Captulo 1 Introduccin .............................................. .................................................. ... ..........

1
Captulo 2: Revisin de la literatura ............................................. ........................................ ..... 4
2.1 Contaminacin ................................................ .................................................. ....... ............ 4
2.1.1 Contaminacin de la fuente puntual ............................................ ....................................... 4
2.1.2 Contaminacin de fuentes no puntuales ............................................ ................................. 5
2.1.3 Alcantarillas pluviales municipales ............................................ ........................................ 5
2.2 Regulaciones ................................................ .................................................. ....................... 6
2.2.1 Sistema Nacional de Eliminacin de Descargas Contaminantes ......................................... 6
2.2.1.1 Fase I ............................................. .................................................. ....... ......................... 7
2.2.1.2 Fase II ............................................. ..................................................................... ........... 7
2.2.2 Ley de Agua Potable Segura ........................................... ................................................... 9
2.3 Impacto del uso de la tierra en la calidad del agua .......................................... ...................... 9
2.3.1 Uso de la tierra urbana ............................................ ......................................................... .. 9
2.3.2 Uso de la tierra agrcola ............................................ ........................................................ 11
2.3.3 Otros factores de uso de la tierra ........................................... ........................................... 12
2.4 Monitoreo ................................................ ............................................................... ............ 12
2.4.1 Parmetros de calidad del agua ............................................ ............................................ 14
2.4.1.1 Materia particulada ............................................. ........................................................... 14
2.4.1.2 Temperatura .............................................. .................................................................... 14
2.4.1.3 pH .............................................. .................................................. ................ ...15
2.4.1.4 Conductividad .............................................. ................................................................. 15
2.4.1.5 Oxgeno disuelto ............................................. ...............................................................17
2.4.1.6 Materia orgnica ............................................. ...............................................................17
2.4.2 Patgenos .............................................. ................................................................. ........ 17
2.4.3 Organismos indicadores ............................................. .................................................... 18
2.4.3.1 Coliformes totales y fecales ........................................... ............................................. 18
2.4.3.2 Streptococcous / Enterococcus fecales ........................................... ............................ 19
2.4.3.3 Relacin FC / FS ........................................... .......................................................... ... 20
2.5 Resumen de la literatura .............................................. ..................................................... 21
Captulo 3: Metodologa .............................................. ................................................. ......... 23
3.1 Diseo experimental ............................................... .......................................................... 23
3.2 Procedimientos experimentales ............................................... ......................................... 2 7
3.2.1 Turbidez .............................................. .................................................. .... .................... 27
3.2.2 Conteos de partculas ............................................. ........................................................ 27
3.2.3 Absorcin ultravioleta ............................................. ...................................................... 28
3.2.4 pH .............................................. .................................................. ................................. 29
3.2.5 Carbono orgnico total y disuelto .......................................... ....................................... 29
3.2.5.1 Estndar de stock primario e intermedio ........................................................... ........ 29
3.2.5.2 Estndares de trabajo ............................................. .................................................... 30
3.2.5.3 Anlisis .............................................. ................................................................ ....... 30
3.2.6 Anlisis microbiolgico ............................................. .................................................. 31
3.2.6.1 Tcnica asptica ............................................. ........................................................... 31
3.2.6.2 Coliformes fecales ............................................. ........................................................ 32
3.2.6.3 Enterococos .............................................. ................................................................. 32
3.2.6.4 Control positivo ............................................. ........................................................... 33
3.3 Reactivos ................................................ ....................................................... ................ 33
3.3.1 Agua de grado reactivo ............................................ ................................................... 33
3.3.2 Agars .............................................. .................................................. .......................... 34
3.3.3 Aguas de dilucin ............................................. .......................................................... 35
3.3.4 Caldo de soja trptico (as) ......................................... .................................................. 35
3.4 Mtodos estadsticos ............................................... ....................................................... 36
3.4.1 Anlisis de correlacin ............................................. .................................................. 36
3.4.2 Anlisis de ANOVA ............................................. ..................................................... 39
Captulo 4: Resultados .............................................. .......................................................... 42
4.1 Descripciones del sitio de muestreo .............................................. ................................ 42
4.1.1 Subcuenca del Arroyo Malagasco ............................................ ................................. 42
4.1.2 Subcuenca Beaman Pond ............................................ ............................................... 45
4.2 Anlisis de datos ............................................... .................................................. ......... 47
4.2.1 Anlisis del sitio - Arroyo Malagasco .......................................... ............................. 48
4.2.1.1 Carbono orgnico ............................................. ....................................................... 48
4.2.1.2 Calidad del agua fsica y qumica .......................................... ............... ......... .............. 50
4.2.1.3 Materia particulada ............................................. .................................... ......... ............ 52
4.2.1.4 Organismos indicadores ............................................. ........................... ......... .............. 52
4.2.2 Anlisis estacional - Arroyo Malagasco .......................................... ......... ......... ............. 53
4.2.2.1 Carbono orgnico ............................................. ................................... ......... ................ 53
4.2.2.2 Calidad del agua fsica y qumica .......................................... ....... ......... ....................... 54
4.2.2.3 Materia particulada ............................................. ........................... ......... ...................... 56
4.2.2.4 Organismos indicadores ............................................. ..................... ......... ..................... 57
4.2.3 Anlisis del sitio - Beaman Pond .......................................... ................. ......... ................. 57
4.2.3.1 Carbono orgnico ............................................. ................................... ......... ................. 57
4.2.3.2 Calidad del agua fsica y qumica .......................................... ........... ......... ......... ......... 58
4.2.3.3 Materia particulada ............................................. .............................. ......... ................... 59
4.2.3.4 Organismos indicadores ............................................. ..................... ......... ..................... 60
4.2.4 Anlisis de temporada - Beaman Pond .......................................... .............. ......... ........... 61
4.2.4.1 Carbono orgnico ............................................. ................................... ......... ................. 61
4.2.4.2 Calidad del agua fsica y qumica .......................................... ......... ......... ...................... 62
4.2.4.3 Materia particulada ............................................. ............................................................. 63
4.2.4.4 Organismo indicador ............................................. .......................................................... 63
4.3 Datos de la Universidad de Massachusetts ............................................. .............................. 64
4.3.1 Datos de UMass - Arroyo Malagasco .......................................... ...................................... 64
4.3.2 Datos de UMass - Beaman Pond .......................................... ..............................................65
4.4 Anlisis estadstico ............................................... ................................... ......... .................. 66
4.4.1 Anlisis de correlacin ............................................. ........................ ......... ...................... 66
4.4.1.1 Anlisis del Arroyo Malagasco ........................................... .............. ......... .................. 67
4.4.1.2 Anlisis de Beaman Pond ........................................... ....................... ......... ...................68
4.4.2.3 Anlisis de ambas subcuencas ........................................... ................ ......... .................. 69
4.4.2 ANOVA Analysis ............................................. .................................. ......... .................... 70
4.4.2.1 Anlisis del sitio para Malagasco Brook........................................... ...70
4.4.2.2 Anlisis del sitio para Beaman Pond .................................................................................71
4.4.2.3 Anlisis estacional ........................................... .................................................................71
4.5 Resumen ........................................... ........................................... ..........................................72
Captulo 5: Conclusiones y recomendaciones........................................... .................................. 75
5.1 Conclusiones........................................... ............................................................................... 75
5.1.1 Arroyo Malagasco ........................................... ...................................................................75
5.1.2 Beaman Pond............................ ............................ ............................ ............................ ... 76
5.1.3 Anlisis estadsticos ........................................... ................................................................76
5.1.4 Uso de la tierra ........................................... ........................................................................77
5.2 Recomendaciones ........................................... .......................................................................77
INDICADORES DE CALIDAD DEL AGUA EN SUBBASES
DE CUENCAS CON USOS MULTIPLES DE TIERRAS

CAPTULO 1
INTRODUCCIN
Las aguas superficiales se utilizan para una serie de fines, incluidas las fuentes de agua
potable, recreacin, transporte y esttica. Con tantos usos, los cuerpos de agua son
susceptibles a los efectos que pueden degradar la calidad del agua. Por lo tanto, los
mecanismos para proteger las aguas superficiales, mantener la calidad actual del agua o
reducir la degradacin de las masas de agua superficial son importantes.
La proteccin de los cuerpos de agua est gobernada por agencias federales y estatales.
La proteccin federal de las masas de agua superficiales est bajo el control de la Agencia
de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos (EPA de EE. UU.). La EPA de EE. UU.
Regula las fuentes puntuales de contaminacin, como las descargas de las plantas de
tratamiento de aguas residuales municipales o las descargas de las fbricas. Los
programas estatales varan para cada estado, pero generalmente requieren algn tipo de
programa de monitoreo de la calidad del agua. El gobierno del estado maneja la
contaminacin de fuentes no puntuales, que es una fuente de contaminacin difcil de
controlar.

La contaminacin de fuentes no puntuales es difcil de controlar debido a la naturaleza

del tipo de descarga. Las fuentes de contaminacin no puntuales no son fuentes
especficas, como las fuentes puntuales, sino que incluyen principalmente la
contaminacin de la escorrenta superficial. Dado que la escorrenta de las superficies es
la fuente ms importante que contribuye a la contaminacin no puntual de la fuente, el
tipo de uso de la tierra que contiene una cuenca hidrogrfica influye significativamente
en el tipo de contaminacin en la escorrenta. Por ejemplo, un uso de suelo agrcola puede
contribuir con altas concentraciones de fertilizantes y pesticidas a un cuerpo de agua
superficial, mientras que las reas urbanas pueden contribuir con contaminantes como
grasa, aceite y basura.
Con el fin de ayudar a controlar el impacto de los usos de la tierra en las masas de agua
superficiales, los programas de monitoreo se utilizan para determinar la calidad del agua
y las posibles fuentes de contaminacin. Se pueden medir varios parmetros de calidad
del agua. Las mediciones fsicas incluyen, temperatura y slidos suspendidos. Las
mediciones qumicas incluyen pH, fsforo, nitrgeno y demanda biolgica de oxgeno
(DBO). Por ltimo, las mediciones biolgicas incluyen organismos indicadores
microbiolgicos, mediciones de plantas y animales y clasificacin de plantas y animales.

No solo existen numerosos parmetros que se pueden medir, tambin hay varios factores
que afectan la confiabilidad y el resultado de estas mediciones. La calidad del agua puede
variar con la temporada y puede verse significativamente afectada por los eventos de
precipitacin. Por lo tanto, los administradores de la cuenca hidrogrfica deben disear
planes integrales de muestreo a lo largo de todo el ao. Por lo tanto, es importante
determinar los indicadores de calidad del agua adecuados para medir en funcin del
tiempo, la necesidad y el costo.
El objetivo de esta tesis fue evaluar la utilidad de varios parmetros de calidad del agua
y el efecto del uso del suelo sobre la calidad del agua. Las subcuencas estn ubicadas en
el centro de Massachusetts y forman parte de la cuenca hidrogrfica que desemboca en el
embalse de Wachusett, que se utiliza como fuente de agua potable para Boston,
Massachusetts y numerosas comunidades aledaas. La cuenca es administrada por el
Departamento de Conservacin y Recreacin (DCR). Se tomaron muestras de varios
lugares durante cuatro temporadas y se analizaron para determinar la calidad del agua.
Esto se logr al examinar la calidad del agua en dos subcuencas de cuencas hidrogrficas
con diferentes usos de la tierra. Los datos recopilados se analizaron para determinar las
fuentes de contaminantes dentro de cada subcuenca. Los anlisis estadsticos se utilizaron
para evaluar las correlaciones entre los parmetros de calidad del agua y las diferencias
de calidad del agua entre los sitios de muestreo y entre las estaciones. Esta investigacin
se centr en los parmetros de calidad del agua ya que estas mediciones son tomadas
rutinariamente por el DCR, pero no evalu los flujos ni el efecto de los flujos en la calidad
del agua. Finalmente, se proporcionan recomendaciones para seleccionar qu parmetros
de calidad del agua medir en un plan de muestreo de cuencas.

El prximo captulo describe la literatura actual sobre programas federales y estatales

para monitoreo y regulacin, parmetros de calidad del agua y los efectos de los usos de
la tierra en la calidad del agua superficial. El Captulo 3 analiza los mtodos utilizados
para recopilar y analizar la calidad del agua, as como los anlisis estadsticos realizados
sobre los datos. Finalmente, los resultados de este estudio se presentan junto con las
recomendaciones sobre la utilidad de los indicadores de calidad del agua en el monitoreo
de las aguas superficiales.
 CAPITULO 2
REVISIN DE LITERATURA
Muchos constituyentes son examinados al determinar la calidad de las aguas
superficiales. Los componentes incluyen caractersticas fsicas, qumicas y
microbiolgicas del agua. Este captulo examina los antecedentes de los contaminantes
del agua, las regulaciones sobre las aguas superficiales y los factores que afectan la
calidad del agua superficial. Una discusin sobre el monitoreo y la relacin de las
caractersticas del agua concluye este captulo.

2.1 Contaminacin
La contaminacin puede poner en riesgo las aguas superficiales de nuestra nacin. La
contaminacin es un desecho que se origina de descargas residenciales, industriales,
municipales y agrcolas al agua (EPA de EE. UU., 2004d). La contaminacin del agua
superficial incluye contaminantes microbianos, inorgnicos, orgnicos y radioactivos
(EPA de EE. UU., 2004c). Los contaminantes microbianos son virus, bacterias y
protozoos que se encuentran en las aguas superficiales. En lugar de medir los patgenos
individuales, organismos indicadores como E. coli y coliformes fecales se utilizan para
indicar la presencia o ausencia de patgenos. Los contaminantes inorgnicos comunes
que se encuentran en las aguas de origen son el nitrito y el arsnico, que provienen de
fuentes naturales. Adems de los contaminantes inorgnicos de origen natural, una
cantidad de contaminantes inorgnicos provienen de fuentes antropognicas tales como
las descargas de desechos industriales y domsticos. Los contaminantes qumicos
orgnicos son qumicos sintticos o voltiles como el aceite y la grasa. Estos son a
menudo el resultado de fugas de automviles o talleres de reparacin de automviles. Los
pesticidas y los herbicidas tambin son un tipo de contaminante qumico orgnico
tpicamente transportado a las aguas superficiales por la escorrenta de las reas agrcolas.
El uso domstico de pesticidas y herbicidas comerciales es otra fuente de estos
contaminantes. Los contaminantes radiactivos son naturales y tambin se producen
durante los procesos de petrleo y gas.
2.1.1 Contaminacin de fuentes puntuales
Los contaminantes que se originan en una fuente establecida se consideran contaminacin
de fuentes puntuales. La contaminacin de la fuente puntual, segn la definicin de la
EPA de EE. UU., Es "cualquier medio discernible, confinado y discreto, como una
tubera, zanja, canal, tnel, conducto, fisura discreta o contenedor ... desde el cual se
descargan o pueden descargarse los contaminantes" ( US EPA, 2004b). Las instalaciones
de aguas residuales y las fbricas industriales que descargan los desechos directamente
en las aguas superficiales son una forma de contaminacin de fuentes puntuales. Como la
contaminacin de fuentes puntuales es una forma conocida de contaminacin, la descarga
puede regularse como se discuti en la Seccin 2.2.1.

2.1.2 Contaminacin de fuente no puntual

Una segunda forma de contaminacin de las aguas superficiales es a travs de descargas
de fuentes no puntuales. La contaminacin de fuentes no puntuales proviene de muchas
fuentes difusas, donde los contaminantes en las superficies terrestres son transportados
por las aguas pluviales o la escorrenta de deshielo hacia los cuerpos de agua. Ejemplos
de contaminacin de fuentes no puntuales incluyen la escorrenta agrcola y la escorrenta
de reas altamente urbanizadas donde la mayora de las superficies estn pavimentadas.
Estas fuentes de contaminacin no estn reguladas y se consideran la principal causa de
problemas de calidad del agua informada por los funcionarios del estado (EPA de EE.
UU., 2004d).

Los efectos de los contaminantes de fuentes no puntuales incluyen el exceso de

acumulacin de sedimentos en cuerpos de agua, altos niveles de nutrientes y
contaminacin bacteriana. El transporte de sedimentos en cuerpos de agua se ve muy
afectado por los sitios de construccin con poca o ninguna medida de control de la
erosin. Los altos niveles de nutrientes son producidos por la escorrenta que transporta
pesticidas, estircol y otros desechos que contienen nutrientes hacia los cuerpos de agua.
Los nutrientes afectan la calidad del agua al proporcionar un exceso de nitrgeno o
fsforo, lo que lleva a un crecimiento extremo de las plantas y las algas. La contaminacin
bacteriana puede ser consecuencia de la vida silvestre, las heces domsticas o del ganado
que contaminan el agua, o de sistemas spticos sobrecargados o deteriorados.

2.1.3 Alcantarillas municipales

Muchas ciudades tienen alcantarillas pluviales municipales separadas donde la
escorrenta de las tormentas se dirige a una tubera separada especficamente para aguas
pluviales, que es diferente de la infraestructura de alcantarillado sanitario. Esta estructura
de alcantarillas pluviales es tpica en las ciudades y pueblos recientemente desarrollados,
donde era ms fcil y menos costoso construir sistemas separados de lo que sera la
reconversin de la infraestructura existente. Varios contaminantes pueden ser dirigidos
desde sistemas separados de aguas pluviales a aguas superficiales. Estos incluyen
pesticidas, sedimentos, grasa y aceite, fertilizantes y escombros.

La otra forma de infraestructura de aguas pluviales son los sistemas de alcantarillado

combinados. Los sistemas combinados de alcantarillado y aguas pluviales generalmente
se encuentran en las ciudades ms antiguas, donde las aguas pluviales se dirigen a la
infraestructura del alcantarillado sanitario para ser tratadas en las instalaciones de aguas
residuales.
Aproximadamente 772 comunidades an tienen sistemas combinados de alcantarillado
(EPA de EE. UU., 2002a). Los problemas con los sistemas combinados de alcantarillado
se encuentran durante las tormentas con flujos altos. El agua de lluvia se mezcla con el
alcantarillado sanitario, aumentando el flujo. Si el flujo es lo suficientemente alto, una
parte del flujo se desviar a travs de un tubo de salida, que dirige el exceso de flujos al
agua receptora. Esto disminuye el flujo a la planta de tratamiento municipal, por lo que
puede funcionar correctamente, pero tambin contamina el agua superficial con algunas
aguas residuales.

2.2 Regulaciones
Histricamente, las aguas superficiales de alta calidad se han utilizado para fuentes de
agua potable y se han deseado para aguas recreativas. Hace tan solo 25 aos, solo un
tercio de las aguas de la nacin eran seguras para uso recreativo (EPA de EE. UU., 2004b).
Los otros dos tercios de las aguas de la nacin se contaminaron de varias fuentes, incluida
la contaminacin por escorrenta (EPA de EE. UU., 2004b). En 1972, se promulg la Ley
Federal de Control de la Contaminacin del Agua (ahora conocida como la Ley de Agua
Limpia) para informar al Congreso y al pblico sobre las condiciones del agua en el pas
e implementar un curso de accin.

2.2.1 Sistema Nacional de Eliminacin de Descargas

Contaminantes
De acuerdo con el Ttulo IV de la Ley de Agua Limpia, se cre un sistema para permitir
descargas de aguas residuales llamado Sistema Nacional de Eliminacin de Descargas
Contaminantes (NPDES). Este sistema requera que todas las instalaciones que
descargaban contaminantes desde fuentes puntuales obtuvieran un permiso que regulara
los requisitos tecnolgicos y los lmites cuantitativos del agua descargada. Desde su
origen, este sistema de permisos ha reducido significativamente la cantidad de
contaminacin de fuentes puntuales que ingresan a las aguas superficiales, evitando que
miles de millones de libras de contaminacin ingresen a las aguas superficiales cada ao
(EE. UU. EPA, 2004b, 1998). En la actualidad, dos tercios de las aguas superficiales de
la nacin son ahora seguras para la pesca y la natacin (EPA de EE. UU., 2004d).

2.2.1.1 Fase I
La regla final para NPDES Fase I se public en noviembre de 1990, regulando las
descargas de fuentes puntuales. Los dos principales grupos de descargas fueron
instalaciones industriales y alcantarillas pluviales municipales separadas, abreviadas por
la EPA de los EE. UU. Como MS4. Las alcantarillas municipales separadas se definen en
40 CFR 122.26 (b) (8) como "un medio de transporte o sistema de transporte ... propiedad
u operado por un estado, ciudad, pueblo, distrito, condado, distrito, asociacin u otro
organismo pblico. ... diseado o utilizado para recoger o transportar aguas pluviales ...
que no es una alcantarilla combinada (y) no forma parte de una obra de tratamiento de
propiedad pblica (POTW) "(US EPA, 2000b). La Fase I requiri instalaciones
industriales y MS4 dentro de un lugar o condado incorporado con poblaciones de ms de
100,000 personas para obtener un permiso para el alta. Aproximadamente 900 MS4 estn
regulados en la Fase I (US EPA, 2000b).

