ESTEQUIOMETRÍA DEL

CRECIMIENTO Y
BALANCES ELEMENTALES
El crecimiento de las células
obedecen a la ley de la
conservación de la materia
Todos los átomos de C, H, O, N y
otros elementos consumidos
durante el crecimiento se
incorporan a las nuevas células o
se expulsan como productos
Conversión del sustrato, oxígeno
y N para el crecimiento celular

Sustrato Biomasa
Oxígeno Célula CO2
Nitrógeno Agua
Sistema de flujos para un análisis macroscópico
 Centramos nuestra atención a
aquellos compuestos consumidos
o producidos significativamente

Ejemplo: Si los únicos productos

extracelulares formados son CO2 y H2O el
crecimiento AEROBIO, de las células
puede describirse:
CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi
cCHON + dCO2 + eH2O

CwHxOyNz: Sustrato

bHgOhNi : Fuente de N

cCHON : Biomasa seca

 La fórmula de la biomasa:
CHON, aunque no se aplica
comúnmente en biología, esta
muestra simplemente la
composición de la biomasa.
Composición elemental y grado de reducción
para algunos organismos

Organismo Fórmula Grado de reducción

(en relación al NH3)

Escherichia coli CH1.77O0.49N0.24 4.07

S. cerevisiae CH1.64O0.52N0.16 4.12
S. cerevisiae CH1.83O0.56N0.17 4.20
S. cerevisiae CH1.81O0.51N0.17 4.28
Candida utilis CH1.83O0.54N0.10 4.45
C. utilis CH1.87O0.56N0.20 4.15
C. utilis CH1.83O0.46N0.19 4.34

Media: CH1.79O0.50N0.20 4.19

desviación estándar = 3%
Existe normalmente un 5-10% de
ceniza residual que no se incluye
en la fórmula
En la ecuación:
CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi
cCHON + dCO2 + eH2O

Se puede calcular los coeficientes

Balance de C: w = c+d
Balance de H: x + bg = c + 2e
Balance de O: y + 2a + bh = c + 2d + e
Balance de N: z + bi = c
 Para resolver el sistema,
experimentalmente se obtiene el
coeficiente de respiración (RQ):

RQ = moles de CO2 producidos / moles de O2 consumidos

Las cantidades de sustrato, N y O2

necesarias para la producción de biomasa
pueden determinarse directamente.
 La presencia del agua causa
problemas ya que se encuentra en
gran exceso y los cambios en su
concentración son difíciles de medir.

En su lugar un principio útil es la

conservación de potencia reductora o
electrones disponibles.
 BALANCE DE
ELECTRONES

(a). Los electrones disponibles: se

refieren a aquellos disponibles para
transferir al oxígeno en la combustión
de una sustancia a CO2, H2O y
compuestos que contengan N
El número de electrones disponibles se calcula
a partir de la valencia de sus elementos:
4 para C
1 para H
-2 para O
5 para P
6 para S
para N: -3 si la referencia es NH3
0 para nitrógeno molecular N2
5 para nitratos
(b). El grado de reducción (): es el
número equivalente de electrones disponibles en
aquella cantidad de materia que contenga 1 g
átomo de carbono.

Para el sustrato CwHxOyNz el número de

electrones disponibles es 4w+x-2y-3z

El  del sustrato (S) es:

(4w+x-2y-3z) / w
 En general para calcular el  de un
compuesto se plantea la ecuación de
oxidación del mismo a CO2 y H2O (a
partir de C-mol), y se obtiene
multiplicando por 4 el coeficiente
estequiométrico del O2
Ejm.: Glucosa (C6H12O6), C-mol = CH2O
CH2O + O2 CO2 + H2O

= 4
Ejm: Supongamos un compuesto dado por CHxOyNz y
deseamos calcular el valor  con respecto al nivel de referencia
dado por CO2, H2O y NH3.

