CENTRO DE CIENCIAS BSICAS

DEPARTAMENTO DE QUMICA
BIOQUIMICA I
PRCTICA #9: PREPARACIN DE UNA CURVA PATRN PARA GLUCOSA

MC MARA CRISTINA SERNA GUTIRREZ

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGA
3ER SEMESTRE

ADOLFO ANDRADE DE LA CRUZ

FRIDA GUERRERO LPEZ

06/11/17
RESULTADOS

Tubo Concentracin (mg/ml) Absorbancia

2 0.0100 0.049
3 0.0200 0.351
4 0.0300 0.303
5 0.0400 0.494
6 (Problema) 0.0194 0.227
Tabla 1. Valores de absorbancia obtenidos.

Grfico 1. Curva de calibracin para la glucosa, indicando la ubicacin interpolada y

la obtenida por medio de la ecuacin de la muestra problema.

A partir de la ecuacin de la recta despejamos la concentracin:

= 12.87() 0.0225
+ 0.0225
=
12.87

Calculamos la concentracin de la muestra problema a partir de la absorbancia registrada:

0.227 + 0.0225
=
12.87

= .
DISCUSIONES
Al incidir un haz de luz de determinada longitud de onda () sobre una muestra, parte de la
luz es absorbida y la otra parte es reflejada o transmitida (Quesada, 2007) como se puede
ver en la imagen 1.1, la absorbancia de las muestras (tabla 1) se
tomaron a una longitud de onda de 540 nm, dando diferentes
absorbancias segn las concentraciones de las muestras ya que
la cantidad de la luz absorbida es directamente proporcional a la
concentracin (glucosa) de la muestra.
Para la calibracin del espectrofotmetro como dice Bolaos et
al (2003) para calibrar el espectrofotmetro, se hace uso de un
blanco, este no contiene la disolucin patrn a medir. Se mide
IMAGEN 1.1 Ejemplo de una luz su absorbancia y se resta del resto de las muestras que se utilizan
que incide sobre una muestra para la construccin de la curva patrn. En el espectrofotmetro
donde:
utilizado para las mediciones se tiene la opcin de calibrar y
Li=luz incidente restar el blanco en automtico.
Lt=luz transmitida
l = ancho de la cubeta Con las absorbancias obtenidas se construy una curva de
absorbancia contra concentracin y como Quesada (2007)
menciona a partir de la curva de calibracin de una sustancia, es posible conocer la
concentracin de una muestra; para ello, se mide su absorbancia a la misma longitud de
onda y, con base en ese valor, se interpola la concentracin. Siguiendo lo mencionado con
anterioridad el resultado de la concentracin de la muestra fue aproximadamente 0.019
mg/ml.
En cambio, Sierra et al (2008) nos da la opcin de hacer la curva por el mtodo de mnimos
cuadrados el cual permite obtener la ecuacin de la mejor lnea recta que pase por los puntos
(cuya pendiente ser ). Siendo as solo se saca la ecuacin de la recta, y se hace un despeje
para conocer la concentracin, dando como resultado una concentracin de 0.0194 mg/ml,
teniendo una pequea diferencia, que resulta de la agudeza visual o escala del grfico
necesaria para dar resultados precisos por el mtodo de interpolacin.

CONCLUSIONES
Al trmino de la prctica se pudo preparar de manera exitosa una curva de calibracin para
la glucosa utilizando un reactivo de cobre en medio bsico y realizando mediciones de
absorbancia mediante espectrofotometra. De esta manera y mediante los mtodos de
interpolacin, y de mnimos cuadrados se pudo calcular la concentracin de glucosa en una
muestra problema.

BIBLIOGRAFA
Bolaos N. Lutz G. & Herrera R. (2003) Qumica de Alimentos: Manual de
laboratorio. Costa Rica: editorial de la universidad de Costa Rica. p.p.47

Quesada S. (2007) Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica. Costa

Rica: EUNED| editorial universidad estatal a distancia. p.p.25 y 27

Sierra, I., Prez, D., & Morante, S. (2008). Prcticas de anlisis instrumental.
Madrid, ES: Dykinson. P.p. 49