ENHANCEMENT OF THE SENSITIVITY AND SELECTIVITY OF THE

VOLTAMMETRIC SENSOR FOR URIC ACID USING MOLECULARLY

IMPRINTED POLYMER

Miratul Khasanah1,2,*, Mudasir3, Agus

Kuncaka3, Eko Sugiharto3, Ganden Supriyanto2,

and Siti Wafiroh2

1Student of Doctoral Program, Department of Chemistry, Faculty of Mathematic and

Natural Sciences, Universitas Gadjah Mada

2Department of
Chemistry, Airlangga
University

3Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Universitas

Gadjah Mada, Sekip Utara, Kotak Pos 21

Bls
Yogyakarta
, Indonesia
55281

Received August 6, 2010;

Accepted September 27, 2010

ABSTRAC
Sensitivitas dan selektivitas voltammetric sensor untuk asam urat dapat ditingkatkan
dengan memodifikasi elektrode bekerja menggunakan polimer dengan template molekuler
(molekuler tercetak polimer, MIP). Polymer dan MIP disintesis dari methacrylic asam
(MAA) sebagai monomer, etilena glikol dimethacrylic asam (EGDMA) seperti cross-linker,
asam urat (UA) sebagai template, dan hasil yang ditandai dengan berbagai metode. Adalah
pembentukan Poli-MAA. diidentifikasi oleh penurunan intensitas inframerah (IR) spektrum
1540 cm-1 (C = C) dan peningkatan 1700 cm-1 (C = O) dibandingkan dengan garis-garis
spektrum IR MAA dan EGDMA. Analisis SEM menunjukkan rongga polimer cukup kecil (
0.1 m) dan homogen. Pendirian MIP dilakukan penggalian asam urat dari jaringan polimer.
Spektrum IR MIP dipamerkan penurunan intensitas 1700 cm-1 (C = O) dibandingkan
dengan Bebas tercetak polimer (NIP). Data dari taruhan analisis menunjukkan bahwa polimer
pori-pori ukuran meningkat sedikit dari 37.71 untuk 38.02 setelah proses ekstraksi asam
urat dari jaringan polimer. Yang mungkin karena tidak lengkap ekstraksi asam urat dari
jaringan polimer. Modifikasi menggantung Merkurius drop elektroda menggunakan MIP
terbuat dari MAA, EGDMA, dan UA dengan tahi lalat rasio 1:3:1 diproduksi sensitif dan
selektif sensor voltammetric untuk asam urat. Sensitivitas yang diperoleh adalah 16.405 nA L
g. Adanya asam askorbat dalam konsentrasi yang sama dengan asam urat menurun
tanggapan saat ini hanya 0.08%. Dibandingkan dengan HMDE elektroda, kepekaan dan
selektivitas HMDE-MIP sensor ditingkatkan sekitar 100 dan 700 kali, masing-masing.
Deteksi batas ditemukan untuk menjadi 5.94 x10-10 M.
Kata kunci: molekuler tercetak polimer, selektivitas, sensitivitas, sensor, asam urat

PENGENALAN

Pengembangan metode voltammetric untuk menganalisis asam urat dalam darah dan
urin adalah studi yang sangat menarik karena tekad asam urat yang menggunakan metode
voltammetric terusik dengan asam askorbat yang bersamaan dalam contoh darah dan urin.
Menggunakan elektroda padat telanjang seperti kaca karbon (GC) atau karbon pasta (CP),
respon voltammetric asam urat dan asam askorbat cenderung terjadi di dekat potensi dan
kadang-kadang bahkan overlap. Selain itu, penggunaan telanjang elektroda padat
membutuhkan beberapa pretreatments yang memakan waktu lama sebelum dapat dianalisis,
dan metode tidak bisa dipakai untuk analisis solusi keasaman tinggi [1].
Penerapan elektroda padat dimodifikasi untuk analisis asam urat juga telah dilaksanakan,
seperti penggunaan emas-diubah [2], palladium GC-propionyl Kolin [3], Grafit bubuk-DNA
[4], GC-norepinefrin [5], GC-5-hidroksi triptofan [6], dan GC-CeO2 partikel nano [7].
Menggunakan elektrode yang dimodifikasi,

