Penetrasi Pernafasan

Seperti pada GIT dan kulit, saluran pernapasan dapat dianggap sebagai permukaan eksternal.
Namun, pada paru-paru, di mana penyerapan gas / uap terjadi, didahului dengan struktur pelindung
(misalnya, hidung, mulut, faring, trakea, dan bronkus), yang dapat mengurangi
toksisitas zat udara, terutama partikel. Terdapat sedikit atau tidak adanya penyerapan dalam
struktur ini, dan volume residu dapat terjadi di situs ini. Namun, lapisan sel Saluran pernapasan
dapat menyerap zat yang dapat menyebabkan respons toksikologi. Tempat penyerapannya, terjadi
di membran alveoli-kapiler yang sangat tipis (0,4-1,5 m). Membran untuk menyeberang dari ruang
alveolar ke darah mencakup: sel tipe I ke membran basal, kemudian ke sel endotel kapiler (Gambar
6.8). Jarak pendek ini memungkinkan terjadinya pertukaran gas / uap yang cepat. Jarak serapan
analog pada kulit adalah 100 sampai 200 m, dan di GIT kira-kira 30 m. Ada juga luas permukaan
yang luas (50 kali luas kulit) yang tersedia untuk penyerapan serta aliran darah yang signifikan, yang
memungkinkan dilakukannya penyesuaian cepat dalam konsentrasi plasma.

Gas / uap harus masuk ke larutan dalam fluida tipis di alveoli untuk terjadi penyerapan sistemik. Jadi,
dosis sering merupakan pengukuran tekanan parsial, yang penting untuk gas / uap.

Toksisitas udara di bedakan menjadi dua jenis senyawa umum, yaitu gas dan aerosol. Senyawa
seperti gas, pelarut, dan uap mengikuti hukum gas dan dapat dibawa dengan mudah ke alveolar.
Senyawa seperti aerosol, partikulat, dan uap tidak mengikuti hukum gas karena dalam bentuk
partikel.

Distribusi Toksik

Sifat Fisikokimia dan Pengikatan Protein

Penyerapan racun ke dalam darah perlu cukup tinggi sehingga akan memiliki efek signifikan pada
tempat beraksi di daerah lain di tubuh. Proses distribusi yang membawa obat terserap ke jaringan
lain bergantung pada berbagai faktor fisiologis dan sifat fisikokimia obat tersebut. Proses ini
merupakan gerakan reversibel dari racun antara darah dan jaringan atau antara kompartemen
ekstraselular dan intraselular. Namun, ada beberapa faktor rumit yang dapat mempengaruhi
distribusi racun. Misalnya, perfusi jaringan adalah proses fisiologis yang penting, karena beberapa
organ lebih baik disembuhkan (mis., Jantung, otak) daripada yang lain (mis., Lemak). Ada juga ikatan
protein yang signifikan yang mempengaruhi pengiriman obat ke jaringan. Untuk lebih memperumit
masalah ini, proses eliminasi seperti ekskresi dan biotransformasi (dibahas di lain waktu) terjadi
bersamaan untuk menghilangkan racun dari darah dan juga lokasi sasaran.

Ada beberapa sifat fisiokimia dari racun yang dapat mempengaruhi

distribusi. Ini termasuk kelarutan lipid, pKa, dan berat molekul, kesemuanya
dijelaskan di awal bab ini (Bagian 6.4). Untuk banyak racun, distribusi dari darah ke jaringan adalah
dengan difusi sederhana ke gradien konsentrasi, dan prinsip penyerapan yang dijelaskan
sebelumnya juga berlaku di sini. Gradien konsentrasi akan dipengaruhi oleh koefisien partisi atau
lebih tepatnya rasio konsentrasi toksik dalam darah dan jaringan. Jaringan massa dan aliran darah
juga akan memiliki pengaruh yang signifikan terhadap distribusi. Misalnya, massa otot yang besar
dapat menyebabkan peningkatan distribusi ke otot, sementara aliran darah terbatas ke jaringan
lemak atau tulang dapat membatasi distribusi. Rasio aliran darah terhadap massa jaringan juga
merupakan indikator yang berguna tentang seberapa baik jaringan perfusi. Jaringan yang
disempurnakan dengan baik meliputi hati, ginjal, dan otak, dan jaringan perfusi rendah termasuk
lemak dan tulang dimana ada eliminasi lambat dari jaringan ini. Distribusi awal ke jaringan yang
disempurnakan dengan baik (mis., Jantung, otak) terjadi dalam beberapa menit pertama, sementara
pengiriman obat ke jaringan lain (mis., Lemak, kulit) lebih lambat.

