I.

TUJUAN PERCOBAAN
Percobaan ini bertujuan untuk :
1. Menentukan panjang gelombang optimum untuk menentukan
konsentrasi larutan CuSO4 dan Rhodamin B.
2. Membuat kurva kalibrasi absorbansi versus konsentrasi untuk
larutan CuSO4 dan Rhodamin B.
3. Menentukan konsentrasi larutan CuSO4 x ppm dan Rhodamin
B y ppm menggunakan spektrofotometer UV-Visible.

II. DASAR TEORI

Spektrofotometri adalah metode analisis dengan mengukur
energi berupa cahaya yang diserap oleh larutan berwarna, dimana
hal ini menunjukkan adanya interaksi antara larutan dengan
komponen cahaya (Anna, 2011). Timbulnya intensitas penyerapan
cahaya yang beragam tergantung pada konsentrasi larutan.
Spektrofotometri merupakan metode analisis yang berdasar pada
teknik spektroskopi (ilmu yang mempelajari interaksi materi
dengan energi pada level mikroskopis). Teknik spektroskopi
sendiri terdiri dari tiga jenis, yakni Fourier Transform Infrared
(FTIR) Spectrometer, Atomic Absorption Spectroscopy (AAS) dan
UV-Visible Spectroscopy.
Spektrofotometer UV-Visible adalah alat analisis sampel
dengan prinsip absorbansi radiasi gelombang elektromagnetik
dengan panjang gelombang di kisaran sinar UV (190-380 nm)
hingga cahaya tampak (380-900 nm). Spektrofotometer UV-Visible
dapat digunakan untuk menentukan kandungan zat organik atau
anorganik dalam sebuah larutan (Mulyono, 2001).
Prinsip kerja spektrofotometer UV-Visible adalah interaksi
yang terjadi antara energi yang berupa sinar manokromatis dengan
materi dalam bentuk molekul, sehingga ketika sinar atau cahaya
mengenai larutan jernih, energi akan ditransmisi atau diabsorbansi.
1
Energi yang diserap menyebabkan elektron memiliki energi yang
lebih tinggi. Molekul yang memerlukan energi lebih banyak akan
menyerap panjang gelombang yang lebih pendek dan molekul yang
memerlukan energi sedikit akan menyerap panjang gelombang
yang lebih panjang (Rizka, 2015).
Pada spektrofotometer, terdapat komponen-komponen
utama, yaitu :
1. Sumber radiasi
Sumber radiasi yang stabil penting dalam model single beam,
tetapi tidak penting dalam model double beam karena
intensitas radiasi sinar yang diserap selalu diukur. Sumber
cahaya yang digunakan beragam, misalnya dari lampu
hidrogen atau deutorium.
2. Monokromator
Berfungsi untuk memecah radiasi polikromatis dengan pita
energi yang lebar menjadi radiasi monokromatis dengan pita
energi yang sempit.
3. Shutter
Berfungsi sebagai penutup cahaya.
4. Cuvet
Berfungsi sebagai wadah sampel yang akan diuji. Bentuknya
balok tertutup yang diletakkan setelah manokromator supaya
dapat meminimalkan dekomposisi oleh panjang gelombang
energi tinggi dalam radiasi polikromatis.
5. Detektor radiasi
Berfungsi mengabsorbsi foton yang menumbuknya dan
mengubahnya menjadi arus listrik atau perubahan suhu yang
kemudian digunakan untuk mengaktifkan recorder (Mulyono,
2001).
6. Recorder / meter
Berfungsi untuk menampilkan hasil pengukuran dari detektor.
2
 (3)

(1) (2) (4) (5) (6)

Gambar
Gamb1.arSkema Kerja
1. Skema Spektrofotometri
KerjaSpektrofotometri

(Skoog, 1985)

Dalam percobaan dengan menggunakan metode

spektrofotometri, tentu ada kekurangan dan kelebihannya, antara
lain :
1. Kekurangan :
a) Hanya dapat dilakukan dengan kisaran panjang gelombang
UV-Visible
b) Sinar yang digunakan harus monokromatis
c) Absorbansi kurang tepat karena dipengaruhi PH larutan,
suhu dan zat pengotor cuvet.
2. Kelebihan:
a) Prosedur sederhana, kinerjanya cepat, daerah
pembacaannya otomatis.
b) Dapat menganalisa larutan dengan kosentrasi yang sangat
kecil (sensitivitas tinggi).
c) Panjang gelombang dari sinar putih lebih terseleksi.
d) Ketelitiannya baik, kesalahan relatif pada konsentrasi yang
ditemui dengan tipe spektrofotometer UV-Visible pada
rentang 1% sampai 5%.
e) Penggunaannya luas, dapat digunakan untuk senyawa
anorganik, organik dan biokimia yang diabsorbsi di daerah
cahaya tampak (Skoog, 1996).
3
 Absorbansi merupakan banyaknya energi yang diserap oleh
suatu molekul, dimana jika suatu molekul menyerap radiasi energi
dan gelombang elektromagnetik cahaya tampak, akan terjadi
eksitasi elektron pada atom-atomnya. Hal ini terjadi jika jumlah
energi yang diserap lebih besar daripada tingkat energi elektron
pada keadaan dasar. Sedangkan transmitansi adalah perbandingan
antara intensitas cahaya yang keluar atau diteruskan melalui larutan
terhadap intensitas cahaya mula-mula. Nilai absorbansi berbanding
terbalik dengan transmitansi (Skoog, 1985).
Larutan yang encer (konsentrasinya rendah), hubungan
antara absorbansi dan konsentrasinya memenuhi Hukum Lambert-
Beer, yaitu :
A = .b.c (1)
dengan A = Absorbansi
= Absortivitas molar (cm-1.ppm-1)
b = Lebar cuvet (cm)
c = Konsentrasi larutan (ppm)
Persamaan tersebut menunjukkan bahwa konsentrasi
berbanding lurus dengan absorbansi. Semakin tinggi
konsentrasinya, maka absorbansi yang dihasilkan semakin tinggi,
begitupun sebaliknya, semakin rendah konsentrasi, semakin rendah
absorbansi yang dihasilkan (Seran, 2011). Hukum ini berlaku
untuk larutan dengan konsentrasi rendah, maka untuk konsentrasi
tinggi perlu dilakukan pengenceran.
Ada syarat-syarat yang harus dipenuhi agar Hukum
Lambert-Beer dapat berlaku, antara lain :
1. Konsentrasi larutan yang diuji rendah
Larutan yang memiliki konsentrasi rendah akan lebih mudah
diketahui transmitansinya. Hal ini dikarenakan kerapatan pada
molekulnya kecil sehingga kemampuan meyerap radiasi
elektromagnetiknya kecil dan banyak radiasi yang terbaca oleh
4
 detektor pada alat spektrofotometer. Pada konsentrasi rendah,
indeks refraksi akan relatif konstan dan kurva kalibrasi akan
linier (Harvey, 2000).
2. Zat yang diukur bersifat homogen, tak terjadi fluoresensi atau
phoporesensi.
3. Indeks refraksi tak berpengaruh terhadap konsentrasi.
4. Cahaya yang digunakan adalah monokromatis (Basset, 1994).
Untuk mengetahui hubungan antara konsentrasi dan
absorbansi pada panjang gelombang optimum, perlu dibuat larutan
standar pada berbagai konsentrasi yang kemudian hasil pengukuran
absorbansinya dinyatakan dalam bentuk kurva kalibrasi hubungan
antara absorbansi dan konsentrasi.
Kurva standar atau kurva kalibrasi merupakan grafik yang
membentuk garis lurus atau linier yang menyatakan hubungan
antara konsentrasi suatu larutan dengan besaran lain, dalam
percobaan ini adalah absorbansi larutan. Cara pembuatannya
sendiri yaitu dengan menentukan absorbansi dari larutan blangko
dan larutan standar yang konsentrasinya sudah diketahui dengan
pasti, kemudian hasil pengukurannya dibuat dalam grafik
hubungan antara konsentrasi dan absorbansi.
Kurva kalibrasi sendiri dibuat pada panjang gelombang
optimum. Panjang gelombang optimum merupakan panjang
gelombang yang ditunjukkan saat absorbansi yang terbaca bernilai
paling besar (maksimum). Ada beberapa alasan dalam penggunaan
panjang gelombang optimum, antara lain :
1. Pada panjang gelombang optimum, energinya tepat dan
sensitivitas maksimal, karena pada kondisi ini perubahan
absorbansi untuk setiap satuan konsentrasi adalah paling
besar, jadi dengan perubahan sedikit saja, absorbansinya akan
berubah juga.

