1.

Instruccin
Las pectinas son polisacridos que se encuentran de manera ubicua en las plantas.
Estn presentes en las paredes celulares ubicadas en la laminilla central y en la pared
celular primaria y secundaria. La estructura qumica de la pectina es heterognea, segn
el origen, la ubicacin en la planta y el mtodo de extraccin. El motivo estructural
principal est formado por residuos de cido urnico unidos mediante enlaces -1-4-
glicosdicos. De acuerdo con las definiciones del Comit Mixto FAO / OMS de Expertos
en Aditivos Alimentarios y la Comisin Europea, la pectina debe contener al menos el
65% del cido galacturnico. Ms all de la caracterstica estructural estndar del
polmero galacturonilo, el homogalacturonano, se han descrito diferentes estructuras
pcticas en la literatura. En rhamnogalacturonan I, los residuos de cido galacturnico
estn parcialmente sustituidos por residuos de ramnosa unidos a-1-2. Adems, se ha
observado que varias cadenas laterales que contienen azcares, como la xilosa, la
arabinosa, la glucosa, la fucosa, la manosa o la galactosa, estn unidas a la estructura
principal del esqueleto. Adems, los restos de cido galacturnico en la cadena principal
tambin pueden esterificarse en el resto de cido carboxlico por grupos metilo, mientras
que en sus posiciones de O2 / O3, los steres tambin pueden estar presentes por unin
con el grupo acetilo o, menos comnmente, con el grupo feruloilo
Las pectinas son ampliamente utilizadas como adyuvantes tecnolgicos en la industria
alimentaria, explotando plenamente su diversidad estructural. Diferentes estructuras
conducen a diferentes propiedades de gelificacin, actividades de emulsin,
estabilidades de emulsin y efectos de liberacin en matrices de alimentos complejos.
La pectina tambin puede usarse no solo para producir gelatinas o rellenos para
panadera, sino tambin para bebidas de leche, soja o trigo y en alimentos y preparados
farmacuticos como ingredientes funcionales para el control de liberacin de oligmeros
que muestran actividades prebiticas ( Babbar, Dejonghe, Gatti, Sforza y Elst, 2015 ).
Debido a la creciente demanda mundial de pectina, la identificacin de diferentes
fuentes es de gran inters ( Babbar et al., 2015; Willats, Knox y Mikkelsen, 2006 ).
Entre las posibles fuentes de polisacridos pcticos, los flujos de residuos de alimentos
son de gran inters. De hecho, la explotacin de los flujos de residuos por parte de la
industria agroalimentaria ha sido un tema cada vez ms importante a lo largo de varios
aos. Grandes volmenes de desechos se han utilizado como alimento para animales,
fertilizantes o para la generacin de bioenerga, pero recientemente la extraccin de
componentes ms valiosos en los residuos es el tema de muchos proyectos de
investigacin ( Pfaltzgraff, de Bruyn, Cooper, Budarin y Clark , 2013 ). Estos compuestos
de alto valor pueden clasificarse como insolubles (fibras), compuestos solubles en agua
o solubles en lpidos ( Schieber, Stintzing y Carle, 2001).) Por lo tanto, los productos
innovadores procedentes de los flujos de residuos pueden incluir fibras dietticas con
diferentes propiedades tecnolgicas y nutricionales, as como aditivos alimentarios (p.
Ej. Bioflavours) y bioadsorbentes (p. Ej., Tratamiento de aguas residuales) ( Laufenberg,
Kunz y Nystroem, 2003 ). En esta lnea de investigacin, se han investigado varios
residuos alimenticios, como la manzana, los ctricos, la remolacha azucarera, el guisante
y la coliflor, para aislar la pectina. ( McKnee y Latner, 2000 ). Sin embargo, una
caracterizacin detallada de la cantidad y la estructura de la pectina en diferentes flujos
de residuos, lo cual es esencial para evaluar su potencial tecnolgica y biofuncional,
sigue siendo en gran parte incompleta.
En el presente documento, se han investigado 26 flujos de residuos de alimentos
seleccionados de acuerdo con su potencial de explotacin (principalmente debido a sus
posibles propiedades nutricionales, cantidades producidas y estacionalidad) en el marco
del proyecto UE NOSHAN (Acuerdo de subvencin de la UE n. 312140) su contenido
de pectina, caracterizando completamente la pectina aislada en trminos de cido
urnico y otra composicin de azcar, metilacin y grado de acetilacin. Incluso si los
datos no pudieran cubrir todas las variaciones posibles de lote por lote y de pas, se
demuestra que muchos flujos de desechos pueden ser una fuente valiosa de pectina.
Las estructuras de pectina tambin presentan una enorme diversidad estructural, lo que
da como resultado un amplio rango de estructuras de pectina, que pueden tener
propiedades fisicoqumicas y biolgicas diferentes que son tiles en una amplia gama
de aplicaciones.
Hasta la fecha, esto representa la caracterizacin de pectina ms completa a partir de
los flujos de residuos de alimentos que se han reportado en la literatura.