Los trabajos de tratamiento de propiedad pblica estn regulados por NPDES a travs de
estndares de tratamiento secundario. Los requisitos basados en la tecnologa para el
tratamiento secundario del POTW requieren que la calidad del efluente cumpla con los
requisitos de demanda biolgica de oxgeno (DBO5) y de slidos suspendidos (TSS) de
cinco das. Estos lmites son 30 mg / L de DBO5 y 30 mg / L de TSS en un perodo
promedio de 30 das, y 45 mg / L para cada uno cuando se promedian durante 7 das.

Cuando las regulaciones basadas en la tecnologa no son suficientes para proteger las
cualidades del agua, se pueden usar estndares basados en la calidad del agua. Con base
en la seccin 303 (d) de la Ley de Agua Limpia, el estado puede clasificar la prioridad de
las aguas superficiales y desarrollar una carga diaria mxima total (TMDL) para las aguas
superficiales de mayor rango. Un TMDL es la cantidad de un contaminante de fuentes
puntuales, no puntuales y naturales permitidas en aguas superficiales que mantendrn los
estndares de calidad del agua de las aguas superficiales, incluido un factor de seguridad
(US EPA, 2004b).

2.2.1.2 Fase II
La Fase II del NPDES se promulg en 2000, requiriendo pequeas MS4 reguladas para
obtener permisos de descarga. Las pequeas MS4 reguladas incluyen las MS4 no
reguladas en la Fase I, que cumplen con una de las tres designaciones: designacin
nacional automtica, designacin potencial por la autoridad de permisos de NPDES por
evaluacin o conexin fsica (EPA de EE. UU., 2000b). Las pequeas MS4 automticas
nacionales designadas incluyen todos los operadores de MS4 ubicados dentro de los
lmites definidos por la Oficina del Censo como "reas urbanizadas". Las reas
urbanizadas incluyen uno o ms lugares y el rea adyacente densamente asentada que
colectivamente tiene una poblacin residencial de 50,000 habitantes. una densidad de
poblacin general de al menos 1,000 personas por milla cuadrada (US EPA, 2000b). La
autoridad de permisos del NPDES tambin puede determinar si las MS4 pequeas
ubicadas fuera de un rea urbanizada que atiende a una poblacin de al menos 10,000
deben incluirse en las reglamentaciones de la Fase II. La tercera designacin es por
conexin fsica de un pequeo MS4 que contribuye sustancialmente a la carga
contaminante de un NPDES MS4 regulado.

Hay seis medidas que la Fase II requiri para integrarse en el programa de gestin para
todos los MS4. Dos mediciones requeridas involucraron la inclusin del pblico, en las
formas de educacin y participacin de alcance. Una tercera medida es detectar, mapear
y prohibir las descargas ilcitas dentro de la infraestructura de aguas pluviales. Las
descargas ilcitas son cualquier descarga que no est compuesta de agua de lluvia, con la
excepcin de las fuentes permitidas y las actividades de extincin de incendios.
Durante los proyectos de construccin, la Fase II requiere medidas para controlar la
escorrenta de sitios alterados mayores o iguales a un acre. Los planes del sitio son
revisados para medidas apropiadas de control de erosin y sedimentos. Otras medidas
incluyen el manejo post-construccin de aguas pluviales para nuevos desarrollos y
redesarrollos utilizando las mejores prcticas de gestin estructural (BMP). Las BMP
estructurales son estructuras fsicas que aceptan el flujo de aguas pluviales y pueden
contener o eliminar los sedimentos del flujo, reduciendo finalmente los contaminantes en
la escorrenta. La medida final requerida en virtud de las reglamentaciones de la Fase II
es el desarrollo de una operacin de prevencin de la contaminacin / buen
mantenimiento para las operaciones municipales, principalmente a travs de la
capacitacin de los empleados (US EPA, 2000a).

2.2.2 Ley de agua potable segura

El Congreso aprob la Ley de Agua Potable Segura en 1974 para proteger la salud pblica
al proteger el suministro de agua potable de la nacin. En virtud de las Enmiendas de
1996, se exigi a los estados que implementaran los Programas de evaluacin de las
fuentes de agua (SWAP). Estos programas determinaran las amenazas existentes y
posibles a la calidad del agua de los suministros de agua potable. Las acciones requeridas
de estos programas fueron evaluar una cuenca delineada utilizando un modelo de
contaminantes existentes. Con base en el modelo, la susceptibilidad del suministro de
agua se determin y se present al pblico.

2.3 Impacto del uso de la tierra en la calidad del agua

La contaminacin proveniente de fuentes no puntuales puede variar significativamente
debido a los tipos de usos de la tierra dentro de una cuenca. Se han realizado varios
estudios para determinar la relacin entre los usos del suelo y diversos parmetros de la
calidad del agua. Estos estudios se discuten en las siguientes secciones.

2.3.1 Uso de la tierra urbana

Los usos del suelo urbano se definen dentro de esta tesis como reas de superficies
impermeables aumentadas. Sin embargo, los usos del suelo urbano no se limitan solo a
los problemas que presentan las superficies impermeables. Otros usos de la tierra
clasificados bajo usos urbanos pueden incluir reas residenciales, industriales y
comerciales, as como carreteras y carreteras. La tendencia natural de la tierra a filtrar el
agua se reduce cuando las tierras naturales se convierten en superficies impermeables,
como carreteras, entradas de automviles, estacionamientos y techos (Mallin et al., 2001).
Bannerman et al. (1993) estudiaron reas crticas de fuentes urbanas, que se definieron
como reas que producan grandes cargas de contaminantes. La carga se evalu mediante
muestreo de emisarios de aguas pluviales que fueron representativos de la escorrenta de
los usos del suelo urbano. Las muestras se analizaron para 16 componentes que incluyen
fsforo total y disuelto, slidos totales y suspendidos, cadmio total, recuperable, cromo,
cobre, plomo y zinc, dureza y bacterias coliformes fecales. La media geomtrica se
analiz para comparar los datos con las cargas fuera del rea de muestra. Las ubicaciones
observadas consistieron en un rea residencial con 66.7% de superficies permeables, un
rea comercial sin superficies permeables, y un rea industrial con 38.4% de superficies
permeables. La escorrenta de las calles tuvo las mayores concentraciones medias en 10
de los 16 contaminantes estudiados en esta prueba. Las concentraciones totales
recuperables de zinc fueron las ms altas en la escorrenta obtenida de los techos
industriales, y el fsforo se encontr en las concentraciones ms altas de los cspedes.
Los cspedes aportaron cantidades significativas de carga de fsforo, 2 a 18 veces ms
que otras fuentes de escorrenta residenciales (Bannerman et al., 1993).
Basnyat et al. (1999) estudiaron reas con diferentes usos urbanos que contribuyeron con
la contaminacin de fuente no puntual a Weeks Bay, que finalmente se conecta con el
Golfo de Mxico. La calidad del agua dentro de la cuenca hidrogrfica se vio afectada
negativamente debido a las actividades de uso del suelo urbano. Los usos del suelo
residencial observados en este estudio produjeron la mayor cantidad de nitrato en la
escorrenta (Basnyat et al., 1999).

Los tejados de las zonas urbanas fueron una fuente importante de contaminacin por Van
Meter y Mahler (2003). Los investigadores estudiaron las cargas contaminantes de metal
galvanizado y tejas asflticas. Estos dos tipos de tejados generalmente se encuentran
dentro de los usos de suelo urbano. Veintids contaminantes fueron medidos, incluyendo,
zinc, plomo, pireno y criseno. Se descubri que los tejados contribuyen
significativamente a la carga de zinc y plomo. El veinte por ciento y el 18% de la carga
total de la cuenca de zinc y plomo, respectivamente, provino de los tejados. Las
concentraciones de zinc estuvieron en el rango de 141 - 6200 mg / kg y el plomo vari de
36 - 390 mg / kg para las 22 fechas de muestreo (Van Meter y Mahler, 2003).

Estudios adicionales han demostrado aumentos en la carga bacteriana en reas urbanas.

Un estudio de Kelsey et al. (2004) sugirieron que la proximidad a las fosas spticas era
un importante predictor de conteos de coliformes fecales. Sin embargo, la contaminacin
de gatos y perros domsticos era ms probable la fuente de la contaminacin,
contribuyendo con una carga de 1.36 1014 FCU / da donde la contribucin humana fue
solo de 0.0048 1014 FCU / da (Kelsey et al., 2004). Mallin et al. (2000) establecieron
que la abundancia de coliformes fecales estaba correlacionada con la cobertura de
superficie impermeable a las cuencas. Un estudio realizado por Gannon y Busse (1989)
encontr que el escurrimiento urbano de aguas pluviales afect significativamente los
niveles de organismos indicadores bacterianos. Se encontr que las muestras tomadas de
desages pluviales en Ann Arbor, Michigan, tenan niveles elevados de E. coli y
enterococos. Los niveles de coliformes fecales fueron los ms altos aguas abajo de cuatro
tuberas de descarga colectivas de drenaje de tormenta a 41,000 / 100 ml (73% - 99%
mayor que las concentraciones en las tuberas individuales ro arriba). Se encontr que
los niveles de enterococos eran los ms altos en el drenaje de Traver Creek a 80,000 / 100
ml (58% - 99% mayor) (Gannon y Busse, 1989). Los estndares de la EPA de EE. UU.
En el momento de este estudio se establecieron en 126/100 ml para E. coli y 33/100 ml
para enterococos.

2.3.2 Uso de la tierra agrcola

Se ha encontrado que la tierra agrcola tiene efectos significativos y duraderos en la
calidad del agua. Los usos de la tierra agrcola incluyen la tierra utilizada para el
crecimiento de cultivos, huertos, pastos y csped, as como el manejo del ganado.

Un estudio realizado por Basnyat et al. (1999) mostraron que los usos de la tierra agrcola
podran tener un impacto significativo en las aguas superficiales, particularmente de
fuentes no puntuales de contaminacin. Los sedimentos, los desechos animales, los
nutrientes de las plantas y los pesticidas pueden afectar negativamente la calidad del agua.
Se encontr que la proximidad de las tierras agrcolas a las aguas superficiales afecta la
degradacin de la calidad del agua (Basnyat et al., 1999). Se observ que una disminucin
en el uso de la tierra agrcola producira una disminucin en la carga de nitrgeno.
Buck et al. (2003) estudiaron reas en Nueva Zelanda, que se utilizaron principalmente
como tierras agrcolas para el cultivo de ovejas y ciervos. Se descubri que el nitrgeno
y el nitrato totales tienen una significacin estadstica del 99% para las dos reas de
estudio, as como tambin la turbidez y el fsforo total. Se observaron altos niveles de
indicadores bacterianos durante las altas estaciones de inundacin en julio, alcanzando
concentraciones de 88,000 ufc / 100 ml, 2000 veces ms altas que el muestreo de mayo
(Buck et al., 2003).

Grandes cantidades de fertilizantes y estircol se ponen en tierras agrcolas para aumentar

los nutrientes para el crecimiento de los cultivos. Se observaron niveles elevados de
nitrgeno en el ro Sumas, ubicado en el estado de Washington y Columbia Britnica, lo
que dio como resultado valores excedentes promedio de 120 kg / ha ao. Niveles de 20
a 70 por ciento mayores que el nivel de tolerancia (100 kg N / ha) fueron observados por
Berka et al. (2000) La tierra agrcola tambin tiene la capacidad de contribuir con los
sedimentos a travs de la escorrenta, que es la segunda contribucin ms alta de nitrato
en el agua (Basnyat et al., 1999).

En un estudio posterior realizado por Mallin et al. (2001), los conteos de coliformes
fecales en arroyos fueron significativamente ms altos en las reas rurales donde se
ubicaba la produccin animal en comparacin con las reas pantanosas con produccin
animal. Mallin et al. (2001) concluyeron que los patgenos microbianos transmitidos por
el agua podran reducirse mediante la reduccin de superficies impermeables. Esto fue
confirmado por Tufford y Marshall (2002), quienes demostraron que la abundancia de
coliformes fecales estaba correlacionada con grandes reas de superficies impermeables.

2.3.3 Otros factores de uso de la tierra

Buck et al. (2003) mostraron que la influencia del uso del suelo en la calidad del agua
dependa de la escala. Las conclusiones de este estudio mostraron que el uso local de la
tierra era un factor significativo para arroyos ms pequeos donde el uso de la tierra ro
arriba era un factor significativo para arroyos de mayor tamao. El uso de la tierra no solo
puede afectar la calidad del agua, sino que la distancia del uso de la tierra desde la fuente
de agua puede afectar la calidad. Esto se demostr a partir del 95% de las correlaciones
estadsticamente significativas del uso del suelo y los niveles de fsforo en los sedimentos
a 4000 metros de la fuente (Houlahan y Findlay, 2004).

Adems del uso de la tierra, las diferencias estacionales tambin afectan la calidad del
agua receptora (Berka et al., 2000). En este estudio, el aumento de la actividad (26% de
aumento del uso de la tierra agrcola) se correlacion con un aumento en la contaminacin
del agua. En conjunto, se encontr una gran cantidad de nitratos en el afluente durante el
invierno (57% - 75% ms que en las temporadas de verano). El amonaco, el fosfato y los
coliformes se elevaron durante los inviernos hmedos (Berka et al., 2000).

2.4 Monitoreo
Debido a los efectos de la contaminacin en las aguas superficiales, se han creado
reglamentos para garantizar el control de la calidad del agua superficial. El monitoreo se
realiza para caracterizar las corrientes de agua a lo largo del tiempo, proporcionar
soluciones para la prevencin de la contaminacin, mantener la integridad de las aguas
naturales y responder a los problemas de emergencia (EPA, 2004d). Tan recientemente
como en la dcada de 1980, el monitoreo se bas en el cumplimiento de ciertos estndares
u objetivos establecidos para la calidad del agua en cuerpos de agua individuales (Waite,
1984, Canter, 1985, Biswas, 1997, EPA, 2002b). Bajo nuevas enmiendas a la legislacin
existente, como la Ley de Agua Limpia y la Ley de Agua Potable Segura, los programas
de monitoreo del agua estn evolucionando para cumplir con los requisitos nacionales de
monitoreo. Estos nuevos mtodos de monitoreo de la calidad del agua tienen en cuenta
cuencas hidrogrficas completas o subcuencas e incluyen un mayor nmero de
indicadores de calidad.

Bajo la Ley de Agua Limpia, las subvenciones para programas de control de la

contaminacin solo se otorgan a los estados que monitorean la calidad de las aguas
navegables y brindan informes anuales bajo la Seccin 305 de CWA (CWA, Seccin 106
(e) (1)). Con el fin de ayudar a completar el monitoreo y la presentacin de informes
requeridos, la EPA de EE. UU. Public un documento con las directrices para cumplir
con esta legislacin (US EPA, 2003a). Este documento, Elementos de un Programa estatal
de monitoreo y evaluacin del agua, reconoce las diferencias en el monitoreo de la calidad
del agua entre los estados y busca la conformidad en la implementacin y presentacin
de informes para 2013. Se publican informes nacionales bienales de los resultados del
monitoreo de la calidad del agua. de informar al Congreso de las condiciones. Estos
informes 305 (b) tambin se actualizan anualmente por cada estado, el Distrito de
Colombia y los territorios.

Para desarrollar un programa de monitoreo, los estados deben observar la calidad general
de todos los cuerpos de agua y cmo han cambiado con el tiempo. La determinacin de
reas problemticas y reas que necesitan proteccin permite establecer un marco de
objetivos. Se eligen varios sitios de muestreo para su posterior anlisis en ubicaciones
prioritarias dentro de los cuerpos de agua. Estos sitios se eligen como ubicacin
representativa para observar las caractersticas de cada cuerpo de agua. Los indicadores
biolgicos, qumicos y fsicos se miden incluyendo pH, temperatura, oxgeno disuelto
(OD), slidos en suspensin, patgenos y varios otros indicadores dependiendo del uso
del cuerpo de agua. Los usos se dividen en cuatro categoras: vida acutica y vida
silvestre, recreacin, agua potable y consumo de pescado / marisco. Junto con estos
indicadores bsicos, se pueden usar indicadores complementarios, como toxicidad de los
sedimentos, productos qumicos peligrosos y plaguicidas hidroflicos, cuando hay un
contaminante especfico presente y es deseable controlarlo ms a fondo (EPA de EE. UU.,
2003a).

Despus de que se desarrolla un plan de monitoreo basado en un ncleo de indicadores,

los datos se pueden almacenar en base a un sistema de datos provisto por la EPA de los
EE. UU. Llamado STORET (US EPA, 2003a). Esta informacin luego se analiza e
informa al Congreso como se describi anteriormente.

2.4.1 Parmetros de calidad del agua

Se analizan varios parmetros para determinar la calidad del agua de las fuentes de agua
pblicas. Esta seccin describe los parmetros analizados y su significado. Estos
parmetros incluyen componentes fsicos, qumicos y microbiolgicos que se analizaron
en las muestras de agua para esta tesis.
2.4.1.1 Materia particulada
La turbidez es una medida agregada de la claridad del agua basada en la cantidad de
partculas dentro de la muestra. La composicin de los materiales que contribuyen a la
turbidez se suspende y la materia coloidal incluye, arcilla, limo, materia orgnica
finamente dividida, plancton y otros organismos microscpicos (APHA et al., 1998). Los
slidos tambin se pueden analizar contando la concentracin de partculas en una
muestra de agua. Este mtodo cuantifica la cantidad de partculas dentro de ciertos rangos
de tamao.

La materia particulada que se encuentra en el agua puede afectar la esttica del agua al
disminuir la claridad y tambin al contribuir a los sabores y olores. El agua turbia puede
afectar los procesos de tratamiento del agua, incluida la desinfeccin y la coagulacin, as
como tambin agregar costos al tratamiento debido a la demanda adicional de eliminacin
de partculas. Adems, los slidos pueden ser dainos para las especies acuticas, ya que
las aguas turbias inhiben los procesos respiratorios y reducen la visibilidad (Vigil, 2003).

2.4.1.2 Temperatura
Los cambios en la temperatura afectan en gran medida las caractersticas qumicas del
agua. El aumento general de las temperaturas en las masas de agua puede provocar un
aumento de las velocidades de reaccin qumica y biolgica, la solubilidad mineral y el
crecimiento de organismos acuticos. Las temperaturas ms altas tambin disminuyen la
solubilidad del gas y las tasas de respiracin (Tchobanoglous, 1985). Las aguas ms
clidas tienen una menor solubilidad de oxgeno disuelto. Los bajos niveles de DO afectan
negativamente a las plantas y especies acuticas dentro del agua y cambian el carcter de
un cuerpo de agua (Wilber, 1969, APHA et al., 1998, Kailasam y Sivakami, 2004).

Las instalaciones industriales y de produccin de energa pueden causar aumentos en las

temperaturas del agua superficial. Estas instalaciones usan grandes volmenes de agua
para procesos de enfriamiento y luego descargan el agua calentada a las aguas
superficiales. La escorrenta en reas urbanas tambin se puede calentar con asfalto
caliente y pavimento, aumentando la temperatura (WOW, 2004). En las reas ribereas,
los cuerpos de agua pueden protegerse de los cambios de temperatura causados por la
sombra debido a la vida de las plantas en los bordes de la masa de agua. Otras causas de
los cambios de temperatura se deben a variaciones estacionales y cambios de temperatura
diarios. Las variaciones estacionales son procesos ms lentos, especialmente en cuerpos
de agua ms grandes donde el agua ms profunda experimenta un pequeo cambio en la
temperatura debido al aislamiento del suelo (Spellman y Drinan, 2000). Este resultado
tambin indica que la luz del sol y el viento pueden afectar la velocidad del cambio de
temperatura.

2.4.1.3 pH
Las caractersticas cidas o bsicas de un cuerpo de agua se describen por pH (APHA,
1998). El pH se mide en una escala de 1.0 - 14.0 sin unidad, donde las soluciones ms
bsicas tienen un pH ms alto y las soluciones ms cidas tienen un pH ms bajo. La
escala de pH mide la concentracin logartmica de los iones de hidrgeno (H +) e
hidrxido (OH-) como se muestra en la ecuacin 2.1 (EPA de EE. UU., 2003b).

pH = -log [H +] (Ecuacin 2.1)

Varios factores pueden verse afectados por el pH del agua, incluida la disponibilidad
biolgica y la solubilidad de los elementos en el agua (WOW, 2001). Se considera que el
crecimiento y la reproduccin de especies acuticas de agua dulce son ideales dentro de
un rango de pH de 6.5 a 8.5; sin embargo, tambin pueden prosperar ligeramente fuera
de este rango (Wilber, 1969). La capacidad del agua para resistir cambios en el pH se
basa en la capacidad de amortiguacin del cuerpo de agua.

