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ACCIN ENZIMTICA

ADA LUZ ATENCIA LAMADRID


MARA JOS QUIROZ BARRETO
VICTOR JESS YEPES YANEZ

DOCENTE: CAROLINA ARANGO RIVAS

UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS
PROGRAMA DE QUMICA
CURSO DE BIOLOGA GENERAL

MONTERA CRDOBA
2016

INTRODUCCIN

Las reacciones qumicas que se dan en los seres vivos no podran tener lugar sin la
presencia de los enzimas. Estas macromolculas, que generalmente son protenas
globulares formadas por una o ms cadenas polipeptdicas, catalizan las reacciones
bioqumicas, permitiendo que los sustratos se conviertan en los productos que
necesita la clula. Como todo catalizador, los enzimas no se consumen en las
reacciones que catalizan, pero a diferencia de otros catalizadores de naturaleza
inorgnica, las reacciones que catalizan son muy especficas: slo interaccionan
con determinados sustratos, y slo facilitan el curso de determinadas reacciones.

En el presente informe se mostrar y analizar los resultados obtenidos al estudiar


la actividad de la amilasa sobre el almidn; la amilasa es una enzima que ayuda a
digerir los carbohidratos. Se produce en el pncreas y en las glndulas salivales. La
renina (una enzima digestiva) sobre la casena de la leche y la catalasa sobre el
perxido de hidrgeno, esta es una enzima que podemos encontrar en todos los
seres vivos, necesaria para descomponer el perxido de hidrgeno, un compuesto
txico, que se produce durante el metabolismo celular. Adems, se reconoci el
efecto que sobre las actividades de las enzimas nombradas anteriormente al variar
la concentracin del sustrato, el pH y la temperatura.
OBJETIVOS

Interpretar con claridad los mecanismos subyacentes de la accin enzimtica


sobre sustratos especficos.
Analizar los mecanismos subyacentes de la actividad de la catalasa en tejido
animal y vegetal.

METODOLOGA

El diseo del estudio realizado fue de tipo experimental, el cual tena como objetivos
principales la interpretacin de los mecanismos de la accin enzimtica sobre
sustratos especficos y el anlisis de la actividad de la catalasa presente en tejido
vegetal y animal sobre el perxido de hidrgeno.

Accin de la amilasa sobre el almidn. Inicialmente, fue necesario obtener 6mL de


saliva. Luego, se rotularon 2 tubos de ensayo con las letras A, al que se le adicion
1mL de la muestra y B, 3mL, el cual fue calentado hasta ebullicin. Posteriormente,
se rotularon 4 tubos de ensayo del 1 al 4, agregndoles a cada uno 4 ml de almidn
al 1%; al tubo 1 y 2 se le adicionaron dos y diez gotas respectivamente de la muestra
presente en el A; de igual manera, al tubo 3 y 4 se le aadieron dos y diez gotas
pero del tubo B. Despus de cinco minutos, se realizaron pruebas de Lugol y
Benedict a cada uno de los tubos.

Accin de la renina sobre la casena de la leche. Se rotularon dos tubos de ensayo


(1 y 2), en el 1 se agregaron 5 mL de leche y en el 2, 5 ml de leche ms dos gotas
de HCl al 10%. Despus, a estos se les aadieron 10 gotas de solucin de renina y
se anotaron los resultados observados en cada uno.

Accin de la catalasa sobre el perxido de hidrgeno (H2O2). El procedimiento se


llev a cabo de igual manera para tejido vegetal (papa) y animal (hgado). Primero,
se realizaron 3 cortes de dimensiones iguales de cada uno de estos. Luego, se
adicionaron en tubos de ensayos rotulados de 1 al 3; al primero se le aadieron 3
gotas de H2O2, al segundo se le agregaron tres gotas de HCl concentrado, se
esper 1 minuto y posteriormente se adicionaron 3 gotas de H2O2. Por ltimo, Al
tercer tubo se le agreg agua y se transfiri a un bao de Mara. Despus de que la
muestra estuviera hervida, se retir el agua y se aadieron 3 gotas de H2O2.
RESULTADOS Y ANLISIS

1. ACCIN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDN

En la siguiente tabla se muestran los resultados de la actividad o inactividad de la


enzima amilasa sobre el almidn, en trminos de los resultados positivos o
negativos obtenidos con los reactivos utilizados:

Tabla 1. Resultados de la accin de la amilasa sobre el almidn

Prueba a los cinco minutos


Tubo N Enzima lugol benedict
1 actividad - +
2 - +
3 inactividad + -
4 + -

Figura 1.Almidn + dos gotas Figura 2. Almidn + 10


de saliva. gotas de saliva.
Figura 3. Almidn + dos gotas de Figura 4. Almidn + diez gotas de
saliva despus de calentamiento saliva despus de calentamiento.