2. materiales y mtodos
2.1. Materiales
Se consideraron las siguientes muestras provenientes de plantas de procesamiento
industrial en toda Europa: copos de remolacha azucarera, orujo de manzana, calabaza
sin granos, vaina de guisante, col agridulce, pepino amargo, casco de cebolla, pastel de
manzana, pulpa de espino amarillo, espino amarillo ), pastel de kernel de calabaza,
perejil, lpulo, pastel de colza, sabal (suministrado por IGV GmbH, Alemania, a travs
de la recoleccin en plantas locales), aceite de orujo, cscaras de naranja, orujo de uva
(provisto por Leitat Technological Center, Espaa, a travs de la coleccin en plantas
locales), pieles de tomate (proporcionadas por la Universidad de Parma, Italia, a travs
de la recoleccin en plantas locales), bayas (provistas por el Instituto Flamenco de
Investigacin Tecnolgica, Blgica, a travs de la recoleccin en plantas locales),
manzanas enteras, peras enteras, endibia belga y se va,puerro (provisto por el Instituto
de Agricultura y Pesqueras de Investigacin, Blgica, a travs de la recoleccin en
plantas locales).

2.2. Determinacin de materia seca

Se pesaron aproximadamente 5 g de muestra y se secaron durante 4 h en un horno
precalentado a 103 C. Despus de enfriar durante 30 minutos, se pesaron
nuevamente y este valor se tom como el contenido de materia seca.
2.3. Aislamiento de la pared celular
El aislamiento de la pared celular se realiz adaptando el mtodo por Melton y Smith
(2001) . Veinticinco gramos de muestra se molieron en polvo, se mezclaron con 100 ml
de tampn 80% de fenol -HEPES 0,5 M (p / v) y se homogeneizaron con un Ultraturrax
T-50 bsico (IKA-Werke, Staufen im Breisgau, Alemania, 2 -3 min, 4000 rpm). La mezcla
se separ en una centrfuga, modelo 5804 (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemania)
mediante centrifugacin durante 20 minutos a 3220 g a temperatura ambiente en
botellas de centrfuga de HDPE, y se elimin el sobrenadante. La separacin del
contenido de la matriz celular soluble se realiz usando tampn HEPES 50 mM (pH 6,7).
El sedimento se trat (incubacin 6 y 24 h) con DMSO 90% (v / v) y, adems, se incub
1 h a 40 C con 200 U porcino -amilasa pancretica estabilizado por 20 HEPES
mM de tampn con 20 mM CaCl 2 (pH 6,9), para eliminar el almidn de las muestras.
El sedimento se lav con 20 mM de tampn HEPES con 20 mM CaCl 2 (pH 6,9) y el
sobrenadante eliminado.
2.4 . Extraccin secuencial
El mtodo de aislamiento sigui las instrucciones de Melton y Smith (2001) . Las paredes
celulares de 25 g de tejido vegetal se trataron dos veces (6 y 12 h) con trans-1,2-
diaminociclohexano-N, N, N, N-tetraactico (CDTA) 50 mM en tampn de acetato de
potasio 50 mM (pH 6,5) , para extraer los slidos solubles del agente quelante (CASS).
El sobrenadante se separ en un modelo de centrfuga 5804 (Eppendorf AG, Hamburgo,
Alemania) mediante centrifugacin durante 20 min a 3220 g a temperatura ambiente en
botellas de centrfuga de HDPE y se dializ con tampn de acetato de amonio 0,1 M (pH
6,5, 1 da, 3 cambios, 4 C) seguido de H 2 O (3 das, 3 cambios a 4 DO). La
solucin se liofiliz (LIO 5P, VWR International PBI Milano, Italia) y el residuo se ponder
para determinar el rendimiento de CASS relacionado con el contenido de materia seca
de las corrientes de residuos de alimentos.
El sedimento se trat con 50 mM Na 2 CO 3 /20 mM NaBH 4 dos veces (16 y 2 h) a 4
C para extraer los slidos solubles alcalinas diluidas (DASS). El sobrenadante se
separ en un modelo de centrfuga 5804 (Eppendorf AG, Hamburg, Alemania) mediante
centrifugacin durante 20 min a 3220 g a temperatura ambiente en botellas de centrfuga
de polietileno de alta densidad y se neutraliz con cido actico y se dializ con H 2 O
(3 das, 3 cambios, 4 C). La solucin se liofiliz (LIO 5P, VWR International PBI Milano,
Italia) y el residuo se pes para determinar el rendimiento de DASS relacionado con el
contenido de materia seca de las corrientes de residuos de alimentos.
El rendimiento total de pectina se tom como los pesos combinados del CASS liofilizado
y el DASS relacionados con el contenido de materia seca de las corrientes de residuos
alimentarios.

