Kirim Pesanan untuk Reprints untuk reprints@benthamscience.

net
18 The Open Conference Prosiding Journal, 2014, 5, (Suppl-2, M29) 18-20
2210-2892 / 14 2014 Bentham Terbuka

Identifikasi Senyawa Alkaloid dan Antioksidan Kegiatan Rafflesia

cantleyi dan Tuan rumah yang, Tetrastigma tuberculatum
Muhammad A. Zulkffle, Nor S. Osman *, Zaini Yusoff, Mohd Lias Kamal dan Jamil Tajam
Fakultas Ilmu Terapan, Universiti Teknologi Mara Perlis, 02600, Arau, Perlis, Malaysia
Abstrak: senyawa alkaloid di Rafflesia cantleyi dan tuan rumah, Tetrastigma tuberculatum diidentifikasi menggunakan metode
skrining fitokimia dan teknik HPLC. Hasil penelitian menunjukkan tes positif untuk host, T. tuberculatum yang menunjukkan
adanya alkaloid sedangkan tes skrining untuk R. cantleyi menunjukkan bahwa alkaloid adalah absenced. Kedua ekstrak
kemudian mengalami HPLC untuk identifikasi alkaloid dan kafein digunakan sebagai standar. Data spektroskopi dari HPLC
mengungkapkan adanya kafein di kedua ekstrak metanol. Ekstrak metanol dari kedua sampel juga diuji untuk aktivitas
antioksidan dengan menggunakan aktivitas radikal bebas DPPH. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan dari
R. cantleyi dan T. tuberculatum sebanding dengan referensi standar, BHT tetapi lebih tinggi dari tokoferol alpha standar.
Kata kunci: HPLC, skrining fitokimia, Rafflesia cantleyi.
PENDAHULUAN
Rafflesia sp. adalah genus kecil dari parasit dari keluarga Rafflesiaceae dimana bunga dan buah adalah satu-
satunya bagian yang datang di luar jaringan tanaman inang [1]. Sebagai tanaman holoparasitic endofit, itu tumbuh
benar-benar tertanam dalam inangnya dan bergantung sepenuhnya pada tuan rumah mereka untuk semua nutrisi [2].
Lokal dikenal sebagai bunga pakma dan Patma (Jawa), dapat ditemukan di Sumatera dan Semenanjung Malaysia
(perbukitan Perak dan Pahang utara). Aborigin Sakai percaya bahwa itu dapat mempercepat pengiriman melahirkan
[3] dan di Jawa, perempuan digunakan sebagai afrodisiak [1]. Tetrastigma sp., Milik anggur keluarga Vitaceae dan
itu dikenal sebagai Lipoi oleh masyarakat lokal di Sabah [4]. Spesies yang ditemukan di daerah subtropis dan tropis
di Asia, Malaysia, dan Australia yang mereka tumbuh di hutan hujan primer. Spesies dari genus ini terkenal sebagai
tuan rumah tunggal tanaman parasit di keluarga Rafflesiaceae yang Rafflesia arnoldii dan juga Rafflesia cantleyi [4].
Spesies tanaman ini dianggap memiliki sifat obat yang digunakan untuk mengobati pembengkakan pankreas,
demam, batuk dan selain itu juga telah digunakan untuk meningkatkan sirkulasi darah, anti-inflamasi, analgesik,
pengobatan demam tinggi, radang paru-paru dan kanker anti [ 4]. Genus Rafflesia memiliki kekurangan biologi
dasar dan studi ilmu terkait terutama senyawa kimia. Penelitian sebelumnya pada genus Rafflesia mengungkapkan
adanya dua senyawa alkaloid (nikotin dan kafein) bersama dengan tiga senyawa fenolik (catechin, proantosianidin
dan asam fenolik) yang pertama terdeteksi di Rafflesia hasseltii dan inangnya, Tetrastigma leucostaphylum [5].
Penelitian sebelumnya pada spesies Rafflesia mendeteksi empat senyawa tannin bersama dengan glukosida
phenilpropanoid di Rafflesia kerrii [6]. Sampai saat ini, tidak ada menerbitkan laporan tentang
* Alamat korespondensi untuk penulis ini di Fakultas Ilmu Terapan, Universiti Teknologi Mara Perlis, 02600, Arau, Perlis
Malaysia; E-mail: da_imie@yahoo.com