5
2. Memenuhi Hukum Lambert-Beer dengan pembuktian bentuk
kurva kalibrasi berupa garis linier.
3. Apabila dilakukan pengulangan percobaan, maka kesalahan
relatif kecil dan data yang didapat akurat.
4. Pengukuran zat dengan konsentrasi rendah tetap akan
terdeteksi karena memenuhi Hukum Lambert-Beer (Rohman,
2007)
Kurva kalibrasi dapat digunakan untuk menentukan
konsentrasi larutan yang tidak diketahui konsentrasinya. Cara
menentukannya adalah dengan menyatakan hubungan antara
absorbansi dan konsentrasi pada kurva kalibrasi dalam bentuk
persamaan linier, kemudian melakukan perhitungan dengan
memasukkan absorbansi larutan dengan konsentrasi x ppm yang
sudah diukur ke dalam persamaan linier.
Dalam percobaan ini, spektofotometri digunakan untuk
menganalisis larutan CuSO4 dan Rhodamin B. Ada beberapa
alasan yang mendasari penggunaan spektofotometri UV-Visible
dalam analisis kedua larutan tersebut, antara lain :
1. Karena absorbansi radiasi pada larutan CuSO4 dan Rhodamin
B dalam bentuk molekul.
Jika dalam bentuk atom, maka menggunakan metode
Atomic Absorption Spectroscopy.
2. Karena spektrofotometer UV-Visible dapat menentukan kadar
atau konsentrasi zat organik atau anorganik dalam larutan.
Rhodamin B adalah zat organik dan CuSO4 adalah zat
anorganik. Selain itu, biasanya metode AAS cenderung untuk
anorganik dan FTIR cenderung untuk zat organik saja.
3. Karena absorbansi maksimum kedua larutan tersebut terletak
pada panjang gelombang optimum yang kisarannya pada 190-
380 nm atau 380-900 nm (kisaran gelombang sinar UV dan
cahaya tampak).
6
 Selain itu, untuk metode FTIR panjang gelombang yang
digunakan di antara 1000-4000 nm.
4. Karena pada Rhodamin B dan larutan CuSO4 sama-sama
memiliki ikatan pi yang dapat menyerap energi ultraviolet dan
atau cahaya tampak yang digunakan untuk eksitasi elektron ke
orbital yang lebih tinggi.
5. Karena spektrofotometri memiliki sensitivitas yang tinggi,
dengan pembuktian dapat digunakan untuk mengukur larutan
konsentrasi rendah (dalam percobaan ini larutan Rhodamin B
dan CuSO4 konsentrasinya rendah).
Selain untuk menguji absorbansi larutan CuSO4 dan
Rhodamin B, metode spektrofotometri UV-Visible dapat
diaplikasikan pada berbagai hal, di antaranya :
1. Penetetapan Fe(II) sebagai kompleks dengan o-fenantrolin
(Vis) dengan analisis kuantitatif.
2. Penetapan nitrat dalam makanan daging olahan dengan
analisis kuantitatif.
3. Penetapan kafein dalam berbagai kemasan minuman kaleng
dengan analisis kuantitatif (Anna, 2011)
Sedangkan dalam kehidupan sehari-hari terdapat contoh
aplikasi nyata metode spektofotometri, yaitu penyerapan cahaya
polikromatik pada matahari oleh pigmen warna tumbuhan
(klorofil) yang kemudian digunakan pada saat reaksi cahaya.
Klorofil yang merupakan zat warna hijau pada daun ternyata
efektif menyerap gelombang pada spektrum warna biru dan merah,
sehingga cahaya yang direfleksikan ke mata manusia berwarna
hijau. Klorofil yang sensitif terhadap sinar menghasilkan makanan
melalui fotositesis, melalui reaksi terang dan reaksi gelap. Cahaya
putih polikromatik yang menyinari daun akan diserap spektrum
merah dan biru yang kemudian dapat mentransmisikan warna

7
 hijau, dimana sinarnya digunakan untuk reaksi-reaksi cahaya
(Hartiwi, 2009).

