Universidade Federal do Rio Grande

Escola de Qumica e Alimentos

Laboratrio de Engenharia de Bioprocessos
Disciplina Bioqumica Industrial I
Prof. Andr Burkert

COLORAO DE GRAM

Gabriela Ehlert 72692

Gabriele Marques 82195
Taiane Coelho 71329

Rio Grande
10 de Julho de 2017
 1. INTRODUO
Diferentes micro-organismos convivem no mesmo meio ambiente, seu estudo
realizado atravs de cultivo em meios de cultura e observao a fim de determinar
caractersticas morfolgicas. A observao de microrganismos apresenta muitas
dificuldades, no s devido sua reduzida dimenso, mas tambm, a maioria dos micro-
organismos no apresenta cor quando observados no microscpio tico, ento uma
colorao permite a visualizao desses micro-organismos com mais clareza. Com o
propsito de estudar as suas propriedades e/ou de diferenciar os microrganismos em
grupos especficos para fins taxonmicos e de diagnstico, recorre-se normalmente a
tcnicas de colorao.
A colorao de Gram, desenvolvida em 1884 pelo mdico dinamarqus
Christian Gram, um dos mtodos de colorao mais aplicados em Bacteriologia. Trata-
se de um mtodo de colorao diferencial, dado que permite dividir as bactrias em duas
classes - Gram negativas e Gram positivas[1]. Esta diferenciao baseia-se na diferente
estrutura e composio, nomeadamente no diferente teor lipdico, da parede celular destas
bactrias.
Os corantes so sais compostos de um on positivo e outro negativo e o on
responsvel pela cor denominado cromforo. Quando o on cromforo o positivo,
temos um corante bsico e quando o cromforo negativo, temos um corante cido. A
clula bacteriana carregada negativamente, ento atrai corantes bsicos, tais como
cristal violeta, azul de metileno e safranina[2].
A composio da parede celular uma das principais diferenas entre as
bactrias Gram-positivas e Gram-negativas e tambm o que permite sua diferenciao
atravs do mtodo de Gram. Os micro-organismos Gram-positivos possuem 90% de sua
parede celular composta por peptideoglicano, enquanto nos Gram-negativos apenas 10%
da parede celular peptideoglicano, contendo uma camada adicional composta por
lipopolissacardeos. Isso explica o fato da reteno do corante nas Gram-positivas, pois o
lcool causa a desitratao da parede celular e consequente reduo da porosidade e
permeabilidade; j nos micro-organismos Gram-negativos, o lcool extrai os lipdeos da
parede celular, aumentando a porosidade e permitindo a sada do corante o lugol
utilizado para aumentar a finidade entre da parede pelo corante.[2].
 2. OBJETIVO
Visualizar e diferenciar bactrias Gram-positivas e Gram-negativas aps
aplicao do mtodo da Colorao de Gram.

3. REVISO BIBLIOGRFICA
Dentre as estruturas bacterianas celulares de fcil identificao podemos citar
os flagelos, a parede celular, os pelos (fmbrias) e o glicoclice. Destas mencionadas,
aquela que cai dentro do nosso campo de estudo e, por isso, merece uma ateno
devida a parede celular.
De acordo com Tortora et al. (2012) a parede celular de uma clula bacteriana
uma estrutura complexa, semirrgida, responsvel pela forma da clula. A parede celular
engloba a membrana plasmtica, protegendo o interior celular das alteraes adversas no
ambiente externo. A principal funo prevenir a ruptura das clulas bacterianas quando
a presso da gua dentro da clula maior do que fora dela. Ela tambm ajuda a manter
a forma de uma bactria e serve como ponto de ancoragem para os flagelos.
Existem diversos tamanhos e formas de bactrias, a maioria delas varia de 0,2
a 2 m de dimetro e de 2 a 8 m de comprimento. As formas bsicas das mesmas so:
cocos esfricos (geralmente redondos, mas podendo ser ovais), bacilos em forma de
basto e espiral.
Os cocos ao se dividirem para reproduo podem permanecer com as clulas
ligadas umas s outras, formando dessa forma os diplococos (aos pares), estreptococos
(em cadeia), trtades (em grupos de quatro), sarcinas (em grupos com oito cocos) e
estafilococos (agrupamentos tipo cacho de uva).
 Figura 1 Bactrias: Cocos
Fonte: Tortora et.al (2012)

Os bacilos se dividem somente ao longo de seu eixo curto, existindo assim

um menor nmero de agrupamento de bacilos que de cocos. A maioria dos bacilos se
apresenta como bastonetes simples. Os diplobacilos se apresentam em pares aps a
diviso e os estreptobacilos ocorrem em cadeias.