Jika afinitas untuk jaringan target tinggi, maka bahan kimia akan menumpuk atau
membentuk depot. Keuntungannya di sini adalah jika ini adalah obat, tidak perlu memuat
kompartemen pusat untuk sampai ke tempat yang aktif. Namun, jika reservoir untuk obat memiliki
kapasitas besar dan mengisi dengan cepat, sehingga mengubah distribusi obat yang jumlahnya lebih
besar dari obat yang diperlukan awalnya untuk memberikan konsentrasi yang efektif terhadap terapi
di organ target. Jika ini adalah racun, ini mungkin merupakan fitur yang menguntungkan karena
tingkat toksik pada lokasi target akan berkurang. Secara umum, toksisitas yang tidak larut dalam lipid
tetap berada di cairan plasma dan interstisial, sedangkan toksisitas larut lipid menjangkau semua
kompartemen, dan dapat menumpuk dalam lemak.

Ada hambatan anatomi unik yang bisa membatasi distribusi racun. Contoh klasik penghalang unik
seperti penghalang darah-otak (BBB), yang dapat membatasi distribusi racun ke dalam SSP dan
cairan serebrospinal. Ada tiga proses utama atau struktur yang menjaga konsentrasi obat atau racun
di daerah ini: (1) BBB, yang terdiri dari sambungan ketat endothelial kapiler dan sel glial, mengelilingi
precapillaries, mengurangi filtrasi, dan mensyaratkan bahwa racun tersebut melewati beberapa
membran. untuk sampai ke CSF. (Perhatikan bahwa sel endotel di organ lain dapat memiliki
pankreas interseluler dan vesikula pinositik.). (2) Sistem transportasi aktif di pleksus koroid
memungkinkan pengangkutan asam organik dan basa dari CSF ke dalam darah. (3) Proses produksi
CSF yang terus menerus di ventrikel dan drainase vena terus menerus mengencerkan konsentrasi
toksik atau obat. Proses penyakit seperti meningitis dapat mengganggu penghalang ini dan dapat
memungkinkan penetrasi antibiotik (misalnya aminoglikosida) yang seharusnya tidak mudah
melewati penghalang ini pada individu yang sehat. Hambatan jaringan / darah lainnya termasuk
prostat / darah, testis / darah, dan bola mata / darah, namun peradangan atau infeksi dapat
meningkatkan permeabilitas penghalang ini. Toksinat dapat melewati plasenta terutama dengan
difusi sederhana, dan ini paling mudah dilakukan jika racun tersebut larut dalam lipida (yaitu asam
lemah atau basa lemah). Pandangan bahwa plasenta merupakan penghalang untuk obat dan racun
tidak akurat. Janin, setidaknya sampai batas tertentu, pada dasarnya terkena semua obat meskipun
mereka yang memiliki kelarutan lipid rendah yang terambil dari ibu.

Seperti yang ditunjukkan sebelumnya, sistem peredaran darah dan komponen dalam aliran darah
terutama bertanggung jawab untuk mengangkut toksisitas ke jaringan target. Eritrosit dan getah
bening dapat memainkan peran penting dalam pengangkutan toksik, namun dibandingkan dengan
protein plasma, peran mereka dalam distribusi toksisitas relatif kecil untuk kebanyakan racun.
Pengikatan protein plasma dapat mempengaruhi distribusi karena hanya racun yang tidak terikat
yang bebas atau tersedia untuk menyebar di seluruh membran sel. Reaksi pengikatan protein racun
adalah reversibel dan mematuhi hukum aksi massa:

Biasanya rasio konsentrasi plasma tak terikat (Cu) dari racun terhadap konsentrasi toksik total dalam
plasma (C) adalah fraksi obat yang tidak terikat, fu, yaitu,

Konstanta k1 dan k2 adalah konstanta laju spesifik untuk asosiasi dan disosiasi. Asosiasi konstan Ka
akan menjadi rasio k1 / k2, dan sebaliknya, konstanta disosiasi, Kd akan menjadi k2 / k1. Konstanta
dan parameter sering digunakan untuk menggambarkan dan, yang lebih penting, untuk
membandingkan afinitas relatif xenobiotik untuk protein plasma.

