DIAGNOSIS DERMATOPHYTOSIS

Pemeriksaan laboratorium
Kuantitas dan kualitas spesimen yang diperiksa sangatlah penting agar pemeriksaan
laboratorium memberikan hasil yang optimal. Kerokan skuama kulit diambil dari tepi lesi
yang aktif dan ditempatkan pada kertas steril berwarna hitam supaya spesimen tetap kering
dan mencegah adanya pertumbuhan bakteri kontaminan. Berikut ini adalah berbagai tes
laboratorium yang bisa digunakan untuk mengkonfirmasikan diagnosis dermatofitosis.
1. Pemeriksaan mikroskopik langsung: [20] Pemberian kalium hidroksida (KOH) 10-20%
pada spesimen kulit merupakan cara yang cepat dan murah untuk membuktikan adanya
infeksi dermatofitik. Kerokan kulit Positif ditandai dengan adanya filamen hifa panjang,
halus,bergelombang, bercabang, dan septa dengan atau tanpa arthospora. Hasil negatif
palsu terlihat dalam 15% kasus. Pewarnaan fluoresen dengan optik terang
(diaminostilbene) adalah metode mikroskopis yang paling sensitif untuk mendeteksi jamur
pada skuama kulit, spesimen dari kuku dan rambut. [21] Zat ini mengikat kitin yang
merupakan komponen utama dinding sel pada jamur.
2. Kultur dan pemeriksaan sensitivitas antifunggi: [22] Sabouraud dekstrosa agar (SDA,
pepton 4%, glukosa 1%, agar, air) adalah Media isolasi yang paling usering digunakan
untuk dermatofitosis dan berfungsi sebagai media yang paling dasar. Pengembangan
koloni membutuhkan waktu 7-14 hari. Modifikasi SDA, dengan penambahan gentamisin,
kloramfenikol dan sikloheksimida lebih selektif Untuk dermatofit seperti kloramphenikol
menghambat pertumbuhan jamur saprophytik. Media uji dermatofit adalah alternatif
media isolasi yang mengandung indikator pH fenol merah. Media uji tersebut diinkubasi
pada suhu kamar selama 5-14 hari. Dermatofit memanfaatkan protein yang dihasilkannya
pada keadaan kelebihan ion amonium dan lingkungan basa yang akan metubah warna
medium dari kuning menjadi merah terang.
Uji Sensitivitas antijamur
a. Metode mikrodilusi: Uji mikrodilusi kaldu untuk uji kerentanan antijamur dermatofit
sebelumnya telah dikembangkan sebagai modifikasi dari Lembaga Standar Klinis dan
Laboratorium Metode standar M38-A2. Konsentrasi akhir dari terbinafin dan
itrakonazol yang digunakan adalah 0,06-32,0 g / ml dan untuk flukonazol, 0,13-
6,4,0 g / ml. [23] Standar Inokulum disiapkan dengan cara menghitung
mikrokonidia secara mikroskopis. Kultur ditanam pada SDA selama 7 hari pada 350
C untuk menghasilkan konidia. Normal salin (85%) ditambahkan pada media agar,
kemudian kultur diswab dengan lembut menggunakan aplikator berujung kapas
untuk mengusir konidia dari dasar hifa. Suspensi dipindahkan ke tabung sentrifus
steril, dan volumenya disesuaikan sampai 5 ml dengan ditambahkan normal salin
steril. Suspensi yang dihasilkan dihitung pada hemacytometer dan diencerkan pada
medium RPMI 1640 sampai konsentrasi yang diinginkan. Dish mikrodilusi diatur
sesuai dengan metode referensi. Dish mikrodilusi diinkubasi pada suhu 35 C dan
dibaca secara visual setelah 4 hari inkubasi. Konsentrasi hambat minimum
didefinisikan sebagai konsentrasi dimana pertumbuhan organisme akan terhambat
80% dibandingkan dengan pertumbuhan di sumur kontrol.
b. Konsentrasi minimum fungisida (KMF)
Untuk penentuan KMF, aliquot 100 l dikeluarkan dari sumur uji yang tidak
menunjukkan pertumbuhan yang nyata pada akhir inkubasi. Dish diinkubasi pada
suhu 30 C selama 7 hari. KMF didefinisikan sebagai konsentrasi obat terendah
dimana tidak ada pertumbuhan jamur atau koloni yang terlihat
 3. Identifikasi dermatofit
Hal ini dapat didasarkan pada karakteristik koloni, morfologi mikroskopik, dan tes
fisiologis. Dermatofit dapat dibedakan berdasarkan morfologi makrokonidia. Terdapat
beberapa tes fisiologis yang tersedia untuk membantu dalam konfirmasi spesies tertentu.
Selain itu, kebutuhan asam amino dan vitamin khusus dapat membedakan spesies
Trichophyton dari spesies lainnya. Kemampuan untuk menghidrolisis urea membedakan
T. mentagrophytes (urease positif) dari T. rubrum (urease negatif).