Figura 2 Bactrias: Bacilos

Fonte: Tortora et.al (2012)
Por sua vez, as bactrias espirais possuem uma ou mais curvaturas, elas nunca so
retas, classificando-se em vibries (com uma curvatura), espirilos (forma helicoidal com
um corpo rgido) e espiroqueta (forma helicoidal com o corpo malevel).
 Figura 3 Bactrias: Espirais
Fonte: Tortora et.al (2012)

A parede celular trata-se de um importante mecanismo, pois contribui para a

capacidade de algumas espcies causarem doenas e tambm por ser o local de ao dos
antibiticos, uma vez que ao promover quebra dessa parede a clula bacteriana no
sobreviver.
Com uma espessura aproximada de 10 a 25 nanmetros, a parede celular tem
como funo principal a sustentao e proteo da clula bacteriana contra agentes
externos, tais como substncias nocivas clula e tambm impede o escape de enzimas
essenciais. H dois tipos de composio de parede celular e isto nos classifica as clulas
bacterianas como Gram-positivas ou Gram-negativas.
A primeira delas tem em sua composio noventa por cento de
peptideoglicano e dez por cento de cido teicico. Tambm chamado de murena, o
peptideoglicano um polmero formado por uma parcela peptdica, com uma mdia de
cinco aminocidos, e uma parcela derivada da glicose, com duas unidades monomricas
principais: cido acetilmurnico e N- acetilglicosamina. A conformao desta parede se
resume em cadeias de glicano paralelas entre si ligadas em cruzamento pelos peptdeos e
dando origem a uma rede firme. uma estrutura simples, porm efetiva em suas
atribuies protetoras e conservadoras. Em vista de estar presentes ligaes da parede
celular com os cidos teicos, a superfcie desta parede torna-se negativa, como
consequncia do grupo fosfato ligado a este cido. s bactrias que contm este tipo de
parede celular, d-se o nome de Gram-positivas.
Por outro lado, existem paredes bacterianas com uma frao de
peptdeoglicano bem menor que a anteriormente citada, e uma parcela maior de
lipopolissacardeos. Visto que contm apenas dez por cento de peptideoglicano, esta
formao no to forte, todavia, possui uma camada externa constituda por
fosfolipdeos, protenas e lipossacardeos que conferem mais complexidade mesma, a
esta camada d-se o nome de membrana externa. As bactrias as quais possuem sua
parede bacteriana com esta membrana externa so classificadas como Gram-negativa.
Observe a figura esquemtica dos dois divergentes tipos de parede celular bacteriana.

Figura 4 Esquematizao da parede celular bacteriana Gram-positiva (esquerda) e negativa (direita).

Fonte: HOGG, Stuart, Essential Microbiology, John Willey & Sons Ltd. The University of Glamorgan UK. 2005

Com a ajuda das figuras, possvel observar a camada espessa de

peptidoglicano e as ligaes feitas pelos cidos teicicos na parede ou na membrana
plasmtica na clula bacteriana Gram-positiva ao passo que na clula Gram-negativa, v-
se uma camada bem menos espessa de peptidoglicano e a camada externa que forma uma
membrana de lipopolissacardeos. (HOGG, 2005).

