UNIVERSIDADE TECNOLGICA FEDERAL DO PARAN

CAMPUS FRANCISCO BELTRO

COORDENAO DE TECNOLOGIA EM ALIMENTOS
CURSO DE TECNOLOGIA EM ALIMENTOS

BIANCA REBONATTO
POLIANA CITTADIM

PROCESSO DE ARMAZENAMENTO DO MILHO EM SILO A

GRANEL EM COOPERATIVA DE FRANCISCO BELTRO PR

TRABALHO DE CONCLUSO DE CURSO

FRANCISCO BELTRO
2014
 BIANCA REBONATTO
POLIANA CITTADIM

PROCESSO DE ARMAZENAMENTO DO MILHO EM SILO A

GRANEL EM UMA COOPERATIVA NO MUNICPIO DE
FRANCISCO BELTRO PR

TRABALHO DE CONCLUSO DE CURSO

Trabalho de Concluso de Curso de

graduao, apresentado ao Curso Superior de
Tecnologia em Alimentos da Universidade
Tecnolgica Federal do Paran, como
requisito parcial para a obteno do ttulo de
Tecnlogo em Alimentos.

Orientador: Prof. Dr. Hernan Vielmo

Co-orientadora: Prof. Dr Elisabete Hiromi

Hashimoto

FRANCISCO BELTRO
2014
 FOLHA DE APROVAO

PROCESSO DE ARMAZENAMENTO DO MILHO EM SILO A GRANEL EM

UMA COOPERATIVA NO MUNICPIO DE FRANCISCO BELTRO PR

Por

Bianca Rebonatto, Poliana Cittadim

Trabalho de Concluso de Curso aprovado como requisito parcial para a

obteno do ttulo de Tecnlogo em Alimentos, no Curso Superior de
Tecnologia em Alimentos da Universidade Tecnolgica Federal do Paran.

BANCA AVALIADORA

Prof. Dra. Elisabete Hiromi Hashimoto

Universidade Tecnolgica Federal do Paran UTFPR

Prof. Dra. Ellen Porto Pinto

Universidade Tecnolgica Federal do Paran UTFPR

Prof. Dr. Hernan Vielmo

Universidade Tecnolgica Federal do Paran UTFPR
(Orientador)

Prof. Dra. Cleusa Ines Weber

Universidade Tecnolgica Federal do Paran UTFPR
(Coordenador do curso)

Francisco Beltro, fevereiro de 2014.

A Folha de Aprovao assinada encontra-se na Coordenao do Curso.

 AGRADECIMENTOS

Primeiramente gostaramos de agradecer a Deus, por guiar nossos

passos, nos dando foras para seguir em frente e colocando em nosso
caminho pessoas e oportunidades maravilhosas.
Aos nossos pais, irms e cunhados, que sempre nos incentivaram,
acreditando em ns e nos apoiando em todos os momentos difceis, no
medindo esforos para que os nossos objetivos sejam alcanados. Aos
namorados por estarem ao nosso lado nos dando fora e no deixando-nos
desistir.
Agradecemos ao nosso orientador, professor Hernan Vielmo pela
dedicao, por acreditar e incentivar nosso trabalho nos auxiliando durante
todo o tempo, fazendo parte de nossas vidas disposto a nos ajudar sem medir
esforos. A co-orientadora, professora Elisabete Hiromi Hashimoto por toda sua
disponibilidade e ateno mesmo entre sua rotina de me, sempre nos
ajudando e acompanhando.
Agradecemos aos colegas de laboratrio Naara, Caroline, Michel e
Ronaldo por terem nos auxiliado durante todo o perodo de anlises. De forma
geral agradecemos a todos que direta ou indiretamente fizeram parte dessa
etapa de nossas vidas: a Universidade, os professores, os colegas de sala,
trabalho e os demais amigos.
Agradecemos imensamente cooperativa que cedeu as amostras e
seu espao para o estudo. Ao gerente da unidade Clverson Penso, por ter
acreditado no projeto nos incentivando e ajudando. Ao Hilario Rebonatto
encarregado de armazm, por ter nos ajudado com a coleta das amostras e ter
nos passado seu conhecimento prtico sobre armazenagem de gros. Ao
Jocemar Carpenedo, supervisor e responsvel por toda parte de armazenagem
das unidades da cooperativa, pela sua disponibilidade de materiais e seus
conhecimentos repassados.
Que os vossos esforos desafiem as impossibilidades,
lembrai-vos de que as grandes coisas do homem foram
conquistadas do que parecia impossvel. (Charles
Chaplin)
 RESUMO

REBONATTO, Bianca.; CITTADIM, Poliana. Processo de armazenamento do

milho em silo a granel em uma cooperativa no municpio de Francisco
Beltro PR. 2014. Trabalho de Concluso de Curso (Curso Superior de
Tecnologia em Alimentos). Universidade Tecnolgica Federal do Paran.
Francisco Beltro.

O milho o terceiro cereal mais produzido do mundo, com potencial de ser

cultivado em praticamente todas as regies do mundo. De extrema importncia
para a economia, destinado um percentual dessa produo para a exportao
e o consumo interno, para alimentao animal (como rao), silagem ou
consumo humano. No entanto, o gro suscetvel a transformaes na lavoura
e, principalmente, durante seu perodo de armazenamento. Na armazenagem o
gro est sujeito a ataques de insetos, roedores e fungos micotoxignicos,
alm de alteraes fsicas e qumicas, como perda de protenas, valor
energtico e gua. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade
fsicoqumica, microbiolgica e de aflatoxina B1 em milho armazenado em silo
a granel, safra 2012/2013, em uma cooperativa de Francisco Beltro/PR. As
amostras foram coletadas, aps o enchimento do silo, sendo seis amostras em
diferentes alturas, para caracterizar o milho armazenado e sete amostras (uma
por ms) durante o perodo de armazenamento. Foram realizadas anlises
fsico-qumicas, anlise microbiolgica, anlise de micotoxinas e o
monitoramento dos fatores temperatura e umidade relativa (UR%) dentro do
silo durante o perodo de armazenamento. Os resultados obtidos pelas analises
demonstraram que o processo de armazenamento do produto foi eficiente
sendo que os resultados de protena bruta e lipdios mantiveram-se constantes
(variando de 7,47 % e 5,06%, no incio e de 7,24-8,74% e 4,24-5,69% ao longo
da armazenagem, respectivamente). Os principais gneros de fungos
detectados foram Penicillium, Fusarium (nd a 3,3x104 UFC/g no incio e at
2,6x105 UFC/g ao longo da armazenagem) e Aspergillus spp (1,0x103a 2,6x105
UFC/g no incio e at 1,9 x105 UFC/g ao longo da armazenagem). Detectou-se
presena de micotoxinas (aflatoxina B1) abaixo do limite de quantificao do
mtodo analisado, e a temperatura e umidade relativa do silo se mantiveram
em equilbrio, sendo que a temperatura variou de 11 a 21 C e a UR de 52 a
68%, no causando danos aos gros durante todo o perodo de
armazenamento.

Palavraschave: Milho. Armazenagem. Micotoxinas. Anlise fsicoqumica.

 ABSTRACT

REBONATTO, Bianca; CITTADIM, Poliana. Process of corn grains in a silo

bulk at a cooperative in the city of Francisco Beltrao PR. 2014. Course
Completion Project (Food Technology). Federal Technological University of
Parana. Francisco Beltrao.

Corn is the worlds third most produced cereal, with potential to be cultivated in
practically all regions of the world. Extremely important for the economy, a
percentage of that production is destined to export and domestic consumption,
animal feed (as feed), silage or human consumption. However, the grain is
susceptible to changes during farming and especially during the storage. During
storage, the grain is subject to insect, rodent and mycotoxigenic fungi attacks,
as well as physic-chemical changes such as loss of protein, energy value and
water. The present study aimed to evaluate the physic-chemical, microbiological
and aflatoxin B1 qualities of corn grains stored in silo bulk, 2012/2013 crop, at a
cooperative in Francisco Beltrao-PR. The samples were collected, after the
silo's filling, being six samples at different heights to characterize the stored
corn grains and seven samples (one per month) during the storage period.Were
performed physico-chemical (moisture, lipid, protein and ash), fungi's
microbiological, and mycotoxin analyzes, as well as the monitoring of the
temperature and relative humidity (RH%) factors inside the silo during storage.
The results obtained by the analysis demonstrated that the process of storing
the product was efficient and the results of crude protein and lipids remained
constant (ranging from 7.47% to 5.06% at the beginning and 7.24 to 8 74% and
4.24 to 5.69% during storage, respectively). The main genera of fungi were
detected Penicillium, Fusarium (nd 3,3 x104 CFU / g at baseline and up to 2.6
x105 CFU / g during storage) and Aspergillus spp (1.0 x103a 2,6 x105 CFU / g
at the beginning and up to 1.9 x105 CFU / g during storage). We detected the
presence of mycotoxins (aflatoxin B1) below the quantification limit of the
method analyzed, and the temperature and humidity of the silo remained in
equilibrium, and the temperature ranged from 11 to 21 C and RH 52-68%, not
causing damage to the grains during the storage period.

Key Words: Corn. Storage. Mycotoxins. Physic-Chemical Analysis.

 SUMRIO

1 INTRODUO 9
2 OBJETIVOS 11
2.1 Objetivos especficos 11
3 REVISO DA LITERATURA 12
3.1 Histria do milho 12
3.1.1 Milho na Amrica 12
3.2 Produo 13
3.3 Caractersticas fsico-qumicas 14
3.4 Armazenagem de gros 15
3.4.1 Classificao dos gros 16
3.4.2 Limpeza dos gros armazenados 18
3.4.3 Secagem 19
3.4.4 Armazenagem em silos a granel 22
3.5 Pragas na armazenagem 24
3.6 Fungos 26
3.7 Micotoxinas 27
3.7.1 Aflatoxinas 29
4 METODOLOGIA 31
4.1 Amostras de milho 32
4.1.1 Preparo da amostra para anlise 32
4.2 Anlise fsico-qumica 33
4.2.1 Secagem direta em estufa a 105C 33
4.2.2 Cinzas totais 33
4.2.3 Lipdios ou extrato etreo Extrao direta em Soxhlet 34
4.2.4 Determinao de protenas Mtodo Kjeldahl 35
4.3 Anlise microbiolgica 35
4.3.1 Mtodo de contagem dos principais bolores isolados do milho 35
4.4. Anlise de aflatoxina 36
4.4.1 Determinao de aflatoxina B1 em milho por Cromatografia em Camada
Delgada CCD 36
4.4.2 Extrao de aflatoxina 36
4.4.3 Anlise de aflatoxina B1 38
5 RESULTADOS E DISCUSSO 39
5.1 Anlise microbiolgica 39
5.2 Anlise aflatoxina B1 (AFB1) 42
5.4 Temperatura e umidade relativa UR 50
6 CONSIDERAES FINAIS 55
REFERNCIAS 56
 9

1 INTRODUO

De acordo com o Departamento de Agricultura dos Estados Unidos

(USDA), o milho o terceiro cereal mais produzido no mundo, estando sua
produo mdia nos ltimos cinco anos em 833,56 milhes de toneladas. O
Brasil ocupa o terceiro lugar produzindo cerca de 72,73 milhes de toneladas
do cereal na safra 2011/2012 (SEAB/DERAL, 2012).
O milho possui em sua composio vitaminas A e do complexo B,
protenas, gorduras, carboidratos, clcio, ferro, fsforo, amido e fibras.
(MUSSOLINI, 2009). Utilizado principalmente na alimentao animal, e na
alimentao humana, seu consumo ocorre principalmente na forma de seus
derivados, como leo, farinha, amido, margarina, xarope de glicose, dentre
outros (LENZ et al; 2011).
Logo aps a colheita, os gros devem ser armazenados em locais
apropriados, pois esto sujeitos a transformaes. Em cooperativas
praticamente todo o armazenamento feito em silos a granel, os quais devem
estar limpos, protegidos da luz, calor e umidade (EMBRAPA, 2004). Os silos
devem apresentar ainda um sistema de ventilao, para renovar o ar no interior
da massa de gros, mantendo assim, a temperatura intragranular e a umidade
na faixa ideal de conservao, uniformizando a temperatura no interior do silo.
Tais procedimentos visam evitar perdas por acmulo de umidade e
aquecimento. No entanto, devido a fatores como a temperatura e umidade, o
milho comumente contaminado por fungos, tanto na pr-colheita, como na
ps-colheita, acarretando em perdas e contaminaes, com possvel
ocorrncia de produo de micotoxinas (DEMARCHI, 2010).
A presena de micotoxinas em alimentos representa um grave risco
aos alimentos e a sade pblica. As aflatoxinas so um grupo de micotoxinas
de suma importncia em alimentos e raes, tendo como principal substrato
para sua produo os cereais, ocasionando prejuzos econmicos, alm de
problemas sade humana e animal.
Prope-se neste trabalho, avaliar a qualidade fsico-qumica,
microbiolgica, de aflatoxina B1 e os fatores temperatura e umidade relativa
 10

UR dentro do silo, em hbridos de milho safra 2012/2013 armazenados em silo

a granel de uma cooperativa de Francisco Beltro-PR.
 11

2 OBJETIVOS

2.1 Objetivo geral

Avaliar a qualidade fsico-qumica, microbiolgica e a presena de

aflatoxina B1 ao longo da armazenagem em silo a granel produzido em
Francisco Beltro/ PR durante a safra 2012/2013.

