Reporte de practica

EFECTO DE LA CONCENTRACIN DE ENZIMA Y EFECTO DE pH

SOBRE LA VELOCIDAD DE REACCIN
Grupo: 4QM2 Seccin: 4

Alumnos: Cabrera Rendn Citlalli Odaliz y Plata Ortiz Mario Alberto

Objetivos:
Conocer que efecto tiene una reaccin enzimtica al incrementar la concentracin de enzima.
Obtener el pH ptimo de la enzima invertasa.
Resultados:
Como resultado de la parte experimental se obtuvieron las siguientes graficas de concentracin de la enzima
sobre la velocidad de reaccin (Fig. 1) y efecto del pH sobre la velocidad de enzima (Fig. 2).

0.14

0.12
Mol/ min

0.1 y = 0.1987x - 0.0043

R = 0.8747
0.08
Efecto de la concentracin de Enzima
VO

0.06 sobre la velocidad de Reaccin

Linear (Efecto de la concentracin de
0.04 Enzima sobre la velocidad de Reaccin)

0.02

0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
mL
-0.02
Concentracion de enzima

Fig. 1. Grafico del efecto de la concentracin de enzima sobre la velocidad de reaccin, demostrando que la
velocidad de reaccin aumenta al incrementar la concentracin de enzima.
En la grfica del efecto del pH (Fig. 2) se ve demostrado que antes del pH 5 y hasta este valor de pH la enzima
no es funcional, pues se observ que en los tubos de pH 3 y 4 (Fig. 3) donde se llev a cabo la reaccin un
precipitado insoluble, el cual se relaciona con la desnaturalizacin de la enzima, en el tubo de pH 5 (Fig. 4)no
se observ este precipitado por lo que se ve que la actividad enzimtica fue casi nula, despus ya inicio a
trabajar la enzima catalizando la reaccin aumentando su velocidad, hasta el pH de 7, el cual su velocidad se
vio disminuida drsticamente.
 0.06

0.05
VO Mol/min

0.04

0.03
Efecto del pH sobre la
velocidad de Reaccin
0.02

0.01

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
pH

Fig. 2 Grafico del efecto del pH sobre la velocidad de reaccin.

7 5.5 6 5 4.5
5

Fig. 3. Tubos de reaccin en donde se nota la
desnaturalizacin enzimtica por presencia de
precipitado a pH de 3 y 4.
Fig. 4. Tubos de reaccin enzimtica desde pH 4.5, en donde
se nota la actividad enzimtica por la presencia de color cada
vez ms intenso, hasta pH 5.5, despus de este en pH 7 el color
disminuye dando a notar que la actividad enzimtica disminuyo
por la tonalidad de color similar a l tubo de pH 4.5.

Discusin
De acuerdo a los resultados se logra apreciar en la grfica de efecto de la concentracin de enzima (fig.1 ) que,
a medida que aumenta la concentracin de esta aumenta la velocidad de reaccin, observando que hasta los
0.4 ml de enzima, la velocidad de reaccin conserva la tendencia de linealidad, pero a partir de la concentracin
de 0.5 ml se observa un incremento brusco en la velocidad de reaccin perdiendo su tendencia a ser una recta
que crece proporcionalmente, pudiendo deducir con esto que quiz hubo una mayor adicin de enzima a esta
concentracin en el tubo de reaccin provocando este gran incremento. Sin embargo, en este ensayo logramos
comprobar que la velocidad de reaccin si es directamente proporcional a la concentracin de enzima pues a
pesar del pequeo error se logra observar como es que a medida que aumentamos la concentracin de la
enzima la velocidad va aumentando. Esto pudiendo ser explicado debido a que a bajo condiciones dadas, dos
molculas de enzima actan independientemente en solucin para transformar el doble de sustrato que una
sola molcula de enzima en un tiempo, por lo que la velocidad es directamente proporcional a la concentracin
de enzima, expresado como:
Vo= k [E]
Por otro lado, con respecto al efecto del pH sobre la velocidad de reaccin, se pudo observar que a pHs muy
cidos como de 3 y 4 en este caso, la enzima se desnaturaliz ya que es una protena y existe la prdida de las
estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la cadena polipeptdica reducida
a un polmero estadstico sin ninguna estructura tridimensional fija. Por lo tanto, la desnaturalizacin provoca
diversos efectos en la protena los cuales pueden ser:

Cambios en las propiedades hidrodinmicas de la protena: aumenta la viscosidad y disminuye el coeficiente

de difusin.
Una drstica disminucin de su solubilidad como se muestra en la fotografa 1 (Fig.3), ya que los residuos
hidrofbicos del interior aparecen en la superficie
Prdida de las propiedades biolgicas.
Despus de los pH de 3 y 4, la enzima comienza a catalizar la reaccin aumentando su velocidad a muy pequea
escala, llegando a su mxima velocidad de reaccin a pH de 5.5, correspondiendo al valor de pH ptimo para
que la enzima trabaje, observndose que despus de este valor de pH, la enzima comenz a desnaturalizarse,
y la velocidad de reaccin decae. Este comportamiento se conoce como campana de Gauss.Dicho
comportamiento descrito anteriormente se debido a que, las enzimas solo son activas en un margen limitado
de pH, y en muchos casos este margen es estrecho y definido, rebasando este lmite de pH, las enzimas pierden
su actividad desnaturalizndose y perdiendo la capacidad de catalizar una reaccin, debido que estas poseen
grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol) en las cadenas laterales de sus
aminocidos y segn el pH en el que se encuentre la enzima, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva,
negativa o neutra y como la conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas, habr
un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada para la actividad cataltica, pudiendo modificar el sitio
activo de la enzima ionizando los grupos R de los aminocidos y cambiando el sitio activo.
Finalizando as que el valor de pH optimo encontrado experimentalmente de 5.5 concuerda con el valor de pH
ptimo de la enzima Invertasa encontrado en la literatura el cual es estrecho; de 4.5 5.5.
Conclusin:

La concentracin de enzima es directamente proporcional a la velocidad de reaccin.

El pH ptimo de la invertasa fue de 5.5.
Las enzimas solo son activas en un margen limitado de pH.
Bibliografa:

Hicks, J. (2007). Bioqumica. 2nd ed. Mxico: McGraw-Hill, pp.109, 117-118.

Mathews, C., Van Holde, k. y k. Athen. 2003.bioquimica. 3era edicin. Pearson educacin. Madrid.
Espaa.