikokimia obat,
keterbatasan yang ditetapkan oleh anatomi dan penyakit keadaan mata, dan persyaratan dosis
obat untuk penyakit tertentu.
Bentuk sediaan yang paling diresepkan konvensional mata untuk pengiriman obat
tetes mata, salep mata dan suspensi memiliki kelemahan seperti bioavailabilitas miskin
karena eliminasi yang cepat prekornea, omset air mata yang normal dan penyerapan
konjungtiva, sering berangsur-angsur obat terkonsentrasi, efek samping karena penyerapan
sistemik obat, penglihatan kabur karena kehadiran kendaraan kental. Selain itu, tingkat obat
dalam tearfilm yang berdenyut, dengan periode awal overdosis, diikuti dengan jangka waktu
yang lebih bawah dosing.3
Dalam rangka meningkatkan kelemahan yang terkait dengan bentuk sediaan
konvensional, diinginkan bahwa cara alternatif administrasi yang dibutuhkan untuk
meningkatkan bioavailabilitas obat. Akibatnya, berbagai sistem pengiriman obat tetes mata
baru dikembangkan untuk mencapai bioavailabilitas yang lebih tinggi dari drugs.4,5 antara
formulasi ini in situ pembentuk gel polimer, mikrosfer, nanopartikel, liposom dan sisipan
mata. Sisipan mata dari bahan polimer yang dapat melepaskan obat pada tingkat pra-
diprogram tanpa campur tangan dengan penglihatan normal dapat melayani tujuan ini.
Timolol maleat banyak digunakan sebagai agen -adrenergik-blocking topikal diterapkan
dalam oftalmologi untuk menurunkan tekanan intraokular dari patients.6 glaukoma Hal ini
givenin dibagi dosis beberapa kali dalam sehari dalam bentuk mata drop.7 Eye penurunan
persiapan meskipun secara luas digunakan menderita kelemahan dari drainase cepat obat dari
mata atau ke nasolakrimalis jalur karena turnoverresultinginlossorsystemicabsorption air
mata yang cepat dari obat. Sementara kehilangan hasil obat dalam keberhasilan terapi
dikompromikan, hasil penyerapan sistemik di samping yang tidak diinginkan effect.8
Meskipun pekerjaan penelitian yang luas dilaporkan pada sisipan mata, itu bisa dibuktikan
dari literatur yang guar gum tidak dilaporkan sebagai polimer untuk persiapan insert mata.
Seperti guar gum adalah polisakarida dan sudah digunakan dalam obat tetes mata sebagai
viscolizer, dapat digunakan sebagai polimer dalam insert mata. Dengan demikian, karya
penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk memperpanjang waktu tinggal okular serta
kontak antara mata dan obat oleh penggabungan dalam insert.
The IVIVC untuk formulasi adalah hubungan matematis antara properti in vitro dari
perumusan dan yang bertindak in vivo. In vitro profil pelepasan obat yang biasa bertindak
sebagai dibedakan dalam karakteristik vitro. Sedangkan, tindakan in vivo diuraikan oleh
profil obat plasma, profil ini kemudian diperlakukan secara matematis untuk menilai apakah
korelasi ada; korelasi umumnya dapat diharapkan ketika pelepasan obat dari formulasi adalah
langkah mengendalikan penyerapan berikutnya kinetics.9

Metode

Bahan
Timolol maleat diperoleh sebagai sampel hadiah dari Micro Labs Ltd., Bangalore, India.
Guar gum itu diperoleh dari Ases Kimia, Jodhpur, India. Natrium klorida, natrium bikarbonat
dan kalsium klorida dihidrat yang dibeli dari SD Fine Chemicals, Mumbai, India.
Dibutylphthalate dibeli dari Loba Kimia, Mumbai, India. Semua bahan kimia yang digunakan
adalah