En todas las figuras, del lado izquierdo est la muestra con el reactivo de lugol y en
el derecho con el reactivo de benedict.

Figura 5. Muestras ms reactivo de benedict, despus de calentamiento.


En la saliva se encuentra una enzima llamada ptialina o amilasa que descompone
(hidroliza) el almidn que se caracteriza por ser un polisacrido, para as generar
azucares ms simples.

A pesar de la amplia variabilidad de estructuras, los monosacridos glucosa,


fructosa y galactosa son los nicos glcidos con buena absorcin intestinal, por lo
que disponemos de distintos mecanismos para convertir cualquier polisacrido a
estas estructuras ms simples.

El primer proceso es la digestin del almidn, que comienza en la boca por medio
de la -amilasa salival. Esta enzima acta sobre los enlaces -1-4 de la amilosa y
la amilopectina cortando las largas cadenas de almidn en otros componentes de
menor longitud (maltosa, maltotriosa y -dextrina lmite), pero no tiene actividad
sobre los enlaces -1-6 (ramificaciones) ni sobre los -1-4 de la celulosa (por eso
sta no puede ser digerida). La -amilasa salival se inactiva por el pH cido del
estmago por lo deja de tener accin cuando an quedan molculas de almidn por
digerir. El pncreas produce -amilasa de accin idntica a su homloga salivar
pero con mayor tasa de actividad.

Figura 6. Accin de la amilasa sobre el almidn.


Figura 7. Amilasa salival humana. Un ion calcio es visible en color amarillo y un ion
cloruro en verde.

En los tubos 1 y 2 se observ que la amilasa estuvo activa sobre el almidn, puesto
que el lugol (I2/KI), que se utiliza para la identificacin de polisacridos fue negativa.
En cambio, fue positiva con el reactivo de Benedict indicando la presencia de
azucares simples. Lo anterior, se debe a la hidrolisis o ruptura de los enlaces o-
glucosidicos que unen a las molculas de amilasa y amilopectina, que componen al
polisacrido produciendo azucares ms simples como por ejemplo la glucosa.

Por otro lado, para los tubos 3 y 4 se identific la presencia del polisacrido puesto
que la coloracin obtenida fue morado intensa para la prueba de Lugol, de tal
manera que se puede decir que la actividad enzimtica es nula. En cambio con el
reactivo de Benedict result de color azul despus de calentamiento debido a que
no se encontraban azucares reductores en la muestra.

Se debe tener en cuenta que las enzimas poseen caractersticas fsico-qumicas,


que pueden afectarse por las condiciones presentes en el lugar que estas actan,
tal es el caso de la temperatura. Debido a que las enzimas muestran una cierta
termolabilidad. Con el aumento de temperatura se acelera la velocidad de reaccin
que estas conllevan, conocindose esto como temperatura ptima. Sin embargo, al
elevarla demasiado, la enzima se desnaturaliza provocando inactividad sobre esta.

Adems, la glucosa es producto de la hidrolisis del almidn con la amilasa, y esta


se not con el reactivo de benedict en los tubo 1 y 2, en donde la glucosa u otros
azcares reductores reaccionan con el cobre(Cu+2) aportado por el sulfato de cobre
del reactivo de benedict, a travs de un proceso redox, en los que los grupos
cetnicos o aldehdos libre como en este caso el de la glucosa que se transforman
en enedioles (reductoras) al calentarlos; oxidan con facilidad, el ion cprico (Cu 2+)
a (Cu+), generando colores que varan de acuerdo a la concentracin de estas
azucares, para ello citamos la siguiente tabla:

Tabla 2. Relacin del color con la concentracin de azucares reductores en la


prueba de Benedict.

