HUAMANGA
PRESENTADO POR:
AYACUCHO - PERÚ
2017
A mis padres Modesto y Felícitas.
A mi novia: Leydi.
i
AGRADECIMIENTOS
A la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga, alma máter del saber, en cuyas
aulas me instruyeron y guiaron para desempeñarme en la vida profesional de lo cual
siempre estaré agradecido.
ii
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN………………………………………………………..………………..……………1
CAPÍTULO II……………………………………………………..…………………………..……….19
iii
CAPÍTULO III…………………………………………………….…………………..……………….26
CAPÍTULO IV………………………………………………………..……...………………………..35
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES…………………..…………….…………..……….35
4.1. CONCLUSIONES…………..…………………………………….…...……………………..35
4.2. RECOMENDACIONES……………………………………………...………….…………..35
4.3. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA……………………………………...………… ..…………..36 ..
iv
INTRODUCCIÓN
Los Pleurotus ostreatus son hongos comestibles de importancia económica que ocupa el
tercero más consumidas y utilizadas en la gastronomía mundial después de Lentinula
edodes. Este alto consumo se debe a la gran difusión de las características nutricionales,
medicinales y culinarias que poseen estas setas, consideradas un producto gourmet (Chang,
1999; citado en Ardón, 2007).
Objetivo general:
Complementar los conocimientos adquiridos durante mi formación profesional en las aulas
universitarias, en especial en los cursos de Microbiología y Fitopatología Agrícola.
Objetivos específicos:
1
CAPÍTULO I
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
1.1. ANTECEDENTES
Las setas han sido parte de la dieta humana desde tiempos inmemoriable, siendo usados
como alimentos, aun antes de que el hombre entendiera el manejo de otros organismos.
Para los antiguos romanos estos eran “la comida de los dioses”, resultado de los rayos que
chocaban contra la tierra empleados por Júpiter durante las tormentas; los egipcios
consideraban “un regalo del dios Osiris”, mientras que los chinos los veían como “el elixir de
la vida” (Smith et al., 2002).
Se tienen registros de que se cultivó por primera vez un hongo macroscópico comestible
Auricularia auricula en China cerca del año 600 de nuestra era. En Europa se sabe que el
champiñón (Agaricus bisporus) se cultivó inicialmente en Francia hacia el año 1650 (Smith et
al., 2002).
El cultivo de hongos comestibles se ha convertido en una practica alrededor del mundo por
la habilidad de crecer en un amplio rango de temperaturas utilizando varios sutratos. Asi
mismo, el interes de los consumidores por adquirir productos libres de fertilizantes,
conservantes y otros productos químicos, asi como con una alta proporcion de proteinas y
otros nutrientes, convierten a estos hongos en un alimento apetecido y con una creciente
demanda (Guzmán, 1997).
El cultivo de diversas especies de hongos ostra está adquiriendo una gran importancia en el
mundo, siendo China, Francia y Holanda los principales países exportadores. Estados
Unidos, Alemania, Reino Unido, Francia, Italia y España se destacan como consumidores de
hongos comestible, ya que sus pobladores adquieren cantidades mayores cada año, y le
siguen Canadá, Corea, China y Holanda. Siendo el más conocido el Pleurotus ostreatus
después de Lentinula edodes (Guarín y Ramírez, 2004).
El consumo percápita de setas de Alemania 2.3kg, Francia 2.9kg, Holanda 4.1kg, Belgica
3.2kg, Irlanda 2.6kg, Italia 1.8kg, España 1.1kg, Argentina 0.1kg, posesionándose Argentina
como productor en Sudamérica (Guarín y Ramírez, 2004).
1.2.1. Generalidades
La ciencia que estudia los hongos es la Micología. El termino hongo viene del latín Fungus,
que significa seta y del griego sphongos que significa esponja. Estudios han demostrado que
los hongos son el grupo de organismos más numerosos en la tierra después de los insectos.
En efecto, se calcula que hay más de 1´500,000 especies de hongos. La diversidad de estos
organismos favorece que se desarrollen en un sinfín de hábitats (Guzmán, 1997).
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Los hongos se dividen en tres grandes grupos. Los saprófitos que se alimentan de materia
orgánica muerta; los parásitos que se alimentan de materia orgánica viva y los simbiontes
(micorrízicos), que subsisten solo en relación simbiótica con algunos miembros que
pertenecen al reino vegetal (Rojas, 2004).
