Ni Hms 415188 Translate

NIH Public Access
Author Manuscript
Brain Behav Immun. Author manuscript; available in PMC 2014 February 01.
Published in final edited form as:
Brain Behav Immun. 2013 February ; 28: 25–43. doi:10.1016/j.bbi.2012.09.013.
Latihan fisik meningkatkan memori, stimulasi

hippocampal neurogenesis dan modulasi immune dan
neuroimmune cytokines tikus usia tua
teks
$ Watermark
Rachel. B. Speisman1, Ashok Kumar2,3, Asha Rani2,3, Thomas C. Foster2,3,*, and Brandi K.
Ormerod1,2,3,*
1J. Crayton Pruitt Family Department of Biomedical Engineering, University of Florida,
Gainesville, FL, USA

2Department of Neuroscience, University of Florida, Gainesville, FL, USA
3McKnight
Brain Institute, University of Florida, Gainesville, FL, USA
Abstrak
Kami menguji apakah latihan sehari-hari memodulasi kekebalan tubuh dan neuroimmune sitokin,
hippocampus mengatur tingkah laku - dan hippocampal neurogenesis pada tikus jantan berusia tua
teks
$ Watermark
F344 (18 mo upon arrival). Dua belas minggu setelah keadaan berlari atau kelompok kontrol
tugas (n = 6 per kelompok), tikus dilatih dan diuji dalam labirin air yang cepat diikuti oleh tugas
menghindari hambatan. Tikus-tikus yang disuntikkan BrdU dimulai dari 12 hari setelah uji
perilaku dan dimatikan 3 minggu kemudian untuk mengukur sitokin dan neurogenesis. Latihan
sehari-hari meningkatkan neurogenesis dan meningkat cepat dan skor discrimination index (DI)
24 jam di labirin air dan 24 jam menghindari hambatan retention latencies. Latihan sehari-hari
menurunkan cortical VEGF, hippocampal IL-1β dan serum MCP-1, GRO- KC dan level leptin
tetapi meningkatkan konsentrasi hippocampal GRO-KC dan konsentrasi IL-18. Konsentrasi serum
leptin berhubungan negatif dengan jumlah neuron baru dan kedua skor DI sedangkan konsentrasi
hippocampal IL-1β berhubungan negatif dengan skor memori di kedua tugas. Cortical VEGF,
serum GRO-KC dan serum level MCP-1 berhubungan negatif dengan skor DI dan kami
menemukan sebuah hubungan positif antara hippocampal IL-18 dan tingkat GRO-KC dan nomor
teks
$ Watermark
neuron baru. Analisis jalur menunjukkann serumnya berbeda, hippocampal dan hubungan
compartment cytokine relationship. Hasil kami menunjukkan bahwa latihan sehari-hari berpotensi
meningkatkan kognisi pada tikus usia tua yang di modulasi oleh hippocampal neurogenesis dan
kekebalan tubuh dan neuroimmune cytokine signaling.
Kata kunci
adult neurogenesis; hippocampus; running; cytokine; chemokine; biomarker; learning; memory;
water maze; Fisher 344; Bio-Plex
Corresponding Author: Brandi K. Ormerod, PhD, Assistant Professor, J. Crayton Pruitt Family Department of Biomedical
Engineering, University of Florida, Gainesville, FL 32611-6131, USA, Phone: 352-273-8125, Fax: 352-273-9221,
bormerod@bme.ufl.edu.
Publisher's Disclaimer: This is a PDF file of an unedited manuscript that has been accepted for publication. As a service to our
customers we are providing this early version of the manuscript. The manuscript will undergo copyediting, typesetting, and review of
the resulting proof before it is published in its final citable form. Please note that during the production process errors may be
discovered which could affect the content, and all legal disclaimers that apply to the journal pertain.
Conflict of interest statement
The authors declare that all research reported in this manuscript was conducted in the absence of any commercial or financial
relationships that could be construed as potential conflicts of interest.
Speisman et al. Halaman 2
1. Pengantar
Pengembangan strategi baru untuk melindungi kognisi pada populasi lansia yang
berkembang sangat penting untuk mengelola beban dan biaya perawatannya. Hippocampal
neurogenesis adalah bentuk plastisitas yang menurun secara signifikan berdasarkan usia
pada hewan pengerat (Bizon et al, 2004; Dupret et al, 2008; Kuhn et al, 1996), anjing
(Siwak-Tapp et al, 2007) dan primata bukan manusia (Aizawa et al, 2009; Gould et al,
1999b) terutama karena neural progenitor cell (NPC) prekursor neuron baru dan glia
menjadi semakin tidak berkembang berdasarkan usia (Cameron dan McKay, 1999). Neuron
bertambah banyak setiap hari di hippocampus mamalia muda (Cameron dan McKay, 2001)
yang menunjukkan bahwa neurogenesis berkontribusi untuk integritas hippocampus dan
teks
$ Watermark
dibutuhkan, neurogenesis dan kemampuannya dalam tugas tergantung hippocampus yang

