Enlace fosfodister. El grupo fosfato (PO43-) une el carbono 5' del azcar de un nuclesido
con el carbono 3' del siguiente.
Su frmula qumica es H3PO4. Cada nucletido puede contener uno (monofosfato: AMP),
dos (difosfato: ADP) o tres (trifosfato: ATP) grupos de cido fosfrico, aunque como
monmeros constituyentes de los cidos nucleicos slo aparecen en forma de
nuclesidos monofosfato.
Desoxirribosa:
Es un monosacrido de 5 tomos de carbono (una pentosa) derivado de la ribosa, que
forma parte de la estructura de nucletidos del ADN. Su frmula es C5H10O4. Una de las
principales diferencias entre el ADN y el ARN es el azcar, pues en el ARN la 2-
desoxirribosa del ADN es reemplazada por una pentosa alternativa, la ribosa.25
Las molculas de azcar se unen entre s a travs de grupos fosfato, que forman enlaces
fosfodister entre los tomos de carbono tercero (3, tres prima) y quinto (5, cinco
prima) de dos anillos adyacentes de azcar. La formacin de enlaces asimtricos implica
que cada hebra de ADN tiene una direccin. En una doble hlice, la direccin de los
nucletidos en una hebra (3 5) es opuesta a la direccin en la otra hebra (5 3).
Esta organizacin de las hebras de ADN se denomina antiparalela; son cadenas
paralelas, pero con direcciones opuestas. De la misma manera, los extremos asimtricos
de las hebras de ADN se denominan extremo 5 (cinco prima) y extremo 3 (tres
prima), respectivamente.
Bases nitrogenadas:
Las cuatro bases nitrogenadas mayoritarias que se encuentran en el ADN son la adenina
(A), la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T). Cada una de estas cuatro bases est
unida al armazn de azcar-fosfato a travs del azcar para formar el nucletido completo
(base-azcar-fosfato). Las bases son compuestos heterocclicos y aromticos con dos o
ms tomos de nitrgeno, y, dentro de las bases mayoritarias, se clasifican en dos
grupos: las bases pricas o purinas (adenina y guanina), derivadas de la purina y
formadas por dos anillos unidos entre s, y las bases pirimidnicas o bases pirimdicas o
pirimidinas (citosina y timina), derivadas de la pirimidina y con un solo anillo.25 En los
cidos nucleicos existe una quinta base pirimidnica, denominada uracilo (U), que
normalmente ocupa el lugar de la timina en el ARN y difiere de sta en que carece de un
grupo metilo en su anillo. El uracilo no se encuentra habitualmente en el ADN, slo
aparece raramente como un producto residual de la degradacin de la citosina por
procesos de desaminacin oxidativa.
Adenina: 6-aminopurina.
Adenina:
En el cdigo gentico se representa con la letra A. Es un derivado de la purina con un
grupo amino en la posicin 6. Forma el nuclesido adenosina (desoxiadenosina en el
ADN) y el nucletido adenilato o (desoxi)adenosina monofosfato (dAMP, AMP). En el ADN
siempre se empareja con la timina de la cadena complementaria mediante 2 puentes de
hidrgeno, A=T. Su frmula qumica es C5H5N5 y su nomenclatura 6-aminopurina. La
adenina, junto con la timina, fue descubierta en 1885 por el mdico alemn Albrecht
Kossel.