1.2.2. Macromicetos
Son denominados de esta manera los hongos cuyos carpóforos o cuerpos fructíferos pueden
ser vistos a simple vista, comunmente se dice que son organismos macrocópicos, sin
embargo, esta afirmación es falsa ya que es solamente el carpóforo el que puede ser visto a
simple vista.
Los hongos macromicetos estan formadas por hifas ramificadas que se reunen en cordones
y cuerpos de reproduccion visibles. Son saprofitos ya que crecen en materia orgánica
descompuesta absorbiendo materia organica y mineral, en simbiosis con plantas, formando
ectomicorrizas o como parásitos sobre los arboles (Pedreros, 2007).
1.2.3. Ascomycetes
Pueden ser unicelulares o estar formados por un micelio de paredes quitinosas. Con septos
transversales incompletos (presentando un poro central). Las hifas pueden ser uni o
multinucleadas, homocarióticas o dicarióticas ramificadas. La principal caracteristica de estos
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hongos es que como producto de su reproduccion sexual se forman unos sacos o bolsas
llamados ascos los cuales, contienen en su interior a las esporas de origen sexual
(ascosporas). Los cuerpos productores de ascos se denominan ascocarpos.
1.2.4. Basidiomycetes
Las esporas que dan nombre al grupo son las basidiosporas, producidas exógenamente en
organos especiales, los basidios. En los basidiomycetes superiores se producen cuatro
basidiosporas típicamente y los basidios se encuentran el laminillas (lamela) de los
basidiocarpos carnosos. Los basidiomycetes inferiosres tienen un ciclo vital mas complicado
y su lugar en la clasificacion no es muy seguro. Un buen grupo de especies de Agaricales
(hogos con laminillas) pueden desarrollarse en cultivos artificiales (Stamets, 2000).
Figura 01. Carpóforo típico de un basidiomycete Amanita muscaria (Campbell et al, 2010).
5
la madera. Existen dos tipos de podredumbre, la marron, en la que solamente se degrada la
celulosa pero no la lignina y la blanca, en la que ambos polímeros son degradados
efecientemente (Pedreros, 2007).
La forma de reproduccion de los hongos es a traves de las esporas, los hongos superiores
poseen en el himenio unas celulas madres que son las encargadas de producir las esporas,
en el caso de los basidiomycetes, estas son llamadas basidios.
Las esporas son lanzadas por el himenio al exterior, si se depositan en lugares húmedos y
de condiciones favorables, darán origen al micelio, éste crecerá bajo tierra o leños dando
lugar a una seta con basidios en su himenio y se producirán las esporas para que sean
nuevamente liberadas al exterior y se complete el ciclo de reproducción (Campbell et al,
2010).
Figura 02. Ciclo de vida de un basidiomycota, productor de setas (Campbell et al, 2010).
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Los basidiomycotas fitopatógenos (royas y carbones) son muy destintos y tienen ciclos de
vida mucho mas complicados. No aparecen en hortícolas, pero causan problemas muy
graves en cultivos extensivos, como son los frutales y sobre todo en cereales.
Los hongos pertenecientes a este orden, son hongos que se caracterizan por tener esporas
de color café chocolate, presentan anillos diferentes a partir de un velo parcial y laminillas o
agallas libles. Lo integran tanto especies comestible, como venenosas. Pueden ser
saprófitos, parásitos o ectomicorrízicos (Stamets, 2000).
Los hongos ostra (como son conocidos en Estados Unidos, Europa, Asia) o champiñon ostra
(como es conocido en el Perú), forman parte del grupo de hongos comestibles más
populares. Al igual que el champiñon ostra, muchos de los pleurotus son descomponedores
primarios de árboles de madera dura y se encuentran en todo el mundo. Su carpóforo es
redondeado con la supeficie lisa, abombada y convexa cuando es joven, aplanándose en su
proceso de maduracion, sus colores pueden variar desde azul oscuro, hasta crema, blanco,
café, gris, amarillo y rozado, sin embargo, el color del carpóforo puede variar de acuerdo a
las condiciones ambientales, puede ser oscuro en condiciones frias y claro en condiciones
de luz y calor. Su tamaño puede variar de 5 a 30cm de diametro. El cuerpo fructífero
generalmente es pequeño cuando crece en troncos y es mas grande cuando se cultiva en
tubulares sintéticos con otros substratos. El pie es excétrico o lateral, sin embargo cuando
llega al sombrero, es central (Chang y Miles, 2004).