pada umumnya berhubungan pada mamalia muda (Deng et al., 2010 ;. tapi lihat Epp et al,
2011; Gould et al., 1999a). Ukuran neurogenesis telah berhubungan dengan ukuran kinerja
dalam tugas hippocampus-dependent di antara anjing berusia tua (Siwak-Tapp et al., 2007),
berusia primata non-manusia (Aizawa et al., 2009) dan ketika manipulasi eksperimental
memperkenalkan variabilitas yang cukup ke kedua langkah-langkah untuk mendeteksi
hubungan pada tikus berusia (Bizon et al, 2004; Dupret et al, 2008; Kempermann, 2002;.
Speisman et al, 2012). Gabungan, data ini menunjukkan bahwa melindungi hippocampal
neurogenesis dari pengaruh usia juga dapat melindungi beberapa bentuk kognisi.
Manipulasi eksperimental yang menghasilkan respon neuroimmune dapat merusak
hippocampal neurogenesis dan kognisi. Misalnya, suntikan sistemik atau central bacterial
lipopolysaccharide (LPS) mengaktifkan mikroglia, secara potensial memblokir diferensiasi
neuronal (Ekdahl et al.,2003; Monje et al., 2003), dan mengganggu integrasi neuron muda
teks
$ Watermark
ke sirkuit hippocampal yang ada (Belarbi et al., 2012). Sitokin dirangsang oleh LPS (lihat
Erickson dan Bank, 2011), hanya segelintir penelitian yang telah terbukti mempengaruhi in
vivo dan neurogenesis in vitro (Ben-Hur et al, 2003;. Buckwalter et al, 2006;. Grotendorst
et al 1989; Liu et al, 2009.; Lum et al, 2009.; Monje et al., 2003; Qin et al., 2008; TURRIN
et al., 2001; Vallieres et al., 2002; Villeda et al., 2011). Pada manusia, percobaan LPS
mengganggu memori verbal dan non-verbal (Reichenberg et al., 2001), namun konfirmasi
dampak pada neurogenesis membutuhkan teknologi yang memungkinkan visualisasi
neurogenesis pada otak hidup. Namun sedikit, jika ada, bukti hippocampal neurogenesis
terdeteksi dalam jaringan pasien post-mortem yang memperlihatkan kehilangan memori
yang mendalam setelah terapi iradiasi γ, yang juga merangsang sinyal neuroimmune
(Coras et al, 2010;. Correa et al, 2004. ; Crossen et al, 1994;.. Monje et al, 2007). Efek
buruk dari LPS dan radiasi γ pada hippocampal neurogenesis pada hewan pengerat dapat
teks
$ Watermark
diblokir oleh non-steroid anti-inflamasi drugs (Monje et al, 2003;. Rola et al, 2008;. Tan et
al, 2011.), mengkonfirmasikan peran dari kekebalan tubuh dan / atau sinyal neuroimmune
dalam menangani efek dari perawatan pada neurogenesis ini.
Pada tikus berusia tua, administrasi LPS sistemik atau pusat telah merangsang respon
microglial berlebihan, kadar sitokin dan gangguan memori (Barrientos et al, 2006;.. Chen
et al,2008; Godbout et al., 2005; Xu et al., 2010). Bahkan, transkripsi molekul
neuroimmune diregulasi dikategorikan berdasarkan usia tetapi kebanyakan pada tikus
berusia tua yang menunjukkan terganggunya pelaksanaan pada tugas hippocampus-
dependent (Blalock et al, 2003; Kohman et al, 2011a). Persiapan otak mengungkapkan
bahwa konsentrasi beberapa sitokin yang meningkat pada hewan pengerat berusia tua
juga berhubungan negatif dengan ukuran potensi jangka panjang dan kemampuan spasial
