Anda di halaman 1dari 14

Halaman 1

Int. J. Mol. Sci. 2014, 15, 16.511-16.521; doi: 10.3390 / ijms150916511


Jurnal Internasional Indonesia
Ilmu Molekuler
ISSN 1422-0067
www.mdpi.com/journal/ijms
Artikel
Penjelasan Struktur dan Evaluasi Sitotoksik
Polyacetylenes baru dari Marinir Sponge Petrosia sp.
Yung-Shun Juan 1,2,3, †, Chien-Chih Lee 4,5, †, Chia-Wei Tsao 6, Mei-Chin Lu 6,7,
Mohamed El-Shazly 8, Huei-Chuan Shih 9, Yu-Cheng Chen 6, Yang-Chang Wu 10,11, *
dan Jui-Hsin Su 6,7, *
1
Departemen Urologi, Rumah Sakit Kaohsiung Hsiao-Kang, Kaohsiung 812, Taiwan;
E-Mail: juanuro@gmail.com
2
Departemen Urologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Kedokteran Kaohsiung,
Kaohsiung 807, Taiwan
3
Departemen Urologi, Rumah Sakit Universitas Kedokteran Kaohsiung, Kaohsiung 807,
Taiwan
4
Pusat Penelitian Epigenome, Departemen Laboratorium Kedokteran,
Rumah Sakit Universitas Pengobatan China, Taichung 404, Taiwan; E-Mail:
insect@hotmail.com.tw
5
Sekolah Pengobatan Cina, Fakultas Kedokteran Tiongkok, Universitas Kedokteran China,
Taichung 404, Taiwan
6 Graduate Institute of Bioteknologi Kelautan, Universitas Dong Hwa Nasional,
Pingtung 944, Taiwan;
E-Email: gaway4297@yahoo.com.tw (C.-WT); jinx6609@nmmba.gov.tw (M.-CL);
j520c@hotmail.com (Y.-CC)
7
Museum Nasional Biologi dan Laut Kelautan, Pingtung 944, Taiwan
8
Departemen Pharmacognosy dan Natural Products Chemistry, Fakultas Farmasi,
Universitas Ain-Shams, Organisasi Jalan Unity Afrika, Abassia, Kairo 11566, Mesir;
E-Mail: elshazly444@googlemail.com
9
Departemen Keperawatan, Universitas Meiho, Pingtung 912, Taiwan;
E-Mail: x00002213@meiho.edu.tw
10 Sekolah Farmasi, Fakultas Farmasi, China Medical University, Taichung 404,
Taiwan
11 Pengobatan Cina Pusat Penelitian dan Pengembangan, China Medical
University Hospital,
Taichung 404, Taiwan

Penulis ini berkontribusi sama terhadap pekerjaan ini.
* Penulis untuk siapa korespondensi harus ditangani;
E-Email: yachwu@mail.cmu.edu.tw (Y.-CW); x2219@nmmba.gov.tw (J.-HS);
Tel .: + 886-4-2205-7153 (Y.-CW); + 886-8-8822-370 (J.-HS);
Faks: + 886-4-2206-0248 (Y.-CW); + 886-8-8825-087 (J.-HS)
AKSES TERBUKA