CHxOyNz + aO2 dCO2 + eH2O + fNH3

El valor  = 4a
C:1=d
H : x = 2e + 3f
O : y + 2a = 2d + e
N:z=f
resolviendo, a = (4 + x-2y - 3z) / 4
Por lo tanto:  = 4a = 4 + x-2y - 3z
Grado de reducción () de materiales
biológicos

Compuesto Fórmula  relativo  relativo

al NH3 al N2

Acido acético C2H4O2 4.00 4.00

Etanol C2H6O 6.00 6.00
Glucosa C6H12O6 4.00 4.00
Hidrógeno H2 2.00 2.00
Biomasa CH18ON 4.20 4.80

El  para el CO2, H2O y NH3 = es cero

 Aplicando el principio que los electrones disponibles para
transferir oxígeno se conservan durante el metabolismo a la
ecuación:

CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi

cCHON + dCO2 + eH2O

y utilizando NH3 como fuente de nitrógeno el balance de

electrones disponibles es:

wS - 4a = cB
S y B, son los grados de reducción del sustrato y biomasa
 RENDIMIENTO DE BIOMASA (Yxs):

Para calcular los coeficientes estequiométricos se

utiliza las ecuaciones vistas, pero se necesita otra
experimental, la cual se obtiene con la relación de
biomasa producida a partir del sustrato consumido:

Yxs = g de células producidas / g de sustrato

consumido

Yxs = c(p.m. células) / (p.m. sustrato)

ESTEQUIOMETRIA DEL PRODUCTO

Se considera la formación de un producto extrace- lular

(CjHkOlNm) durante el crecimiento y la ecuación puede
extenderse a:

CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi

cCHON + dCO2 + eH2O + fCjHkOlNm

Se puede determinar experimentalmente :

YPS = g de producto formado / g de sus-
trato consumido
YPS = f(p.m. producto )/ (p.m. sustrato)
 DEMANDA TEORICA DE OXIGENO

Parámetro importante ya que es a menudo el

sustrato limitante en las fermentaciones
aerobias.
La demanda de oxígeno puede derivarse a
partir de:
CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi
cCHON + dCO2 + eH2O + fCjHkOlNm
En donde el balance es:

ws - 4a = cB + fjP

P, es el grado de reducción del producto
Reordenando wS - 4a = cB + fjP se obtiene:
1
a  ( w S  c B  fj P )
4
Significa que si se conocen:
Los organismos : B
El sustrato : w, S
El producto : j, P
El rendimiento de la biomasa : c
El rendimiento del producto : f
¡Entonces la demanda de
oxígeno puede calcularse!
RENDIMIENTO MAXIMO POSIBLE

De la ecuación wS - 4a = cB + fjP

se deduce que el reparto de electrones
disponibles en el sustrato puede escribirse:

4a c B f j  p
1  
w s w s w s

4a/wS : fracción de electrones transferidos desde el sustrato

oxígeno
cB/wS : fracción de electrones transferidos a la biomasa
fjP/wS : fracción de electrones transferidos al producto
B: fracción de electrones disponibles en el
sustrato transferidos a la biomasa

B = cB / wS
En ausencia de formación de producto, si
todos los electrones disponibles se utilizaran
para la síntesis de biomasa B sería igual 1.

Bajo estas condiciones el valor máximo del

coeficiente estequiométrico c, es:
w S
cmax 
B
Rendimientos termodinámicos máximos de
biomasa correspondiente a B = 1

Sustrato Fórmula S Rendimiento Rendimiento

de carbono másico
( cmax/w ) (YxS,max)

Etanol C2H6O 6,0 1,4 1,5

Glucosa C6H12O6 4,0 0,95 0,8
Sacarosa C12H22O11 4,0 0,95 0,8
Almidón ( C6H10O5)x 4,0 0,95 0,9
Ac. acético C2H4O2 4,0 0,95 0,8

La tabla muestra que los sustratos con alto contenido energético (valores
elevados de γS) producen elevados rendimientos de biomasa.
 De esta manera puede determinarse el
rendimiento máximo de producto en ausencia
de síntesis de biomasa a partir de:
4a c B f j  p
1  
w s w s w s

Se tiene:
fmax = wS / jP

Esta ecuación permite calcular rápidamente el límite

superior del rendimiento de producto a partir de la
fórmula molecular del sustrato y del producto.
Problema.-

La producción de proteína de seres unicelulares a partir de

hexadecano se describe mediante la siguiente ecuación:

C16H34 + aO2 + bNH3 cCH1.66O0.27N0.20 + dCO2 + eH2O

.