De la tabla anterior se puede notar que la cantidad de azucares reductoras que


contenan los tubos 1 y 2 eran mnimas ya que los colores obtenidos en estos
despus del calentamiento fueron azul verdoso. Aunque el 2 que contena la mayor
cantidad de amilasa respecto al 1 present un color un poco ms fuerte, es decir, la
concentracin de glucosa era aproximadamente un 0,5%.

CUESTIONARIO

En qu tubo se demuestra la actividad de la enzima de la saliva? Cmo lo has


demostrado?

La amilasa degrada al almidn segn los factores y condiciones del medio en el cual
acta, entre los que encontramos a la temperatura, PH, especies inductores o
inhibidores de enzimas, entre otros. Pero en este caso el tubo que presento las
condiciones ptimas para generar la hidrolisis un poco ms completa del almidn
fue el tubo 2, algo que se demostr a travs de la utilizacin o prueba con el
reactivo de benedict, debido a que este reactivo muestra segn una gama de
colores el posible contenido de azucares reductoras en el medio, y por ende
demuestra en que tubo de ensayo se present la mayor actividad enzimtica. Ya
que para que se produzca un resultado (+) con este reactivo la amilasa tuvo que
haber hidrolizado anteriormente al almidn en el sentido en que los enlaces
glucosidicos del tipo alfa 1,4 de la fraccin amilosa de almidn, se desdoblan
generando alfa dextrina como la glucosa. Es decir que la intensidad de color
alcanzado con el reactivo de benedict es proporcional a la cantidad o concentracin
de encimas en el medio de reaccin.

En qu tubo se ha inactivado la enzima? Por qu no ha actuado?

Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque muchas de ellas el


aumento de temperatura, hasta cierto lmite, acelera la velocidad de reaccin, sin
embargo cabe resaltar que estas son estructuras proteicas que pueden ser
desnaturalizadas a medida que se aumenta la temperatura y as perder su actividad
biolgica, tal es el caso de la amilasa contenida en los tubos 3 y 4 que es inactiva,
ya que el volumen de saliva que contena la enzima amilasa fue calentado, y genero
as una desnaturalizacin de esta protena. Este resultado se demuestro con el
reactivo de lugol que dio positivo la inactividad de esta encima, al proporcionar como
positivo este ensayo respecto a la presencia de polisacridos, en ambos tubos 3 y
4.

Por qu se hace necesario esperar cinco minutos para observar el resultado?

La amilasa, denominada tambin ptialina, es una enzima hidrolasa que tiene la


funcin de catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente -
amilasa al digerir el almidn para formar azcares simples. En el cual este proceso
es demorado debido a que por lo general se trabaja a ciertas temperaturas
moderadas, con el fin de evitar la desnaturalizacin de la amilasa, por eso cuando
se trabaj con los reactivos de lugol y benedict, se tuvieron que esperar unos
minutos, que fue el tiempo necesario para generar las rupturas de las cadenas poli
peptdicas de esta enzima para generar la glucosa y brindar los posibles resultados
que brindaran como positiva o negativa la actividad de la enzima sobre el
polisacrido (almidn).
2. ACCIN DE LA RENINA SOBRE LA CASENA DE LA LECHE

Figura 8. Tubo 1 (izquierda): leche ms solucin de Renina


Tubo 2 (derecha): leche ms HCl y solucin de Renina

En el tubo 1 no se observaron cambios inmediatos, mientras que en el 2, al adicionar


HCl se formaron dos fases y al agregar Renina empez a coagular.

Figura 9. Estructura de la Renina o Quimosina.

Esta enzima se encuentra en el grupo de las hidrolasas, dentro de la clasificacin


de las proteasas, las cuales son enzimas que catalizan las reacciones de hidrolisis
rompiendo los enlaces peptdicos de las protenas y para ello, utilizan una molcula
de agua, as:

(1) A B + H2 O A H + B OH

La leche es un fluido acuoso complejo, formado por la presencia de varias fases en


equilibrio. Es una emulsin de una fase grasa dispersa y una fase acuosa coloidal
continua. Desde el punto de vista qumico, coexisten varios estados: emulsin
(materia grasa bajo forma globular), suspensin (de casena ligada a las sales
minerales) y solucin (acuosa, como medio continuo). Esta contiene dos grupos de
protenas marcadamente diferentes: las casenas, fosfoprotenas insolubles a pH
4,6 y 20C, y las protenas del suero. Las casenas representan aproximadamente
el 80% del nitrgeno total de la leche de vaca y dentro de ellas se distinguen 4
protenas principales s1 , s2 , , k-casena en una relacin 40:10:35:12
aproximadamente.