2.4.1.4 Conductividad
La conductividad describe la capacidad de una solucin acuosa para transportar una
corriente elctrica (APHA et al., 1998). La cantidad de iones o sales totales disueltas en
el agua es un indicador de conductividad, lo que significa que la conductividad aumenta
a medida que aumenta la concentracin de iones (Tchobanoglous, 1985). La
conductividad se informa tpicamente en microsiemens por centmetro (S / cm). Las
soluciones con compuestos principalmente inorgnicos tienden a ser mejores
conductores, mientras que las soluciones con compuestos orgnicos no conducen bien las
corrientes (APHA et al., 1998). El tipo de roca y suelo dentro de la cuenca afecta la
conductividad. El tamao de la cuenca tambin es un factor, ya que el tiempo de contacto
con las rocas y los suelos aumenta a medida que aumenta el tamao de la cuenca.

2.4.1.5 Oxgeno disuelto

El oxgeno disuelto (DO) es una medida de la cantidad de gas oxgeno disuelto en agua y
disponible para el uso de plantas y especies acuticas. El gas de oxgeno se mezcla de
forma natural con el agua a travs de la interaccin superficial. Las aguas de movimiento
rpido generalmente tienen un OD ms alto debido a la mezcla con el aire cuando el agua
golpea escombros como rocas y troncos (Vigil, 2003). El oxgeno disuelto puede agotarse
por la demanda de descomposicin orgnica y el uso de la respiracin de plantas y
animales.

Las poblaciones acuticas expuestas a bajas concentraciones de oxgeno disuelto pueden

ser ms susceptibles a los efectos adversos de otros factores estresantes como la
enfermedad o los efectos de sustancias txicas. Las diferentes variedades de peces
necesitan diferentes cantidades de DO para prosperar. Segn los criterios de calidad del
agua de la EPA de EE. UU., El mnimo de un da para las especies de agua fra es de 5.0
mg / L en las primeras etapas de desarrollo y 4.0 mg / L para las otras etapas. Para las
especies de agua templada, se necesitan 5,0 mg / L y 3,0 mg / L en etapas tempranas y
otras etapas, respectivamente (US EPA, 1986).

2.4.1.6 Materia orgnica

La materia orgnica puede provenir de fuentes naturales y antropognicas. Los
compuestos orgnicos se definen por la presencia de carbono. Tambin pueden incluir
elementos como hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, fsforo y azufre. Las contribuciones
orgnicas naturales a las aguas incluyen vegetacin en descomposicin y
microorganismos (Tchobanoglous, 1985). Hay ms de 100.000 tipos de productos
orgnicos sintticos que pueden contribuir a la carga orgnica en el agua. Estos incluyen
pinturas, herbicidas, fertilizantes sintticos, tintes y combustibles (Spellman y Drinan,
2000). Los efectos de la materia orgnica en una fuente de agua son los olores, colores,
sabores, agotamiento del oxgeno y la formacin de compuestos halogenados con la
adicin de cloro para la desinfeccin (Tchobanoglous, 1985).

El carbono orgnico total (TOC) es un anlisis de la concentracin de materia orgnica.

La materia orgnica se puede encontrar tanto en forma de partculas como en formas
disueltas. La medicin de TOC se usa como un sustituto del anlisis tradicional de
demanda biolgica de oxgeno (DBO) de cinco das. Se ha observado una correlacin
entre TOC y la absorbancia de la luz ultravioleta a una longitud de onda de 254 nm
(MacCraith et al., 1993; Sung, 2003; Westphal et al., 2004). Con base en la fuerte
correlacin entre las dos mediciones, se ha sugerido UV254 como una forma econmica
y fcil de determinar el contenido orgnico dentro de una muestra de agua (MacCraith et
al., 1993; Westphal et al., 2004).

2.4.2 Patgenos
La calidad microbiolgica del agua puede evaluarse por la ausencia de patgenos en la
muestra de agua. Los principales tipos de microorganismos que se encuentran en el agua
son bacterias, protozoos, virus y helmintos. No todas las bacterias son patgenas; muchas
formas de bacterias son tiles, como las bacterias en el intestino humano. Los ejemplos
de bacterias que se sabe causan enfermedades son Salmonella typhi y Escherichia coli
patgena, que causan fiebre tifoidea y gastroenteritis, respectivamente. Los protozoos son
organismos unicelulares, que tienen una estrategia de alimentacin similar a la de los
humanos (Spellman y Drinan, 2000). Los protozoos patgenos transmitidos por el agua
ms comnmente conocidos son Giardia lamblia y Cryptosporidium. Giardia lamblia
puede causar giardiasis, que causa sntomas de nuseas, anorexia y diarrea severa. La
criptosporidiosis es una enfermedad causada por la ingestin del patgeno
Cryptosporidium. Los sntomas incluyen dolor de cabeza, calambres abdominales,
nuseas y vmitos. Ambas enfermedades pueden ser autolimitantes en individuos con
sistemas inmunolgicos sanos. Sin embargo, la criptosporidiosis puede ser fatal para las
personas con sistemas inmunitarios dbiles o comprometidos. Los virus son la forma de
vida infecciosa ms pequea conocida. Los virus necesitan un host para reproducirse; sin
embargo, solo se necesita un virus para infectar al husped. Aproximadamente 100 virus
se encuentran en las heces humanas (Spellman y Drinan, 2000). Los virus transmitidos
por el agua incluyen la hepatitis infecciosa, el virus de la polio y el agente de Norwalk.
Por ltimo, los helmintos son gusanos intestinales como Ascaris lumbricoides (gusanos
del estmago) y Necator americanus (anquilostoma).

La enumeracin de patgenos individuales que se encuentran dentro de una fuente de

agua no es un mtodo ideal de deteccin. La determinacin de cada bacteria individual,
protozoos, virus y helmintos no es prctica debido a la dificultad, el tiempo y los gastos
para realizar las enumeraciones (Mardon y Stretch, 2004). Muchas agencias de manejo
de cuencas y servicios de agua no cuentan con la instrumentacin o el personal necesarios.
Como resultado de la complejidad de cuantificar los patgenos individuales, los
organismos indicadores se miden de forma rutinaria para evaluar la seguridad del agua.

2.4.3 Organismos indicadores

La alternativa para clasificar cada patgeno individual en una muestra de agua es
enumerar organismos indicadores. Un organismo indicador es un organismo que se mide
ms fcilmente que los patgenos e indica la presencia potencial de un patgeno. Los
organismos indicadores ideales tienen ciertas caractersticas que los hacen deseables de
usar. El organismo indicador debe estar presente cuando el patgeno est presente y
ausente cuando el patgeno est ausente (Noble et al., 2003). El indicador debera ser ms
fcil de enumerar que los agentes patgenos individuales, as como ms seguro de
manejar. Por ltimo, el indicador debe estar presente en grandes cantidades en materia
fecal por lo que es fcil de detectar.

2.4.3.1 Coliformes totales y fecales

Los recuentos de coliformes fecales y coliformes totales son los organismos indicadores
ms comnmente utilizados. Los coliformes son parte de la familia Enterobacteriaceae
(Noble et al., 2003; Mallin, 2000; APHA et al., 1998). Los coliformes fecales son un
subconjunto de coliformes totales, que pueden crecer a una temperatura elevada de 44.5
C (AWWA, 1999). El crecimiento de coliformes fecales es una indicacin de que los
patgenos que se encuentran en los intestinos de los mamferos de sangre caliente pueden
estar presentes. Los coliformes totales incluyen todos los coliformes y se usan porque la
ausencia de todos los coliformes indica una ausencia de coliformes fecales. Los
coliformes totales pueden originarse en los intestinos de los mamferos de sangre caliente,
as como del medio ambiente.

Los coliformes totales y fecales se miden comnmente de dos maneras: la tcnica de

fermentacin multitubo (MTF) y la tcnica de filtracin por membrana (MF) (APHA et
al., 1998). El mtodo de fermentacin de tubos mltiples depende de la dilucin hasta el
punto de extincin. La presencia de coliformes se determina por la produccin de gas
durante la fermentacin de lactosa. Se inocula una serie de tubos de ensayo con una
muestra de agua a diferentes diluciones, y los tubos de ensayo positivos y negativos
resultantes se correlacionan con el nmero ms probable (NMP) de organismos presentes
mediante anlisis estadsticos. La filtracin de membrana es el proceso de filtrar
volmenes de agua de muestra a travs de una membrana con un tamao de poro lo
suficientemente pequeo como para atrapar bacterias. La membrana se incuba en medios
nutritivos para crecer colonias coliformes. Despus de la incubacin, las colonias se
cuentan e informan en colonias por 100 ml.

La enumeracin de coliformes fecales y totales para las instalaciones de tratamiento de

agua debe tener menos del cinco por ciento de las muestras positivas en un mes. Para las
instalaciones que recolectan menos de 40 muestras al mes, no ms de una muestra puede
ser positiva para coliformes totales (EPA de EE. UU., 2004a).

El uso de coliformes como organismo indicador ha sido cuestionado ya en 1922 (AWWA

et al., 1999). Los patgenos se aislaron cuando hubo bajas concentraciones de coliformes
fecales (Waite 1984). Esto indica que los conteos de coliformes fecales pueden no ser un
indicador preciso. Otros estudios han demostrado que los patgenos, como los virus y los
quistes de protozoos, son ms resistentes a la desinfeccin que los coliformes (AWWA,
1999). Algunos estudios han demostrado una mejor correlacin entre los patgenos y
otros indicadores. Por ejemplo, se ha demostrado que E. coli es un mejor indicador de la
enfermedad de los baistas en aguas recreativas (Noble, 2003).

2.4.3.2 Estreptococo fecal / Enterococcus

Un indicador que puede ser ms especfico que los coliformes es el estreptococo fecal,
que incluye los enterococos. Enterococcus faecalis se ha encontrado en humanos, perros
y pollos, y puede o no estar limitado a otros animales de sangre caliente (Wheeler et al.,
2002). Los enterococos se miden en un mtodo similar a los coliformes mediante
filtracin por membrana. Un volumen de agua de muestra se filtra a travs de una
membrana que retendr las bacterias. La membrana luego se incuba en un agar que
permitir el desarrollo de colonias de enterococos mientras se inhiben otros
microorganismos. La membrana se transfiere a otro agar que confirma la presencia de las
colonias. Los resultados se presentan como colonias por 100 mL.

Las limitaciones de la EPA de los EE. UU. En cuanto al enterococo administrado para
aguas recreativas son de 61 ufc / 100 ml para los lmites de asesoramiento de muestras
individuales. La media geomtrica de cinco das no debe exceder 33 cfu / 100 ml
(Kinzelman et al., 2003).

Se ha encontrado que el enterococo es un mejor indicador de la contaminacin patognica

en ambientes marinos, especialmente cuando los indicadores se encuentran a
concentraciones relativamente bajas (Mardon y Strecth, 2004). Por ejemplo, en las playas
contaminadas de Amrica del Sur, nunca se excedi el lmite de E. coli de 126 ufc / 100
ml. Sin embargo, los 33 ufc / 100 ml de enterococo se excedieron entre el 3% y el 10%
del tiempo. En las playas ms contaminadas, solo hubo ligeras diferencias en la deteccin
de los dos indicadores por encima de los lmites reglamentarios. Estudios en los Estados
Unidos y el Reino Unido han determinado altas correlaciones entre la presencia de
enterococos y sntomas gastrointestinales en aguas marinas y correlaciones levemente
menores entre los dos en aguas dulces (Nuzzi y Burhans, 1997).

Por el contrario, los estudios tambin han demostrado que E. coli y enterococos no tienen
comparacin estadstica (Kinzelman et al., 2003). Kinzelman et al. Descubrieron que,
segn las pautas de evento nico de EPA de EE. UU., el umbral se excedi 20 y 46 veces
para los enterococos y E. coli, respectivamente. Los resultados para la media geomtrica
de 5 das mostraron que los niveles se superaran 33 y 26 veces para los enterococos y E.
coli, respectivamente.

2.4.3.3 Relacin FC / FS
Algunos estudios han demostrado que la relacin de coliformes fecales a estreptococos
fecales (FC / FS) puede significar con mayor precisin la contaminacin humana que las
mediciones individuales. La concentracin de coliformes fecales y estreptococos fecales
es diferente en humanos y animales (Tchobanoglous, 1985). Las proporciones
determinadas por Mara (1976) muestran que los humanos tenan una proporcin de 4.4,
y los pollos, las vacas, los patos, los cerdos, las ovejas y los pavos tenan proporciones
que variaban de 0.4 - 0.1. Por lo tanto, una proporcin FC / FS mayor a 4 est asociada
con desechos humanos, mientras que las relaciones menores a 0.7 son indicativas de
fuentes animales (Brion y Lingireddy, 1998; Gannon y Busse, 1989; Daby et al., 2002).
Este mtodo es problemtico porque las fuentes de contaminacin son inciertas para
proporciones entre 0.7 y 4 (Tchobanoglous, 1985). Los dos indicadores microbianos
tienen tasas de supervivencia diferentes, lo que aumenta la incertidumbre del mtodo
(Brion y Lingireddy, 1998). Los estudios han demostrado que la relacin FC / FS puede
aumentar durante un perodo de un da (con una significacin estadstica de 0,01) a partir
de la rpida desaparicin en estreptococos fecales sobre coliformes fecales (Gannon y
Busse, 1989).
Para determinar la relacin FC / FS de una muestra, el anlisis debe realizarse a un pH
entre 4 y 9 para eliminar los efectos adversos del pH sobre los microorganismos. El
anlisis no es tan confiable si la muestra no es fresca o si la muestra tiene concentraciones
indicadoras inferiores a 100 ufc / 100 ml (Brion y Lingireddy, 1998). Un estudio realizado
por Brion y Lingireddy, (1998) examin la correlacin entre la relacin FC / FS y el
origen de la fuente de contaminacin de un rea urbana o un rea agrcola. Las relaciones
promedio FC / FS fueron indicativas de contaminacin animal; sin embargo, la presencia
de contaminacin humana no puede excluirse sin un anlisis especializado adicional. Los
investigadores concluyeron que los datos eran muy variables y no adecuados para
diferenciar entre reas urbanas o afectadas por la agricultura.

2.5 Resumen de literatura

Desde la dcada de 1970, la US EPA se ha preocupado por las cuencas hidrogrficas de
la nacin. Esto se evidencia en la Ley de Agua Limpia, que requiere medios de accin
reguladores y no regulatorios para la contaminacin puntual y no puntual de las aguas
superficiales. Ms recientemente, las enmiendas a la Ley de Agua Potable Segura
requieren el monitoreo de la calidad de las aguas de la nacin y el monitoreo de las fuentes
de contaminantes de los usos de la tierra adyacentes. Dentro de una cuenca, los usos de
la tierra incluyen usos urbanos, agrcolas, residenciales y otros usos de la tierra. Estos
diferentes usos de la tierra tienen un impacto en la calidad del agua de la escorrenta del
pavimento y en los suelos tratados que contribuyen a aumentar los constituyentes
contaminantes. Las agencias de cuencas hidrogrficas monitorean la calidad del agua y
los impactos de los usos de la tierra en la calidad del agua midiendo varios componentes
fsicos, qumicos y microbiolgicos. En este proyecto, varios de estos parmetros de
calidad del agua se midieron y los resultados se analizaron estadsticamente para
determinar las correlaciones entre el uso de la tierra, los cambios estacionales y la calidad
del agua. Adems, se evalu el uso de enterococos para determinar la fuente de
contaminacin fecal. El siguiente captulo describe los mtodos utilizados para cumplir
este propsito.
 Captulo 4
Resultados
Se realiz un anlisis de todos los datos recopilados durante un perodo de 12 meses para
extraer conclusiones sobre la calidad del agua fsica, qumica y microbiolgica en dos
subcuencas de la cuenca del embalse de Wachusett en Massachusetts. Este captulo
primero describe las ubicaciones del sitio donde se recolectaron muestras de agua. Luego,
los datos de la calidad del agua se analizan por sitio y por temporada, y los datos
recopilados en la Universidad de Massachusetts se resumen en Amherst. Por ltimo, es
una discusin de la correlacin estadstica y ANOVA anlisis realizados en los datos. Los
datos para todos los eventos de muestreo se proporcionan en el Apndice A.

4.1 Descripciones del sitio de muestreo

Todos los sitios de muestreo analizados en esta tesis se ubicaron dentro de la cuenca del
embalse de Wachusett. Esta cuenca hidrogrfica se encuentra en el centro de
Massachusetts y est compuesta por 71,000 acres. Esta investigacin se centr en dos
subcuencas: la subcuenca del arroyo Malagasco y la subcuenca Beaman Pond. Los mapas
del locus del sitio se proporcionan en el Apndice B. Estas subcuencas se eligieron en
funcin de las preocupaciones sobre la calidad del agua y en funcin de la diversidad de
usos del suelo dentro de las subcuencas, lo que puede afectar la calidad del agua receptora.

4.1.1 Subcuenca del arroyo Malagasco

La subcuenca del arroyo Malagasco se encuentra en el extremo sur de la ciudad de
Boylston y justo al sur del embalse de Wachusett. Seis sitios fueron elegidos para el
muestreo dentro de la subcuenca. Se hace referencia a cada sitio con la abreviatura AM
para el arroyo Malagasco y un nmero que hace referencia al orden en que se recolectaron
las muestras. La muestra AM1 es el sitio ms ro abajo y AM6 el ms ro arriba.
El sitio de muestreo ms corriente arriba (AM6) se ubic en la cabecera del arroyo y
aguas arriba de un vivero. El vivero se muestra en la Figura 4.1. Este sitio est ubicado
dentro de un pantano de pinos, que es propiedad del Departamento de Conservacin y
Recreacin (DCR), cerca del Centro Boylston. El agua a la cabeza de la corriente se filtra
desde el suelo sin un camino de flujo aparente. Se encontr material orgnico en y
alrededor de la corriente de la zona boscosa que rodea el sitio.
El siguiente sitio, AM5, se encuentra aguas abajo del vivero a aproximadamente 0.14
millas de AM6. Una gran parcela de tierra adyacente al sitio de muestreo se usa para
cultivar rboles para el vivero. Este sitio est en la interseccin del arroyo de Malagasco
y la calle de la escuela. La muestra fue recolectada aguas abajo de la calle en propiedad
privada. Tres casas unifamiliares estn adyacentes al sitio.

Figura 4.1. Guardera cerca de los

sitios AM6 y AM5.
El siguiente sitio de muestreo, AM4, se encuentra dentro de un desarrollo de condominio
a lo largo del borde del camino de arroyo. Este sitio de muestreo est aproximadamente
a 0.31 millas del AM5. El desarrollo, que se denomina condominios de madera de arroyo,
tiene un rango de seis a 12 residencias en cada uno de los 21 edificios. La Figura 4.2 es
una fotografa de una de las unidades de condominio cerca de AM4. El arroyo se
encuentra aproximadamente a 50 pies de distancia de la calle y baja una pequea colina.
Dos unidades de condominio, cada una con seis residencias, se encuentran en el lado
derecho del sitio de muestreo. Tres unidades de condominio estn adyacentes a la
izquierda del sitio de muestreo.
AM3 tambin se encuentra dentro del complejo de condominios en la unidad de borde de
arroyo, a 0.30 millas del ltimo sitio. El sitio est ubicado aproximadamente a 25 pies de
la acera. Dos unidades de condominio estn ubicadas a cada lado del sitio de muestreo.
Las unidades tienen seis residencias y garajes. En este sitio, la corriente se desva a travs
de una estructura de concreto y fluye sobre un vertedero (ver Figura 4.3). Esta estructura
permite que el agua se rena.
La muestra se recolect del grupo aguas arriba del vertedero.

Figura 4.2. Complejo de

condominios cerca del sitio AM4.

Figura 4.3. Sitio de muestra AM3 con vertedero

El siguiente sitio de muestreo, AM2, se encuentra ro abajo de los condominios a lo largo

de la calle del templo oriental, aproximadamente a 0.22 millas de AM3. El arroyo fluye
adyacente a la carretera, aproximadamente a 20 pies por debajo del nivel de la calle. Cinco
casas unifamiliares se encuentran adyacentes al sitio de muestreo. La tierra alrededor del
arroyo es muy boscosa con una pendiente muy inclinada.
El ltimo sitio, AM1, se encuentra en la confluencia con el embalse de wachusett y
aproximadamente a 0.26 millas de AM2. El sitio est ubicado al final de la calle del
templo oriental ms all de una calle de acceso protegido para el embalse. Una casa
unifamiliar se encuentra al final de la calle del templo oriental. La corriente se canaliza
debajo de la calle de acceso y fluye a travs de una estacin de medicin al depsito. La
estacin de medicin se muestra en la Figura 4.4. La tierra adyacente al embalse est muy
arbolada.

