UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

“Determinación de la concentración mínima inhibitoria del extracto

vegetal de Artemisia absinthium en Salmonella entérica ATCC 13076 en
condiciones de laboratorio, Trujillo, 2017”

Asesor: Blgo. Mblgo.Cinthya Aspajo Villalaz

Integrantes Sánchez Llatas Christian José

Zapata Silva Marlon Alexis

Curso: Elaboración de proyectos de investigación

Trujillo-Perú

2017
I. GENERALIDADES

1. TÍTULO DEL PROYECTO

Determinación de la concentración mínima inhibitoria del extracto vegetal de

Artemisia absinthium en Salmonella entérica ATCC 13076 en condiciones de
laboratorio, Trujillo, 2017

2. TIPO DE INVESTIGACIÓN

Investigación básica Desarrollo tecnológico

Investigación aplicada Innovación

3. PERSONAL INVESTIGADOR

Nombres
Investigador 1: Sánchez Llatas Christian José
Investigador 2: Zapata Silva Marlon Alexis

Dirección
Investigador 1: A.v Gran chimú 1867 La Esperanza. Trujillo-La Libertad
Investigador 2: Manuel Arevalo 3ra etapa, Mz C-08 Lt 08. Trujillo-La
Libertad
 4. AREA DE INVESTIGACIÓN/ DISCIPLINA CIENTÍFICA

Ciencias Exactas CC. Fis y Matem Ciencias Sociales

Química, Ingenierias y Tecnología Humanidades

Ciencias de la Salud Derecho

Ciencias Biológicas y Agropecuarias X Otras

5. LINEA Y SUB LÍNEA DE INVESTIGACIÓN

La línea de investigación Cultivos andinos, frutales y plantas medicinales tiene
el código CONCYTEC 01010100
01 Área; Producción y competitividad
01 Sector: Agricultura Agroindustria y Agroexportación
01Sub sector: Agrícola
00 Línea: Cultivos andinos, frutales y plantas medicinales

6. LOCALIDAD E INSTITUCIÓN DONDE SE DESARROLLARÁ EL

PROYECTO

Localidad
Trujillo – La Libertad.

Institución
Universidad Nacional de Trujillo.

7. TAREAS DEL EQUIPO INVESTIGADOR

QUÉ TAREAS? QUÉ EXACTAMENTE?

 8. DURACIÓN DEL PROYECTO

Cronograma de ejecución
DESCRIPCIÓN MESES/HORAS SEMANALES
2016 2017
ACTIVIDAD
A S O N D E F M A M J J A S
8.1 Elaboración del
proyecto X X X X X X

8.2 Proceso X X X X
experimental

8.3 Redacción de X X X X
Informe

9. RECURSOS DISPONIBLES

9.1. Personal

Autor
Asesor

9.2. Materiales y Equipos

2 . 3 . 1 8 . 2 1 Material, insumos, instrumental y accesorios de

laboratorio

N° Artículo Marca Presentación Cantidad

Materiales de laboratorio
1 Tubos de ensayo de 13 “Pirex” Unid. 15
x 100 mm
2 Pipetas de vidrio de 10 “LMS” Unid. 05
mL
3 Pipetas de vidrio de 5 “LMS” Unid. 05
 mL
4 Pipetas de vidrio de 1 “LMS” Unid. 05
mL
5 Micropipeta de 10-100 “Boeco” Unid. 01
µL
6 Mechero de vidrio s/m Unid. 02
7 Matraces de vidrio de “Pirex” Unid. 02
250 mL
8 Balones de vidrio de “Pirex” Unid. 02
500 mL
9 Baguetas de vidrio s/m Unid. 02
10 Vasos de precipitación “Pirex” Unid. 02
de 250 mL
11 Placas de Petri “Pirex” Unid. 10
12 Gradillas s/m Unid. 02
13 Asa bacteriológica s/m Unid. 02
Reactivos y Medios de Cultivo
14 Lugol s/m mL 100
15 Safranina s/m mL 50
16 Violeta de genciana s/m mL 50
17 Alcohol acetona s/m mL 50
18 Reactivo oxidasa s/m mL 50
19 Peróxido de hidrógeno “Dropaksa” mL 50
20 Ácido clorhídrico 1 N “Dropaksa” mL 50
21 Hidróxido de sodio 1 N “Dropaksa” mL 50
22 Peptona “Merck” g 100
23 Cloruro de sodio s/m g 50
Equipos
24 Estufa “Memmert” Unid. 01
25 Horno “Memmert” Unid. 01
26 Autoclave “Aserhoff” Unid. 01
27 Balanza analítica “Ohaus” Unid. 01
28 Cocina eléctrica “Morillas” Unid. 01
29 Centrifuga “Memmert” Unid. 01
30 Incubadora “DigiSystem” Unid. 01
 9.3. Locales
Laboratorio de tecnología enzimática y productos naturales

