Makanan Fungsional Berbasis Kedelai Dengan Bakteri Asam Laktat Yang Memproduksi Vitamin B12
Makanan Fungsional Berbasis Kedelai Dengan Bakteri Asam Laktat Yang Memproduksi Vitamin B12
ABSTRAK
Konsumsi produk kedelai telah meningkat pesat karena efek kesehatannya yang
penting yang dapat larut dalam air penting untuk mencegah patologi yang parah,
(Lactobacillus reuteri CRL 1098) untuk mencegah patologi yang disebabkan oleh
Betina hamil dibagi menjadi empat kelompok. Selain kekurangan B12 dan
kedelai non-fermentasi dan susu kedelai yang difermentasi dengan L. reuteri CRL
1098 dari akhir kehamilan hingga disapih. Pada akhir persidangan, betina dan
konsekuensi defisiensi B12 gizi baik pada tikus betina maupun pada keturunannya
senyawa dengan aktivitas B12 merupakan terapi alternatif yang menarik untuk
susu, kelompok mikroorganisme ini juga berperan dalam sistem makanan lain
seperti sosis dan minuman, konservasi makanan, pematangan zaitun dan roti
penghuni pertama, antara lain. Fleksibilitas LAB mendorong para ilmuwan untuk
mencari aplikasi baru untuk mendapatkan produk baru untuk pasar makanan
dalam nutrisi mengingat nilai gizi tinggi, kualitas protein dan asam amino dan
kelemahan seperti kandungan vitamin rendah, terutama vitamin B12 yang larut
dalam air (Riaz, 2006) yang termasuk dalam kelompok B kompleks. Vitamin ini
terlibat sebagai kofaktor dalam berbagai reaksi enzimatik dan sebagai donor metil
dalam sintesis DNA dan sel darah merah. Penting untuk menjaga integritas
selubung insulasi (sarung myelin) yang mengelilingi sel saraf (Miller, Korem,
Diet yang cukup dalam vitamin B12 sangat penting untuk mencegah
patologi yang parah, beberapa di antaranya tidak dapat dipulihkan lagi. Telah
menyebabkan retardasi mielinasi parah pada sistem saraf dan atrofi otak pada bayi
(Lovblad, Ramelli, & Remonda, 1997; Pepper & Black, 2011). Selama masa bayi,
kekurangan ini dapat menyebabkan kegagalan untuk berkembang, mudah
pancytopenia megaloblastik berat karena sintesis DNA tertunda dan cacat mielinasi
(Grattan Smith, Wilcken, Procopis, & Wise, 1997; Ramussen, Fernboff , &
Pada sapi, domba, dan ruminansia lainnya, mikroorganisme yang ada dalam rumen
semacam itu di usus kecil mereka dan mereka harus menyerap koenzim dari sumber
alami seperti daging hewan (terutama hati dan ginjal), ikan, telur, dan produk
reuteri CRL 1098 untuk menghasilkan senyawa dengan aktivitas vitamin B12
(Taranto, Vera, Hugenholtz, Font, & Sesma, 2003). Temuan ini merupakan bukti
menegaskan bahwa corrinoid yang dihasilkan oleh strain LAB ini dalam kondisi
Baru-baru ini, Molina, Medici, Taranto, dan Font de Valdez (2008b) menunjukkan
bahwa korinoid yang diproduksi oleh L. reuteri CRL 1098 secara biologis aktif dan
vitamin B12 gizi pada tikus hamil dan anak-anak mereka yang disapih. Selain
properti fungsional yang menarik ini, strain ini juga memiliki karakteristik
teknologi dan probiotik tertentu, misalnya, produksi biomassa yang mudah dan
murah; kemampuan untuk tumbuh pada substrat makanan yang berbeda; kapasitas
untuk menanggung tekanan lingkungan dan mengurangi kadar kolesterol (Taranto,
lobak kobalamin - dan untuk mengevaluasi efisiensi susu kedelai yang difortifikasi
yang diperoleh untuk mencegah gejala yang dihasilkan oleh kekurangan vitamin
B12 gizi pada ibu hamil. betina dan keturunannya yang disapih dengan
Strain yang digunakan dalam penelitian ini, L. reuteri CRL 1098, termasuk
kaldu MRS steril (De Man, Rogosa, & Shape, 1960) dan diinkubasi pada suhu 37
C selama 16 jam.
