TINCION DE GRAM

Informe de Laboratorio Biologa

Estudiante

Bilogo

OBJETIVOS

Objetivo general:

Notar la presencia de bacterias presentes en las muestras problemas.

Objetivos especficos:

Emplear adecuadamente el microscopio, en pro de, la obtencin eficiente

de datos certeros.
Acceder a la observacin de estos microorganismos obedeciendo a la
tcnica de tincin de GRAM.

MARCO TERICO
La clula es la estructura ms pequea capaz de realizar por s misma las
tres funciones vitales: nutricin, relacin y reproduccin. Todos los
organismos vivos estn formados por clulas. Algunos organismos
microscpicos, como las bacterias y los protozoos, son unicelulares, lo que
significa que estn formados por una sola clula. Las plantas, los animales
y los hongos son organismos pluricelulares, es decir, estn formados por
numerosas clulas que actan de forma coordinada. [1]
 Ellas, pueden presentar distintas formas, ya sean que conformen a un ser
unicelular o multicelular dependiendo de su desempeo en el medio para
el caso del organismo unicelular y en el caso de los organismos
multicelulares depender su forma y tamao de la funcin que lleve a cabo
en el organismo [1]; por ejemplo: se puede observar que las clulas
vegetales tienen pared celular debido a que protegen a la planta y
desarrollan ese tipo de membrana, las clulas planas de la piel cuya forma
plana forma un tejido compacto que protegen a los tejidos subyacentes de
infecciones de bacterias; el tamao pequeo ,an ms pequeos que las
clulas normales, de los glbulos rojos al ser ellos los transportadores de
los elementos en la sangre.[1]

Todas estas caractersticas que se evidencian en las clulas en distintos

medios, distintas funciones hasta presentar diferentes tamaos y formas,
estn determinados por la informacin gentica que los rige (ADN).
Partiendo de que la clula tiene 3 partes:

1. La membrana que se caracteriza por ser semipermeable, dinmica y con

capacidad para modificarse. Asimismo, hay que subrayar el hecho de que est
formada por dos sustancias de tipo orgnico como son los lpidos y las protenas.
Entre las funones ms relevantes que tiene este tercer componente se encuentran
el aislar y proteger a aquella de lo que es el exterior, el regular el paso de
sustancias nutrientes a la clula y la salida de desechos, y finalmente, en relacin
con el anterior fin, el permitir o denegar el paso de sustancias. [2]
2. El citoplasma se caracteriza porque se encuentra entre las otras dos partes
mencionadas, el ncleo y la membrana, porque est formado por los llamados
organelos celulares (mitocondrias, cloroplastos, ribosomas, retculo
endoplasmtico, lisosomas) y porque cuenta con tres funciones fundamentales.
En concreto, esas tres citadas funciones son: la estructural porque no slo es el
que le da forma a la clula sino tambin la clave de sus movimientos; la nutritiva
pues cuenta con sustancias que luego se transforman en energa; y la de
almacenamiento pues guarda sustancias de reserva. [3]
3. El ncleo determina que haya dos tipos claramente delimitados de aquellas.
As, por un lado, estn las llamadas clulas eucariontes que son las que tienen un
ncleo verdadero y separado del citoplasma; y por otro estn las procariontes en
las que los distintos elementos de aquel no slo no estn definidos sino que
adems se presentan mezclados con dicho citoplasma.

DIFERENCIAS ENTRE CLULAS EUCARITAS Y PROCARITAS

Clulas procariotas Clulas eucariotas

- No tienen ncleo - S tienen ncleo

Miden menos de 10 micrmetros - Miden ms de 10 micrmetros

- No poseen organelos S poseen organelos

- No tienen citoesqueleto - S tienen citoesqueleto

- Siempre son unicelulares Las hay unicelulares y

pluricelulares

- Pertenecen a los reinos Bacteria - Pertenecen a los reinos Protista,

y Archaea Fungi, Plantae y Animalia

Son de reproduccin asexual Las hay de reproduccin sexual y

asexual

[3]

CLULAS EUCARIOTAS

[1]
CLULA ANIMAL. Con membrana celular.
 [1]

CLULA VEGETAL. Con pared celular y clorofila.

CLULA PROCARIOTA

[4]
 ESQUEMA DEL MECNISMO DE LA TINCION DE GRAM

METODOLOGA

TINSION SIMPLE

Tomar en haza bacteriolgica, una muestra de cultivo de bacterias,

ponerlas sobre un porta objetos y aadir una gota de azul de metileno,
posteriormente hacer frotis para extender la muestra.
Fijar a travs de flameo la muestra.
 Teir por un minuto aadiendo cristal violeta.
Lavar con agua destilada, luego cubrir con lugol durante un minuto luego
lavar con agua destilada.
Decolorar la muestra (eliminacin de exceso de colorante violeta),
aadiendo alcohol o cetona.
Lavar con agua destilada.
Secar a temperatura ambiente.
Someter el portaobjeto a observacin en el microscopio (100x) montando
la muestra adecuadamente.
Determinar estructuras observadas.