Las protenas estructurales que se unen al ADN son ejemplos bien conocidos de interacciones
inespecficas ADN-protenas. En los cromosomas, el ADN se encuentra formando complejos con
protenas estructurales. Estas protenas organizan el ADN en una estructura compacta
denominada cromatina. En eucariotas esta estructura implica la unin del ADN a un complejo
formado por pequeas protenas bsicas denominadas histonas, mientras que en procariotas
estn involucradas una gran variedad de protenas.82 83 Las histonas forman un complejo de forma
cilndrica denominado nucleosoma, en torno al cual se enrollan casi dos vueltas de ADN de doble
hlice. Estas interacciones inespecficas quedan determinadas por la existencia de residuos bsicos
en las histonas, que forman enlaces inicos con el esqueleto de azcar-fosfato del ADN y, por
tanto, son en gran parte independientes de la secuencia de bases.84 Estos aminocidos bsicos
experimentan modificaciones qumicas de metilacin, fosforilacin y acetilacin,85 que alteran la
fuerza de la interaccin entre el ADN y las histonas, haciendo al ADN ms o menos accesible a los
factores de transcripcin y por tanto modificando la tasa de transcripcin.86
Otras protenas que se unen a ADN de manera inespecfica en la cromatina incluyen las protenas
del grupo de alta movilidad (HMG, High Mobility Group) que se unen a ADN plegado o
distorsionado.87 Estas protenas son importantes durante el plegamiento de los nucleosomas,
organizndolos en estructuras ms complejas para constituir los cromosomas88 durante el proceso
de condensacin cromosmica. Se ha propuesto que en este proceso tambin intervendran otras
protenas, formando una especie de "andamio" sobre el cual se organiza la cromatina; los
principales componentes de esta estructura seran la enzima topoisomerasa II (topoIIalpha) y la
condensina 13S.89 Sin embargo, el papel estructural de la topoIIalpha en la organizacin de los
cromosomas an es discutido, ya que otros grupos argumentan que esta enzima se intercambia
rpidamente tanto en los brazos cromosmicos como en los cinetocoros durante la mitosis.90
Interacciones especficas[editar editar cdigo]
Un grupo bien definido de protenas que unen ADN es el conformado por las protenas que se
unen especficamente a ADN monocatenario o ADN de hebra sencilla (ssDNA). En humanos, la
protena A de replicacin es la mejor conocida de su familia y acta en procesos en los que la
doble hlice se separa, como la replicacin del ADN, la recombinacin o la reparacin del ADN.91
Estas protenas parecen estabilizar el ADN monocatenario, protegindolo para evitar que forme
estructuras de tallo-lazo (stem-loop) o que sea degradado por nucleasas.
El factor de transcripcin represor del fago lambda unido a su ADN diana mediante un motivo
hlice-giro-hlice (helix-turn-helix).92Sin embargo, otras protenas han evolucionado para unirse
especficamente a secuencias particulares de ADN. La especificidad de la interaccin de las
protenas con el ADN procede de los mltiples contactos con las bases de ADN, lo que les permite
"leer" la secuencia del ADN. La mayora de esas interacciones con las bases ocurre en la hendidura
mayor, donde las bases son ms accesibles.93
Las protenas especficas estudiadas con mayor detalle son las encargadas de regular la
transcripcin, denominadas por ello factores de transcripcin. Cada factor de transcripcin se une
a una secuencia concreta de ADN y activa o inhibe la transcripcin de los genes que presentan
estas secuencias prximas a sus promotores. Los factores de transcripcin pueden efectuar esto
de dos formas:
En primer lugar, pueden unirse a la polimerasa de ARN responsable de la transcripcin, bien
directamente o a travs de otras protenas mediadoras. De esta forma. se estabiliza la unin entre
la ARN polimerasa y el promotor, lo que permite el inicio de la transcripcin.94
En segundo lugar, los factores de transcripcin pueden unirse a enzimas que modifican las
histonas del promotor, lo que altera la accesibilidad del molde de ADN a la ARN polimerasa.95
Como los ADN diana pueden encontrarse por todo el genoma del organismo, los cambios en la
actividad de un tipo de factor de transcripcin pueden afectar a miles de genes.96 En consecuencia,
estas protenas son frecuentemente las dianas de los procesos de transduccin de seales que
controlan las respuestas a cambios ambientales o diferenciacin y desarrollo celular.
La enzima de restriccin EcoRV (verde) formando un complejo con su ADN diana.97
Enzimas que modifican el ADN[editar editar cdigo]
Nucleasas y ligasas[editar editar cdigo]
Las nucleasas son enzimas que cortan las hebras de ADN mediante la catlisis de la hidrlisis de los
enlaces fosfodister. Las nucleasas que hidrolizan nucletidos a partir de los extremos de las
hebras de ADN se denominan exonucleasas, mientras que las endonucleasas cortan en el interior
de las hebras. Las nucleasas que se utilizan con mayor frecuencia en biologa molecular son las
enzimas de restriccin, endonucleasas que cortan el ADN por determinadas secuencias
especficas. Por ejemplo, la enzima EcoRV, que se muestra a la izquierda, reconoce la secuencia de
6 bases 5-GAT|ATC-3, y hace un corte en ambas hebras en la lnea vertical indicada, generando
dos molculas de ADN con los extremos romos. Otras enzimas de restriccin generan sin embargo
extremos cohesivos, ya que cortan de forma diferente las dos hebras de ADN. En la naturaleza,
estas enzimas protegen a las bacterias contra las infecciones de fagos, al digerir el ADN de dicho
fago cuando entra a travs de la pared bacteriana, actuando como un mecanismo de defensa.98 En
biotecnologa, estas nucleasas especficas de la secuencias de ADN se utilizan en ingeniera
gentica para clonar fragmentos de ADN y en la tcnica de huella gentica.
