El estilo de vida de Streptomyces, un gnero luego desarrollan paredes de esporas
de bacterias Gram-positivas que pertenece al gruesas, sintetizan un pigmento de esporas
phylum Actinobacteria, es en muchos grises y adquieren las otras caractersticas de aspectos sorprendentemente similar al de las esporas maduras. En comparacin con las los hongos filamen- tes: ambos crecen como endosporas formadas por especies de hifas ramificadas que forman un micelio Bacillus, las esporas de Streptomyces son vegetativo y se dispersan a travs de esporas mucho menos resistentes a condiciones que se forman estructuras reproductivas adversas, aunque pueden sobrevivir durante especializadas llamadas hifas areas, que largos perodos de tiempo en un estado emergen de la superficie de la colonia hacia desecado. Por lo tanto, parece que las el aire. Estas similitudes son esporas Streptomyces, en su mayora presumiblemente resultado de adaptaciones latentes, estn bien adaptadas para la a nichos ecolgicos similares, aunque los dispersin del organismo en el medio mecanismos subyacentes tienen diferentes ambiente1. orgenes evolutivos. Como los hongos, la En esta revisin, analizamos los avances mayora de los estreptomicetos viven como recientes en saprofitos en el suelo, aunque Streptomyces biologa celular y gentica del crecimiento de spp. tambin habitan exitosamente una Streptomyces y la morfognesis del amplia gama de otros nichos, tanto desarrollo, centrndose principalmente en terrestres como acuticos, y algunas cepas Streptomyces coelicolor como organismo son patgenos de plantas y animales1. La modelo. Se discute la base molecular del insuperable riqueza y diversidad del crecimiento apical y la ramificacin de las metabolismo secundario de Streptomyces ha hifas, seguida de un relato de los procesos hecho de estos organismos valiosos morfogenticos que permiten a las hifas proveedores de antibiticos y otras romper la tensin superficial y crecer en el molculas bioactivas, y la produccin de aire. La regulacin de la formacin de micelio estos compuestos se coordina con el areo y su integracin con el metabolismo programa de desarrollo de Streptomyces1. secundario se resumen para el sistema mejor Cuando una espora tpica de Streptomyces entendido a este respecto: Streptomyces encuentra condiciones favorables y griseus. A continuacin, se describe la nutrientes, germina y uno o dos tubos reorganizacin del desarrollo de los germinales emergen y crecen para formar elementos del citoesqueleto, la divisin hifas (Figura 1). Estos tubos germinales celular, la segregacin de los cromosomas y crecen por extensin de punta y ramificacin peptidoglycan montaje que conduce y lo que para formar un micelio vegetativo, sabemos sobre la regulacin de estos encontrndose a menudo profundamente en procesos. Finalmente, se discuten los el sustrato circundante. En respuesta al avances recientes en el estudio de la agotamiento de los nutrientes y otras expresin gnica especfica de clulas, y se seales, tanto la produccin de metabolitos describen nuevas herramientas y sistemas secundarios que facilitarn en gran medida la investigacin de la biologa del desarrollo de y se inicia la diferenciacin morfolgica. Las Streptomyces. hifas areas rompen la tensin superficial, escapan del medio acuoso del micelio Crecimiento y ramificacin de hifas vegetativo y crecen en el aire. Las hifas Una caracterstica definitoria de los areas se dividen por una forma de divisin estreptomicetos es que crecen como hifas de celular perfectamente controlada en cadenas ramificacin y forman un micelio (Figura 1). largas de compartimientos de presps, que El crecimiento se produce a travs de la extensin de la punta y la iniciacin de peptidoglucana, de una manera que es nuevas ramas y, por consiguiente, el nuevo distinta de las observadas durante el material de la pared celular se sintetiza slo crecimiento y la divisin celular de otros en las puntas de las hifas2. Este pronunciado bacterias En S. coelicolor, DivIVA es esencial crecimiento apical puede ser visualizado y tiene un fuerte impacto en la extensin de usando conju- gados fluorescentes de la punta, la ramificacin y la forma de la vancomicina (Figura 1) que manchan los clula. Forma un gran foco en cada punta de sitios donde el lpido precursor de hifas en crecimiento, y no surgen tubos