Halaman 2
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16512
Diterima: 19 Agustus 2014; dalam bentuk yang direvisi: 11 September 2014 / Diterima: 12
September 2014 /
Diterbitkan: 18 September 2014
Abstrak: spons Petrosia sp. menghasilkan lima senyawa polyacetylenic (1 - 5), termasuk
dua polyacetylenes baru, petrosianynes A (1) dan B (2). Struktur senyawa ini
dijelaskan oleh analisis spektroskopi rinci dan dibandingkan dengan fisik dan
data spektral analog terkait yang diketahui. Senyawa 1 - 5 dipamerkan sitotoksik yang
signifikan
aktivitas melawan panel sel kanker yang terbatas.
Kata kunci: spons; Petrosia; poliasetilen
1. Perkenalan
Sejak hari-hari awal produk kimia laut, spons (Porifera) telah menempati atasan tempat di
fokus peneliti yang bertujuan untuk mengungkapkan potensi terapeutik dari organisme bentik
ini [1]. Ribuan metabolit sekunder telah diidentifikasi dari organisme ini dan kontribusinya
terhadapnya perpustakaan kimia berlanjut dengan hasil yang menarik. Tema spons-sentris
seperti itu tidak mengherankan, karena organisme semacam itu telah terlihat sejak zaman
purba dan metabolit sekundernya yang unik menyarankan segudang aplikasi potensial [2-4].
Di antara Porifera genera dipelajari dengan baik adalah Petrosia sp.
Mereka telah menjalani pemeriksaan intensif setelah pemisahan asiklik yang berbeda
polyacetylenes dengan aktivitas biologis potensial dari spons milik genus ini [5-7]. Meskipun
fakta bahwa poliaketel asiklik tertentu dapat ditemukan di tanaman terestrial, terutama
keluarga Asteraceae, Petrosia sp. telah dikenal sebagai sumber polyacetylenes dengan
struktur yang unik fitur seperti yang telah ditunjukkan selama dua dekade terakhir penelitian
[8]. Diperkirakan 33% polyacetylenes dari semua yang dikenal telah diisolasi dari Petrosia
sp. [9]. Selain yang unik fitur struktural dari polyacetylenes terisolasi, kebanyakan aktivitas
biologis yang menarik telah terjadi dilaporkan untuk kelas metabolit sekunder ini, termasuk
antimikroba [10], antijamur [11,12], penghambatan reverse transcriptase [13] dan antitumor
[9,14,15]. Dalam mencari bioaktif metabolit dari organisme laut, spons Petrosia sp. (Gambar
1) dipilih secara rinci Investigasi, karena ekstrak kasar EtOAc menunjukkan sitotoksisitas
yang signifikan pada enam sel tumor manusia.
Bioassay-dipandu fraksinasi mengakibatkan isolasi dua senyawa baru polyacetylenic (1 dan
2) dan tiga dikenal polyacetylenes (3 - 5) (Gambar 2). Aktivitas sitotoksik metabolit (1 - 5)
melawan sel T manusia seperti lymphoblast-cell cell (CCRF-CEM), limfoblas T manusia,
akut leukemia limfoblastik (MOLT-4), leukemia myelogenous kronis manusia (K-562),
kolon manusia adenokarsinoma (DLD-1), human prostate carcinoma (LNCaP) dan payudara
bergantung hormon manusia garis sel kanker (T-47D) dievaluasi.

Halaman 3
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16513
Gambar 1. Sponge Petrosia sp.
Gambar 2. Struktur metabolit terisolasi 1 - 5.

OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
HAI
HAI
HAI
HAI
OH
OH
OH
OH
1
3
5
7
9
11
1315
17
19
21
23
25
27
29
30
14
4
5
26
27
1
2
3
4
5
OH
OH
OH
OH

