Influencia del laser en la germinacion y desarrollo inicial

de distintas especies de semillas

Jazmin G. Garduno Hernandez, Antonio Daz Villarreal
Universidad Nacional Autonoma de Mexico
6 de diciembre de 2016

Resumen
Se realizo la exposicion de semillas de trigo (Triticum) y de alfalfa (Medicago sativa) a la luz del haz de
un laser a distintos tiempos, observando las diferencias en el crecimiento de las mismas tanto cualitativa como
cuantitativamente. Se obtuvo que, en el caso de las semillas de alfalfa, el laser propicio el crecimiento de la planta,
provocando una influencia positiva en las mismas; para el trigo, en cambio, se obtuvo una influencia negativa, pues
se inhibio el desarrollo de la planta.
Motivacion 4. Ruptura de la cubierta seminal por el embrion.

Se sabe que el crecimiento de las semillas tiene una me- 5. Establecimiento de la plantula como ente autonomo.
jor respuesta o es optimizado a longitudes de onda que
caen entre el rojo y el rojo lejano. Los laseres nos per- En la transformacion de una semilla a una planta se
miten aplicar dosis de luz altamente monocromatica con involucran distintos factores bioestimulantes, los cuales
una eficiencia e intensidad mayor a la que se obtendra pueden ser fsicos, qumicos, electromagneticos, etc. y
mediante otras fuentes, como la luz solar o lamparas aco- cualquier estmulo que afecte indirecta o directamente
pladas a filtros especiales. El objetivo y motivacion de al sistema biologico que la semilla conlleva [4]. Desde el
este experimento es analizar y observar el crecimiento punto de vista de este proyecto, el estmulo de mayor in-
de semillas de interes para la agricultura, como lo es el teres es la fotobioestimulacion, as pues, se ignoraran los
trigo (Triticum) y la alfalfa (Medicago sativa), a traves efectos de otros bioestmulos en la germinacion.1
de la fotobioestimulacion de luz roja , pues dependiendo La fotobiestimulacion afecta directamente a la semilla
los resultados de este experimento podra ser un parte a partir de la division y la ruptura de la cubierta semi-
aguas para siguientes investigaciones. Curiosidad y la in- nal, siempre y cuando nuestra semilla sea fotoblastica, es
tencion de ver la reaccion entre algo tan relacionado a decir, que la luz tiene cierta influencia (ya sea positiva o
la fsica que conocemos como lo es la luz de un laser y negativa) en su desarrollo.
algo tan importante y esencial en la biologa como lo es
Existen varias teoras acerca de la estimulacion lumni-
el crecimiento de una planta.
ca en las plantas, estas proponen la existencia de molecu-
las llamadas cromoforos, las cuales son fotorreceptores y
Marco Teorico tienen la capacidad de absorver longitudes de onda es-
pecficas para las semillas y plantas en sus distintas fa-
Para poder entender claramente el crecimiento y desa- ses de desarrollo; especficamente han sido descubiertas
rrollo incial de una planta, es necesario saber acerca de tres clases de fotorreceptores; fitocromos, fototropinas y
los factores que le afectan. A continuacion daremos una criptocromos, los cuales absroven respectivamente ciertas
introduccion sobre estos factores, ademas de aquellos que longitudes de onda. Los fitocromos absroben en longitu-
necesitan ser esclarecidos para el correcto entendimiento des de 600 a 750nm, las fototropinas de 320 a 500nm y
de la informacion presentada en nuestro proyecto. los criptocromos de 500 a 630nm [3]. En la bioestimula-
cion laser, aquellos laseres en el rango del rojo exitan a
Germinacion los fitocromos (por encontrarse en la longitud de onda
que absroben).
La germinacion es una secuencia de eventos que dan
La existencia de estos fotoreceptores implica que se
como resultado la transformacion de un embrion en esta-
absrobe la energa de la luz, transformandola en energa
do quiescente a una plantula [5]. El proceso de germina-
qumica, la cual es usada en procesos de crecimiento de
cion puede dividirse arbitrariamente en varios eventos:
las plantas; esto quiere decir que de cierta forma se mo-
1. Embibion, el proceso fsico de absorcion de agua. difica la energa interna de las semillas obteniendo una
reaccion diferente para especies variadas, as como para
2. Activacion, comienza a funcionar de la maquinaria el tipo de cultivo que se tenga.
de sntesis y degradacion.
1 Se procuro mantener a las semillas bajo las mismas condiciones