studi fitokimia Rafflesia cantleyi kecuali untuk aktivitas antimikroba yang [7]. Penelitian ini melibatkan identifikasi
kafein dengan kombinasi skrining fitokimia dan deteksi HPLC dan evaluasi aktivitas antioksidan pada ekstrak
metanol kasar Rafflesia cantleyi dan tuan rumah, Tetrastigma tuberculatum.

BAHAN DAN METODE

Umum Prosedur Percobaan
TLC: Precoated Silica HPLC: Shimadzu LC Solusi gel 60 F 254 HPLC (tebal 0,25 m System, Merck). (pompa, UV /
Vis detektor SPD-20A, auto-sampler SIL-20A, kontroler CBM-20A) yang dilengkapi dengan kolom analitis
(Zorbax gerhana XDB-C18, 4,6 mm id x 250 mm ODS, 5μm). Reagen dan pelarut yang digunakan adalah semua
analitis dan HPLC kelas.
Tanaman Bahan
Buds Rafflesia cantleyi dan tuan rumah, Tetrastigma tuberculatum dikumpulkan di Royal Bellum, Tasik Banding,
Grik, Perak, Malaysia pada tahun 2012.
Ekstraksi dan Penyusunan tanaman Ekstrak
Kuncup Rafflesia cantleyi (966.80g) dan tuan rumah, Tetrastigma tuberculatum (16,45 g) dikeringkan selama
tiga hari sebelum cincang dan digiling menjadi bentuk bubuk kering. Kedua sampel diekstraksi dengan cara
maserasi dengan petroleum eter (2x24 jam) dan disaring menggunakan corong Buchner. Sampel dimaserasi lagi
dengan metanol (3x24 jam). Sampel disaring dan pelarut diuapkan untuk mendapatkan ekstrak metanol kasar R.
cantleyi dan T. tuberculatum.
Alkaloid Deteksi oleh alkaloid Skrining
Testekstrak metanol kasar R. cantleyi dan tuan rumah, T. tuberculatum disaring secara kualitatif untuk alkaloid
Tabel 1. tes skrining alkaloid dari R. cantleyi.
Tidak ada Konstituen Uji Inference
1 Alkaloid Dragendorff ini (Sofowora, 1993) -
Mayer (Sofowora, 1993) -
Table tes skrining 2. Alkaloid dari T. tuberculatum.
Tidak ada Konstituen Uji Inference
1 Alkaloid Dragendorff ini (Sofowora, 1993) +
Mayer (Sofowora, 1993) +
Key: + = ini; - = tidak ada
Tabel 3. Hasil HPLC.
Sampel Retensi Waktu (min) Lokasi (%)
Standard kafein 2,319 100,0
Rafflesia cantleyi 2,396 14,45
Tetrastigma tuberculatum 2,358 39,85