Ahora, el proceso realizado consista en una serie de modificaciones fisicoqumicas


de la casena (protena mayoritaria de la leche), la cual tiene una alta hidrofobicidad
(no es capaz de interaccionar con las molculas de agua ni por interacciones in-
dipolo ni mediante puentes de hidrgeno). Esta se encuentra en forma de partculas
coloidales de fosfocaseinato de calcio que estn en equilibrio en el seno de la leche
como micelas dispersas en fase liquida (figura 10). Este equilibrio metaestable es
alterable por cambio en la estructura proteica de la casena por accin de un cido,
como el clorhdrico o por enzimas especficas.

Figura 10. Estructura de la micela de la casena.

En el tubo 1, se deba presentar coagulacin enzimtica, en la cual, la casena es


desnaturalizada por accin de la enzima utilizada que acta desestabilizndola,
formando un gel o coagulo que engloba el suero y los glbulos grasos en su interior
ayudado por la acidificacin previa de la leche por medio de bacterias acidolcticas.
La coagulacin enzimtica se efecta en dos etapas: En la primera, el enlace Phe105
Met106 de la K-casena (Figura 11 y 12) (insensible al calcio lo que la protege de
la precipitacin siendo as la protena que estabiliza la micela) se rompe, dando
lugar mediante hidrlisis a la formacin de dos polipptidos : el para-K-casena (que
comprende los residuos 1-105) poco soluble y de un caseinomacropptido (residuo
106-169), poco estable y polar debido a su perfil de aminocidos y el contenido de
azucares, por lo que se difunde a la fase acuosa, eliminndose durante el
desuerado. Ahora la leche est preparada para cuajar, pero esto no sucede hasta
que no se produzca la segunda etapa en la que el calor es imprescindible. En la
segunda etapa, como resultado, las otras casenas (, , k) precipitan en presencia
de iones de Ca (3), los cuales son los que establecen los puentes de unin entre las
micelas, englobando en este cogulo formado el resto de los componentes de la
leche. Entonces, en el laboratorio no se observ coagulacin enzimtica debido a
que no se proporcionaron las condiciones requeridas de temperatura y pH para que
ocurriera en menor tiempo o la concentracin de iones calcio en la muestra no era
suficiente para generar la coagulacin. Adems, el almacenamiento prolongado de
la leche a bajas temperaturas pudo provocar cambios fsico-qumicos en esta, como
la disociacin de la casena micelar.

Figura 11. Casena , y k.


Figura 12. Estructura primaria de la k- Casena (indicando el enlace Phe105 Met106
)

Proceso general de la hidrlisis y coagulacin:


(2) k caseina para k Caseina + Macropptido de Caseina

(3) p k Caseina + caseina + Caseina + Caseinak


2+

Figura 13. Mecanismo de accin de la enzima.

a) k-casena siendo atacada por la quimosina

b) Proceso de hidrlisis de la k-casena

c) Al llegar al 85% de hidrlisis de la k-casena, las micelas comienzan a agregarse.

Por otro lado, en el tubo 2 se presenta coagulacin lctica. Luego de adicionar HCl,
la leche se acidifica y llega a un pH del orden de 4.0, producindose la floculacin
de las casenas en forma de un precipitado ms o menos granuloso, el cual se
separa del lactosuero dando lugar a una cuajada frgil y desmineralizada. Cuando
ocurre lo anterior y al adicionar una dosis normal de la enzima, se observa una
coagulacin muy rpida debido a que la enzima quimosina tiene su mayor
efectividad a pH 3.8 4.0. Actuando sobre el fosfocaseinato de calcio, rompiendo
enlaces peptdicos y transformndolo en fosfoparacasinato de calcio (inestable y
muy sensible al calcio libre), lo que provoca la precipitacin y formacin del coagulo
en mayor tiempo con respecto al proceso enzimtico.
3. ACCIN DE LA CATALASA SOBRE EL PERXIDO DE HIDRGENO

3.1. ACCIN DE LA CATALASA DE TEJIDO VEGETAL SOBRE EL


PERXIDO DE HIDRGENO

TUBO 1. PAPA + TRES GOTAS DE H2O2


Al agregar las tres gotas de perxido de hidrgeno, se observ un burbujeo intenso
de color blanco, indicando que la catalasa estaba activa sobre el H2O2
descomponindolo en agua y oxgeno.