Halaman 4
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16514
2. Hasil dan Pembahasan
Setelah pemisahan kromatografi Petrosia sp., Fraksi larut EtOAc menghasilkan lima senyawa
polyacetylenic, dua di antaranya adalah produk alami baru (1 dan 2). Semua senyawa
diperoleh sebagai minyak tak berwarna. Senyawa-senyawa baru diberi nama sepele
petrosianynes A (1) dan B (2). Tiga senyawa 3 - 5 yang ditemukan menjadi identik dengan
polyacetylenes dikenal 15,16-dihydropetrosianyne (3) [16], petrosynol (4) [17] dan
petrosynone (5) [10], masing-masing, melalui perbandingan data fisik dan spektroskopi
mereka dengan yang dilaporkan dalam literatur.
Senyawa 1, yang diisolasi sebagai minyak berwarna, ditemukan memiliki rumus molekul
C 30 H 44 O 4 disimpulkan oleh HRESIMS pada m / z 491,3135 [M + Na] +. Spektrum IR dari
1 menunjukkan serapan band karena hidroksil (3425 cm -1) dan alkuna (3280 dan 2225 cm -1)
gugus. MS, 1 H dan 13 C NMR (Tabel 1) dari 1 menunjukkan pola sinyal
karakteristik yang mengingatkan pada Struktur simetris C2. Struktur planar dan semua 1
H dan 13 C pergeseran kimia dari 1 adalah dijelaskan dengan analisis spektroskopi 2D NMR,
terutama 1 H 1 H NYAMAN dan HMBC korelasi (Gambar 3). Dengan demikian, 1
ditemukan untuk memiliki dua acetylenes terminal C-1 / C-2 dan C-29 / C-30, dua
asetil yang disubstitusikan pada C-12 / C-13 dan C-18 / C-19, satu ikatan rangkap pada C-15
/ C-16 dan empat hidroksi kelompok di C-3, C-14, C-17 dan C-28. Selain itu, data
spektroskopi dari 1 (IR, 1 H dan 13 C NMR)
adalah sama dengan 4, yang diisolasi dari spons yang sama. Perbandingan 1 H dan
13 Data C NMR dari 1 dengan 4 [17] menunjukkan bahwa sinyal yang sesuai
dengan 1,2-Disubstituted ganda
obligasi di 4 digantikan oleh sinyal dari ikatan tunggal di 1. Sebagai metabolit baru 1 diisolasi
bersama-sama
dengan 3 [16] dan 4 dari spesies yang sama dan memiliki kerangka molekul yang sama,
diusulkan
bahwa ketiga senyawa tersebut disintesis melalui jalur biosintesis yang umum dan dengan
demikian memiliki
konfigurasi absolut yang sama pada C-3, C-14, C-17 dan C-28. Atas dasar analisis di atas,
Struktur 1 didirikan dan senyawa bernama petrosianyne A.
Tabel 1. 1 H dan 13 data C NMR selama 1 dan 2.
Posisi
1
2
δ H (J dalam Hz) a
δ c (mult.) b
δ H (J dalam Hz) a
δ c (mult.) b
1
2,47 d (2,0)
72,8 (CH)
2,57 d (2,0)
74,0 (CH)
2
85,0 (C)
83.3 (C)
3
4,38 ddd (6.5, 6.5, 2.0)
62.3 (CH)
4,84 d (6.0)
62,8 (CH)
4
1,72 m
37,6 (CH 2)
5,60 m
128,5 (CH)
5
1,45 m
24,9 (CH 2)
5.91 dt (15.0, 7.0)
134.3 (CH)
6
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
2,08 m
31,8 (CH 2)
7
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
8
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
9
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
10
1,51 m
28,4 (CH 2)
1,48 m
28,4-29,7 (CH 2)
11
2,21 ddd (7.0, 7.0, 2.0)
18,7 (CH 2)
2,14 m
18,7 (CH 2)
12
86,7 (C)
81,0 (C)
13
79,6 (C)
77.3 (C)
14
5.28 dd (5.0, 1.5)
58,6 (CH)
3,03 dd (6.5, 5.5)
17,6 (CH 2)
15
5.71 dd (5.0, 1.5)
132,0 (CH)
5,59 m
128,0 (CH)
16
5.71 dd (5.0, 1.5)
132,0 (CH)
5,59 m
131,0 (CH)
17
5.28 dd (5.0, 1.5)
58,6 (CH)
5.18 d (7.0)
58.2 (CH)

Halaman 5
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16515
Tabel 1. Cont.
Posisi
1
2
δ H (J dalam Hz) a
δ c (mult.) b
δ H (J dalam Hz) a
δ c (mult.) b
18
79,6 (C)
79,8 (C)
19
86,7 (C)
86.1 (C)
20
2,21 ddd (7.0, 7.0, 2.0)
18,7 (CH 2)
2.21
18,7 (CH 2)
21
1,51 m
28,4 (CH 2)
1,51 m
28,4-29,7 (CH 2)
22
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
23
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
24
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
1,27-1,42, m
28,4-29,7 (CH 2)
25
1,28-1,40, m
28,7-29,2 (CH 2)
2,08 m
31,8 (CH 2)
26
1,45 m
24,9 (CH 2)
5.91 dt (15.0, 7.0)
134,4 (CH)
27
1,72 m
37,6 (CH 2)
5,60 m
128,5 (CH)
28
4,38 ddd (6.5, 6.5, 2.0)
62.3 (CH)
4,84 d (6.0)
62,8 (CH)
29
85,0 (C)
83.3 (C)
30
2,47 d (2,0)
72,8 (CH)
2,57 d (2,0)
74,0 (CH)
500 MHz di CDCl 3; b 125 MHz di CDCl 3.
Gambar 3. Key 1 H- 1 H NYAMAN (▬), HMBC (→) dan NOE (
) Korelasi dari 1 dan 2.