4.1.2 SubcuencaFigura
del 4.4. Estacin de medicin en el sitio AM1
estanque Beaman
en la confluencia del embalse de Wachusett.
La subcuenca del estanque Beaman se encuentra en el lado norte del embalse de
Wachusett. Se tomaron tres muestras de un arroyo a lo largo de Lancaster Street, que es
la ruta MA 110. La muestra ms corriente arriba, HF3, se tom en propiedad DCR, ro
arriba de una pequea granja de caballos (ver Figura 4.5). El lugar de muestreo est
aproximadamente a 50 pies detrs del Cuartel General de Mantenimiento de Campo de
DCR en un rea ligeramente pantanosa. La muestra se recolect al lado de una valla
vinculada a la cadena, que separ la propiedad DCR y la granja de caballos. El sitio
normalmente tena un flujo bajo que haca el muestreo difcil o imposible en ciertos
momentos.
El segundo sitio, HF2, se encuentra justo aguas abajo de una granja de caballos
aproximadamente a 0.06 millas de HF3 (ver Figura 4.6). Esta granja de caballos aloj
cuatro caballos hasta que fueron retirados el 7 de julio de 2004. Se descubri un caballo
en la propiedad el 23 de septiembre de 2004. Esta ubicacin del sitio estaba cubierta de
maleza durante las estaciones ms clidas y los propietarios de la propiedad mantenan
un montn de hojas de basura. y desechos de animales cerca del terrapln. A los
propietarios se les pidi en 2004 que DCR retirara los caballos o instalara las mejores
prcticas de manejo para proteger la corriente de agua. El sistema sptico para la casa se
instal en 1973 y consista en un tanque, sistema de distribucin y sistema de absorcin
del suelo.

Figura 4.5. Sitio HF3 aguas arriba de la granja de caballos

Figura 4.6. Fotografas cerca del sitio HF2: Izquierda: Vista del establo y campo de caballos, rodeado por una valla.
Derecha: pila de material de desecho adyacente a la corriente
La Figura 4.7 muestra el ltimo sitio de muestreo, HF1, que se localiz aguas abajo del
sitio de la granja de caballos aproximadamente 0.26 millas. La corriente se encuentra
aproximadamente a 100 pies detrs de una casa ubicada en Lancaster Street. Se instal
un sistema sptico en 1959 y consisti en dos pozos negros y un sumidero de
desbordamiento. La muestra fue tomada justo aguas abajo de una pequea pasarela dentro
de un rea ligeramente boscosa. El flujo era tpicamente bajo, por lo que se ubicaba la
ubicacin ms profunda a lo ancho de la corriente para recolectar muestras.

4.2 Anlisis de DatosFigura 4.7. Sitio HF1 durante la primavera.

El anlisis de los datos de calidad del agua se realiz por sitio y por temporada. Para los
anlisis realizados por sitio, se determinaron las tendencias en los datos en diferentes
sitios o los cambios desde el lugar de muestreo ms aguas arriba al sitio ms aguas abajo.
El anlisis de los datos por temporada se complet agrupando las fechas de muestreo en
cuatro temporadas segn el calendario astronmico. La primavera incluy fechas del 22
de marzo al 21 de junio, verano del 22 de junio al 22 de septiembre, otoo del 23 de
septiembre al 22 de diciembre e invierno del 23 de diciembre al 21 de marzo. Se hizo una
excepcin para el anlisis estacional. Los datos de las muestras tomadas el 9 de diciembre
de 2003 del arroyo Malagasco se consideraron muestras de invierno. Esto se hizo porque
no se tomaron muestras dentro del calendario astronmico apropiado y porque las
mediciones realizadas fueron ms consistentes con las caractersticas de invierno que las
de otoo. Las muestras tomadas en Horse Farm el 12 de enero de 2004 tuvieron una
temperatura promedio de 2.3 C y las muestras de arroyos de Malagasco tomadas el 9 de
diciembre de 2003 tuvieron una temperatura promedio de 0.2 C. Las mediciones de
oxgeno disuelto tambin fueron ms consistentes con las mediciones de invierno donde
el promedio de las muestras del arroyo 9 de diciembre de 2003 fue de 12.6 mg / L y el
promedio de las muestras de invierno de la Granja de Caballos fue de 14.4 mg / L. En
contraste, las muestras de cada en el arroyo Malagasco promediaron 7.7 mg / L y 9.6 mg
/ L de oxgeno disuelto para las fechas de muestreo del 21 de octubre de 2003 y el 10 de
noviembre de 2004, respectivamente.

4.2.1 Anlisis del sitio - Arroyo Malagasco

La siguiente seccin describe los datos observados para la subcuenca del arroyo
Malagasco basado en variaciones en las mediciones por sitio.

4.2.1.1 Carbono orgnico

Los datos sobre las concentraciones de carbono orgnico incluyeron carbono orgnico
total, orgnico disuelto mediciones de carbono y UV254. En los sitios de muestreo del
Arroyo Malagasco, carbono orgnico concentraciones en general mostraron una
tendencia decreciente desde ubicaciones aguas arriba a sitios aguas abajo del sitio AM5
a AM1. Niveles TOC, DOC y UV en el sitio AM6 (en la ubicacin ms arriba) fueron
similares, pero ligeramente menores que los niveles en AM5. Por ejemplo, en el otoo de
2003, TOC fue 50.8 mg / L en AM6, aument ligeramente a 51.9 mg / L en AM5, y luego
disminuy progresivamente aguas abajo a un mnimo de 26.4 mg / L en AM1 (ver Figura
4.8). DOC y UV254 siguieron tendencias similares.

Figura 4.8. Concentraciones de carbono orgnico en Arroyo Malagasco, 21 de octubre

de 2003.
Tendencias similares se observaron en otras temporadas, con el TOC y DOC ms altos
en AM5, A los niveles ms bajos de compuestos orgnicos en AM1. En el invierno de
2003, el nivel ms alto de TOC se observ en MB5 (31.9 mg / L), y las concentraciones
disminuyeron para alcanzar 15.3 mg / L en AM1 (ver figura 4.9). Las concentraciones de
DOC estaban dentro del 0.3% - 5.3% de TOC concentraciones para esta fecha de
muestreo. En los eventos de muestreo de otoo y primavera, TOC y DOC alcanzaron su
punto mximo en AM5 con concentraciones que van desde 23.1 a 51.9 mg / L para TOC
y 20.9 a 50.1 mg / L para DOC. Las concentraciones disminuyeron sistemticamente
aguas abajo entre 0% y 49%. Aunque las tendencias fueron similares en el verano, los
valores absolutos fueron diferentes. TOC alcanz un mximo de 47.9 mg / L en AM5, y
disminuy a 9.3 mg / L en AM4. La concentracin fue solo de 1,4 mg / L en AM1, una
disminucin del 97% de AM5.

Estas altas concentraciones de carbono orgnico se pueden atribuir a material vegetal

adicional desde la guardera. La escorrenta de productos qumicos utilizados en la
produccin de un vivero tambin entra en cuerpos de agua superficial inadvertidamente
aumentando el crecimiento de otras plantas encontradas en el agua. Adems, las cabeceras
pantanosas en MB6 eran una fuente probable de orgnicos materia, especialmente en el
otoo cuando las hojas de las reas boscosas cayeron en o cerca del agua.

Figura 4.9. Datos orgnicos de arroyo Malagasco, 9 de diciembre de 2003.

Los niveles de UV siguieron las mismas tendencias que TOC y DOC. Durante el muestreo
de otoo de 2003 fecha, se observ un nivel de 2.26 cm-1 en AM6, luego aument
ligeramente a 2.82 cm-1 en AM5, luego disminuy en un 52% de AM5 a AM1. Todas
las fechas de muestreo mostraron la mayor concentracion para UV en el sitio AM5. La
diferencia en las concentraciones desde el sitio AM5 ael sitio ms aguas abajo (AM1)
vari de 45% a 98%.

4.2.1.2 Calidad del agua fsica y qumica

Parmetros fsicos y qumicos medidos en las muestras de calidad del agua incluidas
temperatura, conductividad, oxgeno disuelto y pH. En la subcuenca del Arroyo
Malagasco, la temperatura y el pH fueron relativamente constantes a lo largo del cuerpo
de agua. Por ejemplo, durante el muestreo de primavera de 2004, los niveles de
temperatura variaron de 11.4 a 9.5 C, una diferencia de solo 1.9 C (ver Figura 4.10).
El 11 de agosto de 2004, la temperatura en AM1 fue de 13.9 C y las otras medidas
variaron entre 18.1 - 18.9 C. Sin embargo, las diferencias de temperatura entre los sitios
para todas las dems fechas de muestreo fue de 0.9 - 1.9 C. pH los valores variaron de
un mnimo de 5.31 en AM5 en el otoo de 2004 a un mximo de 7.33 en AM2 en 11 de
agosto de 2004. Se observ un promedio del 3 por ciento de variacin en el pH en todos
los sitios para todos fechas de muestreo.
 Figura 4.10. DO, pH y conductividad en Malagasco Brook, 4 de mayo de 2004.
Los niveles de oxgeno disuelto dentro de la subcuenca del arroyo Malagasco mostraron
una aumento constante de las ubicaciones aguas arriba a aguas abajo. Durante la
primavera de 2004 muestreo, el nivel ms bajo se observ en MB6 a 4.1 mg / L y el
segundo ms bajo de 5.4 mg / L en MB5. Los niveles aumentaron a> 10 mg / L para todos
los dems sitios aguas abajo. Lo mismo tendencia se observ para todas las dems fechas
de muestreo con valores atpicos mnimos. En el otoo de 2004 fecha de muestreo, los
niveles variaron de 11.9 a 13.0 mg / L en los cuatro sitios ms aguas abajo con DO ms
alto observado en MB2. La diferencia entre los sitios fue solo de 1.1 mg / L, mostrando
niveles consistentes de DO a medida que el agua se mueve ms aguas abajo.
Esta nivelacin de DO indica que la calidad del agua del arroyo est aumentando a
continuacin el flujo de agua aguas abajo. Una fuente de esta mayor calidad del agua
puede ser un resultado de turbulencias a lo largo del flujo del arroyo, en particular pasando
por la presa entre sitios de muestra AM3 y AM2. El DO tambin puede estar relacionado
con la concentracin de sustancias orgnicas encontrado en el agua. El aumento de los
niveles de materia orgnica en los sitios aguas arriba requiere oxgeno del agua para la
degradacin. Esta demanda disminuye a medida que los niveles de TOC y DOC
disminuir, lo que permite aumentar los niveles de DO debido a la reiteracin.
La conductividad en el arroyo Malagasco aument de MB6 a MB1. En general, grande
se observaron aumentos de MB6 a MB4 y luego se estabilizaron hasta otro se produjo un
gran aumento de MB2 a MB1. Por ejemplo, el muestreo de otoo de 2004 la
conductividad fue de 30 S en MB6 y aument a 56 S en MB5. La conductividad
entonces aument a 71 S en MB4, aumentando solo ligeramente hasta que se produjo
otro gran aumento observado desde MB2 a MB1. La diferencia entre estos dos sitios fue
del 116%. En promedio, la diferencia entre MB5 a MB4 fue del 86% y 103% entre MB2
y MB1.
Los altos niveles de conductividad estn asociados al aumento de slidos disueltos
inorgnicos como cloruro y nitrato. Las reas donde se observaron niveles altos se
ubicaron en reas que eran muy boscosas y tenan cantidades elevadas de material vegetal
en el cuerpo de agua. Estas cantidades excesivas de desechos dan como resultado la
descomposicin del material de la planta que aumenta la cantidad disuelta slidos que
pasan una corriente elctrica. El arroyo pasa a travs de una medicin de granito estacin
en MB1 que puede explicar el aumento de la conductividad de la descomposicin de la
materiales de la estacin.
4.2.1.3 Materia particulada
No se encontr una tendencia observable en materia particulada en los sitios a lo largo
del arroyo Malagasco. Se observaron altos y bajos tanto de la turbidez como del conteo
de partculas en diferentes niveles sitios de muestreo de las cinco veces que se tomaron
muestras del cuerpo de agua. Por ejemplo, el Recuento de turbidez y partculas tanto para
el 9 de diciembre de 2003 como para el 11 de agosto de 2004 las fechas de muestreo
mostraron el nivel ms alto de partculas en el sitio AM3. Sin embargo, el ms alto se
observ turbidez (1,23 ntu) en el sitio AM2 en el otoo de 2004 y la fecha de muestreo el
mayor recuento de partculas (3012 / mL) se observ en AM6 en la misma fecha de
muestreo. Bajo los niveles de turbidez y el recuento de partculas tampoco mostraron
variaciones observables en funcin del sitio. En general, la diferencia entre los niveles
ms bajos y ms altos de turbidez oscilaba entre 33% a 97% y las diferencias en los
recuentos de partculas variaron de 20% a 84%.
Debido a las ubicaciones variables de los altos y bajos de los dos componentes, no hay
claros se puede establecer una correlacin entre el uso de la tierra y la medicin de los
slidos. Diferencias en niveles medidos podra haber sido debido a la turbulencia
repentina en el agua mezclando los sedimentos en la cama del arroyo.

4.2.1.4 Organismos indicadores

Los dos anlisis del organismo indicador realizados en las muestras de agua fueron fecales
coliformes y enterococos. El anlisis realizado en el arroyo Malagasco no mostr una
tendencia constante en los niveles altos de coliformes fecales. Sin embargo, generalmente
se encontraron niveles ms altos en el desarrollo de la vivienda (sitios AM4-AM2).
Cuatro de las cinco muestras indicaron los niveles ms bajos de coliformes fecales en el
sitio AM1 (ver Tabla 4.1). El rango entre las concentraciones ms altas y ms bajas de
coliformes fecales en una fecha de muestreo dada fue del 76% al 96%. La Tabla 4.2
muestra que no se encontr una relacin discernible entre las concentraciones altas y bajas
de enterococos por sitio. Sin embargo, nuevamente se ve que las altas concentraciones
tienden a ser en el desarrollo de la vivienda. Se encontraron rangos de 36% a 99% para
las diferencias en concentraciones altas y bajas de enterococos, en diferentes sitios en una
fecha de muestreo dada.

Mximas Concentraciones Mnimas Concentraciones

Fecha Localizacin Efu/ 100 ml. Localizacin Efu/ 100 ml.
21 de Octubre, 2003 AM 3 75 AM 1 16
9 de Diciembre, 2003 AM 4 46 AM 1 2
4 de Mayo, 2004 AM 6 734 AM 1 175
11 de Agosto, 2004 AM 2 2459 AM 1 152
10 de Noviembre, AM 4 26 AM 6 2
2004
Tabla 4.1. Concentraciones de coliformes fecales en el Arroyo Malagasco por fecha de
muestreo.

Tabla 4.2. Concentraciones de enterococos en el arroyo Malagasco por fecha de

muestreo.

Durante dos fechas de muestreo, las concentraciones ms bajas de coliformes fecales y

enterococos se observaron durante los niveles ms bajos de material particulado. Muchas
veces los microorganismos se adhieren a las partculas en una muestra de agua, por lo que
los menos slidos en una muestra de agua podran producir un nivel ms bajo de
organismos indicadores. Otra tendencia notable fue el aumento de la medicin de
coliformes fecales y enterococos en el sitio AM4. Este sitio se ubic inmediatamente
despus de la primera seccin de condominios. El aumento de las concentraciones
microbiolgicas podra ser una indicacin de fallas en los sistemas spticos en esta rea.
El aumento continuo de las concentraciones de coliformes fecales y enterococos en AM3,
tambin ubicado dentro de un desarrollo de condominio, tambin podra indicar
problemas con los sistemas spticos.

4.2.2 Anlisis estacional - Arroyo Malagasco

Las siguientes secciones describen los resultados y anlisis de los datos encontrados en
la subcuenca del Arroyo Malagasco en funcin de las diferentes estaciones.

4.2.2.1 Carbono orgnico

Comparando TOC, DOC y UV para cada una de las cuatro estaciones, las concentraciones
de materia orgnica fueron ms altas durante la temporada de otoo. Como se muestra en
la Figura 4.11, DOC en el sitio 1 fue de 25.7 mg / L en el otoo de 2003 y 20.5 mg / L en
Mximas Concentraciones Mnimas Concentraciones
Fecha Localizacin Efu/ 100 ml. Localizacin Efu/ 100 ml.
21 de Octubre, 2003 AM 3 129 AM 1 83
9 de Diciembre, 2003 AM 4 13 AM 1 3
4 de Mayo, 2004 AM 6 1061 AM 1 31
11 de Agosto, 2004 AM 2 3233 AM 1 45
10 de Noviembre, AM 4 41 AM 6 1
2004
el otoo de 2004, en comparacin con 15.2 mg / L, 8.4 mg / L y 1.5 mg / L durante el
invierno, primavera y verano, respectivamente. Las concentraciones totales de carbono
orgnico siguieron tendencias similares, con una cada de los valores de 2003 de 38.4%
a 47.0% ms que los valores en invierno, 55.4% a 74.9% ms altos que los valores en la
primavera y 7.7% a 94.7% ms altos que los valores en el verano. Los valores de UV254
tambin mostraron tendencias estacionales similares, que se esperan, ya que la UV es una
medida sustitutiva para la materia orgnica. Los sitios AM2-AM6 tenan valores de UV
superiores a 2,0 cm-1 en el otoo de 2003. Solo el doble de las otras 22 muestras fue el
valor de UV mayor o igual a 2,0 cm-1. Esto ocurri durante el otoo de 2004 tomando
muestras en AM5 (2.0 cm ^ -1) y en el verano de 2004 en AM5 (2.6 cm ^ -1).
Las altas concentraciones de compuestos orgnicos son tpicas durante la cada debido a
las mayores cantidades de material vegetal en el cuerpo de agua. Dado que varias
secciones del arroyo se encuentran dentro de reas muy boscosas, la cada producira
niveles ms altos de carbono orgnico. Las secciones que no estn cerca de las reas
boscosas tambin se ven afectadas por el follaje de otoo, ya que el material vegetal se
transporta por el arroyo.

4.2.2.2Figura
Calidad del aguaestacionales
4.11. Concentraciones fsica deycarbono
qumicaorgnico en AM1.

Las temperaturas en el arroyo Malagasco fueron apropiadas para cada estacin.

Temperaturas de 7.5 - 9.2 C se midieron en el otoo, -0.1 - 0.8 C en el invierno, 9.5 -
11.4 C en la primavera, y 13.9 - 18.9 C en el verano. El oxgeno disuelto y la
temperatura tienen una inversa relacin, que se representa en la Figura 4.12 donde la
temperatura para el invierno es ms baja y el DO es ms alto, y viceversa para los datos
de verano. Por ejemplo, en la temperatura en MB4 durante el invierno se midi a 0 C y
el OD fue de 12,8 mg / l. Por el contrario, la temperatura fue de 18.1 C en MB2 durante
el verano y el DO del mismo sitio fue de 7,6 mg / l. El pH de los cuerpos de agua era
consistentemente neutro, donde la diferencia entre los niveles ms alto y ms bajo siempre
fue menos de 1,4 unidades durante cada temporada. La conductividad de los cuerpos de
agua mostr pocos patrones basados en diferencias estacionales. El nico patrn
observado con conductividad basada en la temporada fue que los niveles de verano fueron
ms altos que todas las dems estaciones (ver Tabla 4.3). la conductividad durante el
verano fue 25.6% - 59.2% mayor que la primavera, 13.5% - 58.4% mayor que el invierno,
y 3.6% - 62.2% mayor que las conductividades de cada. La diferencia en la conductividad
basada en el anlisis estacional podra ser una indicacin de desperdicio contaminacin.
Sin embargo, tambin se supondr que se producen altos niveles de Conductividad en
fines de invierno / principios de primavera debido a la escorrenta de las carreteras saladas
a lo largo de los condominios.
 Tabla 4.3. Niveles de pH y conductividad en Arroyo Malagasco por temporada.
Ph Conductividad (S)
Temporada Mximo Promedio Mnimo Mximo Promedio Mnimo
Otoo 2003 6.99 6.70 6.09 297 146 58
Invierno 6.83 6.40 5.58 304 172 95
Primavera 7.04 6.61 5.95 226 137 38
Verano 7.33 6.96 6.29 554 287 110
Otoo 2004 6.62 6.06 5.31 172 81 30

4.2.2.3 Materia particulada

Se encontr que los recuentos de turbidez y partculas eran ms altos durante la temporada
de verano que durante todas las dems estaciones, con la excepcin del sitio de muestreo
ms corriente abajo (AM1). La turbidez fue la ms baja en AM1 durante el verano en
comparacin con todas las dems estaciones (ver Figura 4.13). La turbidez para el verano
fue un promedio de 68% mayor que los valores de cada, 55% mayor que los valores R -
valor, y 42% mayor que los valores de primavera para la turbidez. Los promedios para el
recuento de partculas fueron 71% mayores que los valores de cada, 47% mayores que
los valores R de invierno, y 51% mayores que los valores de primavera.

