Unit de recherche REBX

Equipe CARMA
50 avenue de Verdun
33612 CESTAS Cedex

MISE EN UVRE DE LA DIRECTIVE CADRE EUROPEENNE SUR LEAU POUR

LES PLANS DEAU

Echantillonnage des communauts de

phytobenthos en plans deau

Prambule
Cette proposition s'appuie sur des documents prexistants tels que la norme CEN EN
13946 : 2010, des rapports et publications issus de travaux scientifiques et techniques ou
d'analyses bibliographiques des mthodes europennes actuellement disponibles, et sur les
acquis concrets actuellement disponibles en matire de droulement des campagnes de
terrain.
Le prsent document dcrit une mthode dchantillonnage des communauts de
phytobenthos en plans deau douce. Cette mthode vise fournir des donnes adaptes
lvaluation de ltat cologique des plans deau dans le cadre de la mise en uvre de la
DCE. Elle est base sur les communauts de diatomes benthiques et sapplique aux plans
deau douce naturels ou dorigine anthropique faiblement marnants, cest--dire dont
lamplitude maximale du marnage annuel est de lordre de 2 m. Cette mthode ne sapplique
pas aux plans deau fortement marnants, les communauts de diatomes benthiques ne
reprsentant, dans ces conditions hydrologiques particulires, que trs partiellement ltat
cologique global des plans deau.
1 Principe
Les diatomes benthiques, prsentes sur les macrophytes (la base immerge des
hlophytes) ou sur des supports inertes durs dans les plans deau, sont prleves afin de
produire des chantillons reprsentatifs du peuplement diatomique en place considr
comme un indicateur de la qualit de leau. Les chantillons sont purifis laide doxydants
puissants pour prparer les diatomes en vue de leur identification et de leur dnombrement.
Les donnes obtenues par lanalyse microscopique de ces chantillons permettent de
produire des indices de qualit deau bass sur les diatomes.
Les diatomes sont des algues brunes microscopiques pourvues dun squelette siliceux
(frustule) constitu de deux valves. On distingue les diatomes benthiques vivant
accroches sur des supports, et les diatomes phytoplanctoniques qui vivent en suspension
dans la colonne deau. Le protocole dchantillonnage prsent dans ce document concerne
uniquement les communauts de diatomes benthiques.

2 Mthode dchantillonnage
2.1 Priode dtude
Les prlvements de diatomes benthiques seront raliss simultanment avec
lchantillonnage des communauts de macrophytes, durant la priode prcise dans la
norme XP T90-328 (dcembre 2010). A lchelle dun plan deau, la ralisation des relevs
de diatomes et de macrophytes devra obligatoirement faire l'objet d'une campagne de
terrain unique sans discontinuit des jours. Si une interruption des relevs est invitable, elle
ne doit pas dpasser une semaine.

2.2 Positionnement des sites dtude

Les sites de prlvement du phytobenthos seront positionns au niveau des units
dobservation choisies pour ltude des communauts de macrophytes, telles quelles sont
dcrites dans la norme XP T90-328 (dcembre 2010).

2.3 Substrats chantillonner

Lchantillonnage doit se faire si possible sur 2 types de substrat :
- Echantillonnage sur substrat minral dur,
- Echantillonnage sur les tiges de macrophytes (hlophytes).

Les deux types de substrat doivent tre chantillonns et conditionns sparment

sur chaque unit dobservation.

DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 2
2.3.1 Substrat minral dur
Lchantillonnage doit se faire de prfrence sur des lments granulomtriques de
grande taille tels que des blocs rocheux ou des galets. A dfaut, prlever sur d'autres
substrats inertes constamment immergs tels que la partie infrieure de boues, etc. Eviter
l'chantillonnage sur bois mort ou tout substrat en dcomposition. Eviter de prlever
lintrieur des herbiers de macrophytes.
Prlever au minimum sur 5 supports, quivalant une surface finale de 100 cm, pris au
hasard. Les supports choisis doivent tre immergs une profondeur comprise dans la zone
euphotique et ne doivent pas tre prlevs plus de 50 cm de profondeur (Cf. Annexe 1).
Pralablement l'chantillonnage, il sera ncessaire de s'assurer de cette dure
d'immersion en se renseignant sur l'volution rcente du niveau des eaux du plan d'eau. Les
prlvements ne doivent pas tre raliss proximit directe des rives, en bordure des
eaux, dans la zone o lagitation de leau lie un batillage trop important est susceptible
dinfluencer les communauts prsentes.

2.3.2 Substrat macrophytes

L'chantillonnage doit se faire sur des macrophytes dont au moins la base est immerge
de manire permanente, si possible sur hlophytes (notamment Phragmites australis).
Pour un plan d'eau donn, lchantillonnage devra tre fait sur des macrophytes du mme
type biologique1, et, si possible, sur le mme taxon.
Il ne devra pas tre ralis sur des macrophytes libres ou dbris de macrophytes flottants ou
immergs ni au sein d'herbiers denses.
Il faudra privilgier des macrophytes isoles ou la priphrie des herbiers denses en
contact avec leau libre.
Sur un minimum de 5 macrophytes pris au hasard, si possible sur des pousses de l'anne,
prlever des segments de tiges dune dizaine de cm de longueur ayant t immergs au
moins depuis une priode dpassant 4 6 semaines. Pralablement l'chantillonnage, il
sera ncessaire de s'assurer de cette dure d'immersion en se renseignant sur l'volution
rcente du niveau des eaux du plan d'eau. Ces segments de tige devront tre localiss dans
les 20 premiers cm sous la surface de l'eau (Cf. Annexe 1).
Les tiges recouvertes par plus de 75% dalgues filamenteuses ne devront pas tre
prleves.

