PRCTICA

CUANTIFICACIN DE INDOLES PRODUCIDOS IN VITRO

Alumna: Figueroa Rivera Claudia

Introduccin
El uso indiscriminado de productos fertilizantes, ha ocasionado un desequilibrio de la
microbiota nativa que cumple con funciones importantes, provocando bajos
rendimientos y aumento en los costos para el agricultor y el ganadero. Una alternativa
para promover el crecimiento rpido de races y tallos es el uso de inoculantes
microbianos (biofertilizantes), que contribuyen a la recuperacin de las poblaciones
existentes en el suelo y con ello a mejorar la fertilidad de los mismos.
Entre los microorganismos, las bacterias tienen especial importancia en la relacin
suelo-planta y son responsables del incremento o disminucin en el suministro de
nutrientes como tambin en la produccin de factores de crecimiento (fitohormonas); las
bacterias pertenecientes a los gneros: Azotobacter sp, Azospirillum sp, Pseudomonas
sp, Xantomonas sp, Enterobacter sp, Arthrobacter sp, Bacillus subtilis, se destacan por
su potencial como biofertilizantes e inciden grandemente en el rendimiento y en la
calidad de los cultivos.Los estudios realizados con microorganismos de los gneros
Azospirillum sp y Azotobacter sp segregan sustancias promotoras del crecimiento
(auxinas, giberelinas, citoquininas), las cuales benefician a la planta de una forma
multidimensional
Las fitohormonas son sustancias endgenas bioactivas presentes en las plantas, que
controlan diversos procesos del desarrollo vegetal. Las aplicaciones prcticas de estos
compuestos son muy diversas y su utilizacin actual en Agricultura es frecuente y en
continuo aumento. La sntesis microbiolgica de fitohormonas puede constituir una
alternativa viable en el contexto de una Agricultura ecolgica sostenible ya que la
aplicacin de caldos de fermentacin que contengan estos productos reduce el impacto
medioambiental y su obtencin a escala industrial resulta econmicamente ms
atractiva.
La eficacia de estas fitohormonas de origen biolgico se ha comprobado en diversos
estudios en los que se ha demostrado que su aplicacin produce un aumento en los
rendimientos y la calidad de las cosechas
cido indolactico (AIA), es una auxina (hormona vegetal) que acta a nivel de
los pices, en los que hay tejido meristemtico, el cual es indeferenciado,son
naturalmente sintetizadas por la planta por medio de tres rutas diferentes, la ruta de
triptamina (TAM), est ntimamente relacionada con los tropismos de la planta, como
inclinaciones, giros o curvaturas del tallo; adems, estimula el desarrollo del sistema
radical de la planta, interviene en los procesos de divisin celular, estimula el desarrollo
de frutos y nmero de hojas.
Se ha establecido que las rizobacterias promotoras del desarrollo vegetal ( PGPR),
juegan un papel primordial en los cultivos permitiendo disminuir la utilizacin de
fertilizantes qumicos.pueden producir AIA, a partir de triptfano que es exudado por la
raz de las plantas, este acta como un precursor en la sntesis del AIA.
Objetivo
Determinar el ndice de indoles por la tcnica de Salkowski.

Metodologa

2
1

El inoculo de cada cultivo bacteriano Luego todos los cultivos se centrifugaron

(LS7) se coloca en 5ml de caldo a 3000rpm por 5 minutos.
tripticasa soya suplementado con
triptfano. Luego incubar a 30C por 72
horas.
5
4 3

Despus se deposita en un tubo esteril 0,4 ml , que luego se agreg el reactivo de

Slkowski modificado.

7
6

Leer la absorbancia en
Se mezcl y se dej en reposo espectrofotmetro a 530nm
por 30 minutos en oscuridad.
 Resultados

La reaccin es positiva por La reaccin es positiva a la produccin

aparicin de un colorante grosella, de indoles del cultivo LS9 por la aparicin
de la coloracin grosella.

Tabla1. Concentraciones de cido indol-actico

Cultivos Absorbancia en AIA(ug/Ml) Absorbancia

analizados espectrofotmetro corregida
G1(LS9) 0,210 26,9 0,130
G2(LS15) 0,088 -0,2 0,008
G3(LS8) 0,100 2,5 0,020
G4(LS7) 0,138 -11,3 -0,058
G5(LS17) 0,079 -2,2 -0,001
G6(LS4) 0,099 2,2 0,019
G7(LS1) 0,090 0.2 0,010
Tubo blanco 0,080

Obtenida la muestra la absorbancia de las 7 concentraciones de Acido de Indol Actico,

introducir datos ene l programa Microsoft Office Excel 2007 y construir a curva patrn
de calibracin.

Bibliografa

1. Castillo, G; Altuna, B; Michelena, G; Snchez, J; Acosta, M. Cuantificacin del

contenido de cido indolactico (AIA) en un caldo de fermentacin microbiana.
2005: 27: 137-142.
2. Patten, C. y Glick, B. Bacterial biosynthesis of indole-3-acetic acid (review).
Canadian Journal of Microbiology 1996: 42, 207-220.