El ncleo celular
Generalidades del ncleo............15
Componentes nucleares..16
Ciclo celular........19
Muerte celular..20
Conclusiones..21
Bibliografa ..22
Anexos
Pawlina W, ROSS Histologa Texto y Atlas. 7ma. edicin. Editorial Wolters Kluwer. Espaa, 2016USER 2
Gartner, Leslie P. Texto Atlas de Histologa. 3ra. Edicin. Editorial Mc Graw Hill. Mxico, 2008.
Introduccin
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1) TECNICAS HISTOLOGICAS
PROCEDIMIENTO
Obtencin de muestra
Existen 2 formas:
-Necropsia: Examen u obtencin de tejido de un organismo muerto.
-Biopsia: Examen u obtencin de tejido de un organismo vivo. La biopsia se
le toma a un paciente en el consultorio o puede ser una ciruga.
Fijacin
Este proceso se refiere al tratamiento del tejido con sustancias qumicas que
tienen los siguientes objetivos:
-Conservar los tejidos de forma que muestren el mayor parecido posible a su
estado in vivo.
-Destruir bacterias y grmenes que pudieran encontrarse en ellos.
-Interrumpir los procesos celulares dinmicos que ocurren a la muerte de la
clula.
El fijador de uso ms comn es la formalina.
Deshidratacin
Debido a que el tejido est constituido por clulas y estas en gran parte estn
constituida por agua, se aplica una serie gradual de soluciones acuosas de
menor a mayor de agente deshidratante.
Aclaramiento
Luego de deshidratar el tejido, la sustancia comnmente utilizada es
el Xileno, de la misma manera se coloca la muestra de tejido en un recipiente
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de Xilol, Se llama aclaramiento ya que el tejido se torna transparente o claro
en el xileno.
Inclusin
Inclusin o impregnacin se realiza a fin de que se puedan obtener cortes
suficientemente finos para ser observados al microscopio con el objetivo de:
-Distinguir entre s las clulas superpuestas en un tejido y
la matriz extracelular.
-Tener un objeto lo suficientemente duro para su manejo y corte.
La inclusin se logra al infiltrar la parafina liquida.
Seccin o corte
El taco ahora se puede cortar en secciones lo suficientemente delgadas
como para permitir el paso de la luz. Para estos cortes se utiliza un aparato
llamado MICROTOMO.
Montaje
Los cortes se colocan sobre portaobjetos a los que se les ha agregado una
pequea cantidad de Albmina, la cual acta como adhesivo.
Extensin
La parafina se elimina en un solvente orgnico, de nuevo se incluyen en Xilol,
y la muestra se rehidrata hacindola pasar por una serie de graduaciones
decrecientes de alcohol etlico hasta llegar a una solucin 100% de agua.
Tincin
Ya rehidratado se tie el tejido. La tincin se puede realizar de dos formas
simple (un solo colorante) o combinaciones (colorantes difsicos, cidos y
bsicos). Los colorantes ms utilizados son la hematoxilina y la eosina.
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HISTOQUIMICA Y CITOQUIMICA
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METACROMASIA
Es el fenmeno por el cual un colorante (por ejemplo Azul de Toluidina o la tionina)
cambia de color tras reaccionar con un componente textural. Esto se debe a que en
tejidos con altas concentraciones de POLIANIONES, la molcula del colorante se
polimeriza entre si y sus propiedades de absorcin son diferentes de las
propiedades de las molculas individuales.
MICROSCOPIA OPTICA
El poder de resolucin del ojo humano, es decir, la distancia a la que deben estar
dos objetos para que se vean por separado, est determinado por el espacio que
hay entre las clulas foto receptoras contiguas de la retina.
fuente luminosa
diafragma de campo
ajuste de la platina
condensador
diafragma del condensador
platina
lente condensador auxiliar
objetivo
tubo
ocular
cmara tubular opcional
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ajuste de foco
MECNICO DEL MICROSCOPIO
La parte mecnica del microscopio tambin se denomina montura y es de forma y
dimensiones muy variables, dependiendo del fabricante y el precio del instrumento.