2.1 Objetivos especficos

Determinar o teor de umidade, lipdeos, protenas e cinzas, no milho

armazenado;
Realizar anlise microbiolgica no milho armazenado;
Quantificar aflatoxina B1em amostras de milho armazenado;
Monitorar os fatores temperatura e umidade relativa dentro do silo.
 12

3 REVISO DA LITERATURA

3.1 Histria do milho

O milho vem sendo consumido desde civilizaes antigas a cerca de

7.300 anos por povos que viviam em ilhas prximas ao litoral mexicano, como
Maias, Astecas e Incas (ARAUJO, 2008). O nome do cereal significa o
"sustento da vida e considerado um alimento sagrado que traduzia a relao
de sobrevivncia homem-milho, um alimento de muita utilidade, uma vez que o
milho uma cultura, e, portanto, no se produz, tem que ser plantado,
semeado pelas mos dos homens (URU, 2007).
A domesticao do milho por seleo para produzir maior nmero de
espcies aconteceu inicialmente no sudoeste do Mxico, e posteriormente
espalhou-se pelos povos da regio da Amrica como Panam e Estados
Unidos (ARAUJO, 2008). Por volta de 1930, intensificaram-se os trabalhos de
melhoramento gentico, resultando numa maior variabilidade, sendo conhecido
o que se chama hoje de milho hbrido, obtido por linhagens promissoras de
combinao e cruzamento (URU, 2007).

3.1.1 Milho na Amrica

Aproximadamente 500 anos atrs uma esquadra de caravelas chega

ao Brasil, trazendo consigo grandes mudanas e o incio da colonizao dos
povos que habitavam a Amrica do Sul. Cristovo Colombo considerado o
descobridor da Amrica e tambm do milho, por ser o responsvel pela
disseminao e ensinamento sobre as diferentes maneiras de utilizao
culinria do gro (FREITAS, 2011).
 13

Quando Cristovo Colombo descobriu a Amrica, o milho constituiu-

se, dentre os vegetais, a base alimentcia dos indgenas que aqui
viviam e era cultivado desde a Argentina at o Canad. Logo aps a
descoberta da Amrica, o milho foi levado para Espanha, Portugal,
Frana e Itlia, onde era a princpio cultivado em jardins mais como
planta extica e ornamental. Uma vez reconhecido seu valor
alimentar, passou a ser cultivado como planta econmica e difundiu-
se para o resto da Europa, para sia e Norte da frica (CAMPOS,
1973).
medida que os europeus foram colonizando as Amricas, em
meados de 1942, j encontraram vrios tipos de milho domesticados e
cultivados pelos nativos. Com a interao dos povos teve-se acrscimos nas
variedades de milho, permitindo melhorias no seu desenvolvimento (ARAUJO,
2008). Existem relatos da existncia do cultivo do milho pelos ndios antes
mesmo da chegada dos portugueses ao Brasil, o cereal era o principal
ingrediente na dieta da tribo guarani (URU, 2007 apud FERNANDES 2004, p.
36).

3.2 Produo

Atualmente, estima-se em 175,2 milhes de hectares a rea semeada

com milho no mundo, resultando em um aumento de aproximadamente 4% em
relao ao ano anterior. Os Estados Unidos o principal produtor, exportador e
consumidor mundial de milho representando 36% da produo e 32% do
consumo mundial dos ltimos cinco anos. Cerca de 50% de sua produo
utilizada para consumo animal e 1/3 utilizada para produo de etanol
(SEAB/DERAL, 2012).
O Brasil ocupa hoje o 3 lugar na produo mundial do milho,
representando 7,2% do total produzido no mundo. De acordo com a
Companhia Nacional de Abastecimento (CONAB, 2012), a produo total de
milho no Brasil na safra 2011/2012 foi de 72,73 milhes de toneladas,
destacando-se a 2 safra, em que houve acrscimo em torno de 23% na rea
semeada no pas. A safra 2011/2012 do cereal obteve valores recordes
superando o 58,6 milhes de toneladas obtidos na safra 2007/2008.
 14

A produo de milho no Brasil caracteriza-se pela diviso da produo

em duas pocas de plantio. O plantio de vero (primeira safra) realizado na
poca tradicional, variando do final de agosto na regio Sul at os meses de
outubro/novembro no Sudoeste e Centro Oeste. Nos ltimos anos vem sendo
constante o crescimento do milho safrinha, principalmente na regio centro-
oeste e nos estados do Paran e So Paulo, plantado nos meses de fevereiro
ou maro, aps a colheita precoce da soja (EMBRAPA, 2008).
O Paran o lder da produo brasileira, representando 23% da safra
2011/2012. No Paran, a SEAB possui 22 ncleos regionais, dos quais na 1
safra de milho o ncleo regional de Ponta Grossa responsvel por 18% da
produo paranaense de milho, seguido de Curitiba com 13%, Guarapuava
com 10%, Francisco Beltro com 9% e Pato Branco com 7% do total produzido.
Segundo a CONAB, 2012 a maior parte do milho produzido no Paran, cerca
de 10 milhes de toneladas anuais, consumida no prprio Estado, destinado
principalmente avicultura e suinocultura. Em seguida vem o estado do Mato
Grosso, respondendo por 21% da produo total, seguido do estado de Gois
e Minas Gerais, totalizando 12% cada da safra brasileira (SEAB/ DERAL,
2012).

3.3 Caractersticas fsico-qumicas

O milho um dos cereais que possui maior capacidade de produo,

sendo mais eficiente na produo de matria seca por rea (PEIXOTO, 2002).
Possui aproximadamente 70 a 73% de amido, 9 a 10% de protenas, 4 a 5% de
leo, 1 a 2% de cinzas, 2% de acares e 9 a 10% de fibras, vitamina A e
vitaminas do complexo B, alm de minerais como clcio, ferro e fsforo
(MUSSOLINI, 2009 apud JACKSON; SHANDERA, 1995).
Seu consumo destinado tanto para o consumo humano, podendo ser
transformado em leo, farinha, amido, margarina, xarope de glicose, cereais
matinais, corantes, gelatinosos, adesivos, alimentos proticos como para a
alimentao de animais, sendo esse seu principal destino na fabricao de
 15

rao animal, silagem ou consumo direto, correspondendo a 75% da produo

nacional. (BRASIL, 2012).

Os gros de milho apresentam coloraes variveis, podendo

apresentar-se na cor amarela, branca, vermelha e preta. Seu peso
individual de 250 a 300mg e sua composio mdia em base seca
72% de amido, 9,5% de protena, 9% de fibra e 4% de leo.
Conhecido botanicamente como uma cariopse o milho formado por
quatro principais estruturas fsicas: endosperma, grmen, pericarpo
(casca) e ponta. O endosperma representa a maior frao do gro
(82%) de seu peso seco, o qual constitudo basicamente de amido
(88%) e onde se encontram as protenas de reserva (8%) do tipo
prolamina, chamadas de zenas. O grmen representa 11% do gro
do milho onde se concentra 83% dos lipdios, 78% dos minerais, 26%
das protenas e 70% dos acares. O pericarpo representa 5% do
gro, sendo a estrutura que protege as outras estruturas do gro da
elevada umidade do ambiente, insetos e micro-organismos rica em
fibras (54%) e apresenta como principais componentes: lipdio (1,3%),
protenas (2,6%), minerais (2,9%), amido e acares. A ponta
representa apenas 2% do gro composta por amido, lipdios,
minerais e acares, em pequena porcentagem. As protenas de
reserva, encontradas em maior abundncia no gro de milho, so
ricas nos aminocidos metionina e cistena, mas pobres em lisina e
triptofano, as quais so essenciais nutrio humana e de alguns
monogstricos (PAES 2006 apud SHOTWELLAND LARKINS, 1989).

3.4 Armazenagem de gros

Rodrigues (2007) define armazenagem como a gesto econmica do

espao necessrio para manter estoques pertencentes a terceiros, englobando
todas as funes de localizao, dimensionamento de rea, arranjo fsico,
recuperao do estoque e recuperao de armazm.
Ainda que muitos avanos de pesquisa e tecnologia de ps-colheita
tenham ocorrido, a secagem ainda praticamente o nico mtodo utilizado
para a conservao de gros no Brasil e em grande parte do mundo. A
capacidade de preservao da qualidade, salubridade e do valor nutritivo dos
gros durante o perodo de armazenagem no depende exclusivamente das
condies de produo e colheita, mas do armazenamento e manuteno das
circunstncias de estocagem do produto (ELIAS, 2003).
As adulteraes decorrentes da armazenagem refletem em perdas
qualitativas e quantitativas, dessa forma, as quantitativas consideram o
 16

metabolismo dos gros ou organismos associados, ocasionando a perda do

contedo da matria seca dos gros. Perdas qualitativas so as reaes
qumicas e enzimticas, presena de materiais estranhos, impurezas e ataque
microbiano, resultando em danos no valor nutricional, germinativo e comercial,
com a possibilidade de formao de substncias txicas no produto
armazenado (ELIAS, 2003).
O fluxograma 1 demonstra o processo de armazenamento desde a
chegada do produto at sua armazenagem.

FLUXOGRAMA 1- Processo de armazenamento de gros

3.4.1 Classificao dos gros

A classificao um instrumento auxiliar no processo de

comercializao de produtos agrcolas, que consiste em determinar a qualidade
do produto atravs de um padro estabelecido atravs da portaria n 845, de
08 de novembro de 1976, que estabelece as especificaes para a
padronizao, classificao e comercializao do milho (SENAR, 2004).
Para a classificao e determinao de um lote de gros, leva-se em
considerao o teor de umidade, impurezas, matrias estranhas, gros
trincados, quebrados e atacados por insetos. A coleta da amostra realizada
no momento de recebimento do produto, utilizando-se caladores que realizam a
 17

coleta ao acaso em lugares e profundidades diferentes da carga, objetivando

uma amostragem homognea, conforme Figura 1 (FORNEL, 2010).

Figura 1 Coleta da amostra para classificao. Fonte: Autoras (2014).

A classificao de impurezas, matrias estranhas, gros trincados,

ardidos, brotados, avariados dentre outras especificaes realizada sobre o
que estabelece a legislao vigente (BRASIL, 1976).

Figura 2: Classificao de impurezas da amostra. Fonte: Autoras (2014).

 18

O contedo de umidade dos gros pode ser determinado por mtodos

diretos ou indiretos. Mtodos diretos geralmente so empregados em trabalho
de laboratrio, aquecendo a amostra de gros para retirar a umidade e
pesando antes e depois de aquecer, seguindo um procedimento padronizado
que resultar na quantidade de perda de gua no produto. O mtodo indireto
geralmente utilizado em unidades de armazenamento, no qual os medidores
de umidade medem a resistncia eltrica do produto e a relaciona com o teor
de umidade do produto. O contedo de umidade a quantidade de gua que
pode ser removida do material sem alterao da estrutura molecular do slido
(HEUERT, 2011).

3.4.2 Limpeza dos gros armazenados

A limpeza a operao que visa reduzir e eliminar o teor de impurezas

nas massas de gros, fragmentos do prprio produto, e de matrias estranhas
(detritos vegetais, sementes de vegetao nativa, torres de terra, dentre
outras). As impurezas que acompanham o produto se no eliminadas afetam
consideravelmente sua qualidade, sofrendo interferncias durante sua
armazenagem e posterior comercializao (PARK et al; 2007).
As impurezas em uma massa de gros dificultam as operaes de
secagem, aerao e expurgo. A massa de gros contendo impurezas
portadora de ampla quantidade de micro-organismos, assim sendo proporciona
condies que aceleram a deteriorao do produto. As impurezas sempre
apresentam atividade de gua maior que a do produto oferecendo condies
favorveis para o desenvolvimento de fungos (CASEMG, 2013).
A limpeza realizada atravs de mquinas de pr-limpeza e limpeza
at os nveis adequados para armazenagem e comercializao. retirada de
uma parte das impurezas do produto facilitando seu transporte pelos
elevadores, conforme mostra na Figura 3. A secagem realizada com mais
facilidade e a remoo de materiais verdes e palhas evita fermentaes na
massa de gros quando armazenados. As mquinas de pr-limpeza e de
 19

limpeza operam segundo os mesmos princpios. O produto separado de

outros materiais pela ao de uma corrente de ar e por peneiras (CASEMG,
2013).

Figura 3 Limpeza e pr limpeza de milho. Fonte: Autoras (2014).

3.4.3 Secagem
A secagem um conjunto de cincia, tecnologia e arte, baseado em
extensiva observao experimental e experincia operacional.
Durante a secagem necessrio um fornecimento de calor para
evaporar a umidade do material e tambm deve haver um sorvedor
de umidade para remover o vapor de gua, formado a partir da
superfcie do material a ser seco (ALONSO, 1998).