Figura 14. Tubo 1: trozo de papa Figura 15. Papa + H2O2

La reaccin que ocurri en la figura 15 es la siguiente:

CATALASA
2H2 O2 2H2 O + O2

En el cual se deduce que la catalasa que es una enzima acta como catalizador en
la reaccin de descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno.
Figura 16. Estructura de la catalasa Figura 17. Se seala el grupo hemo de
de la catalasa

Figura 18. Grupo hemo: componente importante del sitio activo en la catalasa.

En la reaccin de la catalasa ocurre la transferencia de dos electrones entre dos


molculas de perxido de hidrgeno en la cual una funciona como donador y otra
como aceptor de electrones.

1. Enz (Por FeIII ) + H2 O2 Compuesto I (Por + FeIV O) + H2 O


2. Compuesto I (Por + FeIV O) + H2 O2 Enz (Por FeIII ) + H2 O + O2

El mecanismo de reaccin se lleva a cabo en dos pasos. En el primero la catalasa


se oxida por una molcula de perxido formando un intermediario llamado
compuesto I. El compuesto I se caracteriza por tener un grupo ferroxilo con Fe IV y
un radical catinico de porfirina. En esta reaccin se produce una molcula de agua
(Reaccin 1). En el segundo paso de la reaccin, el compuesto I es reducido por
otra molcula de perxido regresando la catalasa a su estado inicial y produciendo
agua y dioxgeno (Reaccin 2).

Muchos organismos pueden descomponer el perxido de hidrgeno (H2O2) por la


accin de las enzimas. Se conoce que al menos dos enzimas diferentes catalizan
esta reaccin: la catalasa, que se encuentra en animales y protistas (estudiada en
este caso) y peroxidasa, que se encuentra en las plantas.

El perxido de hidrgeno es un residuo del metabolismo celular de muchos


organismos vivos, pero dada su toxicidad debe transformarse rpidamente en
compuestos menos peligrosos. Para ello se usa con frecuencia esta enzima que
cataliza su descomposicin en agua y oxgeno. Adems la catalasa se usa en la
industria textil para la eliminacin del perxido de hidrgeno, as como en menor
medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en
una solucin de perxido de hidrgeno.

La existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el agua


oxigenada como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchas de
las bacterias patgenas son anaerobias (no pueden vivir con oxgeno), mueren con
el desprendimiento de oxgeno que se produce cuando la catalasa de los tejidos
acta sobre el agua oxigenada.

TUBO 2. PAPA + TRES GOTAS DE HCl Y H2O2

Al adicionar HCl y luego de un minuto H2O2 a la papa, no se observ ningn cambio


inmediatamente. Pero, luego de unos segundos se not una pequeas burbujas y
en poca cantidad. Despus de varios minutos, se not una efervescencia en el tubo.
Lo que nos indica que el HCl actu como inhibidor de la accin de la catalasa sobre
el perxido de hidrgeno, desnaturalizando la enzima y desacelerando la reaccin.
Figura 19. Trozo de papa + HCl + H2O2 Figura 20. Papa + HCl + H2O2, despus
. de varios minutos.

En esta experiencia de observ la propiedad de desnaturalizacin que tienen las


protenas (en este caso la enzima catalasa) y que consiste en la prdida de su
estructura terciaria (tridimensional), lo que afecta su funcin. La enzima catalasa, al
igual que otras protenas, se puede desnaturalizar al exponerla a altas
temperaturas. Al perder su estructura se perder tambin la funcin, por lo que no
podr descomponer el perxido de hidrgeno.