OH
OH
1
3
5
14
11
13
15
1
4
2
12
OH
OH
OH
14
2
10
12
16
18
20
21
Metabolit 2 diperoleh sebagai minyak berwarna. HRESIMS-nya menunjukkan formula
molekulnya C 30 H 40 O 3, dengan sebelas derajat ketidakjenuhan. Spektrum IR menyarankan
adanya hidroksil (3414 cm -1) dan alkuna (3284 dan 2209 cm -1) gugus. 13 Data C NMR dari 2
(Tabel 1) menunjukkan kehadiran 30 sinyal karbon, yang ditugaskan dengan bantuan
spektrum DEPT sampai delapan karbon asetilena [δ 86,1, 83,3 (2C), 81,0, 79,8, 77,3, dan
74,0 (2C)], tiga oksikarbon [δ 62,8 (2C) dan 58,2], enam karbon olefinik [δ 134,4, 134,3,
131,0 128,5 (2C) dan 128,0] dan tiga belas metilen.
Perbandingan 1 H dan 13 data C NMR (Tabel 1) senyawa 2 dan 4 menunjukkan bahwa
struktur 2 adalah mirip dengan 4, dengan pengecualian sinyal ditugaskan untuk C-14. Sinyal
oksimetrik (δ H 5,26, 1H, s; δ C 58,5) di 4 digantikan oleh sinyal metilen (δ H 3,03, 1H, dd, J =
6,5, 5,5 Hz; δ C 17,6) di 2. Selanjutnya, Nuklir Overhauser Effect (NOE) korelasi antara H 2 -
14 dan

Halaman 6
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16516
oxymethine proton H-17 menunjukkan konfigurasi Z untuk ikatan ganda pada C-15 / C-16
(Gambar 3). Hasil ini, bersama-sama dengan rinci 1 H 1 H NYAMAN dan HMBC korelasi
(Gambar 3), mendirikan struktur 2 sebagai turunan 14-deoksi dari 4, dan metabolit itu
bernama petrosianyne B.
Aktivitas sitotoksik senyawa 1 - 5 terhadap proliferasi panel terbatas kanker garis sel,
termasuk sel CCRF-CEM, MOLT-4, K-562, DLD-1, LNCaP dan T-47D, dievaluasi
(Tabel 2). Senyawa 1 dan 3 - 5 menunjukkan aktivitas sitotoksik yang signifikan terhadap
tiga sel kanker, CCRF-CEM, MOLT-4 dan K-562 (IC 50 <4 mg / mL), dan senyawa 1 juga
dipamerkan signifikan sitotoksisitas terhadap LNCaP dan T-47D. Selain itu, senyawa 3
dipamerkan sitotoksisitas signifikan menuju jalur sel DLD-1 dan LNCaP. Senyawa 2 tidak
sitotoksik (IC 50> 4 mg / mL) terhadap diatas enam sel kanker. Menurut struktur 14, senyawa
2, turunan 14-deoksi dari 4, memiliki nilai-nilai IC 50 dari> 4 mg / mL terhadap garis sel
karsinoma atas; Oleh karena itu, disarankan itu gugus hidroksi C-14 adalah penting bagi
aktivitas sitotoksik senyawa 14.
Tabel 2.
Cytotoxicities (IC 50 ug / mL) senyawa 1 - 5.
Senyawa
Garis sel
CCRF-CEM MOLT-4
K-562
DLD-1
LNCaP
T-47D
1
0,6 ± 0,2
<0,1
3,3 ± 1,2
NA b
3,2 ± 1,2 0,3 ± 0,1
2
6,3 ± 2,5
5,7 ± 1,2 7,8 ± 3,2
NA
NA
NA
3
0,8 ± 0,2
0,7 ± 0,1 3,4 ± 1,1
<0,1 3,2 ± 1,4
NA
4
2,5 ± 1,8
3,0 ± 1,6 4,0 ± 2,3 7,4 ± 3,1
NA
4.4 ± 1.1
5
0,4 ± 0,1
0,7 ± 0,5 3,4 ± 0,4 3,7 ± 1,8 5,9 ± 2,2 7,3 ± 2,2
doxorubicin sebuah
<0,1
<0,1
<0,1 5,8 ± 2,1 1,9 ± 1,1 <0,1
sebuah obat antikanker klinis digunakan sebagai kontrol positif; b NA, tidak aktif pada 10 ug / mL.
3. Bagian Eksperimental
3.1. Prosedur Umum
Nilai rotasi optik diukur dengan polarimeter digital Jasco P-1010 (Jasco, Tokyo, Jepang).
Spektrum IR dicatat pada spektrometer inframerah Varian Digilab FTS 1000 Fourier
transform (Varian Inc., Palo Alto, CA, AS). Spektrum NMR direkam pada Varian Mercury
Plus 400 FT-NMR atau Varian Unity INOVA 500 FT-NMR, (Varian Inc., Palo Alto, CA,
USA) instrumen di 400 MHz (atau 500 MHz) untuk 1 H NMR dan 100 MHz (atau 125 MHz)
untuk 13 C NMR di CDCl 3. ESIMS adalah diperoleh dengan spektrometer massa APEC II
Bruker (Bruker Daltonics, Billerica, MA, USA). Gravitasi kromatografi kolom dilakukan
pada silika gel (230-400 mesh, Merck, Darmstadt, Germany).
Kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan pada katalis Kieselgel 60 F254 (0,2 mm, Merck,
Darmstadt, Jerman) dan bintik-bintik divisualisasikan dengan penyemprotan dengan 10% H 2
SO 4 solusi diikuti oleh pemanasan. Kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dilakukan
dengan menggunakan sistem yang terdiri dari dari sebuah pompa Hitachi L-7100 (Hitachi,
Ltd., Tokyo, Jepang) dan sebuah port injeksi Rheodyne 7725 (Rheodyne LLC, Taman
Rohnert, CA, AS). Sebuah kolom fase normal preparatif (Hibar 250 × 21,2 mm, Supelco,
silika gel 60, 5 μm, Supelco Inc., Bellefonte, PA, USA) digunakan untuk HPLC.