konstituen memanfaatkan metode standar analisis. Beberapa kuantitas setiap bagian dari ekstrak metanol mentah
diaduk dengan 5 ml dari 1% air HCl pada air mandi dan disaring. Filtrat, 1 ml diambil secara individual menjadi 2
tabung reaksi. Untuk bagian pertama, beberapa tetes reagen Dragendorff ini telah ditambahkan; terjadinya endapan
oranye-merah diambil sebagai positif. Untuk kedua 1 ml, reagen Mayer ditambahkan dan penampilan dari endapan
penggemar berwarna akan menjadi indikasi keberadaan alkaloid [8].
Alkaloid Deteksi dengan HPLC
The metanol mentah ekstrak solusi kemudian mengalami HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
untuk identifikasi kafein menggunakan solusi kafein sebagai standar. Kondisi HPLC didasarkan pada metode Miean
dan Mohamed (2001) [9] dengan sedikit modifikasi. Kondisi HPLC adalah, kolom: Nova-Pak C18 (3,9 x 150 mm,
4μm); fase gerak: metanol / air (30:70 v / v, pH 2,5 dengan asam trifluoroacetate; laju aliran: 1 mL / menit .;
detektor: PDA 254 nmsampel.
Aktivitas Antioksidan Uji oleh DPPH Radical Scavenging Activity [10]
Lima konsentrasi yang berbeda dari solusi yang 20 ug / mL, 40 mg / mL, 60 mg / mL, 80 mg / ml dan 100 ug /
mL disusun. solusi DPPH dibuat dengan melarutkan 7,9 mg DPPH menjadi 100 mL metanol untuk menghasilkan 20
pM dari DPPH solusi. Kemudian, 1 mL dari 20 mg larutan sampel / mL ditambahkan dengan 3 mL larutan DPPH
dan campuran ini didiamkan selama 30 menit sebelum absorbansi dapat diukur. warna larutan berubah dari ungu
gelap ke kuning. absorbansi dari sampel diukur dengan menggunakan Spectronic 20 pada 517 nm. Butylated
hyroxytoluene (BHT) dan α-tokoferol yang disiapkan dan disajikan sebagai antioksidan standar). Rumus
yang digunakan untuk menghitung persentase radikal bebas ditunjukkan di bawah ini:
HASIL
Hasil skrining alkaloid dari Rafflesia cantleyi dan tuan rumah, Tetrastigma tuberculatum adalah seperti disajikan
pada Tabel 1 dan Tabel 2 masing-masing.
PEMBAHASAN
tes skrining alkaloid dari ekstrak metanol kasar R. cantleyi dan T. tuberculatum menunjukkan tes positif untuk
tuan rumah, T. tuberculatum yang menunjukkan adanya alkaloid sedangkan tes skrining untuk R.cantleyi
menunjukkan bahwa alkaloid adalah absenced. Analisis spektroskopi dengan HPLC menunjukkan bahwa kedua R.
cantleyi dan T. tuberculatum mengandung kafein tetapi konsentrasi kafein lebih tinggi pada T. tuberculatum. Bukti
ini dibangun berdasarkan nilai waktu retensi dari kedua sampel dibandingkan dengan waktu retensi kafein standar.
Uji DPPH didasarkan pada kemampuan DPPH, bebas stabil radikal untuk membuat tdk berwarna dengan adanya
antioksidan. Dalam studi ini, butylated Hydroxy Toluene (BHT) dan α-tokoferol digunakan sebagai antioksidan
acuan standar. Karakteristik dari antioksidan dan efek penghambatan ekstrak tanaman dinyatakan pemulungan
sebagai aktivitas IC50, seperti yang disajikan pada Tabel 4. tertinggi diamati dengan butylated aktivitas
hidroksitoluen pembilasan (BHT) minyak mentah yang metanol IC 50 nilai ekstrak adalah 11.15μg / mL . R. cantleyi
The dan T. tuberculatum sebanding dengan standar (BHT) dengan masing-masing. IC 50 nilai 14.58μg / mL dan
19,12 ug / mL Namun aktivitas pemulungan dari kedua ekstrak lebih tinggi dari standar α-tokoferol yang IC cantleyi
50 nilai dan 36,07 tuan rumah, ug / mL. T. Penelitian ini menunjukkan bahwa R. tuberculatum memiliki aktivitas