Si aucun substrat dcrit prcdemment nest prsent au niveau dune unit dobservation, il
est possible de dplacer le site de prlvement du phytobenthos. Le nouveau site de

1
Hlophyte, amphiphyte, hydrophyte immerge, hydrophyte feuilles flottantes

DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 3
prlvement du phytobenthos devra tre positionn au niveau dune rive appartenant au
mme type que lunit dobservation dorigine et les coordonnes gographiques du nouveau
site devront tre enregistres et notes sur les fiches de terrain.

2.4 Prlvements
Les diatomes seront prleves sur toute la surface des segments de tiges ou sur la face
suprieure des substrats durs au moyen dune brosse ou dun couteau. Elles seront
rcupres par rinage dans des flacons ou piluliers dissocis pour chaque type de support.

Des fiches de recueil de donnes de terrain sont proposes en Annexe 2.

Les informations suivantes sont ncessaires lexploitation des donnes, elles seront
prsentes dans le rapport final :
la date des observations
le numro de lunit dobservation o les prlvements ont t effectus
le type et le nombre de supports prospects

Toute information susceptible daider linterprtation des rsultats ou tout cart

lapplication du protocole, comme par exemple le dplacement dun site de prlvement,
devront galement tre indiqus sur la fiche de terrain. Il est galement recommand de
prendre des photographies des sites dchantillonnage.
Pour une unit d'observation donne, le temps spcifiquement consacr la ralisation des
prlvements de phytobenthos pour une personne sera variable selon les difficults de
rcolte ou d'accs aux substrats adquats pour lchantillonnage, mais il ne devrait pas
dpasser quelques dizaines de minutes.

2.5 Conservation des chantillons

Pour chaque unit dobservation, regrouper :
- les 5 prlvements sur "substrat minral dur" dans un seul flacon labellis et
indiquer sur le flacon : la localisation prcise (au minimum nom du plan deau et
numro de lunit dobservation), la date, le(s) substrat(s) chantillonn(s)
(cailloux, galets, bloc rocheux, etc.).
Remplir le flacon avec de leau du site dchantillonnage.
- les 5 prlvements sur "substrat macrophytes" dans un seul flacon labellis et
indiquer sur le flacon : la localisation prcise (au minimum nom du plan deau et
numro de lunit dobservation), la date, le(s) substrat(s) chantillonn(s), la
caractrisation des macrophytes le cas chant (au minimum le type biologique et
si possible le nom du (des) taxon(s)).
Remplir le flacon avec de leau du site dchantillonnage.
DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 4
Y ajouter un agent de conservation (type lugol, formol) 4% v/v, et conserver si
possible temprature ambiante et l'abri de la lumire.

3 Prparation, observation et comptages

Les phases de prparation des lames, dinventaire des taxons et darchivage des donnes
sont dtailles dans le paragraphe 8 de la norme NF T90-354 (dcembre 2007) pour la
dtermination de lIndice Biologique Diatomique (IBD).

La liste des taxons accompagns de leur dnombrement exprim en abondance sera fournie
dans le rapport final. Les dtails ayant pu influencer les rsultats devront galement tre
prciss dans le rapport.

DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 5
 -- Annexe 1 --
Recommandations pour l'chantillonnage

Substrat minral dur :

Zone
dagitation
des eaux

Zone de
prlvements

Prof ondeur
incluse dans
la zone
euphotique,
50 cm max.

DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 6
Substrat macrophytes :

Ne pas
prlever sur
hlophyte Jeunes
snescente hlophytes
prlever Section
dhlophyte
prlever
(~ 10 cm)

Prof ondeur
maximale du
prlvement :
20 cm

Daprs Valade D., Proposition d'une mthode d'chantillonnage du phytobenthos en plan

d'eau. Cemagref, UR REBX. 2010.

Rive
Eau

Echantillonner en
priphrie ou sur
plantes isoles
(zone de bordure en Herbier
vert soutenu) Ne pas dhlophytes
chantillonner
au centre

DCE Plan deau Phytobenthos Irstea REBX Version 1.2 Fvrier 2013 7
 -- Annexe 2 --
Fiche de terrain

Informations gnrales
Nom du plan deau : N Unit dObservation :

Organisme / Oprateur : Date :

Substrats slectionns (type biologique et/ou taxon). Si autre que macrophyte, prciser :

Profondeur maximale de la zone dchantillonnage :

Physico-chimie du plan deau (facultatif) :

Temprature : pH :

O2 dissous en mg/L : Saturation en O2 (%) : Conductivit (S/cm) :

Informations complmentaires
Impacts humains visibles : oui / non

Distance de la rive (m) :

Transparence au disque de Secchi :

Commentaires / Prcisions

Photo (souhaite) fichier joindre

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