O teor de gua o fator mais importante para determinar a qualidade

de sementes no armazenamento, pelo fato de interferir em sua atividade
biolgica, atividade dos micro-organismos e sensibilidade danificao
mecnica. A secagem de gros constitui uma ferramenta essencial para sua
produo e qualidade, visa manter o teor de gua adequado para as operaes
de beneficiamento, transporte e armazenamento, reduzindo ao mnimo os
 20

impactos que a qualidade dos gros possa sofrer durante essas etapas
(AVELAR, VILLELA, PESKE, 2013).
Existem diversos sistemas e tecnologias de secagem disponveis no
mercado. Porm, em cooperativas, armazns e cerealistas utiliza-se
basicamente o mtodo de secagem artificial, que pode ser classificado quanto
periodicidade de exposio da massa de sementes ao ar de secagem, em
continuo ou intermitente, e quanto movimentao das sementes em
estacionrio ou de fluxo contnuo (AVELAR, VILLELA, PESKE, 2013).
A cooperativa na qual realizou-se o estudo utiliza-se do mtodo de
secagem intermitente, na qual a semente permanece em exposio ao ar
aquecido na cmara de secagem em intervalos ajustados de tempo,
interpolados por perodo sem exposio, nos quais ficam na cmara de
equalizao, ocorrendo homogeneizao da umidade e da temperatura da
massa (AVELAR, VILLELA, PESKE, 2013).
O secador possui calhas ou dutos de ar dispostos de forma paralela, de
forma que o ar entra pelo lado da fornalha e sai pelo lado do ventilador, que se
encontra do lado oposto. As calhas cruzadas formam um ngulo de 90 entre
si, fazendo com que o ar quente entre por um lado e saia formando um ngulo
reto, sendo assim, a fornalha e o ventilador no se encontram em linha. Este
sistema apresenta dificuldade para limpeza da torre, comprometendo a atuao
e colocando-o em risco de incndio, alm de no oferecer uma secagem
uniforme em toda a seo (COMIL, 2013; KEPLER WEBER, 2013).
O monitoramento do ar de secagem realizado em trs pontos da
torre, atravs de sensores localizados na entrada do primeiro estgio de
secagem, no segundo estgio e na sada para os ventiladores. O aparelho de
medio est incorporado ao quadro de comando de descarga, podendo ser
programado para emitir sinal sonoro quando os valores sarem da faixa de
temperaturas pr-programadas. O sistema de carregamento de gros pode ser
intermitente, trabalhando por carga, no possuindo zonas de resfriamento
recebem uma carga de gros que circula na torre at a completa secagem
(BROD, 1999).
O principal componente de um secador a torre, dividida em duas
zonas. Na parte superior, conhecido como cmara de secagem o ar entra
 21

aquecido. A segunda zona, estabelecida na parte inferior, a zona de

resfriamento da massa de gros, conforme descrito nas Figura 4 e 5.

Figura 4 Secador continuo de fluxo misto. Fonte: Kepler Weber (2013).

A torre formada por quadros laterais. Estas fazem o fechamento e

a estrutura lateral da torre de secagem, so aparafusados entre si e
sustentam os difusores de entrada e sada do ar. Espelhos e dutos ou
calhas so dispositivos montados que permitem a entrada do ar,
sendo os do lado da fornalha abertos e do lado do ventilador
fechados. Este procedimento auxilia no direcionamento do fluxo do ar
em contracorrente ou concorrente, possibilitando que o ar atravesse
uma camada de gro da ordem de 210 mm. Neste momento que se
d a troca de calor do ar com a massa de gros e a umidade do gro
com o ar. Na cmara de resfriamento, os gros trocam calor com o ar,
resfriando-se (PARK et al; 2007).
 22

Figura 5 - Detalhe da torre de secagem. Fonte: Kepler Weber (2013).

Para cada tipo de gro, recomenda-se uma temperatura de ar de

aquecimento, no caso do milho as faixas de temperatura variam de 80C a
100C. Aps a secagem realizada deixando o produto com 14% de umidade,
os gros devem ser armazenados em locais apropriados, para que no sofram
alteraes na qualidade inicial.

3.4.4 Armazenagem em silos a granel

O armazenamento pode ser realizado tanto em sacos como em silos a

granel. No caso de cooperativas de armazenamento de gros, em geral o
armazenamento feito em silos a granel, os quais devem estar limpos,
protegidos da luz, calor e umidade, alm de possuir um sistema de ventilao
muito eficiente (EMBRAPA, 2004).
Os silos so constitudos de chapas zincadas fixadas com parafusos,
suportando ventos de at 120 Km/h. Possuem escadas internas e externas
permitindo acesso ao silo para inspeo e limpeza. Dispe tambm, de um
sistema de termometria para leitura da temperatura da massa de gros no
interior do silo, possibilitando o acionamento dos ventiladores e sistemas de
aerao na hora exata (COMIL, 2013; KEPLER, 2013).
 23

Os gros so materiais higroscpicos, ou seja, tm capacidade de

ceder ou absorver a umidade do ar que os envolve. Ao respirar o gro absorve
oxignio liberando calor, umidade e anidrido carbnico, elevando assim sua
temperatura, acarretando em aes microbianas graves e irreversveis (ELIAS,
2003).
O equilbrio higroscpico representa uma estabilizao entre a
temperatura e umidade do gro e a temperatura e umidade relativa do ar.
Quando em temperaturas iguais ocorre a igualdade das tenses entre a
percentagem de umidade dos gros e a umidade relativa do ar. Assim, quando
h equivalncia no deslocamento da umidade ocorrer o equilbrio higroscpico
(CUNHA, 2001).
A migrao de umidade est relacionada com a temperatura e o teor de
umidade do gro e a maior causadora de danos que ocorrem em gros
estocados. No inverno, o ar frio que est localizado junto parede do silo
provoca um fluxo de ar que circula em seu interior, de cima para baixo. Ao
mesmo tempo, o ar existente entre os gros no fundo e no centro do silo
absorve o calor dos gros quentes, forando o ar a subir. A combinao do
fluxo do ar frio com o fluxo de ar quente faz o ar circular. Quando o ar se
aproxima da superfcie da massa armazenada a umidade condensa nos gros
frios da superfcie, provocando uma zona de umidade e uma crosta de gros
em deteriorao. No vero, o processo ocorre no sentindo inverso ao do
inverno (CUNHA, 2001). A Figura 6 demonstra um esquema de migrao de
umidade no inverno e vero.

Figura 6: Migrao de umidade em silo no inverno e vero. Fonte: Cunha (2001).

 24

A instruo normativa n03, do Ministrio da Agricultura, Pecuria e

Abastecimento, publicada no Dirio Oficial da Unio em 18/01/2010 estabelece
que: as unidades armazenadoras para produtos a granel, devem ser dotadas
de sistema de aerao em condies operacionais adequadas. As estruturas
de armazenagem do tipo vertical devem ser dotadas de sistema de aerao
com fluxo de ar de no mnimo 0,05 metro cbico por minuto, para cada
tonelada de capacidade esttica (BRASIL, 2010).
A aerao de gros a passagem forada do ar no interior da massa
dos gros, promovendo a reduo e uniformizao da temperatura na massa
de gros armazenados, visando uma boa conservao pela reduo da
atividade metablica do gro e dos organismos associados, evitando perdas
por concentrao de umidade e aquecimento, impossibilitando o
desenvolvimento de fungos e produo de micotoxinas. A aerao realizada
por insuflao consiste na aspirao por um ventilador ou exaustor, que conduz
atravs dos dutos de distribuio o ar por sistemas de canaletas. O ar insuflado
ir expulsar o ar modificado sem atravessar a massa de gros, com exceo
dos que estiverem rente ao corpo do silo (ELIAS et al; 2011; QUIRINO, 2011).

3.5 Pragas na armazenagem

Uma vez armazenado, o gro est sujeito a transformaes,

deterioraes e perdas devido interao de fenmenos fsicos, qumicos e
biolgicos. Os principais fatores que influenciam so: temperatura, umidade,
disponibilidade de oxignio, micro-organismos, insetos, roedores e pssaros
(EMBRAPA, 2007).
Os insetos so os principais responsveis por perdas no milho no
perodo de armazenagem atacando inicialmente a regio do embrio do milho,
onde o ovo depositado, resultando no nascimento das larvas que completam
seu desenvolvimento dentro da semente. Segundo dados da EMBRAPA 2007,
em milhos armazenados a granel em silos, ou sacarias pode-se chegar a uma
baixa percentual de 1 a 2% do peso do gro devido as perdas por insetos. A
 25

maioria dos insetos que atacam os gros armazenados so de origem tropical

e subtropical. As condies ideais de desenvolvimento ficam entre 23 e 25C,
com umidade relativa prxima de 70% (SILVA, FILHO,DEVILLA, 2009).
O Sitophilus zeamais (caruncho) uma das principais pragas dos
gros armazenados, responsvel pela perda de gros e subprodutos. So
besouros pequenos medindo aproximadamente 3 mm de comprimento,
possuem quatro manchas avermelhadas no litro, suas larvas apresentam
colorao amarelo-clara com a cabea mais escura e as pupas brancas. Seus
ovos so colocados sobre os gros e aps eclodirem o perfuram para se
alimentar (BRAGA; et al, 2003). Outra praga conhecida por seus estragos no
milho armazenado a Sitotroga cerearella (mariposa) de cor amarelo-palha
(conhecida como traa dos cereais), que mede entre 5mm e 6mm de
comprimento. A Sitophilus oryzae tambm tem sua importncia e formada por
pequenos besouros de cor castanho-escura que medem entre 2mm e 3mm
(EMBRAPA, 2006).
Outra praga que causa grandes prejuzos aos milhos so os ratos, que
alm de destrurem grande quantidade de gros incorporam mau cheiro pela
urina, que pode contaminar os gros com bactrias causadoras de doenas
como a leptospirose (ARAUJO, 2008). Estima-se uma perda anual de at 8%
da produo mundial de cereal e razes, visto que cada roedor consegue
consumir por dia o equivalente a 10% do seu peso (ZULEN, 2007).
O manejo integrado de pragas (MIP) um sistema de controle de que
procura preservar e aumentar os fatores de mortalidade natural das pragas
pelo uso integrado dos mtodos de controle selecionados com base em
parmetros tcnicos, econmicos, ecolgicos e sociolgicos. O MIP dividido
em 3 etapas: avaliao do agroecossistema, tomada de deciso e seleo dos
mtodos de controle (PICANO, 2010).
A temperatura e umidade so dois quesitos extremamente importantes
na ocorrncia de insetos e fungos no armazenamento. A grande parte das
espcies de insetos e fungos reduz sua atividade biolgica a 15C. Gros com
elevados teores de umidade tornam-se vulnerveis ao ataque de insetos e
fungos (ZULEN, 2007).
 26

3.6 Fungos

Mofos ou bolores so micro-organismos eucariticos, multicelulares e

filamentosos. Sua atividade pode ocasionar alteraes no sabor e na qualidade
dos alimentos. Algumas destas alteraes so desejveis, como na fabricao
de queijos. Porm, em muitos casos, os fungos podem causar transformaes
indesejveis nos alimentos produzindo sabores e odores desagradveis
causados por diferentes graus de deteriorao (MAZIERO, 2010).
Os gros de milho esto suscetveis deteriorao por fungos em duas
etapas: na prcolheita, com podrides de espigas e formao de gros
ardidos e na pscolheita dos gros durante o beneficiamento, armazenamento
e transporte (PINTO, 2005). As podrides destacam-se no mundo entre as mais
importantes doenas que atacam a cultura do milho por causarem reduo de
produo e de qualidade de gros (COSTA et al., 2005; VIANA, 2009).
Os fungos podem atacar o gro causando danos fsicos como
descoloraes, reduo nos contedos de carboidratos, protenas e acares
totais. O milho ardido tem como principal responsvel o ataque de fungos na
lavoura. Esses fungos podem ser divididos em dois grupos: a) apenas
produzem gros ardidos; e b) alm da produo de gros ardidos, so
produtores de toxinas (micotoxinas). So considerados ardidos os gros que
possuem pelo menos um quarto de sua superfcie com descoloraes
(EMBRAPA, 2010).
Outro gnero que se destaca o Aspergillus, classificado entre os
fungos de armazenagem, exigindo elevada umidade para seu
desenvolvimento, causando doenas em homens e animais, podendo ser
patognicos, com destaque para Aspergillus flavus, fungo de armazenamento
produtor de aflatoxinas (GASPERINI, 2011). Os esporos de Aspergillus esto
amplamente distribudos no meio ambiente, especialmente em locais contendo
matria orgnica em decomposio (CRUZ, 2007). So considerados
iniciadores da deteriorao das sementes estando ou no associadas a outros
fatores, como pequenas aberturas nas superfcies das sementes causadas por
insetos, transporte e armazenamento (MULLER, 2010).
 27

Entre os fungos, destaca-se o gnero Fusarium que classificado

como um fungo imperfeito, caracterizado por um miclio hialino, ramificado e
tabicado, com esporOs em forma de filides e condios de forma e tamanho
varivel (LEAL et al., 2005). Pode ser encontrado no solo e em vrias regies
do mundo, sobretudo em locais de clima tropical e subtropical sobrevivendo por
longos perodos no solo pela formao de estruturas chamadas clamidsporos,
podendo colonizar ramos, folhas, inflorescncias e frutos atravs de seus
condeos que so disseminados pelo ar ou pela gua (PINTO, 2005; TINOCO,
2010). Sua temperatura tima de desenvolvimento est situada entre 20 a
25C. Produzem toxinas como fumonisinas, tricotecenos, zearalenona,
moliformina e cido fusrico, alm de patologias em plantas. A presena do
fungo toxignico no implica impreterivelmente na produo de micotoxinas, as
quais esto intimamente relacionadas capacidade de biossntese do fungo e
das condies ambientais predisponentes, como em alguns casos, a
alternncia das temperaturas diurna e noturna (PINTO, 2005).