2.5 . Contenido de cido urnico

La preparacin de la muestra y la medicin siguieron las instrucciones de Melton y Smith
(2001) con cido galacturnico como estndar. Se hidrolizaron 10 mg de muestras de
pectina liofilizada mediante la adicin de 2 ml de cido sulfrico concentrado durante 10
min, bajo agitacin y enfriamiento constantes en un bao de hielo. Luego se agregaron
0,5 ml de agua bidestilada, la mezcla se agit y se diluy adicionalmente con otros 5 ml
de agua bidestilada. Las muestras se separaron en un modelo de centrfuga 5804
(Eppendorf AG, Hamburgo, Alemania) mediante centrifugacin durante 20 minutos a
3220 g a temperatura ambiente en botellas de centrfuga de HDPE y el sobrenadante
se us para el ensayo colorimtrico como sigue. A 400 l de sobrenadante o estndar
(cido galacturnico en agua a diferentes concentraciones que van desde 25 g / 400
l hasta 300 g / 400 l), 40 l de solucin de cido sulfmico 4M / sulfamato de
potasio (pH 1,6) y 2,4 ml de tetraborato de sodio 75 mM / solucin de cido sulfrico.
La mezcla se calent (100 C) durante 20 min y luego se enfri. Para el control de la
muestra, se agregaron 80 l de NaOH al 0,5% para determinar la coloracin del azcar.
A la muestra y al estndar, se aadieron 80 l de 255 M m de hidroxidifenilo en NaOH
al 0,5% y la absorbancia se midi despus de 10 min a 525 nm frente a un blanco de
agua en un espectrofotmetro UV / VIS LAMBDA BIO 20 (Perkin Elmer, Waltham, MA ,
ESTADOS UNIDOS).
2.6 . Grado de metilacin y acetilacin
El mtodo previamente publicado por Mller-Maatsch et al. (2014) fue seguido. Se
combinaron 30 mg de muestras de pectina liofilizadas con 1 ml de NaOH 0,4 M y se
agitaron durante 2 horas a temperatura ambiente en tubos tapados. Posteriormente, el
sobrenadante se separ en un modelo de centrfuga 5804 (Eppendorf AG, Hamburgo,
Alemania) mediante centrifugacin durante 20 minutos a 3220 g a temperatura ambiente
en botellas de centrfuga de HDPE, seguido de la adicin de 100 l de solucin estndar
interna (10 mg de 3- (trimethylsilyl) propionate-d4 (TSP) en 5 ml de D 2 O) utilizado para
cuantificar el metanol y el cido actico. El sobrenadante se filtr usando una jeringa
equipada con 0.4 m filtro de nylon y transferido en tubos de RMN. Los espectros
de 1H RMN se adquirieron en un espectrmetro VARIAN-INOVA a 600 MHz, equipado
con una sonda inversa de resonancia triple (HCN), que funciona a 599.736 MHz para
protn. Los espectros se adquirieron a 298 K, con puntos complejos de 32 K, utilizando
una longitud de pulso de 90 . Se obtuvieron 128 escaneos con un ancho espectral de
7196.8 Hz, un tiempo de adquisicin de 2.53 y un retraso de relajacin (d1) de 5 s. Los
experimentos se llevaron a cabo con supresin del agua mediante presaturacin de
seal de agua selectiva de baja potencia durante 5 s del retardo de relajacin. Los
espectros de RMN fueron procesados por el software MestreC. Los espectros fueron
transformados por Fourier con un tamao FT de 64 K y 0.2 Factor de ensanchamiento
de lnea Hz, escalonado y lnea de base corregido, y referenciado al pico de 3
(trimetilsilil) -propionato-d4 (TSP) (0 ppm). La determinacin cuantitativa de cido
actico y metanol se obtuvo mediante la integracin manual de las seales
correspondientes (1,92 ppm para cido actico, 3,36 para metanol) y la comparacin
con el rea de TSP. Los valores obtenidos por la integracin se convirtieron en valor de
masa (mg) de acuerdo con la frmula informada en Mller-Maatsch et al. (2014) . La
exactitud de los datos cuantitativos fue asegurada por el retraso de la relajacin,
determinado por las mediciones de T1, que se estableci para permitir la relajacin
completa de los ncleos.

2.7 . Azcares neutrales

Las muestras de pectina se hidrolizaron siguiendo el mtodo publicado previamente por
Melton y Smith (2001) . Se hidrolizaron 10 mg de muestra de pectina con 3 ml de cido
trifluoroactico 2 M en nitrgeno durante 60 minutos a 121 C. A la mezcla hidrolizada,
se aadi 1 ml de fenil-- d -glucopiransido (500 ppm) como patrn interno. Las
muestras se aclararon mediante filtracin con jeringa en filtros de nailon (40 m) y el
filtrado se evapor a sequedad con nitrgeno. Con 1800 l de N-N-dimetilformamida y
200 l de N, O-Bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (BSTFA) con trimetilclorosilano
(TMCS), los azcares se sililaron durante 60 minutos a 60C DO. El anlisis de
GC / MS se llev a cabo con un sistema de GC de red de tecnologa Agilent 6890N
equipado con un detector de MS 5973, utilizando una columna capilar HP-5MS de 0,25
mm x 30 m x 0,25 m, volumen de inyeccin de 1 l, temperatura inicial de 60 C
, inyeccin dividida (relacin 20: 1), gas portador de helio, siguiendo esta rampa de
temperatura: 10 C / min hasta 160 C, luego 10 C / min hasta 220 C, luego 20
C / min hasta 270 C .