Figura 4.13. Medidas estacionales de materia particulada en AM2

4.2.2.4 Organismos indicadores

Los recuentos de colonias de coliformes fecales y enterococos fueron ms altos durante
el verano con un mximo de 2459 ufc / 100 ml para coliformes fecales y 3233 ufc / 100
ml para enterococos, ambos tomados durante la fecha de muestreo del 11 de agosto de
2004. Los recuentos de colonias ms bajos se encontraron durante el invierno a 2 ufc /
100 ml para los coliformes fecales y 3 ufc / 100 ml para los enterococos, tomados en la
fecha de muestreo del 9 de diciembre de 2003. Los niveles mximos de verano de
coliformes fecales son 70% mayores que los niveles de primavera, 97% y 99% mayores
que los niveles de cada, y 98% mayores que los niveles de invierno. Las concentraciones
mximas de verano de los enterococos para el Arroyo Malagasco son 67% mayores que
los niveles de primavera, 96% y 99% mayores que los niveles de cada, y 99% mayores
que los niveles de invierno. Es probable que haya niveles ms altos de concentraciones
de indicadores microbiolgicos durante el verano porque las temperaturas ms clidas
ayudan al crecimiento y la reproduccin de los organismos, donde las temperaturas ms
fras matan a los organismos por lo que no se detectara la deteccin.

4.2.3 Anlisis del sitio - estanque Beaman

Las siguientes secciones describen los datos y anlisis realizados en la subcuenca del
estanque Beaman en funcin de las diferencias en el sitio.

4.2.3.1 Carbono orgnico

Los niveles totales de carbono orgnico, DOC y UV se midieron en tres sitios en la
subcuenca del estanque Beaman. Las concentraciones totales de carbono orgnico
generalmente disminuyeron en la direccin descendente. Por ejemplo, las
concentraciones de TOC para el muestreo del 13 de noviembre de 2003 fueron de 6.11
mg / L en el sitio HF3, 2.22 mg / L en el sitio HF2 y 2.14 mg / L en el sitio HF1 (vea la
Figura 4.14). Sin embargo, el 26 de octubre de 2004, el nivel de TOC fue de 1,80 mg / L
en HF2 y aument a 2,48 mg / L en sentido descendente a HF1. HF3 no pudo ser
muestreado en esta fecha, ya que no hubo flujo. A diferencia de TOC, el DOC tendi a
aumentar en la direccin descendente. En el otoo de 2003, las concentraciones de DOC
aumentaron de 1,31 mg / L a HF3 a 2,10 mg / L a HF1. Tpicamente, los niveles de UV
fueron mayores en el segundo sitio de muestreo. El muestreo de otoo de 2003 tuvo un
bajo nivel en HF3 de 0.027 cm ^ -1, que aument a un mximo de 0.058 cm ^ -1 en HF2
y luego disminuy a 0.048 cm ^ -1 en HF1.
Los altos niveles orgnicos en el sitio HF2 podran atribuirse a la acumulacin de recortes
y residuos de desperdicios ubicados adyacentes a la corriente. Durante las tormentas de
lluvia, estos residuos se pueden lavar fcilmente en el arroyo alterando las caractersticas
naturales.
 Figura 4.14. Concentraciones de carbono orgnico en el estanque Beaman, 13 de
noviembre de 2003.

4.2.3.2 Calidad del agua fsica y qumica

Los parmetros fsicos y qumicos de la calidad del agua incluyen temperatura,
conductividad, oxgeno disuelto y pH. La temperatura y el pH fueron relativamente
consistentes a lo largo del cuerpo de agua. En el otoo y el verano, la temperatura vari
solo 2 C entre los sitios de muestreo. En el invierno y la primavera, las temperaturas
variaron entre 3.0 - 3.4 C. El pH fue razonablemente consistente, variando de 0.05 a
0.40 para una fecha de muestreo particular. Por ejemplo, en otoo de 2003, el pH ms
alto (6.33) se encontr en HF1 y el ms bajo (6.28) en HF3, una diferencia de solo 0.05.
Los niveles de oxgeno disuelto en la subcuenca del estanque Beaman tuvieron el nivel
ms bajo aguas arriba en HF3, aumentaron a un nivel alto en HF2, luego disminuyeron
nuevamente en HF1. El 13 de noviembre de 2003, la DO fue de 6,83 mg / L a HF3, 9,03
mg / L a HF2 y 7,99 mg / L a HF1 (ver Figura 4.15). El muestreo del 26 de octubre de
2004 mostr una tendencia similar de un mximo de 10.29 mg / L en HF2 y un nivel ms
bajo en HF1 de 8.63 mg / L, sin embargo, la muestra para HF3 no se tom debido a un
flujo no observable. El 13 de septiembre de 2004, los niveles de OD fueron virtualmente
idnticos en HF1 y HF2, midiendo 8.40 mg / L y 8.37 mg / L, respectivamente.
 Figura 4.15. Concentraciones de cada de oxgeno disuelto en el estanque Beaman.
Los niveles de conductividad aumentaron aguas abajo durante cuatro de las seis fechas
de muestreo. En las fechas en que la conductividad aument aguas abajo, se encontr un
aumento del 3% al 21% entre cada sitio de muestreo para una fecha de muestreo
particular. Las dos fechas de muestreo que disminuyeron en sentido descendente (13 de
septiembre de 2004 y 26 de octubre de 2004) solo tuvieron una disminucin del 3% y del
7% entre los sitios. Estas fechas de muestreo tenan dos sitios de muestreo (HF1 y HF2)
porque HF3 no tena flujo o era poco fluido el da del muestreo.
Los niveles ms altos de conductividad pueden deberse a sistemas spticos que estn
lixiviando desechos. Este desecho introducira iones que aumentaran la capacidad de
pasar una carga en el agua.

4.2.3.3 Materia particulada

Los recuentos de turbidez y partculas mostraron una tendencia decreciente en la
subcuenca del estanque Beaman excepto en las muestras tomadas el 26 de octubre de
2004, donde las muestras aguas abajo fueron mayores que las muestras aguas arriba. En
el otoo de 2003, la turbidez era de 17.75 ntu en HF3, 1.34 ntu en HF2 y 0.90 ntu en HF1.
De manera similar, la concentracin de partculas disminuy desde un mximo de 6881 /
mL a HF3 a 3137 / mL a HF2 y 2843 / mL a HF1. El 26 de octubre de 2004, los niveles
en sentido ascendente fueron inferiores a los niveles posteriores. El sitio HF2 tena una
turbidez de 1.40 mg / L y un conteo de partculas de 2457 / mL. Los recuentos de turbidez
y partculas en HF1 fueron 2.83 mg / L y 3764 / mL, respectivamente. El sitio HF3 no se
muestre en la fecha de muestreo del 26 de octubre debido a que no fluy.
Parece que el gran stock de material vegetal ubicado junto al sitio HF2 no era una fuente
importante de material particulado. Los niveles ms altos encontrados en HF3 pueden
deberse al hecho de que hubo un flujo constantemente bajo en el sitio. Debido al bajo
flujo fue difcil tomar muestras del cuerpo de agua sin perturbar el sedimento en el fondo
del arroyo.

4.2.3.4 Organismos indicadores

Los dos anlisis del organismo indicador realizados en las muestras de agua fueron fecales
coliformes y enterococos. Dentro de la subcuenca Beaman Pond, elevado las
concentraciones tanto de coliformes fecales como de enterococos se detectaron en el sitio
HF2 o HF3 hasta la fecha de muestreo del 13 de septiembre de 2004, donde se observ la
mayor enumeracin de colonias en el sitio HF1 (ver Tabla 4.4 y Tabla 4.5). Se
encontraron grandes aumentos en las concentraciones de ambos organismos indicadores
de HF3 a HF2 en la fecha de muestreo del 13 de noviembre de 2003 con un aumento del
95% en la concentracin de coliformes fecales y un aumento del 98% en las
concentraciones de enterococos.
Las concentraciones elevadas en HF2 el 13 de noviembre de 2003 (coliformes fecales =
1364 ufc / 100 ml, enterococos = 1636 ufc / 100 ml) fueron 93% - 98% mayores que las
heces concentraciones de coliformes y 98% mayores que las concentraciones de
enterococos tomadas en HF1 y HF3. Estos niveles elevados indicaran contaminacin de
la granja de caballos aguas arriba del sitio de muestreo; sin embargo, los coliformes
fecales fueron mximos en este sitio una vez fuera de las seis fechas de muestreo y tres
de seis veces para los enterococos. Esto significa que los caballos fueron una fuente de
contaminacin de la calidad del agua, pero no un problema recurrente. Los niveles
elevados en HF1 indicaran la contaminacin de un sistema sptico, mientras que la
contaminacin en HF3 podra ser causada por agua estancada con poca rotacin.
Tabla 4.4. Concentraciones de coliformes fecales en el estanque Beaman por fecha de
muestreo.

Mximas Concentraciones Mnimas Concentraciones

Fecha Localizacin Efu/ 100 ml. Localizacin Efu/ 100 ml.
13 de Noviembre, HF2 1364 HF1 15
2003
12 de Enero, 2003 HF3 42 HF1 6
6 de Abril, 2004 HF3 57 HF1 11
2 de Junio, 2004 HF3 115 HF2 78
13 de Setiembre, HF1 283 HF2 69
2004
26 de Octubre, 2004 HF1 95 HF2 61
Tabla 4.5. Concentraciones de enterococos en el estanque Beaman por fecha de
muestreo.

Mximas Concentraciones Mnimas Concentraciones

Fecha Localizacin Efu/ 100 ml. Localizacin Efu/ 100 ml.
13 de Noviembre, HF2 1636 HF1 33
2003
12 de Enero, 2003 HF3 85 HF1 25
6 de Abril, 2004 HF3 1000 HF1 32
2 de Junio, 2004 HF3 118 HF2 59
13 de Setiembre, HF1 103 HF2 38
2004
26 de Octubre, 2004 HF1 48 HF2 30
4.2.4 Anlisis estacional - estanque Beaman
Las siguientes secciones describen los datos y los resultados de los anlisis en la
subcuenca del estanque Beaman en funcin de los cambios estacionales.
4.2.4.1 Carbono orgnico
El carbono orgnico medido para el estanque Beaman mostr menos relaciones basadas
en variaciones estacionales que el arroyo Malagasco. Se observaron altas concentraciones
de TOC y DOC durante el verano, y las concentraciones ms bajas se encontraron en el
invierno. La Tabla 4.6 muestra las concentraciones mximas, promedio y mnima de los
tres parmetros de calidad del agua con carbono orgnico. Los datos de otoo y primavera
se basan en dos eventos de muestreo y los datos de invierno y verano se basan en un
evento de muestreo. El verano de 2004 y el otoo de 2004 solo se muestrearon en HF1 y
HF2 ya que no hubo flujo en HF3. Los niveles ms altos de orgnicos seran apropiados
para el verano debido al aumento de la actividad externa con el cuidado de las plantas y
el pleno crecimiento de la vida vegetal. Sin embargo, se habran esperado niveles an ms
altos durante el otoo debido a la mayor cantidad de follaje y material vegetal que se cae
de los rboles. Los bajos niveles de carbono orgnico tambin seran apropiados para el
invierno debido al bajo crecimiento de la vida vegetal durante esta temporada.
Tabla 4.6. Concentraciones de carbono orgnico en el estanque Beaman por temporada.
TOC (mg/L) DOC (mg/L) UV (cm^-1)
temporada Max Prom Min Max Prom Min Max Prom Min
Otoo 6.11 2.95 1.80 2.38 1.88 1.31 0.058 0.039 0.027
Invierno 2.11 1.35 0.94 0.98 0.89 0.81 0.023 0.020 0.017
Primavera 2.34 1.85 1.44 1.57 1.39 1.04 0.083 0.049 0.023
Verano 3.61 3.22 2.83 2.89 2.57 2.24 0.059 0.056 0.052
* Datos basados en dos eventos de muestreo por temporada

4.2.4.2 Calidad del agua fsica y qumica

Los parmetros fsicos y qumicos como la temperatura, la turbidez y el recuento de
partculas, el pH, la conductividad y el DO mostraron relaciones estacionales. Los rangos
de temperatura fueron consistentes con las estaciones asociadas. El rango de temperaturas
para el resorte fue 4.0 - 12.3 C, las temperaturas de verano variaron entre 14.7 - 15.6
C, cayeron de 6.8 - 10.6 C, y el invierno de 1.0 - 4.0 C. El rango de temperaturas es
muy variable durante la primavera debido a las mediciones realizadas el 6 de abril de
2004 y el 2 de junio de 2004, que se encuentran en los dos extremos del rango estacional.
El oxgeno disuelto tpicamente tiene una relacin inversa con la temperatura: a medida
que la temperatura disminuye, el OD aumenta. En el invierno, los niveles de OD variaron
de 13.7 a 15.3 mg / L. Los niveles de OD durante el verano fueron significativamente
menores, promediando 8.4 mg / L. Aunque la temperatura y DO estn inversamente
relacionados, otros factores influyen en la concentracin de DO en aguas superficiales y,
por lo tanto, existe cierta variabilidad en los datos.
El pH de las muestras de agua fue aproximadamente neutral para todas las estaciones, sin
embargo, los niveles de verano fueron ligeramente elevados en comparacin con las otras
temporadas (ver Tabla 4.7). El pH promedio para el verano en la subcuenca del estanque
Beaman fue un 13% mayor que la cada, un 7% mayor que en el invierno y un 10% mayor
que en el verano. Estas diferencias porcentuales tambin muestran que hubo una pequea
diferencia en el pH. Los niveles ms altos de conductividad se encontraron durante el
invierno. Los valores R invernales promedios fueron 12% mayores que la cada, 13%
mayores que la primavera y 8% mayores que en el verano. El mayor nivel de
conductividad durante el invierno podra ser una indicacin de que la sal del camino
ingresa al cuerpo de agua debido a la escorrenta.
Tabla 4.7. Los niveles del estanque Beaman de pH y la conductividad por temporada.
Ph Conductividad (S)
Temporada Mximo Promedio Mnimo Mximo Promedio Mnimo
Otoo* 7.14 6.62 6.28 785 616 447
Invierno 7.36 7.14 6.95 805 699 601
Primavera 6.98 6.88 6.65 784 607 387
Verano 7.78 7.65 7.51 568 549 530
* Datos basados en dos eventos de muestreo por temporada

4.2.4.3 Materia particulada

El nivel ms alto de turbidez fue durante la primavera (4,84 ntu). La cantidad promedio
de turbidez fue un 57% mayor que en invierno, un 46% ms que en primavera y un 24%
mayor que en el verano. Los conteos de partculas fueron los ms altos durante los
muestreos de primavera (4154 / mL). La diferencia porcentual no fue tan alta para los
recuentos de partculas donde las diferencias entre temporadas promediaron 8% - 21%.
Los dos parmetros suelen tener tendencias similares, sin embargo, pequeas variaciones
en la naturaleza de las mediciones pueden causar diferentes tendencias.

4.2.4.4 Organismo indicador

Los niveles de coliformes fecales y enterococos variaron por una temporada. Los niveles
ms altos se observaron durante el otoo de 2003, donde los niveles de coliformes fecales
fueron de 1364 ufc / 100 ml y los niveles de enterococos fueron de 1636 ufc / 100 ml.
Los niveles microbianos ms bajos se observaron durante el invierno con un nivel de
coliformes fecales de 6 ufc / 100 ml y 25 ufc / 100 ml para los enterococos. La Tabla 4.8
muestra todos los niveles mximo, promedio y mnimo para los dos organismos
indicadores.
La concentracin promedio ms alta para ambos organismos indicadores se encontr
durante la temporada de muestreo de otoo. Las concentraciones de coliformes fecales y
enterococos en la cada fueron 45% - 94% y 37% - 83% mayores que las otras estaciones,
respectivamente. Las altas concentraciones de organismos microbiolgicos son ms
probablemente el resultado de la presencia de los caballos en la granja en lugar de un
efecto estacional.
Tabla 4.8. Las concentraciones del organismo indicador del estanque de Beaman por
estacin.
Coliformes fecales (# / 100 mL) Enterococci (# / 100 mL)
Temporada Maximo Promedio Minimo Maximo Promedio Minimo
Otoo* 1364 320 15 1636 355 29
Invierno 42 20 6 85 59 25
Primavera* 283 64 11 1000 223 32
Verano 283 176 69 103 71 38
* Datos basados en dos eventos de muestreo por temporada
4.3 Datos de la Universidad de Massachusetts
En conjunto con la Universidad de Massachusetts en Amherst, se analizaron otros
parmetros para caracterizar an ms la calidad del agua y, en particular, determinar la
fuente de los aportes microbianos a las aguas. Los tres parmetros medidos en el
laboratorio de UMass fueron Rhodococcus coprophilus, bifidobacterias que fermentan
sorbitol y colifagos. Rhodococcus coprophilus es un indicador de la contaminacin
animal de pastoreo. Las bifidobacterias fermentadoras de sorbitol son un indicador de la
contaminacin de las aguas residuales domsticas fecales o domsticas. Por ltimo, los
colifagos de ARN especficos de F son indicadores de las aguas residuales y la
contaminacin fecal, pero se pueden clasificar adems como procedentes de humanos o
animales no humanos mediante genotipado o serotipado.

Los niveles de Bifidobacteria estaban por debajo de los lmites de deteccin (<2 ufc / 100
ml) para todos los sitios en 12 de diciembre de 2003 y 4 de mayo de 2004. El sitio MB4
tena un nivel de 4 ufc / 100 ml en el Fecha de muestreo del 11 de agosto de 2004, mientras
que todos los dems sitios fueron <2 cfu / 100 ml. El 21 de octubre de 2003 se observaron
concentraciones detectables en cuatro sitios, MB1-MB4. Los El nivel de bifidobacterias
en el sitio MB4 fue de 46 ufc / 100 ml, seguido por niveles decrecientes de 16 ufc / 100
ml en MB3, 11 ufc / 100 ml en MB2 y 4 ufc / 100 ml en el lugar ms corriente abajo,
MB1. Estos datos indican que la contaminacin de fuentes humanas pueden haber
ocurrido. Se encontraron niveles ms altos en MB3 y MB4 que se ubicaron dentro de los
condominios.
Los colifagos de ARN F + fueron inferiores a 1 ufc / 100 ml en todos los sitios, tanto para
el 21 de octubre, 2003 y 9 de diciembre de 2003 fechas de muestreo. En la fecha de
muestreo del 5 de mayo de 2004, los sitios upstream, MB6 y MB5, tenan niveles
inferiores a 1 ufc / 100 ml. Concentraciones que van desde 0.5-1.0 ufc / 100 ml se
midieron en los sitios MB4-MB1. No hubo muestra tomada en MB6 el 11 de agosto de
2004. Los sitios MB5 y MB4 tenan niveles de 0.5 cfu / 100 ml. El siguiente sitio, MB3,
tena 8.5 ufc / 100 ml y luego disminuy a menos de 1.0 ufc / 100 ml para el resto de los
sitios downstream. El pico en la concentracin de colifago de ARN F + en el sitio MB3
en combinacin con los niveles elevados de concentracin de Bifidobacteria an ms
apoyar la posibilidad de contaminacin de los sistemas spticos.

4.3.2 Datos de UMass Estanque Beaman

R. coprophilus, bifidobacterias fermentadoras de sorbitol y colifagos de ARN F + fueron
Pedido por UMass para todos los sitios en todas las fechas de muestreo, con la excepcin
del sitio HF3 en 12 de septiembre de 2004 y 26 de octubre de 2004, cuando hubo poco o
ningn flujo en el momento de muestreo. El nivel ms alto de R. coprophilus se detect
el 13 de noviembre de 2003. El la mayora del sitio ro arriba era menos de 20 ufc / 100
ml, seguido de una concentracin de 320 ufc / 100 ml a HF2 y luego una disminucin a
53 ufc / 100 ml a HF1. Los niveles ms altos de R. coprophilus se observ en HF2 en
cuatro de los seis eventos de muestreo. R. coprophilus era no detectable en HF2 (<20 ufc
/ 100 ml), el 13 de septiembre de 2004. R. coprophilus la concentracin super el nivel
umbral de 50 ufc / 100 ml cuatro veces. Tres de estos los tiempos se produjeron en HF2,
y uno en HF1, aguas abajo de HF1. Esto indica que hubo contaminacin de un animal de
pastoreo. Segn la ubicacin de HF2, contaminacin de los caballos en la granja aguas
abajo del sitio son sospechosos.
Los niveles de Bifidobacteria de menos de 2 cfu / 100 mL ocurrieron en los tres sitios de
muestreo en tres ocasiones, el 13 de noviembre de 2003, el 2 de junio de 2004 y el 26 de
octubre de 2004. La ms alta nivel se observ el 12 de enero de 2004 en HF3 (8 ufc / 100
ml). El nivel de Bifidobacteria el 13 de septiembre de 2004 a HF2 fue de 6 ufc / 100 ml
y un nivel de 5 ufc / 100 ml fue observado el 6 de abril de 2004 en HF1. Todos los niveles
de colifagos de ARN F + fueron inferiores a 1.0 ufc / 100 ml en todos los sitios excepto
el 2 de junio de 2004, donde el nivel se midi a 0,5 ufc / 100 ml. Las concentraciones ms
altas de Bifidobacteria podran ser una indicacin de humano contaminacin tal como de
sistemas spticos; sin embargo, niveles elevados de ARN F + los colifagos solo se
observaron una vez en las 16 muestras analizadas. Dado que estos dos las concentraciones
no se observaron con patrones similares se hipotetiza que humanos la contaminacin no
est presente en la subcuenca estanque Beaman.