3. Division y elongacion celular. de humedad, luz y temperatura a lo largo del procedimiento

1
Laser
El laser es un dispositivo que utiliza el principio cuanti-
co de emision inducida para poder formar un rayo de luz
coherente, altamente monocromatico y focalizado, lo cual
permite tener un rayo de luz de una intensidad mayor
comparada con la luz obtenida de manera natural por el
sol o de manera artificial como la luz de un foco.
En recientes artculos se menciona que la luz roja a
distintas frecuencias puede activar y desactivar distintos
genes en plantas y semillas. Por las propiedades del laser,
estas frecuencias de rojo pueden ser alcanzadas con ma-
yor precision y potencia, por lo cual la utilizacion de este
metodo en el crecimiento de plantas y germinacion de se-
millas ha sido fundamental para el entendimiento de los
efectos de la luz en el desarrollo de las mismas.
Existen varios tipos de laseres, los cuales utilizan dis-
tintos metodos para producir la emision inducida, sin
embargo, para el interes de este proyecto nos fijaremos
en el laser de He-Ne, el cual emiten en una longitud de
onda que oscila entre los 532 y 533nm, por lo que el rayo
que produce es de color rojo. Los efectos de la luz laser
de He-Ne sobre semillas de trigo haban sido analizados,
obteniendo resultados positivos. La altura de las plantas
procedentes de semilla tratada con irradiacion laser fue
considerablemente mas grande que las provenientes de
las semillas control (muestras no-irradiadas). La cosecha
fue mayor encontrando, que la semilla humeda es mas
susceptible al efecto laser que la semilla seca (Jevtic et
al. 2015) [3].
Procedimiento experimental
Incialmente seleccionamos las semillas que utili-
zaramos en nuestro experimento, el principal criterio fue
la velocidad de germinacion. Las semillas elegidas fue-
ron de alfalfa y trigo, pues despues de informarnos que
eran de las semillas que germinaban con mayor veloci-
dad, tambien se nos comento que la semilla de trigo se
hongueaba facilmente cuando se humedeca mucho.
Una vez que decidimos esto, comenzamos con la orga-
nizacion del procedimiento a seguir. Las semillas seran
expuestas directamente al haz de un laser, que en nues-
tro caso fue rojo con una longitud de aproximadamente
632nm y una potencia de 3,5mW , ademas decidimos que
sera a distintos tiempos de exposicion2 , una porcion de
semillas sera expuesta durante 15 segundos al haz del
laser, mientras que otra lo estara durante 30 segundos,
y una porcion final no sera expuesta al laser, obteniendo
que para cada especie de semilla que tenamos se haran
tres grupos de las mismas.
Elegimos 6 vasos de precipitados, de los cuales tres es-
taran destinados a portar semillas de alfalfa y los otros
tres portaran de trigo, en cada uno de los vasos colo-
camos aproximadamente la misma cantidad de algodon
2 Esta desicion fue basada en los experimentos consultados en to de las semillas sanas (aquellas que no fueron retiradas
las referencias, pues la mayora lo hacan en estos lapsos.
(150g), e inicialmente le agregamos a cada uno la canti-
dad de 50ml de agua, colocando en los vasos para alfalfa
10 semillas (por su pequeno tamano), y en los de trigo
solo 7 semillas. Una vez que todo estuvo montado, ele-
gimos un lugar para colocar todos los vasos en el que la
exposicion a luz solar fuese ligera.
La exposicion al laser fue directa (como se puede apre-
ciar en la imagen 1, es decir, se colocaba el canon apun-
tando a las semillas, y durante el tiempo que tenan que
ser expuestas nos aseguramos que el haz incidiera sobre
cada semilla (lo movamos de forma que sucediera as).
Cabe recalcar que se etiquetaron los vasos con el tiempo
de exposicion que cada uno deba de tener, a forma de
evitar confusiones.
Figura 1: Forma en que se aplico el laser a las semillas.
La exposicion al laser se realizo durante 7 das, y solo
hubo un salto de dos das en los cuales no haba labores en
la facultad. Se detuvo la exposicion debido a que despues
de ese tiempo se apreciaban ya diferencias muy notables
en el crecimiento de las ahora plantas.
Para que las observaciones realizadas no fuesen mera-
mente cualitativas, realizamos una medicion de las plan-
tas que haban nacido. Para el caso de la alfalfa, se puede
apreciar en la figura 2 con la lnea marcada ah la dis-
tancia que fue medida, que basicamente fue a partir del
inicio del tallo y hasta el nudo (donde inicia la hoja);
en el caso del trigo, su forma era distinta (practicamente
recta), y terminaba en forma de punta (no tena hojas),
por lo que la medicion se tomo nuevamente a partir del
inicio del tallo hasta la punta de la planta.
Un detalle importante es considerar que crecio micro-
biota en las semillas de trigo, sucediendo que en cada
vaso fueron aproximadamente el mismo numero de semi-
llas invadidas permitiendo que la mayora germinara; por
tal motivo solo tomamos en cuenta el dato de crecimien-
del vaso).
2
 En la imagen a continuacion se presenta el desarrollo
inicial que presento la planta de trigo.