5.-El Tubo: Soporta la porcin ptica del microscopio. Es un cilindro hueco de cuyo
interior est pintado de negro mate y posee un diafragma para impedir la formacin
de reflejos y facilitar la observacin.
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La iluminacin Khler es una de las claves de la buena microscopa y est
incorporada en el diseo de prcticamente todos los microscopios modernos que
se usan en laboratorios o para la investigacin, se debe:
EnfocaR la muestra
Cerrar el diafragma de campo
Se enfoca el condensador.
Se retira el y se observa la pupila de salida del objetivo.
2) CITOPLASMA CELULAR
ORGANELOS
Los orgnulos ms conocidos fueron descritos mediante el microscopio ptico. La
organizacin estructural del citoplasma en compartimientos separados, que
consisten en orgnulos limitados por membranas, tiene importancia en muchos
aspectos. Las reacciones qumicas estn localizadas all. Si bien en esencia la
membrana celular y las membranas de los distintos orgnulos presentan el mismo
aspecto ultra estructural
ORGANELOS MENBRANOSOS
-Membrana plasmtica (plasmalema)
Una delgada membrana, denominada, limita la clula de su entorno. El plasmalema
es demasiado delgado para poder ser detectado mediante el microscopio ptico. La
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presencia de la membrana celular se demostr tempranamente mediante tcnicas
de micro manipulacin.
La doble capa lipdica es relativamente impermeable a la mayora de las molculas
hidrosolubles y representa la estructura bsica de la membrana. La viscosidad de
la capa depende de la composicin lipdica.
Las protenas integrales de membrana son molculas anfipticas con zonas
hidrfobas no cargadas, que se extienden a travs de toda la doble capa Ijpdica, y
zonas hidrfilas polares con carga.
-APARATO DE GOLGI
El aparato de Golgi se encuentra en todos los tipos celulares, pero no se tie en los
cortes histolgicos comunes. Esto se observa particularmente en las clulas en las
cuales el aparato de Golgi no teido contrasta con un citoplasma circundante
basfilo. A menudo, el aparato de Golgi se ubica cerca del ncleo. Por lo general,
estas pilas contienen 3-10 cisternas, cada una de las cuales suele estar un poco
dilatada en la periferia y adoptar una forma curva.
-LISOSOMAS Y ENDOCITOSIS
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Los lisosomas representan la parte esencial de un sistema digestivo intracelular.
Los Lisosomas son orgnulos limitados por membrana que contienen enzimas
hidrolticas activas a pH cido..
Las enzimas lisosmicas tienen en conjunto la capacidad de degradar casi todos
los tipos de macromolculas biolgicas (protenas, lpidos, carbohidratos, etc.), pero
por lo general la membrana que las rodea impide la dispersin por el citoplasma.
-PEROXISOMAS
Los peroxisomas son orgnulos citoplasmticos redondeados, limitados por
membrana, con un dimetro de 0,5 en promedio. Los peroxisomas contienen
enzimas que intervienen en procesos en los que se forma perxido de hidrgeno,
de all el nombre. Los peroxisomas pueden aislarse por centrifugacin con
gradientes; el anlisis bioqumico demostr que contienen numerosas enzimas,
entre ellas catalasa, urato oxidas a y distintas aminoacidasas.
Tienen varias funciones es, si bien se desconocen muchos detalles al respecto. As
Los, se cree que tienen capacidad para desintoxicar varias sustancias, tambin
intervienen en la degradacin de Lpidos
-PROTEASOMAS
Los proteasomas son grandes complejos con mltiples subunidades, demostrados
en todas las clulas eucariotas estudiadas hasta el momento. Actan como
unidades que degradan protenas (las proteasas son enzimas que degradan
protenas), con la forma de pequeos cilindros de unos 15 nm de largo, sin
membrana circundante.
Los proteasomas tienen la funcin de degradar, tambin se degradan protenas en
la luz del retculo endoplsmico liso y en el sistema lisosmico-endosmico). Ya se
explic en la seccin sobre sntesis proteica que en el citosol se marcan con
ubicuitina las protenas destinadas a ser degradadas a pequeos pptidos en el
hueco central de los proteasomas, debido a la actividad de proteasa dependiente
de ATP.