Sabiendo que las enzimas son protenas, cualquier cambio brusco de pH puede
alterar el carcter inico de los grupos amino y carboxilo en la superficie proteica,
afectando as las propiedades catalticas de una enzima. A pH alto o bajo se puede
producir la desnaturalizacin de la enzima y en consecuencia su inactivacin.
El pH no afecta la actividad enzimtica, sino la concentracin de protones. Los
protones adems de alterar la estructura de la enzima y el substrato, pueden
participar tambin en la reaccin como substrato o producto. En esos casos, la
concentracin de protones afecta directamente la velocidad de la reaccin. El pH
ptimo de la catalasa es 7.6.
Figura 21. Efecto del PH sobre la velocidad de reaccin.

TUBO 3. PAPA + CALENTAMIENTO + H2O2

Despus de someter la papa a calentamiento y agregar el perxido de hidrgeno,


no hubo ningn cambio, debido a que la enzima se desnaturaliz por accin de las
altas temperaturas.

Figura 22. Papa + agua antes de calentar. Figura 23. Papa + H2O2 despus de
. calentamiento.

En esta experiencia notamos el efecto que tiene la temperatura sobre la actividad


de la catalasa, puesto que al someterla a calentamiento, esta se desnaturaliz
provocando que no se diera la descomposicin del perxido de hidrgeno.

Un aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reaccin


hasta cierta temperatura ptima, ya que despus de aproximadamente 45C se
comienza a producir la desnaturalizacin trmica. Las enzimas de muchos
mamferos tienen una temperatura ptima de 37 C, por encima de esa temperatura
comienzan a inactivarse y se destruyen. Sin embargo existen especies de bacterias
y algas que habitan en fuentes de aguas termales y en el otro extremo ciertas
bacterias rticas tienen temperaturas ptimas cercanas a 0C.
Figura 24. Efecto de la temperatura en la velocidad de reaccin.

3.2. ACCIN DE LA CATALASA DE TEJIDO ANIMAL SOBRE EL


PERXIDO DE HIDRGENO

Figura 25. Tubo 1: Hgado + H2O2, Tubo 2: Hgado + HCl + H2O2 y Tubo 3: Hgado
hervido + H2O2.

En los tubos 1 y 2 se observ burbujeo, en el primero ms que en el segundo. Por


otro lado, en el 3 no ocurri reaccin.

Tubo 1: Anlogamente, con el hgado ocurre la misma reaccin de descomposicin


de perxido de hidrgeno catalizada por la enzima catalasa presente en este tejido.
Tubo 2: El HCl actu como inhibidor de la accin de la catalasa sobre el perxido
de hidrgeno, desnaturalizando la enzima y desacelerando la reaccin.

Tubo 3: La enzima se inactiv por efecto de la temperatura.

CUESTIONARIO

Cul es el efecto del cido clorhdrico sobre la catalasa?

El efecto que provoca el cido clorhdrico sobre la enzima es desnaturalizarla, ya


que las enzimas poseen un pH caracterstico donde su actividad es mxima, y al
estar presente el cido con un pH bastante bajo (alta concentracin de protones),
disminuye la actividad de la enzima sobre la reaccin.

Al cocinar los alimentos demasiado cmo influye en la actividad de las


enzimas?

Existen otros factores que alteran o modifican la actividad enzimtica, entre estos
se encuentra la temperatura, y al someter los alimentos a altas temperaturas las
enzimas se desnaturalizan y por ende se desactiva la actividad de la catalasa (en
este caso) sobre la reaccin.

Cuando el perxido de hidrgeno es agregado a heridas produce burbujas qu


indica esto?

El perxido de hidrgeno es un compuesto que se descompone fcilmente en agua


y en hidrgeno (H2O y O2). Cuando el oxgeno se libera, se encuentra en forma de
radicales libres de oxgeno. Eso significa que los tomos de oxgeno tienen una
carga negativa. Esto es altamente reactivo, y se produce una reaccin qumica
llamada oxidacin. Este proceso se refiere cuando los radicales de oxgeno se
combinan con otras sustancias para romper las molculas. Mientras esto sucede, el
oxgeno se libera. Esto produce la reaccin de la espuma o de las burbujas. El
perxido de hidrgeno mata las bacterias por oxidacin, haciendo que las bacterias
se descompongan y se convierten en inofensivas. La oxidacin hace que las
molculas de protena se rompan y se desnaturalicen de modo que ya no puedan
funcionar.