Halaman 7
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16517
3.2. Bahan hewan
Spons Petrosia (Vosmaer, 1887) sp. milik kelas Demospongiae, pesan Haplosclerida
(Topsent 1928), keluarga Petrosiidae (Van Soest, 1980) [18]. Itu dikumpulkan oleh penyelam
scuba di kedalaman 15-20 m dari terumbu karang di lepas pantai Pingtung, Taiwan, pada
bulan Februari 2013. Spon ini tidak beraturan bentuk dan warna ungu gelap dalam warna
(Gambar 1). Kerangka ectosomal padat, granular, dengan tangensial jaringan kelompok kuat
tunggal membentuk jala subrectangular, dengan kelompok kuat bebas dikelompokkan di
nodus dari jaringan (Gambar 4). Mikroba melengkung yang melimpah diamati. Keputihan
Choanosomal Saluran sedikit dibedakan dengan saluran membujur yang membujur dan
menghubungkan saluran pendek dan tidak beraturan dari strongyles dan free strongyles.
Megascleres diukur dari 188-322 μm dan mikroskop dari 72-100 μm (Gambar 5). Spons itu
diidentifikasi sebagai Petrosia sp. dan spesimen voucher disimpan di Museum Nasional
Biologi Laut dan Aquarium, Taiwan (spesimen no SP2013-1).
Identifikasi taksonomi dilakukan oleh Prof. Li-Lian Liu, Universitas Sun Yat-sen Nasional,
Kaohsiung, Taiwan.
Gambar 4. Petrosia sp. spesimen: Detail dari ektosom, menunjukkan bahan asing.
Gambar 5. spikula dari pinggiran ectosomal diamati menggunakan mikroskop optik.

Halaman 8
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16518
3.3. Ekstraksi dan Pemisahan
Spons Petrosia sp. (1,16 kg berat segar) disimpan beku kemudian dibekukan kering. Itu
bahan kering beku (370 g) dicincang dan diekstraksi secara mendalam dengan EtOAc (5 × 2
L). Itu Ekstrak EtOAc diuapkan untuk menghasilkan residu (4,81 g), yang dikenai kolom
terbuka kromatografi pada silika gel, eluting dengan n -hexane (H) -EtOAc (E) gradien dan
EtOAc (E) -acetone (A) gradien, untuk menghasilkan 13 fraksi. Fraksi 9 (450 mg), dielusi
dengan n -hexane: EtOAc (1: 2), adalah lebih lanjut dimurnikan dengan HPLC yang normal
fase menggunakan n -hexane: EtOAc (3: 1) untuk membeli 5 (12,7 mg). Fraksi 10 (720 mg),
dielusi dengan murni EtOAc, dipisahkan oleh HPLC fase normal, menggunakan n -hexane:
EtOAc (3: 2) untuk membeli tujuh subfraksi (10A-10G). Subfraksi 10B dipisahkan oleh
HPLC fase normal yang digunakan n -hexane: EtOAc (5: 2) untuk membeli 2 (5,5 mg).
Senyawa 1 (2,1 mg), 4 (361,7 mg) dan 3 (8,2 mg) diperoleh dari subfraksi 10C-10E dengan
fase normal HPLC menggunakan n -hexane: EtOAc (2: 1), n -hexane: EtOAc (3: 2) dan n -
hexane: EtOAc (1: 1), masing-masing. Petrosianyne A (1): minyak berwarna; [α] 24 D
= 82 (c 0,2, CHCl 3); IR (rapi) ν max 3425, 3280, 2923, 2225, 1651, 1458 dan 1270 cm -1; 1 H
dan 13 data C NMR, lihat Tabel 1; ESIMS m / z 491 [100, (M + Na) +]; HRESIMS m / z
491.3135 (calcd. Untuk C 30 H 44 O 4 Na, 491,3137). Petrosianyne B (2): minyak
berwarna;[α] 24 D = 37 (c 0,2, CHCl 3); IR (rapi) ν max 3414, 3284, 2926, 2854, 2209, 2096,
1647 dan 1237 cm -1; 1 H dan 13 data C NMR, lihat Tabel 1; ESIMS m / z 471 [100, (M + Na)
+];
HRESIMS m / z 471.2873 (calcd. Untuk C 30 H 40 O 3 Na, 471,2875). 15,16
Dihydropetrosianyne (3): minyak berwarna; [α] 24 D 18 (c 2,0, CHCl 3); [menyala [α] 22 D 10
(c 0,14, CHCl 3)] [16]. Petrosynol (4): minyak berwarna; [α] 24 D 102 (c 2,0, CHCl 3);