Colorao de Gram
Segundo Tortora et al. (2012) de grande importncia a preparao de uma
amostra para a microscopia ptica, pois a maioria dos micro-organismos aparece quase
incolor quando observados atravs de um microscpio ptico padro. E, uma das formas
pelas quais isso pode ser feito atravs da colorao da amostra.
 Colorao significa simplesmente corar os micro-organismos com um
corante que enfatize certas estruturas. Porm, antes que os micro-organismos possam ser
corados, devem ser fixados lmina do microscpio. A fixao simultaneamente mata os
micro-organismos e os fixa na lmina. Ela tambm preserva vrias partes dos micrbios
em seu estado natural com apenas um mnimo de distoro.
Quando uma amostra precisa ser fixada, um filme delgado de material
contendo os micro-organismos espalhado sobre a superfcie da lmina. Esse filme,
denominado esfregao, deixado secar ao ar. Na maioria dos procedimentos de
colorao, a lmina ento fixada pela passagem, vrias vezes, sobre a chama de um bico
de Bunsen, com o lado do esfregao para cima, ou recobrindo a lmina com lcool
metlico por um minuto. A colorao aplicada e ento lavada com gua; a seguir, a
lmina seca com papel absorvente. Sem a fixao, a colorao poderia lavar os
micrbios da lmina. (TORTORA et al, 2012)
Os corantes so sais compostos por um on positivo e um on negativo, um
dos quais colorido e conhecido como cromforo. A cor dos chamados corantes bsicos
est no on positivo; em corantes cidos, est no on negativo. As bactrias so levemente
carregadas negativamente em pH 7. Desse modo, o on positivo colorido em um corante
bsico aderido clula bacteriana carregada negativamente. Os corantes bsicos, que
incluem o cristal violeta, o azul de metileno, o verde de malaquita e a safranina, so mais
comumente usados que os corantes cidos.
Para aplicar corantes cidos ou bsicos, podem ser utilizados trs tipos de
tcnicas de colorao: simples, diferencial e especial. Em uma colorao simples
utilizada uma soluo aquosa ou alcolica de um nico corante bsico onde o objetivo
principal destacar todo o micro-organismo, para que as formas celulares e as estruturas
bsicas fiquem visveis e algumas vezes, uma substncia qumica adicionada soluo
para intensificar a colorao; este aditivo denominado mordente que tem por funo
aumentar a afinidade de uma colorao por uma amostra biolgica; ou de revestir uma
estrutura (como um flagelo) para torn-la mais espessa e mais fcil de ser vista aps ser
corada. Alguns dos corantes simples comumente usados em laboratrio so o azul de
metileno, a carbolfucsina, o cristal violeta e a safranina.
Colorao diferencial se distingue por reagir de modo distinto com diferentes
tipos de bactrias, podendo assim ser utilizada para diferenci-las. As mais
frequentemente utilizadas para bactrias so a colorao de Gram e a colorao lcool-
cido resistente. A colorao de Gram classifica as bactrias em dois grandes grupos:
gram-positivas e gram-negativas onde um dos procedimentos de colorao mais teis.
J a colorao lcool-cido resistente, se liga fortemente apenas a bactrias que possuem
material creo em suas paredes celulares. Essa tcnica muito utilizada para identificar
todas as bactrias do gnero Mycobacterium, incluindo os dois importantes patgenos
Mycobacterium tuberculosis, o agente causador da tuberculose, e Mycobacterium leprae,
o agente causador da lepra. Essa colorao tambm usada para identificar as linhagens
patognicas do gnero Nocardia.
Como anteriormente mencionado, a colorao de culturas bacterianas facilita
a visualizao e anlise de sua morfologia, e a classificao da parede celular influenciar
totalmente neste processo, alm disso, pode-se afirmar que as bactrias no so
classificadas quanto a sua constituio da parede celular, mas pela afinidade desta com