2.8 . anlisis estadstico

Todas las mediciones se realizaron por duplicado y se calcularon los valores promedio
con las desviaciones estndar correspondientes.
3 . Resultados
El contenido de pectina se determin para las dos fracciones de pectina, la que es
soluble en los agentes quelantes (pectina unida a calcio) y la otra soluble en solucin
alcalina (pectina unida al enlace ster). De acuerdo con el mtodo aplicado aqu, las
soluciones de agente quelante primero extraen polisacridos pcticos solubles ( Melton
y Smith, 2001) produciendo, despus de la liofilizacin, el slido soluble del agente
quelante (CASS, detalles en la seccin experimental). El CDTA realmente solubiliza los
polisacridos pcticos supuestamente rompiendo los puentes inicos entre el calcio y
los residuos galacturnicos no esterificados. Los agentes quelantes mejoran la
capacidad de extraccin de los polisacridos pcticos en condiciones suaves y reducen
la degradacin y la produccin de artefactos. Esta fue la razn principal para elegir este
mtodo, aunque fuera bastante engorroso, exactamente porque se sabe que produce
pectinas con su estructura nativa lo ms intacta posible ( Renard y Thibault, 1993 )
incluso si la coextraccin de protenas (14-44% w / w segn Pustjens, Schols, Kabel, &
Gruppen, 2013 ) u otros polisacridos como hemicelulosas (Mateos-Aparicio, Redondo-
Cuenca, y Villanueva-Surez, 2010 ) pueden conducir a estimaciones aberrantes del
contenido de pectina. Este mtodo tambin podra conducir a la recuperacin
incompleta de la fraccin de pectina unida al ster. Por lo tanto, con el fin de obtener la
pectina de ster de ruedas, una extraccin alcalina con 50 mM de Na 2 CO 3 /20 NaBH
mM 4 fue entonces tambin realizado en el residual de la extraccin con CDTA
produciendo, despus de la liofilizacin, la alcalina diluida slido soluble (DASS, detalles
en la seccin experimental). La fraccin de DASS contiene la anterior pectina unida al
ster, as como trazas de hemicelulosas. NaBH 4 se aadi a las soluciones alcalinas
para reducir el extremo reductor de los polisacridos y, por lo tanto, prevenir la
descamacin de la base de los polisacridos ( Melton y Smith, 2001 ).
El contenido total de pectina, tambin dividido en las fracciones CASS y DASS, se
muestra en la Fig. 1 para los diferentes residuos alimenticios, expresados en mg / g de
muestra (como materia seca), en orden decreciente de contenido. Los niveles ms altos
de CASS se obtuvieron a partir de piel de naranja (126 mg / g), calabaza (85 mg / g) y
perejil (47 mg / g), mientras que los valores ms altos de DASS provinieron de calabaza
(150 mg / g), naranja cscaras (121 mg / g) y races de escarola (119 mg / g). Como se
muestra en la Fig. 1 , la fraccin de pectina DASS fue casi siempre la ms consistente
(el lmite inferior representado por las hojas de puerro, con una relacin CASS / DASS
de 0.21). Sin embargo, en pocas muestras, la fraccin de CASS fue ms abundante
(proporcin de CASS / DASS 1.27 de orujo de oliva, 1.45 de orujo de uva, 3.24 de piel
de tomate).
Aunque los resultados no pueden considerarse representativos de todas las posibles
variaciones presentes en las corrientes de residuos alimentarios en Europa, la
metodologa analtica homognea aplicada mostr el impacto de la tecnologa de
procesamiento sobre el rendimiento y la composicin de la pectina, como lo indican las
diferencias entre el orujo de manzana (CASS 14 mg / g DM, DASS 41 mg / g DM) y
torta de manzana (CASS 13 mg / g; DASS 73 mg / g). Tambin los diferentes tejidos
de las plantas con diferente contenido de pectina afectaron obviamente el rendimiento:
la manzana entera, menos rica en pieles, tena una menor cantidad de pectina por
gramo de materia seca que el orujo de manzana y la tarta de manzanas (CASS 10 mg
/ g DM, DASS 10 mg / g DM). Hojas de endibia (CASS 18 mg / g DM, DASS 85 mg /
g DM) y races de endibia (CASS 29 mg / g DM, DASS 102 mg / g DM) tambin mostr
un contenido de pectina diferente.
El contenido de cido urnico en los polisacridos obtenidos es una buena indicacin
de la calidad de la pectina en el extracto. La cantidad de cidos urnicos en nuestras
muestras se determin espectrofotomtricamente mediante el uso de m-hidroxidifenilo
como agente colorante, que es la forma comn de determinar los cidos urnicos en la
literatura ( Melton y Smith, 2001 ). Los resultados se muestran en la Fig. 2 (contenido
de cido urnico en muestras de CASS) y en la Fig. 3 (contenido de cido urnico en
muestras de DASS), expresado en mg de cido urnico por g de fraccin de pectina
extrada. Las muestras se informan en el mismo orden que en la Fig. 1, de acuerdo con
el contenido decreciente de la pectina total. La cantidad de cidos urnicos en el extracto
puede variar debido a la presencia de azcares neutrales que reemplazan a los cidos
galacturnicos. Adems, la calidad de los datos puede verse afectada por la
sobrestimacin del cido urnico en algunas muestras debido a la interferencia en la
medicin espectrofotomtrica de los coproductos extrados, lo que podra conducir a
una sobreestimacin de 10-20% del contenido real de cido urnico. Teniendo en
cuenta estas limitaciones del mtodo aplicado y los errores esperados, las tendencias
en el contenido de cido galacturnico fueron de todos modos muy claras. Los
resultados ms altos en el contenido de cido urnico, y por lo tanto principalmente
homogalacturonan, se extrajeron con solucin quelante del casco de cebolla (1146 mg
/ g CASS), piel de naranja (1099 mg / g CASS), puerro (890 mg / g CASS), endibia
(993-1033 mg / g CASS), pulpa de espino amarillo (1002 mg / g CASS) y repollo fresco
(934 mg / g CASS). Se encontr que los slidos extrados en soluciones alcalinas
diluidas tienen los mejores rendimientos en cido urnico en el caso del orujo de
manzana (1066 mg / g DASS), lpulo (974 mg / g DASS), pulpa de espino amarillo
(968 mg / g DASS), cebolla ( 958 mg / g de DASS) y vaina de guisante (949 mg / g de
DASS).
Con el fin de determinar el contenido de azcar neutro, los polisacridos pcticos
extrados por los agentes quelantes se hidrolizaron luego con TFA, liberando los
azcares neutros, incluso si no fuera probable una hidrlisis completa de los
polisacridos ( Melton y Smith, 2001 ). Posteriormente se realiz la sililacin de azcares
neutros y otros compuestos, para hacerlos susceptibles de deteccin de GC-MS, como
se inform anteriormente ( Caligiani et al., 2013; Reinders & Thier, 1999 ). Los resultados
de la cantidad total de azcares que se producen y la composicin detallada se informan
en la Tabla 1. Se encontr que la concentracin de azcares neutros de los
polisacridos pcticos era variable entre las diferentes muestras, de acuerdo con las
diferentes corrientes de desechos, la fraccin CASS y DASS, el tratamiento de muestras
con los mismos orgenes durante el procesamiento de alimentos, as como diferentes
partes de una planta . El contenido ms alto de azcar neutro en los extractos de CASS
se encontr en remolacha azucarera (386 mg / g CASS), pod de guisante (310 mg / g
CASS) y orujo de oliva (305 mg / g CASS). Los valores de azcar neutra obtenidos en
DASS alcanzaron 442 mg / g de DASS en repollo fresco, 422 mg / g de DASS en
cscaras de naranja y 373 mg / g de DASS en aceite de orujo. No es sorprendente que
las muestras con la menor cantidad de cido urnico tambin tuvieran la mayor cantidad
de azcares neutrales.