[menyala [α] 22 D 111 (c 1,29, CHCl 3)] [17].


3.4. File tambahan
HR-ESI-MS, 1 H NMR, dan 13 C NMR spektrum untuk dua senyawa baru (1 dan 2) serta
1 H NMR, dan 13 C NMR spektrum untuk senyawa 3 - 5 tersedia sebagai Informasi
Tambahan.
3.5. Uji Sitotoksisitas
Uji MTT dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya dengan beberapa modifikasi [19].
Sitotoksisitas tes senyawa 1 - 5 dilakukan terhadap sel T lymphoblast-seperti jaringan sel
manusia (CCRF-CEM), limfoblas T manusia, leukemia limfoblastik akut (MOLT-4),
leukemia myelogenous kronis manusia (K-562), adenokarsinoma kolon manusia (DLD-1),
karsinoma prostat manusia (LNCaP) dan manusia kanker payudara bergantung hormon (T-
47D) menggunakan metoda MTT colorimetric. Kanker yang diuji manusia baris sel yang
diunggulkan di 4 × 10 4 per baik di 96-baik piring kultur sebelum pengobatan dengan berbeda
konsentrasi senyawa yang diuji. Senyawa 1 - 5 dilarutkan dalam DMSO (kurang dari 0,02%)
dan segera dilakukan ke 1,25, 2,5, 5, 10 dan 20 μg / μL sebelum percobaan. Setelah
perawatan untuk 72 jam, sitotoksisitas senyawa yang diuji ditentukan dengan menggunakan
uji proliferasi sel MTT (thiazolyl blue tetrazolium bromida, Sigma-M2128, Sigma-Aldrich,
St. Louis, MO, AS). MTT berkurang oleh dehidrogenase mitokondria dari sel yang layak ke
produk formazana ungu. Itu Produk MTT-formazan dilarutkan dalam DMSO. Nilai
absorbansi cahaya (OD = OD 570 - OD 620) yang direkam pada panjang gelombang 570 dan
620 nm menggunakan pembaca ELISA (Alat Laboratorium Anthos,