TINSION DE GRAM EN MUESTRA YOGOURT

Tomar en haza bacteriolgica, una muestra de cultivo de bacterias,

ponerlas sobre un porta objetos y aadir una gota de solucin isotnica,
posteriormente hacer frotis para extender la muestra.
Fijar a travs de flameo la muestra.
Teir por un minuto aadiendo cristal violeta.
Lavar con agua destilada, luego cubrir con lugol durante un minuto luego
lavar con agua destilada.
Decolorar la muestra (eliminacin de exceso de colorante violeta),
aadiendo alcohol o cetona.
Lavar con agua destilada, luego cubrir con safranina y luego la var on agua
destilada.
Secar a temperatura ambiente.
Someter el portaobjeto a observacin en el microscopio (100x) montando
la muestra adecuadamente.
Determinar estructuras observadas.

TINSION DE GRAM EN MUESTRA DE VINAGRE

Tomar en haza bacteriolgica, una muestra de cultivo de bacterias,

ponerlas sobre un porta objetos y aadir una gota de solucin isotnica,
posteriormente hacer frotis para extender la muestra.
Fijar a travs de flameo la muestra.
Teir por un minuto aadiendo cristal violeta.
Lavar con agua destilada, luego cubrir con lugol durante un minuto luego
lavar con agua destilada.
 Decolorar la muestra (eliminacin de exceso de colorante violeta),
aadiendo alcohol o cetona.
Lavar con agua destilada, cubrir con safranina y luego lavar con agua
destilada.
Secar a temperatura ambiente.
Someter el portaobjeto a observacin en el microscopio (100x) montando
la muestra adecuadamente.
Determinar estructuras observadas.

ANLISIS Y RESULTADOS

TINCION SIMPLE
Al seguir los pasos instruidos en la gua y las instrucciones adicionales
suministradas por el profesor en el laboratorio se pudo observar en esta
tincin, que se alcanza observar unas estructuras pero no se podan
clasificar en Gram positivas ni Gram negativa.

TINCION DE GRAM EN MUESTRA DE YOGOURT

Observacin. Objetivo de 100x

esreptococos

Al seguir los pasos instruidos en la gua y las instrucciones adicionales

suministradas por el profesor en el laboratorio se pudo observar en esta
tincin, que se tie de color rosado con rojo, lo que indica que las bacterias
 presentes en este cultivo son GRAM NEGATIVAS. Se toma esta imagen
porque se puede apreciar mejor los estreptococos, estructuras presentes en
la muestra.

TINSION DE GRAM EN MUESTRA DE VINAGRE

Observacin. Objetivo de 100x.

Recorte de imagen

Bacilos

Al seguir los pasos instruidos en la gua y las instrucciones adicionales

suministradas por el profesor en el laboratorio se pudo observar en esta tincin,
que se tie de color morado, indicando de presencia de clulas GRAM
POSITIVAS, las estructuras presentes en la muestra son los bacilos.
 PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Cul es la funcin del lugol en la tcnica de Gram?

R// La funcin que cumple el lugol es de fijar la preparacin y acta sobre
las paredes de las bacterias Gram positivas para fijar el colorante, de modo
cuando se aade el alcohol las bacterias no se decoloran.

2. Explicar a qu se debe la diferencia en los resultados de los

procedimientos que acaba de realizar?
R// La diferencia en estos resultados radica en la diferencia de las
estructuras de las paredes celulares de las bacterias presentes en los
cultivos sometidos a la tincin de esa forma se observa en el mecanismo de
este procedimiento como los reactivos afectan de manera diferente a estos
organismos.

3. Explicar para qu se fija la muestra en la tcnica de Gram?

R// La muestra se fija en dicha tcnica, para que la muestra permanezca en
el porta objeto y no se desplace a razn de alguna brisa o algo por el estilo.

CONCLUSION

Al desarrollar la prctica siguiendo los pasos suministrados y observando

cuidadosamente, se puede notar que el conjunto de reactivos utilizados
reaccionan de manera ventajosa con las bacterias amn de la clasificacin
deseada en al tincin de Gram, por tanto lo convierte en un procedimiento
pertinente y adecuado a la hora de buscar identificar estructuras presentes
en un cultivo de bacterias y llegar a concebir la presencia o no de pared
celular, ya que esta caracterstica juega un papel importante la hora del
teido, observndose uno colores poco usuales pues, para las bacterias
Gram positivas el color debi ser morado y para las Gram negativas rosado,
esto sucede cuando los reactivos estn en unas condiciones no normales,
pero en general se pudo llegar al objetivo de clasificar las bacterias y as
llevar de manera exitosa la teora a la prctica.

BIBLIOGRAFA

[1] http://www.celulas.org/
[2] http://definicion.de/celula/

[3] http://biologiacelular2.blogspot.com/2012/11/cuadro-comparativo-de-celula-
procariota.html

[4]https://www.google.com.co/?gfe_rd=cr&ei=yRE9VcC1IsaIqQWZiYHQBg#q=c%
C3%A9lula%20procariota