-MITOCONDRIAS
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Los distintos tipos de trabajo realizados por las clulas vivas requieren energa. El
principal asiento de produccin de energa es un conjunto de pequeos
denominados mitocondrias (gr. mitos, filamento; chondros, grano). Tienen forma de
grano, bastn o filamento, apenas visible con el microscopio.
Las mitocondrias se encuentran en casi todos los tipos celulares y un tipo celular
determinado suele contener una cantidad caracterstica de estos orgnulos,
relacionada con los requerimientos energticos de la clula. Los glbulos rojos
carecen por completo de mitocondrias, debido a que la energa se produce slo por
gluclisis (vase ms adelante).. Por lo tanto, es tpico que en las clulas en las
Cuales hay transporte activo (es decir, que requiere energa) de material a travs
del plasma lema.
ORGNULOS NO MENBRANOSOS
-Laminillas anulares
Estos orgnulos citoplasmticos se componen de una pila de cisternas paralelas en
las cuales, a intervalos regulares, aparecen pequeos orificios redondos o anillos
cerrados por un delgado tabique o diafragma. Las laminillas anulares se observan
con mayor frecuencia en las clulas sexuales, pero tambin se ha demostrado su
presencia en muchos tipos celulares somticos. Son comunes en las clulas que se
dividen con frecuencia, como ciertas clulas embrionarias o tumorales. An se
desconoce la funcin de las laminillas anulares.
-Centrosoma y centriolos
En la parte central de la clula, se encuentra una zona con citoplasma
especializado, el centrosoma o centro celular, que contiene un par de pequeos
grnulos o bastones cortos, los centriolos, de unos 0,15 /lm de dimetro y 0,25-2
/lm de largo. Desempean un papel importante en la formacin de cilios y en la
divisin celular. Por lo general, el centrosoma se encuentra muy cerca del ncleo
celular, en una hendidura de ste, rodeado por el aparato de Golgi en la cara ms
alejada del ncleo. Los centriolos suelen aparecer en grupos de dos, denominados
en conjunto diplosoma.
-Citoesqueleto
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Mediante microscopia ptica, se demostr en muchos tipos celulares la presencia
de estructuras filiformes dentro del citosol aparentemente desestructurado. Estos
orgnulos se denominaron fibrillas para diferenciarlos de las fibras, denominacin
de las estructuras
.Las fibrillas se denominan de acuerdo con el tipo celular en el cual fueron descritas.
Por microscopia electrnica, se demostr que las fibrillas estn compuestas por
haces de estructuras an ms delgadas, denominadas filamentos , que
individualmente son demasiado delgadas para poder ser detectadas mediante el
microscopio ptico.
-Filamentos de actina
Los filamentos de actina del cito esqueleto tienen un dimetro aproximado de 7 nm
y una longitud variable. Se encuentran en casi todas las clulas eucariotas y pueden
detectarse por inmunohistoqumica, mediante la utilizacin de anticuerpos contra la
protena actina. Los filamentos de actina estn constituidos por una protena
globular denominada actina G, que se polimeriza para formar dos cadenas
idnticas, actina. F ("fibra"), que dan origen a una espiral doble, la columna vertebral
del filamento de actina.
-Microtbulos
Los Microtbulos son delgadas estructuras tubulares de dimensiones tan finas que
slo se detectan mediante el microscopio electrnico. Los Microtbulos tambin se
encuentran aislados en todas las clulas eucariotas. Mediante los nuevos mtodos
inmunohistoqumicos que utilizan anticuerpo contra tubulina, es posible demostrar
la presencia de microtbulos con microscopia ptico.La polimerizacin de los
microtbulos tambin requiere la presencia de GTP, que se fija a los hetermeros
de tubulina por el extremo plus del microtbulo para formar el denominado casquete
de GTP, que favorece la polimerizacin, dado que el GTP estimula la tendencia de
los dmeros de albumina a unirse entre s. El GTP se escinde en GDP y fosfato,
pero este proceso es ms lento que la polimerizacin durante el crecimiento del
microtbulo.