(Felzien et al, 2001;.. Griffin et al, 2006;. Prechel et al, 1996; Ye dan Johnson, 1999).
Pada manusia dewasa dan manusia berusia tua, meningkatkan sirkulasi konsentrasi
kekebalan tubuh sitokin telah dikaitkan dengan gangguan kognitif (Gimeno et al, 2008;.
Krabbe et al, 2009;. Krabbe et al, 2004;. Magaki et al, 2007;. Rachal Pugh et al ., 2001;
Rafnsson et al, 2007;.. Weaver et al, 2002). Dalam penelitian terbaru, Villeda dan rekan
mempersempit daftar 17 sitokin potensial yang sirkulasi (dari 66 pemeriksaan)
Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Speisman et al. halaman 3
yang berkaitan dengan gangguan usia pada neurogenesis dan kognisi. Mereka kemudian
menunjukkan bahwa peningkatan sirkulasi konsentrasi eotaksin saja berkompromi pada
neurogenesis, plastisitas sinaptik dan memori yang bertugas di hippocampus-dependent
(Villeda et al., 2011). Data ini menyoroti bahwa pengujian sistematis yang sirkulasi dan
biomarker sitokin pusat berhubungan dengan neurogenesis dan kognisi yang dapat
mengungkapkan kandidat mekanistik. Yang penting, mencakup hypoactive atau autoimmune
terhadap pikun dan sitokin pemberi isyarat neuroimmune, terutama pada tikus berusia tua
(Conde dan Streit, 2006;. Ziv et al, 2006).
Manusia lanjut usia yang berolahraga secara teratur menunjukkan skor yang lebih baik pada
tes kognitif dan memiliki volume hipokampus yang lebih besar dibandingkan dengan
manusia lanjut usia yang berdiam saja (Christensen dan Mackinnon, 1993; Churchill et al,
teks
$ Watermark
2002;. Colcombe dan Kramer, 2003;. Erickson et al,2010). Tikus muda dan tua yang
berolahraga setiap hari pada setiap langkah-langkah saat menjalankan roda menunjukkan
peningkatan plastisitas yang mencakup neurogenesis dan potensiasi jangka panjang dan
kinerja yang lebih baik pada tugas-tugas hippocampus-dependent (Brown et al, 2003;. Creer
et al .; Kronenberg et al., 2003; Kumar et al, 2012.; Lambert et al., 2005; Lugert et al .;
Madronal et al, 2010.; Steiner et al., 2008; Suh et al., 2007; van Praag et al., 1999; van Praag
et al., 2002; van Praag et al., 2005). Pada tikus muda yang berlari secara sukarela,
peningkatan kadar neurogenesis berhubungan dengan penurunan tingkat IL-1β hippocampal
(Chennaoui et al, 2008;.. Farmer et al,2004; Leasure dan Decker, 2009; Stranahan et al.,
2006), menunjukkan bahwa aktivitas fisik dapat merangsang plastisitas dan meningkatkan
kognisi oleh modulasi neuroimmune jalur sinyal, mungkin melalui pelemahan mikroglia
proliferasi (Kohman et al., 2011b) dan / atau mengubah kekebalan ekspresi gen yang
berkaitan (Kohman et al ., 2011a) seperti yang ditunjukkan pada tikus berusia tua. Oleh
teks
$ Watermark
karena itu, kami menguji efek dari menjalankan roda yang dikondisikan pada gerakan cepat
dan retensi platform tersembunyi pada labirin air, penghambatan akuisisi menghindar dari
retensi, hippocampal neurogenesis dan 24 kekebalan tubuh dan neuroimmune pada penuaan