3.7 Micotoxinas

Micotoxina o termo usado para descrever substncias txicas

formadas durante o crescimento de fungos, o que est associado a mudanas
na natureza fsica do alimento no sabor, odor e aparncia (CANADO, 2004).
Jay (2005) define micotoxinas como sendo metablitos secundrios produzidos
por fungos filamentosos. So molculas um tanto quanto diferentes com
estruturas que variam de simples anis heterocclicos apresentando peso
molecular de at 50 Da, a grupos de 6 a 8 anis heterocclicos irregularmente
dispostos e com peso molecular total >500 Da e que no apresentam
imunogenicidade (FREIRE et al; 2007).
As micotoxinas presentes em alimentos so um srio problema para a
sade pblica e para a qualidade dos alimentos. H muitos anos os fungos
foram conhecidos pela sua capacidade de produzir metablitos txicos, no
 28

entanto, os seus efeitos foram largamente ignorados, tornando as mico

toxicoses negligenciadas. Os rgos mais afetados so: fgado, rins, crebro,
msculos e o sistema nervoso. Os sintomas vo desde nuseas e vmitos at
a falta de coordenao dos movimentos (ou ataxia) e morte (CANADO, 2004).
Os principais substratos para a produo dessas toxinas so os
cereais, cujas perdas segundo estimativa da Food and Agriculture Organization
of the United Nations FAO chegam a 25% dos gros produzidos (AMARAL et
al; 2006). De acordo com a quantidade ingerida e tempo de exposio
micotoxicose classificada em aguda, crnica e subcrnica, tendo esta mais
importncia econmica causando reduo na produtividade e no crescimento
dos animais (YANAKA et al; 2007).
As micotoxinas podem entrar na cadeia alimentar humana e animal por
meio de contaminao direta ou indireta. Sabe-se que a maioria dos alimentos
e raes pode permitir o crescimento e o desenvolvimento de fungos
toxignicos, tanto durante a produo, processamento, transporte e o
armazenamento (FREIRE et al; 2007, apud FRISVAD, 1992).
A contaminao direta ocorre quando o produto diretamente usado na
alimentao humana ou de animais, sendo contaminado por um fungo
toxignico, com posterior formao de micotoxinas. J, a contaminao indireta
de alimentos e raes ocorre quando um ingrediente qualquer foi previamente
contaminado por um fungo toxignico, e mesmo que o fungo tenha sido
eliminado durante o processamento as micotoxinas ainda permanecero no
produto final (SILVA, 2005; FREIRE et al; 2007, apud FRISVAD e SAMSON,
1992).
Para preveno e controle das micotoxinas, deve-se observar que os
fungos no podem se desenvolver (ou micotoxinas serem produzidas) em
alimentos precisamente secos. Para reduzir e prevenir a produo da maioria
das micotoxinas, o processo de secagem deve ser feito logo aps a colheita e
o mais rpido possvel. Para um alimento seguro deve-se manter a atividade de
gua (aw) em aproximadamente 0,7. A manuteno de alimentos abaixo de 0,7
aw uma tcnica eficaz usada mundialmente para controlar estragos
provocados por fungos e produo de micotoxinas em alimentos. Os insetos
so as principais causas de estragos, pragas de insetos do campo e algumas
espcies de armazenamento estragam o gro e estimulam em ambiente mido
 29

o crescimento de fungos no gro em amadurecimento. No armazenamento,

muitas espcies de insetos atacam o gro, e a umidade que pode acumular
oferece um meio ideal para fungos (FOOD INGREDIENTS BRASIL, 2009).

3.7.1 Aflatoxinas

Dentre as micotoxinas, a aflatoxina a mais estudada, havendo relatos

da sua descoberta desde 1960. So metablitos secundrios produzidos por
algumas cepas de Aspergillus, principalmente das espcies A. flavus e A.
parasiticus, os quais desenvolvem-se naturalmente em produtos alimentcios,
como amendoim, milho, feijo, arroz, trigo, dentre outros cereais (OLIVEIRA,
GERMANO, 1997).
A palavra aflatoxina pode ser utilizada para designar 17 substncias
qumicas, tendo quatro, como as principais que so: B1, B2, G1 e G2. Quando
submetidas luz ultravioleta apresentam fluorescncia, azul-violeta ou
esverdeada, por isso, so representadas pelas letras B (blue-azul) ou G (Green
- verde), j os ndices 1 e 2 referem-se sua mobilidade cromatogrfica
(CANADO, 2004).
Podem ser encontradas em frutas secas, oleaginosas como amendoim,
e cereais como milho, feijo, arroz, trigo, dentre outros. Em condies de
umidade e temperatura elevadas constituem um srio risco sade humana
devido aos seus efeitos txicos imediatos, imunossupressores, mutagnicos,
teratognicos e carcinognicos (MAZIERO, 2010).
Nos gros de milho armazenados o desenvolvimento de micotoxinas
ocorre por fungos especialmente do gnero Aspergillus, que necessitam de
temperatura, umidade relativa do ar e substrato adequados para o
desenvolvimento. So condies timas para a produo de aflatoxinas em
gros de milho: umidade relativa de 80 a 85%, umidade dos gros de 17% e
temperatura de 24 a 35C. Porm, aliado a presena de oxignio e um longo
perodo de armazenamento pode haver produo de micotoxinas com umidade
12% (DILKIN et al., 2000).
 30

A produo de aflatoxinas por Aspergillus flavus s pode iniciar-se com

atividade de gua (aw) a partir de 0,83, porm, a aw mnima para o
crescimento e produo de aflatoxinas influenciada pela temperatura, sendo
que temperaturas abaixo de 13C so capazes de prevenir a formao de
aflatoxinas, e temperaturas entre 24 e 30C so mais favorveis para a
produo da mesma (CANADO, 2004 apud Bullerman et al, 1984).
No Brasil, a ANVISA Agncia Nacional da Vigilncia Sanitria
publicou no Dirio Oficial da Unio a resoluo RDC n 7 de 18 de fevereiro de
2011, a qual dispe sobre limites mximos tolerados (LMT) para micotoxinas
em alimentos. Os limites mximos tolerveis de aflatoxinas B1, B2, G1, G2 em
milho, milho em gro (inteiro, partido, amassado, modo), farinhas ou smolas
de milho de 20 Ug/kg.
 31

4 METODOLOGIA

Na safra vero 2012/2013, um total de 13 amostras, em trs repeties

foram coletadas de um silo a granel com capacidade de armazenamento de
4.800 toneladas (80.000 sacos) em uma cooperativa de Francisco Beltro
PR. A coleta foi realizada com caladores, em diferentes alturas do silo, com o
auxlio de funcionrios da cooperativa os quais utilizaram os equipamentos de
proteo individual - EPI. Foram retirados aproximadamente 1 Kg de milho,
homogeneizados e acondicionados em sacos de papel. Estes mantiveram-se
resfriados e foram encaminhados ao laboratrio da UTFPR-FB, em at 24
horas aps a coleta.
As primeiras 06 amostras foram realizadas em diferentes alturas do silo
em um nico dia no ms de maio, objetivando caracterizar o milho
armazenado, conforme descrito na Figura 7. Posteriormente realizaram-se
coletas mensais, nos meses de junho a dezembro de 2013, sempre em
momentos de retirada de gros de milho do silo.

Figura 7 Amostragem para caracterizao do milho armazenado Fonte:

Autoras (2014).

Durante o perodo de trabalho, fez-se o acompanhamento mensal de

temperatura e umidade relativa- UR no silo, analisando possveis alteraes
 32

que pudessem acarretar em problemas na armazenagem. A medio da

temperatura e umidade relativa - UR pode ser usada como um mtodo para
constatar a causa da deteriorao de gros armazenados.
As anlises foram realizadas nos laboratrios de Qumica, e
Microbiologia da Universidade Tecnolgica Federal do Paran Cmpus
Francisco Beltro, conforme mostra no fluxograma 2.

Fluxograma 2- Procedimento Experimental.

4.1 Amostras de milho

4.1.1 Preparo da amostra para anlise

As amostras foram homogeneizadas, conservadas em sacos de papel

em local seco e arejado. Atravs do quarteamento manual foram espalhados
1kg da amostra com uma esptula sobre uma folha grande de papel. Logo
aps, foram separadas em quatro partes em forma de cruz, retirando-se dois
segmentos opostos devolvendo-o para o pacote. Misturou-se as duas partes
restantes e repetiu-se o processo de separao de quatro segmentos,
continuando at obter 200 g de material, para anlise em triplicata. As amostras
 33

foram ento submetidas anlise microbiolgica (contagem dos principais

bolores isolados do milho), anlises fsico-qumicas e de micotoxinas.

4.2 Anlise fsico-qumica

Para a realizao das anlises fsico-qumicas, foram seguidos os

procedimentos descritos pelo Instituto Adolf Lutz (IAL, 2008) e para
determinao de protenas utilizou-se o mtodo Kjeldahl (AOAC,1997).

4.2.1 Secagem direta em estufa a 105C

Inicialmente, triturou-se a amostra de milho e pesou-se uma quantidade

de 10g, as quais foram colocadas em cadinho de porcelana previamente
tarado. A amostra foi ento transferida para uma estufa a 105C, a qual
permaneceu durante 6 horas at peso constante. Calculado de acordo com a
equao:

U (%) = Pi-Pfx100 (1)

Pi-T
Onde: U (%) =porcentagem de umidade
Pi=peso inicial da amostra
Pf=peso final
T=peso do recipiente

4.2.2 Cinzas totais

O procedimento foi realizado aps a determinao de umidade a

105C, possibilitando assim que a amostra j estivesse seca. Transferiu-se esta
 34

para mufla a 550C, por aproximadamente 8 horas. A amostra foi resfriada em

dessecador at a temperatura ambiente e pesada. Calculando de acordo com a
equao 2.

Cinzas totais =
100xN (2)
P
Onde:N= nmero de gramas de cinzas
P=numero de gramas de amostra

4.2.3 Lipdios ou extrato etreo Extrao direta em Soxhlet

Pesou-se 2 a 5 g da amostra em papel filtro e esta foi grampeada.

Transferiu-se o cartucho para o aparelho extrator tipo Soxhlet. Acoplou-se o
extrator ao balo de fundo chato previamente tarado a 105C. Adicionou-se
ter de petrleo em quantidade suficiente para um extrator Soxhlet e meio.
Adaptou-se a um refrigerador de bolas, mantendo-se sob aquecimento em
chapa eltrica, extrao contnua por 8 horas (quatro a cinco gotas por
segundo). Retirou-se o papel de filtro grampeado, destilou-se o ter em
rotaevaporador rotativo transferiu-se o balo com o resduo extrado para uma
estufa a 105C, mantendo-se por cerca de uma hora. Resfriou-se em
dessecador at a temperatura ambiente. Pesou-se as amostras, calculado de
acordo com a equao 3.

L(%) =Pf-Pix100 (3)

g amostra
onde:L(%) = porcentagem de lipdeos
Pf=peso final do balo
Pi=peso inicial do balo
 35

4.2.4 Determinao de protenas Mtodo Kjeldahl

A determinao de protenas foi realizada pelo mtodo semi-micro

Kjeldahl, onde se determina o nitrognio contido na matria orgnica, incluindo
o nitrognio protico e outros compostos nitrogenados no proticos. O mtodo
Kjeldahl constitudo de trs etapas: digesto, destilao e titulao. Calculado
de acordo com as equaes 4 e 5.

N%=VxNxfx14x100 (4)
m
Onde:N%= porcentagem de nitrognio total da amostra;
V=volume gasto de Hcl gasto na titulao (mL);
N=concentrao (mol/L) do padro (HCl);
f=fator de correo do padro;
m=massa da amostra (mg).

PB (%) =%NxFE (5)

Onde: PB (%): porcentagem de protena bruta contida na amostra;

FE:fator especifico de converso: 6,25

4.3 Anlise microbiolgica

4.3.1 Mtodo de contagem dos principais bolores isolados do milho

A quantificao de bolores em alimentos feita pelo mtodo de

contagem padro em placas, determinando-se o nmero de unidades
formadoras de colnias (UFC). O mtodo utilizado no trabalho foi o
plaqueamento Pour plate.
 36

Foram seguidos os procedimentos conforme descrito por Silva et al.;

(2007). A contagem dos principais bolores isolados do milho foi realizada a
partir de 25 g da amostra que foi assepticamente triturada e homogeneizada.
As amostras foram adicionadas a um erlenmeyer contendo 225 mL de soluo
peptonada a 0,1%, resultando na diluio 10-1. Procedendo-se a diluio
seriada com soluo peptonada de 10-1 a 10-5. Aps realizadas as diluies,
pipetou-se assepticamente 1 mL da amostra (equivalente a diluio 100) em
triplicata, em placas de Petri, devidamente esterilizadas e identificadas,
repetindo-se o procedimento para as demais diluies (10-1;10-2; 10-3; 10-4 e 10-
5
). Em cada uma das placas contendo a amostra, foram adicionados cerca de
20mL de gar Batata Dextrose (BDA) e homogeneizadas. Aps a solidificao
do meio, as placas foram incubadas invertidas por 5 dias em estufa BOD a
25C.

4.4. Anlise de aflatoxina

4.4.1 Determinao de aflatoxina B1 em milho por Cromatografia em Camada

Delgada CCD

A anlise de aflatoxinas por CCD (cromatografia em camada delgada)

foi conduzida conforme metodologia descrita por Soares e Rodriguez Amaya
(1989), apud ONO, et al. (2007), conforme a Figura 8.

