TUGAS MAKALAH

FISIOLOGI TANAMAN

BRASSINOSTEROID

Disusun Oleh:
Qoid Luqmanul Hakim 165040207111022
Atikha Wulandari 165040207111038
James Aloycius G. 165040207111047
Damaraji Nurwidhi A. 165040207111112
R. Muhammad Yusuf Adi P. 165040207111126
Tri Raharjo 165040207111167

Kelas: M
Program Studi: Agroekoteknologi
Kelompok: 6

Dosen Pengampu: Ir. Koesriharti, MS.

UNIVERSITAS BRAWIJAYA
FAKULTAS PERTANIAN
MALANG
2017
 KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena dengan
rahmat, karunia, serta taufik dan hidayah-Nya kami dapat menyelesaikan makalah
tentang Brassinosteroid ini dengan tepat waktu. Kami sangat berharap makalah ini
dapat berguna dalam rangka menambah wawasan serta pengetahuan kita tentang
brassinosteroid. Kami berterima kasih kepada Ibu Ir. Koesrihartini, MS yang telah
memberikan tugas ini kepada kami.

Kami juga menyadari sepenuhnya bahwa makalah ini terdapat kekurangan dan
jauh dari kata sempurna. Kami mohon maaf apabila terdapat kesalahan kata-kata
yang kurang. Oleh sebab itu, kami berharap adanya kritik, saran dan usulan demi
perbaikan makalah yang telah kami buat di masa yang akan datang, mengingat tidak
ada sesuatu yang sempurna tanpa saran yang membangun.

Malang, 13 Desember 2017

Penyusun
 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Brassinosteroid secara alami merupakan hormon tanaman endogen yang
sangat diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan. Sejak penemuan mereka,
penelitian intensif berdasarkan analisis genetik mutan brassinosteroid-defcient dan
brassinosteroid-insensitive, dan pada proteomik dan genomik terutama pada spesies
tanaman model Arabidopsis thaliana dan Oryza sativa (beras) telah menghasilkan
pengetahuan komprehensif mengenai jalur transduksi sinyal kuningan kuningan , dari
reseptor kinase hingga faktor transkripsi dan targetnya, sehingga telah menjadi salah
satu jalur hormon tanaman yang ditandai dengan baik. Meskipun awalnya
digambarkan sebagai linier, jalur transduksi sinyal kuningan sangat saling
berhubungan dengan jalur sinyal lainnya, termasuk auksin, asam giberelat, asam
absis, cahaya, dan gula, sehingga mendukung anggapan bahwa brassinosteroid
adalah pengatur utama pertumbuhan tanaman. Jalur transduksi sinyal brassinosteroid
juga berbagi komponen dan berinteraksi dengan jalur kinase reseptor lainnya yang
mengatur pengembangan kekebalan dan stomata, akar, dan reproduksi. Potensi
agronomi calon hormon brassinosteroid memerlukan penelitian aktif pada spesies
tanaman selain Arabidopsis, namun hasil awal memberi petunjuk pada tingkat
transferabilitas yang baik antara spesies tanaman yang dicotyledonous dan
monocotyledonous, mengenai efek brassinosteroid pada sifat arsitektur tanaman.
Karena itu, ada potensi untuk mengidentifikasi mutan brassinosteroid atau
tanaman transgenik dengan produktivitas yang meningkat pada tanaman pertanian
penting, seperti jagung (Zea mays), gandum (Triticum sp.), sorghum (Sorghum
bicolor), kedelai (Glycine max), kentang (Solanum tuberosum), poplar ( Populus sp.),
Dan tomat (Solanum lycopersicum). Terlepas dari kemajuan penting yang dibuat
dalam tungku brassinosteroid, sejumlah pertanyaan penting tetap harus dijawab.
Penelitian difokuskan pada penyelesaian jalur pensinyalan brassinosteroid spesifik
untuk garis keturunan seluler yang berbeda yang baru saja mulai berkembang.
Munculnya teknologi genomik sel tunggal berdiri sebagai janji untuk identifikasi cepat
jalur brassinosteroid dengan resolusi sel tunggal. Sedangkan pengangkutan hormon-
hormon brassinosteroid jarak jauh telah dikesampingkan, mekanisme gerakan
shortend brassinosteroid tetap menjadi misteri. Bagaimana molekul brassinosteroid
disekresikan dari sel di mana mereka disintesis juga perlu diklarifikasi, karena ini
adalah prasyarat untuk menjelaskan sinyal sel-ke-sel yang diatur oleh hormon.