tikus F344. Kita mengharapkan bahwa pelari yang terkondisi akan menunjukkan
pembelajaran dan memori indeks yang lebih baik dan memiliki tingkat neurogenesis yang
lebih tinggi dari pada tikus kontrol. Kami juga mengharapkan bahwa pelari terkondisi
mungkin telah mengubah tingkat kekebalan tubuh dan / atau neuroimmune sitokin yang
mungkin berhubungan dengan hippocampal integrity dan / atau hippocampal neurogenesis.
2. Metode
2.1. subyek
Semua subjek tikus diperlakukan sesuai dengan University of Florida and federal policies
teks
$ Watermark
mengenai perawatan manusiawi dan penggunaan hewan laboratorium. Setelah tiba, tikus
jantan Fischer 344 (18 bulan; n = 12) yang dibeli dari National Institute of Aging colony at
Harlan Sprague Dawley Laboratories (Indianapolis, IA) yang ditempatkan secara
individual di corn cob bedding-lined berlapis yang bergantung pada kotak sepatu yang
terletak di ruangan yang mendapatkan cahaya 12 jam : 12 jam siklus gelap pada suhu 24 ±
1°C. Tikus-tikus diberi akses ke Harlan Teklad Rodent Diet #8604 dan air ad libitum.
Semua tikus ditimbang mingguan dan diperiksa setiap hari untuk memastikan bahwa
mereka tidak menunjukkan masalah kesehatan yang berkaitan dengan usia (namun tidak
terbatas pada) termasuk poor grooming, pengurangan makanan dan asupan air, sekresi
porfirin berlebihan atau penurunan berat badan.
Satu minggu setelah datang, tikus ditugaskan secara acak atau kelompok kontrol (n = 6 per
kelompok). Tikus kontrol ditempatkan individual di kandang laboratorium standar dengan
akses pada makanan dan air ad libitum selama percobaan - 18 minggu, sementara pelari
mencegah penurunan fungsi perilaku yang ditunjukkan oleh tikus berusia tua pada minggu
percobaan (Cui et al 2009; Holloszy et al, 1985; Kumar et al, 2012.). Karena itu, tikus pelari
ditempatkan individual di ruang yang berisi running wheel (model H10-38R, Coulbourn
Instrumen, Allentown, PA) di mana mereka mendapatkan makanan tanpa batas (Kumar et
al.,2012). A Graphic State Notation computer program (Versi 3.02, Coulbourn Instruments,
Allentown, PA) mencatat rotasi roda dan diprogram untuk memberikan 45 mg makanan
pelet (Harlan Teklad Rodent Diet # 8604) berdasarkan rotasi roda. Frekuensi makanan pelet
45 mg berkurang 1 pelet per rotasi pada awal rotasi, 1 pelet berkurang per 3-4 meter selama
4 minggu. Pada minggu ke-8, semua pelari konsisten berlari ~ 4 km per minggu. Jika tikus
pelari yang telah dikondisikan kehilangan lebih dari 10% dari berat badan berdasarkan pada
pra-kondisi mereka dan perubahan berat badan tikus kontrol, jumlah rotasi roda dibutuhkan
untuk mengurangi pengiriman makanan. Perhatikan bahwa massa tubuh pelari terkondisi
(418,52 ± 5.12 g) yang mirip dengan kontrol (414,26 ± 5,26 g) pada awal percobaan (t (10)
= -0,45; p = 0,66) dan cenderung lebih kecil (357,97 ± 12,79 dan 417,50 ± 33,41 g, masing-
masing) pada akhir percobaan (t (10) = 1.97; p = 0,08). Percobaan disajikan pada Gambar. 1.
teks
$ Watermark
2.2. Latihan labirin air dan pengujian