as substncias utilizadas na tcnica de colorao. A violeta de metila, tambm chamada
de cristal violeta o corante primrio utilizado nesta tcnica. Em um primeiro momento
ambas as culturas ficaro com a colorao violeta. Aps a aplicao do lugol, uma soluo
de iodeto que serve como fixador ocorre a formao de um complexo denominado cristal
violeta-iodo, o qual insolvel no citoplasma bacteriano e, a partir da cada clula reagir
de maneira diferente em conformidade com afinidade molecular.
As placas contendo a microbiota so lavadas com acetona-etanol o que, nas
bactrias Gram-positivas, promove a desidratao das protenas e do peptidoglicano que
sofre uma contrao diminuindo a permeabilidade da clula e o fechamento dos poros,
portanto, retendo o corante e fazendo com que a cultura permanea com a colorao
violeta do corante primrio. O cido teicico ligado ao peptidoglicano e a membrana
plasmtica da bactria Gram-positiva torna a parte externa da clula negativa, e isso
caracteriza uma espcie de dipolo que pode induzir a fixao do corante com mais
facilidade e por mais tempo. As foras intermoleculares atuam em molculas polares com
mais intensidade do que em molculas apolares. (HOGG, 2005)
J nas bactrias Gram-negativas, a adio do solvente orgnico acarreta uma
dissoluo da poro lipdica, logo, a remoo da membrana externa da parede celular.
Visto que, em comparao com as bactrias Gram-positivas, a parede menos espessa,
no possui poros o suficiente para serem obstrudos evitando a passagem do corante. Uma
vez que o corante removido com o lcool do corante, a placa contendo a microbiota
descolore. A etapa da descolorao crtica, pois a exposio prolongada ao solvente
provoca a remoo do cristal violeta dos dois tipos de bactrias, podendo produzir
resultados falsos. A reteno ou no do corante primrio , portanto, dependente das
propriedades fsicas e qumicas das paredes celulares bacterianas tais como espessura,
densidade, porosidade e integridade. (BOSSOLAN, 2002)
Aps sofrerem reteno ou expulso do solvente orgnico, as placas contendo
a cultura bacteriana recebem a adio de um corante secundrio, denominado fucsina, o
qual age em torno de trinta segundos. Ao microscpio, as clulas Gram-positivas
aparecero coradas em violeta escuro e as Gram-negativas em vermelho ou rosa escuro.
Clulas de bactrias Gram-positivas, clulas velhas, mortas ou com envelopes danificados
por agentes fsicos ou qumicos, tendem a perder o cristal violeta e uma mesma amostra
bacteriana pode exibir parte ou todas as clulas coradas como Gram-negativas. Portanto,
o uso de material fresco importante. Por outro lado, resultados do tipo "falso Gram-
positivo" s so obtidos se o tratamento com etanol-acetona for omitido.
Em suma, o mtodo de colorao de Gram muito utilizado em momentos
primrios ao estudo de uma determinada cultura, pois indica a morfologia bacteriana que,
pelo seu pequeno tamanho em torno de um micrometro seria de difcil visualizao
mesmo no microscpio. Entretanto, esta tcnica oferece auxlio somente para a avaliao
externa do microrganismo e no suficiente para design-lo. A fim de que seja realmente
determinada, uma cultura deve passar pelos testes bioqumicos que consiste em verificar
processos como: consumo da glicose, produo de gs, sntese de cidos entre outros, at
que se chegue em um possvel gnero bacteriano.
E por ultimo, coloraes especiais so utilizadas quando se deseja corar e
isolar partes especficas dos micro-organismos, como os endosporos e os flagelos, e para
revelar a presena de cpsulas, as mais utilizadas so a colorao negativa para cpsulas,
colorao para endosporos (esporos) e colorao dos flagelos.
A seguir, apresentamos a tabela com o resumo de vrias coloraes e seus
usos, conforme o autor Tortora et al. (2012).
Colorao Principais usos