Donde CH1.66O0.27N0.20 representa la biomasa. Si RQ=0.43;

determínese los coeficientes estequiométricos
Solución:

C16H34 + aO2 + bNH3 cCH1.66O0.27N0.20 + dCO2 + eH2O

Balances de:
C: 16 = c + d d 16  c
H: 34 +3b = 1.66c +2e 34  3(0.20c)  1.66c  2e 34  1.06c  2e
e  17  0.53c

O: 2a = 0.27c + 2d +e 2(37.28  2.33c)  0.27c  2(16  c)  (17  0.53c)

N: b = 0.20c
25.56  2.4c
RQ: 0.43 = d/a
c  10.65
d
a  2.33d a  2.33(16  c) a  37.28  2.33c
0.43
 a  12.47
b  2.13
c  10.65
d  5.35
e  11.36

C16H 34  12.47O2  2.13NH 3  10.65CH1.66O0.27 N0.20  5.35O2  11.36H 2O

Problema.-

La ecuación para la reacción química para la respiración de la glucosa

es:

C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O

Las células de Candida utilis convierten la glucosa en CO2 y agua

durante el crecimiento. La composición de la célula es CH1.84O0.55N0.2 con
un 5% en masa de cenizas. El rendimiento de la biomasa a partir del
sustrato es 0.5 g.g-1. Como fuente de nitrógeno se utiliza amoniaco.

a. ¿Cuál es la demanda de oxígeno con y sin crecimiento celular?

b. La C. utilis puede también crecer utilizando etanol como sustrato,

produciendo células de la misma composición anterior. En base másica,
¿Cuál es el rendimiento máximo posible de biomasa a partir de etanol
comparando con el máximo posible a partir de glucosa?
Solución.-

pm glucosa = 180
pm etanol = 46

mw de la biomasa:

C: 12x1 = 12.00
H:1x1.84 = 1.84
O: 16x0.55 = 8.80
N:14x0.2 = 2.80
25.44 /0.95 (95% del total)= 26.78 (mw de la
biomasa)
  s glu cos a  4 wglucosa (C H O )  6
6 12 6
CwHxOyNz
 s e tan ol  6 we tan ol(C H OH )  2
2 5

 B  (4 1  11.84  2  0.55  3  0.2)  4.14 4w+x-2y-3z

CH1.84O0.55N0.2
YXS  0.5gg 1

0.5 g biomasa 180 g glu cos a   1mol biomasa 


g glu cos a  1mol glu cos a   26.78 g biomasa 
YXS

mol biomasa
YXS  3.36 c Yxs = c(p.m. células) / (p.m. sustrato)
mol glu cos a

a  w S  c B  fj P 
1 Sin formación
a = 1/4(wS – cB – fjP)
4 de producto
moles de O2/mol de glucosa consumida
a  6(4.00)  3.36(4.14)  2.52
1 representa el 42% (2.52/6) del oxígeno necesario
4 en ausencia de crecimiento
Rendimiento máximo posible

Para la glucosa:

w S
cmax 
B

6(4.00)
cmax   5.80
4.14
5.80 g biomasa  1mol glu cos a   26.78 g biomasa 

mol glu cos a 180 g glu cos a   1mol biomasa 
YXS ,max

g biomasa
YXS ,max  0.86
g glu cos a
Para el etanol:

w S
cmax 
B

2(6.00)
cmax   2.90
4.14
2.90 g biomasa  1mol e tan ol   26.78 g biomasa 

mol e tan ol 180 g e tan ol   1mol biomasa 
YXS ,max

g biomasa
YXS ,max  1.69
g glu cos a
Problema.-

Una reacción de conversión biológica simplificada se puede escribir para

un carbohidrato que reacciona con O2 y NH3 para formar material celular,
agua y CO2 únicos productos, según la ecuación:

CHmOn + O2 + bNH3 cCHON + dH2O + eCO2

Por lo tanto, el carbohidrato como reactivo y el producto como material

celular, solo contiene un átomo gramo de carbono.

El sustrato de glucosa (C6H12O6) reacciona con O2 y NH3 para formar un

material bacteriano CH2O0.27N0.25, H2O y CO2, con un coeficiente
respiratorio igual a 1.5 (CO2/O2).