-Filamentos intermedios
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Los filamentos intermedios tienen un espesor de unos 10 nm, Y se denominan as
porque el dimetro del fi lamento es intermedio entre el de los filamentos de actina
y de miosina en las clulas musculares, donde se demostraron por primera vez.
Son ms fuertes que los filamentos de actina , pues estn formados por protenas
fibrosas alargadas en lugar de protenas globulares. Representan el componente
ms estable del citoesqueleto.
Los filamentos de queratina slo se encuentran en las clulas epiteliales,
donde la funcin mecnica es muy notable.
Los filamentos de vimentina se encuentran en los fibroblastos y otros tipos
celulares de origen mesenquimtico; al igual que los filamentos de queratina,
tienen la funcin de conferir apoyo mecnico a estas clulas.
Los filamentos de desmina se encuentran en los tres tipos de clulas
musculares (msculos esquelticos, cardaco y liso).
-Inclusiones citoplasmticas
Se entiende por inclusiones a los componentes celulares no indispensables, que
pueden ser sintetizados por la clula o captados del medio. Y que a menudo slo
permanecen en la clula por tiempo limitado. La denominacin se aplica
principalmente a los depende sustancias nutritivas y a ciertos pigmentos.
3) NCLEO CELULAR
El ncleo es la estructura que caracteriza a las clulas eucariotas. Es el
compartimento donde se encuentra el ADN y toda la maquinaria necesaria para
transcribir su informacin a ARN. La forma nuclear es variable y se suele adaptar
a la forma celular, aunque no siempre es as. La localizacin habitual del ncleo
es en el centro de la clula, pero tambin puede situarse en otras posiciones ms
perifricas. As, en las clulas secretoras se puede localizar en la parte basal de
la clula y en las musculares esquelticas se dispone en las proximidades de la
membrana plasmtica. El ncleo consta de dos componentes que se pueden
distinguir morfolgicamente: la envoltura nuclear y el nucleoplasma.
La envoltura nuclear: Separa el nucleoplasma del citoplasma. En ella se
encuentran los poros nucleares que comunican estos dos espacios,
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permitiendo el trasiego de molculas en los dos sentidos pero de una
manera especfica y regulada.
En el nucleoplasma: Se encuentra el ADN y sus protenas asociadas
formando la cromatina, que si est muy compactada se
denomina heterocromatina y si aparece ms laxa se
denomina eucromatina;se observan estructuras densas denominadas
cuerpos nucleares, que son agrupaciones de molculas, cromatina y
protenas que realizan una funcin comn.
COMPONENTES NUCLEARES
- ENVOLTURA NUCLEAR
La envoltura nuclear est formada por una membrana doble, externa e interna,
respectivamente, quedando entre ambas un espacio intermembranoso de
aproximadamente 25-40 nm, formando todos estos elementos juntos las
denominas cisternas perinucleares. La membrana externa se contina con la del
retculo endoplasmtico y posee ribosomas adheridos. Esta continuidad permite
que el espacio intermembranoso y el interior del retculo endoplasmtico se
comuniquen directamente y que la envoltura nuclear funcione tambin como
almacn de calcio. La membrana interna contiene una composicin molecular
diferente y posee protenas transmembrana que interactan con la cromatina y
con la lmina nuclear, otro componente de la envoltura nuclear. Las protenas se
sintetizan en el retculo endoplasmtico y llegan a la membrana interna por
difusin lateral (difusin por la membrana), pero slo aquellas que interaccionan
con las protenas de la lmina nuclear o de la cromatina se mantienen como
componentes propios de la membrana interna.
La lmina nuclear, en las clulas animales, es un entramado proteico que separa
tiene mltiples funciones. Una de las principales es la de mantener la estructura
de la envoltura nuclear, y por tanto la de dar forma, y tamao, al ncleo. La forma
nuclear cambia cuando cambia la expresin de las protenas que forman la
lmina nuclear, lo cual es observable durante el desarrollo embrionario, la
diferenciacin celular o ciertas patologas celulares.