III. METODOLOGI PERCOBAAN

a. Bahan
Ada beberapa bahan yang digunakan dalam percobaan
spektrofotometer ini, diantaranya :
1. Kristal CuSO4 Merck
2. Rhodamin B Merck
3. Aquadest

b. Alat

Keterangan :
Keterangan:
1. Spektrofotometer
1. Spektrofotometer
2. Tempat
2. Tempat cuvet
Cuvet
3. Kabel USB
3. Kabel USB
4. Laptop
(3)
C
(4) 4. Laptop
(1)

(2)

Gambar2.RangkaianAlatSpektrofotometerUV-Visible
Gambar 2. Rangkaian Alat Spektrofotometer UV-Visible

c. Cara Percobaan
1. Pembuatan Larutan CuSO4 10.000 ppm
Kristal CuSO4 1,0009 gram ditimbang dengan
menggunakan gelas arloji dalam neraca analitis digital.
Gelas beker 250 mL diisi dengan aquadest, lalu kristal
CuSO4 dilarutkan ke dalam gelas beker berisi aquadest dan
diaduk dengan gelas pengaduk hingga semua kristal terlarut.
Larutan tersebut dituang ke dalam labu ukur 100 mL dengan
menggunakan corong gelas, kemudian diisi dengan aquadest
8
 menggunakan botol semprot hingga tanda batas, lalu digojog
hingga homogen.
2. Pengenceran Larutan CuSO4 yang Akan Diuji
Larutan CuSO4 10.000 ppm yang ada di dalam labu
ukur 100 mL diambil 25,0000 mL dengan pipet volume 25
mL dan dimasukkan ke dalam gelas beker I. Labu ukur diisi
aquadest sampai tanda batas, lalu ditutup dan digojog
hingga homogen, sehingga menghasilkan larutan CuSO4
7.500 ppm. Larutan diambil 60,0000 mL dengan pipet
volume 25 mL dan 10 mL dan dimasukkan ke dalam gelas
beker II. Labu ukur diisi aquadest sampai tanda batas, lalu
ditutup dan digojog hingga homogen sehingga
menghasilkan larutan CuSO4 3.000 ppm. Larutan diambil
50,0000 mL dengan pipet volume 25 mL dan dimasukkan
ke dalam gelas beker III. Labu ukur diisi aquadest sampai
tanda batas, lalu ditutup dan digojog hingga homogen
sehingga menghasilkan larutan CuSO4 1.500 ppm. Larutan
diambil 50,0000 mL dengan menggunakan pipet volume 25
mL dan dimasukkan ke dalam gelas beker IV. Labu ukur
diisi dengan aquadest sampai tanda batas, lalu ditutup dan
digojog hingga homogen sehingga menghasilkan larutan
CuSO4 750 ppm.
3. Pembuatan Kurva Kalibrasi CuSO4
Kabel USB dan spektrofotometer dihubungkan ke
laptop dan Software Logger Lite dibuka. Cuvet diisi dengan
aquadest sampai batas tempat cuvet, lalu dimasukkan ke
dalam tempat cuvet pada spektrofotometer. Pada bagian
toolbar, dipilih Experiment Calibrate Spectrometer 1.
Proses kalibrasi ditunggu hingga selesai, lalu diklik Finish
Calibration, OK. Apabila pengkalibrasian telah selesai,
cuvet dikeluarkan dan aquadest dibuang. Cuvet lalu dicuci
9
 dengan larutan CuSO4 yang akan diuji, dan larutan CuSO4
yang akan diuji dimasukkan ke dalam cuvet, kemudian
cuvet dimasukkan ke tempat cuvet pada spektrofotometer.
Tombol Collect diklik, lalu diklik stop, maka akan
ditampilkan tabel pada sebelah kiri Windows. Pajang
gelombang optimum dengan nilai absorbansi maksimum
dipilih, kemudian tombol wave diklik dan dipilih
Absorbance vs Concentration, lalu panjang gelombang
yang tercheklist dilihat. Nilai absorbansi yang diperoleh
lalu dicatat dan percobaan diulangi dengan konsentrasi
7.500, 3.000, 1.500 dan 750 ppm secara berurutan dari
konsentrasi yang terendah. Plot data absorbansi versus
konsentrasi di Microsoft Excel.
4. Penentuan Konsentrasi Larutan CuSO4 x ppm
Cuvet dicuci dan diisi dengan aquadest, lalu cuvet
dimasukkan ke dalam tempat cuvet pada spektrofotometer.
Nilai absorbansinya diamati hingga menunjukkan 0,000.
Cuvet dikeluarkan dan aquadest dibuang. Cuvet dicuci
dengan larutan CuSO4 x ppm, kemudian cuvet diisi dengan
larutan CuSO4 x ppm. Cuvet dimasukkan ke dalam tempat
cuvet pada spektrofotometer. Tombol Collect diklik, lalu
diklik stop. Nilai absorbansi yang ditunjukkan dicatat dan
diplotkan ke dalam kurva kalibrasi.
5. Pengenceran Larutan Rhodamin B yang Akan Diuji
Labu ukur 100 mL diisi sedikit aquadest, lalu
ditambahkan dengan 5,0000 mL larutan Rhodamin B 100
ppm yang diambil dari botol penyimpanan dengan
menggunakan pipet volume 5 mL. Labu ukur diisi dengan
aquadest sampai tanda batas, lalu ditutup dan digojog
hingga homogen sehingga dihasilkan larutan Rhodamin B 5
ppm. Larutan dalam labu ukur diambil sebanyak 60,0000
10
 mL dengan menggunakan pipet volume 25 mL dan 10 mL
dan dimasukkan ke dalam gelas beker V. Labu ukur
kemudian diisi dengan aquadest sampai tanda batas, lalu
ditutup dan digojog hingga homogen sehingga dihasilkan
larutan Rhodamin B 2 ppm. Larutan dalam labu ukur
diambil sebanyak 50,0000 mL dengan menggunakan pipet
volume 25 mL dan dimasukkan ke dalam gelas beker VI.
Labu ukur kemudian diisi dengan aquadest sampai tanda
batas, lalu ditutup dan digojog hingga homogen sehingga
menghasilkan larutan Rhodamin B 1 ppm. Larutan dalam
labu ukur diambil sebanyak 75,0000 mL dengan
menggunakan pipet volume 25 mL dan dimasukkan ke
dalam gelas beker VII. Labu ukur diisi dengan aquadest
sampai tanda batas, lalu ditutup dan digojog hingga
homogen sehingga dihasilkan larutan Rhodamin B 0,25
ppm. Larutan dalam labu uur diambil 60,0000 mL dengan
menggunakan pipet volume 25 mL dan 10 mL dan
dimasukkan ke dalam gelas beker VIII. Labu ukur
kemudian diisi dengan aquadest sampai tanda batas, lalu
ditutup dan digojog hingga homogen sehingga dihasilkan
larutan Rhodamin B 0,1 ppm.
6. Pembuatan Kurva Kalibrasi Larutan Rhodamin B
Cuvet diisi dengan aquadest, lalu cuvet dimasukkan
ke dalam tempat cuvet pada spektrofotometer. Pada bagian
toolbar, diklik Experiment Calibrate Spectrometer 1.
Proses pengkalibrasian ditunggu hingga selesai, kemudian
diklik Finish Calibration, OK. Cuvet dikeluarkan dan
aquadest dibuang. Larutan Rhodamin B 100 ppm yang
sudah diencerkan menjadi 5 ppm digunakan untuk mencuci
cuvet, kemudian cuvet diisi dengan larutan Rhodamin B 5
ppm dan dimasukkan ke dalam tempat cuvet pada
11
 spektrofotometer. Tombol Collect diklik, maka akan
muncul tabel pada sebelah kiri Windows, lalu diklik stop.
Panjang gelombang optimum larutan Rhodamin B yang
menunjukkan nilai absorbansi maksimum dipilih pada tabel
di sebelah kiri. Tombol wave diklik lalu dipilih Absorbance
vs Concentration dan dicentang panjang gelombang
optimum yang sesuai, lalu diklik OK. Nilai absorbansi yang
ditunjukkan pada bagian kiri bawah dicatat. Pengukuran
absorbansi dilakukan dengan konsentrasi 2 ; 1 ; 0,25 ; dan
0,1 ppm secara berurutan dari konsentrasi terendah. Kurva
kalibrasi absorbansi versus konsentrasi dibuat pada
Microsoft Excel.
7. Pengenceran Larutan Rhodamin B y ppm
Labu ukur 100 mL diisi sedikit aquadest, lalu
ditambahkan 5,0000 mL larutan Rhodamin B y ppm yang
diambil dari botol penyimpanan dengan menggunakan pipet
volume 5 mL. Labu ukur kemudian diisi dengan aquadest
smapai tanda batas, lalu ditutup dan digojog hingga
homogen.
8. Penentuan Konsentrasi Larutan Rhodamin B y ppm
Cuvet diisi dengan aquadest, lalu dimasukkan ke
dalam tempat cuvet pada spektrofotometer. Nilai
absorbansinya diamati hingga menunjukkan 0,000. Cuvet
dikeluarkan dan aquadest dibuang. Larutan Rhodamin B y
ppm yang sudah diencerkan dua puluh kali digunakan untuk
mencuci cuvet, lalu cuvet diisi dengan larutan pengenceran
Rhodamin B y ppm dan cuvet dimasukkan ke dalam tempat
cuvet pada spektrofotometer. Tombol Collect diklik, lalu
diklik stop. Nilai absorbansi yang ditunjukkan dicatat dan
diplotkan ke dalam kurva kalibrasi.