¿Cuáles serán los coeficientes estequiométricos para esta reacción,

cuando se escribe en la forma de la ecuación anterior?
 C6H12O6 + aO2 + bNH3 cCH2O0.27N0.25 + dH2O + eCO2

C1H2O1 + aO2 + bNH3 cCH2O0.27N0.25 + dH2O + eCO2

RQ = 1.5 = CO2/O2 = e/a

e = 1.5 a

1.5a – e = 0

Balance para el carbono: 1=c+e

Balance para el hidrógeno: 2 + 3b = 2c + 2d
Balance para el O2: 1 + 2a = 0.27c + d + 2e
Balance para el N2: 3b = 0.25c
Balance para el carbono: 1=c+e
Balance para el hidrógeno: 2 + 3b = 2c + 2d
Balance para el O2: 1 + 2a = 0.27c + d + 2e
Balance para el N2: 3b = 0.25c

c+ e =1
3b – 2c – 2d = -2
2a – 0.27c – d – 2e = -1
3b – 0.25c =0
1.5a – e =0

Matriz:
a b c d e
0 0 1 0 1 1
0 3 -2 -2 0 -2
2 0 -0.27 -1 -2 -1
0 3 -0.25 0 0 0
1.5 0 0 0 -1 0
 Problemas propuestos

Problema 4.7

Se produce Klebsiela aerogenes a partir de glicerol en un cultivo

aerobio utilizando amoniaco como fuente de nitrógeno. La
biomasa contiene 8% de cenizas y se produce 0.40 g de biomasa
por cada g de glicerol consumido, no formándose ningún otro
producto metabólico. ¿Cuáles son las necesidades de oxígeno
para este cultivo en términos de masa?
Klebsiela aerogenes: CH1.73O0.43N0.24 Peso molecular: 23.97 g/mol
C: 12x1 = 12.00
H:1x1.73 = 1.73
O: 16x0.43 = 6.88
N:14x0.24 = 3.36

Glicerol: C3 H 8O3 Peso molecular: 92 g/mol

 S  4.67

Producción aerobia de Klebsiela según el enunciado:

C3 H8O3  aO2  bNH 3  cCH1.73O0.43N0.24  dCO2  eH 2O

23.97
Sin considerar las cenizas:  26.05 g / mol biomasa
0.92
0.40 g biomasa 92 g glicerol 1mol biomasa mol biomasa
c    1.41
g glicerol 1mol glicerol 26.05 g biomasa mol glicerol
mol biomasa
c  1.41
mol glicerol
 a  w S  c B  f j  P 
1
4
f j P  0

a  w S  c B 
1
4
w3
 B  4 1  11.73  2  0.43  3  0.24  4.15
4w+x-2y-3z
CH1.73O0.43N 0.24

a
1
3(4.67)  1.41(4.15) a = 1/4(wS – cB – fjP)
4

mol O2
a  2.039
mol glicerol
 En términos de masa:

mol O2 1mol glicerol 32 gO2 g O2

2.039    0.709
mol glicerol 92 g glicerol 1molO2 g glicerol

La demanda de oxígeno para la formación de Klebsiela

aerogenes es de 0.709 g por g de glicerol consumido.
Problema 4.9

(a) La bacteria Cellulomonas que se utiliza como proteína

unicelular para la alimentación humana o animal se produce a
través de glucosa bajo condiciones anaerobias. Todo el carbono
del sustrato se convierte en biomasa y como fuentes de nitrógeno
se utiliza amoniaco. La fórmula molecular de la biomasa es
CH1.56O0.54N0.16 con un contenido de ceniza de 5%. ¿Cuál es el
rendimiento de biomasa a partir del sustrato en términos másicos
y molares en comparación con el rendimiento máximo posible?
el reparto de electrones disponibles en el sustrato puede escribirse:
Se elimina porque es anaerobio

4a c B f j  P
1  
w S w S w S

Se elimina porque todo el sustrato se

convierte en biomasa, NO HAY
FORMACIÓN DEPRODUCTO
c B
1
w S
La fórmula de la biomasa es: CH1.56O0.54N0.16
Su peso molecular es: C: 12 x 1 = 12.00
H:1 x 1.56 = 1.56
O: 16 x 0.54 = 8.64
N:14 x 0.16 = 2.24
24.44/0.95 = 25.73 (mw biomasa) g/mol
Grado de reducción de la biomasa:

 B  4 1  11.56  2  0.54  3  0.16  4.00 4w+x-2y-3z

CH1.56O0.54 N0.16

c B
1 w = 6 para la glucosa
w S

c(4) datos :  S  4
1
6(4)

moles biomasa
c6  YX / S
mol glu cos a
 mol biomasa 1mol glu cos a 25.73g biomasa g biomasa
YX / S  6    0.858
mol glu cos a 180 g glu cos a 1mol biomasa g glu cos a

En ausencia de formación de producto, si todos los electrones

disponibles se utilizaran para la síntesis de biomasa, se tiene:

w S
cmax 
B

6(4) mol biomasa

cmax  6
(4) mol glu cos a
Se obtiene el mismo valor que cuando se
estimo Yx/s
Problema 4.9

(b) Otros sistema para la producción de proteína unicelular es

utilizar Methylophilus methylotrophus. Este organismo se
produce en medios aerobios a partir de metanol, con amoniaco
como fuente de nitrógeno. La formula molecular de la biomasa es
CH1.68O0.36N0.22 con un contenido de ceniza de 6%.