UNILEVER) digunakan sebagai substrat. Komposisi (per 100 ml) adalah sebagai
berikut: protein, 2,6 g; karbohidrat, 4 g; lipid, 1,5 g; serat, 0,6 g; Ca, 48 mg; Fe,
0,84 mg; P, 48 mg, dan Mg, 18 mg; pH 7.3. Steril SM (115 C selama 20 menit)
6,8 dan jumlah koloni total 1,6 107 cfu / ml. Konsentrasi vitamin B12 pada
untuk penilaian B12 dalam makanan (Kelleher & Broin, 1991). Secara singkat, L.
tidak difermentasi.
2.3. Binatang
Tikus betina betina / betina hamil berumur enam minggu yang hamil (empat
belas hari kehamilan dihitung dari kontak pertama dengan laki-laki) yang diperoleh
dari koloni tertutup unit pengembang yang dipelihara di CERELA Institute (San
jam.
mendapat diet defisiensi B12 (kelompok DF); B12 perempuan yang cukup yang
menerima diet kekurangan B12 ditambah susu kedelai ditambah dengan 1,3 lg per
dengan L. reuteri CRL 1098 (107 sel / hari / tikus (kelompok SRF). Diet kekurangan
B12 yang digunakan dalam penelitian ini diberikan oleh Biomedical Inc / ICN
(Irvine , CA, USA). Hewan diizinkan mengakses makanan dan air selama 30 hari
dari tengah masa kehamilan (hari ke 11 dari kawin) sampai dengan penyapihan (hari
Betina yang termasuk dalam kelompok CF dan SRF melahirkan ca. sepuluh
DF dan SF melahirkan ca. lima B12-anak muda yang cukup (kelompok DY dan
SY, masing-masing). Kaum muda tetap bersama ibu mereka sampai disapih dan
betina (kelompok DF, CF, SF dan SRF) terus menerima makanan yang sesuai
selama periode menyusui. Asupan pakan (5,2 0,6 g pakan / hari) serupa pada
Berat badan betina dicatat pada awal pemberian pakan sampai periode
penyapihan. Berat badan anak muda ditentukan pada akhir masa penyapihan (21
hari muda). Hasil diekspresikan dalam gram (g). Semua determinasi pada wanita
(ibu) dan keturunan masing-masing dilakukan pada lima dan sepuluh tikus /
(5%) - xylacin (2%) (2,0 ml / kg berat hewan; 20: 1 v / v) Bayer SA) dan berdarah
hematologi dan menjadi tabung sentrifus plastik untuk penentuan vitamin B12
dengan immunoassay.
Usus kecil yang baru dipotong dikeluarkan dan diproses untuk inklusi
Nilai hematokrit (Hto) dan jumlah leukosit dan sel darah merah ditentukan
menghitung 100 sel dalam noda darah yang diwarnai dengan May Grunwald-
cresol biru cemerlang (BCB) dicampur dan diinkubasi pada suhu 37 C selama 15
menit. Sampel darah disiapkan pada slide kaca dengan 5 ll suspensi sel. Ret dihitung
di bawah mikroskop (1000 perbesaran) di sepuluh area noda bernoda, sesuai dengan
sekitar 1000 sel darah merah. Hasil dinyatakan sebagai persentase total sel darah
merah.
cresol biru cemerlang (BCB) dicampur dan diinkubasi pada suhu 37 C selama 15
menit. Sampel darah disiapkan pada slide kaca dengan 5 ll suspensi sel. Ret dihitung
di bawah mikroskop (1000 perbesaran) di sepuluh area noda bernoda, sesuai dengan
sekitar 1000 sel darah merah. Hasil dinyatakan sebagai persentase total sel darah
merah.