Simples (azul de Utilizada para destacar os micro-organismos e para determinar

metileno, as formas e os arranjos celulares. Uma soluo aquosa ou
carbolfucsina, cristal alcolica de um nico corante bsico cora as clulas. (Algumas
violeta, safranina) vezes, um mordente adicionado para intensificar a colorao.)

Utilizada para distinguir diferentes tipos de bactrias. Classifica

as bactrias em dois grandes grupos: gram-positivas e gram-
negativas. As bactrias gram-positivas retm o corante cristal
Diferencial Gram
violeta e adquirem a cor prpura. As bactrias gram- -negativas
no retm o cristal violeta e permanecem incolores, at serem
contracoradas com safranina, quando adquirem a cor rosa.

Utilizada para distinguir espcies de Mycobacterium e algumas

espcies de Nocardia. As bactrias lcool-cido resistentes, uma
vez coradas com carbolfucsina e tratadas com lcool-cido,
Diferencial lcool- permanecem vermelhas, pois retm o corante carbolfucsina. As
cido resistente bactrias lcool-cido sensveis, quando coradas e tratadas da
mesma forma e a seguir coradas com azul de metileno, adquirem
a cor azul, pois perdem a carbolfucsina e so ento capazes de
aceitar o corante azul de metileno.

Utilizada para corar e isolar vrias estruturas, como cpsulas,

Especial endosporos e flagelos; algumas vezes usada como auxiliar de
diagnsticos.

Utilizada para demonstrar a presena de cpsulas. Uma vez que

as cpsulas no reagem com a maioria dos corantes,
Negativa
apresentam-se como halos incolores em torno das clulas
bacterianas, destacando-se contra um fundo escuro.

Utilizada para detectar a presena de endosporos nas bactrias.

Quando o verde malaquita aplicado a um esfregao de clulas
Endosporos bacterianas fixado pelo calor, o corante penetra nos endosporos
e os cora de verde. Quando a safranina (vermelha) adicionada,
cora o restante da clula de vermelho ou rosa.

Utilizada para demonstrar a presena de flagelos. Um mordente

usado para aumentar os dimetros dos flagelos at que se
Flagelos
tornem visveis microscopicamente quando corados com
carbolfucsina.

Tabela 1 - Tipos de Colorao

Fonte: TORTORA et al. (2012)
 4. MATERIAL E MTODOS

4.1. Preparo do Esfregao:

- Colocar uma gota de soluo salina em uma lmina limpa e seca;
- Flambar a ala, esfri-la na parede do tubo de ensaio com a cultura e retirar uma pequena
quantidade de colnia bacteriana;
- Espalhar o material coletado sobre a lmina, homogeneizando com a soluo salina, de
forma a obter um esfregao fino;
- Secar a temperatura ambiente e fixar, passando 2 a 3 vezes sobre a chama do bico de
Bunsen;
- Proceder colorao propriamente dita.

4.2. Tcnica de Colorao de Gram:

- Cobrir toda a lmina com uma soluo de Cristal Violeta, aguardar 1 min e desprezar o
corante;
- Cobrir a lmina com Lugol, aguardar 1 min e 30 s e desprezar o corante;
- Inclinar a lmina e gotejar lcool-acetona at que no haja desprendimento do corante
(cerca de 30 s);
- Lavar a lmina rapidamente com gua corrente;
- Cobrir com fucsina bsica e aguardar 30 s. Lavar a lmina e secar (sem esfregar);
- Observar em microscpio com objetiva de imerso;

5. RESULTADOS E DISCUSSO
Inicialmente a bancada do laboratrio e todos os materiais utilizados foram
esterilizados. Primeiramente feito o preparo do esfregao que a transferncia do
microrganismo para uma lmina de vidro que, em seguida ir ser analisada no
microscpio.
Com uma pina, a lmina pega e colocada sob um suporte ao qual est sobre
um bquer a fim de que escorra qualquer reagente ou o microrganismo analisado. Antes
do deslocamento da bactria, a placa recebe algumas gotas de gua peptonada 0,1M com
o objetivo de diluir o microrganismo e assim facilitar sua visualizao. Com a ajuda de
uma ala que foi flambada ao rubro, o microrganismo coletado de um tubo de ensaio
previamente removido e espalhando na lmina com movimentos circulares que vo do
meio da placa at suas extremidades. Este movimento essencial, pois permite que, no
processo de secagem que ocorre acima da chama do bico de Bunsen, a colnia seque de
fora para dentro.
O prximo passo a fixao do microrganismo na lmina e feita movendo-
a trs vezes acima da chama.
Em seguida usado o corante primrio - cristal violeta e pinga-se algumas
gotas deixando agir por 1 minuto. Ento, retira-se o excesso de corante e uma soluo de
iodeto adicionada a placa a fim de fixar o corante primrio e espera-se 1minuto e 30
segundos.
Depois, a lmina lavada com gua para remover o lcool e preparar a adio
de fucsina. Aps a adio de fucsina, espera-se trinta segundos, remove-se o excesso de
corante com gua e seca-se as laterais das lminas com papel, sem esfreg-la, para no
haver perdas.
Logo aps a secagem final da lmina possvel observar a colorao. Antes
de ser levada ao microscpio, a lente tambm esterilizada com ter etlico e um leo de
dimenso especfico para o equipamento adicionado lmina.