- ¿Cómo es el rendimiento de rendimiento máximo posible

comparado con el obtenido en el apartado (a) anterior?.¿Cuál
es la principal razón de esta diferencia?
- Si el rendimiento máximo termodinámico de biomasa a partir
de metanol es del 42%, ¿cuál es la demanda de oxígeno?
 4a c B f j  P
1  
w S w S w S

El proceso es aerobio y no se menciona la formación de algún

producto

La fórmula de la biomasa es: CH1.68O0.36 N0.22

Peso molecular: C: 12 x 1 = 12.00

H:1 x 1.68 = 1.56
O: 16 x 0.36 = 5.76
N:14 x 0.22 = 3.08
22.4/0.94 = 23.84 (mw biomasa) g/mol
Grado de reducción de la biomasa:

 B  4 1  11.68  2  0.36  3  0.22  4.30 4w+x-2y-3z

CH1.68O0.36 N0.22

Metanol: CH 4O datos : w  1,  S  6

Reemplazando en: 4a c B
1 
w S w S

4a c(4.3)
1 
(1)(6) (1)(6)

1  0.67a  0.717c
 1
a  ( w S  c B )
4
1
a  (1 6  c  4.3)
4
a  1.5 1.075c

1  0.67(1.5  1.075c)  0.717c

1  1.005  0.720c  0.717c

 0.005  0.003c

c  1.67 a  0.295
 mol biomasa 1mol me tan ol 23.84 g biomasa g biomasa
c  1.67    1.244
mol me tan ol 32 g me tan ol 1mol biomasa g me tan ol

w S
cmax 
B
(1)(6)
cmax 
(4.3)

mol biomasa 1mol me tan ol 23.84 g biomasa g biomasa

cmax  1.395    1.039
mol me tan ol 32 g me tan ol 1mol biomasa g me tan ol

La razón de un rendimiento mayor con respecto al caso anterior es

la fuente de carbono
 g biomasa
c  YX / S  42%  0.42
g me tan ol

0.42 g biomasa 32 g me tan ol 1mol biomasa mol biomasa

   0.56
g me tan ol 1mol me tan ol 23.84 g biomasa mol glicerol

1
a  ( w S  c B )
4
1 mol O2
a  (1 6  0.56  4.3)  0.898
4 mol me tan ol
mol O2 32 g mol me tan ol g O2
0.898    0.898
mol me tan ol mol O2 32 g me tan ol g me tan ol

La demanda de oxígeno es 0.898 g por g de metanol

 Pseudomonas: PM: 26.13 g/mol

Sustrato gas óleo: PM: 22.4 g/mol

Concentración final de las células: 25 g Pseudomonas/L gas óleo

( NH 4 ) 2 SO4 PM: 132 g/mol

C16H 32  aO2  b( NH 4 ) 2 SO4  cCH1.83O0.55 N0.25  dCO2  eH 2O  SO2

25 g Pseudomonas 22.4 L gas óleo 1mol Pseudomonas mol Pseudomonas

c  YX / S     21.43
L gas óleo 1mol gas óleo 26.13g Pseudomonas mol gas óleo
 4a c B
1 
w S w S

w  16 gas óleo 4w+x-2y-3z

 S  gas óleo  4 1  1 2  2  0  3  0  6
C16H 32  Cmol  CH 2

 B  4 1  11.83  2  0.55  3  0.25  3.83

CH1.83O0.55 N0.25
4a (21.43)(3.83)
1 
(16)(6) (16)(6)

mol O2
a  3.47
mol gas óleo
C16H 32  3.47O2  b( NH 4 ) 2 SO4  cCH1.83O0.55N0.25  dCO2  eH 2O  SO2

Balance de N
b(4  2)  21.43(0.25)

132 g ( NH 4 ) 2 SO4
b  0.67 mol( NH 4 ) 2 SO4 
mol( NH 4 ) 2 SO4

b  88.4 g ( NH 4 ) 2 SO4