Poros nucleares
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Las cisternas de la envoltura nuclear, compuestas por una membrana interna, una
externa y un espacio entre ambas, dejan unos huecos entre ellas donde se
encuentran los poros nucleares. stos son grandes complejos moleculares visibles
con el microscopio electrnico y denominado en su conjunto complejo del poro.
Son la puerta de comunicacin entre ncleoplasma y citoplasma, y todo el
transporte entre ambos compartimentos se da a travs de los poros nucleares.
Son un elemento clave en la funcin, respuesta a seales externas o diferenciacin
de las clulas. Y esto es as porque condicionan, por ejemplo, la salida del ARNm
al citoplasma, o la entrada al ncleo de los factores de transcripcin que
determinan la expresin gnica.
Los poros nucleares son muy numerosos en las clulas que requieren un alto
trnsito de sustancias entre el ncleo y el citoplasma como, por ejemplo, en las
clulas que se estn diferenciando. Se estima que puede haber unos 11 poros por
m2 de envoltura nuclear, lo que equivale a unos 3000 a 4000 poros por ncleo.
Los poros nucleares contienen un pasaje acuoso interno de unos 80 a 90 nm de
dimetro, pero el espacio til para el trasiego de las molculas que se transportan
es de unos 45 a 50 nm de dimetro cuando est en reposo, y se puede expandir
cuando realizan transporte activo. Normalmente, este canal permite el paso libre
de pequeas molculas (menores de 60 kDa) pero restringe el movimiento de otras
de mayor tamao, con un potencial papel fisiolgico.
3.1.2 CROMATINA
El nucleoplasma, rodeado por la envuelta nuclear, contiene la cromatina, la cual
se puede considerar como el ADN (cido desoxirribonucleico) ms todas las
molculas relacionadas con su organizacin, fundamentalmente histonas. El ADN
est formado por 4 desoxirribonucletidos (abreviado como nucletidos). Cada
nucletido contiene una sucesin de tres componentes: base, pentosa y grupo
.As, una cadena de ADN est formada por una sucesin de nucletidos unidos
entre s por los grupos fosfato. Los nucletidos no slo estn en el ADN. Las
histonas son protenas asociadas al ADN que determinan su organizacin. Hay
dos tipos: las nucleosmicas que son cuatro (H2A, H2B, H3 y H4) y la histona H1.
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Las cuatro histonas nucleosmicas son las responsables de formar junto con el
ADN los denominados nucleosomas, que son la unidad estructura bsica de la
cromatina. Entre ellas se encuentran todas las protenas responsables de la
expresin (transcripcin), sntesis (replicacin) y empaquetado del ADN.
3.1.3 NUCLEOLO
El nuclolo es un compartimento nuclear formado por cromatina y visible al
microscopio ptico. Sus dimensiones varan dependiendo de la actividad de la
clula y puede llegar a ser muy grande, del orden de micrmetros de dimetro.
Normalmente las clulas que estn realizando una gran sntesis proteica poseen
nuclolos grandes. Durante la mitosis desaparece, permitiendo a la cromatina que
lo forma reorganizarse para constituir los cromosomas.En el nuclolo se dan
procesos relacionados con la generacin de los ribosomas: sntesis y maduracin
del ARN ribosmico (ARNr) y ensamblaje de las subunidades ribosmicas. El
ensamblaje de las subunidades ribosmicas es un proceso curioso de trasiego de
molculas entre el citoplasma y el nucleoplasma.
Morfolgicamente el nuclolo contiene distintas regiones: el centro fibrilar, donde
se encuentran los genes para el ARNr, el componente fibrilar denso que rodea al
centro fibrilar, donde se produce la transcripcin activa de los genes ARNr, y el
componente granular donde se ensamblan las subunidades ribosmicas.
Cuando el destino de un gen es producir ARN, como el ARNr, falta la amplificacin
aportada por la traduccin. Una clula eucariota tiene una enorme cantidad de
ribosomas y todos contienen molculas de ARNr. Los ARNr estn codificados por
dos tipos de genes, uno que produce un transcrito grande que luego tienen que
cortarse en otros ms pequeos y otro gen que produce el fragmento denominado
ARNr 5S. Los transcritos primarios grandes de ARNr tienen que cortarse y
procesarse para formar los distintos tipos de ARN que formarn el ribosoma: ARNr
18S, ARNr 28S y ARNr 5.8S. El ARNr 5S, como hemos dicho, proviene de otra
regin nuclear. El procesamiento de este ARNr grande se lleva a cabo tras su
sntesis por otras molculas de ARN denominadas ARN nucleares pequeos.