12
d. Analisis Data
1. Larutan CuSO4
a) Penentuan Panjang Gelombang Optimum
Panjang gelombang optimum merupakan panjang
gelombang yang ditunjukkan saat absorbansi yang
terbaca bernilai paling besar (maksimum).
b) Penentuan Kurva Kalibrasi
Kurva kalibrasi merupakan plot kurva hubungan
absorbansi dan konsentrasi larutan CuSO4. Konsentrasi
larutan CuSO4 dapat dihitung dengan persamaan :

[CuSO4] = mCuSO4 (2)

vlarutan
dengan keterangan : mCuSO4 = masa CuSO4 (g)
vlarutan = volume larutan (mL)
Sedangkan untuk memperoleh larutan CuSO4
dengan berbagai konsentrasi, dilakukan pengenceran
dengan persamaan :
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
dengan keterangan :
V1 = volume larutan CuSO4 mula-mula (mL)
V2 = volume larutan CuSO4 setelah pengenceran (mL)
M1 = konsentrasi larutan CuSO4 mula-mula (ppm)
M2 = konsentrasi larutan CuSO4 setelah pengenceran
(ppm)
Kemudian dibuat plot grafik hubungan absorbansi
versus konsentrasi larutan CuSO4.
c) Penentuan Kurva Hubungan antara Absorbansi dan
Konsentrasi
Hubungan antara absorbansi dan konsentrasi dapat
dinyatakan dengan persamaan :

13
 y = ax + b (4)
dengan keterangan :
y = absorbansi larutan CuSO4
x = konsentrasi larutan CuSO4 (ppm)
a,b = konstanta
dengan regresi linier (least-square method) diperoleh :
a = nxy - xy (5)
nx2 (x)2

b = y - ax (6)
n

dengan n = jumlah larutan yang diuji

Setelah diperoleh nilai a dan b, diperoleh juga
persamaan linier hubungan antara absorbansi dan
konsentrasi larutan CuSO4.
d) Penentuan Konsentrasi CuSO4 x ppm
Absorbansi larutan CuSO4 x ppm yang ditunjukkan
oleh spektrofotometer dimasukkan ke dalam Persamaan
(4) yaitu x = y-b sehingga dapat dihitung konsentrasi
larutan a CuSO4 x ppm.

2. Larutan Rhodamin B
a) Penentuan Panjang Gelombang Optimum
Panjang gelombang optimum merupakan panjang
gelombang yang ditunjukkan saat absorbansi yang
terbaca bernilai paling besar (maksimum).
b) Penentuan Kurva Kalibrasi
Kurva kalibrasi merupakan plot kurva hubungan
absorbansi dan konsentrasi larutan Rhodamin B. Untuk
memperoleh larutan Rhodamin B dengan berbagai
konsentrasi, dilakukan pengenceran dengan persamaan :
V1 . M1 = V2 . M2 (7)
14
 dengan keterangan :
V1 = volume larutan Rhodamin B mula-mula (mL)
V2 = volume larutan Rhodamin B setelah pengenceran
(mL)
M1 = konsentrasi larutan Rhodamin B mula-mula (ppm)
M2 = konsentrasi larutan Rhodamin B setelah
pengenceran (ppm)
Kemudian dibuat plot grafik hubungan absorbansi
versus konsentrasi larutan Rhodamin B.
c) Penentuan Kurva Hubungan antara Absorbansi dan
Konsentrasi
Hubungan antara absorbansi dan konsentrasi dapat
dinyatakan dengan persamaan :
y = ax + b (4)
dengan keterangan :
y = absorbansi larutan Rhodamin B
x = konsentrasi larutan Rhodamin B (ppm)
a,b = konstanta
dengan regresi linier (least-square method) diperoleh :
a = nxy - xy (5)
nx2 (x)2

b = y - ax (6)
n

dengan n = jumlah larutan yang diuji

Setelah diperoleh nilai a dan b, diperoleh juga
persamaan linier hubungan antara absorbansi dan
konsentrasi larutan Rhodamin B.
d) Penentuan Konsentrasi Rhodamin B y ppm
Absorbansi larutan Rhodamin B x ppm yang
ditunjukkan oleh spektrofotometer dimasukkan ke dalam