10. RECURSOS NO DISPONIBLES

10.1. BIENES

2 . 3 . 1 5 . 1 2 Papelería en general, útiles y materiales de oficina

Precio Precio
N° Artículo Marca Presentación Cantidad
Unitario Total (s/.)
1 Borrador “Faber Unid. 1 0.50 0.50
Castell”.
2 Cinta adhesiva “Faber Unid. 1 1.00 1.00
Castell”.
3 Cinta masking tape “Faber Unid. 1 3.50 3.50
Castell”.
4 Corrector “Faber Unid. 1 2.50 2.50
Castell”.
5 Goma s/m Unid. 1 1.00 1.00
6 Lapiceros “Faber Unid. 1 0.50 0.50
Castell”.
7 Lápiz “Faber Unid. 1 0.50 0.50
Castell”.
8 Libreta de apuntes “Artesco” Unid. 1 2.50 2.50
9 Papel bond A4 75 g “Atlas” Millar 1 40.00 40.00
10 Papel de aluminio “Aluminium Caja 1 5.00 5.00
Foil”
11 Plumón marcador “Faber Unid. 2 2.00 4.00
Castell”.
12 Stickers s/m Bolsa 1 1.80 1.80
13 Tijera “Artesco” Unid. 1 5.00 5.00
SUB TOTAL EN NUEVOS SOLES 47.80

2 . 3 . 1 5 . 3 1 Aseo, limpieza y tocador

Precio Precio
N° Artículo Marca Presentación Cantidad
Unitario Total (s/.)
1 Bolsas plásticas s/m. Ciento 1 5.00 5.00
2 Detergente “Ariel.” x250g 1 5.00 5.00
3 Escobillas s/m. Unid. 2 1.00 2.00
4 Esponjas “Scoch brite” Unid. 1 1.20 1.20
5 Jabón carbólico “Denise” Unid. 1 1.40 1.40
6 Jabonera de s/m. Unid. 1 1.00 1.00
 plástico
7 Lejía “Clorox” L 3 2.20 6.60
8 Papel absorbente “Suave”. Rollo. 3 2.50 7.50
9 Papelera “Duraplast” Unid. 2 7.00 14.00
10 Toalla s/m. Unid. 1 5.00 5.00
SUB TOTAL EN NUEVOS SOLES 48.70

2 . 3 . 1 8 . 2 1 Material, insumos, instrumental y accesorios de

laboratorio

Precio Precio
N° Artículo Marca Presentación Cantidad
Unitario Total (s/.)
1 Agua destilada “Dropaksa” L 20 2.00 80.00
2 Alcohol etílico 70° “Dropaksa” L 1 5.00 5.00
3 Algodón “Algotec” Libra 1 12.00 12.00
4 Goteros s/m Unid. 3 1.00 3.00
5 Papel indicador de “Merck” Caja 1 30.00 30.00
pH
6 Mascarillas “Distech” Unid. 50 0.25 12.50
7 Tocas “Tocas” Unid. 20 0.60 12.00
8 Guantes “Great love” Caja 1 14.00 14.00
protectores.
9 Ron de quemar “Dropaksa” L 5 2.50 12.50
10 Encendedor s/m. Unid. 1 1.00 1.00
11 Pavilo s/m Unid. 1 0.50 0.50
12 Laminas “Algotec” Caja 1 8.00 8.00
protaobjeto
13 Laminas “Algotec” Caja 1 8.00 8.00
cubreobjetos
14 Caldo nutritivo “Merck” Unid. 1 400.00 400.00
15 Agar Mueller
“Merck” Unid. 1 300.00 300.00
Hinton x 500g
SUB TOTAL EN NUEVOS SOLES 898.50

10.2. SERVICIOS

2 . 3 . 2 1 . 2 99 Otros gastos

Precio Precio total

N° Tipo de Servicio Unidad Cantidad
unitario (S/.)
1 Movilidad x día 200 2.00 400.00
2 Refrigerios x día 30 5.00 150.00
SUB TOTAL EN NUEVOS SOLES 550.00
 2 . 3 . 2 2 . 4 4 Servicio de impresiones, encuadernación y empastado

Precio Precio total

N° Tipo de Servicio Unidad Cantidad
unitario (S/.)
1 Fotocopias Página 200 0.10 20.00
2 Impresiones Página 500 0.20 100.00
3 Empastado Ejemplar 5 20.00 100.00
SUB TOTAL EN NUEVOS SOLES 220.00

11. PRESUPUESTO

Precio Total (S/.)

