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Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Microbiologa I
Prcticas 3,4,5 y 6.

Preparacin de material para microbiologa, limpieza y


esterilizacin.
Preparacin de medios de cultivo.
Siembras
Caractersticas microscpicas de cultivos (Morfologa
colonial)

Equipo 4

Integrantes:

Hernndez Hernndez Mario Reynaldo

Roman Ramrez Miriam Nayeli

Soto Andrade Berenice

Asesor: Yolanda Flores


Resumen.

Para un correcto anlisis de la morfologa colonial es necesario un buen manejo y cultivo de una
bacteria, para lo que es necesario el uso de material estril y la buena eleccin del medio de cultivo
para el fin deseado, una bacteria que se siembra en un medio de cultivo slido quedar
prcticamente fija al reproducirse dar origen a millones de clulas reunidas en una masa, cada
bacteria posee caractersticas morfolgicas coloniales caractersticas tiles para el aislamiento
primario de la bacteria que le dio origen, en la presente prctica se utilizaron diversas cepas de
bacterias (S. aureus, E. coli, Klebsiella, Salmonella, B. subtilis, Proteus) al igual que medios de
cultivo(solido, gelatina, pico de flauta, caldo nutritivo) obteniendo resultados bastante parecidos a los
reportados por la literatura.

Objetivo.

Efectuar una correcta esterilizacin y preparacin del material, adems conocer el fundamento de la
preparacin de los medios de cultivos, realizar una buena eleccin de siembra de acuerdo a la
consistencia del medio de cultivo y diferenciar las principales caractersticas de crecimiento de los
microorganismos en los distintos medios.

Resultados.

Tabla 1. Resultados obtenidos en la morfologa colonial para medios


solidos
Microorganismo
Medios de

Observaciones
Luz transmitida
Consistencia

Luz reflejada
cultivo

Elevacin

Tamao
Margen
Forma

Sangre
Staphylococ

aislamiento
cus aureus

obtuvo
No se

Sangre
/Pulvinada
Exsudado

Convexa

Cremosa

Hemolisis
/circular
Irregular

2-3 mm

Opaca
Entero

Mate

beta

Mac
Ondulada

Cremosa

conkey
Irregular

Opaca
E. Coli

Plana

4 mm

Mate
Chocolate

Klebsiella

Cremosa
Circular

Opaco
Entera
Plana

3 mm

Mate
S-110

Staphylococcus

Fermentacin
Circular

Viscosa

Opaco
aureus

Entera
Plana

1 mm

Mate
S-110

aislamiento
Exsudado

obtuvo
No se
Mac

aislamiento
Salmonella

conkey

obtuvo
No se
Chocolate

No se obtuvo
aislamiento
Exsudado

Tabla 2. Medio de cultivo, Gelatina

Microorganismo Hidrolisis

Bacillus subtilis (-) negativo

Escherichia coli (-) negativo

Tabla 3. Caldo nutritivo

Microorganismo Formacin de
tapn

E. Coli (+) Positivo

Staphylococcus (+) Positivo


aureus

Tabla 4. Inclinado

Microorganismo Motilidad
E. coli (-) Negativo

Proteus (-) Negativo

Imagen 1. Staphylococcus Imagen 2. Exsudado, Imagen 3. E. coli, Mac conkey


aureus, Sangre Sangre

Imagen 4. Klebsiella, Imagen 5. Exsudado,


Chocolate Chocolae
Imagen 6. Proteus, pico de Imagen 7. E. coli, pico de Imagen 8. E. coli, S. aureus,
flauta flauta Caldo nutritivo

Discusin de resultados.
El microorganismo S. aureus es un coco inmvil, de 0,5 a 1 m de dimetro, las colonias de S.aureus
son grandes, lisas, enteras, presentan consistencia cremosa. Las colonias formadas por S.aureus
suelen estar pigmentadas con colores que van del gris al amarillo o naranja, en condiciones
anaerobias o en caldos no produce pigmento. Algunas cepas de S. aureus presentan -hemolisis,
que es ms notable en cultivos con incubacin prolongada. En la prctica esta fue sembrada en
diversos medios, en sangre no se logr aislamiento, mientras que en S-110 se obtuvo una variacin
en la consistencia obsevada, puesto que se determin que esta era viscosa. Y en cuanto al caldo
nutritivo se obtuvo la formacin del tapn.