El perxido de hidrgeno utiliza dos mtodos para matar a las bacterias: los
radicales libres de oxgeno y la entrega de oxgeno. Los radicales libres rompen las
paredes celulares de los microbios. Despus de sufrir bastante dao, las clulas
mueren. Pero no son los grmenes los que hacen que el perxido de hidrgeno
tenga burbujas. Es una sustancia llamada catalasa. Si el perxido de hidrgeno se
deja solo, se descompone lentamente en agua y pierde el oxgeno. Pero la catalasa,
que est presente en la sangre y en las clulas del cuerpo, aceleran esta reaccin.
Grandes cantidades de oxgeno son liberados, y eso es lo que causa el burbujeo.
El oxgeno es txico en altas concentraciones en algunas bacterias. As, el oxgeno
forma una espuma en la herida a medida que se inunda de agua. El oxgeno se
libera rpidamente.

Dicho en otras palabras, al aplicar H2O2 a las heridas las burbujas se producen a
partir de una reaccin qumica en los peroxisomas. Los peroxisomas son orgnulos
citoplasmticos muy comunes con forma de vesculas, contienen enzimas (las
enzimas son molculas proteicas que ayudan a romper enlaces qumicos facilitando
una reaccin) que cumplen funciones de detoxificacin celular, formacin y
destruccin de perxido.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

Qu cambios puede sufrir, en relacin a la estructura qumica y el nmero inicial


de molculas, el sustrato y la enzima en una reaccin qumica?

Muchas de las reacciones qumicas entre el sustrato y las enzimas conllevan


liberacin de energa en forma de calor esto ocurre debido a que muchas de estas
reacciones catablicas conllevan la transformacin de estructuras de molculas
complejas a molculas simples por la ruptura de enlaces de alta energa; tal es el
caso del sustrato que tiende a adherirse a un centro activo o catablico de una
determinada enzima, en donde durante esta interaccin la molculas y el numero
inicial de sustrato varia o disminuye de manera positiva ya que el efecto cintico de
esta enzima es disminuir la energa de activacin necesaria para la transformacin
del sustrato en productos de gran inters biolgico en un tiempo menor. Es decir
que las caractersticas iniciales como molculas y estructura del sustrato cambia,
debido a que estos pueden ser Reducidos u oxidados, se les puede transferir grupos
funcionales, romper varios enlaces e introduciendo radicales -H y -OH o bien
adicionrseles grupos funcionales a los dobles enlaces, o tambin convertir los
sustratos ismeros unos en otros, y as generar una disminucin en la concentracin
de este sustrato.

Por otra parte como muy bien se sabe las enzimas son biocatalizadores orgnicos,
con estructura de protena, que poseen un poder cataltico especfico en el sentido
que induce la transformacin de un slo tipo de molculas y no de otros que tambin
se encuentran presentes en el medio de reaccin.
Segn lo anteriormente mencionado de la actividad biolgica de las enzimas, se
debe enunciar que la concentracin de estas protenas durante el transcurso de la
reaccin no disminuye y tampoco aumenta, no obstante a esto puede que el
nmero de molculas no cambien pero la estructura de la enzima si se puede ver
afectada de manera negativa ya que esta se vuelve inactiva, por factores a los
cuales las enzimas son sensibles, como lo son el PH, temperatura o inhibidores que
causan la desnaturalizacin de esta . Por ejemplo en los seres vivos se han
desarrollados sistemas que mantienen el PH intracelular estable a travs de
amortiguadores o sistema buffer fisiolgico, que ayudan a contrarrestarlos PH acido
de sustancia ingeridas y as mantener activas las enzimas utilizadas por ejemplo en
la digestin de los alimentos. del mismo modo se menciona como la temperatura
puede variar la estructura de las enzimas como por ejemplo la amilasa que hidroliza
el almidn en azucares reductoras como la glucosa, se lleva cercana a la
temperatura ambiente, del mismo modo cabe mencionar que las temperaturas
optimas de las enzimas es a los 40c y por ltimo los inhibidores, que son sustancias
o compuestos que inactivan la enzima ya que estas en muchos de los casos se
posicionan en los sitios o centros activos de la enzima, de tal forma que el sustrato
no podr interaccionar con la enzima.