Las esporas son pequeñas, ovoides, casi cilindricas, que en gran numero forman masas de
polvo de color blanco con cierta tonalidad violácea (Guarín y Ramírez, 2004).
Para su crecimiento micelial, las mejores fuentes de carbono son el almidón, glucosa,
fructosa, maltosa, manosa, sucrosa, pectina y, celulosa. Las fuentes denitrógeno utilizadas
por el microorganismo son la peptona, licor de maíz, polvo detorta de soya, polvo de
levadura, sulfato de amonio, aspargina, serina, alanina yglicina. Las temperaturas óptimas de
crecimiento del micelio son cercanas a 25°C a 28°C y el rango de pH es alrededor de 5,5 a
6,5. La tolerancia al CO2 es baja, concentraciones mayores a 30% hacen que el crecimiento
decaiga (Chang y Miles, 2004).
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Pleurotus ostreatus, es un hongo destructor de la madera, está extendido en las zonas
templadas y forma cuerpos fructíferos a temperaturas relativamente frescas comparados con
otras especies de Pleurotus. Su carpóforo es grisáceo–marrón en estadios jóvenes,
obteniendo un color crema–blanco en su maduración. En los basidios, se encuentran cuatro
esporas para su reproducción.
Esta es la especie más frecuentemente cultivada dentro del género; una de las
características de esta especie es que requiere un tratamiento de temperatura llamado
“choque frío” para comenzar la formación de primordios (Mendivil, 2013).
Reino : Fungi
División : Basidiomycota
Subdivisión : Basidiomycotina
Clase : Basidiomycetes
Subclase : Holobasidiomycetidae
Orden : Agaricales
Familia : Tricholomataceae
Género : Pleurotus
Especie : Ostreatus
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Nombre científico : Pleurotus ostreatus.
Nombres comúnes: Champiñón ostra, hongo ostra, seta ostra, seta de concha, girgolas
En el hongo hay que diferenciar dos partes fundamentales: el cuerpo vegetativo y el cuerpo
reproductor o fructífero (figura 01). El cuerpo vegetativo, que se encuentra bajo la tierra, está
formado por unos filamentos llamados hifas, que pueden ser unicelulares (con una sucesión
de nucleos), y pluricelulares. El conjunto de todas la hifas es el micelio. Él, es el que se
encarga de absorber las sustancias minerales del suelo o substrato para alimento del hongo.
El micelio en realidad es el hongo, ya que la seta (a la que vulgarmente se llama hongo), es
el aparato reproductor (Mendivil, 2013).
1.3.3. Reproducción
La forma de reproduccion de los hongos es por esporas (figura 02). los hongos superiores
tienen unas celulas madre ubicadas en el himenio que son las encargadas de producir
esporas. En el caso de los basidiomicetes, a estas celulas madre se les denomina basidios,
mientras que las celulas madre en los ascomicetos son los ascos. Las esporas de los
basidios y de los ascos, son lanzados al exterior para la propagacion de la especie. Si la
espora se deposita en un lugar cuyas condiciones sean favorables daran origen al micelio.
Éste se reproducen en sustratos donde las condiciones son favorables, se ramificará y se
entremesclará con los micelios de otras esporas. En el medio donde la humedad y las
condiciones sean óptimas crecerá una seta que producirá en su himenio los ascos o basidios
que expulsarán al exterior la esporas, dando lugar de nuevo al ciclo biológico del hongo
(Mendivil, 2013).
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Figura 04. Reproducción de Pleurotus ostreatus (Mendivil, 2013).
Este es uno de los generos que contiene la mayoría de los aminoácidos esenciales y
minerales, tambien su estructura está formado por vitaminas como la tiamina (B1).
Riboflavina (B2), ácido ascórbico, ácido nicotínico y ácido pantoténico, ácido fólico, tocoferol,
piridoxina, cobalamina y provitaminas como la ergosterina y carotenos; así tambien otra serie
de aminoácidos asenciales. Ancestralmente se ha estimado a los hongos como alimento de
calidad debido a su sabor, textura apreciable y sobre todo el alto valor alimenticio. En la
actualidad los hongos juegan un papel muy importante en la nutricion del hombre, al igual
que la carne de pescado, frutas y vegetales (Chang y Miles, 2004).
