PERCOBAAN VI

GLUTAMAT PIRUVAT TRANSAMINASE (GPT)

I. Tujuan Percobaan
Setelah meleakukan percbaan ini diharapkan mahasiswa dapat :
1. Melakukan pemeriksaan fungsi hati melalui pemeriksaan Glutamat Piruvat
Transaminase
2. Memahami prinsip dasar prnrntuan aktivitas enzim GPT
3. Menginterpretasikan hasil pemeriksaan yang diperoleh

II. Prinsip

III. Pre-Analitik
A. Persiapan Subjek Untuk Proses Sampling
1. Dini Fuji Lestari
2. Erik Firman Rusdianto
3. Geni Wulandari
4. Ratih Sunandini
5. Rima Nur Adillah Effendi
B. Pembagian Kerja
1. Plain Manager : Rima Nur Adillah Effendi
2. QC : Dini Fuji Lestari
3. Pipetasi : Erik Firman Rusdianto
4. Pengukuran : Geni Wulandari
5. Pelaporan : Ratih Sunandini
C. Kelengkapan Alat dan Bahan
a. Alat
a.Tabung reaksi
b. Pipet piston
c.Beaker glass
d. Spektrofotometer
e.Sentrifuga
f. Spuit 3ml
b. Bahan
g. Serum, heparin atau EDTA A-plasma
h. Alkohol

c. Kandungan Reagensia
Reagen :
i. Buffer/subtract Konsentrasi pengukuran
 Tris buffer 100 mmol/l, pH 7.5
L-alanin 0.6 mol/l
j. Enzim/koenzim/a-oxoglutarat
a-oxoglutarat 15 mmol/l
LD 1.2 U/ml
NADH 0.18 mmol/l
d. Persiapan dan Stabilitas Larutan
k. Buffer/subtract :
Larutan siap untuk digunakan. Larutan stabil sampai dengan tanggal
kadaluarsa bila disimpan pada suhu 2-8 C

l. Enzim/koenzim/a-oxoglutarat :
Rekonstruksi satu vial enzim/koenzym/ a-oxoglutarat 2 dengan perbandingan
volume buffer substrat yang tepat sebagai berikut :
2ml untuk larutan 20x2 ml kit AS 1200
10ml untuk larutan 10x10 ml kit AS 1205
20ml untuk larutan 5x20 ml kit AS 1268
Larutan stabil selama 14 hari pada suhu 2-8 C atau 24 jam pada suhu 15-25 C

IV. Teori Dasar

Adanya kondisi patologis sebagai akibat dari penyakit hati menyebabkan
terjadinya perbahan-perubahan biokimiawi dalam tubuh. Kerusakan sel-sel hati
menyebabkan perubahan pada organelnya, dan perubahan morfologi ini akan fungsi
biokimiawi sel hati, dan akhirnya dapat menimbulkan adanya pertanda-pertanda
biokimiawi yang dapat diperiksa di dalam loboratorium klinik.

Salah satu perubahan-perubahan biokimiawi yang terjadi pada sel-sel hati

adalah adanya peningkatan permeabilitas membrane sel yang ditandai dengan
meningkatnya aktivitas enzim-enzim hati dalam darah. Akibat adanya peningkatan
permeabilitas membrane sel hati komponen-komponen sitoplasma akan ke luar dari sel,
sehingga akan terjadi peningkatan aktivitas enzim-enzim hati yang dapat diukur dalam
darah. Contoh beberapa enzim-enzim sitoplasma hati antara lain: GOT, GPT, LDH dan
MDH.

Glutamat Piruvat Transaminase (GPT) merupakan salah satu enzim yang

terdapat dalam sitoplasma hati. Bila terjadi kerusakan pada hati, misalnya pada infeksi
virus hepatitis akan terjadi kerusakan pada hati, misalnya pada infeksi virus hepatitis
akan terjadi peningkatan permeabilitas membrane sel, sehingga komponen-komponen
sitoplasma akan keluar dari sel, maka berdasarkan fenomena tersebut peningkatan
aktivitas enzim-enzim dalam serum dapat diukur.

GPT merupakan salah satu pertanda enzim kerusakan sel-sel hati Nilai normal
dalam serum :
 25 C 30 C 37 C
Laki-laki Sampai 22 U/I Sampai 29 U/I Sampai 40 U/I
Wanita Sampai 17 U/I Sampai 22 U/I Samapai 31 U/I

V. Analitik
Prosedur Percobaan
Spektrofotometer diset pada panjang gelombang 365 nm, 340 nm atau 334 nm,
menggunakan kuvet berdiameter 1cm
Temperatur pemeriksaan 25C, 30 C, 37 C
Pengukuran dilakukan terhadap udara

Cara Kerja

Larutan Reagen 1 ml
Sampel 0,1 ml
Campurkan, baca absorbansi permulaan setelah 1 menit, dan jalankan stopwatch pada
waktu yang sama. Ulangi pembacaan setelah tepat 1, 2, dan 3 menit

Perhitungan
Perhitungan aktivitas GPT dalam sampel adalah :
U/I : 3235 x d A 365 nm/menit
1780 x d A 344 nm/menit
1746 x d A 330 nm/menit

VI. Pengamatan
Tabel Kontrol

Kontrol Absorbansi X-X (X-X)2

1 1,795
1,786 7,857 mg/dL
1,786
2 1,894
1,831 55,872
1,830
3 1,831
1,849
1,797
VII. Perhitungan
Kelompok 1
K1
Kelompok 2
Kelompok 3
K1 = (A1-A2) + (A2-A3) 1746
2
= (2,736-2,368) + (2,368-2,486) 1746
2
= 223,488
K2 = (A1-A2) + (A2-A3) 1746
2
= (2,578-2,579) + (2,579-2,693) 1746
2
= -100,395
Kelompok 4
K1 = (A1-A2) + (A2-A3) 1746
2
= (1,791-1,776) + (1,776-1,735) 1746
2
= 48,015 g/dL

K2 = (A1-A2) + (A2-A3) 1746

2
= (1,769-1,771) + (1,771-1,746) 1746
2
= 20,079 g/dL

K3 = (A1-A2) + (A2-A3) 1746

 2
= (1,760-1,745) + (1,745-1,734) 1746
2
= 22,698 g/dL

VIII. Kesimpulan