4.4 Anlisis estadstico

Se realizaron varios anlisis estadsticos de los datos medidos en el campo y laboratorio.
Todos los anlisis se realizaron con las herramientas de anlisis de datos de Microsoft
Excel.
Se realizaron anlisis de correlacin para identificar las relaciones entre el agua individual
parmetros de calidad que fueron medidos El anlisis ANOVA fue completado para
determinar diferencias entre la calidad del agua en diferentes sitios y las diferencias entre
las estaciones.

4.4.1 Anlisis de correlacin

El anlisis de correlacin se utiliz para determinar las relaciones entre la calidad del agua
parmetros. Se realizaron tres anlisis: correlacin entre la calidad del agua parmetros
en la subcuenca del arroyo Malagasco, correlacin entre la calidad del agua parmetros
dentro de la subcuenca estanque Beaman, y la correlacin entre la calidad del agua
parmetros para los datos combinados de ambas subcuencas. El anlisis de correlacin
realizado por Microsoft Excel proporciona un valor R, que muestra qu tan bien dos
factores estn correlacionados Se utiliza una tabla de coeficientes de correlacin para
determinar el nivel de confianza de los datos (ver Apndice C). Esta tabla muestra el valor
R que debe cumplirse o superar separa que exista una correlacin estadsticamente
significativa. El valor R depende del nmero de puntos de datos, n, que se evalan. Un
valor P de 0.05, o un 95% de confianza nivel, se utilizaron para determinar correlaciones
estadsticamente significativas para esta investigacin.

4.4.1.1 Anlisis del Arroyo Malagasco

Se analizaron catorce parmetros de calidad del agua para la subcuenca del arroyo
Malagasco.
Hubo 28 puntos de datos para cada parmetro (cinco fechas de muestreo con seis sitios
por fecha, excepto que MB6 no se muestre en dos fechas debido a la falta de flujo). Con
base en la tabla de coeficiente de correlacin, se necesita un valor R de 0,375 para una
correlacin estadsticamente significativa con un valor P de 0,05 o un nivel de confianza
del 95%. La Tabla 4.4 presenta los datos de correlacin donde las correlaciones
estadsticamente significativas se muestran en negrita. De las 90 posibles correlaciones,
41 resultaron ser 95% estadsticamente significativas. Los valores R ms altos (mayores
o iguales a 0,99) se encontraron para la relacin entre TOC y UV254, DOC y UV254, y
DOC y TOC. Se espera que estas relaciones sean significativas, son todas medidas de
materia orgnica. Adems, la materia orgnica en Malagasco Brookis se disolvi
predominantemente ya que las concentraciones de TOC y DOC fueron muy similares.
Por lo tanto, estos parmetros deben estar altamente correlacionados. Tambin hubo una
fuerte correlacin entre los recuentos de partculas y la turbidez, lo que puede esperarse
ya que ambas son medidas de slidos en el arroyo. Numerosas otras correlaciones se
observaron. Por ejemplo, se observaron correlaciones entre DO y temperatura (-0.460),
TOC y DO (-0.408), temperatura y pH (0.508), coliformes fecales y temperatura (0.733),
enterococos y temperatura (0.605) y coliformes fecales y enterococos (0.818).

Tabla 4.9. Anlisis de Correlacin de Arroyo de Malagasco

Se espera que la correlacin inversa entre OD y temperatura se base en cambios niveles

de saturacin de oxgeno disuelto con la temperatura. Varias correlaciones fueron
observado entre recuentos de partculas y concentraciones microbiolgicas.
Microorganismos puede unirse a los slidos que se encuentran en el agua, lo que puede
ser problemtico desde un tratamiento perspectiva ya que los slidos pueden proteger a
los microorganismos de la desinfeccin. Los coliformes fecales tenan una correlacin
estadsticamente significativa con cualquier otro parmetro de calidad del agua, excepto
DO y conductividad. Lo mismo fue cierto para los enterococos. Estas observaciones son
importante porque indican relaciones entre los parmetros, que ayudan determinar qu
pruebas son crticas para el anlisis de la calidad del agua y cules pueden excluirse a
favor de otras pruebas.

4.4.1.2 Anlisis de estanque Beaman

Teniendo en cuenta los puntos de datos de la subcuenca del estanque Beaman , hubo 16
puntos de datos para cada parmetro de calidad del agua. A partir de la tabla del
coeficiente de correlacin, fue necesario un valor R de 0.497 para que la relacin tuviera
una correlacin con una significacin de P = 0.05 (95% de confianza). De las 90 posibles
correlaciones entre los parmetros, 10 fueron estadsticamente significativas al 95%. La
Tabla 4.5 muestra el valor R para todas las correlaciones en el estanque Beaman. Tanto
DOC como TOC se correlacionaron inversamente con DO.
Esto puede deberse a una alta carga orgnica que provoca una demanda de oxgeno en el
agua. Tanto el recuento de partculas como la turbidez se correlacionaron con el TOC,
una relacin que puede observarse cuando la materia orgnica es en gran parte de
naturaleza particulada en lugar de disuelta. Se observ una correlacin inversa para la
temperatura y DO, con un valor R de -0.755. Se observaron correlaciones positivas para
la temperatura y DOC (0,646), turbidez y partculas (0,765), coliformes fecales y
enterococos (0,833), coliformes fecales y R. coprophilus (0,897), y enterococos y R.
coprophilus (0,744). Tambin se encontr que estas ltimas correlaciones tienen un
mayor nivel de confianza al 99% de confianza.
Tabla 4.10. Anlisis de correlacin del estanque Beaman.

Hubo varias correlaciones que se esperaban con los datos del estanque Beaman que fueron
no encontrado como estadsticamente significativo. Una de estas fue la correlacin entre
TOC y DOC. Estos dos parmetros pueden no estar relacionados cuando hay variacin
entre fracciones particuladas y disueltas de la materia orgnica en diferentes sitios. Lo
positivo correlacin en material particulado y organismos microbiolgicos que se
observ en No se observ el Arroyo Malagasco en la subcuenca Beaman Pond. Sin
embargo, fecal coliformes y enterococos tuvieron una fuerte correlacin que alcanz un
99% de significacin estadstica.

4.4.2.3 Anlisis de ambas subcuencas

Los datos recopilados de ambas subcuencas incluyeron 44 puntos de datos para cada
calidad de agua parmetro. Treinta y dos correlaciones estadsticamente significativas se
identificaron a partir de la posible 90. Sobre la base de 44 puntos de datos, se necesitaba
un valor R de 0.298 para cumplir con una significacin estadstica del 95%. Se encontr
que muchas de las mismas correlaciones para los indicadores de calidad del agua en el
anlisis en ambos sitios eran las mismas que en los anlisis en cada sitio individual. Por
ejemplo, se observ una correlacin estadsticamente significativa para los tres anlisis
de temperatura y DO, turbidez y partculas, y coliformes fecales y enterococos. La Tabla
4.11 identifica todos los valores R para el anlisis en ambos sitios.
Tabla 4.11. Anlisis de correlacin de subcuencas combinadas.

Las correlaciones observadas para ambos sitios fueron muy similares a las correlaciones
encontradas solo para el Arroyo Malagasco. Las correlaciones que difirieron de ambos
anlisis previos incluyeron correlaciones entre DO y DOC, DO y conteos de partculas, y
R. coprophilus y conductividad. Estas correlaciones no se hubieran hipotetizado como
significativas ya que estas correlaciones no se encontraron en los otros dos anlisis, con
las excepciones de DO y DOC que se observaron en el anlisis de Beaman Pond.

4.4.2 Anlisis de ANOVA

El anlisis ANOVA se realiz para determinar las diferencias entre los sitios y las
diferencias entre las estaciones. Para la prueba anterior, la hiptesis nula era que los
medios de los datos para cada constituyente en una subcuenca eran los mismos en cada
sitio. Para la prueba posterior, la hiptesis nula fue que los medios de los datos para cada
componente eran los mismos para cada estacin. La hiptesis nula fue rechazada si el
valor de P fue de 0.05 o menos, alcanzando un nivel de confianza del 95%.

4.4.2.1 Anlisis del sitio para el Arroyo Malagasco

Cinco sitios en la subcuenca del Arroyo Malagasco (AM1 - AM5) tenan cada uno cinco
puntos de datos y el ltimo sitio (MB6) tena tres puntos de datos, totalizando 28 puntos
de datos para el anlisis. Los datos analizados por la Universidad de Massachusetts para
el arroyo Malagasco tenan 22 puntos de datos, donde se tomaron cuatro puntos de datos
en cada uno de los sitios MB1 - MB5, y dos puntos en MB6.
Se encontraron tres parmetros de calidad del agua en la subcuenca del Arroyo
Malagasco. Estadsticamente diferente por sitio. Los parmetros fueron oxgeno disuelto
(valor P = 1.01 10-5), conductividad (valor P = 0.002) y pH (valor P = 6.21 10-4).
Todas las dems medidas de calidad del agua no fueron estadsticamente diferentes segn
el sitio con un nivel de confianza del 95%. No se esperaba una diferencia estadstica en
el pH para el arroyo Malagasco; sin embargo, la distancia entre cada sitio permite
diferencias en la composicin de los materiales circundantes y el uso de la tierra que
puede tener un efecto significativo sobre el pH de una muestra de agua. Se supondra que
el DO de las muestras es estadsticamente diferente en cada sitio debido a las diferentes
caractersticas en cada sitio. Aproximadamente la mitad de los sitios se ubicaron dentro
de reas muy boscosas donde la cantidad de follaje en el agua podra causar que el agua
tenga una alta demanda de oxgeno, mientras que el vertedero cerca de MB3 podra
aumentar las concentraciones de OD. Sin embargo, tambin se plante la hiptesis de que
las diferencias en la materia orgnica seran estadsticamente diferentes por las mismas
razones por las que se esperaba que el DO fuera diferente, y este resultado no se encontr.

4.4.2.2 Anlisis del sitio para estanque Beaman

La subcuenca Beaman Pond tena seis puntos de datos para los sitios HF1 y HF2, y cuatro
datos puntos para el ltimo sitio, HF3, para un total de 16 puntos de datos para anlisis
ANOVA. En el Subcuenca Beaman Pond, basada en un valor P menor o igual a 0.05, dos
de los parmetros de calidad del agua fueron diferentes por sitio. La turbidez vari segn
el sitio con un valor de P de 0.017 y conteos de partculas con un valor de P de 0.002. Los
dos indicadores de material particulado que difieren segn el sitio seran asumidos ya que
cada sitio era muy diferente. El sitio HF1 estaba rodeado por un rea boscosa escasa, el
sitio HF2 estaba cerca de arbustos, pero tambin tena una pila de material de plantas de
desecho cerca, y HF3 estaba en un rea pantanosa. Con la diferencia en la turbidez y el
recuento de partculas, tambin se pueden observar diferencias en TOC y DOC. Esta
diferencia no se hizo entre los sitios.

4.4.2.3 Anlisis estacional

El anlisis estacional se bas en todos los puntos de datos para el arroyo Malagasco y
Subcuencas del estanque Beaman divididas en estaciones. Se analizaron nueve puntos de
datos para la primavera, siete durante el verano, 17 durante el otoo y 11 en el invierno,
totalizando 44 puntos de datos. Hubo menos puntos de datos para los constituyentes
analizados por la Universidad de Massachusetts. Seis puntos de datos menos se analizaron
para el otoo, totalizando 34 puntos de datos para el anlisis estacional.
La Tabla 4.12 muestra los ocho parmetros de calidad del agua que fueron
estadsticamente diferentes en funcin del anlisis estacional. Las diferencias estadsticas
en DO y temperatura se esperaran para el anlisis estacional debido a las obvias
diferencias de temperatura en el clima de Nueva Inglaterra y la correlacin inversa entre
DO y temperatura. Los recuentos de partculas variaron segn la temporada, mientras que
la turbidez no. Este resultado puede demostrar la sensibilidad de los datos de recuento de
partculas en comparacin con la turbidez, que es una medida agregada. Tanto TOC como
UV254 fueron estadsticamente diferentes segn la temporada; sin embargo, DOC no lo
era. Es posible que las tres mediciones no sean necesarias en un plan de muestreo de
cuencas. Por ltimo, los coliformes fecales y los enterococos difieren segn la estacin.
Normalmente, durante las temperaturas ms clidas, los organismos microbiolgicos
pueden vivir y crecer ms fcilmente que durante las temperaturas ms fras cuando los
organismos mueren debido a las duras condiciones de vida.
Tabla 4.12. Estadsticamente diferentes parmetros de calidad del agua por temporada.
Parametros de calidad del agua P Valor
Temperatura 3.14 x 10^-12
DO 7.7x10^-4
Ph 0.017
Uv 0.01
TOC 0.007
 Conteo de Particulas 0.002
Coliformes fecales 2.05x10^-4
Enterococci 0.008

4.5 Resumen
Dentro de la subcuenca del arroyo Malagasco, el vivero tuvo el mayor efecto en el agua
calidad en los sitios MB5 y MB6. En estos sitios, se detectaron altos niveles de carbono
orgnico. En relacin con los niveles elevados de material vegetal, se detect una
demanda de oxgeno en estos mismos sitios, lo que reduce los niveles de OD. Tambin
se encontraron niveles elevados de indicadores icrobiolgicos en los sitios ms aguas
abajo, los niveles ms altos observados en MB3 y MB4. Los indicadores encontrados en
concentraciones ms altas fueron coliformes fecales, enterococos, bifidobacterias
fermentadoras de sorbitol y colifagos de ARN F +. Estos son todos indicadores de
contaminacin por origen humano.
Los indicadores de calidad del agua medidos en la subcuenca Beaman Pond mostraron
altos niveles de conductividad en HF1 y HF3. Es muy probable que estos niveles se deban
a los lixiviados de los sistemas spticos que ingresan al cuerpo de agua. Se encontraron
indicadores microbiolgicos tales como coliformes fecales, enterococos y R. coprophilus
a altas concentraciones en HF2. Esta es una clara indicacin de que los desechos animales
fueron una fuente de contaminacin en el sitio. Sin embargo, los niveles ms altos de
estos indicadores solo se detectaron una vez en este sitio, por lo que la contaminacin de
los caballos no fue un problema recurrente.
Muchas de las observaciones hechas para el anlisis por temporada fueron tpicas de la
temporada cambios y afectos que ocurren debido a esa temporada en particular. Por
ejemplo, la temperatura fue el cambio estacional ms tpico en las dos subcuencas. Segn
las temperaturas estacionales en el rea de Nueva Inglaterra, durante el verano y la
primavera se detectaron temperaturas del agua ms clidas, en las que se encontraron
temperaturas ms fras durante el invierno y el otoo. Sobre la base de esas temperaturas,
se observaron concentraciones de DO con los niveles opuestos.
Tambin se encontraron altas concentraciones de carbono orgnico durante la cada en la
subcuenca del arroyo Malagasco. Esto es tpico de grandes cantidades de follaje de
plantas que caen dentro y alrededor de los cuerpos de agua. Eventualmente, las hojas y
las plantas entran al agua y aaden material orgnico a la fuente de agua. Sin embargo, a
la inversa, se encontraron niveles ms altos de carbono orgnico durante el verano en la
subcuenca del estanque Beaman . Esto se atribuye al hecho de que hay una mayor
actividad externa durante esta temporada que puede provocar un mayor impacto en la
calidad del agua debido a las personas que se encuentran dentro y alrededor de la masa
de agua. En general, cuando se observan altas concentraciones de compuestos orgnicos,
tambin se detectaran altos niveles de material particulado.
Varias de las correlaciones y resultados son tpicos de las relaciones naturales. Por
ejemplo, la correlacin inversa entre DO y temperatura es una relacin bien conocida y
comnmente observada. De forma similar, se espera una correlacin entre la turbidez y
el recuento de partculas ya que ambas son mediciones de la cantidad de slidos dentro
de la muestra de agua. Sin embargo, hubo correlaciones y tendencias que pueden indicar
problemas especficos del sitio con la calidad del agua.

CAPTULO 3
METODOLOGA
Para determinar la calidad fsica, qumica y microbiolgica de las aguas de origen, se
deben utilizar mtodos especficos para el anlisis. Este captulo primero describe el plan
experimental, que incluye un muestreo de campo realizado durante un perodo de 12
meses, mediciones de campo y mediciones de laboratorio. El captulo concluye con los
procedimientos experimentales, que describen las metodologas utilizadas para realizar
los anlisis de muestreo y calidad del agua.

3.1 Diseo Experimental

La calidad de las aguas superficiales, incluidas las caractersticas qumicas, fsicas y
microbiolgicas, se ve afectada por varios factores. Estos factores incluyen aportes de
contaminantes de fuentes puntuales y no puntuales, clima y caractersticas de la cuenca
incluyendo el tamao y flujo de la corriente. Como se discuti en el Captulo 2, la
contaminacin de fuentes no puntuales se ve afectada por el uso de la tierra, la
precipitacin y los cambios estacionales. El impacto de las fuentes no puntuales en un
cuerpo de agua superficial en particular se puede determinar a travs de anlisis de
laboratorio y observaciones de campo. Un anlisis completo de la calidad del agua incluye
observaciones y datos de las cuatro estaciones, as como muestras de clima hmedo y
seco. En esta tesis, se midieron y analizaron varios indicadores de la calidad del agua para
dos subcuencas en la cuenca del embalse de Wachusett en Massachusetts. Tambin se
determin el uso de la tierra alrededor de los cuerpos de agua de la superficie. Se
desarrollaron correlaciones entre los parmetros de calidad del agua. Por ltimo, se
determin la utilidad de varios parmetros de calidad del agua para el abastecimiento de
contaminacin.

Los datos de campo y laboratorio se obtuvieron de dos subcuencas en la cuenca del

embalse de Wachusett: subcuenca del arroyo Malagasco y subcuenca Beaman Pond. Los
registros histricos de DCR mostraron mediciones peridicas de coliformes fecales
elevados en los afluentes de estas subcuencas. En la subcuenca del arroyo Malagasco,
ubicada en West Boylston, se observaron concentraciones elevadas de coliformes fecales
en la confluencia con el embalse de Wachusett.

Numerosos usos de la tierra aguas arriba podran haber contribuido a los niveles
bacterianos elevados. Los usos predominantes de la tierra cerca del arroyo Malagasco son
uso residencial y bosque, como se muestra en la Figura 3.1. Seis sitios de muestra fueron
elegidos a lo largo del Arroyo Malagasco para muestreo de agua. El primer sitio estaba
ubicado en la interseccin de las cabeceras del cuerpo de agua y una calle privada de un
vivero local de plantas. La seccin de la que se tomaron muestras es propiedad de DCR.
El segundo sitio de muestra se localiz aguas abajo del vivero y aguas arriba de un
desarrollo de condominios. El tercer y cuarto sitios de muestreo se ubicaron en el
desarrollo del condominio. El quinto sitio de muestreo estaba ubicado aguas abajo de los
condominios. El sexto sitio de muestreo estaba en la confluencia con el embalse de
Wachusett. Los detalles sobre los sitios de muestreo se proporcionan en la Seccin 4.1.1.

Figura 3.1. Sitios de muestreo del arroyo Malagasco

La subcuenca Beaman Pond se encuentra en Boylston, Massachusetts. Se identificaron

varias fuentes posibles de contaminacin a lo largo del arroyo, incluidos los animales
domsticos y los sistemas spticos. Los usos del suelo dentro del rea de Beaman Pond
Brook se muestran en la Figura 3.2. Junto al arroyo, el uso predominante es la vivienda
residencial, en lotes de a acre.
Se seleccionaron tres sitios de muestra en Lily Ponds a lo largo de la Ruta 110. El primer
sitio se ubic en la propiedad DCR aguas arriba de una pequea granja de caballos. Varias
residencias se encuentran aguas arriba de este sitio. El segundo sitio de muestreo fue
aguas abajo de una pequea granja de caballos con 4 caballos. El tercer sitio de muestreo
se localiz aguas abajo de un rea residencial atendida por sistemas spticos. Una
descripcin completa de los sitios de muestreo se proporciona en la Seccin 4.1.2.

Figura 3.2. Sitios de muestreo del Arroyo del estanque Beaman

Para ambas subcuencas, los sitios de muestreo se seleccionaron para identificar las fuentes
de contaminacin de la mejor manera posible. La seleccin de sitios de muestreo se
realiz en lugares ro arriba y aguas abajo de ciertos usos del suelo que pueden afectar la
calidad del agua, a fin de aislar las reas problemticas. Todos los sitios estaban ubicados
en la interseccin de una carretera y la fuente de agua, o cerca de ella, por lo que los sitios
eran ms accesibles.