Setiap tikus dilatih dan diuji dalam sebuah tangki labirin air (diameter 1,7 m) di tempat
remang. tangki diisi dengan air (27 ± 2 ° C) dengan kedalaman 8 cm di bawah bibir tangki.
Sebuah Columbus Instruments tracking system (Columbus, OH) digunakan untuk record
latencies (s), pathlengths (cm), % waktu yang dihabiskan di anulus labirin luar dan platform
crossings (lihat Gambar. 2). Pada awalnya tikus terbiasa dengan kolam renang pada 3
percobaan di mana mereka dilepaskan ke lokasi kolam renang yang berbeda dan
diperbolehkan untuk naik. Tikus dikeringkan dengan handuk dan udara hangat antar blok
sebelum kembali ke kandang rumah mereka.
2.2.1. Visible platform training - pada awal minggu percobaan ke 13, tikus dilatih di 5
blok dari 60 s visible platform trials (selang 15 menit inter-block interval [IBI] dan 20 s
teks
$ Watermark
inter-trial interval [ITI]) yang membutuhkan prosedur dan kemampuan sensorimotor

(Vorhees dan Williams, 2006). Platform(diameter 29 cm) ini ditandai dengan bagian yang
menonjol 1,5 cm dari permukaan air dan kolam yang dikelilingi oleh tirai hitam untuk
menutupi isyarat distal. Lokasi platform dan titik N, S, E dan W diacak. Tikus yang gagal
untuk mencari dan memanjat ke platform yang dialokasikan selama 60 s di pandu ke
platform oleh peneliti. Satu tikus kontrol dihapus dari percobaan setelah gagal menemukan
platform yang terlihat setelah ≥ 2 uji coba selama 2 blok terakhir. Latencies (s) dan
pathlengths (cm) merupakan langkah prosedural dan kemampuan sensorimotor, % waktu
yang dihabiskan di anulus luar yang mengukur ukuran kecemasan dan kecepatan berenang
(cm / s) yang mengukur kemampuan gerak.
2.2.2. Hidden platform training-Tiga hari setelah visible platform trials, tikus dilatih 5 blok
60 s hidden platform trials (15 min IBI dan 20 s ITI) yang membutuhkan kemampuan spasial
teks
$ Watermark
(Vorhees dan Williams, 2006). Pelatihan labirin air yang cepat ini berhubungan dengan usia -
penurunan kognitif dan efek diferensial pengalaman pada kemampuan spasial pada tikus
berusia (Carter et al, 2009;. Foster dan Kumar, 2007; Fosteret al., 2003; Kumar et al, 2012.;
Speisman et al., 2012). Platform tersembunyi 1,5 cm di bawah permukaan air di tengah titik
NE dari labirin air yang dikelilingi oleh distal yang terlihat. Titik N, S, E dan W diacak pada
setiap percobaan. Tikus yang gagal untuk mencari dan naik ke platform selama 60 detik
dipandu ke platform oleh peneliti sebelum dikeluarkan dari labirin. Latencies (s) dan
pathlengths (cm) sebagai ukuran kemampuan spasial, % waktu yang dihabiskan di anulus luar
sebagai ukuran kecemasan dan kecepatan berenang (cm / s) sebagai ukuran kemampuan
gerak.
2.2.3. Immediate and delayed probe trials - Platform yang terlepas telah dihapus dari
labirin air dalam uji penyelidikan diberikan waktu sesegera mungkin atau 24 jam setelah
latihan hidden platform trials terakhir untuk menguji kekuatan pembelajaran dan memori,
masing-masing, untuk platform lokasi. Pada kedua uji coba, tikus dilepaskan dari kuadran