Persiapan okular memasukkan

The sisipan mata disusun oleh pengecoran pelarut method.10 Empat batch (F1-F4) dari
timolol sisipan mata maleat disusun menggunakan konsentrasi yang berbeda dari guar gum
(Tabel 1). Jumlah yang dibutuhkan dari guar gum ditimbang dan dilarutkan dalam air suling
dengan menuangkan guar gum secara bertahap dengan pengadukan yang kuat. Campuran
diaduk selama 2-4 jam untuk hidrasi lengkap guar gum. Jumlah yang diperlukan dari
plasticizer (dibutylphthalate - 30% b / b polimer) telah ditambahkan diikuti oleh obat dan
pengadukan dilanjutkan untuk membentuk larutan homogen.
Setelah selesai pencampuran, larutan disimpan semalam untuk menghilangkan gelembung
udara terperangkap. Solusi (10 mL) dituangkan ke dalam cetakan kaca (35 cm2), yang
kemudian ditempatkan pada permukaan yang datar dan ditutupi oleh corong terbalik dengan
plug kapas untuk mencegah kontaminasi udara dan untuk memungkinkan penguapan lambat
dan seragam pada suhu kamar selama 48 h. Film-film yang dikeringkan sehingga diperoleh
dikupas dari permukaan casting dan dipotong menjadi ukuran yang sesuai (8 mm diameter)
menggunakan steril penggerek stainless steel. Seluas 0,50 cm2 mengandung 85,6 mg dari
timolol maleat digunakan dalam semua studi.
Formulasi ini disterilisasi secara terpisah dengan mengekspos radiasi UV selama 90 menit
dalam lemari dalam kondisi aseptik dan akhirnya dikemas dalam pra disterilkan aluminium
foil. Sisipan mata ditempatkan dalam desikator sampai use.11

Dalam vitro transcorneal studi permeasi

persiapan Kornea
Bola mata seluruh domba diperoleh dari toko daging lokal dalam waktu setengah jam dari
pemotongan hewan, dan diangkut ke laboratorium di dingin (4 C) larutan garam normal
(0,9% b / v NaCl) segera. Kornea dengan hati-hati dipotong bersama dengan 2-4 mm dari
jaringan scleral sekitarnya dan dicuci dengan dingin normal saline sampai itu bebas dari
protein.

Penelitian perembesan
kornea segar dipasang oleh mengapit jaringan scleral sekitarnya antara
donor dijepit dan sel-sel reseptor dari versi modifikasi dari sel difusi Franz sedemikian rupa
sehingga permukaan epitel nya (apikal) menghadapi kompartemen donor dan permukaan
endotel yang dihadapi reseptor kompartemen. Sel itu ditempatkan pada pengaduk magnetik
dalam posisi holding. Kompartemen reseptor dipenuhi dengan 11 mL baru disiapkan cairan
air mata simulasi (pH 7,2) dan diaduk menggunakan berlapis Teflon pengaduk magnet. Insert
mata ditempatkan ke sisi epitel kornea dalam sel donor dan pengadukan cairan reseptor
(berjaket dengan air pada 32 1 C) dimulai. Pada interval yang tepat, 1 ml sampel ditarik
dari kompartemen reseptor dan volume sampel ditarik digantikan dengan volume yang sama
cairan simulasi air mata segar untuk memastikan kondisi sink. Sampel ditarik disaring dan,
diencerkan sesuai dengan STF dan dianalisis secara spektrofotometri dengan mengukur
absorbansi pada max itu. Dari 294,5 nm. Penelitian ini dilakukan selama sekitar 24 jam dan
dilakukan dalam rangkap tiga.