1.2 Tujuan
Pembahasan materi Brassinosteroid tentunya penting untuk dibahas.
Brassinoteroid merupakan fitohormon yang baru dalam dunia tumbuhan ataupun
hewan. Oleh karena itu, dalam pembuatan makalah Brassinosteroid memiliki
beberapa tujuan yang harus dicapai, diantaranya mahasiswa dapat mengetahui
sejarah terbentuknya hormon Brassinosteroid, fungsi yang penting hormone steroid
dalam dunia tumbuhan, proses metabolisme dan biosintesis yang terjadi dalam
perangsangan pada tumbuhan, fotomorgenesis BR deficient mutant.
 2. PEMBAHASAN
2.1 Sejarah dan Pengertian Brassinosteroid
Brasinosteroid ditemukan sejak lama pada hewan, dan baru ditemukan pada
tumbuhan. Brasinosteroid adalah kelompok hormon steroid yang memiliki peran
penting dalam perkembangan pada tanaman, termasuk pembelahan sel dan sel
elongasi pada batang dan akar, fotomorfogenesis, perkembangan reproduksi,
penuaan daun, dan respon stress. Identifikasi dari hormone steroid pada tanaman
adalah hasil dari identifikasi zat pengatur tumbuh pada polen dari berbagai macam
spesies tumbuhan yang dilakukan selama 30 tahun. J. W. Mitchell menunjukkan
bahwa zat pengatur tumbuh yang paling aktif ditemukan pada pelarut organic yang
berasal dari ekstrak polen dari hasil persilangan tanaman Brassica napus L. Bagian
yang tidak terindentifikasi pada senyawa aktif dalam polen dinamakan brassine.
Efek pertumbuhan yang spesifik dari brassine memiliki hasil pada beberapa tes
fisiologi, meliputi uji hayati internode kedua dari kacang-kacangan. Pada pengujian ini
brasine mempunyai perbedaan dengan fitohormon yang lain, menyebabkan tanaman
mengalami pembelahan dan elongasi selain itu mengalami pembelokan,
pembengkakan, dan pemisahan internode. Berdasarkan pada kemampuan brassine
untuk mengalami pertumbuhanan drastis dan diferensiasi pada konsentrasi rendah,
Mitchell mengatakan bahwa brassine adalah hormone baru pada tanaman. Pada
demonstrasi yang lebih lanjut, brassine tidak hanya menyebabkan elongasi pada
batang, tapi juga meningkatkan biomasa total dan hasil produksi biji.
Meskipun brassinosteroid diketahui sebagai senyawa yang dapat menyebabkan
efek pertumbuhan yang berlebih pada uji hayati, brassinosteroid tidak langsung
dianggap sebagai hormone tumbuhan, karena peran brassinosteroid pada
pertumbuhan dan perkembangan tanaman normal sukar untuk di pahami dalam
bertahun-tahun. Brassinosteroid dianggap sebagai hormone tanaman pada
demonstrasi tanaman Arabidopsis pada pertengahan tahun 1990-an. Hormone ini
menunjang pertumbuhan bagian atas tanaman, pertumbuhan akar, pembelahan
jaringan vaskuler, pembuahan, dan perkecambahan biji.

2.2.1 Percobaan

Tanaman kacang dan bioassay sudut daun lamina pada tanaman padi. Kedua
bioassay ini membedakan antara BRs yang secara biologis aktif dengan intermediate
atau metabolit inaktif dan menggambarkan jumlah senyawa yang aktif ada. Struktur
dasar kimiawi Brassinosteroid berupa steroidal lactone yang dimurnikan melalui X-ray
crystallographic analysis disebut: Brassinolide (BL). Berikut merupakan struktur dari
Brassinolide, Brassinolide merupakan Brassinosteroid paling aktif dan banyak
ditemukan pada tanaman.

Pada bioassay internode kedua tanaman kacang, internode merupakan bagian

batang yang terletak diantara node (ruas-ruas), Potongan dari second-internode
tanaman kacang diapungkan dalam larutan yang mengandung Brassinosteroid pada
berbagai konsentrasi selama beberapa hari. Terdapat perlakuan kontrol yang tidak
direndam dengan Brassinosteroid (kiri). Pada konsentrasi rendah, Brassinosteroid
menginduksi pertumbuhan memanjang pada internode kacang. Konsentrasi yang
lebih tinggi mengakibatkan penebalan, pelengkungan, dan pecah pada internode
kacang.

Setetes kecil sample yang dilarutkan dalam ethanol diberikan pada pertemuan
antara lamina dan leaf sheath. Setelah inkubasi selama dua hari pada
kelembapan tinggi, sudut lengkung theta (θ) antara lamina dan leaf sheath
diukur. Sudut yang tebentuk sepadan dengan jumlah brassinosteroid dalam
sample yang diberikan
Berikut merupakan grafik respon dwarf rice terhadap pemberian berbagai
Brassinosteroid pada berbagai dosis terhadap besar sudut lamina.
 2.2 Struktur, Genetik Brassinosteroid

2.2.1 Struktur Brassinosteroid

Lokalisasi subselular biosintesis BR belum diidentifikasi. Namun, karena

sitokrom p450 monooxygenase yang terlibat dalam biosintesis gibberellin terletak
pada retikulum endoplasma, kemungkinan biosintesis BL juga terjadi pada reticulum
endoplasma.

2.2.2 Photomorphogenesis BR Deficient Mutant Terganggu

Bukti pasti bahwa fungsi brassinosteroid berfungsi sebagai hormon tanaman
hanya terjadi selama dekade terakhir dari analisis genetika di Arabidopsis, yang
menyebabkan isolasi dan deskripsi mutant yang rusak pada biosintesis dan persepsi
BR. fenotip abnormal mutan ini menunjukkan bahwa BR dibutuhkan untuk
perkembangan normal.
Mutan defisien BR yang pertama, det2 (de-etiolated 2) dan cpd
(fotomorfogenesis konstitutif dan dwarfisme) diidentifikasi pada layar untuk bibit
Arabidopsis yang memiliki morfologi tumbuh ditempat terkena cahaya (yaitu, mereka
de-etiolasi) setelah tumbuh selama beberapa hari dalam kegelapan total. Kedua det2
dan cpd memiliki respons fotomorfogenesis yang terganggu, dengan hipokotil pendek
dan tebal, kotiledon yang dikeluarkan, daun primer muda (yang tidak ada pada bibit
yang tumbuh gelap), kedua mutan tersebut memiliki tingkat mRNA yang diatur lebih
tinggi saat ditanam pada tempat gelap. Sebaliknya, pertumbuhan di tempat gelap
dengan wild type menunjukkan fenotipe etiolated yang khas (hypocotyl panjang,
kotiledon terlipat, dan pigmen antosianin yang tidak ada).