berlawanan ke kuadran tujuan selama 60s berenang bebas. Sebuah hidden platform trial
tersembunyi diberikan setelah pemeriksaan pertama untuk memperkuat hubungan antar
platform dan keluar dari kolam. Waktu (s) yang dihabiskan pada masing-masing kuadran,
platform yang berlokasi pada penyeberangan dan skor discrimination index (DI) [(t(G)-
t(O))/(t(G)+t(O)), di mana t(O) adalah waktu yang dihabiskan pada kuadran yang
berlawanan dan t(G) adalah waktu yang dihabiskan pada kuadran tujuan sebagai ukuran
kekuatan pembelajaran dan memori pada probe trials. Skor DI memperhitungkan kuadran
yang akan didekati ("kuadran tujuan" [G]) dan kuadran yang harus dihindari ("kuadran
berlawanan" [O]), dan sering menghasilkan indeks memori yang lebih tinggi pada tikus
berusia tua yang sering membuat tikungan menyapu lebar saat dinavigasi dengan berenang.
teks
$ Watermark
2.3. Inhibitory avoidance training and testing

Pada minggu ke-14, tikus dilatih dan diuji dalam sebuah alat inhibitory avoidance
(Coulbourn Instrumen, Allentown, PA) yang terdiri dari ruang gelap dan terang dengan
lantai logam kotak shockable yang dipisahkan oleh sebuah pintu geser. Selama akuisisi,
tikus ditempatkan di kompartemen yang diberi cahaya selama 90s sebelum pintu geser
dibuka untuk memasuki kompartemen gelap yang dicatat. Setelah masuk ke kompartemen
gelap, pintu ditutup dan diberikan aliran listrik pada kaki (0,21 mA selama 3 s) yang
diberikan 10 s kemudian. Respon perilaku binatang (yaitu lompatan atau gerakan cepat)
menegaskan bahwa mereka telah mengalami shock. Tikus itu kemudian kembali ke kandang
sebelum dikembalikan ke ruangan yang dinyalakan selama 90 s pada 1 dan 24 jam
kemudian, dan waktu yang dibutuhkan untuk masuk ke sisi gelap setelah pintu terbuka
tercatat sebagai ukuran memori. Retensi latencies yang ditetapkan pada 900s karena tikus
teks
$ Watermark
tidak memasuki kompartemen gelap dalam 15 menit. Pintu dibuka, pengiriman shock dan
akuisisi data komputer dikendalikan.
2.4. Bromodeoxyuridine Injections

Kami menunggu 16 minggu setelah onset percobaan dan 3 minggu setelah pembelajaran
spasial sebelum diberikan label membagi NPC dengan sintesis DNA marker
bromodeoxyuridine (BrdU; Sigma Aldrich, St. Louis, MO) untuk mengukur efek dari latihan
sehari-hari jangka panjang pada neurogenesis dan meminimalkan efek dari perilaku spasial
pada neurogenesis (Gould et al.,1999a, Epp et al., 2010). Proliferasi NPC tidak berpengaruh
ketika diberikan BrdU pada akhir pembelajaran hippocampus-dependent (Gould et al.,
1999a) dan efek laten perilaku hippocampus tergantung pada neuron baru yang diproduksi
selama 3 minggu. Tikus yang di suntik intraperitoneal sekali sehari selama 5 hari mulai dari
teks
$ Watermark
minggu ke-16 setelah onset percobaan untuk membagi label sel. BrdU dilarutkan dalam
larutan NaCl 0,9% pada konsentrasi 20 mg / ml (w / v) sesaat sebelum digunakan pada
volume 2,5 ml / kg (50 mg/kg/injeksi). Dosis ini di beri label BrdU membagi hippocampal
NPC aman dan efektif pada tikus dewasa (Cameron dan McKay, 2001; Kolb et al, 1999).
2.5. Histologi
Pada akhir minggu ke-18 (21 hari setelah injeksi BrdU pertama), tikus dianestesi dengan
ketamin (90 mg/kg)/xylazine (10 mg/kg) koktail (Webster Veterinary Supply, Sterling,
MA). Darah dikumpulkan dari ventrikel kiri jantung dengan cepat sebelum tikus dipenggal
dan otak mereka diekstraksi. Ventral hippocampi dan frontal cortices dengan cepat dibedah
dari otak kiri, dibekukan dan disimpan pada suhu -86 ° C sampai protein untuk sitokin
cukup. Meskipun sitokin sentral pada tikus ini unperfused bisa mencerminkan tingkat
sirkulasi diffusible cytokines kita tidak mendeteksi immune-to-brain cytokine clusters atau
konsentrasi sitokin individu yang dipengaruhi oleh lari secara bersamaan dalam darah dan
otak yang akan memvalidasi hipotesis ini. Massa hippocampal serupa (t(10)=1.00; p=0,34)
dan cortical (t (10)=-0,01; p=1.00) jaringan dikumpulkan dari kontrol (masing-masing
79,70±11,30 dan 246,40±21,95 mg) dan kondisi pelari (masing-masing 65,90±8,05 dan
246,60±15,69 mg). Serum supernatant dikumpulkan dari sampel darah setelah
didinginkan selama 24 jam pada suhu 4°C dan disentrifugasi pada 1.000 × g selama 10 menit
pada RT dan kemudian disimpan pada suhu -86°C sampai sitokin kuantifikasi. Belahan kanan
otak setelah semalaman dipersiapkan dengan paraformaldehyde 4% (Electron Microscopy
Sciences; Hatfield, PA) dan kemudian diseimbangkan dalam sukrosa 30% (~4 hari) pada
suhu 4°C, sebelum koronal dipotong melalui dentate gyrus, dimulai antara ~-1,72 dan -1,92
mm posterior bregma menurut Paxinos dan Watson (82) pada 40 pM interval pembekuan
pada mikrotom beku (Model 860; American Optical Corporation; IMEB Inc, San Marcos,
CA). Enam set setiap bagian keenam dikumpulkan melalui sisi kiri dentate gyrus disimpan
pada -20°C dalam larutan krioprotektan dari 30% etilena glikol, 25% gliserin dan 45% 0,1M
natrium fosfat penyangga sampai diproses secara imunohistokimia untuk mengukur
neurogenesis .
teks
$ Watermark
2.6. Protein dari jaringan otak