Uno de los mayores intereses en el cultivo del hongo seta es el alto valor nutritivo y
proteínico que estos poseen. Los hongos tienen un contenido de proteína promedio de 3.5 a
4.0% en peso fresco y de 30 a 50% en peso fresco. Haciendo una relacion con el contenido
de proteínas de otros alimentos, el de los hongos en fresco es dobleque el de los vegetales
(excepto soya, frijole y lentejas) y cuartro a doce veces mayor que el de las frutas, sin
embargo, es inferior al de la carne, pescado, huevo y lácteos (Acosta y Bustos, 1998).
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Tabla 01. Contenido nutricional de Pleurotus ostreatus (Romero, 2000).
SUSTANCIA %
Agua 92.2
Materia seca 7.8
Ceniza 9.5
Grasa 1
Proteína bruta 39
Fibra 7.5
Fibra cruda 1.4
Nitrógeno total 2.4
Calcio 33mg/100g
Fósforo 1.34mg/100g
Potasio 3793mg/100g
Hierro 15.20mg/100g
Ácido ascórbico. Vit. C 90-144mg/100g
Tiamina. Vit. B1 1.16-4.8mg/100g
Niacina. Vit. B5 46-108.7mg/100g
Ácido fólico 65mg/100g
Referencia: A excepción de las calorías que estan expresadas en kilocalorías por cien gramos de peso
seco del hongo, los restantes componentes corresponden a gramos por cien gramos de hongo seco.
1.3.5. Características
El hongo ostra (Pleurotus ostreatus) cambia color desde su desarrollo inicial hasta su
madurez, entre tonalidades blancas hasta el gris pardo-azulado, llegando a una presentación
final de color amarillo oscuro. El carpóforo o sombrerillo mide de 5 a 15 cm de diámetro,
dependiendo de la edad, aunque eventualmente pueden producirse ejemplares de mayor
diámetro. Se trata de un hongo que crece en un ambiente natural, sobre árboles, tocones,
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arbustos y otras plantas leñosas, alimentándose a costa de su madera, destruyéndola. El
píleo, o parte superior de la seta tiene la superficie lisa y curvada cuando es joven,
aplanándose luego poco a poco. En su parte inferior se presenta el himenio, constituido de
unas laminillas, que van desde el pie o tallo que lo sostiene, hasta el borde del carpóforo
(Acosta y Bustos, 1998).
Es esencial tener presente que se trabaja con un organismo vivo, susceptible a cambios en
la temperatura, humedad, ventilación, luz, etc., que son las condiciones ambientales
importantes y necesarias a considerar para controlar a lo largo del proceso el cultivo de los
hongos. Las condiciones varían según la etapa del proceso y según el tipo de hongo, por lo
que es primordial conocer las necesidades específicas de la especie que se pretende
cultivar. Generalmente el mantenimiento de estas condiciones para su producción semi o
industrial requiere de la construcción de un invernadero (Acosta y Bustos, 1998).
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temperatura durante un mínimo de 45 minutos. Luego de la pasterización se elimina el
exceso de agua exprimiendo el sustrato con las manos y luego se deja escurrir por dos horas
(Acosta y Bustos, 1998).
a. El personal debe estar provisto de ropa limpia, con mascarillas, cofia y de preferencia
guantes estériles.
b. La puerta del local debe permanecer cerrada durante el proceso para evitar
corrientes de aire.
El sustrato primario se coloca dentro de las bolsas que contienen el sustrato definitivo,
alternando las capas de sustrato. Terminando la siembra, la bolsa se cierra por medio de un
nudo, teniendo el debido cuidado de eliminar el aire del interior. La incubación es una de las
etapas más importantes, porque es cuando el hongo se propaga en el sustrato, previo a la
fructificación y su posterior cosecha. Por lo que se debe realizar en un local donde la luz sea
mínima o en completa oscuridad, colocando los sustratos en anaqueles debe mantenerse
una temperatura de 28 ºC durante 15-21 días. Durante la incubación, 2 días después de
haber realizado la siembra, se hacen perforaciones bien distribuidas sobre toda la superficie
de la bolsa que se ha sembrado, eso es para permitir un mejor intercambio gaseoso y un
mejor crecimiento del hongo (Ardón, 2004).
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1.3.6.4. Formación de primordios
Es uno de los últimos pasos que se da en el cultivo del hongo comestible, se lleva a cabo
después de la incubación, cuando ya ha crecido bien el micelio y ha formado una superficie
blanco-algodonosa que cubra totalmente el sustrato y esté lo suficientemente compactado
(Tuchan, 2004).