Banyaknya protein yang beredar, tapi yang terlibat dalam xenobiotik mengikat meliputi albumin,
glikoprotein asam-a11, lipoprotein, dan globulin. Karena banyak racun yang bersifat lipofilik, mereka
cenderung mengikat plasma - dan -lipoprotein. Terutama ada tiga kelas lipoprotein, yaitu high-
density lipoprotein (HDL), lowdensity lipoprotein (LDL), dan low density lipoprotein (VLDL). Besi dan
tembaga diketahui saling berinteraksi kuat dengan ikatan globin dan globin yang mengikat logam
dan ceruloplasmin. Obat-obatan asam terutama terikat pada albumin, dan obat-obatan dasar
terutama terikat pada glikoprotein asam-a1-asam dan -globulin. Albumin membentuk 50%
protein plasma total, dan ia bereaksi dengan berbagai macam obat dan toksik. Glikoprotein
asam 1 tidak memiliki banyak situs pengikatan seperti albumin, namun memiliki satu situs
pengikatan afinitas tinggi. Jumlah obat toksik yang terikat bergantung pada konsentrasi obat
bebas, dan afinitasnya untuk tempat pengikatan, dan konsentrasi protein. Pengikatan protein
plasma bersifat nonselektif, dan karena itu toksisitas dan obat-obatan dengan karakteristik
fisikokimia serupa dapat saling bersaing satu sama lain dan zat endogen untuk tempat pengikatan.
Mengikat protein ini tidak serta merta mencegah racun tersebut mencapai lokasi tindakan, namun
memperlambat laju di mana toksik mencapai konsentrasi yang cukup untuk menghasilkan efek
toksikologi. Sekali lagi, ini terkait dengan fraksi racun apa yang bebas atau tidak terikat (fu).

Toksinat kompleks dengan protein oleh berbagai mekanisme. Pengikatan kovalen mungkin memiliki
efek yang diucapkan pada organisme karena modifikasi molekul penting, namun ikatan semacam itu
biasanya merupakan bagian yang sangat kecil dari dosis total. Pengikatan nonkovalen sangat penting
untuk distribusi karena toksisitas atau ligan dapat terdisosiasi lebih mudah daripada yang bisa diikat
kovalen. Dalam kasus yang jarang terjadi, ikatan nonkovalen mungkin sangat stabil sehingga racun
tetap terikat selama berminggu-minggu atau bulan, dan untuk semua tujuan praktis, ikatan tersebut
setara dengan yang kovalen. Jenis interaksi yang menyebabkan pengikatan noncovalent di bawah
kondisi fisiologis yang tepat meliputi ikatan ion, ikatan hidrogen, gaya van der Waals, dan interaksi
hidrofobik. Namun, ada beberapa logam transisi yang memiliki konstanta asosiasi tinggi dan disosiasi
yang lambat.

Kita tahu lebih banyak tentang interaksi ligan protein saat ini karena banyak penelitian mengikat
protein yang dilakukan dengan obat-obatan. Perbedaan utama antara obat-obatan dan kebanyakan
racun adalah ionisasi yang sering terjadi dan kelarutan obat dalam jumlah tinggi dibandingkan
dengan non-ionizability dan kelarutan lipid yang tinggi pada banyak zat toksik. Jadi, pengalaman
dengan obat-obatan membentuk latar belakang yang penting, tapi satu hal yang mungkin tidak
selalu relevan dengan senyawa beracun lainnya.

Variasi fitur kimia dan fisik dapat mempengaruhi pengikatan konstituen plasma. Tabel 6.4
menunjukkan hasil studi pengikatan dengan sekelompok insektisida dengan perbedaan kemampuan
air dan lipida yang sangat berbeda. Afinitas albumin dan lipoprotein berbanding terbalik dengan
kelarutan dalam air, meski hubungannya mungkin tidak sempurna. Hidrokarbon diklorinasi mengikat
kuat ke albumin tapi bahkan lebih kuat untuk lipoprotein. Organofosfat lipofilik yang kuat mengikat
kedua kelompok protein, sedangkan senyawa yang lebih mudah larut terutama terikat pada
albumin. Senyawa yang paling larut dalam air tampaknya terutama diangkut dalam fase berair.
Chlordecone (Kepone) memiliki karakteristik partisi yang menyebabkannya mengikat di hati,
sedangkan DDE, metabolit DDT, partisi menjadi depot lemak. Dengan demikian, implikasi toksikologi
kedua senyawa ini mungkin sangat berbeda.