Analisis asam urat sangat dipengaruhi oleh adanya oksigen terlarut akibat penggunaan
tinggi oksidasi potensial. Selain itu, modifikasi dari elektroda memerlukan prosedur yang
sangat rumit, membutuhkan waktu yang lama dan elektrode modifikasi ini hanya dapat
digunakan untuk analisis konsentrasi tinggi asam urat (mM).
 Voltammetric penentuan asam urat dalam sampel urin dan serum yang menggunakan
gantung Merkurius drop elektroda (HMDE) telah dipelajari sebelumnya. Batas deteksi yang
diperoleh adalah 5.08 g/L (3.02x10-8 M). dengan kepekaan 0.1515 na L/g [8]. Namun,
adanya asam askorbat dalam konsentrasi yang sama dengan asam urat penurunan sinyal saat
ini sebesar 63.61% [9].
Ada beberapa publikasi yang menggambarkan penerapan molekuler tercetak polimer
(MIP) sebagai bahan modifikasi elektroda untuk meningkatkan penginderaan elektrokimia
elektroda. Poli-melamin tercetak co HMDE chloranil-modifikasi ini diaplikasikan pada
sensor di analisis voltammetric creatine dalam larutan dan biologi cairan [10]. Prasad et Al.
[11] dikembangkan MIP dibatasi silika gel sebagai Sorben pada fase padat ekstraksi (SPE).
Kemudian, SPE berbasis MIP dikombinasikan dengan sensor berbasis MIP dan digunakan
untuk menentukan asam urat menggunakan diferensial pulsa katodik stripping voltammetry
(DPCSV). MIP disiapkan dari melamin dan chloranil.
Dalam penelitian terbaru sintesis dan karakterisasi polimer dengan template
molekuler (MIP) telah dilakukan. Prinsip umum molekul pencetakan didasarkan pada proses
seperti mana fungsional dan monomer menghubungkan lintas dikopolimerisasi depan analyte
target (jejak molekul) yang bertindak sebagai molekul template. Polimer dibuat dari asam
methacrylic (MAA) sebagai monomer, cross-linker etilena glikol dimethacrylic asam
(EGDMA) dan inisiator 2, 2'-azobis isobuthyronitrile (AIBN), sementara template asam urat.
Pendirian MIP dilakukan penggalian asam urat dari jaringan polimer. MIP dibentuk
digunakan sebagai bahan untuk lapisan menggantung Merkurius drop elektroda (HMDE)
untuk mendapatkan sebuah sensor yang sensitif dan selektif untuk penentuan asam urat.
Dengan sistem pencetakan ini cetakan khusus akan dibentuk untuk tertentu molekul (analyte)
sehingga analisis analyte tidak terganggu oleh kehadiran matriks lain karena cetakan hanya
akan tepat untuk spesies yang dianalisis.

Bahan-bahan EKSPERIMENTAL
Bagian Bahan kimia yang digunakan adalah asam urat (UA) (Fluka), methacrylic
asam (MAA) dan etilena glikol dimethacrylic asam (EGDMA) (Sigma Aldrich), 2, 2'-azobis
isobuthyronitrile (AIBN), dimethylformamide (DMF), kloroform, etanol, metanol, asam
askorbat (AA), Na - asetat, asam asetat, dan amonium asetat (Merck, Darmstadt, Jerman),
dan kemurnian tinggi N2. Kemurnian semua bahan kimia adalah analisis kelas (pa). MAA,
EGDMA dan AIBN yang diencerkan dengan kloroform. Solusi saham asam urat 1000 mg/L
disiapkan dengan melarutkan asam urat 0.1000 g dalam sekitar 10 mL sodium hidroksida
50% dan diencerkan dengan ultra tinggi (UHP) murni air sampai 100 mL dalam labu
Volumetrik. Solusi asam urat bekerja di bawah 1 mg/L yang disiapkan setiap hari oleh
menipiskan solusi bekerja tepat. UHP air digunakan untuk menyiapkan solusi lain, dan pH
yang disesuaikan dengan penambahan asetat buffer.

Instrumentasi

SIBATA PRODUCTS yang digunakan dalam penelitian ini adalah 797

Computrace Voltammetry (MVA sistem-1) yang terdiri dari wadah sampel, pengaduk, unit
prosesor,
PC, bekerja elektroda HMDE, referensi elektroda Ag AgCl dan Pt elektroda bantu. Peralatan
lain yang spectrophotometer inframerah (IR) Shimadzu, pemindaian mikroskop elektron
(SEM), Brunauer Emmet Teller (BERTARUH) (Quantachrome, versi
2.1), micropipet, pH meter, hot plate dan peralatan pendukung lainnya.