Los primeros primordios dan inicio al proceso de fructificación después de la incubación al
cuarto o quinto día, generalmente inicia el proceso en los lugares cercanos a las aberturas
de las bolsas (Girón, 2000).
El módulo de fructificación debe presentar algunas particularidades que son esenciales para
el buen desarrollo de los carpóforos, siendo éstas: área amplia, dedicada solamente a la
fructificación del hongo; buena ventilación, control de temperatura y de iluminación.
1.3.7.1. Contaminación
Introducción de un agente contaminante dentro de un medio natural, causando inestabilidad,
desorden y también daños. Los contaminantes además pueden ser de varios tipos,
clasificados en no degradables, de degradación lenta, degradable o biodegradable (Ardón,
2004).
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Causas
Los contaminantes aparecen por lo general en la fase de incubación y esto es debido
principalmente a la mala pasteurización del sustrato, al mal manejo del mismo o a la falta de
higiene en el momento de la siembra, orificios que pudieren existir en el módulo permiten la
entrada de aire y polvo e ingreso de microorganismos, insectos y vectores (Cuevas, 2008).
Efectos de la contaminación
Los efectos de una mala pasteurización o descuidos en el manejo del sustrato determinan un
crecimiento pobre y hongos mal formados o defectuosos. Los hongos Trichoderma,
Pennicillium y Aspergillus, aparecen en forma de manchas verdes, amarillentas, negras y
anaranjadas sobre el sustrato, invadiéndolo de forma rápida y evitando el crecimiento
micelial de las setas (Cuevas, 2008).
Soluciones
Para evitar problemas de contaminación en el cultivo del hongo ostra es necesario trabajar
en condiciones asépticas, realizando una buena esterilización y pasteurización de los
sustratos, desinfección y desinfestación de los cuartos de incubación y fructificación, ésto
ayuda a evitar la proliferación de plagas y enfermedades que pueden dañar la producción.
Alrededor del módulo debe mantenerse muy limpio, siempre con el objetivo de no permitir el
acercamiento e ingreso de ningún patógeno (Ardón, 2004).
1.3.7.2. Plagas
Colémbolos
Son insectos diminutos, sin alas, que forman pequeñas galerías secas y de sección oval en
la carne de los hongos. Se encuentran en gran cantidad entre las laminillas que hay bajo el
sombrero de las setas. También pueden atacar al micelio si el sustrato está demasiado
húmedo. Destaca la especie Hypogastrura armata (Ardón, 2004).
Dípteros
El daño lo causan sus larvas que se comen las hifas del micelio, hacen pequeñas galerías en
los pies de las setas y luego en los sombreros. Destacan algunas especies de mosquitos de
los géneros Lycoriella, Heteropeza, Mycophila y moscas del género Megaselia (Ardón,
2004).
Para el control de colémbolos y de dípteros se recomiendan medidas preventivas como
colocación de filtros junto a los ventiladores, eliminación de residuos, tratamiento térmico de
los sustratos para eliminar huevos y larvas, etc. (Girón, 2000).
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Se han visto algunas especies de lepidópteros en su fase larval aún no identificados.
Algunos de estos insectos pueden causar efectos secundarios en el rendimiento o la calidad
de los hongos, ya que suelen alimentarse de las esporas, de las láminas o inclusive del
contexto mismo del hongo, al cual perforan y le hacen túneles y galerías (Acosta y Bustos,
1998).
1.3.7.3. Enfermedades
Se presentan dos tipos de enfermedades que pueden causar daños a los hongos las:
bióticas y abióticas. Las bióticas son causadas por bacterias, micoplasmas o virus; este tipo
de enfermedades son comunes en los hongos, aunque no han sido reportadas como
importantes desde el punto de vista económico. Las abióticas son aquellas causadas por
factores no vivientes, como la falta de espacio para el crecimiento de la raíz, la presencia de
niveles crónicos o agudos de contaminantes del aire o el agua, o la presencia de condiciones
extremas de humedad, calor, luz, pH del suelo, y nutrientes (Girón, 2000).
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producción. La falta de luz junto con una aireación insuficiente provoca la aparición de masas
de tejido sin diferenciar, con forma de coliflor, de las que raramente se desarrollan cuerpos
fructíferos normales. Este síntoma también puede estar ligado a la presencia de virus.
1.3.7.9. El pH
El micelio de Pleurotus mostrará un bajo crecimiento y una incubación defectuosa si el pH es
superior a 7.0 o inferior a 5.0 (Cuevas, 2008).