Hippocampi dan cortical frontal yang dicairkan pada suhu 4°C di 0,1 M tris-buffered saline
(TBS) mengandung 0,1% Igepal dan 1 µl/ml masing-masing 2 protease inhibitor cocktails
ditambahkan sesaat sebelum digunakan. Pertama protease inhibitor cocktails yang berisi
0,5 M phenylmethylsulfonyl fluoride, 5 mg pepstatin A dan 1 mg chymostatin/ml DMSO dan
yang kedua berisi 1 M G-aminocapfroic, 1 M P-aminobenzidine, 1 mg leupeptin dan 1 mg
aprotinin/ml sterile water. Jaringan ditumbuk manual disonifikasi menggunakan
dismembrator (ThermoFisher Ilmiah; Pittsburgh, PA). Jaringan supernatan dikumpulkan
dengan sentrifugasi (12.000 rpm selama 10 menit pada suhu 4°C) dan konsentrasi
proteinnya diukur menggunakan assay protein Bradford dan Bio-Rad SmartSpec Ditambah
Spectrophotometer (Hercules, CA). Konsentrasi protein total yang setara diambil dari
hippocampi (t (10) = -1,28; p =0,23) dan cortical (t (10) = -0,07; p = 0.94) kontrol ( masing-
teks
$ Watermark
masing 0,93±0,19 dan 1,05 ± 0,06 mg/mL) dan kondisi pelari (masing-masing 1,20±0,09
dan 1,06±0,09mg/mL). Sampel protein disimpan pada -86°C sampai konsentrasi sitokin
yang diukur cukup menggunakan Bio-Plex technology.
2.7. Imunohistokimia
Bagian hippocampal yang diberi imunohistokimia untuk mengukur dan fenotip sel baru
(BrdU +) menggunakan metode yang dijelaskan sebelumnya (Ormerod et al, 2003; Palmer et
al, 2000; Speisman et al., 2012).
2.7.1. Enzym substrate immunostaining-Sebelum pengolahan dan diantara langkah-langkah,

free-floating hippocampal sections dicuci berulang kali di tris-buffered saline (TBS; pH 7.4).
Bagian diinkubasi di 0,3% 𝐻2 𝑂2 di TBS selama 10 menit pada RT untuk endogenous
teks
$ Watermark
peroxidase, dicuci di NaCl 0,9% dan kemudian diinkubasi di 2 N HCl selama 20 menit pada
suhu 37°C untuk denaturasi DNA. Bagian itu kemudian diblokir dalam larutan 3% normal
donkey serum (NDS) dan 0,1% triton-x di TBS (v / v) selama 20 menit dan kemudian
diinkubasi semalaman pada tikus anti-BrdU (1: 500; Abd Serotec, Raleigh, NC) pada suhu
4°C. Keesokan harinya, bagian diinkubasi dalam biotinylated donkey anti-rat IgG (Jackson
ImmunoResearch, West Grove, PA; 1: 500) selama 4 jam dan kemudian avidin-biotin
horseradish peroksidase (PK-6100: Vector Laboratories, Burlingame, CA) selama 2 jam pada
RT. Horseradish peroxidase complex ditimbulkan dengan reaksi 0,02% 3,3'-diaminobenzidin
tetrahydrochloride (DAB; Sigma Aldrich, St. Louis, MO) dan 0,5% 𝐻2 𝑂2 di TBS. Bagian ini
ditaruh di kaca, dikeringkan semalaman dan dehidrasi di alkohol sebelum ditutup-slipped
under permount (Thermo Fisher Scientific, Pittsburgh, PA).
2.7.2. Fluorescent immunostaining -- Bagian dicuci berulang kali pada langkah-langkah