Selain fenotip gelapnya yang khas, det2 dan cpd memiliki fenotipe abnormal
saat tumbuh di tempat dengan cahaya. Kedua mutan tersebut tumbuh menjadi kerdil
hijau gelap karena pengurangan ukuran sel dan ruang udara interselular, dan
keduanya telah mengurangi dominasi apikal dan kesuburan jantan. Selain itu, mutan
det2 dan cpd menunjukkan akar pendek, tertundanya berbunga, dan tertundanya
penuaan daun. Secara umum, mutan cpd memiliki fenotip yang lebih ekstrim daripada
mutan det2.
Kedua mutan tersebut terganggu pada biosintesis brassinosteroid, lokus det2
mengkodekan protein dengan identitas sekuens asam amino tinggi dengan steroid
5a-reduktase mamalia. steroid mamalia 5a-reduktase mengkatalisis konversi
testosteron yang bergantung pada NADPH ke dihidrotestosteron - langkah kunci
dalam metabolisme steroid yang penting untuk perkembangan embrio normal alat
kelamin jantan dan prostat. Demikian juga, gen cpd mengkodekan protein homolog
ke enzim monooksigenase mamalia sitokrom P450, termasuk steroid hydroxylases.
Alasan mutan cpd memiliki fenotip yang lebih ekstrem daripada mutan det2 adalah
bahwa mutan det2 mengandung jumlah sisa BR aktif, sementara tingkat BR aktif pada
mutan cpd hampir tidak terdeteksi. Memperlakukan mutan kerdil dengan brassinolide
eksogen memulihkan fenotipe normal, membuktikan lebih lanjut bahwa det2 dan cpd
diperlukan untuk produksi brassinosteroid dan photomorphogenesis normal.
 2.3 Biosintesis, Metabolisme dan Transport BR
Seperti giberelin dan ABA, brasionsteroid disintesis melalui percabangan jalur
terpenoid, dimulai dengan polimerisasi dua farnesyl difosfat untuk membentuk korda
triterpen C30. Squalene kemudian mengalami serangkaian penutupan cincin untuk
membentuk pentasiklik triterpenoid (sterol) prekusor sikloartenol. Semua steroid pada
tanaman berasal dari sikloartenol dengan serangkaian reaksi oksidasi dan modifikasi
lainnya. Pengetahuan kita tentang jalur biosintesis BL adalah hasil kombinasi genetik
dan analisis biokimia.
untuk biokimia studi kultur sel menggunakan periwinkle (Catharanthus
roseus), karena mereka menghasilkan BR dalam jumlah yang relatif tinggi.
Intermediet BR radiolabeled digunakan dalam eksperimen pemberian makan, dan
turunan metaboliknya diidentifikasi dengan analisis spektroskopi massa kromatografi
gas. Menggabungkan jenis analisis ini ke penelitian genetika dengan mutan defisien
BR di Arabidopsis, tomat, dan spesies lainnya telah memungkinkan identifikasi jalur
biosintesis yang lengkap.

2.3.1 Brassinolide Disintesis Dari Campesterol

Brassinosteroid disintesis dari campesterol, sitosterol, dan kolesterol. Dimana
campsterol dan sitosterol banyak terdapat pada membrane tanaman, sedangkan
kolesterol terdapat sedikit. Ketiga sterol tersebut dimetabolisme menjadi sejumlah zat

dalam sel tanaman, tapi hanya beberapa diantaranya memiliki metabolisme biologis.
Jalur biosintesis BR dimulai dengan campesterol, yang berasal dari sikloartenol.
Campsterol pertama kali di konversi menjadi campesterol yang melibatkan det2.
Campesterol kemudian di konversi menjadi castasterone (CS) melaui salah satu dari
dua jalur yang disebut late dan early C-6 oxidation pathways.
Dua jalur C-6 oxidation akan bergabung di castasteron yang kemudia diubah
menjadi brasinolide. Jalur oksidasi aerly dan late c-6 oxidation berdampingan dan
dapat dihubungkan pada berbagai titik di arabidopsis, kacang polong, dan padi.
Secara signifikan biologi memiliki dua jalur yang saling terkait saat ini tidak diketahui.
Faktanya, jalur early C-6 oxidation tidak ditemukan pada tomat. Keberadaan dari dua
jalur yang saling berkaitan meningkatkan kompleksitas biosintesis brassinosteroid dan
mungkin memberikan keuntungan dalam kondisi fisiologis yang berbeda, seperti
berbagai jenis stres.
Semua mutan terganggu kemampuannya untuk mengkonversikan campsterol
menjadi brasinolide memiliki mutasi pada gen yang mengkodekan sitokrom p450
monooxygenase (CYPs). Gen arabidopsis dwarf4 dan cpd mengkodekan dua
monooxygenases tersebut, CYP90B1 dan CYP90A1, yang membentuk hidroksilat BR
antara masing-masing posisi 22 dan 23.