Figura 2: Forma en que se midieron las plantas nacientes

de alfalfa. Figura 5: Forma en que se midieron las plantas nacientes
de alfalfa.

Resultados La imagen siguiente muestra el crecimiento (y gran

desarrollo!) que presento la planta de trigo despues de
Se realizo la observacion de las plantas ya germinadas los 7 das en que se dejo montado el arreglo.
a distintos tiempos. Despues de dos das de haber sido
montado el arreglo experimental, obtuvimos las imagenes
3 y 5, siete das despues del montaje se obtuvieron las
imagenes 4 y 6.
En la siguiente imagen se puede apreciar el crecimiento
inicial en la planta de alfalfa.

Figura 6: Forma en que se midieron las plantas nacientes

de alfalfa.

En las tablas siguientes se puede apreciar el promedio

de la longitud de las plantas respecto al tiempo de ex-
posicion al laser que tuvieron las semillas; esta medicion
Figura 3: Forma en que se midieron las plantas nacientes se realizo con la finalidad de observar cuantitativamente
de alfalfa. la diferencia de longitud (desarrollo) que presentaron las
plantas con respecto al tiempo de exposicion al laser que
En la figura siguiente, se puede apreciar el desarrollo sufrieron.
que presento al da 7 la planta de alfalfa, justo antes de A partir de las mediciones hechas a las semillas germi-
recoger el arreglo experimental. nadas de alfalfa, logramos obtener la siguiente tabla:

T. de exposicion 0s 15 s 30s
long. 1 2.3 1.9 3.0
long. 2 2.4 2.8 3.0
long. 3 2.0 2.5 2.6
long. 4 2.0 2.8 2.7
long. 5 1.9 2.8 2.1
long. 6 2.1 2.2 2.5
Promedio 2.12 2.5 2.65

Cuadro 1: Medidas obtenidas para las plantas de alfalfa.

Figura 4: Forma en que se midieron las plantas nacientes A partir de la medicion a las plantas de trigo, logramos
de alfalfa. obtener la siguiente tabla:

3
 T. de exposicion 0s 15 s 30s es la desviacion estandar que se tena, pues es el valor
long. 1 1.1 0.2 1.6 promedio en la longitud lo que estamos considerando.
long. 2 3.6 2.6 0.8 Finalmente un resultado interesante y que considera-
long. 3 5.0 2.1 0 mos de gran importancia, es que para la planta de trigo,
long. 4 6.2 1.8 1.2
aquellas semillas que haban sido expuestas a mas tiempo
long. 5 6.9 1.5 1.0
del haz del laser diario, presentaron un menor crecimien-
Promedio 4.56 1.76 0.92 to en el hongo que se desarrollo en las semillas.
Cuadro 2: Medidas obtenidas para las plantas de trigo.
Analisis de resultados
A partir de las tablas 1 y 2, logramos obtener los grafi- A partir de las graficas presentadas en la seccion de
cos que mostramos a continuacion, en los cuales se puede resultados, podemos apreciar que el crecimiento en cada
apreciar la relacion de crecimiento (longitud promedio de tipo de semilla utilizada fue distinto. Mientras para las
la planta) y el tiempo de exposicion al laser diario de la semilllas de alfalfa la exposicion al laser propicio un mejor
misma, cabe recalcar que se hizo para cada una de las desarrollo, es decir, a mayor tiempo de exposicion diaria
especies. la longitud de las plantas fue mayor (en promedio). En
Para la planta de alfalfa se obtuvo la grafica siguiente: el caso de las semillas de trigo, sucedio lo opuesto, es
decir, a mayor tiempo de exposicion diara, la longitud de
Longitud de la planta contra tiempo de exposicin para las semillas de
alfalfa las plantas que nacieron fue mucho menor comparada a
aquellas sin exposicion al laser.
3

As mismo, al igual que el crecimiento de la planta,

2.5
para las semillas de trigo se presento una menor cantidad
Longitud promedio de las plantas [cm]

de hongo desarrollado en las semillas a mayor cantidad

2

de tiempo de exposicion al laser.