La metilacin y el grado de acetilacin se realizaron despus de la saponificacin

alcalina ( Levigne et al., 2002 ) mediante la determinacin de metanol y cido actico
por RMN despus de realizar la saponificacin directamente en xido de deuterio
alcalino ( Mller-Maatsch et al., 2014 ). El grado de esterificacin solo se muestra para
CASS ( Fig. 4), ya que la extraccin con alcalina diluida utilizada para DASS provoca la
hidrlisis de los grupos ster, lo que hace que el grado de esterificacin sea
completamente poco confiable. Los valores ms altos en grado de metilacin se
obtuvieron en manzana (manzana entera 57%), incluso si despus de la elaboracin
industrial este valor disminuy (pastel de manzana 36-40%), as como en bayas (42%),
espino amarillo (32%) y pera (30%). El grado de acetilacin no se ha informado con
frecuencia en todas las muestras analizadas para polisacridos pcticos, tambin
debido al hecho de que es inferior al grado de metilacin. En realidad, los valores ms
altos se determinaron en hojuelas de remolacha azucarera (18%), pastel de prensa de
colza (13 %) y vaina de guisante (10%).
4 . Discusin
4.1 . General
El objetivo principal de este estudio fue investigar los subproductos de la industria
alimentaria de procesamiento de plantas para el contenido potencial de valiosos
polisacridos pcticos. Los datos aqu presentados, que abarcan 26 residuos
alimentarios diferentes, no pueden considerarse una descripcin completa y exhaustiva
de todas las posibles variaciones de lote por lote en cada flujo de residuos analizados,
ni cubrir todas las posibles variaciones entre diferentes pases. De todos modos, debido
al enfoque metodolgico homogneo aplicado, las muestras analizadas pueden
considerarse un estudio significativo de las corrientes de residuos consideradas, ya que
los lotes recolectados fueron las mezclas promedio generadas en diferentes etapas de
los sitios de fabricacin de la cadena agroalimentaria, que procesan materias primas de
diferentes pases de Europa.