El tracto respiratorio habitual (la faringe) est formado por distintos microorganismos entre los que
destacan los siguientes grupos y especies: estreptococos, estafilococos, micrococos, neisserias,
Moraxella catarrhalis, corinebacterias, Haemophilus spp, Porphyromonas, Prevotella,
Fusobacterium, Veillonela, Peptostreptococcus, Actinomyces, etc. Sin embargo, cuando
encontramos una patologa en la faringe, el agente etiolgico ms frecuentemente aislado es el
Streptococcus pyogenes, pero tambin, otros microorganismos patgenos que podemos hallar son:
Streptococcus pneumoniae, Streptococcus alfa-hemoltico grupo viridans, etc.
Streptococcus pyogenes es una bacteria Gram-positiva que crece en cadenas de cuatro a diez
clulas, hace hemlisis del tipo beta-hemlisis cuando se cultiva en agar sangre, debido a las
hemolisinas que produce, son cocos esfricos de dimetro comprendido entre 1 y 2 m, Los datos
obtenidos en la literatura coinciden con los encontrados en la evaluacin del mismo, solo para agar
sangre dado que fue el nico en el que se obtuvo aislamiento.

E. coli es un bacilo gramnegativo, oxidasa negativo, perteneciente a la familia de las Enterobacterias.


Es capaz de crecer en medios aerobios y anaerobios, preferentemente a 37 C; tiene formas sin
movilidad y mviles, estas ltimas con flagelos. Las colonias de bacterias exhiben una variedad de
formas y texturas que van de redondas a filamentosas tienen una gama de formas de elevacin, que
van desde simplemente convexas a umbonadas con elevacin slo en el centro.
En comparacin con la literatura no se obtuvo variedad alguna, ya que se observ de la misma forma
en la que fue descrito, fue negativo para hidrolisis, positivo en la formacin del tapn y sin motilidad.
Los organismos bacteriales del gnero Klebsiella son inmviles, Gram negativas, anaerobias
facultativas, con una prominente cpsula de polisacridos, colonias grandes planoconvexa,
mucoides, brillantes, forma irregular, tambin se observan redondeadas, bordes ondulados, lactosa
positivo (consume el carbohidrato lactosa lo cual acidifica el medio y el indicador rojo de fenol cambia
rojo-rosado, por ello las colonias se ven de ese color). Estos datos comparados con los obtenidos
difieren en que la luz reflejada fue encontrada mate.

Salmonella es un bacilo Gram (-) grueso y de longitud media (1 x 3 mm) que pertenece a la familia
Enterobacteriaceae. Son mviles con flagelos peritricos (excepto S. gallinarum y S. pullorum que son
inmviles) y sin cpsula, son anaerobios facultativos, por lo que tienen la capacidad de oxidar y
fermentar, suele producir sulfuro de hidrogeno y no hidroliza la urea. Una de las caractersticas de
este gnero es que la mayor parte de sus integrantes no pueden fermentar la lactosa ni la sacarosa.
En la prctica no se logr obtener aislamiento de la bacteria, razn por la que no pudieron ser
determinados todos los parmetros.

Bacillus subtilis es una bacteria Gram positiva, Catalasa-positiva, aerobio, comnmente encontrada
en el suelo, tiene la Presencia de anillo o tnica, o crecimiento turbio o floculento en el caldo de
cultivo, Es inmvil y capsulado, esta bacteria solo fue usada para el medio de cultivo en gelatina
donde se obtuvo una hidrolisis negativa.

Proteus es un gnero de bacterias gramnegativas, normalmente no fermentan lactosa, son oxidasa-


negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son motiles. Tienden a ser organismos pleomrficos,
no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa. Esta bacteria fue
sembrada en un medio inclinado, donde se encontr que no exista la presencia de motilidad.

Conclusin.

Se realiz de manera correcta la esterilizacin y preparacin de medios de cultivos, mientras que


con las siembras se obtuvieron problemas en el aspecto de que en algunos medios no se logr el
aislamiento y con ello no se pudo elaborar el anlisis correspondiente, pero los resultados obtenidos
de las caractersticas presentes en las colonias en las que se logr aislamiento son bastante
acertados en comparacin con la literatura.

Referencias.

Tortora G J, Funke B R, Case C L. Introduccin a la Microbiologa. 9a ed. Mxico:


Editorial Medica Panamericana.2007.
Koneman W E, Janda M W, Allen D S, Sommers M H, Dowell R V y Winn C W.
Diagnstico Microbiolgico. 3a ed. Mxico: Editorial Medica Panamericana. 1988.