1.5
A partir de estos resultados, podemos inferir que la
influencia del laser tuvo una respuesta distinta en cada
1

una de las especies de semillas que fueron observadas,

0.5
pudiendo ser que el hongo desarrollado en las semillas
de trigo propiciara que el desarrrollo en las plantas fuese
0
-20 -10 0 10 20 30 40 50
T. de expocicin [s] irregular, es decir, que influenciara el mismo, provocando
que la exposicion al laser no fuera el unico estmulo a
considerar.
Figura 7: Grafica obtenida de la relacion entre el creci- Para las semillas de alfalfa, se tiene que el laser ro-
miento de la planta y la exposicion al laser para la alfalfa. jo implico ser una influencia fotoblastica positiva, pues
fomento el desarrollo de la semillas. Caso contrario, pa-
Para las plantas de trigo que germinaron, se obtuvo el ra las semillas de trigo, as como para los hongos que
siguiente grafico. estas desarrollaron, el laser represento una influencia fo-
toblastica negativa, pues inhibio el desarrollo de las se-
Longitud de la planta contra tiempo de exposicin para las semillas de millas y del hongo.
trigo
A partir del artculo presentado en la referencia [3],
obtuvimos la siguiente cita:
6

5
Lonngitud promedio de las plantas [cm]

4
El laser de He-Ne tambien ha demostrado ser un meto-
do util para mejorar la calidad sanitaria de semilla,
3
como los estudios reportados por Ouf y Abdel-Hady
2
(1999), quienes aplicaron un tratamiento con laser de
1 He-Ne, con potencia de 7.3mW durante 1, 3, 6 y 10 min,
a semillas de soya (Glycine max L.) tenida y colocada
0
-20 -10 0 10 20 30 40 50
en un contenedor que rotaba al momento de la irradia-
-1
T. de exposicin [s] cion, observando que a los 3 min, exista una reduccion
en el numero de hongos transmitidos por la semilla y
esta reduccion se hizo mas pronunciada a medida que
Figura 8: Grafica obtenida de la relacion entre el creci- el tiempo de irradiacion se incremento.
miento de la planta y la exposicion al laser para el trigo.
En la que se presenta una importante referencia de que
El error que se muestra en cada una de las graficas a mayor tiempo de exposicion al laser, las semillas de soya

4
presentan un menor desarrollo de hongos, lo mismo que [4] Jose Alfonso Dominguez Chavez(2004). Diseno y
sucedio en nuestro caso. construccion de un equipo de bioestimulacion basa-
Un resultado que parece necesario mencionar en esta do en diodos laser de 650 nm para aplicaciones en
seccion y no en la de resultados como tal, es que paralelo la aceleracion del crecimiento de semillas. (Mestra),
a este experimento se realizo otro, en el cual se coloco un IPN, Mexico.
filtro con papel celofan en frascos con los mismos arreglos
considerados en este experimento. El punto del papel ce- [5] Antonio Juarez Juarez, (1993). Influencia de la luz
lofan es que solo permitio el ingreso de luz polarizada sobre germinacion y crecimiento en semillas. (Licen-
a una longitud de onda (luz monocromnatcica). As, el ciatura), UAM-I, Mexico.
desarrollo de las plantas que nacieron en el experimento
del celofan, fue mnimo en comparacion de las de laser,
razon por la cual no se agregan explicitamente los resul-
tados. De la comparacion con este experimento, podemos
considerar que la exposicion al laser propicio de una for-
ma realmente evidente el crecimiento de las plantas que
tenamos.

Conclusiones
El laser aplicado a las semillas influenca el desarro-
llo de las mismas, as como el desarrollo de organismos
como hongos. La influencia que realice dependera de la
semilla que sea considerada, pues esta puede tener una
reaccion positiva (la exposicion propicia el crecimeinto),
negativa (la exposicion inhibe el crecimiento) o neutra
(la exposicion no tiene ningun efecto en el desarrollo de
la planta).
La bioestimulacion con luz laser es totalmente efectiva
y tiene resultados mucho mas evidentes que la luz mo-
nocromatica aplicada con filtros a las semillas, y esto se
debe a la diferencia esencial entre el laser y una fuente
de luz como un foco o incluso luz solar, la luz coheren-
te del laser (en una direccion), permite la aplicacion de
una potencia muchsimo mayor que la de otros tipos de
fuente de luz, permitiendo un desarrollo acelerado por el
funcionamiento de los receptores mencionados antes.
Finalmente, podemos considerar que el laser permite
eliminar el avance o desarrollo de hongos en las semillas,
por lo que puede ser utilizado en el cultivo de ciertos
alimentos considerando el efecto que tiene ademas en la
semilla en s, es decir, si estimula o inhibe su desarrollo.

Referencias
[1] Wikipeda. (2016).Fitocromo. 01/12/16, de Wikipe-
dia Sitio web: https://es.wikipedia.org/wiki/
Fitocromo

[2] Wikipeda. (2016).Laser He-Ne. 01/12/16, de Wi-

kipedia Sitio web: https://es.wikipedia.org/
wiki/L%C3%A1ser_de_helio-ne%C3%B3n

[3] Claudia Hernandez Aguilar, Arturo Domnguez Pa-

checo, Alfredo Cruz Orea, Anne Podlesna, Rumen
Ivanov, Aquiles Carballo Carballo, Mariana Cristi-
na Reyes (2016). Bioestimulacion laser en semillas y
plantas. (Licenciatura). IPN, Mexico.