Prosedur

Sintesis MIP
MIP dibuat dengan mencampur larutan monomer, salib linker (dalam kloroform), template
dan inisiator. Dalam studi ini, mol MAA, EGDMA, dan
asam urat (UA) dikendalikan pada rasio 1:3:1 (yaitu rasio tahi lalat yang assumpted pada
pembentukan polimer). Campuran monomer, salib linker dan inisiator dalam pelarut
kloroform dipanaskan pada 50 C selama tiga menit pada piring panas dan solusi asam urat
kemudian ditambahkan. Campuran itu dipanaskan sampai padat polimer terbentuk. Padat
polimer yang hancur sampai 140 ukuran mesh dan dicuci dengan kloroform. Asam urat
kemudian diambil dari jaringan polimer dengan berulang kali mencuci dengan 1 M amonium
asetat dalam etanol: asam asetat: air = 40:25:35, diikuti dengan pencucian menggunakan
asam asetat: etanol = 1:3 dan akhirnya mencuci dengan air sampai bebas dari asetat [12].
Poli-MAA dan MIP dipanaskan dalam oven di 105 C selama 30 menit.

Karakterisasi MIP
Karakterisasi polimer dan MIP dilakukan dengan menggunakan spectrophotometer
inframerah (IR),
pemindaian elektron mikroskop (SEM) dan Salzburg Emmet Teller (taruhan)
Persiapan sensor berdasarkan MIP
MIP disintesis digunakan untuk memodifikasi HMDE melalui proses electro-lapisan.
Jumlah 20 mg MIP dibubarkan pada 30 mL DMF, dimasukkan ke dalam sel elektrokimia dan
dilapisi untuk HMDE selama 120 detik dalam kisaran potensial antara 0,4 V dan-1.4 V
(versus Ag/AgCl). Untuk menentukan hasil optimal, elektroda dimodifikasi diterapkan pada
analisis asam urat pada pH 5 dan pengendapan waktu 120 detik menggunakan stripping scan
tingkat 59.5 mV/sec. Deteksi batas (LOD), kepekaan dan selektivitas
HMDE-MIP sensor Asam urat standar solusi 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, dan 1.0 g/l pada pH 5
dianalisis menggunakan dimodifikasi elektroda dengan 3 kali replikasi. Kurva antara
konsentrasi asam urat dan saat ini setiap konsentrasi asam urat dibangun. Lereng kurva
kalibrasi digunakan untuk menentukan sensitivitas sensor. Selektivitas sensor dipelajari
dengan penambahan meningkatkan jumlah asam askorbat. Tanggapan saat ini diperoleh dari
analisis asam urat tanpa dan dengan penambahan asam askorbat dibandingkan.

HASIL DAN DISKUSI

Sintesis dan karakterisasi MIP

Meningkatkan selektivitas HMDE dilakukan dengan memodifikasi elektrode

menggunakan MIP melalui proses electrocoating. Polimer disiapkan oleh bereaksi MAA,
EGDMA dan asam urat dengan rasio tahi lalat
1:3:1. reaksi polimerisasi adalah reaksi radikal. Dalam penelitian ini, untuk membantu
pembentukan polimer, reaksi radikal inisiator AIBN ditambahkan. Reaksi dilaksanakan di
kloroform. Inisiator AIBN adalah sangat reaktif reagen radikal ketika dipanaskan.
Konsentrasi berlebihan yang sangat kecil dari yang dibutuhkan dapat menghasilkan ledakan.
Polimer diperoleh adalah putih solid. Reaksi pembentukan Poli-MAA dijelaskan dalam
gambar 1..
Polymer dan MIP yang ditandai dengan inframerah (IR) Spektrofotometri. Spektrum IR
MAA dan Poli-MAA ditampilkan dalam Fig. 2 dan 3, masing-masing.