Figura 5: Imagem microscpica da bactria Lactobacillus plantarum

Fonte: Autores do relatrio
6. CONCLUSO
Assim, com a observao da lmina pronta olho nu e no microscpio,
constatou-se que a Lactobacillus plantarum um micro organismo Gram-positivo
devido colorao violeta que foi absorvida do corante Cristal Violeta.

7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1- Mini-curso COLORAO DE GRAM. X Semana de Biologia da UFPB.

Universidade Federal da Paraba UFPB Centro de Cincias Exatas e da Natureza
CCEN Departamento de Biologia Molecular DBM Laboratrio de Gentica
de Microrganismos LGM.
2- BURKERT, Carlos Andr Veiga. LADEIRA, Bruno Loureiro.Roteiro de Aulas
Prticas da disciplina de Bioqumica Industrial I.

3- TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia.

10. ed. Porto Alegre: Artmed, 2012.

4- BOSSOLAN, Nelma R. S. Introduo a Microbiologia. Universidade de So

Paulo e Instituto de Fsica de So Carlos, 2002.

5- HOGG, Stuart, Essential Microbiology, John Willey & Sons Ltd. The
University of Glamorgan UK. 2005.
 8. ANEXO

1) Explique porque a composio da parede celular das bactrias permite

diferenciao entre bactrias Gram-positivas e Gram-negativas.

O que permite o reconhecimento de bactrias Gram-positivas e Gram-

negativas diferenciao na parede celular, porque a tcnica de colorao de gram
determinada pela interao entre as substncias utilizadas no processo e a parede celular.
Uma vez que ambas so constitudas de componentes diferentes e em quantidades
variadas, obviamente, iro se comportar de maneira diferente frente a determinada
substncia. Em suma, o que ocorre que, em vista da parede celular majoritariamente
constituda por peptdeoglicanos nas Gram-positivas, esta consegue obstruir seus
inmeros poros e reter o corante violeta quando o solvente orgnico utilizado.
Por outro lado, as bactrias Gram-negativas contm uma parede celular com
uma quantidade bem reduzida, quando comparada as positivas, portanto, tem uma
estrutura complexa e diferenciada, apesar de menos resistente, abrange
lipopolissacardeos os quais formam uma membrana externa. Quando a placa contendo a
microbiota lavada com o solvente orgnico, a parte lipdica da parede celular
dissolvida, estabelecendo um caminho para o corante primrio passar. Em um momento
posterior, adicionado um segundo corante e, atravs dele pode-se observar que as
bactrias Gram-positivas permanecem com a colorao violeta, pois sua estrutura est
fechada, obstruda. Todavia, as bactrias Gram-negativas, aderem a colorao vermelho-
escuro do segundo corante, visto que todo o primeiro foi lavado com o solvente orgnico.

2) Aps aplicar-se a tcnica de colorao de Gram, qual a colorao

apresentada pelas bactrias Gram-positivas e Gram-negativas? Explique
a funo do corante violeta, do Lugol, da soluo lcool-acetona e da
fucsina na tcnica empregada.

As bactrias recebem o nome de Gram-positivas ou de Gram-negativas

devido forma como reagem aos corantes a elas aplicado. As bactrias Gram-positivas
adquirem a colorao violeta e as bactrias Gram-negativas obtm uma colorao
rosa/avermelhado. O corante violeta absorvido da mesma forma pelas bactrias Gram-
positivas e Gram-negativas, corando o citoplasma da clula. O mordente Lugol serve para
aumentar a afinidade entre o corante violeta e a clula e forma com o corante um
complexo insolvel dentro da clula. A soluo de lcool-acetona um solvente lipdico,
que tem o intuito de dissolver a poro lipdica das membranas externas das bactrias.
Nas gram-negativas ocorre a extrao dos lipdios da parede celular, aumento da
porosidade, o complexo cristal-violeta-iodo extrado das clulas. Nas gram-positivas,
ocorre desidratao das paredes celulares, diminuio da porosiadade e da
permeabilidade, o complexo cristal-violeta-iodo no pode sair das clulas, que
permanecem violetas. J a fucsina fixa o corante nas gram-negativas de vermelho.

3) Cite 5 exemplos de bactrias Gram-positivas e Gram-negativas e sua

importncia.

