BAB III

METODELOGI PRAKTIKUM
3.1. Pelaksanaan
a. Acara : Keamanan Pangan Sanitasi Ruangan dan Alat
b. Waktu : Selasa, 14 November 2017
c. Tempat : Laboratorium Analiza Gizi
d. Alokasi Waktu: 1 x 120 menit
3.2. Alat dan Bahan
a. Alat
- Cawan Petri
- Inkubator
- Autoklaf
- Bunsen
- Meja
- Piring
- Botol
- Kompor
- Ruang Pengolahan
- Runga Saji
- Mikropipet
b. Bahan
- Agar PDA steril
- Agar NA steril
- Larutan pengencer steril
3.3. Prosedur Kerja
a. Sanitasi alat metode rodac
b.
Siapkan tabung reaksi yang berisi larutan pengencer sebanyak 5 ml dan batang oles
yang telah disterilkan serta cawan petri

Masukkan batang oles pada tabung reaksi lalu peras batang oles dengan cara
menekan-nekannya pada dinding tabung reaksi bagian atas

Gunakan batang oles untuk menyeka permukaan bahan pangan yang telah di uji
seluas 2,5 x 2 cm

Batang oles dimasukkan kembali kedalam tabung, aduk dan tabung diputar-putar
selama 2 menit lalu peras kembali

Inkubasi pada suhu kurang lebih 300C selama 1-3 hari

Amati perkembangan mikroba dan hitung koloninya atau nyatakan dengan +/++/+++.
Jumlah mikroba / cm = jumlah koloni / ml x 5ml x 5 cm

b. Metode ruang
Menyiapkan 2 cawan NA yang diberi tanda nama ruangan dengan waktu kontak 10
menit dan 20 menit; dan 2 cawan PDA yang diberi tanda nama ruangan dengan
waktu kontak 10 menit dan 20 menit

Secara bersamaan bukalah tutup cawan-cawan tersebut didalam ruangan yang telah
ditetapkan, sehingga agar didalam cawan petri satu persatu setelah 10 dan 20
menit

Inkubasi semua cawan pada suhu 300C selama 1-3 hari

Amati adanya penumbuhan dan dihitung jumlah koloni yang tumbuh. Jika
pertumbuhan koloni menyebar dan sulit untuk dkihitung, nyatakan dengan tanda
sampai +++
c. Sanitasi alat metode bilas (botol)

Siapkan cawan petri steril yang diberi tanda botol dan jumlah contoh

Masukkan 20 ml larutan peengencer ke dalam botol

Bilas seluruh permukaan bagian dalam botol dengan cara memutar botol secara
horizontalsebanyak 10 kali

Inkubasi 2 cawan petri masing masing dengan 1 ml suspense tersebut, kemudian

tuangkan diatasnya PCA cair dan biarkan membeku

Inkubasi pada suhu +300C selama 1-3 hari

Hitung koloni yang tumbuh dan nyatakan jumlah koloni per wadah botol dengan
perhitungan sebagai berikut :
Jumlah koloni/botol = ml X 20
Bila pertumbuhan koloni menyebar nyatakan dengan +++
 BAB IV

HASIL PRAKTIKUM

4.1. Sanitasi Alat

Kelompok Alat / Wadah Jumlah Koloni Mikroba Keterangan
1 Piring tidak dicuci Tidak terhingga () Menyebar (+++)
2 Piring dicuci dengan Tidak terhingga () Menyebar (+++)
sabun
3 Meja tidak Tidak terhingga () Menyebar (+++)
dibersihkan
4 Meja dibersihkan Tidak terhingga () Menyebar (+++)
dengan sabun
1 Botol jar tidak dicuci Tidak terhingga () Menyebar (+++)
2 Botol jar dicuci Tidak terhingga () Menyebar (+++)
3 Botol minuman tidak Tidak terhingga () Menyebar (+++)
dicuci
4 Botol minuman Tidak terhingga () Menyebar (+++)
dicuci

4.2. Sanitasi Ruangan

Kelompok Ruangan Waktu Media Jumlah Keterangan

mikroba
1 Lab analisis 10 menit NA 22 koloni Bentuk koloni
zat gizi bergerombol
PDA 39 koloni Koloni berbentuk
seperti hifa dan
menyebar
2 Lab analisis 20 menit NA 203 koloni Koloni menyebar
zat gizi berbentuk kecil-kecil
PDA 33 koloni PDA berhifa
3 Lab 10 menit NA Tak Menyebar
pengolahan hingga ()
 PDA 22 koloni Menyebar diseluruh
permukaan (sedikit)
4 Lab 20 menit NA 30 koloni Koloni menyebar
pengolahan berbentuk kecil-kecil
PDA 29 koloni Koloni bergerombol
berbentuk seperti hifa