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3.2 CICLO CELULAR
El ciclo celular se puede considerar como una sucesin de etapas por las que
transcurre la vida de una clula.. Hay dos grandes tipos de clulas en los
organismos pluricelulares: las clulas somticas y las clulas germinales. Las
clulas somticas son las que no producirn gametos, mientras que las clulas
germinales s. Esta distincin es importante porque las clulas germinales dan
lugar a los gametos por un proceso denominado meiosis, mediante el cual se
consiguen cuatro gametos haploides a partir de una clula diploide. Las clulas
somticas que proliferan terminarn su ciclo celular dividindose y convirtindose
en dos clulas hijas con la misma dotacin gnica que su antecesora por un
proceso denominado mitosis.
La muerte de las clulas puede ser por daos no controlados por el organismo,
por ejemplo la muerte del propio organismo, o por un suicidio celular inducido
fisiolgicamente denominado apoptosis.
El ciclo celular de los distintos tipos celulares dentro de un tejido o de un organismo
debe estar fuertemente controlado y coordinado. Durante el desarrollo embrionario
y juvenil de los animales se crece en tamao y muchos tipos celulares contribuyen
a ello. El ciclo celular pasa por una serie de etapas denominadas: G1, S, G2 y M
(las letra G significa intervalo o "gap", la S sntesis y la M mitosis). Esta secuencia
se mantiene en prcticamente todas las clulas que proliferan y slo
ocasionalmente alguna de las fases es omitida. Las fases G1, S y G2 se suelen
agrupar en la denominada interfase.
La fase G1 es la primera por la que pasa una clula. Es la etapa ms larga
y ms variable, y en ella se produce crecimiento celular hasta alcanzar el
tamao ptimo.
En la fase S o de sntesis se duplica el ADN. sta es una accin compleja
debido a la gran longitud de las hebras de ADN que forman un ncleo
eucariota. Adems, la replicacin del ADN debe cumplir dos condiciones:
una sola replicacin y cometer los menos fallos posibles. Cualquier error en
la copia del ADN puede llevar a daos letales para las clulas hijas o incluso
para la totalidad del organismo.
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La fase G2 es otra etapa de crecimiento, ms breve que la G1, en la cual
se acumulan los productos necesarios para la siguiente etapa, la fase M, en
la que se producir la divisin celular
La fase M o mitosis es quizs la ms compleja y la que supone una mayor
reordenacin de los componentes celulares. Hay muchos procesos que se
disparan y avanzan en paralelo. La mitosis se puede dividir a su vez en
varias etapas relacionadas con los diferentes estados por los que va
pasando el ADN. Se denominan profase, metafase, anafase y telofase,.
Durante este proceso ocurren otros procesos en paralelo: rotura de la
envuelta nuclear, formacin del huso mittico, reparto de componentes
citoplasmticos, entre otros. La fase M termina con la citocinesis o
separacin del citoplasma en dos para la creacin de dos nuevas clulas.
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CONCLUSIONES
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BIBLIOGRAFA
. Pawlina W R. Histologia Texto y Atlas. 7th ed. Espaa: Wolters Kluwer; 2016.
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Gartner, Leslie P. Texto Atlas de Histologa. 3ra. Edicin. Editorial Mc Graw Hill. Mxico, 2008.
ANEXOS
Tcnica de inmunocitoqumica
directa. 1) Molcula de
inmunoglobulina. 2) Produccin
de anticuerpos policlonales. La
protena X de un ratn se inyecta
en un animal de otra especie, por
ejemplo, en un conejo. El conejo
elabora Ig frente a la protena X.
3) Marcaje del anticuerpo
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Imagen tomada con un microscopio electrnico
de transmisin. Se observa la envuelta nuclear
con dos constricciones que se corresponden con
dos poros nucleares.
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