Usus kecil diangkat pada akhir setiap perawatan dan diproses dengan teknik
formalin 10% dalam larutan garam fosfat (PBS) selama 48 jam pada suhu kamar
dan kemudian mengalami dehidrasi pada bak mandi alkohol berturut-turut (40%,
50%, 70%, 96% dan 100%) selama 20 menit setiap alkohol . Akhirnya, sampel
dibersihkan dengan melewati tiga bak mandi xylene berturut-turut selama 45 menit.
Jaringan itu tertanam pada parafin pada suhu 56 C selama 3 jam. Seleksi
dilakukan seperti biasa dan bagian jaringan (3-4 lm) ditempatkan pada slide kaca.
sampel dari daerah ileum dekat patch Peyer dengan uji imunofluoresensi langsung
(DIFT) (Vinderola, Perdigo'n, Duarte, Farnworth, & Matar, 2006). Tes ini
diinkubasi dengan pengenceran antibodi (1/100) dalam larutan PBS (Fosfat Buffer
Sodium 0,1 M, pH 7) selama 30 menit pada 37 C. Sampel kemudian dicuci tiga kali
mikroskop. Hasilnya dinyatakan sebagai jumlah sel IgA + (positif: sel neon) per 10
bidang (perbesaran 100 ). Hasil rata-rata tiga irisan histologis per hewan.
protokol hewan. Semua tes sesuai dengan hukum Argentina saat ini dan mengikuti
Associations.
Berat badan betina tikus dan keturunannya yang sesuai ditunjukkan pada
Tabel 1. Betina yang menerima susu kedelai L. reuteri CRL 1098-fermented (SRF
Group) dan diet defisiensi B12 menunjukkan berat badan yang serupa dengan
hewan normal (kelompok CF) mendapat susu kedelai ditambah dengan vitamin
B12 komersil. Sebaliknya, berat badan secara signifikan lebih rendah pada
kelompok betina yang kekurangan (kelompok DF) dan pengembangan yang lebih
kecil ini sebagai konsekuensi defisit B12 juga ditemukan pada wanita yang
menerima susu kedelai yang tidak difermentasi dengan diet kurang (kelompok SF).
Di sisi lain, anak perempuan betina yang disapih yang menerima makanan
yang kekurangan dan susu kedelai yang difermentasi (kelompok SRY) mencapai
berat badan lebih tinggi daripada keturunan betina yang diberi diet kurang baik
ditambah air atau susu kedelai yang tidak difermentasi (masing-masing kelompok
DY dan SY ). Nilai yang diperoleh untuk kelompok SRY secara statistik serupa (p>
0,05) terhadap yang ditemukan pada anak muda normal dari kelompok kontrol
(kelompok CY) yang mendapat susu kedelai ditambah dengan vitamin B12
komersial.
parameter hematologis yang dievaluasi (kelompok DF) dan penurunan ini tidak
dinormalisasi saat hewan menerima susu kedelai yang tidak difermentasi dengan
diet kurang (Kelompok SF). Sebaliknya, betina yang menerima diet kekurangan
yang diberikan dengan susu kedelai yang difermentasi dengan L. reuteri CRL 1098
menunjukkan pola hematologis yang serupa dengan yang ada pada hewan normal
(kelompok CF) yang mendapat vitamin B12 komersial. Tidak ada perbedaan yang
signifikan secara statistik (p> 0,05) pada jumlah total leukosit antara kelompok
B12-defisien dan kelompok B12 (wanita dan muda) yang diamati (data tidak
ditunjukkan).