peptidoglicano II se exporta y se expone en la germinales de esporas sin un foco DivIVA superficie celular3,4. Este patrn es asociado3 (Figura 1). Los ortlogos sorprendentemente diferente del de la ciornebacterianos y micobacterianos tienen mayora de las otras bacterias. En Escherichia una localizacin apical y una actividad coli, Bacillus subtilis y muchos otros morfogentica similares, y el agotamiento de organismos en forma de varilla, la elongacin DivIVA en Corynebacterium glutamicum celular es orquestada por un citoesqueleto conduce a la prdida del ensamblaje de la helicoidal que est formado por el homlogo pared celular polar y la conversin a una de la actina bacteriana mreB5,6. Este forma de clula esfrica, mostrando que elemento citoesqueltico dirige la insercin DivIVA es requerido para el mreB de nuevo peptidoglicano en la pared lateral, independiente extensin de la pared celular dando como resultado la extensin celular y en este organismo9. Similar Similar la adquisicin de la forma de la varilla, tambin se han mientras que los polos de clulas reportado datos para Mycobacterium smeg- hemiesfricas permanecen inertes una vez que se han formado como resultado de la Figura 1 | Ciclo de vida del desarrollo de divisin celular. Por el contrario, la extensin Streptomyces coelicolor. La germinacin de de la punta de Streptomyces no depende del una espora implica hinchazn, polarizacin mreB, y la sntesis de la pared celular ocurre del crecimiento y aparicin de un tubo en la punta de la hifa ms que a lo largo de la germinal que se convierte en una hifa. Este pared lateral. Aunque todos los genomas de modo caracterstico de crecimiento estreptomicetos que han sido secuenciados polarizado se muestra en las micrografas, hasta el momento contienen dos genes que muestran las zonas apicales del conjunto mreB, los estudios de S. coelicolor muestran de clulas-pared activas teidas con un que estos genes tienen poco impacto en la conjugado fluorescente de vancomicina extensin de la punta en el micelio (rojo) y la localizacin de la protena vegetativo y se involucran principalmente en determinante de polaridad DivIVA marcada la esporulacin en las hifas areas7 (G. muth, con protena fluorescente verde mejorada personal comunicacin). Adems, muchas (EGFP; verde) en dos hyphae emergiendo de otras actinobacterias, como las una espora. Las hifas crecen por extensin de corinebacterias y micobacterias en forma de la punta y se ramifican en un micelio varilla, no tienen genes mreB y, sin embargo, vegetativo que crece a travs y al igual que los estreptomicetos, crecen profundamente en el sustrato, dando lugar a apicalmente construyendo sus sobres en los la colonia vegetativa. En respuesta al polos celulares4,7-10. agotamiento de nutrientes y otras seales, El modo de crecimiento apical independiente las hifas areas rompen la tensin superficial, de mreB en las actinobacterias depende de la escapan del medio ambiente acuoso y crecen protena de la bobina en espiral DivIVA y en el aire. Las hifas areas se diferencian en parece representar una nueva forma de una larga cadena de compartimientos de dirigir la maquinaria biosinttica prespore, que luego desarrollan paredes de esporas gruesas, sintetizan un pigmento establecidos en tales focos, dando lugar a esporo de polictido gris y desarrollan las mltiples ramas de formas aberrantes12. otras caractersticas de las esporas maduras. Estos datos sugieren que Streptomyces Las esporas en gran parte latentes son los DivIVA puede actuar como una protena de medios para la dispersin de este organismo referencia que, directa o indirectamente, en el medio ambiente, y pueden recluta la maquinaria biosinttica de pared eventualmente germinar cuando encuentran celular a nuevos sitios. En contraste con el C. condiciones adecuadas. La barra de escala glutami- cum en forma de varilla, en el que representa 6 m. DivIVA se rene en sitios de fase tarda de la divisin celular y luego permanece en los nuevos polos celulares9, las hifas de S. En Streptomyces, la iniciacin de la extensin coelicolor forman focos DivIVA y nuevas de la punta durante la ramificacin de las ramas en sitios que no estn relacionados hifas requiere la seleccin y marcado de un con sitios de divisin o polos celulares sitio donde se establezca el crecimiento, existentes. Esto es consistente