4.2 . piel de naranja

El mayor rendimiento de polisacridos pcticos se obtuvo en piel de naranja con 247
mg / g de muestra en base a materia seca. Esto ya es una fuente comn de pectinas,
que generalmente se extraen con extractantes cidos. Tambin se evaluaron diferentes
tecnologas que alcanzaron 154.7 mg / g (calentamiento tradicional), 181.3 mg / g
(microondas) y 204.4 mg / g (ultra alta presin) de pectina en cscaras de naranja (
Guo et al., 2012 ). La composicin de azcar CASS consisti, adems del cido urnico
(del cual el 25% fue metilado), de arabinosa (136 mg / g CASS) como el azcar neutro
ms abundante. El DASS tena en cambio ms arabinosa (266 mg / g DASS) y galactosa
(105 mg / g DASS), de acuerdo con un informe reciente ( Chau y Huang, 2003 ) El alto
contenido de polisacridos pcticos y su composicin indican que esta corriente de
residuos es una fuente ideal de fibra diettica para factores nutricionales ( Chau y
Huang, 2003 ) o como texturizante o estabilizador debido a su propiedad de gelificacin
y comportamiento reolgico en una variedad de alimentos, productos farmacuticos y
productos cosmticos ( Guo et al., 2012 ).
4.3 . Torta de calabaza y calabacn
En la literatura, los polisacridos de calabaza de la pasta de calabaza y aceite de
estireno extrados a pH 4 con el agente quelante EDTA produjeron 24 mg / g de material
pctico ( Kolov, Hromdkov, & Ebringerov, 2013 ). Se obtuvieron mayores
rendimientos combinando una extraccin de cido (42 mg / g) con un tratamiento de
microondas que determin 113 mg / g de polisacridos pcticos en pulpa de calabaza
de calabaza ( Yoo et al., 2012 ). La suma de los polisacridos pcticos determinados en
este estudio fueron 235 mg / g de muestra de materia seca, que es ms alta de lo que
se inform anteriormente, debido al hecho de que toda la calabaza (pulpa y piel) se us
como material de muestra. Solo se encontraron pequeas cantidades de azcares
neutrales: arabinosa (3.2% de CASS) y xilosa (2.6% de CASS) tuvieron los valores ms
altos. El cido urnico extrado con una solucin de agente quelante (445 mg / g CASS;
536 mg / g DASS) solo se esterific parcialmente (18% de grado de metilacin y 3% de
grado de acetilacin). La composicin se inform en la literatura como de 543 mg / g de
cido urnico, con un grado de metilacin del 28% en los extractos y una gran cantidad
de compuestos fenlicos, protenas y azcares neutros ( Kolov et al., 2013) Debido
a su comportamiento en la formacin de soluciones de viscosa y tensiones superficiales,
similares a las cscaras de ctricos, puede usarse como aditivo alimentario ( Fissore,
Rojas, Gerschenson, & Williams, 2013 ). Adems, se sugiere que los extractos tengan
un efecto positivo sobre las bacterias intestinales ( Jun, Lee, Song y Kim, 2006 ). La
tarta de calabaza, por otro lado, es un subproducto de la industria de procesamiento que
explota el valioso aceite de semilla de calabaza. La extraccin de polisacridos pcticos
condujo a rendimientos muy bajos (29 mg CASS / g; 30 mg DASS / g) y con bajo
contenido de cido urnico lo que indica una gran coextraccin de protenas, por lo
tanto, material pctico muy poco y de baja calidad.
4.4 . Puerro
Los polisacridos pectnicos de puerro se extrajeron principalmente mediante
soluciones alcalinas (25 mg CASS / g; 119 mg DASS / g). Los resultados del cido
urnico y los azcares neutros indican una gran cantidad de polisacridos urnicos
metilados (DE 26%, DA 3%) con menos cadenas laterales que contienen azcares
neutrales, principalmente galactosa. Estos resultados concuerdan con los reportados
anteriormente, los cuales proponen que la presencia de cadenas laterales que contienen
galactosa tiene un efecto positivo en la actividad biolgica de estos polisacridos
pcticos ( Kratchanova, Nikolova, Pavlova, Yanakieva y Kussovski, 2010 ).
4.5 . Hojas y races belgas de escarola
La extraccin con agentes quelantes (races 29 mg / g, hojas 19 mg / g) result en
ambas muestras con rendimientos ms bajos que el alcalino (races 102 mg / g; hojas
85 mg / g), lo que indica un mayor contenido de pectina enlazada. La deteccin de cido
urnico fue muy alta en las hojas, tanto en CASS como en DASS, as como en races
CASS. Los hallazgos aqu indican una gran cantidad de pectina, con un alto grado de
metilacin, en particular en las races (DE Races 23% Hojas 12%; DA Races 3%, Hojas
2%), con arabinosa como el azcar neutral principal. Esta composicin se asemeja
estrictamente a la pectina de remolacha azucarera. En la literatura, la distribucin de
azcares neutros de la pectina de pulpa de endibia extrada utilizando enzimas dio lugar
a resultados diferentes. Aunque tambin se determin que la arabinosa era el principal
azcar neutral, se obtuvieron valores ms altos en los azcares neutros manosa,
galactosa y glucosa. El valor del cido galacturnico fue menor que el obtenido con la
extraccin por productos qumicos ( Zykwinska et al., 2008) Tambin se sugiri
previamente el mayor rendimiento de pectina en races que en hojas ( Villanueva-
Surez, Redondo-Cuenca, Rodrguez-Sevilla, y de las Heras Martnez, 2003 ).
4.6 . Repollo agridulce
El rendimiento de polisacridos pcticos en repollo fresco y fermentado difiri poco
cuando se extrajo con soluciones de agente quelante (Fresh 30 mg CASS / g; Sour 23
mg CASS / g) y ms en soluciones alcalinas (Fresh 93 mg DASS / g; Sour 44 mg DASS
/gramo). Se mencion un efecto similar en la prdida de fibra diettica para el repollo
mientras se herva y almacenaba ( Wennberg, Engqvist, & Nyman, 2003 ). La
composicin de los polisacridos pcticos en col fresca y amarga vara de
homogalacturonanos en CASS (contenido de cido urnico 934 mg / g CASS) a
galacturonanos con una gran cantidad de cadenas laterales que contienen arabinosa y
galactosa en DASS. Los polisacridos pectnicos ricos en galactosa y arabinosa se han