antioksidan dan menunjukkan bahwa kedua terkandung kafein.
20 The Open Conference Prosiding Journal, 2014, Volume 5 Zulkffle et al.
KESIMPULAN
Penapisan alkaloid pada R. cantleyi dan T. tuberculatum menunjukkan bahwa alkaloid adalah kehadiran di T.
tuberculatum sementara di R. cantleyi alkaloid yang tidak terdeteksi. Namun, analisis spektroskopi dengan HPLC
menunjukkan bahwa kedua R. cantleyi dan T. tuberculatum mengandung kafein. Ekstrak metanol R. cantleyi dan T.
tuberculatum menunjukkan properti antioksidan tinggi berdasarkan aktivitas antioksidan dengan DPPH.
BENTURAN KEPENTINGAN
Para penulis mengkonfirmasi bahwa konten artikel ini tidak memiliki konflik kepentingan.
UCAPAN TERIMA KASIH
Kami mengucapkan terima kasih Kementerian Pendidikan Tinggi Malaysia untuk FRGS Grant dan Universiti
Teknologi Mara untuk dukungan keuangan dan fasilitas. Tabel 4. Hasil dari aktivitas antioksidan olehradikal DPPH
PUSTAKApemulungan aktivitas.
[1] Burkill, IH Kamus Produk Ekonomi Melayu Semenanjung. Volume I & II. Kementerian Pertanian dan Sampel IC
50
(mg / ml)
Koperasi, Kuala Lumpur, 1966. [2] Barkman, TJ; Seok-Hong, LK; Mat Salleh-, JN Mitocondrial Butylated hydroxytoluene 11.15
urutan DNA mengungkapkan kerabat photosyntetic Rafflesia, bunga terbesar di dunia. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 2004, 101 (3),
a-tokoferol 36,07
787-792. [3] Burkill, IH; Haniff, obat desa M. Melayu. Gard. Banteng. Rafflesia cantleyi 14,58
Straits Settlem, 1930, 6 (2):. 167-332. [4] Hossain, AM; Shah, DM; Gnanaraj, C .; Iqbal, M. In vitro Total Tetrastigma
tuberculatum 19,12
fenolat, isi flavanoid dan aktivitas antioksidan minyak esensial, berbagai ekstrak organik dari daun tanaman obat tropis
Tetrastigma dari Sabah. Asia Pac. J. Trop. Med., 2011, 717-721. [5] Sofiyanti, N .; Wahibab, NN; Purwanto, D .; Syahputra, E .;
Salleh, MK Alkaloid dan fenolik Rafflesia hasseltii Suringar dan inangnya Tetrastigma leucostaphylum (Dennst.) Alston ex
Mabb. Di Taman Nasional Bukit Tigapuluh, Riau: Sebuah Studi Awal 2008, 9, 17-20. [6] Kanchanapoom, T .; Kamel, MS;
Picheansoonthon, C .; Luecha, P .; Kasaiand, R .; Yamasaki, K. dihidrolisa tanin dan fenilpropanoid dari Rafflesia kerrii Meijer
(Rafflesiaceae). J. Nat. Med, 2007, 61:. 478-479. [7] Azizan, N .; Mohamad, N .; Sahalan, aktivitas ZA antibakteri Rafflesia
cantleyi Solms-Laubach melawan Gram positif dan negatif. Jurnal Sains Kesihatan Malaysia, 2011, 9 (2), 51-54. [8] Sofowora,
Tanaman A. Skrining untuk Bioactive Agen. Dalam: Tanaman Obat dan Obat Tradisional di Afrika. 2nd Ed. Spektrum Books
Ltd, Sunshine House, Ibadan, Nigeria, 1993, hlm. 134-156. [9] Miean, KH, Mohammed, S. Flavonoid (myricetin, quercetin,
kaempferol, luteolin dan apigenin) isi dari tanaman tropis yang dapat dimakan. J. Agric. Makanan Chem 2001, 49:. 3106-3112.
[10] Pyo, YH; Lee, TC; Logendra, L .; Rosen, RT Antioksidan aktivitas dan fenolik senyawa ekstrak lobak Swiss. Makanan
Chem., 2004, 19-26.
Diterima: 29 Mei 2013 Revisi: 6 September 2013 Diterima: 29 Oktober 2013
© Zulkffle et al .; Lisensi Bentham Terbuka.
Ini adalah sebuah artikel akses terbuka berlisensi di bawah Lisensi Creative Commons Attribution Non Komersial
(http://creativecommons.org/licenses/by- nc / 3.0 /), yang memungkinkan terbatas, non-komersial penggunaan, distribusi dan
reproduksi dalam media apapun, asalkan pekerjaan benar dikutip.