Penelitian iritasi mata

The in-vivo studi dilakukan sesuai dengan Komite Kelembagaan Hewan Etika (IAEC)
dari ACPTE, Mastuana Sahib, Sangrur (Protocol No.- ATRC / 04/13 / CPCSEA / 2013-98)
dilantik sebagai per arah dari komite untuk tujuan kontrol dan pengawasan dari percobaan
pada hewan (CPCSEA), di bawah Departemen Kesejahteraan Divisi hewan, Pemerintah
India, dan New Delhi.
Studi iritasi mata dilakukan menurut tes Draize Iritasi sesuai OECD uji pedoman 405.
OECD pedoman untuk tes mata iritasi saat ini metode yang paling berharga dan dapat
diandalkan untuk mengevaluasi bahaya atau keamanan zat diperkenalkan ke atau sekitar
mata. Potensi iritasi mata dari zat dievaluasi dengan mengamati mereka untuk setiap
kemerahan, peradangan atau peningkatan produksi air mata. Pengujian dilakukan pada kelinci
albino dewasa bobot sekitar 1,5 sampai 2,0 kg dari kedua jenis kelamin. Semua kelinci
dipertahankan di bawah cahaya 12 jam dan siklus gelap dan diberi makan dengan sayuran
hijau sepanjang program studi. Makanan dan air diizinkan ad libitum. Enam kelinci
digunakan untuk menguji potensi iritasi mata insert mata. Formulasi steril ditempatkan di
fornix lebih rendah dari mata kelinci sementara mata lainnya menjabat sebagai kontrol.
Kelinci diamati secara berkala untuk 24 h untuk kemerahan pembengkakan dan penyiraman
mata.

In vivo Rilis Studi

Hasil studi lekas marah dan tolerabilitas mata dari semua formulasi menyarankan bahwa
formulasi F1 dan F2 ditoleransi dengan baik dengan ada tanda-tanda iritasi apapun.
Formulasi F3 dan F4 menunjukkan kemerahan di alasan sklera. Formulasi F4 menunjukkan
lebih kemerahan serta peningkatan laju aliran air mata.
Atas dasar kinetika rilis dan studi iritasi mata, F2 Formulasi yang mengandung 0,50% guar
gum dipilih untuk in vivo releasestudy obat,asitprolongsthereleaseoftimolol
maleatdan tidak menunjukkan iritasi mata. New Zeland kelinci albino seberat 1,5-2,0 kg,
bebas dari tanda-tanda peradangan mata atau kelainan kotor digunakan untuk studi in vivo.
Setiap kelinci disimpan dalam kondisi higienis yang baik untuk menghindari kerentanan
penyakit apapun termasuk jenis mata. Kelinci ditampung secara tunggal dalam kotak
menahan selama percobaan dan memungkinkan pakan dengan diet standar dan ad libitum air.
Kaki bebas dan gerakan mata yang diperbolehkan.
Disterilkan sisipan mata ditempatkan di bawah cul-de-sac masing-masing kelinci
sedangkan mata yang lain menjabat sebagai kontrol. Secara berkala (1, 2, 4, 6, 12, 24 h)
sisipan dibawa keluar dengan hati-hati dan dianalisis untuk jumlah timolol maleat yang
tersisa di insert. Jumlah timolol maleat tersisa dikurangkan dari kandungan obat awal obat,
yang memberikan jumlah obat dirilis pada mata kelinci.
Observasi untuk setiap jatuh keluar dari sisipan juga tercatat seluruh percobaan. Setelah
satu minggu dari periode wash percobaan diulang dua kali seperti sebelumnya.

In vitro - di korelasi vivo

The in vivo obat rilis studi dari mata timolol maleat memasukkan formulasi F2 ditemukan
sesuai dengan yang dari in vitro pelepasan obat studi. Oleh karena itu, kami mencoba untuk
mengkorelasikan dalam hasil vivo dengan in vitro persentase pelepasan obat. Di sini,
sebidang in vivo pelepasan obat diplot terhadap rilis in vitro untuk menentukan korelasi
seperti yang ditunjukkan pada Gambar IV.