Gambar 1. Reaksi polimerisasi Poli-MAA

Fig 2. Spektrum IR MAA

Fig 3. Spektrum IR Poli-MAA

Fig 4. Spektrum IR NIP

Fig 5. Spektrum IR MIP (asam urat telah diambil dari polimer)

Fig 6. Hasil dari menggunakan analisis permukaan Poli-MAA

SEM

Garis-garis spektrum menunjukkan bahwa Poli-MAA telah dibentuk, ditandai dengan

hilangnya IR spectral puncak intensitas 1540 cm-1 (C = C) dan meningkat intensitas pada
1700 cm-1(C=O). Ekstraksi asam urat dari rantai polimer / jaringan juga telah dilakukan.
Spektrum IR polimer sebelum (NIP) dan setelah ekstraksi (MIP) asam urat dari polimer
jaringan disajikan dalam gambar 4 dan 5, masing-masing. Pada spektrum NIP, intensitas
puncak di 1700 cm-1 sangat tinggi, menunjukkan adanya sejumlah besar fungsional
karbonil (C = O) berasal dari asam methacrylic, EGDMA dan asam urat.
Ketika asam urat diekstrak dari jaringan polimer, intensitas 1700 cm-1 menurun,
menyarankan penurunan jumlah C = O karbonil. Fakta ini menunjukkan bahwa beberapa
molekul asam urat telah diambil dari cetakan dan jaringan dibentuk polimer. TARUHAN
data menunjukkan bahwa ada hanya perubahan kecil dalam distribusi ukuran pori-pori
terbesar antara NIP dan MIP, yaitu dari 37.71 untuk 38.02 . Hal ini menunjukkan bahwa
ekstraksi asam urat dari polimer jaringan mungkin tidak benar-benar mencapai. Permukaan
polimer yang dibentuk telah cukup kecil pori-pori (0.1 m diameter) dan relatif homogen
(Lihat gambar 6).
Lapisan MIP untuk HMDE
 MIP yang telah disintesis dan ditandai dilarutkan dalam DMF dan kemudian
melapiskan pada HMDE melalui electrocoating menggunakan berbagai potensi dari 0,4 V
untuk-1.4 V. dimodifikasi elektroda dikeringkan dengan mengangkat elektrode dari sel
elektrokimia dan flowi ng gas nitrogen melalui untuk 2 menit di udara terbuka. Elektroda
dimodifikasi dibentuk digunakan untuk analisis asam urat standar solusi menggunakan
stripping voltammetry. Voltammogram asam urat dibentuk menggunakan HMDE dan
HMDE-MIP dibandingkan satu sama lain.
Pada potensi positif, tidak ada voltammogram asam urat diperoleh, tetapi
voltammogram muncul di potensi negatif. Potensi negatif lebih sinyal saat ini lebih tinggi
yang diproduksi, tetapi negative potensi yang lebih rendah daripada-1.2 V ukuran yang lebih
besar dari HMDE terjadi, maka peningkatan arus diperoleh pada langkah pengupasan tanah
ini karena meningkatnya jumlah asam urat terakumulasi pada meningkatkan luas permukaan
elektroda. Optimasi MIP lapisan potensial pada permukaan HMDE dilakukan bersamaan
dengan optimasi potensial pada HMDE-MIP akumulasi asam urat. Potensi optimal MIP
lapisan dan asam urat preconcentration ditemukan untuk menjadi -1 V (versus Ag/AgCl).
Reaksi coating polimer pada permukaan Elektrode negatif potensi diperkirakan untuk
melanjutkan menurut persamaan yang diberikan pada gambar 7.
Potensi puncak asam urat yang Diperoleh dari analisis menggunakan HMDE-MIP
menunjukkan ada pergeseran dibandingkan dengan potensi peak menggunakan HMDE.
Namun, voltammogram yang diperoleh dengan menggunakan HMDE-MIP telah
dasar lebih luas dan tidak horisontal (miring) (Lihat
Gambar 8).
Hasil MIP lapisan optimasi dan asam urat preconcentration menunjukkan bahwa
sinyal saat ini menggunakan HMDE-MIP lebih kecil
menggunakan telanjang HMDE (turun sekitar 38%). Mungkin
alasan untuk sinyal lebih rendah adalah karena adanya polimer yang menempel pada
permukaan elektroda, menyebabkan penurunan luas permukaan Merkurius elektroda.

Sensitivitas dan deteksi batas

Sensitivitas dari sensor dan deteksi batas metode dipelajari dengan menganalisis
larutan standar asam urat dalam kisaran konsentrasi
0,2-1.0 g/L menggunakan HMDE-MIP. Hasil yang diperoleh ditunjukkan pada gambar 9.
Linearitas sangat baik respon arus diungkapkan oleh persamaan regresi y = 16.405 x +
20.169 dengan korelasi koefisien (r) 0.9963. kepekaan metode ditemukan untuk menjadi
16.405 nA L/g sekitar 100 kali lebih tinggi daripada yang diperoleh dengan menggunakan
telanjang HMDE [9]. Batas deteksi yang Diperoleh dari studi ini adalah 0,094 g/L (5.60x10-
10 M), mana cukup rendah untuk analisis asam urat dalam sampel alami.

