PROBLEMAS SOBRE ENZIMAS

1. Se estudia la cintica del estado estacionario de una enzima en ausencia y en presencia de un

inhibidor. La velocidad inicial viene dada en funcin de la concentracin del sustrato en la
siguiente tabla:

V [(mmol/L)-1. min-1
[S] (mmol/L) Sin inhibidor con inhibidor

1.25 1.72 0.98

1.67 2.04 1.17
2.50 2.63 1.47
5.00 3.33 1.96
10.00 4.17 2.38

a) Qu tipo de inhibicin se ha producido?

b) Determine Vmax y KM en ausencia y en presencia del inhibidor. Que diferencias encuentra?

2. Una enzima se estudia en ausencia y en presencia de inhibidor con concentracin diferente. Los
datos de la velocidad inicial frente a la concentracin de sustrato en cada caso son:

V [(mmol/L)-1. min-1
[S] (mmol/L) Sin inhibidor con inhibidor 3 mM con inhibidor 5 mM
1.25 1.72 1.25 1.01
1.67 2.04 1.54 1.26
2.50 2.63 2.00 1.72
5.00 3.33 2.86 2.56
10.00 4.17 3.70 3.49

a) De que tipo de inhibicin se trata.

b) Determine Vmax y KM para cada concentracin del inhibidor.
c) Estime K1 a partir de los datos.

3. Qu relacin existe entre KM y [S], cuando una reaccin catalizada enzimticamente, alcanza el
80% de la Vmax.
4-Considere a la enzima Invertasa, que cataliza la hidrlisis de Sacarosa a fructosa y glucosa. Esta
enzima posee una Km para sacarosa de 0.5 mM y una constante cataltica de 175 min -1. Si se mide
su actividad en presencia de 0.25 mM de sacarosa con 25 pmol de enzima en la cubeta - qu
velocidad de catlisis se observar? - qu fraccin representa esto de la Vmax que se podra
calcular en esta reaccin si se variase la cantidad de sacarosa? - Cunto sustrato habra que aadir
para que la velocidad observada alcanzase 0.95% de la Vmax? - Qu importancia podra tener esto
para la posible aplicacin industrial de la enzima? - Explique sus respuestas.

5. A 10.0 ml de una disolucin de una enzima pura que contiene 1.0 mg de protena por mililitro, se
le aade la cantidad de AgNO3 exactamente precisa para inactivar la enzima. Se necesitaron en
total 0,342 M de AgNO3 . Calcular el peso molecular mnimo de la enzima.

6. La actividad de la Acetil-CoA carboxilasa, medida con tres diferentes concentraciones de enzima

y a diferentes concentraciones de sustrato fu la siguiente:

[Enz] (mg de protena) 0.1 0.2 0.5

[AcetilCoA] (mM) Vel (mmol / min)
0.05 0.275 0.546 1.373
 0.14 0.482 1.001 2.502
0.23 0.580 1.185 2.891
0.32 0.642 1.385 3.463
0.50 0.755 1.494 3.656
0.59 0.766 1.497 3.810

a) Calcular para cada experimento el valor de Km y el valor de Vmax.

b) Son los valores de Km y Vmax iguales o diferentes?
c) Explique si lo que observ es lo que esperaba obtener
d) Sabiendo que la enzima pesa 220 000 grs/mol, haga una grfica de Vmax vs mmol de enzima.
e) Qu representa la pendiente de esta grfica?

7. Se realizaron estudios de inhibicin para dos enzimas diferentes presentes en el suero bovino. Se
vari la concentracin de sustrato a en ausencia y en presencia de tres concentraciones diferentes de
inhibidores de cada enzima. En cada caso encontrar:

a) El tipo de inhibicin.
b) El valor de Km y Vmax.
c) El valor de Ki para el inhibidor.

Enzima: Fosfatasa alcalina de suero bovino, inhibidor: Oxalato de Bromolevamisol

[Bromolevamisol] (mM) 0 8 16 40
-1
[Sustrato] [FP](mM) Velocidades iniciales (mmol min mgProt.-1)
0.1 0.231 0.210 0.191 0.158
0.3 0.431 0.369 0.309 0.239
0.7 0.607 0.488 0.425 0.277
1.3 0.751 0.599 0.467 0.304
1.8 0.811 0.657 0.530 0.319
2.6 0.912 0.657 0.546 0.328
4.1 0.957 0.688 0.561 0.351
5.8 0.981 0.741 0.558 0.344

Enzima: Transaminasa Glutmico Pirvica.

[2hidroxisuccnico] 0.0 1.0 2.0 5.1

(mM)
[Sustrato] [Glu] Velocidades iniciales (mmol / min / mgProt)
(mM)
0.6 0.59 0.48 0.38 0.24
1.4 1.12 0.91 0.78 0.51
2.9 1.63 1.43 1.19 0.87
5.2 1.94 1.70 1.64 1.19
8.0 2.19 1.94 1.94 1.56
10.3 2.28 2.06 1.99 1.74
16.0 2.32 2.33 2.24 1.89
25.1 2.62 2.53 2.25 2.09
 8. Wolfenden afirma que carece de sentido distinguir entre sitios de unin y sitios catalticos en una
enzima. Discuta esta afirmacin.

9- La enzima Aspartato transaminasa, que cataliza la reaccin:

Aspartato + Oxoglutarato Glutamato + Oxaloacetato

se realizaron los siguientes tres experimentos el siguiente experimento:

[Asp] = 1 mM [OxG] = 0.02 mM [OxG] = 0.5 Mm

[OxG] Vel [Asp] Vel [Asp] Vel
(mM) (mol/min) (mM) (mol/min) (mM) (mol/min)
0.002 0.444 0.007 0.411 0.007 0.468
0.018 2.031 0.048 1.268 0.048 2.017
0.037 2.781 0.171 1.722 0.171 3.317
0.063 3.336 0.335 1.850 0.335 3.866
0.094 3.756 0.547 1.983 0.547 4.123
0.493 4.324 1.016 2.031 1.016 4.324

a) Calcule Km y Vmax para cada sustrato.

b) Cambian las Vmax? Explique su respuesta
c) Explique que pas en el segundo experimento, con respecto al tercero.
d) Cantos y cules valores de Km debo considerar para describir la afinidad de la enzima por sus
substratos?
e) Qu conclusin se podra sacar de esos datos?

10.- El RNA se hidroliza rpidamente en solucin alcalina. Sin embargo el DNA que carece del
-OH en la posicin 2'- del anillo furansido de la ribosa es resistente a esta condicin. Basado en su
conocimiento del mecanismo qumico de la RNAasa explique esta observacin.
2. En la lactonizacin siguiente:

La reaccin es 3.4 X 1011 veces ms rpida cuando R1 es CH3 que cuando R1= H. Explique este
resultado. Cmo se relaciona lo anterior con los mecanismos de catlisis enzimtica?

11.- Para muchas enzimas, el mecanismo qumico de accin implica catlisis cida (donacin de un
protn) sobre un grupo y catlisis bsica sobre otro. Si la enzima libre posee tanto a la base como al
cido, porqu estos no se neutralizan mutuamente.