BIENES
2 . 3 . 1 5 . 1 2 Papelería en general, útiles y
47.80
materiales de oficina
2 . 3 . 1 5 . 3 1 Aseo, limpieza y tocador 48.70
2 . 3 . 1 8 . 2 1 Material, insumos, instrumental y
898.50
accesorios de laboratorio
SERVICIOS
2 . 3 . 2 1 . 2 99 Otros gastos 550.00
2 . 3 . 2 2 . 4 4 Servicio de impresiones,
220.00
encuadernación y empastado
TOTAL 1765.00

12. FINANCIAMIENTO

12.1. Con recursos universitarios

Recursos disponibles

12.2. Con recursos propios

Recursos no disponibles: S/. 2065.00
 13. RESUMEN

RESUMEN DE QUÉ

II. PLAN DE INVESTIGACIÓN

1. Antecedentes y justificación
2. Justificación
3. Planteamiento del problema

¿Cuál es la concentración mínima inhibitoria del extracto vegetal de

Artemisia absinthium en Salmonella entérica ATCC 13076?

4. Hipótesis

5. Objetivos

5.1. General

- Determinar la concentración mínima inhibitoria del extracto vegetal de

Artemisia absinthium en Salmonella entérica ATCC 13076

5.2. Específicos

- Obtener el extracto vegetal de Artemisia absinthium.

- Probar la actividad bacteriana de Artemisia absinthium en Salmonella
entérica ATCC 13076
- Adquirir la habilidad para el trabajo de laboratorio y para la elaboración
de una investigación experimental.
6. METODOLOGÍA DE TRABAJO

A. Adquisición del extracto vegetal

 La extracción del extracto vegetal será por la técnica de destilación

por arrastre de vapor.

B. Adquisición de la cepa de Salmonella entérica ATCC 1307

 El microorganismo se adquirirá mediante compra por medio

de la empresa ATCC Produc Sheet, se realizará el pedido
con un periodo de 2 meses de anticipación.

C. Reactivación y verificación de la pureza de los cultivos de Salmonella

enterica. (Rodríguez, 2010; Luján, 2007; Ramírez, 2005)

 Del cultivo puro de Salmonella enterica, se repicará en tubos con 5

mL de caldo nutritivo, y se incubará a 37°C por 24 horas.
 A partir de cada tubo con presencia de turbidez se repicó por estría
en Agar Mueller Hinton y se incubarán a 37 °C por 24 a 48 horas,
en condiciones de microaerofilia.
 Para verificar la pureza de los cultivos se realizará una coloración
de Gram.
 Posteriormente, se repicó cada cultivo reactivado en frascos con
Agar MRS para su conservación, realizándose replicajes cada 7
días para mantener los cultivos.

D. Evaluación de la actividad antibacteriana de Artemisia absinthium

 La evaluación se realizará a las 24, 48 y 72 h, con el objetivo de

verificar la formación del halo de inhibición alrededor de cada
abertura, donde se colocaron los extractos. Las evaluaciones
culminarán cuando la bacteria colonice toda el área del cultivo en
las placas del tratamiento testigo, lo cual por referencia debe
ocurrir a las 72 h.
 E. Determinación de la concentración mínima inhibitoria

 La concentración mínima inhibitoria se realizará por el método de

dilución en agar, en donde se incorporará el producto a evaluar en
el medio con agar. La técnica será realizada en microplacas de
fondo plano de 24 pozos, en las cuales se dispondrán los diferentes
volúmenes de solución de los extractos en cada pozo y se
realizarán diluciones con el medio de cultivo.

F. Diseño experimental

 Se usó un diseño experimental completamente aleatorizado, cada

tratamiento está representado por la concentración del extracto de
Artemisia absinthium en el medio de cultivo inoculado con
Salmonella enterica (tres repeticiones cada uno). Con los datos
obtenidos de las lecturas de diámetro de la colonia se realizó un
análisis de varianza para terminar si existen diferencias
significativas entre los tratamientos.

G. Análisis de datos

 Se recolectarán los datos mediante fichas y hojas de registros.

 Se clasificarán, organizarán y presentarán los datos en tablas y

gráficas.

 Se realizará el análisis estadístico de los resultados obtenidos en los

estudios de vida útil físico-químico y microbiológico de los
diferentes sistemas, mediante un análisis ANVA utilizando el
programa SPSS Vs. 20.

Referencias Bibliográficas