Halaman 9
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16519
Salzburg, Austria) untuk menghitung konsentrasi yang menyebabkan 50% inhibisi (IC 50),
yaitu, sel konsentrasi di mana nilai absorbansi cahaya kelompok eksperimen adalah setengah
dari kelompok kontrol Hasil ini dinyatakan sebagai persentase dari kontrol ± SD didirikan
dari n = 4 sumur per satu percobaan dari tiga percobaan terpisah.
4. Kesimpulan
Dalam beberapa tahun terakhir, serangkaian polyacetylenes baru diisolasi dari spons laut
Petrosia sp. [5,7-16,20-25]. Beberapa senyawa poliaketamin ini telah ditemukan
sitotoksisitas signifikan [5,7,9,14,15,20,21,24]. Penyelidikan lanjutan kami tentang unsur
kimia spons Petrosia sp. telah menyebabkan isolasi dua senyawa polyacetylenic baru (1 dan
2), bersama dengan tiga polyacetylenes dikenal (3 - 5). Senyawa 1 dan 3 - 5 dipamerkan
sitotoksisitas signifikan terhadap tiga sel kanker, CCRF-CEM, MOLT-4 dan K-562 (IC 50 <4
mg / mL), dan senyawa 1 juga menunjukkan sitotoksisitas signifikan terhadap LNCaP dan T-
47D. Selain itu, senyawa 3 menunjukkan sitotoksisitas yang signifikan terhadap jalur sel
DLD-1 dan LNCaP. Hasil ini menyarankan itu poliasetilen sebagai kelas unik metabolit
sekunder mewakili harta karun potensial senyawa sitotoksik.
Bahan Tambahan
Angka Tambahan dapat ditemukan di http://www.mdpi.com/1422-0067/15/9/16511/s1.
Ucapan Terima Kasih
Penelitian ini didukung oleh hibah dari National Museum of Marine Biology and Aquarium
dan Kementerian Ilmu Pengetahuan dan Teknologi (PALING 103-2320-B-291-001-MY3),
dan CMU di bawah
Tujuan Rencana Universitas Top Departemen Pendidikan, Taiwan, diberikan kepada Yang-
Chang Wu
dan Jui-Hsin Su.
Kontribusi Penulis
Yang-Chang Wu dan Jui-Hsin Su merancang seluruh eksperimen dan berkontribusi pada
manuskrip
persiapan. Yung-Shun Juan dan Chien-Chih Lee meneliti data dan menulis manuskrip
tersebut.
Mei-Chin Lu berkontribusi terhadap uji bioaktivitas. Chia-Wei Tsao berkontribusi pada
ekstraksi dan isolasi.
Mohamed El-Shazly, Huei-Chuan Shih dan Yu-Cheng Chen berkontribusi dalam mengatur
dan membimbing
eksperimen dan penjelasan struktur.
Konflik kepentingan
Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.
Referensi
1. Thomas, TRA; Kavlekar, DP; LokaBharathi, PA Obat-obatan laut dari spons-mikroba
asosiasi-review Maret Obat 2010, 8, 1417-1468.

Halaman 10
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16520
2. Andavan, GSB; Lemmens-Gruber, R. Cyclodepsipeptides dari spons laut: Agen alami
untuk penelitian obat. Maret Obat 2010, 8, 810-834.
3. Ebada, SS; Lin, W; Proksch, P. sesterterpenes Bioaktif dan triterpen dari spons laut:
Kejadian dan signifikansi farmakologis. Maret Obat 2010, 8, 313-346.
4. Essack, M; Bajic, VB; Archer, JAC Baru-baru ini mengkonfirmasi senyawa pembawa
yang menginduksi apoptosis
Diisolasi dari spons laut relevansi potensial dalam pengobatan kanker. Maret Obat 2011, 9,
1580-1606.
5. Kim, JS; Lim, YJ; Im, KS; Jung, JH; Shim, CJ; Lee, CO; Hong, J; Lee, H. Sitotoksik
polyacetylenes dari spons laut Petrosia sp. J. Nat. Melecut. 1999, 62, 554-559.
6. Minto, RE; Blacklock, BJ Biosintesis dan fungsi polyacetylenes dan sekutu alami
produk. Prog. Lipid Res. 2008, 47, 233-306.
7. Lee, YJ; Yoo, SJ; Kang, JS; Yun, J; Shin, HJ; Lee, JS; Lee, HS Sitotoksik
petrosiacetylenes dari spons laut Petrosia sp. Lipid 2013, 48, 87-91.
8. Kim, JS; Im, KS; Jung, JH; Kim, YL; Kim, J; Shin, CJ; Lee, CO Bioaktif baru
polyacetylenes dari spons laut Petrosia sp. Tetrahedron 1998, 54, 3151-3158.
9. Mejia, EJ; Magranet, LB; de Voogd, NJ; TenDyke, K; Qiu, D; Shen, YY; Zhou, Z;
Crews, P. Struktur dan evaluasi sitotoksik terhadap asyclic ene-ynes baru dan yang diketahui
dari a
Samoa Amerika Petrosia sp. Sepon. J. Nat. Melecut. 2013, 76, 425-432.
10. Fusetani, N; Shiragaki, T; Matsunaga, S; Hashimoto, K. Bioaktif metabolit laut XX.
Petrosynol dan petrosynone, antimikroba C 30 polyacetylenes dari spons laut Petrosia
sp .: Penentuan konfigurasi absolut. Tetrahedron Lett. 1987, 28, 4313-4314.
11. Fusetani, N; Li, HY; Tamura, K; Matsunaga, S. Antijamur brominasi C18 asam asetilenat
dari spons laut, Petrosia Volcano Hoshino. Tetrahedron 1993, 49, 1203-1210.
12. Li, HY; Matsunaga, S; Fusetani, N. Asam kortikat A-C, asam asetilen antijamur dari
spons laut, Petrosia corticata. J. Nat. Melecut. 1994, 57, 1464-1467.
13. Isaacs, S; Kashman, Y; Loya, S; Hizi, A; Loya, Y. Petrosynol dan asam petrosolat, dua
novel
inhibitor alami dari reverse transcriptase dari virus human immunodeficiency dari Petrosia
sp.
Tetrahedron 1993, 49, 10.435-10.438.
14. Hitora, Y; Takada, K; Okada, S; Matsunaga, S. Miyakosynes A-F, sitotoksik metil
bercabang
acetylenes dari spons laut Petrosia sp. Tetrahedron 2011, 67, 4530-4534.
15. Horikawa, K; Yagyu, T; Yoshioka, Y; Fujiwara, T; Kanamoto, A; Okamoto, T; Ojika, M.
Petrosiols A-E, tetraols diyne neurotropik diisolasi dari strongylata Okinawa spons Petrosia.
Tetrahedron 2013, 69, 101-106.
16. Ochi, M; Ariki, S; Tatsukawa, A; Kotsuki, H .; Fukuyama, Y; Shibata, K. Bioaktif
polyacetylenes dari spons laut Petrosia sp. Chem. Lett. 1994, 1, 89-92.
17. Kobayashi, M; Mahmud, T; Tajima, H .; Wang, W; Aoki, S; Nakagawa, S; Mayumi, T;
Kitagawa, I. Produk alami laut. XXXVI. Poliasetilter aktif secara biologis, adociacetylenes
A, B, C, dan D, dari spons Okinawa Kelautan Adocia sp. Chem. Pharm. Banteng. 1996, 44,
720-724.
18. Hooper, JNA; van Soest, RWM Systema Porifera: Sebuah Panduan untuk Klasifikasi
Spons;
Kluwer Academic / Plenum: New York, NY, USA, 2002; hal. 906.