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análogos. Las especies de este género son excelentes productoras de lovastatina, al punto
que pueden ser consideradas como alimentos funcionales (Arias, et al., 2008).
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CAPÍTULO II
MATERIALES Y MÉTODOS
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Figura 05: Mapa Político del Departamento de Ayacucho (Instituto geográfico nacional)
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Figura 07: Vista Satelital del centro de apoyo - vivienda del practicando (Google earth)
La Ciudad de Huamanga caracterizado como una Región Intermedia entre Valle interandino
y la Región sub andina; de precipitación promedio anual de 551.2 mm (precipitación media
acumulada anual para el periodo 1967-2001); siendo los meses de Mayo hasta Octubre los
meses de escasa precipitación y correspondiendo a los de Diciembre a Marzo los más
lluviosos. La temperatura promedio anual de esta zona La media anual de temperatura
máxima y mínima (periodo 1967-2001) es 23.8°C y 9.3°C.
Los cuerpos fructíferos del Pleurotus ostreatus y cepas se adquirió durante el desarrollo del
Seminario Taller: CULTIVO DE HONGOS COMESTIBLES (Pleurotus ostreatus) en junio
2016 - Ayacucho, organizado por los ingenieros Guillermo Carrasco Aquino y Germán De La
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Cruz Lapa, para lo cual contrataron sus servicios del especialista en Cultivo de Hongos
Comestibles el Lic. José A. Romero Carrillo, jefe y encargado del “Módulo de Hongos
Comestibles” de la Universidad Nacional Agraria La Molina - UNALM, en donde trajo
muestras de presentación en bandejas de 200gr de peso fresco, con una marca denominada
“Molihonguitos” producto de dicho módulo.
2.5.1. Equipos
Olla a presión
Olla pequeña y mediana
Balanza de precisión
Cocina
Tambor de metal
Refrigeradora
Gas para cocina
2.5.2. Materiales
Alcohol de 960
Algodón
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Bolsas polipropileno
Fósforos
Tijera
Bisturí
Guantes quirúrgicos
Mandil blanco
Mascarillas
Mecheros de alcohol
Mesa y silla
Colador
Papel boom reciclado
Parafilm
Pinzas de disección (metal)
Placas Petri
Matraz de Erlenmeyer
Vaso de precipitado 1l y de 0.1l
Recipiente mediano
Cobertor o plástico mediano
Rafia
Tabla de picar y cuchillo mediano
Papel toalla
Plumones indeleble
2.5.3. Insumos
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2.6. Medio de cultivo papa, sacarosa y agar (PSA)
Como su nombre propio indica, para su preparación se requiere insumos como: papa,
sacarosa y agar.
El aislamiento de cepas consiste en obtener el micelio del hongo que se desea cultivar. El
micelio se obtiene colocando fragmentos de tejido del hongo en placas Petri con medio de
cultivo solidificado.
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Preparación de medio de cultivo PSA.
Aislamiento de cepas por medio de tejido.
Elaboración de semilla en granos de trigo.
Preparación de sustratos y producción de hongos comestibles (experimento de
prueba).
Otras actividades similares indicadas por el asesor.
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CAPÍTULO III
ACTIVIDADES REALIZADAS
Como se mencionó en la metodología, esta práctica se desarrolló en dos sitios dentro de las
fechas ya mencionadas.
La práctica pre profesional consistió en realizar aislamientos de cepas por medio de tejido
del hongo comestible (Pleurotus ostreatus) y la multiplicación de micelio listas para su
siembra o inoculación y probar producción de setas. Asimismo indicar, que la práctica pre
profesional se dio inicio con la adquisición de los champiñones ostra (fresco) hasta la prueba
de producción de Pleurotus ostreatus, bajo las condiciones ambientales naturales de la
ciudad de Ayacucho; Además, indicarle que se han desarrollado otras actividades ajenas a
los mencionados sobre la especie en estudio, las mismas que se desarrollan a continuación:
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Comestibles” de la UNALM, nos proporcionó setas muy frescas y cepas de Pleurotus
ostreatus, lo cual se tomó como base para el desarrollo de esta práctica pre profesional.
Los champiñones ostra se pueden conservar en estado fresco y viables hasta un tiempo de
una semana a una temperatura de 2 a 30C.
La adquisición de los equipos, materiales e insumos necesarios para el desarrollo de la
práctica pre profesional se hizo tanto en la cuidad de Ayacucho como en la ciudad de Lima.