Bactrias Gram-positivas:
Streptococcus mutans: fazem parte da flora bucal, podem causar a crie
dentria so de fcil transmisso. So facilmente extinguidas quando cremes
ou enxaguantes bucais.
Lactobacillus bulgaricus: uma das espcie encontradas nas culturas para
iogurtes; produzem cido ltico a partir da lactose gerando um ambiente intestinal cido
que inibe fortemente os microrganismos indesejveis, como leveduras.
Enterococcus faecalis: umas das principais causas de infeces em cirurgias
e procedimentos hospitalares - normalmente em pacientes internados. Esto presentes no
trato intestinal de todas as pessoas.
Clostridium tetani: causa do ttano (consequncia de um ferimento na pele).
Sob condies favorveis torna-se capaz de multiplicar-se e produzir tetanospasmina,
que atua em terminais nervosos, induzindo contraturas musculares intensas.
Listeria monocytogenes: causadora da listeriose (intoxicao alimentar).
Pode ser encontrada no solo, na gua e em alguns animais, incluindo aves e bovinos.
transmitida atravs do consumo de alimentos contaminados, da contaminao do recm-
nascido durante o parto, por infeco cruzada no ambiente hospitalar e pelo contato com
animais. Uma pessoa saudvel que no esteja grvida, geralmente, no precisa de
tratamento. Caso houver gravidez o tratamento feito com antibiticos e podem evitar
uma infeco do feto ou do recm-nascido.
 Bactrias Gram-negativas:
Moraxella bovis: Essa bactria causa ceratoconjuntivite infecciosa
bovina (CIB). A transmisso ocorre pelo contato direto ou indireto atravs de moscas. A
CIB embora no fatal, causa considervel prejuzo econmico, pois leva reduo de
peso dos animais, bem como na produo de leite, gastos com tratamentos repetitivos,
desvalorizao comercial e possveis descartes de animais que apresentam sequelas
oculares.
Pseudomonas: Pode causar infeces oportunistas, em
indivduos imunocomprometidos, como infeces respiratrias, urinrias, otite em
crianas e conjuntivite em quem usa lentes. comumente encontrada em casos de
infeces hospitalares, sendo capaz de se aderir a diversos materiais,
contaminando cateteres, ventiladores, prteses e outros. Pode ser tratada por antibiticos,
porm, algumas dessas bactrias esto tornando-se resistentes a alguns
medicamentos comumente prescritos.
Salmonela: causadora de salmonelose. A contaminao se d atravs da
ingesto de alimentos indevidamente preparados, manipulados ou armazenados.
A salmonelose causa diarreia, vmito e nuseas intensas e tratada atravs de
antibiticos e soros.
Treponema pallidum: o agente patolgico da Sfilis. A contaminao
ocorre por contato sexual, transfuso de sangue, micro leses na pele, ou de me para
filho. O tratamento feito geralmente com uso de penicilina. Caso no seja tratado logo
no incio, ocorre progresso para estgios subsequentes, podendo levar a problemas
cardacos.
Vibrio cholerae: Responsvel pela causa de colra. encontrada de forma
livre ou aderida em superfcie de plantas, insetos e crustceos. A contaminao pode ser
feita atravs da ingesto de gua ou alimentos porm s prejudicial quando em grande
quantidade (em mdia 100 milhes e no mnimo 1 milho de microrganismos ingeridos).
feito tratamento por reidratao devolvendo ao organismo os fluidos e sais perdidos.

4) Na pasteurizao do leite, quais bactrias (Gram-positivas ou Gram-

negativas) so mais resistentes a este tratamento trmico? Explique.

Bacterias gram-positivas so formadas por muitas camadas de

peptidioglicano, j as gram-negativas possuem poucas camadas de peptidioglicano e uma
membrana externa de lipopolissacardeos e protenas. Portanto, as bactrias gram-
positivas so mais resistentes ao calor que as gram-negativas ocasionado justamente por
essa diferena na parede celular das clulas das bactrias.
A pasteurizao tem como finalidade a destruio de todos os
microrganismos causadores de doenas e no esporulados. A temperatura da
pasteurizao so suficientes para destruir todas as leveduras, fungos filamentosos,
bactrias gram-negativas e muitas gram-positivas, sobrevivendo, entretanto, as
termodricas.