Halaman 11
Int. J. Mol. Sci. 2014, 15
16521
19. Kuo, CY; Juan, YS; Lu, MC; Chiang, MYN; Dai, CF; Wu, YC; Sung, PJ Pregnane-type
steroid dari formosan karang lunak Scleronephthya Flexilis. Int. J. Mol. Sci. 2014, 15,
10136-10149
20. Hitora, Y; Takada, K; Okada, S; Ise, Y; Matsunaga, S. (+) - Duryne dan homolognya,
acetylenes sitotoksik dari spons laut Petrosia sp. J. Nat. Melecut. 2011, 74, 1262-1267.
21. Ueoka, R; Ise, Y; Matsunaga, S. Polietyetyes sitotoksik yang berkaitan dengan
petroformyne-1 dari
spons laut Petrosia sp. Tetrahedron 2009, 65, 5204-5208.
22. Watanabe, K; Tsuda, Y; Hamada, M; Omori, MI; Mori, G; Iguchi, K; Naoki, H .; Fujita,
T;
van Soest, RWM Acetylenic strongylodiols dari Petrosia (Strongylophora) Okinawa laut
sepon. J. Nat. Melecut. 2005, 68, 1001-1005.
23. Nishimura, S; Matsunaga, S; Shibazaki, M; Suzuki, K; Harada, N; Naoki, H .; Fusetani,
N.
Asam kortikosteroid D dan E, inhibitor tipe-tipe poliasetilena geranylgeranyltransferase tipe
I, dari
spons laut Petrosia corticata. J. Nat. Melecut. 2002, 65, 1353-1356.
24. Lim, YJ; Lee, CO; Hong, J; Kim, DK; Im, KS; Jung, JH alkohol poliaketilen sitotoksik
dari laut yang spons spesies Petrosia. J. Nat. Melecut. 2001, 64, 1565-1567.
25. Seo, Y; Cho, KW; Rho, J.-R; Shin, J; Sim, CJ Petrocortynes dan petrosiacetylenes, novel
polyacetylenes dari spons dari genus Petrosia. Tetrahedron 1998, 54, 447-462.
© 2014 oleh penulis; pemegang lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses
terbuka
didistribusikan berdasarkan syarat dan ketentuan dari lisensi Creative Commons Attribution
(http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/).

Teks asli Inggris


2.47 d (2.0)
Sarankan terjemahan yang lebih baik

Anda mungkin juga menyukai