15
 Persamaan (4) yaitu x = y-b sehingga dapat
dihitung konsentrasi a larutan Rhodamin B
y ppm.

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

Dalam percobaan ini, ada beberapa asumsi yang digunakan,
yaitu :
1. Dinding cuvet bagian luar bersih, tak ada zat pengotor yang
menempel sehingga intensitas cahaya yang diserap akurat.
2. Pengenceran dilakukan dengan ukuran volume tepat, sehingga
konsentrasi yang dihasilkan tepat.
3. Larutan yang diencerkan homogen.
4. Pembacaan absorbansi larutan tepat.
Dalam pengenceran larutan CuSO4 dan Rhodamin B
digunakan pelarut yakni aquadest, karena kedua larutan tersebut
dapat larut dalam aquadest dan juga karena aquadest tak menyerap
sinar yang digunakan dalam pengujian larutan, sehingga absorbansi
yang didapat akurat.
Berdasarkan hasil percobaan, diperoleh absorbansi larutan
CuSO4 10.000 ppm sebesar 0,552 , larutan CuSO4 7.500 ppm
absorbansinya sebesar 0,422 , larutan CuSO4 3.000 ppm
absorbansinya sebesar 0,169 , larutan CuSO4 1.500 ppm
absorbansinya sebesar 0,082 dan larutan CuSO4 750 ppm
absorbansinya sebesar 0,059.
Absorbansi larutan CuSO4 yang berwarna biru diukur pada
panjang gelombang optimum larutan CuSO4 yakni 831,3 nm yang
besarnya berbeda dengan panjang gelombang optimum larutan
Rhodamin B.
Jika dicermati, nilai absorbansi larutan naik seiring naiknya
konsentrasi larutan. Hal ini sesuai dengan teori Hukum Lambert-
Beer yang menyatakan bahwa antara absorbansi dan konsentrasi
16
larutan saling berbanding lurus. Hal ini dibuktikan dengan kurva
kalibrasi yang dibuat dari data percobaan di atas.
0.6
R = 0.9991
0.5 y = 5E-05x + 0.0089 Keterangan :

0.4 7500
Data Percobaan
Absorbansi

2222.589
Data CuSO4 x
0.3
ppm

0.2

0.1

0
0 5000 10000 15000
Konsentrasi (ppm)

Gambar 3. Kurva Kalibrasi Larutan CuSO4

Berdasarkan perhitungan, hubungan antara konsentrasi dan

absorbansi larutan CuSO4 pada kurva kalibrasi di atas dapat
dinyatakan dalam bentuk persamaan linier, yaitu :
y = 5,4486.10-5x + 0,0089
Kurva kalibrasi yang dihasilkan sesuai dengan teori yaitu
berbentuk garis lurus (linier) dan memiliki gradien positif. Begitu
juga dengan persamaannya yang menunjukkan hubungan
kelinieran absorbansi dan konsentrasi larutan CuSO4. Dengan
kurva kalibrasi dan persamaan linier di atas, dapat digunakan untuk
mencari konsentrasi CuSO4 x ppm. Dengan data hasil pengukuran
absorbansi larutan CuSO4 x ppm yaitu 0,130 , maka diperoleh
nilai konsentrasi larutan CuSO4 x ppm sebesar 2222, 5890 ppm.
Jika dilihat pada kurva kalibrasi absorbansi larutan CuSO4 x ppm
yang terletak di antara nilai absorbansi 0,082 dan 0,169 dan begitu
juga konsentrasinya terletak di antara 1.500 dan 3.000 ppm.

17
 Jika kita lihat pada kurva kalibrasi terdapat nilai R2 = 0,999,
dimana R squared value (R2) atau yang disebut juga dengan
koefisien determinasi merupakan hasil ukur dari persamaan regresi
linier yang memberikan proporsi atau presentase variasi total
dalam variabel terikat yang dijelaskan oleh variabel bebas. Nilai R2
berkisar antara 0-1, dimana apabila R2 mendekati 1 maka
kesesuaian hasil dinyatakan lebih baik. R2 akan meningkat
bersamaan dengan meningkatnya jumlah variabel, namun relatif
kecil hingga bisa diabaikan. Berdasarkan R2 pada kalibrasi yang
bernilai 0,9991 , berarti kemampuan variabel bebas dalam
menjelaskan variabel terikatnya adalah 99,91%. Nilai tersebut
dikategorikan baik karena mendekati 100%.
Sedangkan untuk pengukuran absorbansi pada larutan
Rhodamin B 5 ppm diperoleh absorbansi sebesar 0,893 , larutan
Rhodamin B 2 ppm absorbansinya sebesar 0,390 , larutan
Rhodamin B 1 ppm absorbansinya sebesar 0,224 , larutan
Rhodamin B 0,25 ppm absorbansinya sebesar 0,080 dan larutan
Rhodamin B 0,1 ppm absorbansinya sebesar 0,062.
Absorbansi larutan Rhodamin yang berwarna merah
keunguan diukur pada panjang gelombang optimum larutan
Rhodamin B yakni 552,6 nm.
Jika kita lihat, panjang gelombang optimum pada larutan
CuSO4 dan larutan Rhodamin B berbeda. Hal ini berkaitan dengan
spektrum warna yang diserap oleh larutan. Larutan CuSO4 yang
memiliki warna biru, dimana warna tersebut sebenarnya
merupakan komplemen dari warna sinar yang diserap yakni merah.
Jadi dapat kita simpulkan bahwa larutan CuSO4 yang berwarna
biru menyerap sinar berwarna merah yang memiliki panjang
gelombang berkisar 610 nm ke atas. Sedangkan larutan Rhodamin
B yang berwarna merah keunguan dapat menyerap sinar dengan
warna komplemennya yakni hijau kekuningan yang memiliki
18
panjag gelombang berkisar antara 530-559 nm. Hal ini sesuai,
karena diketahui panjang gelombang optimum larutan CuSO4
adalah 831,3 nm dan panjang gelombang optimum larutan
Rhodamin B adalah 552,6 nm. Pada intinya, perbedaan nilai
gelombang optimum suatu larutan berwarna dipengaruhi oleh
spektrum warna larutan itu sendiri yang akan mempengaruhi
penyerapan sinar dan panjang gelombangnya.
Dari data hasil pengukuran absorbansi, dapat dinyatakan
hubungan antara konsentrasi larutan Rhodamin B dan absorbansi
dalam bentuk kurva kalibrasi seperti berikut ini.