descrito previamente en la col fresca y se estudian por su actividad inmunolgica (
Westereng, Michaelsen, Samuelsen, & Knutsen, 2008 ). La metilacin (Fresh 19%, agrio
12%) y el grado de acetilacin (5% nuevo, agrio 4%) indican que este material pctico
puede tener buenas propiedades gelificantes, que an no se han informado.
4.7 . Cebolla
Las sustancias pcticas extradas de los cascos de cebolla se componan
principalmente de cidos urnicos con un grado de metilacin del 19% y un grado de
acetilacin del 2%, indicativo de poligalacturonatos altamente polimerizados. Estos
hallazgos estn en lnea con lo que se inform anteriormente en la literatura, donde
tambin se observaron efectos inmunoestimulantes muy eficaces, as como
propiedades fsicas ( Patra et al., 2013 ).
4.8 . Perejil
No se ha realizado ninguna investigacin sobre la pectina de perejil, por lo que los
valores obtenidos en este documento de 47 mg / g en CASS y 67 mg / g de DASS son
los primeros reportados. El extracto tena un contenido de cido urnico entre 867 mg
/ g de CASS y 858 mg / g de DASS, lo que indica una alta pureza de pectina. Los
azcares neutros detectados fueron principalmente arabinosa (6.51% CASS, 10.75%
DASS) y galactosa (6.45% CASS; 13.06% DASS). El bajo grado de metilacin y
acetilacin indica propiedades fsicas similares a las de la calabaza o los polisacridos
pectnicos de remolacha azucarera. Debido a la gran cantidad de azcares neutrales,
podra usarse como ingrediente alimenticio funcional.
4.9 . Manzana, tarta de manzana y orujo de manzana
Los subproductos de la industria procesadora de manzanas son, despus de los ctricos,
la segunda fuente de pectina ms utilizada ( mayo de 1990 ). Tres muestras de origen
de manzana fueron investigadas en este trabajo. Las manzanas enteras, descartadas
del consumo fresco, la tarta de manzana y el orujo de manzana de la industria de
procesamiento de frutas. Los rendimientos fueron mayores en los productos
procesados: manzana 10 mg CASS / g, 10 mg DASS / g; Tarta de manzana 13 mg
CASS / g, 74 mg / g DASS; Manzana de manzana 14 mg CASS / g, 42 mg DASS / g. El
contenido de cido urnico de los polisacridos pcticos extrados fue menor en la
extraccin con agente quelante (manzana 488 mg / g CASS, torta de manzana 408 mg
/ g CASS, orujo de manzana 781 mg / g CASS) en las tres muestras que en la extraccin
alcalina diluida (manzana 656 mg / g DASS, tarta de manzana 802 mg / g DASS,
orujo de manzana 1067 mg / g DASS). CASS as como DASS fueron ricos en azcares
neutros arabinosa 6-9%, galactosa 2-4%, ramnosa 1-4%, glucosa 1-7% y xilosa 1-5%.
Las huellas de manosa y fucosa se encontraron como se inform anteriormente ( Renard
y Thibault, 1993 ). La fraccin CASS contena galacturonanos altamente metilados, pero
con un amplio rango (26-60%). Estos datos apoyan la disminucin de la metilacin
durante la produccin de jugo, probablemente debido a la actividad de la pectina-
metilesterasa.
4.10 . Guisante
La extraccin de las vainas de guisantes produjo 10 mg de CASS / gy 73 mg de DASS
/ g, valores que concuerdan con el rendimiento total de polisacridos pcticos en la
literatura ( Mateos-Aparicio, Redondo-Cuenca, y Villanueva-Surez, 2012 ). Las
fracciones de polisacridos pcticos eran ricas en cido urnico (70-95%), altamente
metiladas (30%) y acetiladas (10%) y ricas en arabinosa, xilosa y galactosa como se
mencion previamente ( Wheightman, Renard y Thibault, 1995 ) . Todava no se ha
publicado ningn estudio sobre la aplicacin tecnolgica de la pectina del casco de
guisante, a pesar de la pureza y el alto grado de metilacin.
4.11 . Pepino
Los polisacridos pcticos de pepino (agrio) fueron 27 mg CASS / gy 38 mg DASS / g.
El extracto de CASS contena ms homogalacturonanos indicados por el alto contenido
urnico y pequeas cantidades de azcar neutra, principalmente galactosa y fucosa. En
contraste, el contenido de cido urnico fue menor en DASS con una alta cantidad de
azcar neutra (galactosa, arabinosa y fucosa). Los residuos galacturnicos se metilaron
al 25% y parcialmente acetilados al 4%. Segn lo informado por McFeeters et al., La
fermentacin del pepino condujo a una prdida en la esterificacin del 54% en el pepino
fresco al 16% en el fermentado ( McFeeters y Armstrong, 1984 ).
4.12 . Remolacha azucarera
Los rendimientos de polisacridos pcticos obtenidos de la pulpa de remolacha
azucarera fueron 28 mg CASS / gy 32 mg DASS / g. Estos resultados son ms bajos
de lo que se inform anteriormente, lo que puede explicarse por el diferente mtodo
utilizado para la extraccin ( Oosterveld, Beldman, Schols, & Voragen, 1996 ). La
composicin de las fracciones estuvo de acuerdo con la literatura ( Yapo, Robert,
Etienne, Wathelet, & Paquot, 2007 ): el contenido de cido urnico oscil entre 653 mg
/ g CASS y 689 mg / g DASS y altos valores de arabinosa y pequeas cantidades de
galactosa y ramnosa fueron detectados. Esto indica la ocurrencia de
rhamnogalacturonan, arabinan y homogalacturonan en ambos extractos. Se sabe que
los residuos galacturnicos en la remolacha azucarera estn metilados (29%) y
acetilados (18%) ( Renard y Thibault, 1993 ).
4.13 . Bayas
El subproducto de la produccin de jugo de bayas contena 25 mg de CASS / gy 33 mg
de DASS / g , lo que concuerda con los rendimientos reportados de la torta de grosellas
de arndanos y grosellas negras ( Hilz, Bakx, Schols y Voragen, 2005 ). CASS estuvo
compuesto por 744 mg / g de cido urnico con 42% de grado de metilacin y 1% de
acetilacin, arabinosa, galactosa y ramnosa. En DASS se detectaron menos 596 mg / g
de cido urnico y ms azcares neutrales. Resultados similares fueron medidos por
Hilz et al. (2005) , aunque el grado de metilacin y el grado de acetilacin fue diferente.
Nuevamente, esto podra explicarse por diferentes pretratamientos de muestra.
4.14 . Colza
Los rendimientos de extraccin de los polisacridos pcticos fueron bajos en la torta de
