Sebuah studi toksisitas sub kronis dari merkuri klorida pada tikus

ABSTRAK

Logam berat terakumulasi sebagian besar di hati dan ginjal mamalia karena organ-organ ini
terlibat dalam detoksifikasi dan ekskresi bahan asing. Paparan kronis logam berat menyebabkan
racun dari organ-organ ini. Dalam penelitian ini efek sub-kronis merkuri (seperti mercuric chloride
pada dosis 3,75 mg / kg berat badan) pada parameter biokimia dipelajari pada hewan percobaan.
Hasil menunjukkan bahwa merkuri meningkatkan aktivitas transpartasease aspartat transpeptidase
(AST), alanin transpeptidase (ALT), laktat dehidrogenase (LDH) dan creatine phosphokinase (CPK)
secara signifikan dibandingkan kelompok kontrol. Studi ini juga menunjukkan bahwa merkuri
meningkatkan tingkat urea dan kreatinin; Dan menurunkan tingkat zat besi. Bioakumulasi merkuri
lebih tinggi pada ginjal seperti pada organ lain.

2. Bahan dan metode

2.1 Hewan

Tikus albino jantan dari strain lokal yang ditumbuk masing-masing seberat 125-150 g,
digunakan sebagai model hewan percobaan. Tikus diperoleh dari rumah hewan Fakultas Kedokteran
Universitas Assiut, Mesir. Mereka dibakar di bawah kondisi lingkungan suhu constat (22 + 2 oC) dan
kelembaban, dengan siklus 12 jam terang / gelap. Semua hewan diberi makan ad libitum dengan
jatah seimbang yang tersedia secara komersial.

2.2 Studi eksperimental

2.2.1 Penentuan dosis mematikan median (LD50)

Percobaan ini dilakukan menurut weil, (1952). Satu kelompok dari 5 hewan menerima garam
oleh gavages dan berfungsi sebagai kontrol. Dua puluh tikus digunakan untuk kuantisasi LD50 dari
mercuric chloride. Tikus yang digunakan dalam percobaan ini dibagi menjadi empat kelompok
masing-masing 5 ekor. Keempat tingkat dosis yang digunakan untuk percobaan mercuric chloride
adalah 25,50,100 dan 200 mg/kg berat badan. Semua dosis diberikan secara lisan. Jumlah hewan
yang mati untuk setiap dosis dicatat setelah 24 jam.

LD50 oral untuk merkuri klorida dihitung menjadi 75 mg / kg. Nilai ini diambil sebagai dasar
untuk memperkirakan dosis yang digunakan dalam eksperimen lebih lanjut dimana hewan yang
digunakan untuk studi subklinis untuk merkuri menerima satu dua puluh (1/20) dari LD50 yang
dihitung (3,75 MG / KG) dengan rute administrasi yang sama.
2.2.2 Studi toksisitas subklinis dari merkuri klorida

Masing-masing dua puluh tikus albino jantan menerima dosis oral 3,75 mg merkuri klorida /
kg berat badan dengan gavage dua kali seminggu selama 12 minggu. Masing-masing sekelompok 10
tikus menerima 1 ml garam normal dua kali seminggu untuk durasi yang sama dengan rute dan
berfungsi sebagai kontrol.

Setiap empat minggu, sampel darah dikumpulkan oleh pendarahan sinus orbital dari masing-
masing tikus selama percobaan berlangsung. Sampel yang dikumpulkan dibiarkan menggumpal pada
suhu kamar kemudian disentrifugasi pada 3000 rpm dan digunakan untuk pengujian parameter
biokimia.

Pada akhir masa percobaan 12 minggu, sampel darah diperoleh dan hewan-hewan tersebut
kemudian dikorbankan oleh pemenggalan kepala. Organ internal yang berbeda dan sampel otot
skletal dengan cepat dibedah. Organ atau jaringan dicuci dengan garam normal es dingin dan
disimpan pada suhu-200C sampai diuji untuk residu merkuri.

2.2.3 Analisis biokimia

Sebuah autoanalyzer (express plus; ciba Corning Diagnostics, Palo Alto, CA) digunakan untuk
analisis parameter biokimia yang ditentukan dalam penelitian ini. Fungsi ginjal dinilai oleh kadar
serum urea dan kreatinin. Alanin transpetidase (ALT), aspartat transpeptidase (AST) dan laktat
dehidrogenase (LH) digunakan untuk menentukan tingkat kasih sayang hati.

Parameter biokimia lainnya yang diobati adalah asam urat, kreatinin phosphokinase dan
alkaline phosphatase. Kalsium serum, fosfat anorganik dan besi juga diuji. Tingkat merkuri dalam
serum dan jaringan yang dihomogenkan diperkirakan menggunakan Spektrometer Serapan Atom
Thermo Scientific Serapan Atom yang dilengkapi dengan aksesori generasi uap (Spektrometri
Serapan Atom seri M, Thermo scientific, USA) (Burger, 2004).

2.2.4 Analisis statistik

Semua data disajikan sebagai mean + - SEM. Analisis varians satu arah (ANOVA) dilakukan
pada setiap variabel dan statistik Bonferroni digunakan untuk membandingkan nilai rata-rata
kelompok kontrol dan eksperimen. Perbedaan dianggap signifikan pada P <0,05. Semua analisis
statistik dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak statistik SPSS (versi 10).
Hasil

Fungsi ginjal tikus (diobati dengan merkuri) secara signifikan terhambat setelah pemberian klorida
merkuri. Peningkatan urea dan kreatinin terlihat pada minggu pertama periode percobaan dan
meningkat dengan mantap sampai minggu ke 12 (tabel 1).

* Angka dalam kurung mewakili perbedaan persentase dari nilai contol yang sesuai.

Semua nilai untuk tujuan yang diobati secara signifikan lebih tinggi dari nilai kontrol yang
sesuai.

Urea dalam serum meningkat 65,6% (34,6 +2,1 mg / dl) pada minggu ke 4 dan mencapai
74,9% (39,7 + -2,6 mg / dl) di atas nilai kontrol pada minggu ke 12, sementara peningkatan kreatinin
yang sesuai adalah 40,0% (0,63 + -0,01 mg / dl) dan 62,2% (0,73 + -0,11 mg / dl) selama periode yang
sama.

Fungsi hati juga dipengaruhi oleh pemberian merkuri. Kehamilan hati lebih terlihat pada
aktivitas enzim serum yang meningkat yang mencerminkan fungsi hepatosit. Aktivitas ketiga enzim
dinilai; AST, ALT dan LDH meningkat secara signifikan pada minggu keempat. Tingkat AST, ALT dan
LDH adalah 223%, 282% dan 108% lebih tinggi dari kelompok kontrol masing-masing setelah minggu
keempat. Analisis statistik menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan pada tingkat
AST dalam kelompok kontrol dan perlakuan setelah minggu ke 4 (tabel 2).