Todos los sitios fueron muestreados al menos una vez durante cada temporada, con dos
muestras tomadas en el otoo. Las estaciones se definieron astronmicamente donde se
realizan cuatro divisiones de acuerdo con los equinoccios y solsticios. La primavera se
produce entre el 22 de marzo y el 21 de junio, el verano del 22 de junio al 22 de
septiembre, el 23 de septiembre al 22 de diciembre y el invierno del 23 de diciembre al
21 de marzo. El muestreo durante cada temporada permite la evaluacin de cambios
estacionales de temperatura, uso del suelo, y follaje dentro y alrededor del agua.

Las muestras se tomaron aspticamente de la corriente de una manera para no perturbar

los sedimentos en el lecho del ro. Esto fue importante para asegurar que las muestras
fueran una buena representacin de la fuente de agua. Las muestras tambin se tomaron
primero del sitio que estaba ms abajo y luego secuencialmente en la secuencia. Todas
las muestras se recogieron en botellas de muestreo tratadas en autoclave y se marcaron
con el nmero de sitio de muestra apropiado. Para mantener la muestra no contaminada
por elementos externos distintos del agua de muestra, la tapa se mantuvo cerrada hasta
que se tom la muestra y se volvi a cerrar inmediatamente. Las manos de la muestra
tambin se rociaron con una solucin de alcohol al 50% antes de entregar las botellas.

La conductividad, el oxgeno disuelto y la temperatura se midieron en cada sitio de

muestra usando medidores de campo. Los medidores se estandarizaron el da de uso. Las
sondas se colocaron aguas abajo de donde se recogi la muestra de agua para no influir
en la calidad de la muestra. La conductividad se midi en S de acuerdo con el Mtodo
Estndar 2510 B (APHA et al., 1998). La temperatura se midi en incrementos de 0,1
C usando el Mtodo estndar 2550 B (APHA et al., 1998). Tanto la conductividad como
la temperatura se midieron con un medidor de campo YSI 30 Salinidad-Conductividad-
Temperatura (YSI, Yellow Springs, OH). El oxgeno disuelto se midi por el mtodo del
electrodo de membrana, mtodo estndar 4500-O G (APHA et al., 1998), usando un
medidor de campo DO YSI 95 (YSI, Yellow Springs, OH). Las sondas se colocaron en
el agua hasta que se logr una lectura estable.

Las muestras se llevaron primero al laboratorio en la oficina de DCR en West Boylston,

MA, donde cada muestra se dividi aspticamente en dos muestras de agua. Una muestra
fue transportada a la Universidad de Massachusetts, Amherst y la segunda al Worcester
Polytechnic Institute (WPI). Este estudio se realiz en conjunto con la Universidad de
Massachusetts (UMass) como un estudio ms amplio de seguimiento de fuentes
microbianas. Las muestras de WPI fueron devueltas al Laboratorio de Ingeniera
Ambiental en el campus de WPI. Cada muestra se dividi en dos botellas de muestra
estriles en una campana de flujo laminar.

El primer juego de botellas se mantuvo en un refrigerador o refrigerador y se us para

anlisis microbiolgicos. El segundo conjunto de botellas se dej calentar a temperatura
ambiente y se utiliz para anlisis fsicos y qumicos. Los mtodos de laboratorio
especficos estn documentados en la Seccin 3.2.
3.2 Procedimientos experimentales
Esta seccin proporciona los mtodos analticos realizados en el laboratorio. Todos los
anlisis se realizaron de acuerdo con los mtodos estndar y se realizaron dentro de los
tiempos de espera permitidos de acuerdo con los mtodos estndar (APHA et al., 1998).
Todos los parmetros fsicos y qumicos de la calidad del agua se midieron por duplicado
y los resultados promedio se informan en el Captulo 4. Para las mediciones
microbiolgicas, se sembraron un mnimo de cuatro diluciones y / o volmenes, con tres
repeticiones por dilucin. De nuevo, se informan los resultados promedio (para los
recuentos en los intervalos apropiados segn lo especificado por los mtodos estndar).
Los controles positivos y negativos tambin se completaron.

3.2.1 Turbidez
La turbidez se midi de acuerdo con el Mtodo estndar 2130B (APHA et al., 1998) con
un turbidmetro Hach 2100N (Hach Company, Loveland, CO). El turbidmetro se calibr
cada cuatro meses usando estndares de Calibracin Stabl Cal de menos de 0.1, 20, 200,
1000 y 4000 ntu (Nmero de Catlogo de Estndares de Calibracin de Hach 26621-05).
Para medir la turbidez de las muestras de agua recogidas de los afluentes, las muestras se
dejaron calentar a temperatura ambiente. Cada muestra se invirti suavemente tres veces
antes de transferirla a una celda de muestra de turbidez limpia y aceitada. La celda de
turbidez se coloc en el turbidmetro, y se tom una lectura promedio de los primeros 30
segundos que la celda de muestra se coloc en el turbidmetro. La medida se registr en
unidades de ntu.

3.2.2 Conteos de partculas

La concentracin de partculas en el agua de muestra se determin de acuerdo con el
Mtodo estndar 2560C (APHA et al., 1998) usando un contador de partculas de bloqueo
ligero en el laboratorio (PC 2400 PS, Chemtrac Systems Inc., Norcross, GA). El contador
de partculas puede medir hasta 16,000 partculas por mL en tamaos que varan de 2 a
400 m. Los datos se categorizan en un mximo de 16 rangos de tamao, segn lo
especificado por el usuario. El software (Grabbit 3.11) se configur para cada sitio de
muestra utilizando los valores que se muestran en la Tabla 3.1. Cada muestra se analiz
por duplicado usando 50 ml por ciclo y se categoriz en 15 intervalos de tamao. Los
rangos de tamao se enfocaron en los tamaos ms pequeos (<10 m) ya que se anticip
que los recuentos seran ms altos en estos rangos.
 Tabla 3.1. Valores del software Grabbit 3.11 para Particle Counts.
Volumen de muestra
(mL) 50
Muestra numero 2
Volumen de purga
(mL) 25
2-3, 3-4, 4-5, 5-6, 6-7, 7-8, 8-9,
Canales de tamao
(m) 9-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50,
50-75, 75-100, 100 y mayor

El archivo creado en Grabbit 3.11 se descarg de la computadora al contador de

partculas. El contador de partculas se ajust para tomar el modo de muestra y el caudal
se calibr a 100 ml / min usando un cilindro graduado y un cronmetro. El tubo de entrada
limpio se coloc en un vaso de precipitados que contena aproximadamente 150 ml de la
muestra y el tubo de salida se puso en un cubo de desecho para su eliminacin. Cada
muestra se analiz en funcin de la configuracin del software. Se realiz un anlisis de
agua pura E como indicador de referencia. Las muestras de E-pure tambin se corrieron
entre cada muestra de agua para garantizar que no se produjera el arrastre de las muestras.
Despus de que se procesaron todas las muestras, la informacin se carg nuevamente en
la computadora y se compil en una hoja de clculo.

3.2.3 Absorcin ultravioleta

La absorcin ultravioleta a 254 nanmetros, tambin conocida como UV254, se analiz
de acuerdo con el Mtodo estndar 5910 B (APHA et al., 1998). UV254 es una medida
sustitutiva de la concentracin de materia orgnica en la muestra, ya que muchos
compuestos orgnicos absorben la luz ultravioleta. Las muestras se filtraron de la
siguiente manera. En primer lugar, se prelavaron filtros de microfibra de vidrio (Whatman
GF / F, retencin de 0,7 m) con 30 ml de agua E-pure. Luego, la muestra de temperatura
ambiente se pas a travs del filtro. Los primeros 2 - 5 ml de la muestra se desperdiciaron
y aproximadamente 20 ml de agua de muestra se filtraron y se conservaron para el
anlisis. El espectrofotmetro (espectrofotmetro UV-Visible CARY 50, Varian,
Mulgrave, Victoria, Australia) se ajust a una longitud de onda de 254 nm.
Aproximadamente 4 ml de la muestra filtrada se colocaron en una celda de
espectrofotmetro de vidrio de cuarzo (10 mm, Varian, parte N 6610001100) y luego se
colocaron en el espectrofotmetro para su anlisis. Se analiz una medida duplicada para
cada muestra de agua.

3.2.4 pH

Una medicin del pH por el mtodo electromtrico (Mtodo estndar 4500-H + B, APHA
y col., 1998) es un anlisis de la actividad de iones de hidrgeno en una muestra. Un
medidor de pH (medidor de pH AB15, Fisher Scientific, Hampton, NH) se calibr con
soluciones de tampn 4,00, 7,00 y 10,01. Aproximadamente 20 ml de agua de muestra se
vertieron en un pequeo vaso de precipitados de vidrio. Las sondas de pH y temperatura
se suspendieron en el lquido hasta que el medidor de pH indic que se logr una lectura
estable.

3.2.5 Carbono orgnico total y disuelto

Las muestras de agua se analizaron para determinar el carbono orgnico total (TOC) y el
carbono orgnico disuelto (DOC) de acuerdo con el Mtodo Estndar 5310B (APHA et
al., 1998). Todo el material de vidrio se lav con agua y jabn y luego se lav con cido
en cido sulfrico al 20% antes de su uso. El material de vidrio se sec en un horno a 50
C y se envolvi con papel de aluminio hasta su uso. Para muestras DOC, los filtros de
microfibra de vidrio (Whatman GF / F, retencin de 0,7 m) se prelavaron primero con
30 ml de agua E-pure. Luego, la muestra de agua pas a travs del filtro. Los primeros 5
- 10 ml de muestra se desperdiciaron y luego se filtraron 40 ml en un vial de 40 ml lavado
con cido. Para el anlisis TOC, las muestras se vertieron en viales de 40 ml lavados con
cido sin filtracin. Para los anlisis TOC y DOC, las muestras se acidificaron con 40 L
de HCl 6 N y los viales se taparon con tapas roscadas superiores con septos revestidos
con TFE. Todas las muestras se conservaron a 4 C hasta dos semanas antes del anlisis.
El anlisis se complet en un analizador de TOC utilizando estndares de
hidrogenoftalato de potasio como se describe en las siguientes secciones.

3.2.5.1 Estndar primario e intermedio de la accin

Para producir el estndar de stock primario, se secaron aproximadamente 0.75 g de
hidrogenoftalato de potasio (KHP) en un horno entre 103 - 110C durante 30 minutos y
se enfriaron en un desecador durante 30 minutos. Exactamente 0,5314 g de KHP se
pesaron y se disolvieron en E-pure hasta un volumen total de 250 ml en un matraz aforado.
Este material primario, con una concentracin de 1,000 mg / L de TOC, se almacen en
una botella de cido mbar lavado a 4 C y se us en 4 semanas. El estndar de stock
primario se us para hacer el estndar intermedio. El estndar intermedio de 100 mg / l
se produjo diluyendo 10 ml de la reserva primaria hasta 100 ml con E-pure. Esta norma
se elabor el da en que se analizaron las muestras de TOC y DOC, se almacenaron a 4
C y se descartaron despus de dos das.

3.2.5.2 Estndares de trabajo

Una estimacin de las concentraciones necesarias para los estndares de trabajo fue
determinada por el valor UV254. Los estndares se hicieron en matraces volumtricos de
100 ml lavados con cido. Cada matraz recibi 100 L de HCl 6N. El volumen del
estndar intermedio a ser agregado fue determinado por la concentracin deseada. Para
un estndar de 10 mg / l, se agregaron 10 ml del estndar intermedio y luego se diluyeron
hasta 100 ml con E-pure. Se hizo un estndar de 0 mg / L directamente en los viales de
muestra TOC aadiendo 40 L de HCl 6 N al vial y llenndolo con agua E-pure. Se
prepararon dos conjuntos de curvas de calibracin de tres estndares cada uno para
producir una curva con el mejor ajuste para las muestras analizadas.

3.2.5.3 Anlisis
Los estndares y las muestras se analizaron en un analizador de TOC (TOC-5000A,
Shimadzu, Kyoto, Japn), conectado a un automuestreador (ASI-V, Shimadzu, Kyoto,
Japn). El gas (aire de grado ultra cero) y el horno se encendieron. Mientras que el horno
se calent, todas las muestras y estndares se colocaron en viales de automuestreador
Shimadzu para su anlisis. Cada vial se tap con parafilm y un tapn de plstico
Shimadzu. Los estndares se colocaron alrededor del crculo interno de la bandeja de
muestras automticas etiquetada S1-S8 y las muestras se colocaron alrededor del anillo
exterior, que se numeraron del 1-16. El instrumento fue inspeccionado antes de su uso
para asegurar el funcionamiento correcto. Esta inspeccin incluy revisar la botella de
agua de enjuague, el humidificador, el contenedor de drenaje del deshumidificador, el
contenedor de reactivo IC, el manmetro de gas portador, los medidores de flujo de gas
portador y de burbujeo, y la jeringa de microlitros.

El software del analizador se program para medir los estndares, crear curvas de
calibracin y determinar la concentracin de las muestras en mg / L. Todos los patrones
y muestras se rociaron durante cinco minutos antes del anlisis para eliminar cualquier
dixido de carbono. Luego, cada estndar y muestra se analizaron de tres a cinco veces.
Despus de tres mediciones, se calculan la desviacin estndar y el coeficiente de
variacin. Si los valores estn dentro de los lmites aceptables (200 para la desviacin
estndar y 2.0% para el coeficiente de variacin), entonces el anlisis de la muestra est
completo. De lo contrario, se toma una cuarta o quinta medicin y las tres mejores
medidas seleccionadas por el instrumento. Se produjeron dos curvas de calibracin y el
instrumento seleccion la mejor curva para determinar la concentracin de cada muestra.

3.2.6 Anlisis microbiolgico

Se realizaron dos tipos de anlisis microbianos para determinar la calidad del agua de las
fuentes de agua: la enumeracin de coliformes fecales y enterococos. Las muestras se
analizaron manteniendo tcnicas aspticas como se describe en las siguientes secciones.

3.2.6.1 Tcnica asptica

Todos los suministros y equipos microbiolgicos se esterilizaron antes del uso o se
compraron previamente esterilizados. Las pipetas serolgicas y las placas de Petri se
compraron previamente esterilizadas. Otros artculos de vidrio, plstico y metal usados
para las pruebas microbiolgicas se lavaron con agua jabonosa tibia, se enjuagaron con
agua del grifo y se enjuagaron con E-pure. El material se envolvi o cubri con papel de
aluminio o se tap con tapones de rosca autoclavables, segn corresponda, y luego se
esteriliz en autoclave a 121 C durante entre 15 y 45 minutos, dependiendo del
contenido y volumen de los contenidos.

Las condiciones aspticas se mantuvieron durante los anlisis por varios medios. Todos
los bancos de laboratorio y las superficies utilizadas durante los anlisis microbiolgicos
se rociaron con una solucin de alcohol al 50%. Las manos de las personas que realizaron
los experimentos tambin se rociaron con la solucin de alcohol al 50%. Los artculos
como las pinzas se sumergieron en alcohol al 95% y se pasaron a travs de una llama
antes de cada uso. Las tapas de botellas y cuellos fueron flameados entre cada uso. Se
realizaron muchos pasos de experimentos microbiolgicos en una campana de flujo
laminar donde el aire filtrado fluye hacia la persona que realiza el experimento para que
los organismos de la persona o el aire no puedan contaminar la muestra.
3.2.6.2 Coliformes fecales
Los coliformes fecales se enumeraron utilizando la tcnica de filtracin por membrana,
Mtodo estndar 9222D (APHA et al., 1998). Un filtro de membrana estril de 0.45 m
(Millipore, 47 mm de membrana estril cuadriculada, Billerica, MA) en un embudo de
filtro. Si el volumen de muestra a filtrar era inferior a 10 ml, se agregaron al menos 10 ml
de agua tamponada a la torre de filtro. Luego se agreg el volumen apropiado de la
muestra y se activ la aspiradora. Despus de pasar la muestra a travs del filtro, la torre
se enjuag con 20 a 30 ml de agua tamponada y se mantuvo el vaco hasta que todo el
lquido hubo pasado. Usando pinzas flameadas, el filtro se transfiri a una placa de Petri
de 50 mm con agar m-FC. Cada torre de filtro se enjuag con 20 a 30 ml de agua
tamponada entre cada muestra.

Para cada sitio de muestra, se filtraron cuatro volmenes de agua con tres repeticiones de
cada volumen tomado, junto con placas pre-negativas y posteriores-negativas. Las placas
pre-negativas y posteriores-negativas consistieron en 10 ml de agua filtrada filtrada
procesada antes de que las muestras de agua se filtraran y despus de que todas las
muestras estuvieran terminadas, respectivamente. Estas placas se incubaron para asegurar
que no haba contaminantes en las torres de filtro o en el agua amortiguada antes de filtrar
las muestras y que todos los contaminantes se enjuagaban de la torre despus de filtrar las
muestras. La capacidad de los medios para cultivar colonias (controles positivos) tambin
se control filtrando las diluciones de E. coli e incubndolas para observar el crecimiento.
Todas las placas de Petri se incubaron boca abajo en un bao de agua (Coliform Incubator
Bath, Precision, Winchester, MA) durante 24 2 horas a 44,5 0,2 C. Todas las
muestras se analizaron contando las colonias azules con 10 - 15 aumentos. Tambin se
tomaron recuentos de fondo que incluan cualquier coliforme coliforme no fecal,
observado por su color gris a crema.

3.2.6.3 Enterococos
Las colonias de enterococos se contaron como un posible indicador de la fuente de
contaminacin. Esta prueba se realiz por filtracin con membrana, mtodo estndar
9230C (APHA et al., 1998). Este mtodo es similar a la filtracin de la membrana
coliforme fecal, excepto que se usa peptona en lugar de agua tamponada y los filtros se
colocan inicialmente en agar ME. Se filtraron cuatro volmenes diferentes de cada
muestra con tres repeticiones de cada volumen. Las placas de Petri se incubaron durante
48 horas a 41 0,5 C. Despus de 48 horas, los filtros se transfirieron a placas de agar
de Hierro de Esculina y se mantuvieron a temperatura ambiente durante 20 - 30 minutos.
Las placas se incubaron durante otros 20 minutos a 41 0,5 C. Las muestras se
analizaron contando las colonias de color rojo rosado que haban desarrollado un
precipitado negro en la parte inferior del filtro. Esto se observ usando una lmpara
fluorescente y una lupa.

3.2.6.4 Control positivo

Se analiz un control positivo del crecimiento de E. coli en los medios para confirmar el
crecimiento en el agar m-FC. Esta prueba se realiz mediante filtracin por membrana,
mtodo estndar 9222D (APHA et al., 1998). Se filtraron tres diluciones de E. coli en el
caldo de soja trptico a travs de una torre de filtro estril. Los volmenes filtrados fueron
1 mL de dilucin 10-8, 0.1 mL de dilucin 10-6 y 1 mL de dilucin 10-6. Las placas de
Petri se incubaron a 44.5 0.2 C durante 24 2 horas. Las placas se enumeraron
contando las colonias azules que haban crecido durante el perodo de incubacin.

3.3 Reactivos
Esta seccin describe en detalle los mtodos utilizados para fabricar los reactivos
utilizados en esta investigacin.

3.3.1 Agua de grado reactivo

Se us agua de grado reactivo (E-pure) para todas las mediciones de laboratorio
(desionizador E-puro, Barnstead / Thermolyne, Dubuque, IA). El agua tratada con el
sistema E-pure se alimenta de un sistema ROpure ST (Serie 631, Barnstead / Thermolyne,
Dubuque, IA). El ROpure ST es un sistema de tratamiento de smosis inversa donde las
sales y los compuestos orgnicos sintticos son eliminados por una membrana. Se usan
dos cartuchos en este sistema, membrana de acetato de celulosa y acetato (nmero de
catlogo D6317) y un cartucho de membrana de pelcula delgada compuesto (nmero de
catlogo D6318). E-pure es agua desionizada, donde los iones cargados positivamente
(cationes) y los iones cargados negativamente (aniones) se intercambian por iones de
hidrgeno (H +) e hidroxilo (OH-). Este proceso elimina las impurezas como el calcio y
el sodio. Se utilizan una serie de cuatro cartuchos para producir agua E-pure, un filtro
macropure (nmero de catlogo D0836), un filtro de dos camas de alta capacidad (nmero
de catlogo D0803), un filtro de lecho mixto ultrapuro (nmero de catlogo D5027) y un
filtro orgnico libre (Nmero de catlogo D5021). El agua tambin pasa a travs de un
filtro de 0.2 m. E-pure se fabrica in situ en el laboratorio de WPI.