Hasil

kumulatif persen dari timolol maleat dirilis in vitro dari sisipan mata sebagai fungsi
waktu ditunjukkan pada Gambar 1. keseluruhan persentase kumulatif pelepasan obat untuk
formulasi F1-F4 ditemukan 97,72, 78,04, 65,39 dan 50,22, masing-masing, pada akhir 24
jam, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 2. proses pelepasan obat dari matriks obat guar gum
melibatkan penetrasi air ke dalam matriks kering, hidrasi dan pembengkakan polimer, dan
difusi obat terlarut dalam matriks.
Dalam rilis vivo dari timolol maleat dari mata dioptimalkan menyisipkan F2, melalui
konjungtiva cul-de-sac kelinci itu 76,03 1,43 pada akhir 24 jam seperti yang ditunjukkan
pada Gambar 3. Profil rilis menunjukkan bahwa sisipan mata bisa memberikan berkelanjutan
konsentrasi maleat timolol dalam kornea / kompartemen film air mata untuk jangka waktu
lama. Kelinci dikenakan untuk in vivo studi tidak menunjukkan tanda-tanda iritasi,
peradangan dan debit abnormal yang dikonfirmasi keselamatan polimer yang digunakan
dalam formulasi. Juga, ada tidak adanya lengkap pengusiran film dari mata kelinci selama
seluruh studi, yang menunjukkan bahwa dimensi dari sisipan (8 mm) adalah cocok untuk
digunakan okular.
In vitro dan in vivo menunjukkan bahwa formulasi mampu melepaskan obat secara
independen konsentrasi untuk jangka 24 jam. Seperti dipenuhi banyak perquisites dari Novel
Setelah Day sistem pengiriman dan dapat meningkatkan kepatuhan pasien.

Diskusi

Konsep in vitro dan in vivo studi korelasi digunakan dalam penelitian farmasi karena
in vitro rilis studi sederhana pada produk obat tidak akan cukup untuk memprediksi efisiensi
terapeutik. Jadi korelasi antara in vitro rilis perilaku dari obat dan in vivo penyerapan pada
kelinci harus dibuktikan secara eksperimental untuk mereproduksi respon terapi. Pengetahuan
tentang hubungan antara pola aktual pengiriman obat dan distribusi atau respon obat penting
ketika sistem pengiriman dengan tingkat masukan yang optimal harus dikembangkan untuk
terapi mata. Dari grafik yang tersebar disajikan pada Gambar IV menyatakan bahwa korelasi
antara in vitro dan in vivo kuat dan positif. The in vitro-in vivo nilai korelasi ditemukan
menjadi 0,9965. Ada korelasi yang baik antara in vitro dan in vivo rilis data menunjukkan
kebenaran dari metode in vitro diikuti dan adoptability dari sistem pengiriman ke sistem
biologi, di mana ia merilis obat secara independen konsentrasi.
Dari sudut pandang biofarmasi, korelasi dapat disebut sebagai hubungan antara yang
sesuai karakteristik rilis vitro dan in vivo parameter bioavailabilitas. Amerika Serikat
Pharmacopoeia (USP) didefinisikan sebagai membangun mentofaration alrelationship antara
properti biologis atau parameter yang berasal dari properti biologis yang dihasilkan oleh
bentuk sediaan, dan properti fisikokimia atau karakteristik dari bentuk sediaan yang sama
(USP. 2004). Food and Drug Administration (FDA) didefinisikan in vitro-in vivo korelasi
(IV-IVC) sebagai model matematika prediksi menggambarkan hubungan antara properti in
vitro dari bentuk sediaan dan relevan dalam menanggapi vivo. Umumnya, properti in vitro
adalah tingkat atau tingkat pelarutan obat atau rilis sedangkan respon in vivo adalah
konsentrasi obat plasma atau jumlah obat yang diserap (FDA, 1997).

Kesimpulan

Korelasi antara in vitro dan in vivo Data (IVIVC) sering digunakan selama
pengembangan farmasi untuk mengurangi waktu pengembangan dan mengoptimalkan
formulasi. Sebuah korelasi yang baik adalah alat untuk memprediksi hasil vivo berdasarkan
data in vitro. IVIVC memungkinkan bentuk sediaan optimasi dengan uji coba yang mungkin
paling sedikit dalam manusia, perbaikan kriteria penerimaan pembubaran, dan dapat
digunakan sebagai pengganti untuk studi bioekivalensi lebih lanjut; juga dianjurkan oleh
otoritas pengawas.