2.3.2 Katabolisme Dan Feedback Negatif Berkontribusi Pada Homeostasis BR

Tingkat BR aktif juga diatur oleh proses metabolisme, yang menonaktifkan BL.
beberapa jenis reaksi menghasilkan inaktivasi BL, termasuk epimerisasi, oksidasi,
hidroksilasi, sulfonasi, dan konjugasi ke glukosa atau lipid. Pengetahuan kita yang
terbatas di daerah ini didasarkan pada eksperimen pemberian dimana tanaman diberi
radiolabel BR dan produk berlabel yang dihasilkan diidentifikasi dan metabolit
endogen dianalisis. Namun, relevansinya dengan jalur BR di tanaman masih belum
jelas.
pelarutan gen BAS1 arabidopsis yang mengkodekan monooxygenase
sitokrom p450 dengan aktivitas steroid 26-hidroksilase (CYP72B1) telah membantu
menjelaskan peran setidaknya satu enzim metabolik dalam mengendalikan
konsentrasi BL. Overexpression dari BAS1 menyebabkan penurunan kadar BL dan
akumulasi 26-hydroxyBL yang tidak aktif, menghasilkan fenotipe kerdil yang
kekurangan BR. Dengan demikian, seperti halnya hormon tanaman lainnya,
homeostasis BL diatur oleh keseimbangan antara reaksi biosintesis dan inaktivasi.
Tingkat fisiologis yang BR aktif juga diatur oleh mekanisme umpan balik
negatif. Dengan kata lain, jika axcess dari hormon terakumulasi, biosintesis BR
dilemahkan dan perputaran BR meningkat. Memang, mRNA dari semua gen gen
biosintesis BL yang teruji arabidopsis (DWF4, CPD, ROT3 dan BR6ox1) diregulasi
turun (menurun) sebagai respons terhadap aplikasi BL, sementara mRNA BAS1, yang
terlibat dalam perputaran BR, terakumulasi ke tingkat yang lebih tinggi.

Regulasi gen gen biosintesis BR melibatkan faktor transkripsi yang mengikat

secara langsung unsur promoter yang dilestarikan yang ditemukan pada gen
biosintesis di atas, sehingga menekan ekspresi mereka. Oleh karena itu, mutasi
arabidopsis yang terganggu pada kemampuan mereka untuk merespons BL
menumpuk kadar tinggi dari CS dan BL brassinosteroid aktif dibandingkan dengan
tanaman tipe liar.
Alat yang penting untuk studi genetik, fisiologis, dan molekuler BR adalah
ihibitor biosintesis BR spesifik, brassinazole (Brz). Brz mengandung cincin triazol yang
terdiri dari dua karbon dan tiga atom nitrogen. Berbagai senyawa triazol dapat
bertindak sebagai inhibitor monooxygenase sitokrom p450. Triazol Brz secara khusus
menghambat aktivitas enzim biosintesis BL DWF4, yang mengubah 6-
oxoxampestanol menjadi kateterina. Tanaman yang tumbuh pada Brz menunjukkan
fenotipe BR-deficiency, yang dapat membalikkan penambahan BL ke media
pertumbuhannya. Dalam percobaan ini, baik Brz dan BL diambil oleh sistem akar.
Banyak penelitian menggunakan brassinazole telah menghasilkan informasi penting
mengenai homeostasis BR yang melengkapi penelitian dengan BL yang dijelaskan di
atas. Dengan demikian, lima gen biosintesis BR (DET2, DWF4, CPD, BR6ox1 dan
ROT3) dan dua gen biosintesis sterol diregulasi di tanaman arabidopsis BR-habis
beroperasi di hadapan Brz. diambil bersama-sama, hasilnya menunjukkan bahwa
homeostasis BR dipertahankan oleh regulasi umpan balik dari beberapa gen target.
Homeostasis BR juga dikendalikan oleh langkah pembatas laju pada jalur

biosintesis BL. Jika suatu enzim membatasi laju, tingkat substratnya yang signifikan
harus terakumulasi relatif terhadap produk langsungnya. pengukuran BR endogen
dalam arabidopsis telah menunjukkan bahwa cpd, dwf4, dan BR6ox1 / 2 bisa menjadi
langkah pemberian makan. dalam biosintesis BR dan dengan demikian berkontribusi
pada homeostasis BR. Memang, overexpression dari DWF4 dan BR6ox2
menghasilkan peningkatan pertumbuhan vegetatif tanaman.

2.3.3 Brassinosteroid Bertindak Secara Lokal Di Dekat Lokasi Sintesis

Penentu penting respons hormon secara umum adalah tingkat dan laju
pengangkutan hormon dari tempat sintesis ke lokasi tindakan. secara eksogen
diterapkan 24-epibrassinolide (24-epiBL) mengalami transportasi jarak jauh dari akar
ke tunas. Sebagai contoh, ketika akar timun, tomat, atau tanaman gandum diobati
14
dengan C-24-epiBL, radioaktif mudah ditranslokasi ke bagian atas. Bahkan, mutan
arabidopsis kekurangan BR dapat diselamatkan saat ditanam pada media agar
ditambah dengan BL, dan tangkai daun tanaman jenis liar memanjang pada aplikasi
BL ke sistem akar mereka.
 14
Sebaliknya, ketika C-24-epiBL diaplikasikan pada permukaan atas daun
ketimun muda yang mudah terangkat, namun hanya sedikit diangkut keluar dari daun.
Secara keseluruhan, hanya sekitar 6% 14C-24-epiBl yang diaplikasikan ke daun yang
lebih muda. Hasil ini menunjukkan bahwa BR eksogen mudah ditranslokasi dari akar
ke tunas, namun tidak ditranslokasi dengan baik dari dedaunan. Mungkin, 24-epiBL
diambil oleh akar bergerak ke bagian atas melalui arus transpirasi xilem. Karena aliran
xilem searah, bagaimanapun, 24 epiBL eksogen yang diterapkan pada daun hanya
bisa keluar dari daun melalui floem. Kurangnya gerakan 24-epiBL dari daun
menunjukkan bahwa translokasi kurang baik dalam floem. Selain itu, meskipun ada