1
0.9 R = 0.9997
0.8 y = 0.17x + 0.0459
Keterangan :
0.7
Absorbansi

0.6 0.1
Data Percobaan
0.5 0.9771
Data Rhodamin
0.4 B y ppm
0.3
0.2
0.1
0
0 2 4 6
Konsentrasi (ppm)

Gambar 4. Kurva Kalibrasi Larutan Rhodamin B

Dari gambar di atas dapat dilihat hubungan antara

konsentrasi dan absorbansi yang berbanding lurus. Hal ini terbukti
dengan bentuk kurva yang linier dan memiliki gradien positif.
Hubungan tersebut sesuai dengan teori Hukum Lambert-Beer
dimana absorbansi senyawa akan naik seiring dengan naiknya
konsentrasi senyawa dan juga sebaliknya.
Sebagaimana yang sudah dijelaskan sebelumnya, pada
kurva kalibrasi larutan Rhodamin B juga terdapat nilai R2 yang
19
 bernilai 0,9997 yang memiliki arti bahwa kemampuan variabel
bebas dalam menjelaskan variabel terkaitnya adalah 99,97%. Nilai
tersebut dapat dikategorikan baik karena mendekati angka 100%.
Berdasarkan data dan kurva kalibrasi, dapat diperoleh
persamaan linier yang menyataka hubungan antara absorbansi dan
konsentrasi larutan Rhodamin B, yaitu :
y = 0,1700x + 0,0459
Dengan data hasil pengukuran absorbansi larutan
Rhodamin B y ppm yaitu 0,212 dan persamaan linier, dapat
dihitung konsentrasi larutan Rhodamin B y ppm yakni sebesar
0,9771 ppm. Dari hasil perhitungan dapat disimpulkan bahwa
persamaan liniernya mendekati akurat, karena absorbansi larutan
Rhodamin y ppm diketahui berada di antara nilai 0,080 dan 0,224
dengan kisaran konsentrasi larutan pada 0,25-1 ppm. Namun nilai
konsentrasi tersebut adalah konsentrasi larutan Rhodamin B y ppm
setelah diencerkan dan setelah dihitung dengan rumus pengenceran
larutan, maka didapat nilai konsentrasi sebenarnya yaitu 19,5420
ppm.
Dari percobaan dengan dua larutan, hubungan antara
konsentrasi dan absorbansinya sesuai dengan Hukum Lambert-
Beer yakni berbanding lurus. Hal ini karena syarat berlakunya
Hukum Lambert-Beer terpenuhi. Selain itu karena dalam
percobaan menggunakan panjang gelombang optimum,
pengukuran konsentrasi rendah tetap terdeteksi dan pengulangan
pengukuran absorbansinya tidak timpang jauh.

V. KESIMPULAN
Berdasarkan pada hasil percobaan dan pembahasan
praktikum, dapat diambil beberapa poin penting, di antaranya :
1. Spektrofotometri adalah metode analisis dengan mengukur
radiasi energi berupa cahaya yang diserap oleh larutan
20
 berwarna. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer UV-
Visible.
2. Panjang gelombang optimum ditunjukkan pada saat
absorbansi maksimum. Panjang gelombang optimum larutan
CuSO4 adalah 831,3 nm dan larutan Rhodamin B 552,6 nm.
3. Panjang gelombang optimum yang berbeda dikarenakan
spektrum warna larutan yang berbeda sehingga mempengaruhi
penyerapan sinar dengan warna dan panjang gelombang
tertentu.
4. Kurva kalibrasi larutan CuSO4 dan Rhodamin B menyatakan
hubungan antara absorbansi yang berbanding lurus dengan
konsentrasi seperti pada Hukum Lambert-Beer (A = .b.c).
Semakin besar absorbansinya, semakin besar pula
konsentrasinya dan semakin kecil nilai absorbansinya,
semakin kecil pula konsentrasi larutannya.
5. Persamaan linier yang menyatakan hubungan antara
absorbansi dan konsentrasi larutan CuSO4 adalah y =
5,4486.10-5x + 0,0089 dan persamaan linier yang menyatakan
hubungan antara absorbansi dan konsentrasi larutan Rhodamin
B adalah y = 0,1700x + 0,0459.
6. Konsentrasi larutan CuSO4 x ppm adalah sebesar 2222,5890
ppm dan konsentrasi larutan Rhodamin B y pm adalah
19,5420 ppm.

21
VI. DAFTAR PUSTAKA
Basset J et al. 1994. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif
Anorganik. Penerbit Buku Kedokteran EEC. Jakarta.
diakses dari sekara08.student.ipb.ac.id>2010/06/18 pada Senin, 11
April 2016 pukul 20.23 WIB
F.S, Rizka. 2015. Hasil Penelitian Spektrofotometri UV-VIS.
Universitas Jember. Jember.
diakses dari http://www.rizkafs.web.unej.ac.id>sites>2015/04 pada
Selasa, 22 Maret2016 ukul 22.37 WIB
Hartiwi, Etti. Trihandaru, Suryasatriya. 2009. Pengukuran
Spektrum Klorofil Daun Suji Menggunakan
Spektrofotometer Sederhana. Fakultas Sains dan
Matematika UKSW. Salatiga.
diakses dari
http://repository.uksw.wdu>bitstream>PROS_Hartiwi.Trih
andaru_pengukuran_spektrum_klorofil_fulltext.pdf pada
Senin, 11 April 2016 pukul 19.56 WIB.
Harvey. 2000. Modern Analytical Chemistry. The McGraw Hill
Companies. New York.
Http://kovalen.fkip.uns.ac.id/tipe-dan-analisis-spektrofotometri-uv-
vis/
diakses pada Senin, 21 Maret 2016 pukul 14.16 WIB.
Http://www.infolabling.com/2014/03/linearitas-kurva-kalibrasi-
parameter.html?m=l
diakses pada Senin, 21 Maret 2016 pukul 14.05 WIB.
Http://www.perpustakaan.untirta.ac.id>download
diakses pada Selasa, 22 Maret 2016 pukul 10.35 WIB
Mulyono, P. 2001. Diktat Kuliah Analisis Dasar Instrumen Dalam
Teknik Kimia. Fakultas Teknik. Yogyakarta.
Permatasari, Anna. 2011. Spektrofotometri Serapan UV-VIS.
Universitas Pendidikan Indonesia. Bandung.
22
diakses dari http://www.anna-permatasari.staf.upi.edu pada Selasa,
22 Maret 2016 pukul 09.22 WIB.
Seran, Emil. 2011. Spektrofotometer Sinar Tampak (Visible).
Skoog, D.A. 1985. Principles of Instrumental Analysis 3rd.
Saunders College Publishing. Philadelphia.
Skoog, D.A, D.M. West, F.J. Holler. 1996. Fundamental of
Analytical Chemistry 7th ed. Saunders College Publishing.