Insumos
Papa blanca : 250 g
Agar : 20 g
Sacarosa* : 18 g
Agua potable: 1l
Equipos y materiales
Balanza de precisión
Tabla de picar
Cuchillo
Cocina
Olla pequeña
Vaso de precipitado de 1l
Vagueta
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Matraz de Erlenmeyer de 500mL (02)
Tijera
Algodón
Papel boom reciclado
Rafia
Olla a presión
Placas Petri
Alcohol de 700 y de 960
Mecheros de alcohol
Papel toalla
Fósforos
Procedimiento
Se mondó y lavó la papa, por consiguiente se cortó en trocitos pequeños y pesé
250g, luego se hizo hervir en 700mL agua potable de 10 a 15 minutos a fuego lento,
luego se filtró el caldo.
En un vaso de precipitado con 400mL de caldo de papa diluí el agar (20g) y la
sacarosa (18g), luego añadí el resto del caldo. Luego enrasé el volumen con agua
potable hasta 1l.
Mientras el medio de cultivo se encuentra caliente, se distribuyó en partes iguales en
los matraz de Erlenmeyer de 500mL y los sellé con algodón, papel y rafia. luego se
esterilizó por dos horas en olla a presión juntamente con placas Petri.
Post esterilizado las placas petri y medio de cultivo PSA, los retiré a un medio
aséptico y procedí al plaqueo, que consiste en formar una lámina de medio de cultivo
dentro de las placas. Este proceso se realizó con apoyo de dos mecheros de alcohol
por tratarse de materiales estériles. y
Se dejó reposar en pilas de 10 las placas Petri con medio de cultivo PSA listas para
su cultivo in vitro.
* La sacarosa o azúcar común se utilizó por ser muy práctico y barato; como se reemplazó la
dextrosa por sacarosa se denominó PSA.
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3.2.2. Aislamiento de cepas por medio de tejidos
El aislamiento de cepas consistió en obtener el micelio del hongo ostra colocando
fragmentos de tejidos en placas Petri con medio de cultivo PSA solidificado.
Los equipos, materiales e insumos necesarios y los procedimientos para aislar cepas por
medio de tejidos son:
Procedimiento
Primeramente se desinfectó la mesa de trabajo con alcohol de 700. luego
Se prendió los mecheros y se desinfectó el instrumento de siembra (pinza de
disección sin diente).
Se tomó las setas y se quebró por la mitad.
Con la pinza de disección extirpé un pequeño fragmento de tejido, cercana al pie y
sombrero del hongo. Ojo, de la parte interna (estéril).
Dicho fragmento coloqué en las placas petri con PSA, entre 2 a 3 fragmentos de
tejido por placa y procedí a sellarlos con cinta parafilm.
Luego procedí a identificarlas con plumón indeleble las placas ya inoculadas
(especie, fecha y responsable) e incubarlas a temperatura ambiente natural en un
ambiente oscuro (tapers reacondicionados).
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Al cabo de cuatro días se observó el crecimiento del micelio sobre la superficie de la placa, el
color fue de blanco a blanco amarillento, lo que indica que el aislamiento de cepas se realizó
con mucho éxito. Es recomendable purificar el micelio a los cuatro días, si es que se
encuentran contaminados; logrando así, placas de cultivo puros al cabo de 12 a 14 días,
llamados también inóculos primario.
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Micelio del hongo en placas o trigo
Mecheros de alcohol
Alcohol de 700 y de 960
Bisturí con mango
Una cuchara sopera
Vaso de precipitado de 100mL
Indeleble
Procedimiento
Para la siembra y/o inoculación de micelios sobre los sustratos como chala de maíz morado
y pajas de trigo, éstos fueron tratados y esterilizados de modo que dicho inóculo tenga
ventaja competitiva sobre los sustratos.
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Equipos, materiales e insumos
Balanza de precisión
Chala de maíz morada (picados 5cm)
Paja de trigo
Inóculo de Pleurotus ostreatus en sustrato de trigo
Carbonato de calcio (CaCO3)
Sulfato de calcio (CaSO4)
Cilindro de metal con parrilla
Agua potable
Leña
Bolsa polipropileno de 10x15x2
Algodón
Indeleble
Alcohol de 700
Papel boom reciclado
Cuchara sopera
Guantes
Bisturí
Mascarilla
Cernidor
Costalillos
Procedimiento
Para un volumen específico de una bolsa, se requirió y se pesó 5kg de chala de maíz
morado picada y 5kg de paja de trigo, estos se colocó por separado en costalillos y se
sumergió por 12 horas en un tacho de agua. Transcurrido el tiempo retiré los costalillos con
sus respectivos contenidos y los puse al cernidor con el fin de dejar orear hasta alcanzar el
70% de humedad en el sustrato, luego los espolvoricé con cal (17g) y yeso (67g) a cada uno
de los sustratos por separado.