4.4.2 Extrao de aflatoxina

Inicialmente triturou-se 200g de amostra para granulometria de 50

mesh e homogeneizou-se. Em seguida, pesou-se 50g de amostra triturada e
adicionou-se 270 mL de metanol e 30 mL de cloreto de potssio (KCl) 4%.
Agitou-se em liquidificador por 5 minutos. Filtrou-se o extrato em papel de filtro
comum e transferiu-se 150 mL do filtrado para um bquer de 500 mL.
 37

Adicionou-se ao bquer de 150 mL de soluo clarificante de sulfato de amnio

(NH4)2SO4 a 30% e cerca de 20g de terra de diatomcea, agitando-se com
basto de vidro. Filtrou-se novamente em papel filtro comum, transferiu-se 150
mL do filtrado para um funil de separao, adicionou-se 150 mL de gua
destilada e 10 mL de clorofrmio. Agitou-se o funil de separao suavemente
por 3 minutos para extrair a toxina. Esperou-se a separao das fases (aquosa
e clorofrmica) e coletou-se 5,0 mL da fase inferior (clorofrmica) em um
frasco. Repetiu-se a operao com a adio de 10 mL de clorofrmio ao funil
de separao. Agitou-se e esperou-se a separao das fases, coletou-se 5,0
mL da fase inferior do funil no mesmo frasco contendo os 5,0 mL da primeira
partio e transferiu-se o volume total da frao clorofrmica (10 mL) para um
tubo e evaporou-se em banho-maria a 50C sobre fluxo de nitrognio gasoso.

Figura 8 Fluxograma para determinao da presena de aflatoxina em gros.Fonte: ONO, et

al. (2007).
 38

4.4.3 Anlise de aflatoxina B1

Ativou-se a placa cromatogrfica (20 x 20 cm, slica gel 60) colocando-

a em estufa a 100C por 30 minutos.
Ressuspendeu-se o resduo da amostra com 200L de clorofrmio em
agitador de tubos por 30 segundos. Aplicou-se a 2,0 cm da base dois pontos de
amostra (5L) e quatro pontos (2,5; 5,0; 7,5 e 10 L) de padro de aflatoxinas
(2,5 g/mL) na cromatoplaca. Colocou-se a cromatoplaca em cuba
cromatogrfica contendo como fase mvel tolueno, acetato de etila,
clorofrmio, e acido frmico (70: 50: 50: 20). Removeu-se a placa aps o
desenvolvimento de 10 cm de corrida e deixou-a secar. Visualizou-se a placa
sob luz UV a 366nm. Para a quantificao, comparou-se a intensidade de
fluorescncia da banda comparada micotoxina na amostra e no padro.

4.4.4 Anlise estatstica

Os dados obtidos das anlises fsico-qumicas foram submetidos

anlise de varincia (ANOVA), e como existiu diferena significativa entre as
amostras, foi ento, realizado teste de Tukey para comparao de mdias. Os
resultados foram expressos em tabelas e grficos e foram comparados com os
dados da literatura, de modo a estabelecer um parmetro para as alteraes
fsico-qumicas, microbiolgicas e de aflatoxina B1.
 39

5 RESULTADOS E DISCUSSO

5.1 Anlise microbiolgica

As tabelas 1 e 2 demonstram os resultados de 13 amostras de milho

coletadas nos meses de maio a dezembro de 2013, sendo na tabela 1 as 6
primeiras (BP01-BP06) coletadas no mesmo dia em diferentes alturas do silo
no ms de maio, com o objetivo de caracterizar o milho armazenado. Na tabela
2 esto as demais amostras (BP07 a BP13) que foram coletadas mensalmente
a partir do ms de junho a dezembro/2013, para que pudesse ser realizado o
acompanhamento de suas alteraes ao longo do tempo de armazenagem. Os
resultados foram calculados de acordo com as mdias de 3 repeties para
cada amostra. No presente trabalho no ser apresentado contagem total de
bolores e leveduras, somente dos bolores mais frequentes isolados.

Tabela 1 - Contagem inicial dos principais bolores isolados do milho na amostra

de caracterizao.

Bolores (UFC/g)
Amostra Penicillium sp. Fusarium verticillioides Aspergillus flavus
5 4 5
BP01 3,6x10 (2,33) 3,3x10 (2,08) 1,3x10 (0,57)
5 4 5
BP02 2,6x10 (0,88) 1,6x10 (0,91) 1,8x10 (1,02)
3 5
BP03 3,9x10 (1,93) n.d 2,6x10 (1,09)
4 4
BP04 4,0x10 (1,41) n.d 2,3x10 (1,52)
4 4 3
BP05 2,9x10 (3,15) 2,7x10 (2,28) 1,0x10 (0,70)

BP06 1,9x104 (0,74) 2,3x102 (1,83) 2,2x103 (2,07)

n.d: no detectado
*BP faz referncia ao nome das alunas, seguido do respectivo nmero das amostras coletadas

Os dados expressos na tabela 1 representam a contagem de bolores

isolados do milho atravs das amostras de caracterizao, as quais foram
coletadas ao mesmo tempo no ms de maio em diferentes alturas do silo.
 40

De acordo com os dados da tabela 1, pode-se observar que o maior

valor apresentado para o gnero Penicillium foi de 3,6x105 UFC/g na amostra
BP01, enquanto o menor valor foi na amostra BP03 com resultado de 3,9x103
UFC/g. Para o gnero Fusarium os resultados variaram de 3,3x104 UFC/g na
amostra BP01 sendo este o valor mximo apresentado, e as amostras BP03 e
BP04 respectivamente no foi detectada a presena do gnero Fusarium. A
amostra BP01 foi responsvel pela maior presena de Penicillium e Fusarium,
dando indcios de que essa amostra estava contaminada e que possivelmente
essa contaminao ocorreu no campo em virtude dos gneros apresentados
serem de caractersticos do campo.
Quando analisamos o gnero Aspergillus pode-se notar que o valor
mximo apresentado foi de 2,6x105 UFC/g na amostra BP03, a qual no
apresentou indcios do gnero Fusarium e obteve a contagem mais baixa de
todas as amostras avaliadas na caracterizao para o gnero Penicillium. O
valor mnimo para Aspergillus foi de 1,0x103 UFC/g na amostra BP05, a qual
apresentou valores mdios para os gneros Penicillium e Fusarium.
A tabela 2 demonstra os resultados obtidos para contagem dos
principais bolores isolados do milho durante os 8 meses de armazenamento.

Tabela 2 - Contagem dos principais bolores isolados do milho armazenado.

Bolores (UFC/g)
Amostra Penicillium sp. Fusarium verticillioides Aspergillus flavus
4 4 3
BP07 4,7x10 (3,10) 1,5x10 (0,66) 2,2x10 (1,48)

2 3 2
BP08 2,1x10 (1,01) 3,8x10 (3,06) 4,2x10 (2,53)

2 2 3
BP09 4,0x10 (1,41) 1,6x10 (0,57) 3,2x10 (0,35)
5 4 4
BP10 5,4x10 (2,37) 6,2x10 (1,90) 3,2x10 (3,18)
5 4 5
BP11 4,2x10 (3,13) 3,8x10 (2,94) 1,9x10 (1,58)
4 4
BP12 3,6x10 (2,97) n.d 1,3x10 (0,47)

BP13 3,1x103 (1,45) 2,5x102 (2,12) 2,9x104 (2,32)

n.d.: no detectado
*BP faz referncia ao nome das alunas, seguido do respectivo numero das amostras coletadas
 41

Conforme os dados expressos na tabela 2 pode-se observar que os 3

gneros isolados do milho durante o armazenamento apresentaram resultados
elevados na contagem de UFC/g, sendo os gneros Aspergillus e Fusarium os
mais importantes envolvidos na produo de micotoxinas. Os principais fatores
que favorecem o crescimento desses micro-organismos em cereais
armazenados so: alta umidade relativa do ar, teor de gua do substrato e
temperatura de armazenamento (BENTO et al; 2012).
De acordo com os dados observados na tabela 1 e 2, o gnero
Aspergillus flavus esteve presente desde a coleta da amostra de caracterizao
(tabela 1), com presena at o final do perodo de armazenamento (tabela 2).
O aparecimento do gnero Aspergillus em todas as amostras pode ser
consequncia da cooperativa receber milho de diferentes variedades com
umidades e contaminaes diferentes, podendo ocasionar um favorecimento
ao crescimento dos fungos ps-colheita.
Uma vez armazenado no silo, o milho no passou pelo processo de
homogeneizao, o que demonstra a heterogeneidade nos resultados
apresentados ao longo do perodo de armazenamento, e apenas uma das
amostras (BP02) apresentou presena de aflatoxina B1, mas em quantidade
inferior ao que determina a legislao (BRASIL, 2011).
Importante destacar que a amostra BP02 uma amostra de
caracterizao, portanto o desenvolvimento da aflatoxina B1 detectada,
provavelmente ocorreu antes da entrada no silo. Este entendimento baseia-se
no fato de que esta amostra de milho foi uma das ltimas a entrar no silo, e
tambm uma das primeiras a sair, j que o processo de retirada dos gros no
silo ocorre de cima para baixo (Figura 7), no havendo portanto tempo
suficiente para o desenvolvimento do fungo e consequente produo da toxina
na armazenagem.
Santin, et al (2004) sugere que a mistura de lotes de gros infectados
com outros no infectados prejudica a qualidade e o valor comercial de toda a
produo, por favorecer o desenvolvimento de fungos ps-colheita, caso no
seja realizada a secagem adequada, monitoramento peridico da temperatura,
monitoramento do teor de umidade dos gros e do ambiente durante o
armazenamento do produto.
 42

Segundo Pereira et al.(2002) a contaminao e a deteriorao

causadas por fungos nos alimentos so mais comuns que as ocasionadas por
qualquer outro grupo de micro-organismo. A contaminao por fungos
importante no somente sob o ponto de vista sensorial, mas tambm pelo
perigo que a produo de micotoxinas representa ao consumidor.
Mattos et al.(2009), avaliou a qualidade dos gros de milho utilizados
em uma indstria alimentcia de Campina Grande no perodo de 2004 e 2005, e
observaram que o gnero Aspergillus foi o de crescimento mais acentuado,
tendo sido encontrado em 100% das amostras analisadas.
Farias et al. (2000) e Ribeiro et al. (2003) estudaram o gro de milho
armazenado e seus derivados, sendo os principais fungos detectados
pertencentes aos gneros Penicillium, Aspergillus e Fusarium. Bento, et al
(2012), avaliaram 84 amostras de milho oriundas de unidades armazenadoras
das regies Norte, Sul, Leste e Oeste do estado de Mato Grosso, referente s
safras 2009 e 2010. A identificao dos patgenos obteve prevalncia dos
gneros Fusarium, Aspergillus e Penicillium.
Os fungos do gnero Aspergillus so fungos de armazenamento,
indicadores de deteriorao de sementes e gros, podendo ocasionar a
produo de micotoxinas. Esses fungos necessitam de teores de umidade
entre 13% e 18%, havendo pouca incidncia durante o crescimento da planta
no campo e nos gros recm-colhidos (SANTIN, 2001).
Vecchiatto et al. (1994), Cirio (1998) afirmam que o aparecimento do
gnero Penicillium pode estar relacionada incidncia de Aspergillus,
ocasionando o fenmeno de competitividade entre os gneros. Os teores de
umidade exigidos por Penicillium esto acima de 16,5%. Em geral, Aspergillus
desenvolvem em teores de umidade mais baixos (13,5%), no entanto com
crescimento muito rpido acima deste valor, produzem calor e umidade
metablica que favorecem a sucesso das espcies e de gneros de fungos.