23
VII. LAMPIRAN
a. Identifikasi Hazard Proses dan Bahan Kimia
1. Identifikasi Hazard Proses dan Alat
Untuk prosesnya sendiri, karena bekerja dengan
spektrofotometer UV-Visible yang merupakan alat
elektronik dimana terdapat hantara listrik di dalamnya, maka
dipastikan tidak terkena air agar tidak rusak. Selain itu, perlu
kehati-hatian dalam proses pemasangan dan pelepasan alat.
Untuk alat seperti cuvet, apabila cuvet basah atau kotor
dinding luarnya sebaiknya dilap dengan lap kering atau tisu
agar pada saat dimasukkan ke dalam spektrofotometer UV-
Visible dapat diuji dengan akurat dan tidak menyebabkan
kerusakan pada spektrofotometer UV-Visible. Alat-alat
lainnya banyak yang berbahan kaca, sehingga perlu hati-hati
dalam memegang. Selain itu, apabila dirasa licin dalam
proses pencucian, gloves dapat dilepas. Selama praktikum
berlangsung diperlukan kehati-hatian dan fokus.
2. Identifikasi Hazard Bahan
a). Aquadest
Nama lain dari bahan ini adalah distillated water
yang memiliki rumus molekul H2O dengan berat molekul
18 gram/mol. Namun jenis aquadest yang digunakan
dalam Laboratorium Analisis Bahan adalah demineralized
water.
Aquadest merupakan cairan jernih tak berwarna, tak
berbau dan tak berasa. Aquadest tak memiliki resiko
bahaya, terlebih jika digunakan dalam kondisi suhu dan
tekanan ruang. Aquadest yang biasa digunakan sebagai
pelarut sebaiknya disimpan dalam wadah tertutup untuk
menghindari tumpahan dan genangan.

24
 b). Rhodamin B
Rhodamin B memiliki rumus molekul
C28H31N2O3Cl dengan berat molekul 479,02 gram/mol.
Rhodamin B merupakan padatan berupa serbuk berwarna
hijau atau violet kemerahan yang mudah larut di air.
Rhodamin B memiliki bahaya iritan, maka dari itu perlu
disimpan di tempat tertutup. Apabila terjadi kontak mata
cukup disiram dengan air selama lima belas menit dan
apabila terjadi kontak dengan kulit cukup dicuci dengan
air dan sabun.
c). Tembaga Sulfat (CuSO4)
Tembaga sulfat atau yang disebut cupric sulfate
memiliki rumus molekul CuSO4 dengan berat molekul
159,6 gram/mol. Tembaga sulfat memiliki karakteristik
berupa padatan berwarna biru yang mudah larut di air dan
sukar larut pada metanol. Zat yang bersifat stabil ini juga
bersifat iritan dan toxic (LD50 = 300 mg/kg), maka harus
disimpan di tempat tertutup, sejuk dengan ventilasi yang
baik. Apabila terjadi kontak mata, cukup disiram dengan
air selama lima belas menit, apabila terjadi kontak dengan
kulit cukup dicuci dengan air dan sabun dan jika tertelan
jangan dimasukkan apapun lagi.

b. Penggunaan Alat Perlindungan Diri

1. Jas laboratorium lengan panjang
Digunakan untuk melindungi tubuh dari kontak bahan
berbahaya seperti percikan, debu, dll.
2. Masker
Digunakan untuk melindungi saluran pernafasan dan
mulut dari kontak atau hirupan bahan berbahaya, gas, uap
bahan volatil, debu, dll.
25
 3. Gloves karet
Digunakan untuk melindungi kulit dari kontak bahan
berbahaya seperti percikan, debu, dll.
4. Goggles
Digunakan untuk melindungi mata dari kontak bahan
berbahaya, gas, uap bahan volatil, debu, dll.
5. Sepatu safety dan kaos kaki di atas mata kaki
Digunakan untuk melindungi kaki dari kontak dengan
bahan berbahaya, seperti percikan atau tumpahan bahan.

c. Manajemen Limbah
Setiap limbah pasti diperlakukan dengan perlakuan yang
berbeda-beda. Seperti aquadest yang sisanya tetap dikembalikan
ke teko atau botol semprot. Sedangan limbah Rhodamin B
dibuang ke drum limbah halogen karena mengadung unsur
halogen, yaitu Cl. Limbah CuSO4 umumnya dibuang ke drum
logam berat karena mengandung unsur Cu, tetapi untuk
percobaan ini dibuang ke tempat yang telah disediakan yakni
botol limbah CuSO4 yang terdapat di dalam Laboratorium
Analisis Bahan.

d. Data Percobaan
1. Pembuatan larutan CuSO4 10.000 ppm
Massa CuSO4 : 1,0009 gram
Volume larutan : 100 mL
2. Pembuatan kurva kalibrasi larutan CuSO4
Panjang gelombang optimum = 831,3 nm

26
 Daftar I. Data Percobaan Larutan CuSO4

No Konsentrasi (ppm) V1 (mL) Absorbansi

1 10.000 100 0,552
2 7.500 75 0,422
3 3.000 40 0,169
4 1.500 50 0,082
5 750 50 0,059

3. Penentuan konsentrasi larutan CuSO4 x ppm

Absorbansi : 0,130
4. Pembuatan kurva kalibrasi larutan Rhodamin B
Konsentrasi larutan awal : 5 ppm
Panjang gelombang optimum : 552,6 nm

Daftar II. Data Percobaan Larutan Rhodamin B

No Konsentrasi (ppm) V1 (mL) Absorbansi

1 5 5 0,893
2 2 40 0,390
3 1 50 0,224
4 0,25 25 0,080
5 0,1 40 0,062

27
 5. Penentuan konsentrasi larutan Rhodamin B
Pengenceran : 20 kali
Absorbansi : 0,212

e. Perhitungan
1. Penentuan konsentrasi larutan CuSO4
Rumus : (2)
[CuSO4] = mCuSO4
vlarutan
[CuSO4] = 1,0009 g
100 mL
= 0,010009 M
= 10.009,0000 ppm
Untuk pegenceran larutan asumsi konsentrasi tetap
10.000 ppm.