bukti adanya akar untuk memotret transpor 24-epiBL, BR endogen tampaknya tidak
mengalami akar penembakan translokasi. Sebagai contoh, percobaan pada kacang
polong dan tomat menunjukkan bahwa pencangkokan / pencangkokan timbal-balik
dari jenis liar ke mutan defisien BR tidak menyelamatkan fenotip surat tersebut baik
pada arah acropetal maupun basipetal. Hasil ini menunjukkan bahwa BR endogen
bertindak secara lokal pada atau di dekat lokasi sintesisnya.
Perbandingan distribusi spasial temporal intermediet BR menunjukkan bahwa
mereka hadir di semua jaringan tanaman, meskipun zat antara yang berbeda
mendominasi pada organ yang berbeda. Misalnya, pada arabidopsis, kacang polong
dan tomat, zat antara awal lebih banyak terjadi pada akar, sementara late intermediate
seperti CS menumpuk ke tingkat yang lebih tinggi dalam tunas. Demikian pula,
sementara enzim biosintesis BR diekspresikan di semua jaringan yang tak beraturan,
ekspresi relatifnya bervariasi dari satu jaringan ke jaringan lainnya. variasi semacam
itu dalam ekspresi tidak diragukan lagi terkait dengan fungsi jaringan yang berbeda.
Sejalan dengan jalur jalur biosintesis BR, komponen jalur pensinyalan BR juga
tampak diekspresikan di seluruh tanaman, terutama pada jaringan pertumbuhan
muda. Bersama-sama, bukti menunjukkan bahwa masing-masing organ mensintesis
dan merespons BR sendiri yang aktif.
Grafik peningkatan BR pada pemanjangan epikotil kacang kedelai

Efek dari BR adalah pemanjangan sel. Tanaman kerdil dikarenakan mutasi

BR menunjukkan kebutuhan akan penambahan BR. Defisiensi BR tidak hanya
menyebabkan tanaman menjadi kecil tetapi juga menyebabkan sel pada tanaman
menjadi kecil juga. Efek rangsangan BR meningkat pada saat tanaman masih muda
sehingga perkembangan jaringan masih tinggi.
 Hormon BR juga berfungsi sebagai peningkatan dinding plastic pada epikotil
kacang kedelai. Hal ini terjadi dikarenakan BR menginduksi dinding sel yang
mengalami pelebaran sehingga dinding sel tersebut juga akan menjadi lebih
lebar/besar.

Analisis mikroskopik dari microtubules pada tanaman mutan defisiensi BR dari

Arabidiopsis.

Efek dari BR terhadap mikrotubulus pada bibit Arabidopsis. Pada gambar (A),
sel parenkim pada tipe liar menunjukkan pengatururan letak mikrotubulus yang
normal. (B) tanaman mutan defisiensi BR, sel parenkimnya sedikit dan
mikrotubulusnya tidak selaras. (C) pada perlakuan pemberian BR pada mutan yang
berdefisiensi BR, terjadi pemulihan dimana kelompok mikrotubulus akan terbentuk.

2.4 Efek Pertumbuhan dan Perkembangan Tanaman Terhadap

Brassinosteroid
2.4.2 Brassinosteroid mendorong dan menghambat pertumbuhan akar
Berdasarkan fenotipe mutan defisien BR (BR-Mangelmutanten), yang secara
khas menunjukkan pertumbuhan akar yang rendah, Brassinosteroid diperlukan untuk
pemanjangan akar normal. Namun, seperti auxin, Brassinosteroid yang diterapkan
secara eksogen mungkin memiliki efek positif atau negatif pada pertumbuhan akar,
tergantung pada konsentrasi. Bila dioleskan secara eksogen ke mutan defisien BR,
BR mendorong pertumbuhan akar pada konsentrasi rendah dan menghambat
pertumbuhan akar pada konsentrasi tinggi. Konsentrasi ambang untuk penghambatan
tergantung pada aktivitas analog BR yang digunakan. Dengan demikian, konsentrasi
ambang lebih rendah untuk 24epiBL analog yang relatif aktif daripada analog 24-
epikastasteron yang kurang aktif.
Efek BR pada pertumbuhan akar terlepas dari tindakan auxin dan gibberellin.
Penghambat transport auksin polar, asam 2,3,5-triiodobenzoat, tidak mencegah
pertumbuhan BR yang diinduksi. Bila BR dan auksin diaplikasikan secara bersamaan,
efek promotif dan penghambatan pada pertumbuhan akar adalah aditif. Selain itu,
fenotip pertumbuhan akar yang dikurangi mutan defisien BR tidak dibalik oleh aplikasi
gibberellin. Secara keseluruhan, pengamatan ini menunjukkan bahwa hambatan BR
terhadap pertumbuhan akar tidak melibatkan interaksi dengan auxin atau GA. Di sisi
lain, konsentrasi tinggi BR, seperti auksin, merangsang produksi etilen, jadi ada
kemungkinan setidaknya beberapa efek penghambatan BR pada pertumbuhan akar
disebabkan oleh etilen.
 Pada konsentrasi rendah, BR juga dapat menginduksi pembentukan akar
lateral. Dalam kasus ini, bagaimanapun, BR dan auksin bertindak secara sinergis.
Model saat ini menunjukkan bahwa BR mempromosikan perkembangan akar lateral
secara parsial dengan mempengaruhi transport auksin polar. Pengobatan BR
mempromosikan transport auksin asropetal, yang diperlukan untuk pengembangan
akar lateral, sedangkan asam N-naftilftalat (NPA) 1-N-naftilphthalamic (APA), inhibitor
auksin, menghilangkan efek promotif BR. Jadi, BR memberi efek kuat pada
keseluruhan morfologi, yang mempengaruhi tingkat perpanjangan dan kebiasaan
bercabang.

