Anda di halaman 1dari 6

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK

PREPARAT RENTANG MESENTERIUM

Disusun guna memenuhi tugas Mata Kuliah Praktikum Mikroteknik


Dosen pengampu : Dra. Ely Rudyatmi,M.Si

Oleh :

Aisyah Fitri Astuti 4401412075

Pendidikan Biologi/3

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG

2015
PREPARAT RENTANG MESENTERIUM

A. TANGGAL PRAKTIKUM
Rabu, 13 Mei 2015

B. TUJUAN
1. Membuat preparat rentang mesenterium katak (Bufo sp.) dengan metode rentang
dan dengan metode pewarnaan ganda (Hematoxilin-Eosin)
2. Mengamati dan menganalisis struktur jaringan mesenterium katak (Bufo sp.)

C. LANDASAN TEORI
Preparat rentang merupakan preparat yang proses pembuatanya dengan metode
rentang. Metode rentang atau spread adalah suatu metode sediaan dengan cara
merentangkan obyek yang akan diamati di atas gelas benda sehingga diperoleh
lapisan tipis yang dapat teramati di bawah mikroskop (Rudyatmi, 2012).
Pada umumnya jaringan-jaringan yang dapat dibuat preparat rentang adalah
jaringan-jaringan yang tipis, misalnya pleura, mesenterium, peritonium,
plaracnoidea dan pericardium.
Mesenterium merupakan jaringan halus yang berfungsi sebagai penggantung
organ-organ pencernaan, membentuk pembatas halus sehingga organ pencernaan
tidak saling berlekatan satu sama lain, selain itu berfungsi menjaga kedudukan dan
mempertahankan hubungan organ abdomen.
Objek atau jaringan-jaringan yang tipis dapat diamati secara langsung di bawah
mikroskop tanpa menggunakan pewarnaan dan fiksasi, akan tetapi preparat menjadi
tidak tahan lama. Selain itu, jaringan juga akan mudah rusak.
Untuk membuat preparat rentang yang tahan lama maka preparat harus difiksasi
terlebih dahulu sebelum diwarnai. Zat warna yang dapat digunakan dalam membuat
preparat ini antara lain hematoxilin, dan eosin. Pewarna hematoxilin yang
pelarutnya aquadest akan mewarnai inti menjadi biru dengan sangat baik.. Pewarna
eosin dengan pelarut alcohol 70% akan mewarnai sitoplasma menjadi warna merah
dengan baik.
Mast cell merupakan sel yang pertama kali dikenal oleh Ehrlich tahun 1879
karena terlihat sebagai sebuah sel yang besar yang terisi penuh dengan butir-butir.
Bentuk sel biasanya ovoid dengan inti bulat di tengah. Biasanya inti sulit terluhat
karena tertutp oleh butitr-butir yang memenuhi sel. Butir-butir dalam sitoplasma
tersebut diketahui mengandung bahan-bahn seperti heparin, histamin dan berbagai
enzim yang diketahui berhubungan dengan gejala alergi anafilaksi. Mast cell” atau
mastosit diduga berasal dari sel-sel darah yang dinamakn sel basofil yang juga
memiliki butir-butir. “Mast cell” yang terdapat pada jaringan tipis misalnya pada
mesenterium dapat diamati dengan metode rentang. Untuk melihat :mast cell” akan
lebih baik hasilnya bila sediaan dipulas atau diwarnai dengan hematoxylin azurell-
eosin.
Metode rentang dapat digunakan untuk tujuan sitologi dan histology serta juga
dapat digunakan untuk tujuan sitokimiawi seperti penelitian phosphatase dan
hyaluroidase. (Handari, 1983)

D. PROSEDUR KERJA
1. Jaringan subkutan atau mesenterium segar dari katak (Bufo sp.) yang dibedah
diambil dengan cepat tanpa dicuci terlebih dahulu.
2. Mesenterium direntangkan pada gelas benda yang bebas lemak dengan bantuan
jarum pentul sehingga tidak ada bagian yang terlipat maupun terjadinya udara
yang terjebak diantara gelas benda dengan jaringan.
3. Jaringan difiksasi dengan cara gelas benda yang bersangkutan dimasukkan ke
dalam staining jar yang berisi methyl alcohol selama 5 menit.
4. Jaringan dicuci dengan alkohol 50% beberapa celupan masing-masing 2 menit
5. Jaringan aquades beberapa celupan masing-masing 2 menit.
6. Jaringan diwarnai dengan zat warna hematoxilin selama 5 menit
7. Jaringan dicuci dalam staning jar dengan air mengalir sampai terjadi warna biru
cerah
8. Jaringan didehidrasi dengan cara gelas benda yang bersangkutan dimasukkan
beberapa celupan secara berurutan pada staining jar yang berisi alkohol 30%,
50% dan 70%.
9. Jaringan diwarnai dengan zat warna eosin
10. Jaringan dicuci dengan alkohol 70% beberapa celupan dan dilanjutkan dehidrasi
dengan cara gelas benda yang bersangkutan dimasukkan beberapa celupan pada
staiing jar yang berisi alkohol 80%, 90% dan absolut.
11. Jaringan didealkoholisasi/clearing dengan cara gelas benda yang bersangkutan
dimasukkan beberapa celupan pada staining jar yang berisi campuran alkohol :
xilol dengan perbandingan 3:1, 1:1, dan 1:3 dilanjutkan dengan xilol murni l dan
ll
12. Gelas benda diambil dari staining jar dengan cepat
13. Kanada balsam diteteskan pada gelas benda, kemudian ditutup dengan gelas
penutup secara cepat dan hati-hati
14. Label dilekatkan sesuai identitas preparat yang bersangkutan pada ujung kanan
gelas benda dengan posisi memanjang
15. Preparat diamati dengan perbesaran kuat , difoto dan dianalisis hasilnya.