Selektivitas sensor HMDE-MIP

Salah satu masalah utama pada penentuan asam urat dalam sampel serum dengan
metode voltammetry adalah adanya asam askorbat, senyawa yang biasanya ditemukan
bersama dengan asam urat dalam serum dan urin

Tabel 1. Penyimpangan asam urat saat ini pada rasio konsentrasi asam urat dan asam askorbat

metode ditemukan untuk menjadi 5.94x10-10 M, yang masih cukup rendah untuk asam urat
tekad di
Konsentrasi [UA]: [AA] arus

UA: asam urat; AA: asam askorbat

Saat ini

sampel alami seperti serum darah.

PENGAKUAN
 Pertama penulis ingin mengakui Universitas Airlangga untuk dukungan finansial dari
penelitian ini melalui Program Hibah Kompetisi dan Riset bangunannya Nasional 2009 dan
untuk menyediakan apapun sampel. Menggunakan HMDE, adanya asam askorbat dalam
konsentrasi yang sama dengan asam urat menurun tanggapan saat ini 63.61% [9]. Gangguan
tinggi disebabkan oleh persaingan asam urat dan asam askorbat difusi ke permukaan
Merkurius elektroda selama proses akumulasi. Dalam studi ini, untuk menentukan
selektivitas sensor asam urat dikembangkan dengan memodifikasi HMDE menggunakan
teknik MIP, gangguan asam askorbat pada penentuan asam urat oleh sensor dimodifikasi
telah dipelajari. Pengaruh asam askorbat pada penentuan asam urat ditunjukkan dalam tabel
1.
Asam askorbat telah tidak signifikan mengganggu pada penentuan asam urat menggunakan
HMDE-MIP. Kehadiran
asam askorbat dalam konsentrasi yang sama dengan asam urat
menurun tanggapan saat ini hanya 0.08%. Hal ini menunjukkan bahwa menggunakan sistem
pencetakan, selektivitas elektrode terhadap asam urat adalah sekitar 700 kali daripada
menggunakan telanjang HMDE [9]. Rongga yang dibentuk di HMDE - MIP hanya sesuai
dengan analyte yang dianalisis, sehingga kehadiran kelebihan asam askorbat relatif tidak
mempengaruhi penentuan asam urat.

KESIMPULAN

Persiapan sukses Poli-MAA ditandai oleh perubahan pada puncak intensitas spektrum IR
1700 cm-1 (C = O) dan 1540 cm-1 (C = C). SEM
karakterisasi menunjukkan bahwa rongga Poli-MAA relatif kecil dan homogen. TARUHAN
data menunjukkan bahwa ekstraksi asam urat dari polimer jaringan tidak benar-benar
dilakukan. Namun, pengaruh asam askorbat pada penentuan asam urat dalam Serum dan
Urine pengupasan Voltammetry menggunakan menggantung Mercury Dropnd
Modifikasi elektroda dengan MIP disiapkan dengan menggunakan

Elektroda, melanjutkan 2
sensitif dan selektif sensor untuk asam urat. Sensitivitas yang diperoleh dengan menggunakan
metode ini adalah 16.405 nA
Selektivitas sensor terhadap asam urat hadapan asam askorbat sangat tinggi. Adanya asam
askorbat dalam konsentrasi yang sama dengan asam urat menurun tanggapan saat ini hanya
0.08%.
Dibandingkan dengan HMDE elektroda, kepekaan dan selektivitas sensor HMDE-MIP
ditingkatkan sekitar 100 dan 700 kali, masing-masing. Deteksi batas metode ditemukan
untuk menjadi 5.94x10-10 M, yang masih cukup rendah untuk penentuan asam urat dalam
alam sampel seperti serum darah.

PENGAKUAN

Pertama penulis ingin mengakui Universitas Airlangga untuk dukungan finansial dari
penelitian ini melalui Program Hibah Kompetisi dan Riset bangunannya Nasional 2009 dan
menyediakan fasilitas apapun