con la definiendo as un nuevo eje de polaridad demostracin anterior de que la extensin celular. las enzimas que participan en la de la punta y la ramificacin son exportacin y el montaje de peptidoglycan independientes de la divisin celular13. Las debe ser contratado a este sitio para iniciar cuestiones importantes que an no se han el crecimiento y crear una nueva punta de abordado incluyen la identificacin de las hifa. La imagen en tiempo transcurrido de S. protenas con las que Streptomyces DivIVA coelicolor en crecimiento muestra que interacta para iniciar la sntesis de la pared DivIVA se rene en un foco en la pared celular y determinar qu tipo de estructura lateral antes de que cualquier crecimiento intracelular DivIVA se forma en la punta hifal. sea visible y que la nueva rama emerja de La punta de hifa es probablemente un punto este foco12. Adems, la sobreexpresin de caliente al que se dirigen muchas funciones DivIVA conduce al ensamblaje de mltiples importantes. El peptidoglicano, as como focos a lo largo de la pared lateral, y el otros componentes de la envoltura celular, crecimiento de la pared celular es tales como los cidos teicoicos, las protenas de la superficie celular y los lpidos de la Vancomicina membrana, podran ser secretados y Un antibitico que inhibe la biosntesis de la ensamblados especficamente en la zona de pared celular al unirse al lpido precursor de crecimiento apical, pero esto debe ser peptidoglicano II cuando el lpido II est investigado experimentalmente. expuesto en la cara externa Curiosamente, la protena celulosa sinttica de la membrana citoplasmtica. Cs1A se encuentra en las puntas de las hifas, interacta con DivIVA y parece estar matis8,11. La DivivA heterloga tanto de S. implicada en el depsito de un glucano no coelicolor como de Mycobacterium enlazado hasta el momento en el envoltorio tuberculosis, pero no de especies de Bacillus celular14. Como otro ejemplo, la maquinaria o Streptococcus, puede restablecer la que produce y secreta el pptido surfactante polaridad de crecimiento y la forma de SapB (protena B asociada a esporas) parece vstago de las cepas de C. glutami- cum, estar localizada en puntas de hifas (j. agotadas en DivIVA. As, DivIVAs de Nodwell, comunicacin personal). Adems, actinobacterias altamente divergentes se encuentra una DnA translocasa codificada pueden cumplir esta funcin en el montaje por plsmido de la familia FtsK (tambin apical de pared celular9. conocida como familia SpoIIIe) en puntas de hifas: la protena de transferencia TraB participa en la transferencia conjugada del funcin bioqumica de las protenas Ram plsmido pSG5 de Streptomyces y un TraB- permaneci oscura hasta que se realiz que eGFP mejora la protena fluorescente verde) el carboxilo terminal de RamC es similar a las se acumula la fusin en las puntas de sintetasas lantibiticas24. Los antibiticos hifas15. DivIVA es claramente uno de los son antibiticos oligopptidos ribosomales marcadores moleculares que identifican este sintetizados que son producidos por sitio subcelular ocupado en Streptomyces, bacterias Gram-positivas. Se traducen como pero tambin pueden estar involucrados prepptidos inactivos que sufren extensa otros jugadores. modificacin post-traduccional antes de ser escindidos para producir el pptido maduro. Formacin de micelio areo La similitud de RamC con las sintetasas Para romper la tensin superficial del medio lantibiticas plante la posibilidad de que y crecer en el aire, S. coelicolor tiene que SapB estuviera estructuralmente relacionado recubrir sus hifas areas en una vaina con lantibiticos y especificado por los genes hidrfoba que est ausente de las hifas ram. Esto condujo directamente a un vegetales que crecen en la fase acuosa y, en descubrimiento clave en 2004 en el que SapB los medios ricos, debe tambin producen el se caracteriz estructuralmente y mostr ser pptido surfactante SapB16-18. Aunque la un pptido de tipo lantibitico derivado de vaina hidrofbica se identific por primera un prepptido codificado con ramS de 42 vez mediante microscopa electrnica a aminocidos por modificacin extensiva a la principios de los aos sesenta19,20 y SapB se trasmisin mediada por RamC24 (Figura 2) . identific a principios de los aos Aunque SapB est estructuralmente y noventa21,22, ambos componentes biosintticamente relacionada con