E. HASIL PENGAMATAN

Mesenterium
HE
13-5-15

Keterangan :
Perbesaran 40 x 10
Bagian-bagian :
1. Serabut kolagen
2. Tetes lemak

F. PEMBAHASAN
Berdasarkan foto dan hasil pengamatan preparat rentang mesenterium Katak
(Bufo sp.) dengan pewarnaan ganda yaitu hematoxylin dan eosin dapat diketahui
bahwa preparat yang kami buat dapat dikatakan kurang baik karena preparat tidak
terwarnai secara sempurna. Hal ini terjadi karena pengaruh dari zat warnanya yaitu
zat warna Hematoxylin dan Eosinnya. Zat warna yang kami gunakan sudah tidak
berwarna biru lagi, namun sudah berwarna coklat, hal ini yang menjadikan preparat
tidak terwarna sempurna. Bagian-bagian yang teramati pun tidak terlihat kontras
antara satu dengan lainnya pada perbesaran 40 x 10.
Pewarnaan ganda memberikan warna merah ungu. Dimana zat warna
hematoxylin akan mewarnai inti sedangkan zat warna eosin akan mewarnai bagian
sitoplasma, sehingga bagian struktur sel dapat dibedakan antara satu dengan yang
lainnya. Hasil pengamatan di bawah mikroskop preparat mesenterium ini dapat
terlihat benang-benang yang merupakan susunan dari serabut kolagen yang
menyusun mesenterium tersebut, selain itu terlihat juga tetes lemak yang sel-selnya
berbentuk bulat.
Pada prinsipnya zat warna hematoxylin akan mewarnai butir-butir (granula)
pada inti sel sedangkan zat warna eosin mewarnai bagian sitoplasma. Pada
pembuatan preparat rentang mesenterium ini menggunakan fiksator methyl alcohol
pada saat proses fiksasi yang berfungsi untuk mematikan jaringan tanpa harus
mengubah strukturnya, sehingga preparat tersebut dapat di amati sewaktu-waktu.
Struktur jaringan hewan pada preparat rentang ini terlihat secara utuh karena sediaan
diambil langsung sesaat setelah katak tersebut mati, sehingga sel atau jaringan tubuh
masih hidup dan belum berubah bentuknya. Hal tersebut juga merupakan salah satu
alasan mengapa pada saat pengambilan jaringan mesenterium setelah membedah
katak tersebut harus dengan cepat direntangkan di atas gelas benda tanpa dicuci
terlebih dahulu.
Teramatinya bagian-bagian sel (morfologinya) seperti ditemukannya seabut
kolagen dan tetes lemak tersebut sangat tergantung pada cara merentangkan jaringan
tersebut. Saat merentangkan harus setipis mungkin sehingga dapat teramati dibawah
mikroskop dengan jelas morfologinya. Semakin tipis jaringan yang direntangkan,
maka akan semakin jelas bagian dari morfologi yang akan teramati di bawah
mikroskop.

G. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pembahasan preparat rentang mesenterium Katak (Bufo sp.) ini
dapat disimpulkan bahwa :
1. Jaringan yang tipis seperti mesenterium Katak (Bufo sp.) dapat dibuat dengan
metode rentang dan pewarnaan ganda yaitu hematoxylin dan eosin.
2. Pewarnaan ganda menggunakan zat warna hematoxylin untuk mewarnai butir-
butir (granula) pada inti dan eosin untuk mewarnai sitoplasma.
3. Pada preparat rentang mesenterium bagian yang teramati yaitu hanya serabut
kolagen dan tetes lemak.

H. SARAN
1. Untuk memberi warna yang lebih kontras sebaiknya menggunakan pewarna
ganda yaitu dengan zat warna hematoxylin dan eosin yang baru dan belum
terkontaminasi.
2. Untuk membuat preparat rentang mesenterium sebaiknya menggunakan
mesenterium yang masih segar dan sebaiknya direntangkan setipis mungkin.

DAFTAR PUSTAKA
Handari, Suntoro S. 1983. Metode Pewarnaan (Histologi & Histokimia). Jakarta:
Penerbit Bhratara Karya Aksara

Rudyatmi, Ely. 2015. Bahan Ajar Mikroteknik. Semarang: Jurusan Biologi FMIPA
UNNES

Anda mungkin juga menyukai