5.2 Anlise aflatoxina B1 (AFB1)

Os resultados das anlises de aflatoxina B1 em gros de milho

oriundos da cooperativa revelaram que, do total de 13 amostras avaliadas
 43

apenas 1 (7,70%) apresentou a aflatoxina B1, porm, com nvel abaixo do

limite mximo (20 g/Kg) estabelecido pela ANVISA. (2011) (e abaixo do limite
de quantificao do mtodo analisado). A amostra com presena da aflatoxina
B1 foi amostra BP02 que apresentou resultado de 1,8x105 UFC/g para o
gnero Aspergillus. Esta amostra apresentou na coleta um teor de umidade de
7,57%, umidade muito abaixo da umidade requerida pelo fungo para o seu
crescimento. O que nos leva a crer que esta contaminao possa ter ocorrido
anteriormente a sua entrada no silo, pois a mesma foi coletada no ms de
maio, logo aps sua chegada cooperativa e posterior sua secagem,
momento em que foi realizada a caracterizao do silo, onde foram coletadas
as 6 amostras para caracterizar a qualidade do milho no incio do processo de
armazenamento (BP01;BP02;BP03;BP04;BP05;BP06). As demais amostras
foram coletadas mensalmente em sequncia (BP07: junho; BP08: julho) e
assim sucessivamente at amostra final (BP13:dezembro), sendo que as
mesmas no apresentam sequer vestgio da aflatoxina B1 no decorrer dos 8
meses de armazenamento.
O teor de umidade das amostras analisadas variou de 8,52% na
amostra BP13 a 12,36% na amostra BP07, nveis esses inferiores ao valor
mximo (14,5%) permitido pelo Ministrio da Agricultura Pecuria e
Abastecimento, conforme Portaria do n845 de 1976 (BRASIL, 1976). Prado et
al. (1995) apud Almeida (2009), sugere que a ausncia de contaminao por
aflatoxinas pode ser atribuda a nveis reduzidos de umidade, entre 13% e
13,5%.
A boa qualidade dos gros recebidos e os resultados encontrados
demonstraram que, a baixa frequncia e nveis de contaminao por aflatoxina
B1 nas amostras de milho avaliadas podem ser consequncia do eficiente
processo de armazenamento do milho em silo a granel, realizado pela
cooperativa ao longo dos meses de armazenamento, controlando todo o
processo desde o incio com a recepo, limpeza e secagem do gro, seguida
pelo controle de temperatura, umidade relativa e aerao dentro do silo.
Ramos et al. (2008), avaliaram a contaminao por aflatoxinas em
hbridos de milho cultivados em trs regies do estado de Gois, onde detectou
presena do gnero Aspergillus em todas as amostras provenientes do
municpio de Jata-GO, indicativo de que possivelmente nas lavouras deste
 44

municpio o fungo esteve presente nos gros de milho em algum momento do

seu ciclo de produo.
Corts, et al. (2000) constataram que 28,57% das amostras de milho
retiradas de lavouras do estado de Mato Grosso apresentavam nvel mdio de
aflatoxinas de 12,35 g/kg, indicando que o milho no ponto de colheita j
apresentava contaminao por aflatoxinas.
Marques et al. (2009) tambm analisaram a incidncia de fungos dos
gneros Aspergillus, Fusarium e Penicillium e as contaminaes com
micotoxinas em gros de cinco hbridos comerciais de milho em funo da
umidade de colheita, e observaram que a produo de aflatoxinas ocorreu em
gros ainda nas espigas, no campo, devido a condies ambientais favorveis
aos patgenos.
Almeida et al (2009) em seu estudo, coletaram 80 amostras de milho
destinadas a fbrica de raes, obtendo teores de umidade entre 10,1 a 13,8%,
sendo destas 8 contaminadas com nveis variveis de 1 a 5 Ug/kg de aflatoxina
B1, valores considerados abaixo do nvel mximo permitido pela Portaria
MA/SNAD/SFA n. 7 de 1988 para qualquer matria-prima a ser utilizada,
diretamente ou como ingrediente para raes destinadas ao consumo animal.

5.3 Anlises fsico-qumicas

Os valores da composio fsico-qumica esto dispostos nas tabelas 3

e 4, sendo BP01 a BP06 amostras coletadas no ms de maio para
caracterizao do silo, que para discusso dos resultados foi realizado a mdia
e tratamento estatstico das 6 amostras entre si, obtendo um valor nico para
cada parmetro analisado, havendo diferena significativa para cinzas,
protenas e lipdeos. As demais amostras coletadas mensalmente a partir de
junho (BP07) a dezembro (BP13) foram comparados com a mdia da
caracterizao e realizados teste de mdia e anlise estatstica para cada
amostra mensal existindo diferena entre elas.
 45

Tabela 3. Caractersticas fsico-qumicas de amostras de gros de milho para

caracterizao em silos a granel em cooperativa de Francisco Beltro-PR.

Parmetros (%)
Umidade Cinzas* Protenas* Lipdeos*
BP01 8,15 a 1,52 a 8,61 b 5,06 b
(0,10) (0,03) (1,201) (0,424)

BP02 7,57 a 1,74 b 8,23 b 5,12 b

(0,43) (0,10) (0,281) (0,529)

BP03 9,77 a 1,47 a 7,43 b 5,18 c

(3,12) (0,13) (0,464) (1,264)

BP04 9,37 a 1,61b 7,21 b 4,86 a

(1,14) (0,23) (0,246) (0,260)

BP05 8,13 a 1,87 c 6,39 a 5,96 d

(0,03) (0,21) (0,170) (0,775)

BP06 8,21a 1,58 b 7,00 a 4,17 a

(0,08) (0,13) (0,326) (0,405)

Mdia da
8,53 1,63 7,47 5,058
Caracterizao
* base seca **BP faz referncia ao nome das alunas, seguido do respectivo numero das
amostras coletadas

Os resultados expressos na tabela 3 representam as anlises fsico

qumicas para as amostras codificadas de BP01 a BP06 as quais referem-se
caracterizao do produto, retirado em diferentes alturas do silo de
armazenagem, (conforme figura 7). Houve diferena significativa entre as
amostras analisadas para os parmetros de cinzas, protenas e lipdios. No
havendo diferena significativa entre as amostras para a umidade, o que nos
sugere que o processo de secagem realizado pela cooperativa foi eficiente, de
modo que todos os gros estavam com teores prximos de umidade ao entrar
no silo. Apesar dos teores de umidade terem variado, no atingiram valores
que pudessem propiciar micotoxinas acima do limite de quantificao do
mtodo utilizado e perante a legislao vigente (BRASIL, 2011).
 46

Tabela 4. Caractersticas fsico-qumicas de gros de milho armazenados em

silos a granel em cooperativa de Francisco Beltro-PR

Parmetros (%)
Amostra Umidade Cinzas* Protenas* Lipdeos*
Mdia da
8,53 a 1,63 b 7,47 abc 5,058 ab
Caracterizao
12,36 d 1,36 a 7,24 ab 6,34 b
BP07
(0,21) (0,10) (0,23) (0,25)

11,08 cd 1,63 b 8,45 bc 4,24 a

BP08
(0,21) (0,32) (0,25) (0,22)

8,87 a 1,70 b 8,07 bc 5,69 ab

BP09
(0,67) (0,14) (0,09) (0,12)

9,22 ab 1,99 c 7,58 abc 5,64 ab

BP10
(0,14) (0,20) (0,20) (0,44)

12,13 cd 1,97 c 7,46 abc 5,48 ab

BP11
(0,20) (0,08) (0,56) (0,39)

10,29 bc 2,11 c 8,74 bc 5,23 ab

BP12
(0,07) (0,12) (0,22) (0,11)

8,52 a 1,93 c 8,02 bc 5,02 ab

BP13
(0,50) (0,08) (0,72) (0,24)

* base seca **BP faz referncia ao nome das alunas, seguido do respectivo numero das
amostras coletadas

De acordo com a tabela 4 pode-se observar que protenas e lipdeos

apresentaram diferena significativa quando comparadas as amostras de
caracterizao (BP01-BP06), e quando analisadas mensalmente (BP07-BP13).
Por outro lado, cinzas e umidade apresentaram diferena significativa quando
comparadas com a amostra de caracterizao e quando comparadas ao
armazenamento. Houve diferena significativa entre as amostras, inclusive
quando comparadas a amostra de caracterizao. Essas variaes
apresentadas ao longo do perodo de armazenamento podem ser decorrncia
da mudana de clima e temperatura, como tambm em funo das diferentes
variedades de milho existentes dentro do silo.
No grfico 1, estos dispostos os resultados da umidade relativa
UR% (URS) e temperatura C do silo (TS) comparadas com a umidade do gro
% (UGS) armazenado no ms de maio (5) at o ms de dezembro (12). Pode-
se notar que no incio do armazenamento o gro apresentava baixa umidade,
 47

enquanto o silo temperatura baixa, mantendo umidade relativa alta. No entanto,

a partir do ms de junho (6) at o ms de setembro (9) a umidade do gro
obteve comportamento similar, mantendo-se constante. medida que a UR
diminuiu, a temperatura aumentou, do mesmo modo que quando a temperatura
diminuiu, a UR aumentou. No ms de outubro (10) a umidade relativa do ar no
silo aumentou, aumentando tambm a umidade do gro armazenado para
12,14%. Nos meses de novembro e dezembro a UR diminuiu para 61% e 55%
respectivamente, influenciando diretamente na umidade do gro que foi para
10,30% no ms de novembro (11) e 8,52% no ms de dezembro (12).
Sendo o teor de gua um fator importante para determinar a qualidade
das sementes no armazenamento, a secagem de gros constitui uma
ferramenta essencial para sua qualidade, visando manter o teor de gua
adequado para as operaes de beneficiamento, transporte e armazenamento,
(AVELAR, VILLELA, PESKE, 2013). Neste estudo os valores encontrados
atendem a legislao vigente (BRASIL, 1976).
Segundo Weber (2005) o teor de umidade das sementes mais
afetado pela umidade relativa do ar do que pela temperatura, mostrando o
papel da umidade do ar na manuteno da umidade das sementes no
armazenamento. O teor de umidade dos gros armazenados aumenta
rapidamente quando em contato com uma umidade relativa do ar superior a
70%.
Grfico 1 Relao entre UR (URS) e temperatura do silo (TS) x
umidade dos gros %
 48

Arce (2009) afirma que por serem materiais higroscpicos o gro tem
capacidade de ceder ou absorver umidade de acordo com a baixa ou alta
umidade relativa do ar contido na massa de gros. Portanto, em contato com o
ambiente onde a umidade relativa oscila ganharo ou perdero umidade e
tendem a manter o equilbrio de sua umidade com determinada umidade
relativa do ar, a certa temperatura.
Ferrari Filho (2011) encontrou valores de 10,34 a 15,93% de umidade
por diferentes mtodos de secagem, o primeiro foi secagem com uso de
energia solar e o segundo com uso de ar natural, no tempo zero e no tempo de
9 meses respectivamente, o que leva a concluir que o mtodo de secagem
pode influenciar na umidade no produto bem como o tempo de
armazenamento.
Conforme Muir (1973) o aumento no teor de gua ocorre tanto pela
atividade respiratria dos gros quanto pela microflora associada. O
comportamento higroscpico dos gros no armazenamento fundamental para
a conservao do produto e o manejo do sistema de armazenamento (ELIAS,
2008).
A anlise estatstica demonstrou que houve varincia entre a mdia da
amostra de caracterizao e as demais amostras coletadas mensalmente. Para
os teores de cinzas, protenas e lipdios deve ser considerado o fato de que o
milho recebido pela cooperativa era procedente de diferentes produtores, os
quais comercializam milhos de diferentes cultivares, com valores nutricionais
diferentes. Quando entra no silo todo o milho misturado, no podendo fazer
distino entre as variedades, sendo esse o motivo de algumas amostras terem
apresentado valores maiores ou menores para determinados fatores. Os
valores apresentados durante o perodo de armazenamento so considerados
comuns.
Os teores de mineral (cinzas) encontrados no trabalho foram de 1,36 a
2,11% durante o perodo de armazenamento. Valores entre 1,46 a 2,4% foram
encontrados por Ferrari Filho (2011) em seu estudo, apresentou resultados
condizentes com os encontrados neste estudo. Os mesmos autores tambm
demonstram que h um leve aumento no teor final de cinzas ao longo do
perodo de armazenagem. Luchin; Barcaccia; e Parrini (2003) avaliando milho
crioulo encontraram valores mdios de mineral de 1,56%. J para milho
 49

hbrido, Gonalves et al. (2003) encontraram valores de 1,27%. Segundo

Salunkle et al. (1985), o contedo mineral dentre os constituintes qumicos do
gro de milho o que apresenta as maiores variaes no seu contedo durante
o armazenamento.
O grfico 2 representa os resultados de protena e lipdios durante os 8
meses de armazenamento, comparando-os com a temperatura do silo e
umidade relativa. Os teores de protenas e lipdios no sofreram alteraes ao
longo do armazenamento, podendo-se observar que mesmo que a umidade
relativa e temperatura variaram, no foi o suficiente para causar danos aos
gros, pois a umidade relativa no ultrapassou os 70% valor considerado
crtico, e a temperatura manteve-se em nveis aceitveis para boa conservao
de gros, prximo a 18C (DEVILLA, 2004).
No presente trabalho os valores de protena bruta foram de 7,47 a
8,74% durante o perodo de armazenamento. Em estudo realizado por
Bordignon (2009), o teor de protena foi de 9,14 a 9,80% para milhos hbridos
de textura dura e semidura, respectivamente. Pinto (2009) encontrou em sua
caracterizao de milho valor mdio 9,5% de protena bruta.

Grfico 2: Temperatura e umidade relativa no silo X Protenas e

Lipdios.
 50

Ferrari Filho (2011), revelou que as variaes de perda de protena

ocorrem entre 3 e 6 meses de armazenamento e depois desse tempo tendem a
estabilizar. O autor tambm encontrou valores de protena de 9,58 a 10,84%.
Os teores de lipdeos neste trabalho foram de 4,24 a 6,34% durante o
perodo de coleta das amostras. Ferrari Filho (2011) encontrou em seu estudo
resultados entre 4,55 a 5,74% de lipdeos, sendo o primeiro resultado com 9
meses de armazenamento e o segundo no inicio do processo. Santos (2006)
relata que o material armazenado est sujeito a transformaes, deterioraes
e perdas devido a interaes entre os fenmenos fsicos, qumicos e
biolgicos. Sendo que os fatores que exercem grande influncia nesse
ambiente so a temperatura, umidade, disponibilidade de oxignio, micro-
organismos e insetos.
Para Rupollo et al (2004), os lipdios so os constituintes mais
suscetveis degradao qumica e influenciam diretamente na secagem e
conservabilidade do produto armazenado. Alm disso, Gutkoski, et al (2005)
dizem que a velocidade das alteraes dos lipdios depende da umidade, da
temperatura e do tempo de armazenamento do milho.