2. Pengenceran larutan CuSO4

a). Pembuatan Larutan CuSO4 7.500 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 10.000 ppm = 100 mL . 7.500 ppm
V1 = 75,0000 mL
Jadi volume larutan CuSO4 10.000 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 75,0000 mL.
b). Pembuatan Larutan CuSO4 3.000 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 7.500 ppm = 100 mL . 3.000 ppm
V1 = 40,0000 mL
Jadi volume larutan CuSO4 7.500 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 40,0000 mL.
c). Pembuatan Larutan CuSO4 1.500 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
28
 V1 . 3.000 ppm = 100 mL . 1.500 ppm
V1 = 50,0000 mL
Jadi volume larutan CuSO4 3.000 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 50,0000 mL.
d). Pembuatan Larutan CuSO4 750 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 1.500 ppm = 100 mL . 750 ppm
V1 = 50,0000 mL
Jadi volume larutan CuSO4 1.500 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 50,0000 mL.

3. Pembuatan persamaan hubungan antara absorbansi

konsentrasi larutan CuSO4
y = ax + b (4)
dengan y = absorbansi
x = konsentrasi (ppm)
a,b = konstanta

Daftar III. Data Perhitungan Regresi Linier Larutan CuSO4

No x (ppm) y x2 x.y
1 10.000 0,552 1,0000 x 108 5520,0000
2 7.500 0,422 5625,0000 x 104 3165,0000
3 3.000 0,169 9,0000 x 106 507,0000
4 1.500 0082 225,0000 x 104 123,0000
5 750 0,059 5625,0000 x 102 44,2500
22750,0000 1,2840 168062500,0000 9359,2500

29
 nilai a = nxy - xy (5)
nx2 (x)2

a = 5 (9359,2500) (22750,0000) (1,2840)

5 (168062500,0000) (22750,0000)2
a = 46796,25 - 29211
840312500 - 517562500

a = 5,4486 x 10-5
nilai b = y - ax (6)
n
b = 1,2840 5,4486 x 10-5 (22750,0000)
5
= 0,0089
Maka persamaan liniernya :
y = 5,4486 x 10-5 + 0,0089

4. Penentuan konsentrasi larutan CuSO4 x ppm

Absorbansi larutan CuSO4 x ppm = 0,130
y = 5,4486 x 10-5 + 0,0089

x = y 0,0089
5,4486 x 10-5
x = 0,130 0,0089
5,4486 x 10-5

x = 2222,5890 ppm
Jadi konsentrasi larutan CuSO4 x ppm adalah 2222,5890
ppm.

5. Pengenceran larutan Rhodamin B

a). Pembuatan Larutan Rhodamin B 5 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 100 ppm = 100 mL . 5 ppm
V1 = 5,0000 mL

30
 Jadi volume larutan Rhodamin B 100 ppm yang
dibutuhkan untuk pengenceran adalah sebanyak 5,0000
mL.
b). Pembuatan Larutan Rhodamin B 2 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 5 ppm = 100 mL . 2 ppm
V1 = 40,0000 mL
Jadi volume larutan Rhodamin B 5 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 40,0000 mL.
c). Pembuatan Larutan Rhodamin B 1 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 2 ppm = 100 mL . 1 ppm
V1 = 50,0000 mL
Jadi volume larutan Rhodamin B 2 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 50,0000 mL.
d). Pembuatan Larutan Rhodamin B 0,25 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 1 ppm = 100 mL . 0,25 ppm
V1 = 25,0000 mL
Jadi volume larutan Rhodamin B 1 ppm yang dibutuhkan
untuk pengenceran adalah sebanyak 25,0000 mL.
e). Pembuatan Larutan Rhodamin B 0,1 ppm
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
V1 . 0,25 ppm = 100 mL . 0,1 ppm
V1 = 40,0000 mL
Jadi volume larutan Rhodamin B 0,25 ppm yang
dibutuhkan untuk pengenceran adalah sebanyak 40,0000
mL.

6. Pembuatan persamaan hubungan antara absorbansi

konsentrasi larutan Rhodamin B
31
 y = ax + b (4)
dengan y = absorbansi
x = konsentrasi (ppm)
a,b = konstanta

Daftar I. Data Perhitungan Regresi Linier Larutan Rhodamin B

7.
No x (ppm)
8. y x2 x.y
1 5 9. 0,893 25,0000 0,4650
2 2 0,390 4,0000 0,7800
3 1 0,224 1,0000 0,2240
4 0,25 0,080 0,0625 0,0200
5 0,1 0,062 0,0100 0,0062
8,3500 1,6490 30,0725 5,4952

nilai a = nxy - xy (5)

nx2 (x)2
a = 5 (5,4952) (8,3500) (1,6490)
5 (30,0725) (8,3500)2
a = 13,70685
80,64
a = 0,1700
nilai b = y - ax (6)
n
b = 1,6490 0,1700 (8,3500)
5
= 0,0459
32
 Maka persamaan liniernya :
y = 0,1700 + 0,0459

10. Penentuan konsentrasi larutan Rhodamin B y ppm

a) Konsentrasi Rhodamin B y ppm setelah pengenceran
Absorbansi larutan Rhodamin B y ppm = 0,212
y = 0,1700x + 0,0459

x = y 0,0459
0,1700
x = 0,212 0,0459
0,1700
x = 0,9771 ppm
Jadi konsentrasi larutan Rhodamin B y ppm setelah
pengenceran adalah 0,9771 ppm
b). Konsentrasi Rhodamin B y ppm sebenarnya
V1 . M1 = V2 . M2 (3)
5 mL . M1 = 100 mL . 0,9771 ppm
M1 = 19,5420 ppm
Jadi nilai konsentrasi Rhodamin B y ppm yang
sebenarnya adalah 19,5420 ppm.

33