3.3.2 Agars
La filtracin de membranas para coliformes fecales requiere que el filtro se incube en
agar m-FC. Como este agar no se esteriliza en autoclave, todo el material de vidrio
utilizado para fabricar el agar se someti a autoclave antes de su uso. Exactamente 52 g
de polvo de m-FC se suspendieron en 1 l de E-pure en un matraz Erlenmeyer y se
hirvieron durante un minuto. Se aadi una solucin de cido roslico al 1% de 0,1 g de
cido roslico original disuelto en 10 ml de solucin de NaOH 0,2 N al agar y se hirvi
durante un minuto adicional. El agar se enfri a 47 C en un bao de agua (Isotemp 110,
Fisher Scientific, Pittsburgh, PA). El agar se dispens en placas de Petri de 50 x 9 mm (5
a 6 ml por placa) y se dej enfriar. Los platos se almacenaron en bolsas de plstico selladas
al revs en un refrigerador a 4 C. El pH se verific usando papel de pH para verificar
que era aproximadamente 7,4.

La filtracin de membrana de enterococos requiere que el filtro se incube en agar mE.

Una solucin de 71,2 g de polvo mE suspendido en 1 l de agua pura E se hirvi hasta que
se disolvi. El agar se someti a autoclave en una botella de medios a 121 C y luego se
enfri a 47 C en un bao de agua. Dos sustancias qumicas luego se agregaron al agar.
El primero fue cido nalidxico, para el cual se disolvieron 0,25 g en 5 ml de agua pura E
y se aadieron varias gotas de NaOH 0,2 N a la mezcla para ayudar a disolver el cido
nalidxico. El segundo producto qumico aadido fue 0,15 g de cloruro de 2,3,5 - trifenil
tetrazolio. El agar se dispens en placas de Petri (5 a 6 ml por placa de Petri de 50 x 9
mm), se enfri y se almacen al revs en una bolsa sellada a 4 C. Antes del uso, las
placas se verificaron para un pH de aproximadamente 7,1.

Despus de un perodo de incubacin de 48 horas, los filtros de enterococos se

transfirieron a Esculin Iron agar (EIA). Se suspendieron exactamente 16,5 g de polvo de
EIA en 1 L de agua E-pure. La mezcla se hirvi y se someti a autoclave en una botella
de medios. El agar se enfri en un bao de agua a 47 C y se dispensaron
aproximadamente 5 ml en placas de Petri. Los platos enfriados se almacenaron al revs
en una bolsa sellada a 4 C. Se comprob que el pH era 7.1 antes del uso.

3.3.3 Aguas de dilucin

El agua tamponada se usa en el mtodo de filtracin con membrana coliforme fecal. El
agua tamponada es una solucin que no prohbe ni mejora el crecimiento de los
organismos. Se prepar una reserva de cloruro de magnesio disolviendo 20.275 g de
MgCl2 6H2O a un volumen total de 250 mL de E-pure. Se prepar un tampn de fosfato
comn suspendiendo 8,5 g de KH2PO4 hasta 125 ml de E-pure. El agua amortiguada se
produjo diluyendo 1,25 ml del tampn de fosfato de reserva y 5 ml de cloruro de magnesio
madre hasta 1 L de E-pure. La solucin se esteriliz en autoclave a 121 C tanto en
botellas exprimibles como en botellas de medios.

La peptona es una solucin similar al agua amortiguada ya que el agua no prohbe ni

mejora el crecimiento. La peptona se us para la filtracin de membrana de enterococos.
Con el fin de preparar una solucin de peptona al 0,1%, se disolvi 1 g del polvo seco en
agua pura E hasta un volumen total de 1 l. La solucin se mezcl y luego se autoclav en
botellas comprimidas y botellas de medios y se almacen a 4 C hasta el uso.

3.3.4 Caldo de soja trptico (as)

Con el fin de probar la capacidad de los medios m-FC para crecer coliformes fecales, E.
coli se filtr y se incub utilizando el mismo mtodo que el utilizado para las muestras.
Se cultiv E. coli en caldo de soja trptico (TSB) durante la noche para uso en laboratorio
(Standard Methods, 9211 D, APHA et al., 1998). Treinta gramos de polvo de TSB se
disolvieron en 1 L de agua pura E en un vaso de precipitados. La solucin se calent en
una placa caliente y se mezcl suavemente hasta que el polvo se disolvi por completo.
Cincuenta ml de la solucin se vertieron en matraces agitadores tapados y se sometieron
a autoclave durante 15 minutos a 121 C. Los matraces TSB se conservaron a 4 C y se
calentaron a 35 C antes de su uso.

3.3.4.1 Inoculacin con caldo trptico de soja

Utilizando tcnicas aspticas, los matraces TSB se inocularon con E. coli. Una porcin
del stock congelado de E. coli se transfiri usando un anillo de transferencia de metal
esterilizado. Los matraces inoculados se incubaron durante la noche a 35 C en una mesa
de agitacin a 100 rpm.

3.4 Mtodos estadsticos

Se utilizaron dos mtodos estadsticos para analizar los datos recopilados de los sitios de
muestreo. Se realizaron anlisis de correlacin en los parmetros de calidad del agua
individual para identificar las relaciones dentro de cada subcuenca. Los anlisis de
ANOVA se completaron para determinar las diferencias entre diferentes sitios dentro de
cada subcuenca, as como tambin entre temporadas.

3.4.1 Anlisis de correlacin

El mtodo de Pearson de anlisis de correlacin es una prueba estadstica para determinar
la asociacin lineal entre dos pares de datos. El anlisis no depende de las unidades de los
datos, lo que significa que los datos deben estar estandarizados antes de ejecutar el
anlisis. Los pares de datos se pueden estandarizar usando la ecuacin 3.1 y 3.2.

X i = (Xi X )/SX (Ecuacion 3.1)

Yi = (Yi
Y )/SY (Ecuacion 3.2)

El coeficiente de correlacin, R, es un valor de la relacin lineal entre los pares de datos.

Los valores del coeficiente de correlacin van de -1.00 a +1.00, donde el signo negativo
indica una correlacin negativa y cero indica que no hay correlacin. El coeficiente de
determinacin es la magnitud de la relacin entre dos variables (Statsoft, 2003). La
significacin estadstica del anlisis se determina utilizando una tabla de coeficientes de
correlacin (consulte el Apndice C). Esta tabla tiene en cuenta dos variables al
determinar que el coeficiente de correlacin no se calcul en funcin de pura casualidad.
Las dos variables son el nivel de confianza deseado y el nmero de pares de datos. El
valor P es una medida de la fiabilidad de los datos. El valor P comnmente utilizado en
la investigacin es 0.05, que es significativo en el lmite. Una correlacin
"estadsticamente" significativa tendra un valor P de 0.01 y una correlacin altamente
significativa sera 0.005.
Utilizando el paquete de herramientas de anlisis de datos en Microsoft Excel, se
realizaron anlisis de correlacin en los datos de las dos subcuencas. El anlisis de
correlacin se eligi de las Herramientas de anlisis de datos como se ve en la Figura 3.3.
Los datos se ingresaron en una hoja de trabajo donde los datos para cada uno de los
constituyentes de la calidad del agua se organizaron en columnas, como se muestra en la
Figura 3.4.
 Figura 3.3. Anlisis estadsticos disponibles en el paquete de herramientas de anlisis
de datos de Microsoft.

El resultado del anlisis de correlacin se dirigi a otra hoja donde se gener una tabla
que proporciona los coeficientes de correlacin para los pares de constituyentes medidos.
Como se muestra en la Figura 3.5, solo se llena la mitad de la tabla porque la correlacin
correspondiente a la temperatura de la primera columna y la DO de la segunda fila es la
misma que la temperatura de la primera fila y la DO de la segunda columna. La
correlacin entre los mismos dos componentes es siempre 1. Los coeficientes de
correlacin de Excel se compararon con los valores R en la tabla de coeficientes de
correlacin para determinar si las relaciones eran significativas al nivel de confianza del
95%

Figura 3.4. Entrada para anlisis de correlacin.

 Figura 3.5. Salida de tabla del anlisis de correlacin.

3.4.2 Anlisis de ANOVA

El anlisis de varianza (ANOVA), tambin conocido como prueba F, es un mtodo para
determinar la variacin de los promedios de un grupo de datos o variables para evaluar la
significacin estadstica. Este mtodo, cuando se comparan dos medios, es similar a la
prueba t para muestras independientes. La prueba ANOVA de factor nico supone una
hiptesis nula, H0, que establece que no hay diferencia entre los grupos dentro de la
poblacin, como se muestra en la ecuacin 3.3.
H0 : 1 = 2 = = q = 0 (Ecuacion 3.3)
Si se encuentra que el anlisis es estadsticamente significativo, entonces se rechaza la
hiptesis nula para la hiptesis alternativa. La hiptesis alternativa establece que los
medios de los grupos en la poblacin son diferentes. Para esta investigacin, se utiliz un
valor P de 0.05 para determinar la significacin estadstica.

El paquete de herramientas de anlisis de datos de Microsoft Excel se utiliz para realizar

los anlisis ANOVA. La prueba de factor nico se eligi para el anlisis, como se muestra
en la Figura 3.6. Los datos se organizaron de dos maneras para los anlisis. El primero
fue por sitio de muestreo y el segundo por temporada. La configuracin para probar las
diferencias entre sitios de muestreo se muestra en la Figura 3.7.
 Figura 3.6. El anlisis estadstico en Microsoft Excel se us para el mtodo ANOVA
Figura 3.7. Datos de entrada para el anlisis ANOVA basado en cada sitio de muestreo
de Malagasco.

El resultado del anlisis divide la suma, la media y la varianza de cada grupo de muestreo.
Por ejemplo, la Figura 3.8 muestra el rendimiento de las temperaturas para cada uno de
los seis sitios de muestreo de Malagasco Brook (consulte la tabla "Resumen" en la Figura
3.6). La segunda tabla (tabla "ANOVA") proporciona valores estadsticos entre grupos y
dentro de grupos, incluidas las sumas de cuadrados (SS), los grados de libertad (df), los
cuadrados medios (MS), la variable bajo cuestionamiento (F), probabilidad (valor P) y el
valor crtico de F (F-crtico). Estos valores se calcularon usando las ecuaciones que se
muestran en la Tabla 3.2. Todos los resultados del anlisis de datos para las pruebas
ANOVA se encuentran en el Apndice D

Figura 3.8. Salida del anlisis ANOVA

 Table 3.2. ANOVA ecuaciones.
NOMBRE ECUACION
Suma total de cuadrados xT 2

( )
SST = x 2

N
Suma de cuadrados entre grupos x2 xT 2

( ) ( )
SSb =
n N
Suma de cuadrados dentro de grupos SSW = SST SSb
Grados de libertad entre grupos dfb = (number of groups 1)
Total de grados de libertad dfT = (number of groups 1)
Grandos de libertad dentro de los grupos dfW = dfT dfb
Cuadrados medios entre grupos SSb
MSb =
dfb
Cuadrados medios dentro de grupos SSW
MSW =
dfW
Valor critico de F MSb
F = MS
W
 Captulo 5
Conclusiones y Recomendaciones
Las conclusiones y recomendaciones se basaron en la culminacin del anlisis de los
parmetros de la calidad del agua de las dos sub cuencas hidrogrficas.

5.1 Conclusiones:
Las siguientes secciones proporcionan las conclusiones que se extrajeron de los anlisis
de los parmetros de calidad del agua. La primera seccin describe las conclusiones
extradas de los datos de las dos subcuencas, seguidas de las conclusiones de los anlisis
estadsticos y, por ltimo, las conclusiones basadas en el tipo de uso de la tierra dentro de
las dos subcuencas.

5.1.1 Arroyo Malagasco

Los indicadores de calidad del agua que resultaron ser ms significativos en la subcuenca
del arroyo Malagasco fueron la carga de carbono orgnico y las fuentes humanas de
contaminacin microbiolgica. El carbono orgnico fue una contribucin significativa al
arroyo en esta subcuenca debido a las actividades del vivero cercano, adems de la
ubicacin de los sitios dentro de las reas boscosas. Otros parmetros de calidad del agua
probablemente se vieron afectados por la materia orgnica. El oxgeno disuelto
tpicamente disminuy con mayores cargas de carbono orgnico debido a la demanda de
oxgeno durante la descomposicin de los materiales. El material particulado tambin
aument con niveles crecientes de carbono orgnico. Mayores niveles de conductividad
tambin estuvieron presentes debido a las mayores cantidades de slidos e iones en el
agua. Esto podra ser el resultado de la escorrenta de las carreteras adyacentes que lavan
la sal del camino en el cuerpo de agua.

Los microorganismos generalmente eran ms altos cuando la materia particulada estaba

elevada; los microorganismos pueden adherirse a las partculas slidas. Las
concentraciones ms altas de microorganismos se encontraron en los sitios MB4 y MB5.
Estos sitios se ubicaron dentro de los condominios, lo que es una indicacin de
contaminacin humana debido a los sistemas spticos.
Esta rea estaba ms desarrollada por lo que la contaminacin animal sera mnima.

5.1.2 Estanque Beaman

La subcuenca del estanque Beaman se vio afectada por la contaminacin tanto humana
como animal. Se observaron concentraciones elevadas de R. coprophilus, as como de
coliformes fecales y niveles de enterococos una vez en HF2. R. coprophilus es un
indicador de la contaminacin animal de pastoreo que indicara contaminacin de los
caballos en la granja ro arriba. Sin embargo, esta mayor concentracin de indicadores
microbiolgicos solo se observ una vez, por lo que el problema no fue un resultado
recurrente de los caballos en la granja. Durante las otras fechas de muestreo (incluida la
nica ocasin en que los caballos fueron reubicados fuera de la propiedad) se encontraron
altas concentraciones de contaminacin microbiana en HF1 y HF3. Estos dos lugares se
ubicaron detrs de las residencias que estaban conectadas a los sistemas spticos.
Otros indicadores en la subcuenca del estanque Beaman que se encontraron significativos
incluyeron altos niveles de conductividad y carbono orgnico. Los altos niveles de
conductividad se encontraron con mayor frecuencia en HF1, que puede ser una indicacin
de contaminacin por un desecho. Los nitratos y otros iones excesivos aumentan la
capacidad de los cuerpos de agua, transportar una corriente. Los niveles ms altos de
carbono orgnico tambin fueron tpicos de los patrones estacionales, as como tambin
el aumento de las concentraciones en HF2 a partir del material orgnico que ingresa de la
reserva de desechos en el sitio.

5.1.3 Anlisis estadstico

Las correlaciones encontradas en ambos sitios incluyen: temperatura y DO, DO y TOC,
turbidez y conteo de partculas, coliformes fecales y enterococos. Estas relaciones se
esperaban debido a relaciones investigadas previas y suposiciones acerca de la medicin
del parmetro indicado. Por ejemplo, varios estudios han demostrado la relacin entre la
temperatura y el oxgeno disuelto. Con temperaturas cambiantes, el nivel de saturacin
de DO tambin cambia. El carbono orgnico total y el DOC no tenan una correlacin
significativa en la subcuenca del estanque Beaman. Esto fue posible debido a las
diferencias en las cantidades de carbono orgnico en el estado particulado y disuelto.

Se realizaron anlisis ANOVA para determinar las diferencias por sitio y por
temporada.
Las diferencias estadsticas se encontraron por el sitio en el arroyo Malagasco con pH,
conductividad y OD. Sin embargo, no se encontr una diferencia estadstica en el carbono
orgnico, que puede afectar los niveles de DO. Como se observ carbono orgnico en
concentraciones tan diferentes en los sitios, se podra haber esperado una diferencia. En
el estanque Beaman, solo las mediciones de materia particulada variaron segn el sitio.
Tanto TOC como UV254 resultaron ser estadsticamente significativos por temporadas,
sin embargo, DOC no lo fue. Otros parmetros que variaron segn la estacin fueron
temperatura, OD, pH, conteo de partculas, coliformes fecales y enterococos.

5.1.4 Uso del suelo

Los sitios muestreados en el arroyo Malagasco fueron encontrados en reas boscosas o
en una calle desarrollada. Con base en estos dos usos de la tierra, los indicadores de
calidad del agua fueron consistentes con los resultados hipotticos. En las reas boscosas,
se detectaron niveles ms altos de carbono orgnico debido a la abundancia de materiales
vegetales. Las reas ms desarrolladas mostraron niveles crecientes de contaminacin
basada en fuentes humanas. Estos incluyen no solo contaminacin por contaminacin
microbiolgica sino tambin contaminacin por uso humano. Por ejemplo, los niveles
ms altos de conductividad son producto de la escorrenta de las superficies pavimentadas
que lavan la sal del camino de la temporada invernal en cuerpos de agua superficiales
adyacentes.

Los sitios de estanques Beaman estaban ubicados a lo largo de una carretera desarrollada.
Con la excepcin de la granja de dos acres, la mayora de los lotes se usaron para
viviendas unifamiliares. La granja tuvo el mayor impacto en el sitio directamente aguas
abajo. Los otros dos sitios estaban directamente detrs de viviendas unifamiliares con
sistemas spticos. La contaminacin en estos sitios fue probablemente de sistemas
spticos.

5.2 Recomendaciones
Con base en los anlisis de las dos subcuencas, se realizaron varias observaciones sobre
las fuentes y los tipos de contaminacin en las aguas superficiales. Se pueden realizar
varias mediciones en el agua para determinar la calidad del agua, pero la viabilidad, el
costo y el tiempo pueden evitar el anlisis de todos los parmetros. Se recomienda que
solo se realicen de siete a ocho mediciones cuando se analiza el agua de la superficie en
busca de contaminacin, en lugar de las 14 que se tomaron como muestra en esta tesis.
Mediciones de temperatura, OD, conductividad, pH, DOC, conteo de turbidez o partculas
y coliformes fecales. Estos parmetros se eligen principalmente porque son indicadores
rpidos, simples y de bajo costo para medir la calidad del agua. La temperatura, el OD, la
conductividad y el pH son todas las medidas que se pueden tomar en el campo. Hay
herramientas cientficas disponibles que pueden medir todos estos parmetros. Aunque
UV254 estaba altamente correlacionado con TOC y DOC, los valores absolutos de UV254
estn relacionados no solo con la concentracin de materia orgnica sino tambin con la
composicin de esos compuestos orgnicos. Como UV254 es solo un sustituto de las
concentraciones de carbono orgnico, se recomienda la medicin ms concluyente de
DOC.

Se pueden analizar los conteos de turbidez o partculas. Ambos tenan la misma tendencia
para todos los anlisis, por lo que la base del factor decisivo sera si se necesitaba un
nmero real o si se necesitaba una medicin general de la cantidad de slidos. Los
coliformes fecales se recomiendan para el anlisis sobre los enterococos porque es un
anlisis ms fcil y ms rpido, y ambos producen resultados similares. La enumeracin
de Enterococcus requiere ms trabajo preparatorio para el anlisis, as como plazos muy
especficos para los anlisis. Todos los anlisis realizados por UMass no se
recomendaran para uso de rutina al evaluar la calidad del agua de una superficie de agua.
Las tres pruebas requieren mucho tiempo, son costosas y requieren personal con
conocimiento de la metodologa necesaria para las pruebas. El nico momento en que se
recomendaran estas pruebas es si se han obtenido resultados no concluyentes de los
anlisis previamente discutidos.

Adems de los parmetros medidos en esta tesis, la alcalinidad y el carbono inorgnico

pueden ser tiles para el monitoreo. Estas dos mediciones pueden determinar cambios
en el caudal en la calidad del agua, a diferencia de los efectos del uso de la tierra fuera
de la corriente.

En el pasado, DCR solicit que se retiraran los caballos de la granja en la subcuenca del
estanque Beaman. Los caballos fueron removidos por un corto perodo de tiempo y luego
regresaron al sitio. La eliminacin de los caballos reducira la cantidad de contaminacin
proveniente de la granja; sin embargo, dado que no se encontr que sea un problema
recurrente, la eliminacin puede no ser necesaria. Adems, los sistemas spticos detrs
de las casas deben revisarse para detectar posibles fugas.

En el futuro, se recomienda analizar ms fechas de muestreo. Para muchos de los anlisis,

solo se observ una medida estacional. Adems, tambin se recomienda analizar otros
tipos de reas con diferentes usos de la tierra. El impacto de otros usos de la tierra, como
los usos agrcolas, industriales y comerciales, podra afectar la calidad del agua en gran
medida.
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 Apndice A
Resultados del experimento
Muestra: Arroyo Malagasco

Datos sospechosos debido a una incubacin incorrecta

Muestra: Granja de caballos
 Apndice B
Mapas del lugar del sitio
 Apndice C
Tabla de correlacin estadstica
Adaptado de la fuente en lnea:
Universidad Estatal de Pensilvania. 2004. Correlacin, regresin y
puntos atpicos. Mundo
Wide Web: visitado: 11 de febrero de 2004.
http://www.mne.psu.edu/me82/Learning/Stat_2/stat_2.html.
 Apndice D
Anlisis ANOVA

Subcuenca del arroyo Malagasco

Anova: solo
Factor
Temperatura
RESUMEN
Anova: solo
Factor
DO
RESUMEN

Anova: solo
Factor
Conductividad
RESUMEN
Anova: solo
Factor
pH
RESUMEN