5.4 Temperatura e umidade relativa UR

O grfico 3 expressa os resultados de mdia da temperatura do silo e

umidade relativa do ar dentro do silo durante o perodo de armazenamento,
onde o ms 5 representa maio, e assim sucessivamente at o ms de
dezembro (12). A temperatura do silo se manteve baixa durante todo o perodo
analisado, considerando que a partir de outubro (10) temos temperaturas mais
elevadas devido ao vero. A mdia das temperaturas mnimas foi de 11C no
ms de junho e a mxima de 21C no ms de dezembro, enquanto a mdia
mensal das umidades relativas mnimas foi de 52% e a mxima 68%. medida
que a temperatura foi aumentando, a umidade relativa do silo foi diminuindo e o
pico de umidade relativa no ultrapassou os 70% durante todo o perodo de
armazenamento, teor considerado seguro para o desenvolvimento de micro-
 51

organismos (SILVA, 2009). Nesse sentido, e com base nos resultados obtidos,
podemos considerar que a forma de armazenamento conduzida pela
cooperativa foi eficiente.

Grfico 3: Relao entre umidade relativa do silo URS-% e temperatura do silo

TS- C.

Nascimento, Queiroz (2011) apud BENEDETTI (1992), explicam que as

variaes da temperatura em gros armazenados so devidas as fontes de
calor interna e externa ao sistema. As fontes internas so originrias da
respirao do produto, da ao de insetos e micro-organismos, enquanto a
temperatura ambiente e a radiao solar so as fontes externas.
Os gros como qualquer material higroscpico, mantm equilbrio de
sua umidade com determinada umidade relativa do ar UR, a uma dada
temperatura. Quando o gro e o ar que o envolve apresentam diferentes
presses de vapor, a umidade se movimenta da substncia com maior presso
de vapor para aquela que possui menor presso at atingir um ponto de
equilbrio (ARCE, 2009).
Bordignon (2009) estudou a relao das condies de armazenamento
e a qualidade fisiolgica de sementes, analisando as condies de temperatura
e umidade relativa dentro do silo, demonstrando que possivelmente as
condies de armazenagem quando comparadas com a condio ambiental
foram melhores que em ambiente, em virtude de um regime mais uniforme de
 52

temperatura e umidade relativa do ar. Como as sementes so higroscpicas e

seu contedo de gua varia conforme as condies do ar circundante e do ar
intersticial, o contedo de gua destas sementes sofre uma menor variao
durante o armazenamento.
O grfico 4, expressa os resultados de umidade relativa do ar dentro do
silo comparados com os dados de umidade relativa do ar fornecidos pelo
Instituto Tecnolgico SIMEPAR (2013). Pode-se observar que a umidade
relativa do ar dentro do silo esteve homognea durante praticamente todo o
perodo de armazenagem, estando abaixo dos valores apresentados pelo
SIMEPAR. Apenas no ms de novembro (11) que as mdias de umidade
relativa se aproximaram. Tais resultados permitem dizer que mesmo quando a
umidade relativa do ar ambiente esteve a nveis mais altos, o processo de
aerao e controle de temperatura e umidade relativa dentro do silo foram
eficientes, no submetendo o gro sobre estresse de ganho e perda de gua
vrias vezes durante o ciclo de armazenagem. Valores mais altos que 70% de
umidade relativa poderiam prejudicar os gros armazenados, permitindo maior
ataque de micro-organismos.

Grfico 4: Umidade relativa do silo X umidade relativa do ar SIMEPAR

Fonte: SIMEPAR (2013)

 53

Silva et al. (2009) afirmam que os gros podem ser armazenados por
maiores perodos de tempo, se a temperatura for baixa (8 a 10C) e a umidade
relativa no ultrapassar os 70%, pois a maioria dos insetos e micro-organismos
que atacam os gros armazenados se desenvolvem melhor umidade relativa
mais elevadas.
Bordignon (2009) verificou que quando as mdias de umidade relativa
do ar permanecem mais homogneas durante a armazenagem, as sementes
no sofrem estresse com ganho e perda de gua no ciclo de armazenagem,
possibilitando manter a qualidade das sementes por um perodo mais longo de
tempo.
O grfico 5 demonstra resultados de temperatura e umidade relativa
apresentados pelo Instituto Tecnolgico SIMEPAR, o qual mantm uma estao
meteorolgica na cidade de Francisco Beltro. Os dados expressos no grfico
representam os meses de maio (5) e dezembro (12), mesmo perodo em que
se realizou o acompanhamento do milho no silo.

Grfico 5: Temperatura e umidade relativa em uma estao metereolgica de

Francisco Beltro.

Fonte: SIMEPAR (2013).

 54

Nos meses frios a temperatura esteve em mdia a 14C, e umidade

relativa prxima a 80%, demonstrando que em temperaturas mais baixas
temos umidade relativa mais alta. A partir do ms de setembro (9), as
temperaturas comearam a subir, diminuindo a umidade relativa do ar. Assim,
em temperaturas mais altas temos umidade relativa mais baixa.
Diferentemente do silo, a umidade relativa do ar ambiente sofre alteraes
climticas mais facilmente, assim quando chove a umidade relativa aumenta e
geralmente a temperatura diminui. Este grfico representa a importncia do
controle de temperatura e umidade relativa, pois as mesmas apresentam
variaes durante o ano e que precisam ser contornadas para que no existam
problemas durante a armazenagem de gros.
 55

6 CONSIDERAES FINAIS

O presente trabalho nos permite tecer as seguintes consideraes:

a) No houve o desenvolvimento de micro-organismos (fungos) a

ponto de comprometer a qualidade do produto armazenado.
b) No houve deteco de aflatoxina, do tipo B1, acima dos nveis
permitido pela legislao.
c) As anlises fsico-qumicas demonstraram que o produto
armazenado manteve sua qualidade durante todo o perodo
avaliado.
d) Os parmetros de temperatura e umidade relativa do ar dentro do
silo mantiveram-se dentro dos padres recomendados para um
armazenamento eficiente.

Com base nos resultados obtidos neste experimento, conclui-se que o

processo de armazenamento desenvolvido pela cooperativa eficiente para a
manuteno da qualidade do produto armazenado.
 56

REFERNCIAS

ALESSI, M.; RAUPP, D.;GARDINGO,J.; Caracterizao do Processamento

da Farinha de Milho Biju para o Aproveitamento dos Subprodutos. Publ.
UEPG Exact Soil Sci, Agr. Sci. Eng., Ponta Grossa, 9 (2): 31-39, ago. 2003.

ALMEIDA,A.V.A.F.; et.al; Ocorrncia de Aflatoxinas em Milho Destinado a

Alimentao de Aves do Estado da Bahia. Arq. Inst. Biol., So Paulo, v.76,
n.3, p.353-358, jul./set., 2009.

ALONSO, L.F.T. Desenvolvimento de um aplicativo para o projeto de

secadores industriais. Exame de qualificao para doutorado em
Engenharia Agrcola - FEAGRI - UNICAMP. Campinas, 1998. 49 p.

AMARAL, K.; et al. Aflatoxinas em Produtos Base de Milho Comercializados

no Brasil e Riscos para a Sade Humana. Revista: Cincia e Tecnologia em
Alimentos. Campinas, abr.-jun. 2006. 30p.

ASSOCIATTION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. A.O.A.C. Official

methods of analysis, 16 ed, rev e cum. Washington. D.L. 1997.

ARAUJO, C.; hora de armazenar o milho e ficar atento s pragas de gros

armazenados. Jornal Eletrnico da EMBRAPA milho e sorgo. Ano 02 -
Edio 05 - Maro de 2008.

ARCE,M.A.B.; Ps-colheita e Armazenamento de Gros. Depto. Agroindstria,

Alimentos e Nutrio ESALQ/USP, 2009.

AVELAR,S.A.; VILLELA,F.A.; PESKE,S.T.; Avanos na secagem de sementes,

emprego de ar desumidificado por resfriamento. Revista Gros da semente
ao consumo, julho/agosto, 2013.

BENTO,L.F.; et.al. Ocorrncia de Fungos e Aflatoxinas em Gros de Milho. Rev

Inst Adolfo Lutz. 2012; 71(1):44-9

BORDIGNON.B.C.S.; Relao das Condies de Armazenamento com a

Qualidade Fisiolgica de Sementes e Composio do leo Extrado de
Cultivares de Soja. Dissertao de Mestrado. Universidade Federal de Santa
 57

Maria Centro de Cincias Rurais Programa de Ps-Graduao em Agronomia.

Santa Maria, RS, Brasil 2009.

BRAGA,L.; et al. Uso de Ratos de Laboratrio para Determinar o Valor Nutritivo

do Milho em Diversos Nveis de Carunchamento. Revista. Brasileira de
Zootecnia., v.32, n.2, p.331-336, 2003.

BRASIL. Agncia Nacional da Vigilncia Sanitria ANVISA. RESOLUO -

RDC N 7, DE 18 DE FEVEREIRO DE 2011.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento MAPA. Milho.

2012. Disponvel em: http://www.agricultura.gov.br/vegetal/culturas/milho.
Acesso em 21 de janeiro de 2013.

BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento MAPA.

Instruo Normativa 03/2010.

BRASIL. Ministrio da agricultura, Pecuria e Abastecimento MAPA. Portaria

N845, de 8 de novembro de 1976. Padronizao, classificao e
comercializao interna de milho.

BRASIL. Ministrio da Agricultura. Portaria n. 07, de 09 de novembro de 1988.

Estabelece os padres mnimos das diversas matrias primas empregadas na
alimentao animal. Dirio Oficial da Unio, 09 de novembro de 1988.

BROD, F.P.R. Construo e teste de um secador vibro-fluidizado. Dissertao

(Mestrado em Engenharia Agrcola) Faculdade de Engenharia Agrcola,
UNICAMP, Campinas, 1999.

CANADO, R. A. Avaliao microbiolgica e micotoxicolgica de gros de

milho (Zea mays Linn) e soja (Glycine max (Linn) Merrill) provenientes de
cultivo convencional das sementes naturais e geneticamente modificadas.
2004. 166 f. Tese doutorado em Tecnologia em alimentos-Universidade
Federal do Paran, Curitiba.

CAMPOS, T.; FILHO, V.; Principais Culturas 2ed. Campinas, Instituto

Campineiro de Ensino Agrcola, p. 109-111, 1973.

CASEMG Companhia de Armazns e Silos do Estado de Minas Gerais.

Processo de Limpeza. Disponvel em:
 58

http://www.casemg.com.br/servicos/limp_processo.htm, acesso em 06 de
novembro de 2013.

CIRIO,G.M.; Deteco e Controle de Fungos em Sementes de Milho (Zea

Mays) Armazenadas. Dissertao Universidade Federal do Paran, Curitiba,
1998.

COMIL Silos e Secadores: Secadores. Disponvel em:

http://www.comil.com.br/ptb/produtos/secadores, acesso em 06 de novembro
de 2013.

CONAB- Companhia Nacional de Abastecimento. Produo de milho no

Paran, 2012. Disponvel em: http://www.conab.gov.br/, acesso em 05 de
setembro de 2013.

CORTES.N.A. Ocorrncia de aflatoxinas em milho produzido pelo sistema

tradicional de cultivo, em comunidades de agricultura familiar, no estado de
Mato Grosso. Hig Alimentar. 2000;14(77):16-25

COSTA,R.; et al. Podrides do colmo e das razes. Agncia de informao

EMBRAPA, 2005.

CUNHA,O.P.; Curso operacional de preparao para a safra e ps colheita.

Apostila: Dryeration, 2001.

CRUZ, P.; Aspergillus parasitticus. Centro Estadual de Educao Tecnolgica

Paula Souza. So Paulo, 2007.

DEMARCHI, M. Anlise da conjuntura agropecuria-safra 2010/11. SEAB

(Secretaria da agricultura e do abastecimento -Estado do Paran). Boletim
informativo/outubro de 2010.

DEVILLA, I.; et al. Variao da temperature e umidade de gros armazenados

em silos com aerao. Revista Brasileira de Engenharia Agrcola e
Ambiental, V.8, N.2/3, P.284-291, 2004.

DILKIN, P.; MALLMANN, C. A.; SANTURIO, J. M.; HICKMANN, J. L.

Classificao macroscpica, identificao da microbiota fngica e produo de
alfatoxinas em hbridos de milho. Cincia Rural, v.30, n.1, p.137-141, 2000.
 59

DIONELLO, R.G. Mtodo de secagem e sistema de armazenamento na

qualidade dos gros e na ocorrncia de micotoxinas em milho. 2000. 42f.
Dissertao (mestrado) -Programa de Ps graduao em Cincias e
Tecnologia Agroindustrial da Faculdade de agronomia Eliseu
Maciel,Universidade Federal de Pelotas, 2000.

ELIAS, M.; Armazenamento e Conservao de Gros. Universidade federal de

Pelotas, 2003.

ELIAS,M.; Manejo tecnolgico da secagem e do armazenamento de gros.

Pelotas: Ed. Santa Cruz, 2008.

ELIAS,M; et al.; Eficincia na aerao de gros durante a armazenagem.

Conferncia: 5 Conferncia Brasileira de Ps- Colheita. 19 a 21 de outubro
de 2010. Foz do Iguau, 2010.

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria EMBRAPA. Milho: histria e

arte. Jornal Eletrnico da EMBRAPA MILHO E SORGO. Maio de 2008.