2.4.3 BR mendorong diferensiasi xilem selama pengembangan vaskular

BR memainkan peran penting dalam pengembangan vaskular, keduanya
mempromosikan xilem dan menekan diferensiasi floem. Hal ini terlihat pada sistem
vaskulsi gangguan mutan BR, yang memiliki lambang xilem lebih tinggi dibandingkan
dengan tipe liar. Mutan BR-defisien juga memiliki jumlah rangkap vascualr dikurangi
dengan jarak tidak teratur antara bundel. Sebaliknya, mutan yang mengekspresikan
protein reseptor BR menghasilkan lebih banyak xilem daripada tipe liar.
Kultur sel dari zinnia elegans memberikan sistem in vitro yang elegan untuk
mempelajari tahap sekuensial diferensiasi xilem. Ketika sel tunggal diisolasi secara
mekanis dari daun zinnia muda dan dikultur dalam media liqud dalam kegelapan,
bedanya menjadi unsur trakea antara hari dan 3 setelah kultur. Pengukuran BRs
selama perbedaan xilem (Gambar 2.4). Pengukuran BRs selama diferensiasi xilem
dalam sistem ini telah menunjukkan bahwa BR secara aktif disintesis pada sel seperti
makrofag dan sangat penting untuk diferensiasi selanjutnya pada elemen trakea. BR
cenderung memediasi diferensiasi dari procambium menjadi xylem dengan mengatur
ekspresi gen homeobox yang sering memainkan peran penting dalam pembangunan.
Selain itu, gen yang mengkodekan protein mirip reseptor BR diekspresikan secara
eksklusif di jaringan vaskular, mendukung adanya jalur pensinyalan BR yang spesifik
untuk sistem vaskular.

2.4.4 BR dibutuhkan untuk pengisian serbuk sari

Pollen adalah sumber BR yang kaya, dan karenanya tidak mengherankan
bahwa BR penting untuk kesuburan pria. BR telah ditunjukkan untuk mempromosikan
pertumbuhan tabung serbuk sari dari stigma, melalui gaya, ke kantung embrio.
Misalnya, pada mutan mutan Arabidopsis BR-def, tabung polen tidak memanjang
setelah berkecambah pada stigma, dan pemanjangan tabung polen terbukti sebagian
bergantung pada aplikasi BR.
Demikian pula, ketika mutan BR-insentif dengan gen reseptor yang rusak
disolusi sendiri, tabung serbuk sari gagal berkembang, menghasilkan benih steril.
Namun, saat mutan diserbuki dengan serbuk sari liar, bibit subur diproduksi. Jadi,
untuk pertumbuhan tabung serbuk sari normal, BR dan jalur pensinyalan BR sangat
dibutuhkan.
 Mengurangi ke sterilan jantan juga dikaitkan dengan perbedaan di ketinggian
benang sari versus putik. Mutan Arabidopsis dwf4 adalah BR-deficiency, selnya gagal
memanjang. Satamens bunga juga lebih pendek dari jenis liar. Karena Arabidopsis
bersifat penyerbukan sendiri, filamen dwf4 yang lebih pendek menghasilkan serbuk
sari lebih sedikit yang disimpan di permukaan stigmatik. Karena butiran serbuk sari
masih bisa dilakukan, penyerbukan tangan pada hasil mutan menghasilkan produksi
benih normal.

2.4.5 BR mendorong perkecambahan benih

Biji, seperti butiran serbuk sari, mengandung tingkat yang sangat tinggi dari
brassinosteroid, dan BR mempromosikan perkecambahan biji juga. BR
mempromosikan perkecambahan biji dengan berinteraksi dengan hormon tanaman
lainnya, walaupun dasar molekuler untuk interaksi ini tidak diketahui. Sudah mapan
bahwa GA dan asam absis (ABA) memainkan peran positif dan negatif dalam
menstimulasi perkecambahan biji. BR dapat meningkatkan perkecambahan biji
tembakau yang terlepas dari sinyal GA. Selain itu, BR dapat menyelamatkan fenotip
kecambah yang tertunda dari mutan GA-deficient dan GA-perception, dan mutan BR
lebih sensitif terhadap inhibitor oleh ABA dibandingkan dengan tipe liar. Dengan
demikian, BR dapat merangsang perkecambahan dan dibutuhkan untuk mengatasi
efek penghambatan ABA. Sebagai BRs dikenal untuk merangsang ekspansi sel dan
divisi, kemungkinan BRs memfasilitasi perkecambahan dengan merangsang
pertumbuhan embrio.