Meskipun pengikatan yang sangat spesifik (tinggi afinitas, berkapasitas rendah) lebih sering terjadi
pada obat-obatan, contoh pengikat khusus untuk racun cenderung tidak umum. Tampaknya
kemungkinan afinitas rendah, pengikatan berkapasitas tinggi menggambarkan sebagian besar kasus
pengikatan racun. Jumlah situs pengikatan hanya dapat diperkirakan, seringkali dengan kesalahan
yang cukup besar, karena sifat interaksi yang tidak spesifik. Jumlah molekul ligan atau racun yang
terikat pada molekul protein, dan jumlah maksimum tempat pengikatan, n, menentukan kapasitas
definitif protein. Pertimbangan lain adalah afinitas mengikat Kbinding (atau 1 / Kdiss). Jika protein
hanya memiliki satu situs pengikat untuk racun, satu nilai tunggal, ikatan K, menggambarkan
kekuatan interaksi. Biasanya lebih dari satu situs pengikat ada, masing-masing situs memiliki
konstanta pengikatan intrinsiknya, k1, k2,. . . , kn. Jarang ada yang menemukan kasus dimana k1 = k2
=. . . = kn, di mana satu nilai akan menggambarkan konstanta afinitas di semua lokasi. Hal ini
terutama terjadi ketika kekuatan pengikat hidrofobik dan van der Waals berkontribusi terhadap
pengikatan afinitas nonspesifik dan rendah. Jelas sifat kimia dari situs pengikat sangat penting dalam
menentukan ikatan. Struktur molekul threedimensional dari situs pengikatan, lingkungan protein,
lokasi umum dalam keseluruhan molekul protein, dan efek alosterik adalah semua faktor yang
mempengaruhi pengikatan. Studi dengan racun, dan studi yang lebih ekstensif lagi dengan obat-
obatan terlarang, telah memberikan penjelasan yang memadai mengenai faktor-faktor ini. Mengikat
tampaknya terlalu rumit suatu fenomena yang harus digambarkan secara akurat oleh satu rangkaian
persamaan.

Ada banyak metode untuk menganalisis pengikatan, tapi keseimbangan dialisis adalah yang paling
banyak digunakan. Sekali lagi, fokus dari penelitian ini adalah untuk menentukan persentase
toksisitas yang terikat, jumlah situs pengikatan (n), dan konstanta afinitas (Ka). Contoh yang disajikan
di sini sangat disederhanakan untuk menghindari kebingungan yang tidak semestinya yang
ditimbulkan oleh subjek yang sangat kompleks.

Kompleks protein beracun yang memanfaatkan ikatan yang relatif lemah (energi dari orde ikatan
hidrogen atau kurang) mudah diasosiasikan dan dipisahkan pada suhu fisiologis, dan hukum
tindakan massa berlaku terhadap ekuilibrium termodinamika:

Di mana K mengikat adalah konstanta kesetimbangan untuk asosiasi, [TP] adalah konsentrasi molar
kompleks protein racun, [T] adalah konsentrasi molar toksik bebas, dan [P] adalah konsentrasi molar
protein bebas. Persamaan ini tidak menggambarkan lokasi pengikatan atau afinitas pengikatan.
Untuk memasukkan parameter ini dan memperkirakan sejauh mana plot komposit double-reciprocal
1 / [TP] versus 1 / [T] dapat digunakan untuk menguji spesifisitas pengikatan. Istilah 1 / [TP] juga bisa
diartikan sebagai tahi lalat albumin per mol toksik. Kemiringan garis lurus sama dengan 1 / nKa dan
pencegatan garis ini dengan sumbu x sama dengan -Ka. Garis regresi yang melewati titik asal
menyiratkan pengikatan tak terbatas, dan keabsahan menghitung konstanta afinitas dalam keadaan
ini dipertanyakan. Gambar 6.10 mengilustrasikan satu kasus dengan empat pestisida, dan sisipan
tersebut mengilustrasikan sifat pengikatan yang rendah, "tidak dapat dideklarasikan", dalam contoh
ini.

Dua kelas interaksi protein toksik yang dihadapi dapat didefinisikan sebagai (1) spesifik, afinitas
tinggi, kapasitas rendah, dan (2) nonspesifik, afinitas rendah, kapasitas tinggi. Istilah afinitas tinggi
menyiratkan konstanta afinitas (Kbinding) dari urutan 108 M-1, sedangkan afinitas rendah
menyiratkan konsentrasi 104 M-1. Pengikatan afinitas nonspesifik, afinitas rendah mungkin paling
khas dari senyawa nonpolar, walaupun kebanyakan kasus tidak ekstrem seperti yang ditunjukkan
pada Gambar 6.10.