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria EMBRAPA. Circular Tcnica,

75. Aspectos Fsicos, Qumicos e Tecnolgicos do Gro de Milho. Dezembro,
2006.

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria EMBRAPA. Circular Tcnica,

66. Gros ardidos em milho. Dezembro, 2010.

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria EMBRAPA. Circular Tcnica,

55. Armazenagem de milho a granel na fazenda. Dezembro, 2004.

FARIAS, A. X. et.al; Contaminao Endgena por Aspergillus spp. em Milho

Ps-Colheita no Estado do Paran. Pesq. agropec. bras., Braslia, v.35, n.3,
p.617-621, mar. 2000.

FERRARI FILHO, E. Mtodos e temperaturas de secagem sobre a qualidade

fsico-qumica e microbiolgica de gros de milho no armazenamento.
Dissertao (mestrado) - Programa de Ps graduao em Fitotecnia da
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Porto Alegre, 2011.

FREIRE, F.;et al. Micotoxinas: importncia na alimentao e na

sade humana e animal Fortaleza: Embrapa Agroindstria Tropical,
2007.48p.
 60

FREITAS, F.; Estudo gentico-evolutivo de amostras modernas e arqueolgicas

de milho (Zea mays, L.) e feijo (Phaseolus vulgaris, L.). 2001.Tese Doutorado
(agronomia) - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Piracicaba,
Brasil.

FOOD INGREDIENTES BRASIL. Micotoxinas. Rev. Fib. ed. 2, n 7, p. 32-40,

2009.

FORNEL, P.; Armazenagem de Gros. Revista: Gros Brasil pg24. Brasil,

2010.

GASPERINI, A.; BIOCONTROLE DE Fusarium verticillioides EM MILHO.

Trabalho de Concluso de Curso - Universidade Tecnolgica Federal do
Paran UTFPR, 2011.

GONALVES,R.A.;SANTOS,J.P.;TOM, P.H.F.;PEREIRA, R.G.F.A.;ASCHERI,

J.L.R.;ABREU,C.M.P. Rendimento e composio qumica de cultivares de milho
em moagem a seco e produo de grits. Cincia e agrotecnologia, v.27,2003.

GONZALEZ,R.J.;TORRES, R.;DE GREEF,D.;BONALDO,A.;

ROBUTTI,J;BORRAS, F. Efecto de La dureza de endosperma Del maz sobre
ls propiedades de hidratacin y coccion. Archivos Latinoamericanos de
nutritin, Caracas, 2005.

GUTKOSKI,L.C.; Avaliao da Composio Qumica de Milho Seco e

Armazenado em Silo Tipo Alambrado com Ar Natural Forado. Cinc. Tecnol.
Aliment. vol.29 no.4 Campinas Dec. 2009.

HEUERT,K.; Determinao de Umidade. Revista: Gros Brasil pg 15. Brasil,

2011.

JAY, J.; et al. Microbiologia de alimentos. Trad. Tondo.6 ed.- Porto Alegre:
Artmed, 2005, p. 633.

JULIATTI, F.C.; ZUZA, J.L.M.F.; SOUZA, P.P de.; Analy Castilho POLIZEL,
A.C. efeito do gentipo de milho e da aplicao foliar de Fungicidas na
incidncia de gros ardidos. Biosci. J., Uberlndia, v. 23, n. 2, p. 34-41,
Apr./June 2007.
 61

KEPLER WEBER. Catlogos tcnicos. Panambi-RS: Kepler Weber Industrial

S/A. Disponvel em: http://www.kepler.com.br/view/pt/default.aspx, acesso em
07 de novembro de 2013.

LEAL, P.; et al. Micotoxinas do Fusarium e seu Potencial Carcinognico.

Revista: Newslab pg. 70, 2005.

LENZ,G.; et al. Determinao da Umidade do Milho Utilizando o Mtodo de

Estufa. Encontro: III ENDICT Encontro de Divulgao Cientfica e
Tecnolgica. Universidade Tecnolgica Federal do Paran Campus Toledo,
2011.

LINO,C.; SILVA, L.; PENA, A.; Fumonisinas: presena em alimentos,

implicaes na sade e aspectos legislativos. Revista: Portuguesa de
Cincias Veterinrias. Coimbra, Portugal, 2004.

LUCCHIN, M.;BARCACCIA,G.;PARRINIP.C.; Caracterization of aflint maize

(zea mays L.convar. mays)Italian landrace: I. morpho-phenological and
agronomic traits. Genetic Resources and cron evolution, v. 50, 2003.

LUTZ, A. INSTITUTO ADOLFO LUTZ, IAL. Mtodos Fsico Qumicos para

Analise de alimentos. Ed 4; 1 edio digital, p. 98-125, 2008.

MARQUES.O.J, VIDIGAL.F.; DALPASQUALE, S.;, Pricinotto LF, Machinski M.

Incidncia fngica e contaminaes por micotoxinas em gros de hbridos
comerciais de milho em funo da umidade de colheita. Act Scient Agro.
2009;31(4):667- 75.

MATTOS,D.A.; Qualidade dos Gros de Milho Utilizados em uma Industria

Alimenticia de Campina Grande PB no Periodo de 2004 2005. Revista
Brasileira de Toxicologia 22, n.1-2 (2009) 34-41

MAZIERO, M.; BERSOT, L.; Micotoxinas em Alimentos Produzidos no Brasil.

Revista Brasileira de Produtos Agroindustriais, Campina Grande, v.12, n.1,
p.89-99, 2010.

MONTEIRO, M.C.P.; Identificao de fungos dos gneros Aspergillus e

Penicillium em solos preservados no cerrado. Dissertao: Universidade
Federal de Lavras - UFLA, 2012.
 62

MULLER, E.; Aspectos Gerais e Morfolgicos de Aspergillus Nger. 2010.

MUSSOLINI, C. R. Caracterizao Fsico-Qumica e Rendimento da

Moagem mida de Quatro Hbridos de Milho. Dissertao de Mestrado. 2009.
So Jos do Rio Preto SP. 58 f.

MUIR,W.R.Temperature and moisture in grain storages.

In:SINHA.R.N.&MUIR,W.E.Grain storage part of a system. Washigton, AVI
Publishing,1973.

NASCIMENTO,V.R.G.; QUEIROZ,M.; Estratgias de Aerao de Milho

Armazenado: Temperatura e Teor de gua Eng. Agrc., Jaboticabal, v.31,
n.4, p.745-759, jul./ago. 2011.

OLIVEIRA, C.; GERMANO,P.; Aflatoxinas: conceitos sobre mecanismos de

toxicidade e seu envolvimento na etiologia do cncer heptico celular. Revista:
Sade Pblica, 31 (4): 417-24, 1997.

ONO,E.Y.S.; et al. Princpios bsicos para anlise de micotoxinas. 1 ed.

Londrina PR: Universidade Estadual de Londrina, 2007. V.1. 72p.

PAES, D.C.M. Aspectos Fsicos, Qumicos e Tecnolgicos do Gro de Milho.

Revista: Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA). N.
75, p. 1-5, 2006.

PARK,K,J.; et al. Conceitos de processo e equipamentos de secagem.

Manual. Disponvel em:
http://www.feagri.unicamp.br/ctea/manuais/concproceqsec_07.pdf, acesso em
05 de novembro de 2013. Campinas, 2007.

PEIXOTO, C.; O milho: o rei dos cereais da sua descoberta h 8.000 anos
at as plantas transgnicas, 2002.

PEREIRA, M.M.G. et.al. Crescimento e Produo de Aflatoxinas por Aspergillus

flavus e Aspergillus parasiticus B.CEPPA, Curitiba, v. 20, n. 1, p. 141-156,
jan./jun. 2002

PICANO, M.; Manejo Integrado de Pragas. Universidade Federal de Viosa,

2010.
 63

PINTO, A. T. B. Caracterizao de variedades de milho crioulo cultivadas na

regio dos campos gerais para utilizao agroindustrial. 2009.80f. Dissertao
(Mestrado)-Programa de Ps graduao em Cincias e Tecnologia de
Alimentos da Universidade Estadual de Ponta Grossa. Ponta Grossa, 2009.

PINTO,N.; Qualidade Sanitrias de gros. EMBRAPA milho e sorgo, 2005.

Disponvel em:
<http://sistemasdeproducao.cnptia.embrapa.br/FontesHTML/Milho/CultivodoMil
ho/dsanitaria.htm>, acesso em 20 de janeiro de 2013.

PRADO,G.; et al. Ocorrncia de micotoxinas em milho ps colheita e

armazenado do Estado de Minas Gerais, safra 1991. Revista: Higiene
Alimentar, v.9, n.35, p24-27, 1995.

QUIRINO, J.R.; Aerao de gros e controle de temperatura na massa de

gros. Conferncia: 5 Conferncia Brasileira de Ps- Colheita. 19 a 21 de
outubro de 2010. Foz do Iguau, 2010.

RAMOS,C.R.B.A.; et.al. Contaminao por Aflatoxinas em Hbridos de Milho

Cultivados em Trs Regies do Estado de Gois. Pesquisa Agropecuria
Tropical, v. 38, n. 2, p. 95-102, jun. 2008.

RIBEIRO, S.A.L. et.al; Fungos Filamentosos Isolados de Produtos Derivados

do Milho Comercializado em Recife, Pernambuco. Rev. bras. Bot. vol.26 no.2
So Paulo June 2003

RODRIGUES, A.; GESTO ESTRATGICA DA ARMAZENAGEM. 2 ed.rev. e

ampl. So Paulo, Aduaneiras 2007.

RUPOLLO,G.;et.al. Sistemas de Armazenamentos Hermtico e Convencional

na Conservabilidade de Gros de Aveia. Cincia Rural, v.34, n.6, nov-dez,
2004.

SALINAS,Y.M.;ARELANNO,J.L.;MARTINEZ,F.B. Propiedades fsicas, qumicas

y correlacione de maices hidridos precoces para valles altos, Archivos
Latinoamericanos de Nutrition, Caracas,1992.

SALUNKE,D.K.;CHAVAN,J.K.;KADAN,S.S.;Maize. In :Postharvest brotchnology

of cereals. Boca Raton, CRC,1985.
 64

SANTURIO, J.M. Micotoxinas e Micotoxicoses na Avicultura. Revista.

Brasileira de Cincia Avcola. vol. 2 n.1 Campinas Jan./Apr. 2000.

SANTIN,J.A.; et.al Efeito do Retardamento da Colheita de Milho na Incidncia

de Gros Ardidos e de Fungos Patognicos. Revista Brasileira de Milho e
Sorgo, v.3, n.2, p.182-192, 2004.

SANTOS, J.P.Controle de pragas durante o armazenamento de milho. Sete

Lagoas:Embrapa milho e sorgo, 2006.

SANTIN,J.A.; Fungos de Pr e Ps Colheita e a Qualidade de Gros de Milho.

Tese Doutorado. Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Porto Alegre,
2001.

SCHMITT, C.; FISS, L.; Micotoxina Fumonisinas na Avicultura Comercial.

Seminrio: Interinstitucional de ensino, pesquisa e extenso UNICRUZ,
Cruz Alta, 2011.

SEAB/DERAL Secretria de Estado da Agricultura e do

Abastecimento/Departamento de Economia Rural. Milho Anlise da
Conjuntura Agropecuria, 2012.

SENAR Servio Nacional de Aprendizagem Rural. Cartilha: Trabalhador na

classificao de gros. Curitiba, 2004 28p.

SILVA, J.; FILHO, A.; DEVILLA, I.; Aerao de Gros Armazenados, 2009.

SILVA, L.C.; Fungos e Micotoxinas em Gros Armazenados. Universidade

Federal do Esprito Santo. Disponvel em: http://www.agais.com/fungos.htm,
acesso em 09 de setembro de 2013.

SILVA, et al. Contagem de Bolores e Leveduras. Manual de Mtodos de

Anlise Microbiolgica de Alimentos. v. 03, N. 157, p. 99-103, 2007.

SIMEPAR Instituto Tecnolgico Simepar. Dados de Umidade Relativa UR e

Temperatura da Estao Metereolgica de Francisco Beltro PR, 2013.

TINOCO, M.L.P. Silenciamento trans-especifico in vivo de fumo e o fungo

fitopatogenico Fusarium verticillioides. Tese doutorado em biologia
molecular-Universidade de Braslia, 2010.
 65

TISSOT, et al. Caracteristicas Fisica, Quimica, Microbiolgicas e

sensorial.Curitiba. v.19.n.1.2011.

URU, P.; Do Milho Pamonha. Braslia, 2007. Monografia (especializao em

Tecnologia em Alimentos) Universidade de Braslia.

VECCHIATO, M. H.; KOHARA, E. Y. ; MENTEN, J. O. M. Efeito do

armazenamento em sementes de feijo t r a t a d a s com fungicidas.
Fitopatologia Brasileira, v. 1, n. 2, p. 204-208, jun.1994.

VIANA, G. Milho: novos sistemas de produo e busca por maiores

produtividades provocam aumento da severidade das doenas. Jornal
Eletrnico da Embrapa Milho e Sorgo. Ano 03 - Edio 19 - Novembro de
2009. Sete Lagoas-MG.

YANAKA, E.; et al. Avaliao da presena de micotoxinas em milho (Zea

mays linn) e em raes destinadas avicultura comercial de postura nas
regies norte e noroeste do estado do Paran. Universidade Estadual de
Londrina, 2007.

ZULEN, A.; ALMEIDA,M.; LIRA, E.; Manual de Controle Integrado de Pragas.

Prefeitura Municipal de Campinas, 2007.

WEBER, E. Excelncia em beneficiamento e armazenamento de gros. 5.

ed., Panambi: Agropecuria, 2005.