2.5 Perangsangan Brassinosteroid

2.5.1 BR-insentive mutant diidentifikasi dengan permukaan sel reseptor
Untuk mengidentifikasi komponen jalur pensinyalan BR dalam arabidopsis,
layar genetik pada awalnya dilakukan untuk mengisolasi mutan yang menunjukkan
pemanjangan akar normal dengan adanya konsentrasi BL tinggi. Hal ini
mengakibatkan isolasi single bri1 (brassinosteroid-insensitive 1). Layar lebih lanjut
untuk mutasi BL-intensitif semua menghasilkan alel mutan tambahan di BRI1,
menunjukkan bahwa BRI1 adalah komponen penting jalur pensinyalan BR yang
dikodekan oleh gen tunggal. Studi pengikatan Susequent menunjukkan bahwa BL
mengikat secara langsung ke BRI1 dengan spesifisitas tinggi, menunjukkan bahwa
BRI1 adalah reseptor BR.
BL, brassinosteroid paling aktif, mengikat domain ekstraselular reseptor BRI1 di
membran plasma. BRI1 adalah perekat kaya leusin kaya membran plasma (LLR)-
receptor serin / treonin (S / T) kinase. The LLR-Receptor kinase merupakan kelas
reseptor terbesar yang diprediksi dalam genom arabidopsis, dengan lebih dari 230
anggota.
 Keluarga ini memiliki struktur domain yang dilestarikan, terdiri dari domain
ekstraseluler N-Terminal dengan banyak motif LLR tandem (berdekatan), satu domain
transmembran, dan domain kinase sitoplasma dengan spesifisitas terhadap residu
serin dan treonin. Dalam koper BRI1, jumlah LLRs adalah 25. BRI1 juga memiliki fitur
unik yang dibutuhkan untuk mengikat BR: sebentuk amino yang disebut domain pulau
yang mengganggu LRR antara LRR 21 dan 22. domain ini ditambah dengan LRR22
yang mengapit situs pengikatan minimum untuk BRs.
2.5.2 Aktivasi fosforilasi reseptor BRI 1
Analisis sejumlah besar alel mutan BR menunjukkan bahwa baik domain
reseptor ekstraselular dan domain kinase internal diperlukan untuk mentransmisikan
sinyal BR ke sel lainnya. BL mengikat BRI1 melalui domain pengikat steroid baru dari
sekitar 100 asam amino yang mencakup domain pulau dan urutan LRR tetangganya.
Pengikatan BL mengaktifkan reseptor, seperti yang ditunjukkan oleh peningkatan
hubungannya dengan reseptor kinase LRR kedua, reseptor kinase 1 yang terkait
dengan BRI1 (BAK1).
Dengan adanya brassinolide, BRI1 menjadi terfosforilasi in vivo pada
beberapa domain intraseluler, termasuk daerah juxtamembrane / JM (sisi membran
plasma yang menghadap sitoplasma), ekor C-terminal (CT), dan kinase itu sendiri.
situs fosforilasi ini memainkan peran regulasi dalam aktivitas reseptor dan
mengendalikan interaksi BRI1 dengan protein lain, seperti BAK1.
Seperti pada kasus protein hewani kinase, lokasi fosforilasi spesifik dalam
domain kinase BRI1 sangat penting untuk aktivasi. Sebagai tambahan, CT BRI1
secara negatif mengatur reseptor, setelah mengikat ligan, efek penghambatan ini
dibatalkan, dan aktivitas BRI1 kinase meningkat. Namun, mekanisme yang tepat dari
aktivasi BL-induced ini hanya akan menjadi jelas begitu struktur resolusi tinggi yang
dimiliki BRI1 telah ditentukan.
Kinase reseptor pada sel hewan dan tumbuhan sering berfungsi sebagai dimer
in vivo. Percobaan in vitro telah mengkonfirmasi bahwa reseptor BRI1 berfungsi
normal sebagai homooligomer yang terdiri dari monomer identik di dalam sel.
Setelah pengikatan dan pengaktifan BRI1 oleh ligannya, BRI1 yang
terfosforilasi membentuk hetero-oligomerv (yaitu, terdiri dari dua monomer berbeda)
dengan BAK1. Secara in vitro, BRI1 dan BAK1 dapat saling fosforilasi, dan seperti
BRI1, keadaan fosforilasi BAK1 diatur secara positif oleh BL. heterodimer BRI1 / BAK1
yang terfosforilasi tampaknya merupakan bentuk aktivasi reseptor yang menginduksi
respons BR dengan menonaktifkan represor yang disebut BIN2.
2.5.2 BIN2 adalah represor ekspresi gen BR-induced