eludieron la caracterizacin gentica y lantibiotricos, una clase importante de bioqumica durante muchos aos, incluso productos naturales de estreptomicetos, no despus de la secuenciacin completa de la S tiene actividad antibitica aparente y parece coelicolor genome23. La reciente elucidacin haber desarrollado una funcin distinta de la estructura de SapB, la identificacin de como un pptido tensioactivo que es los genes que especifican su produccin y la importante para la diferenciacin de caracterizacin de los componentes estreptomicetos en medios ricos. principales de la vaina hidrofbica son, por tanto, avances importantes en nuestra Chaplins y rodlins son componentes comprensin de la morfognesis de principales de la vaina hidrfoba. SapB no se Streptomyces. La importancia de SapB. en los produce en condiciones mnimas medios ricos, S. coelicolor debe producir medio y, sin embargo, S. coelicolor produce SapB para permitir la formacin eficiente de hifas areas, lo que indica que existe una va hifas areas21. Ahora sabemos que SapB es independiente de SapB de formacin de especificado por el micelio areo. Esta va independiente de rpido micelio areo SapB est mediada por las protenas de la (ram) la formacin de clster de genes, vaina hidrfoba: los chaplins y los rodlins (figura 3). En S. coe- licolor, la familia chaplin consta de ocho protenas secretadas, ChpA- laboratorios de experimentos de clonaje de H, que comparten un dominio hidrofbico escopeta. Por el contrario, la supresin del altamente conservado de ~ 50 aminocidos racimo de ram, o el grupo de amf llamado el dominio chaplin32-34. Chaplins se orthologous en S. griseus, causa la prdida puede subdividir en corto (de los cuales hay de formacin de hifa area (el fenotipo cinco en S. coelicolor) o largo (de los cuales "calvo") en medios ricos25-27,30,31. La hay tres en S. coelicolor) chaplins. Los cinco chaplins cortos, ChpD-H, consisten en un . Sin embargo, la produccin forzada de SapB dominio chaplin precedido por un pptido seal Sec (secrecin). Los tres chaplins segregacin e intercelular largos, ChpA-C, tienen un pptido de seal Transferencia de ADN. Sec de amino-terminal, dos dominios de chaplin que estn separados por una regin ram inducen una formacin rpida de micelio de enlace flexible y una "seal de areo29, y clasificacin" C-terminal que se dirige al los genes ram fueron identificados de forma chaplin para la unin covalente a la clula independiente por varios por el peptidoglicano de las hifas areas por enzimas sortasas32, 33 (Figura 3a). Los sobreexpresin) sobre un medio mnimo, en chaplins se autoensamblan en filamentos de el que SapB amiloide en las interfases aire-agua in normalmente no produce, restaura vitro33, y es probable que los capelones dbilmente el crecimiento Sin embargo, cortos estn anclados a la superficie de las usando microscopa electrnica de barrido, hifas areas in vivo a travs de la se observ que en lugar de tener una heteropolimerizacin con los capelones superestructura superficial de "cestera de largos anclados en la pared celular forman pares de rodillos" que es caracterstico de las filamentos de chaplina hidrfobos (figura esporas de tipo salvaje (Figura 3c), el 3a). mutante rdl-nulo posee una red la expresin de los genes chp se activa antes desordenada de filamentos finos33,35,37. de la formacin de micelio areo en medios Por lo tanto, parece probable que los ricos y pobres, y una cepa suprimida para los filamentos de capilla estn organizados en la ocho genes chaplin no puede producir hifas ultraestructura ms grande de "rodillo" por areas en medios mnimos y es severamente los rodlins (figura 3c). En apoyo de este punto de vista, las esporas de otra especie, Familia FtsK Streptomyces avermitilis, cuyo tipo salvaje Una familia de ATP-dependiente carece de los genes rodlin pero que, sin ADN translocases que son embargo, sufre un desarrollo normal, tienen una ultraestructura superficial similar a la de que contiene ramR, un gen que codifica un un mutante rdlA y rdlB de S. coelicolor 37. regulador de respuesta que activa directamente la convergencia tran- Sealizacin aguas arriba no resuelta. La 24-28 produccin de chaplins y SapB es un paso clave en el inicio de la diferenciacin celular deficiente en medios ricos30,35. Las cepas en S. coelicolor. Sin embargo, las vas de que no pueden