1
Universidad de Sucre, Facultad de Educacin y Ciencias. Estudiante de pregrado del
rea de biologa de 5to semestre, Correspondencia: josecarlosbonfante21@gmail.com.
2
Universidad de Sucre, Facultad de Educacin y Ciencias. Estudiante de pregrado del
rea de biologa de 5to semestre, Correspondencia: leycimar23@gmail.com.
3
Universidad de Sucre, Facultad de Educacin y Ciencias. Estudiante de pregrado del
rea de biologa de 5to semestre, Correspondencia: fabiverbel12@gmail.com.
PROCEDIMIENTO
Se realizaron varios cortes de meristemos
apicales en races de Allium cepa
obtenidos a partir del crecimiento
radicular de la cebolla, cuando a esta se le
proporcionaron las condiciones
adecuadas, con varios das antelacin, a
temperatura y ambiente ptimo.
El tamao aproximado de estos cortes fue
de 5mm de longitud.
Posteriormente se depositaron los pices
de estas races jvenes en una caja de
Petri, a la cual se le agrego orcena
actica clorhdrica, dejando actuar este
colorante por 15 minutos; Para luego con
la ayuda de una pinza fina, poder
depositar estas races en un portaobjetos,
y encima colocar el cubreobjetos para la
posterior realizacin de la tcnica de
squash, presionando con el dedo pulgar
fuertemente en una superficie
completamente plana; se limpi con
servilletas cualquier resto que hubiese
quedado y en ltimo lugar, se realiz el
montaje de la muestra en un microscopio
ptico con un objetivo de 40X para su
respectivo estudio.
esto se debe a que los iones Na+ se
unieron al extremo carboxilo y los iones
Cl- de las protenas haciendo que esta
cambiara su plegamiento tradicional.11 la
eliminacin del agua que estaba unida a
los iones sodio y cloro permitiendo que el
ADN se precipitara; para luego
centrifugarlo y lavarlo con etanol al 70%,
estableciendo una relacin donde del 100
de pureza un 70% es etanol y el 30%
restante es agua, causando que por accin
del agua los iones sodio y cloro se unan a
esta.9
Despus de la recuperacin del ADN, tal
y como se observa en la figura1; los
Figura 3. resultados obtenidos en el anlisis
DISCUSIN realizado en el espectrofotmetro, se
puede decir que la muestra de sangre
A partir de los resultados obtenidos es tuvo una concentracin de ADN de 28,7
posible afirmar que la purificacin del g/L, as como se observa en la Tabla 1;
ADN partiendo de las muestras de sangre, Donde la relacin 260/280 es de 1.52, lo
se atribuye al uso de las soluciones y que indica que en la muestra sangunea
solventes orgnicos.4 Ahora existen molculas proteicas gracias a que
bien, Sabiendo que la sangre presenta una el valor estipulado de pureza es de 1.8 y
fase slida, que comprende eritrocitos, la relacin 260/230 de 0,19 seala
linfocitos y plaquetas; as como tambin existencia de compuestos orgnicos en la
una fase lquida, representada por el muestra sangunea y puesto que el valor
plasma sanguneo.8 Tcnicas como el uso normal es mayor de 0.5, la solucin si
de soluciones buffer permitieron separar presenta dichos compuestos.
los eritrocitos del resto de la sangre para
obtener ARN a partir de clulas blancas; CONCLUSIN
las cuales a travs de la centrifugacin se - Se logro identificar las diferentes
situaron en el fondo mientras que el
componente srico (eritrocitos) se fases de la mitosis a partir de la
ubicaron en la parte superior del tubo.9 En solucin de tincin y por
la extraccin se separaron los leucocitos y consiguiente se estableci el valor
se lisaron con una solucin que contiene del ndice mittico de las clulas
el detergente dodecilsulfato (SDS) y la meristemticas de Allium cepa.
proteinasa K, la anterior potencializada
por SDS liber el ADN nuclear al medio
y permiti la digestin de las protenas. 10
Posteriormente la muestra sufri una
desproteinizacin mediante una
deshidratacin y precipitacin de las
protenas celulares provocada por la
accin de una solucin saturada de NaCl;
REFERENCIAS
[1] Alberts B, Bray D, Lewis J, Rafft M, et al
(1996) Biologa molecular de la clula.
Barcelona, Omega, 3 ed,596-614