Pembentukan hetero-oligomer BRI1 / BAK1 yang diaktifkan di hadapan BR

memulai inisiasi kaskade sinyal yang mengarah pada transkripsi gen BR-regulate.
Langkah selanjutnya yang diketahui dalam jalur transduksi transduksi melibatkan
regulator negatif BIN2 (Brassinosteroid insensitive-2). BIN2 mengkodekan protein
kinase homolog ke kinase glikogen kinase 3 dari ragi dan hewan. Dalam organisme
ini, fungsi homolog BIN2 sebagai kinase S / T aktif secara konstitutif yang terlibat
dalam berbagai jalur sinyal di mana mereka sering bertindak sebagai represor
ekspresi gen.
 Dalam arabidopsis, BIN2 ditemukan di kedua nukleus dan sitosol, juga pada
membran plasma. Dengan tidak adanya BR, BI2 tampaknya bertindak di dalam
nukleus untuk membentuk fosforilasi dua protein nuklida, BES1 (bril-EMS-suppressor
1) dan BZR1 (resisten brassinazole 1), di beberapa lokasi pengatur, sehingga
menghambat aktivitas mereka. BES1 dan BZR1 terkait erat aktivator transkrip gen
BR-induced. Mereka adalah protein berumur pendek dan terdegradasi oleh
proteasom 26S, sebuah proses yang melibatkan ubiquitination.
fosforilasi BES1 dan BZR1 oleh BIN2 mencegah mereka untuk bergaul
dengan protein lain, baik itu sendiri atau faktor transkripsi lainnya. Sebagai hasilnya,
mereka tidak dapat mengikat DNA, sehingga menghalangi aktivitas mereka sebagai
regulator transkripsional.
Di hadapan BR, hetero-oligomer BRI1 / BAK1 yang diaktifkan memulai sebuah
rangkaian kaset sinyal yang menghambat aktivitas kinase BIN2 dengan mekanisme
yang tidak diketahui. Hal ini menyebabkan akumulasi bentuk dephosphorylated aktif
dari BES1 dan BZR1, sebagian karena aktivitas serotonin / trionin fosfatase spesifik,
BSU1 (bri1 suppressor 1), yang menghitung efek dari kinase BIN2. bentuk
dephosphorylated aktif dari BES1 dan BZR1 mengaktifkan atau menekan gen target
BR.
2.5.4 BES1 dan BZR1 mengatur himpunan bagian gen yang berbeda
Setelah sekuensing genom arabidopsis, teknik yang memungkinkan penyidik
memantau ekspresi ribuan gen secara bersamaan, seperti DNA microarray analysis,
tersedia. penerapan teknik ini untuk mempelajari ekspresi gen BR-Regulated
mengidentifikasi ratusan gen yang diinduksi BR, yang banyak diprediksi berperan
dalam proses pertumbuhan. Selain itu, gen diidentifikasi yang direpresi oleh BRs.
Banyak gen yang diatur turun ini juga dikendalikan oleh faktor transkripsi BES1 dan
BZR1.
Urutan asam amino BES1 dan BZR1 adalah 90% identik, namun tampaknya
mengatur himpunan bagian gen yang berbeda dalam arabidopsis. Hal ini diprediksi
oleh fenotip mutannya. Ketika tumbuh dalam kegelapan, mutasi bes1 dan bz1
membuat protein lebih rentan terhadap proteolisis. Secara genetik, bes1 dan bzr1
adalah mutasi semidominan yang menghasilkan keuntungan fungsi.
Pada cahaya, mutan bes1 lebih besar dari pada jenis liar, mirip dengan tanaman
yang terlalu banyak mengekspresikan DWF4 atau BRI1. Sebaliknya, mutan bzr1 yang
tumbuh ringan adalah semi-kurcaci. Dengan demikian, meskipun kesamaan urutan
tinggi, BZR1 dan BES1 tampaknya menengahi ekspresi gen target yang berbeda.
BES1 meningkatkan ekspresi subset gen BR-stimulated. Untuk mengaktifkan
gen ini, BES1 berasosiasi dengan faktor transkripsi lain yang disebut BIM1 (BES1-
interacting myc-like 1). Heterodimer BES1 / BIM1 mengaktifkan transkripsi dengan
mengikat urutan DNA spesifik yang disebut E box yang berfungsi sebagai elemen
respons BR pada promoter gen BR-induced.
Sebaliknya, BZR1 bertindak sebagai represor biosintesis BR. BZR1 mengikat
langsung ke elemen CGTG (T / C) G yang ditemukan di daerah promotor berbagai
gen biosintesis BR, mematikan transkripsi. BZR1 dengan demikian memainkan peran
kunci dalam regulasi umpan balik negatif dari jalur biosintesis BR.
Selain subset gen yang berbeda yang mereka atur, BES1 dan BZR1
diperkirakan mengatur beberapa gen yang sama. Misalnya, BES1 dan BZR1
menekan ekspresi BRI1 dalam kegelapan.
 2.6 Brassinosteroid dalam pertanian
Brassinosteroid ditemukan sebagai kelas hormon pertumbuhan yang
mempromosikan dan aplikasi potensial terhadap pertanian. Selama 20 tahun terakhir,
sejumlah penelitian skala kecil telah dilakukan untuk menguji kemampuan BR untuk
meningkatkan hasil panen tanaman. BL telah ditemukan untuk meningkatkan hasil
panen kacang (berdasarkan berat biji per tanaman) sekitar 45% dan untuk menambah
berat daun varietas selada yang berbeda sebesar 25%. Kenaikan serupa juga dialami
hasil beras, jelai, gandum dan kacang lentil. BL juga mempromosikan pertumbuhan
umbi kentang dan meningkatkan ketahanan terhadap infeksi. Pengaturan buah tomat
inilah yang juga disempurnakan dengan BL.
Selain penelitian berskala kecil, percobaan lapangan berskala besar
menggunakan derivatif brassinosteroid tidak pernah dilakukan di Jepang, Tiongkok,
Korea dan Rusia. Hasil dari uji coba yang diajukan tersebut sangat bervariasi dan
tampaknya mencerminkan tingkatan stres dimana tanaman tumbuh. Tanaman yang
ditanam di bawah kondisi optimal menunjukkan sedikit pengaruh BR yang diterapkan,
sementara tanaman yang tumbuh dalam kondisi stres menunjukkan efek yang
berbeda dari aplikasi BR pada hasil panen. Dengan demikian aplikasi Br paling
bermanfaat bagi pertumbuhan di bawah kondisi stres.
BR juga telah terbukti bermanfaat bagi tanaman untuk perbanyakan tanaman.
Perlakuan sebelum tanam pada berbagai tanaman berkayu, seperti pohon cemara
dan pohon apel Norwegia, dengan BR meningkatkan kuantitas dan kualitas perakaran
dengan stek. Budidaya singkong dan nanas oleh kultur jaringan juga telah diperbaiki
dengan perlakuan BR.
 3. PENUTUP
3.1 Kesimpulan
Brassinosteroid telah muncul sebagai phytohormone yang poten karena
fungsinya yang serbaguna. Berbagai fungsi dikaitkan dengan beberapa target dan
mekanisme peraturan yang kompleks. Upaya global yang serius dan ketat sedang
dilakukan dalam memahami kompleksitas mekanisme aksi BR. Memahami dinamika
homeostasis BR dan mengungkap interaksinya dengan phytohormones lainnya akan
menambah dimensi baru pada penelitian BR. Dengan tersedianya sumber daya hayati
dan pengenalan alat eksperimental baru, diharapkan di tahun-tahun depan akan ada
penambahan pengetahuan yang berarti dalam mode tindakan BR dan ini pada
akhirnya dapat berujung pada era baru dalam pengembangan dan biologi
pertumbuhan tanaman.