CUARTA PRACTICA DE LABORATORIO

SEPARACION DE LIPIDOS POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

HERNANDEZ ENRIQUEZ MARLYN KATHERINE (2141651024)

MONTENEGRO LUCERO ALEJANDRA (2141651036)

ORTEGA FREIRE MARIA ALEJANDRA (2121651084)

PATIO GONZALES JESUS DAVID (2121651092)

UNIVERSIDAD DE NARIO

FACULTAD DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

BIOQUIMICA

IPIALES

2015
 CUARTA PRACTICA DE LABORATORIO

SEPARACION DE LIPIDOS POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

HERNANDEZ ENRIQUEZ MARLYN KATHERINE (2141651024)

MONTENEGRO LUCERO ALEJANDRA (2141651036)

ORTEGA FREIRE MARIA ALEJANDRA (2121651084)

PATIO GONZALES JESUS DAVID (2121651092)

DOCENTE:

CLAUDIA SOFA GUEVARA APREZ

UNIVERSIDAD DE NARIO

FACULTAD DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

TERCER SEMESTRE

BIOQUIMICA

IPIALES

2015
 OBJETIVOS

Separar e identificar lpidos en materiales biolgicos lo cual lo conocemos

como Cromatografa en capa fina.

Conocer los lpidos que contiene el aguacate como muestra problema.

 PROCEDIMIENTO DE LA PRCTICA

EXTRACCION DE LIPIDOS DEL TEJIDO

1.) 1g de Aguacate + 2.) 1g de Aguacate +

10 ml Etanol 95% 10 ml Etanol 95% +
En un mortero 15 ml ter de petrleo
Macerar durante En un mortero
5 minutos Macerar 5 minutos
Para disolver los lpidos.

3.) Aadir 5 ml de agua destilada 4.) Filtrar a travs de una gasa,

Se observara la aparicin Recoger el filtrado
De dos fases: Inferior; compuesta Y Transferir a un
De H2O-Etanol, contiene protenas, Embudo de decantacin.
Mientras que la fase superior
Orgnica, contiene los lpidos.

5.) Pasar la fase superior a una 6.) Re suspender

Cpsula de porcelana y evaporar en 1ml de cloroformo:
A sequedad. Metanol (1:2)
Con una pipeta con pipeteador.
 APLICACIN Y DESARROLLO DE LA MUESTRA

1.) Corte placas de silica gel de

10 cm x 7 cm y realice una marca
Suave con lpiz a 1cm del borde
Inferior de la placa, esta ser
La zona en donde se
Depositen las muestras.

2.) Se toma la muestra del punto 6

Y con un capilar se deposita en la
Zona de muestras. En el espacio que
Queda se aplican de la misma manera
Soluciones de lpidos estndar (triglicridos,
Colesterol, lecitina, cido palmtico)
Disueltos en cloroformo: metanol (2:1)

3.) Las placas ubicadas en un

Beaker de 100 ml) que contiene
Una mezcla de disolventes
(hexano-ter etlico-cido actico 80:20:1)
Que constituye la fase mvil
De la cromatografa.

4.) Despus de dejar que el disolvente

Se desplace por la placa (aproximadamente
20 min) y se saca est de la cubeta,
Se deja evaporar y se procede al revelado.
FICHAS DE SEGURIDAD

ETANOL

Formula: C2H6O

Peso Molecular: 46.07 g/mol.

Es un lquido incoloro, voltil, con un olor caracterstico y sabor picante. Tambin

se conoce como alcohol etlico. El etanol se utiliza industrialmente para la
obtencin de acetaldehido, vinagre, butadieno, cloruro de etilo y nitrocelulosa,
entre otros. Es muy utilizado como disolvente en sntesis de frmacos, plsticos,
lacas, perfumes, cosmticos, etc. Tambin se utiliza en mezclas anticongelantes,
como combustible, como antisptico en ciruga, como materia prima en sntesis y
en la preservacin de especmenes fisiolgicos y patolgicos.

El llamado alcohol desnaturalizado consiste en etanol al que se le agregan

sustancias como metanol, isopropanol o, incluso, piridinas y benceno. Estos
compuestos desnaturalizantes son altamente txicos por lo que, este tipo de
etanol, no debe de ingerirse.

Propiedades Fisicas Y Termodinamicas:

Punto de ebullicin: 78.3 C.

Punto de fusin: -130 C.

Densidad: 0.7893 a 20 C.

Solubilidad: Miscible con agua en todas proporciones, ter, metanol, cloroformo y

acetona.

El etanol es un lquido inflamable cuyos vapores pueden generar mezclas

explosivas e inflamables con el aire a temperatura ambiente.