la prensa de colza (25 mg CASS / g; 23 mg DASS / g). De acuerdo con la literatura, el
contenido de cido urnico oscil entre 85 mg / g de CASS y 102 mg / g de DASS con
altos niveles de arabinosa y xilosa ( Eriksson, Anderson y Aman, 1997 ). En CASS, el
25% del cido urnico se metiliz y el 13% se esterific con grupos de cido actico. La
posibilidad de tener protenas coextractadas con la fraccin de pectina se mencion
anteriormente en harina de colza ( Pustjens et al., 2013 ).
4.15 . Pulpa de espino amarillo y ver
Se encontr que la pulpa del espino amarillo tena ms polisacridos pcticos (14 mg
CASS / gy 25 mg DASS / g), en comparacin con las semillas de espino amarillo del
subproducto (6 mg CASS / g, 8 mg DASS / g). No se realiz ningn anlisis adicional
sobre el desperdicio de semillas, dada la muy baja cantidad de pectina. Los extractos
de la pulpa contenan altas cantidades de cido urnico, esterificadas a medias y
parcialmente acetiladas, as como arabinosa y galactosa de acuerdo con la literatura (
Dongowski, 1996 ).
4.16 . Salto
La extraccin de material pectico del lpulo produjo 9 mg de CASS / gy 18 mg de DASS
/ g. Se detectaron varios azcares neutros, con arabinosa, galactosa y xilosa como los
ms altos. Los residuos urnicos se metilaron parcialmente (14%) y se acetilaron (7%).
Hallazgos similares de extractos pcticos de la placa con solucin cida se obtuvieron
previamente ( Oosterveld, Voragen, & Schols, 2002 ).
4.17 . Pomelos de uva
Se extrajeron 11 g de CASS / gy 8 mg de DASS / g de polisacridos pecticos del orujo
de uva. La cantidad mayor se extrajo con agentes quelantes, como ya se inform para
el orujo de uva de diferentes variedades ( Deng, Penner y Zhao, 2011 ). Se detect un
alto contenido de cido urnico en CASS (894 mg / g CASS), bajo metilado (5%) con
pequeas cantidades de arabinosa y galactosa como se inform para la pulpa de uva (
Saulnier y Thibault, 1987 ).
4.18 . Pomace oliva
El orujo de oliva, como el orujo de uva, tiene una pequea cantidad de polisacridos
pcticos que se pueden extraer mediante agentes quelantes (14 mg CASS / g) o
solucin alcalina diluida (11 mg DASS / g). CASS contiene una gran cantidad de cido
urnico parcialmente metilado y acetilado, as como altas cantidades de azcares
neutros, principalmente arabinosa y ramnosa. Resultados similares fueron reportados
por Jimnez et al. en pulpa de olivo sin tratar ( Jimnez et al., 2001 ).
4.19 . Tomate
Los polisacridos pcticos de CASS y DASS contenan cido urnico (784 mg / g CASS
y 330 mg / g DASS) con trazas de azcares neutros, principalmente galactosa. La
composicin del azcar en los polisacridos pcticos es similar a los hallazgos de
Reinders y Thier (1999) . Los residuos galacturnicos se esterificaron a mitad de camino
y se acetilaron parcialmente, aunque se informaron anteriormente una esterificacin
superior hasta el 69% ( Seymour, Colquhoun, Dupont, Parsley, y Selvendran, 1990 ).
Las diferencias pueden explicarse nuevamente a travs de la etapa de maduracin
avanzada y el tratamiento del material de partida.
4.20 . Pera
Los polisacridos de pectina de pera son similares a los polisacridos de pectina de
manzana, aunque el rendimiento de las peras enteras como material de partida es
mucho menor. Se detect una alta cantidad de cido urnico y arabinosa 6% en CASS
y 10% en DASS, as como rastros de xilosa y galactosa. Los residuos galacturnicos se
esterificaron a medias y se acetilaron parcialmente. Renard et al. extrado del cultivar de
pera fresco "Gieser Wildeman", fracciones ricas en cido urnico con un contenido muy
bajo de azcares neutrales, de los cuales la arabinosa tena el contenido ms alto (
Renard, 2005 ). La similitud con la pectina de manzana sugiere las mismas propiedades
fsicas.
4.21 . Sabal
No se encontr literatura sobre el contenido de polisacridos de pseudoalgas. Entonces,
la informacin sobre esta planta es la primera vez que se informa aqu. Se encontr que
la cantidad de pectina era muy baja, aunque el contenido de cido urnico sugera una
pureza justa.
5 . Conclusin
La investigacin realizada aqu tena el propsito de caracterizar la composicin de
pectina de varias corrientes de residuos de la industria de procesamiento de plantas.
Aunque los datos aqu presentados no agotan todas las posibles variaciones
posiblemente presentes en diferentes lotes y pases, esta es la encuesta ms completa
de los materiales pcticos obtenidos de muchos subproductos diversos con una
metodologa homognea. Ha demostrado que las estructuras y rendimientos de pectina
presentan una diversidad muy alta segn el origen diferente. Se obtuvieron nuevos
conocimientos sobre la distribucin de polisacridos pcticos realizando la extraccin
con una solucin de agente quelante (CDTA) y una solucin alcalina diluida, midiendo
tanto el contenido de cido urnico de la fraccin como el contenido de azcares
neutros, as como el grado de metilacin y acetilacin.

En general, la estructura de pectina de estas corrientes de residuos parece estar bien

conservada en comparacin con el material alimenticio original, con la notable excepcin
de la metilacin y el grado de acetilacin, que a menudo se reducen por el
procesamiento y / o por la accin de las enzimas. La informacin sobre los cambios en
la composicin de polisacridos pcticos despus del procesamiento es muy valiosa
para la industria en vista de una posible reutilizacin de estos materiales como fuente
de pectina. Incluso si por lo general se requiere la cantidad mnima de 65% de cidos
urnicos (evitando as que algunos de nuestros materiales se clasifiquen como
verdaderamente pectina), sin embargo, los extractos que no alcancen este lmite
podran tener funcionalidades interesantes y, por lo tanto, podran ser tiles en
diferentes aplicaciones. Los posibles usos de los polisacridos pcticos segn su
composicin,