Persalinan yang disapih pada wanita yang kurang diobati dengan susu
menunjukkan nilai serum vitamin B12 yang serupa (p> 0,05) terhadap yang
ditemukan pada keturunan betina normal yang mendapat susu kedelai ditambah
dengan komersial vitamin B12 (Tabel 3). Sebaliknya, konsumsi susu kedelai yang
tidak difermentasi oleh betina yang kekurangan tidak menormalkan kadar serum
vitamin B12 pada anak-anak mereka yang sesuai (kelompok SY), yang
menunjukkan nilai yang sama dengan yang ditemukan pada anak muda yang
Sebuah penurunan yang luar biasa dalam jumlah sel penghasil IgA (IgA +)
betina yang menerima susu kedelai yang difermentasi dengan L. reuteri CRL 1098
(kelompok SRF) menunjukkan jumlah sel IgA + serupa dengan betina normal yang
ditemukan pada kontrol muda (CY), yang sama secara signifikan lebih tinggi
Selain penurunan jumlah sel IgA + yang disebabkan oleh defisiensi B12
nutrisi, usus kecil betina pada kelompok DF dan SF menunjukkan perubahan parah
pada mukosa usus (ukuran infiltrasi villi, edema dan leukosit). Sebaliknya, betina
yang menerima susu kedelai yang difermentasi dengan L. reuteri CRL 1098
bersamaan dengan diet yang kurang baik, menyajikan struktur histologis normal
dari usus kecil, serupa dengan hewan kontrol yang mendapat susu kedelai yang
4. Diskusi
merupakan sektor penting di pasar FF. Saat ini, pengembangan produk susu
relevan di bidang industri dan komersial. Namun demikian, salah satu tren saat ini
lain yang berasal dari nabati. Dengan cara ini, penggunaan oat (Angelov, Gotcheva,
Kuncheva, & Hristozova, 2006), millet (Lei, Friis, & Michaelsen, 2006) dan ekstrak
berharga (Sarkar & Li, 2003; Squadrito et al., 2003). Diketahui bahwa sifat
kekurangan nutrisi mikronutrien penting seperti vitamin B12. Dalam penelitian ini,
satu komplikasi utama yang mendorong proses infeksi karena tingginya kebutuhan
gizi yang dibutuhkan untuk mendukung pertumbuhan janin dan bayi serta
efek jangka pendek dan jangka panjang, makanan ibu, bayi yang disusui dan anak
kecil memiliki kepentingan biologis yang besar. Menurut model hewan percobaan
yang digambarkan oleh Molina dkk. (2008a), diet kekurangan vitamin B12 selama
hematologis pada bendungan tikus dan keturunannya yang sesuai. Dalam pekerjaan
ini, baik betina maupun keturunannya yang mendapat susu kedelai yang tidak
difermentasi menyajikan gejala khas penipisan vitamin B12. Selain itu, konsumsi
susu kedelai yang difermentasi dengan L. reuteri CRL 1098 untuk tikus yang diberi
diet B12 kurang mampu mencegah perkembangan semua manifestasi yang menjadi
ciri kekurangan gizi ini. Betina diberi makan dengan produk fermentasi dan
normal yang serupa dengan hewan normal. Hasil ini akan menunjukkan bahwa susu
kedelai itu difortifikasi secara biologis dan bahwa konsumsinya memiliki efek
dengan gangguan respon imun (Jayarajan & Daly, 2011). Mekanisme non-spesifik
ephitelium) dan zat sekresi (lysozymes dan lendir) dipengaruhi oleh kekurangan
gizi (Erickson, Medina, & Hubbard, 2000). Beberapa penulis (Gauffin Cano &
perubahan ini dapat dikoreksi oleh pemberian strain LAB yang dipilih. Dalam
penelitian ini kami menunjukkan bahwa pemberian susu kedelai yang difermentasi
dengan L. reuteri CRL 1098 mengurangi perubahan usus histologis dan imunologis
yang disebabkan oleh defisiensi gizi B12 yang mendapatkan nilai sel IgA + yang
mendekati hewan kontrol pada wanita yang menerima susu kedelai hasil fermentasi
dan masing-masing anak muda yang disapih. Hasil ini akan membuktikan
Mengingat bahwa sebenarnya konsumsi kedelai itu penting dan bahwa LAB
kedelai yang diperkaya dengan vitamin B12 akan berkontribusi untuk mengubah