hacer tanto SapB como sealizacin que conducen a su expresin chaplins son calvas bajo son todava mal 30 entendido. El regulador de respuesta RamR activa directamente los genes para la importante en el cromosoma produccin y exportacin de SapB, pero ramR no tiene gene geneticamente ligado de descrito opern ramCSAB gen kinase cognoscitivo, y no se conoce actualmente nada sobre los mecanismos (FIGURA 2). copias adicionales de la reguladores que rigen directamente la transcripcin de ramR, que es upregulated ditions en el inicio de formacin de micelio areo25. Del mismo modo, se sabe poco sobre la secretada durante la fase vegetativa de regulacin aguas arriba de los chaplins. desarrollo, y la evidencia sugiere que acta Se han identificado una serie de genes que se como un surfactante, recubriendo tanto las requieren para la formacin de hifa area, hifas areas nacientes como las interfaces muchos de los cuales han recibido una aire-agua para facilitar la aparicin de designacin bld (calva) debido a que los filamentos areos mutantes carecen de la morfologa en la atmsfera. Los chaplins y rodlins son caracterstica de colonias difusas del tipo secretados y polimerizan para formar la salvaje. Sin embargo, la forma en que estos vaina hidrofbica alrededor de las hifas genes interactan para producir la formacin areas, facilitando adems la salida al aire. c de micelio areo es en gran medida oscura. | Los filamentos de chaplin estn La produccin de SapB y chaplin en medio organizados en estructuras de orden rico requiere casi todos los genes bld hasta superior por los rodlins (RdlA y RdlB) para ahora probados21,22,26,32 y la producir la caracterstica "cestera de pares sobreexpresin constitutiva de ramR de rodlets" ultraestructura observada en la restaura la produccin de SapB y la superficie de esporas Streptomyces formacin de micelio areo a todos los coelicolor y hifas areas. Las partes a y b se mutantes bld de S. coelicolor26, lo que modifican, con permiso, de REF. 16 (2008) implica que el gen bld culmina en la Sociedad Americana de Microbiologa. La produccin de SapB. Se ha propuesto una parte c se reproduce, con permiso, de REF. cascada jerrquica de sealizacin 34 extracelular basada en la capacidad de (2008) Sociedad Americana de algunos mutantes bld para restaurar Microbiologa. parcialmente la formacin de micelio areo en otros mutantes bld cuando se crecen de las molculas de sealizacin putativas se juntos 22, 38 y una ha caracterizado como un oligopptido de 655 Da que es reimportado por un Figura 3 | Modelo para el papel de los transportador de casete de unin a ATP chaplins y Sapb en la morfognesis. oligopptido codificado por el locus a | Los chaplins largos (ChpA, ChpB y ChpC) bldK38,39. Sin embargo, la mayora de los se exportan a travs del sistema Sec genes bld caracterizados codifican factores (secretory) y se unen covalentemente a la de transcripcin y no determinantes pared celular de las hifas areas mediante evidentes de la produccin o importacin de una enzima sortase a travs de una seal de seales, y por lo tanto deben tener roles ms clasificacin carboxi-terminal. El dominio indirectos, por ejemplo en la percepcin y / o central de los capelones largos abarca la transduccin de la seal. capa de peptidoglicano y el tndem, Los dominios C-terminales, chaplin La cascada del factor A en S. griseus. En hidrfobos se encuentran en la superficie de comparacin con S. coelicolor, se entiende la pared celular. Los chaplins cortos (ChpD-H, bien la va de sealizacin que conduce a la tambin exportados a travs del sistema Sec) iniciacin de la formacin de micelio areo consisten en un solo dominio de chaplin y se en S. griseus. Central a esta va es la propone heteropolimerizar con los chaplins hormona- largos para formar filamentos de chaplin como el factor A de la molcula de hidrfobos extendidos sobre la superficie sealizacin de la \ gamma - butirolactona celular y los filamentos estn por (figura 4). En estreptomicetos, las - consiguiente anclados a la clula pared. b | butirolactonas se producen ampliamente, SapB (protena B asociada a las esporas) es pero sus papeles varan de especie a especie40-42. En S. coelicolor, por ejemplo, las -butirolactonas desempean un papel importante en el control de la biosintesis antibitica, pero no parecen estar implicadas en la diferenciacin42