Histopatologi
Pemeriksaan Histologi dapat digunakan untuk mendiagnosis granuloma Majocchi dimana
pemeriksaan dengan KOH di permukaan mungkin lebih sering negatif. Saat ini, hifa dapat
ditemukan pada stratum korneum dengna pewarnaan hematoxylin dan eosin. Pewarnaan
khusus yang paling sering digunakan adalah asam periodik-Schiff dan Gomori methanamine
silver yang membantu untuk mewarnai hifa.

Dermoskopi
Rambut mati, melengkung, poros rambut retak, dan rambut memendek merupakan penanda
dermoskopik tinea capitis. Rambut rontok dan dystrophik juga terlihat. Namun, pada tinea
corporis, keterlibatan rambut vellus seperti yang terlihat pada dermoskopi adalah indikator
terapi sistemik. [24]

Polymerase chain reaction (PCR) dan amplifikasi berbasis asam nukleat

Tes ini tidak hanya membantu diagnosis dini dan cepat pada infeksi tapi juga membantu
dalam menentukan resistansi obat, [25] meliputi:
a. PCR Uniplex digunakan deteksi dermatofit langsung dalam sampel klinis: PCR untuk
deteksi langsung dermatofit pada skuama kulit tersedia sebagai alat PCR-ELISA yang
secara terpisah mengidentifikasi banyak spesies dermatofit. Penelitian yang dilakukan oleh
pilot menunjukkan bahwa, sensitivitas dan spesifisitas tes dibandingkan dengan kultur
adalah 80,1% dan 80,6%.
b. PCR multipleks untuk deteksi jamur pada dermatofit: Tes PCR multipleks yang tersedia
secara komersial memungkinkan amplifikasi simultan dari 21 patogen dermatomikotik
dengan deteksi DNA menggunakan agarosa elektroforesis gel.

Metode baru molekuler seperti laser matriks yang dibantu desorpsi waktu ionisasi dari tingkat
massa spektrometri.
Hal ini didasarkan pada deteksi karakteristik biokimia, produk degradasi proteolitik yang
merupakan hasil aktivitas infeksi mikologi atau penyakit noninfeksi. Ini ditunjukkan oleh
produk degradasi proteolitik protein asli. Pola peptida sampel diidentifikasi dengan cara
membandingkan dengan spektrum peptida yang sudah diketahui dari kelainan kulit yang
tersimpan dalam database yang sudah ada. Prosedur ini sangat menghemat waktu, karena
memungkinkan identifikasi simultan hingga 64 jenis dermatofit, dengan hasil dalam waktu 24
jam. [26]

Reflektansi mikroskop confocal

Hal Ini memberikan gambaran secara in vivo epidermis dan dermis superfisial pada tingkat
sel dan dapat digunakan untuk mendeteksi jamur kutaneous dan infestasi parasit. [27] Cabang
hifa pada fungi dapat dideteksi melalui skuama patcha annular yang eritem. Keuntungan dari
tes ini bersifat non-invasif dan dalam analisis retrospektif pengujian oleh Friedman dkk.
Sensitivitas menunjukkan 100%.
Secara ringkas dapat direkomendasikan bahwa diagnosis klinis infeksi kulit dermatofitik
harus selalu dilengkapi dengan konfirmasi mikologi. Sementara itu metode tradisional seperti
pemeriksaan langsung jamur oleh KOH menawarkan pilihan yang cukup sensitif dan murah,
metode non-invasif yang lebih baru seperti dermoskopi memiliki keuntungan tambahan dari
kemudahan penggunaan, kemampuan untuk mendeteksi keterlibatan rambut vellus dan
dengan demikian, mempengaruhi pilihan pengobatan (topikal versus sistemik). Kultur jamur
dan uji antijamur adalah pemeriksaan yang lebih mahal dan lebih khusus, infrastruktur seperti
itu perlu ditambahkan di sebagian besar pusat, terutama dalam kasus meningkatnya
prevalensi dermatofitosis yang tidak responsif. Metode lain seperti PCR dan Reflektansi
mikroskop confocal masih digunakan terutama untuk tujuan penelitian.