Los sustratos debidamente ya tratados los transferí a bolsas de polipropileno para luego
sellarlos con rafia o pita.
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b) Pasteurización
Post el procedimiento anterior hice una fogata y en ella coloqué cilindro de metal con 10 litros
de agua potable, puse su parrilla y ordenadamente los coloqué las bolsas conteniendo
sustratos o restos de cosecha, sellé el cilindro con su tapa dejando un escape de seguridad
muy pequeño y esperé que hirviera el agua. Empezado a hervir el agua controlé dos horas a
fuego lento; después de esto dejé que se enfríen el contenido retirando la fogata.
c) Inoculación o siembra
Terminado el tiempo de incubación con los sustratos invadidos al 100% por el micelio del
hongo Pleurotus ostreatus, estos fueron trasladados a una sala o área de fructificación con
iluminación difusa del ambiente, y para estimular la fructificación se procedió a realizar un
choque mecánico generando una presión al centro de los bloques, donde al cabo de 3 a 5
días nacieron los primeros primordios tipo racimo los cuales a sexto día llegaron a tener un
tamaño adecuado y se procedió a la primera cosecha.
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Cabe mencionar que la sala de fructificación se mantuvo a una humedad relativa superiores
al 70%, caso contrario se resecaran los primordios y carpóforos causando finalmente
perdidas y baja producción.
Como bien sabemos que nuestra ciudad de Ayacucho es de clima templado y seco
no nos permite la producción de Pleurotus ostreatus al aire libre bajo sombra,
necesariamente se requiere habilitar un ambiente ventilado húmedo (HR>70%) con
iluminación difusa bajo sombra y esto nos genera mayores costos en el experimento.
Picar el chala de maíz morado (5cm) con herramientas manuales es muy dificultoso,
por lo cual se requiere de una maquina ensiladora o picadora de chalas para dicho
labor, que facilita el manejo y embolsado del mismo.
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CAPÍTULO IV
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
4.1. CONCLUSIONES
3. La chala de maíz morado y pajas de trigo son idóneos para la producción de setas de
Pleurotus ostreatus, lográndose producir setas desde 3.2cm hasta 14.8cm de
diámetro.
4.2. RECOMENDACIONES
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REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
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1ra reimpresión, 2017. Edit. Hemisferio sur S.A. Buenos Aires. p. 19-95 y p. 134-185.
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octubre 2012. p. 2-13.
3. FERNÁNDEZ, F. 2002. El cultivo de setas (Pleurotus spp), Fungitec Asesorías,
Guadalajara, Jalisco México. p. 85-115.
4. FERNÁNDEZ, F. 2004. Guía práctica de producción de setas (Pleurotus spp),
Fungitec Asesorías, Guadalajara, Jalisco - México. p. 9-53.
5. CARDONA, A. 2011. Hongos de tipo ostra (buenas prácticas), técnico de campo de
Food Facility, FAO/Unión Europea, 1ra edición – INFOAGRO. p. 1-6.
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11. SINGER, L. 1964. Las setas y las trufas, la botánica, el cultivo y la utilización. Edit.
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DOCUMENTOS ELECTRÓNICOS
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Vol 43. [en línea]. Consultado: 09 de abril de 2017:
https://es.scribd.com/document/115964761/1tesis-Pleurotus-Imp
11. ARIAS, G.; GUTIÉRREZ, C.; OSPINA, C. 2008. Propuesta del cultivo de hongo
Pleurotus ostreatus y Lentinula edodes a partir de la biomasa del café en las fincas
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alternativo. Cuadernos Latinoamericanos de Administración. Vol 4. No. 6. pag. 35 –
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http://m.uelbosque.edu.co/sites/default/files/publicaciones/revistas/cuadernos_latinoa
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12. ARDÓN, C. 2007. Producción de los hongos comestibles. Universidad de San Carlos,
Guatemala. [en línea]. Consultado: 25 de mayo de 2017:
http://www.innovacion.gob.sv/inventa/attachments/article/2043/07_1932.pdf
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ANEXO
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PANEL DE IMÁGENES FOTOGRÁFICAS
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