Las enzimas denominadas ADN ligasas pueden reunir hebras de ADN cortadas o rotas.99 Las ligasas
son particularmente importantes en la replicacin de la hebra que sufre replicacin discontinua en
el ADN, ya que unen los fragmentos cortos de ADN generados en la horquilla de replicacin para
formar una copia completa del molde de ADN. Tambin se utilizan en la reparacin del ADN y en
procesos de recombinacin gentica.99
Topoisomerasas y helicasas[editar editar cdigo]
Las topoisomerasas son enzimas que poseen a la vez actividad nucleasa y ligasa. Estas protenas
varan la cantidad de ADN superenrollado. Algunas de estas enzimas funcionan cortando la hlice
de ADN y permitiendo que una seccin rote, de manera que reducen el grado de
superenrollamiento. Una vez hecho esto, la enzima vuelve a unir los fragmentos de ADN.59 Otros
tipos de enzimas son capaces de cortar una hlice de ADN y luego pasar la segunda hebra de ADN
a travs de la rotura, antes de reunir las hlices.100 Las topoisomerasas son necesarias para
muchos procesos en los que interviene el ADN, como la replicacin del ADN y la transcripcin.60
Las helicasas son unas protenas que pertenecen al grupo de los motores moleculares. Utilizan
energa qumica almacenada en los nuclesidos trifosfatos, fundamentalmente ATP, para romper
puentes de hidrgeno entre bases y separar la doble hlice de ADN en hebras simples.101 Estas
enzimas son esenciales para la mayora de los procesos en los que las enzimas necesitan acceder a
las bases del ADN.
Polimerasas[editar editar cdigo]
Las polimerasas son enzimas que sintetizan cadenas de nucletidos a partir de nuclesidos
trifosfatos. La secuencia de sus productos son copias de cadenas de polinucletidos existentes,
que se denominan moldes. Estas enzimas funcionan aadiendo nucletidos al grupo hidroxilo en 3'
del nucletido previo en una hebra de ADN. En consecuencia, todas las polimerasas funcionan en
direccin 5 --> 3.102 En los sitios activos de estas enzimas, el nuclesido trifosfato que se
incorpora aparea su base con la correspondiente en el molde: esto permite que la polimerasa
sintentice de forma precisa la hebra complementaria al molde.
Las polimerasas se clasifican de acuerdo al tipo de molde que utilizan:
En la replicacin del ADN, una ADN polimerasa dependiente de ADN realiza una copia de ADN a
partir de una secuencia de ADN. La precisin es vital en este proceso, por lo que muchas de estas
polimerasas tienen una actividad de verificacin de la lectura (proofreading). Mediante esta
actividad, la polimerasa reconoce errores ocasionales en la reaccin de sntesis, debido a la falta
de apareamiente entre el nucletido errneo y el molde, lo que genera un desacoplamiento
(mismatch). Si se detecta un desacoplamiento, se activa una actividad exonucleasa en direccin 3
--> 5 y la base incorrecta se elimina.103 En la mayora de los organismos las ADN polimerasas
funcionan en un gran complejo denominado replisoma, que contiene mltiples unidades
accesorias, como helicasas.104
Las ADN polimerasas dependientes de ARN son una clase especializada de polimerasas que
copian la secuencia de una hebra de ARN en ADN. Incluyen la transcriptasa inversa, que es una
enzima viral implicada en la infeccin de clulas por retrovirus, y la telomerasa, que es necesaria
para la replicacin de los telmeros.105 43 La telomerasa es una polimerasa inusual, porque
contiene su propio molde de ARN como parte de su estructura.44
La transcripcin se lleva a cabo por una ARN polimerasa dependiente de ADN que copia la
secuencia de una de las hebras de ADN en ARN. Para empezar a transcribir un gen, la ARN
polimerasa se une a una secuencia del ADN denominada promotor, y separa las hebras del ADN.
Entonces copia la secuencia del gen en un transcrito de ARN mensajero hasta que alcanza una
regin de ADN denomimada terminador, donde se detiene y se separa del ADN. Como ocurre con
las ADN polimerasas dependientes de ADN en humanos, la ARN polimerasa II (la enzima que
transcribe la mayora de los genes del genoma humano) funciona como un gran complejo
multiproteico que contiene mltiples subunidades reguladoras y accesorias.106