CULTIVO IN VITRO VEGETAL artificial dentro de la cmara de

crecimiento, donde se fija la temperatura en

I. INTRODUCCION valores que oscilan entre los 21 y 23C,
adems de controlar la cantidad de horas
Un cultivo in vitro es aquel realizado sobre
de luz. Esta prctica nos ayudara a
un medio nutritivo en condiciones estriles.
reconocer los medios de cultivo adecuado
Puede ser de: plantas, semillas, embriones,
para la siembre in vitro.
rganos, explantos, clulas y protoplstos.
II. OBJETIVO
Cultivo in vitro de plantas, significa cultivar
- Utilizar los mtodos bsicos de
plantas dentro de un frasco de vidrio en un
cultivo In vitro.
ambiente artificial. Esta forma de cultivar
las plantas tiene dos caractersticas
III. MATERIALES
fundamentales: la asepsia (ausencia de
- 4 frascos de cristal (cada grupo)
grmenes), y el control de los factores que
- Microondas
afectan el crecimiento. El avance
- Bistur
alcanzado por las ciencias biolgicas ha
- Pinzas metlicas
permitido en los ltimos aos el estudio
- 1 mechero de alcohol (para todo el
detallado de las plantas tanto a nivel celular
grupo)
como molecular, y en condiciones de
- Papel aluminio
laboratorio es posible actualmente
- 1 bagueta
reproducir todos los factores que puedan
- 2 tubos de ensayo
incidir en el crecimiento y desarrollo de las
- Gotero
plantas. Este principio general se aplica
- Algodn
tambin al cultivo in vitro de plantas.
- Alcohol
Haberlandt, un cientfico alemn, postul a
principios del siglo pasado que las plantas - Papel pampea (2 -3 tiras para todo
eran capaces de reproducir su crecimiento el grupo)
a partir de clulas aisladas, originando la - Gasa
hiptesis de la totipotencia celular en - Embudo de vidrio
plantas. Sin embargo, este investigador no - Agua destilada 1 lt
pudo demostrar en forma prctica su - Balanza
hiptesis, debido a que la mayora de los - Platano 20 gr
componentes complejos que integran los - Azcar 1 gr
medios de cultivo actuales todava no - 0,24 gr de Tiamina
haban sido descubiertos. Sera recin en - Agar agar 2 gr
la dcada del 50 cuando se determina la - Mascarilla, guantes.
importancia del balance hormonal en las - Lenteja
plantas, con el descubrimiento de las - Hilo blanco
hormonas vegetales ms usadas en la - Papel toalla (cada grupo)
actualidad.
IV. PROCEDIMIENTO
La micropropagacin o propagacin clonal,
es una de las aplicaciones ms 1. Preparacin de envases
generalizadas del cultivo in vitro, a travs - Se desinfecta
de la micropropagacin, a partir de un
fragmento (explante) de una planta madre, 2. Preparacin de cultivo
se obtiene una descendencia uniforme, con - Agregar en una olla 180 ml de
plantas genticamente idnticas, agua destilada
denominadas clones. El explante ms - Agregar 20 gr de pltano (pur) +
usado para los procesos de propagacin in 1g de azcar + 0,24g tiamina.
vitro son las yemas vegetativas de las - Disolver, aadir 2 gtas de agar
plantas. Los frascos que contienen las agar dejar hervir.
plantas se ubican en estanteras con luz - Medir pH 5,5 6

Marianela Coronado A. Pgina 1

 4. Fases de la
3. Distribuir el medio de cultivo en micropropagacion.
tubos de ensayo y frascos 50 ml, 5. Porque esterilizamos todos
mediante un embudo de vidrio. los materiales? Justifica.
4. Esterilizacin del medio de cultivo 6. Diferenciacin entre cultivo
- Dejar en refrigeracin hasta in vitro e in vivo.
gelificar 7. Ventajas y desventajas del
- Pasar por mechero, frascos y tubos cultivo in vitro.
de ensayo antes y despus de 8. Que te pareci esta
agregar el agar. experiencia, opinin
- Tapar con papel aluminio. individual.

5. Preparacin de semilla Lenteja

- Prepara 2 recipientes con agua
VI. REFERENCIA
destilada a la mitad.
BIBLIOGRAFICA
- Cerrar la apertura del envase con
pape aluminio.
- Introduccin al cultivo de especies
- Esterilizar en microondas u olla a
aromticas nativas de inters
presin 5 10 min.
comercial, Tesis de Maestra, julio
- Dejar enfriar para realizar la
2000. Director Dr: Victoriano
esterilizacin de la semilla.
Valpuesta, Tutor: Dr. Marco Dalla
- Envolver las semillas en una gasa
Rizza.
- Sumergir en una solucin 50% de
leja + gtas de jabn 10 30 min
- Avances de Investigacin en
- Pasar las lentejas por las 2
Frutales de Carozo y Arndanos.
soluciones de agua esteril 5 min en
Serie Actividades de Difusin N
cada envase (para eliminar leja
237, Soria J.; Cabrera D.; Pisano
restante).
J.;Castillo A. 11 de octubre de
- Para coger las lentejas (esterilizar
2000.
pinzas)
- Agregar en el cultivo las semillas
4unds. ya esterilizadas (cerrar de
inmediato)
- Cerrar con papel aluminio.
- Rotular
- Mantener en zona oscura 10 dias
aprox. Hasta que se observe la
germinacin.
- Luego poner los tubos y frascos en
zona iluminada 22 24C.

V. CUESTIONARIO

1. Caractersticas del cultivo in

vitro.
2. Morfognesis?
3. Cules son los factores no
biolgicos que afectaran al
desarrollo del cultivo in
vitro?

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