Perlakuan alternatif dan diterima dengan baik untuk studi pengikatan adalah persamaan Scatchard
terutama dalam situasi ikatan afinitas tinggi:

yang disederhanakan untuk perkiraan grafik

dimana adalah mol ligan (racun) yang terikat per mol protein, [T] adalah konsentrasi toksik bebas,
k adalah konstanta afinitas intrinsik, dan n adalah jumlah situs yang menunjukkan afinitas tersebut.
Bila [T] diplotkan melawan , sebuah garis lurus diperoleh jika hanya satu kelas pengikatan yang
terbukti. Kemiringannya adalah -k, dan intersep pada sumbu menjadi n (jumlah tempat
pengikatan). Jika lebih dari satu kelas situs terjadi (mungkin situasi yang paling umum untuk racun),
kurva diperoleh dari mana konstanta dapat diperoleh. Ini diilustrasikan pada Gambar 6.10b, dimana
data menunjukkan tidak satu tapi dua spesies situs pengikatan: satu dengan kapasitas rendah tapi
afinitas tinggi, dan satu lagi dengan kapasitas sekitar tiga kali tetapi kurang afinitas. Biasanya
program komputer yang digunakan biasanya memecahkan data tersebut dengan menentukan satu
baris untuk pengikatan spesifik dan satu baris untuk pengikatan nonspesifik, yang terakhir menjadi
rata-rata banyak solusi yang mungkin.
Bila pengikatan hidrofobik dari racun lipid terjadi, seperti halnya banyak kontaminan lingkungan,
pengikatan mungkin tidak terbatas pada satu jenis protein plasma. Misalnya, pengikatan DDT
hidrokarbon terklorinasi sangat kuat untuk lipoprotein dan albumin, namun protein lain
memperhitungkan bagian penting dari keseluruhan transportasi. Hasil serupa telah diamati untuk
beberapa senyawa dengan berbagai sifat fisiokimia.

Kehadiran racun dan / atau obat lain yang dapat mengikat di tempat yang sama juga dapat
meningkatkan jumlah obat bebas atau tidak terikat. Ini adalah contoh interaksi obat yang dapat
menimbulkan konsekuensi toksikologi atau farmakologis yang serius. Secara umum, bila konsentrasi
terikat kurang dari 90% dari total konsentrasi plasma, pengikatan protein plasma kurang penting
secara klinis. Pengikatan protein plasma menjadi penting bila lebih dari 90%. Misalnya, jika racun
99% terikat pada protein plasma, maka 1% bebas, namun jika ada interaksi racun (misalnya, ikatan
kompetitif) yang menghasilkan 94% terikat, 6% sekarang bebas. Perhatikan bahwa karena interaksi
ini, jumlah toksisitas yang tersedia sehingga menyebabkan respons toksikologis meningkat enam kali
lipat. Skenario semacam itu dapat menyebabkan toksisitas akut parah. Pengikatan protein plasma
yang ekstensif dapat mempengaruhi pembersihan ginjal jika filtrasi glomerulus adalah proses
eliminasi utama di ginjal, namun tidak jika dilakukan dengan sekresi aktif di ginjal. Pengikatan juga
dapat mempengaruhi pembersihan obat jika rasio ekstraksi (ER) di hati rendah, namun tidak jika
UAB tinggi untuk racun tersebut. Pengikatan protein plasma dapat bervariasi antara dan di dalam
kelas kimia, dan juga spesifik spesies. Misalnya, manusia cenderung mengikat obat asam secara lebih
luas daripada spesies lainnya.

Ada beberapa variabel lain yang dapat mengubah konsentrasi protein plasma. Ini termasuk
kekurangan gizi, kehamilan, kanker, abses hati, penyakit ginjal, dan usia bisa mengurangi albumin
serum. Selanjutnya konsentrasi 1-glikoprotein dapat meningkat seiring bertambahnya usia,
pembengkakan, infeksi, obesitas, gagal ginjal, dan stres. Perubahan kecil pada suhu tubuh atau
perubahan keseimbangan asam basa dapat mengubah karakteristik pengikatan protein kimia.
Meskipun penghentian efek obat atau racun biasanya dilakukan dengan biotransformasi dan
ekskresi, hal itu mungkin juga terkait dengan redistribusi dari tempat kerjanya ke jaringan lain.
Contoh klasik dari hal ini adalah ketika obat yang sangat larut dalam lipid atau racun yang bekerja
pada otak atau sistem kardiovaskular diberikan oleh IV atau dengan menghirup.