Ecuacin general de la reaccin de la enzima y el sustrato:


E + S ES EP E + P
Dnde:
E = enzima, S = sustrato(s) y P = producto(s)
(Ntese que slo el paso del medio es irreversible).

Si usted hace reaccionar la amilasa con el almidn y espera hasta que termine
la reaccin. cmo comprobara que la enzima no ha sufrido alteracin
cataltica?

Una forma de comprobar que la enzima amilasa no ha sufrido una alteracin


cataltica con respecto a la reaccin que esta conlleva con el almidn es realizando
anlisis colorimtricos con reactivos que tian o generen colores caractersticos, a
ser positivos a sustancias o productos que posiblemente se pudieron haber
generado en el medio de reaccin, como en este caso la glucosa, que fue un
producto que se obtuvo por la descomposicin del polisacrido. De este modo la
forma en la cual se demostr tal aseveracin fue con la utilizacin de reactivos
como lo son lugol y benedict, que generan colores, caractersticos cuando son
positivos. Por ejemplo el reactivo Lugol o prueba del yodo brinda un resultado
positivo cuando se obtienen colores como lo son el azul o morado intenso que
corresponden a la presencia de polisacridos es decir la inactividad de la enzima,
mientras que el de benedict vira de azul hasta rojo ladrillo de acuerdo a la
concentracin de azucares reductoras generadas, es decir la actividad de la enzima
amilasa.

Relacione los siguientes conceptos en un prrafo de no ms de diez renglones:


enzima alostrica, interaccin alostrica y efector alostrico.

Las interacciones alostricas son aquellas que regulan el mecanismo por el cual
una enzima puede activarse o inactivarse de una manera estructural y por ende
cataltica, para ello definimos que las enzimas que presentan tales interacciones
son identificadas como enzimas alostricas, que son aquellas las cuales poseen
dos sitios activos, uno en donde se une el sustrato y se lleva a cabo la reaccin
cataltica normal y otro en donde se une una especie activante o desactivante
enzimtico conocidos como efectores alostricos, que pueden ser positivos o
negativos segn beneficien o impidan la actividad cataltica de la enzima. Y la
diferencia de estos efectores radica en el hecho de que los positivos permiten que
las velocidades de reaccin sean elevadas ya que activan la accin de la enzima a
concentraciones de sustrato bajas y los negativos o inhibidores que disminuyen su
actividad al interactuar con ella.

Cite cinco ejemplos de enzimas con sus sustratos respectivos.

Las enzimas son sustancias que desempean un papel crucial en la realizacin de


reacciones bioqumicas. Qumicamente, son de naturaleza protenica, que actan
sobre sustratos que dan el resultado final de las reacciones de los llamados
productos. Cuando un sustrato se une a una enzima especfica, se
denomina complejo enzima-sustrato. Como ejemplo de enzimas con sus
respectivos sustratos se mencionan los siguientes:

Amilasa salival, que acta sobre el almidn Pepsina, que acta sobre las
protenas.
Renina, que acta sobre la casena que es una protena de la leche.
Lactasa, que acta sobre la lactosa.
Quimio tripsina, que acta sobre polipptidos
Dipptidasa, que acta sobre los dipptidos.
CONCLUSIN

En esta prctica se logr comprobar la actividad o inactividad de algunas enzimas


(amilasa, renina, catalasa) mediante la observacin del efecto que estas
conllevaban cuando se les suministraba un medio especfico de reaccin ms
conocido como sustrato, por ejemplo la saliva, leche, tejido animal y vegetal, esto
se debe a que estas estructuras proteicas poseen una especificidad del medio en el
cual estas actan. Del mismo modo se consigui analizar cmo esta actividad
enzimtica era afectada de manera negativa o positiva por factores fisicoqumicos,
tales como la temperatura y pH, en el sentido que volvan activa o inactiva a la
determinada enzima. Adems, se destaca tambin la importancia que conllevaron
algunas reacciones que se llevaron a cabo con reactivos que brindaron de manera
colorimtrica, una respuesta acerca del objeto de estudio.

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