RIESGOS: Riesgos de fuego y explosin: Por ser un producto inflamable, los

vapores pueden llegar a un punto de ignicin, prenderse y transportar el fuego
hacia el material que los origin.

EN TODOS LOS CASOS DE EXPOSICION, EL PACIENTE DEBE RECIBIR

AYUDA MEDICA TAN PRONTO COMO SEA POSIBLE.
 ETER DE PETROLEO:

Primeros auxilios:

- En caso de prdida del conocimiento nunca dar a beber ni provocar el

vmito.
- Inhalacin: Trasladar a la persona al aire libre. En caso de asfixia proceder
a la respiracin artificial.
- Contacto con la piel: Lavar abundantemente con agua. Quitarse las ropas
contaminadas.
- Ojos: Lavar con agua abundante manteniendo los prpados abiertos. Pedir
atencin mdica.
- Ingestin: Riesgo de aspiracin. Pedir atencin mdica.

Propiedades fsicas y qumicas

- Aspecto: Lquido
- Color: incoloro
- Granulometra Olor: Caracterstico.
- Punto de inflamacin: - 18 C
- Solubilidad: Inmiscible con agua.

CLOROFORMO: METANOL

FORMULA: CHCl3

PESO MOLECULAR: 119.39 g /mol.

Es un lquido incoloro con olor dulce caracterstico, muy voltil.

Es ligeramente soluble en agua y con densidad mayor que sta.

Es no inflamable, pero productos de su oxidacin, como el fosgeno, son muy

peligrosos. Es peligroso por inhalacin e ingestin.

Propiedades Fisicas Y Termodinamicas:

- Punto de fusin: -63.5 C

- Punto de ebullicin: 61.26 C
- Densidad: 1.498 g/ml ( a 15 C)
- Solubilidad: miscible con etanol, benceno, ter dietlico, ter de petrleo,
tetracloruro de carbono, disulfuro de carbono y acetona.
CONCEPTOS CLAVES

La cromatografa en capa fina (CCF) es una tcnica cromatogrfica que

utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta placa cromatogrfica consiste
en una fase estacionaria polar (comnmente se utiliza slica gel) adherida a
una superficie slida. La fase estacionaria es una capa uniforme de un
absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio,
aluminio u otro soporte.

Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa cromatogrfica sobre algn

recipiente o cmara que contenga la fase lquida de aproximadamente un
centmetro (la distancia entre el principio de la placa y la muestra que se desea
analizar).

La constante RF (Ratio of Front): es simplemente una manera de expresar

la posicin de un compuesto sobre una placa como una fraccin decimal,
mide la retencin de un componente.

Se define como: =

Para calcular el valor de Rf, de un compuesto dado, se miden la distancia

recorrida por este donde se deposit en la placa y la distancia recorrida por el
disolvente. La medida se realiza desde el centro de la mancha. Los mejores datos
se obtienen cuando las manchas no superan los 5 mm de dimetro.

LIPIDOS QUE CONTIENE EL AGUACATE (MUESTRA PROBLEMA)

Segn la Asociacin Americana del Corazn, las grasas buenas son aquellas que
pueden bajar los niveles de colesterol malo y resultan beneficiosas si se
consumen con moderacin. Los aguacates aportan grasas buenas a la dieta,
suministrando 3 gramos de grasa monoinsaturada y 0.5 gramos de grasa
poliinsaturada por porcin de 1 onza.
Los aguacates son libres de colesterol y sodio, y ms del 50 por ciento de su
contenido graso proviene de grasas monoinsaturadas. Grasas: 14-15 gramos en
100 gr. de fruta. Es el nutriente ms abundante en este fruto, por lo que el
aguacate es muchas veces prohibido en las dietas de adelgazamiento
o hipocalricas. Es el aporte calrico en s, quien lo hace inadecuado en personas
que desean bajar su peso, no el tipo de grasas que contiene. En este punto es
muy importante aclarar que el 70% de esas grasas, soninsaturadas (cido
linolnico y cido linoleico). En otras palabras grasas saludables (disminuyen los
niveles de LDL). Slo un 15% del total de grasas es saturada, y est
absolutamente libre de colesterol. Este fruto es adecuado para personas
con colesterol elevado y diabetes.
BIBLIOGRAFIA

gaia.upc.es/gieb/riesgos_laborales.com
grupoprevenir.es/fichas-seguridad-sustancias-qumicas
htraining.itcilo.it/actrav_cdrom2/es.htm
http://www.avocadocentral.com/es/aguacates-y-nutricion/nutrientes-en-
aguacates
http://espanol.arthritis.org/espanol/ejercicio/dieta-nutricion/lipidos-
insaponificables-aguacate-soya/