di TBS (pH 7,4). Bagian diblokir dalam larutan NDS dan kemudian diinkubasi semalaman
pada suhu 4°C di antibodi primer pada protein neuronal neuron nuclei (tikus anti-Neun,
1:500; Chemicon, Temecula, CA) dan immature neuronal protein doublecortin (goat anti-
DCX, 1:500; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) atau oligodendrocyte precursor

marker chondroitin sulfate proteoglycan (rabbit anti-NG2, 1:500; Chemicon, Temecula,

CA) dan astrocyte/neural stem cell protein glial fibrillary acidic protein (chicken anti-
GFAP, EnCor Biotech, Alachua, FL). Hari berikutnya diinkubasi dengan maksimal-
adsorbed fluoroscien isothiocyanate (FITC)–conjugated anti-mouse and cyanine (Cy) 5-
conjugated anti-goat secondary antibodies sekunder untuk menunjukkan neuron atau FITC-
conjugated anti-rabbit dan Cy5-conjugated anti-chicken secondary antibodies sekunder
untuk menunjukkan glia selama 4 jam pada RT (semua sekunder diencerkan pada 1: 500;
Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Bagian kemudian 4% paraformaldehyde,
dibilas di NaCl 0,9%, diinkubasi di 2N HCl dan kemudian diinkubasi pada rat anti-BrdU
(1:500; Abd Serotec, Raleigh, NC) semalaman pada suhu 4°C diikuti dengan Cy3-
conjugated anti-rat sekunder selama 4 jam pada RT. Akhirnya, nuclei dilabel dengan
teks
$ Watermark
inkubasi di 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI;1:10.000; Calbiochem, San Diego, CA)

selama 10 menit. Bagian dipasang di kaca di bawah anti-fading agent PVA-DABCO (2,5%
diazobicyclooctane, 10% polyvinyl alcohol dan 20% glycerol di TBS; Sigma Aldrich).
2.8. Cell quantification

2.8.1. Jumlah nomor-sel baru – Jumlah total sel baru (BrdU +) diperkirakan pada satu
seri 1-in-6 dari bagian sistematis seragam (spasi 240 m terpisah) diambil melalui batas
rostral-caudal dari dentate gyrus di belahan otak kiri masing-masing tikus menggunakan
stereological principles (Boyce et al, 2010;. Cameron dan McKay, 1999;. Kempermann et
al, 2002; Ormerod et al., 2003; Barat et al., 1991). Kami memilih secara acak yang mana
dari 6 set yang dikumpulkan dari bagian untuk memproses imunohistokimia untuk
memastikan bahwa bagian pertama di setiap set tikus secara acak 1 – 6 bagian diambil dari
teks
$ Watermark
dentate gyrus. sel-sel baru diproduksi di zona subgranular hippocampal (SGZ) mungkin
bermigrasi lebih dalam lapisan sel granul (GCL) selama masa hidup 16-21 d dipekerjakan.
Oleh karena itu kami menghitung bulat atau BrdU oval + sel (diungkapkan oleh DAB
pewarnaan) baik di SGZ dan GCL pada setiap bagian yang diambil melalui batas rostral-
ekor dari dentate gyrus di belahan otak kiri masing-masing tikus berusia tua (~ 12 bagian per
tikus) menggunakan sebuah Zeiss Axio Observer Z1 mikroskop terbalik dengan pembesaran
40 x. Karena sel-sel baru sering terletak tidak teratur melalui SGZ dan GCL, kami
menghitung sel BrdU+ setiap seri sistematis per tikus. Mean (± SEM) jumlah 131±12 dan
191±12 sel BrdU+ dalam dentate gyrus kelompok kontrol dan kelompok pelari, masing-
masing, dianggap sebagai jumlah yang memadai untuk memastikan ketepatan antara
perkiraan stereological dari total (Boyce et al., 2010).
Jumlah sel BrdU+dihitung dalam dentate gyrus dari masing-masing tikus dikalikan 6 (bagian
teks
$ Watermark
interval dalam setiap set) dan 2 (untuk memperhitungkan bagian lain dari otak) untuk
menghasilkan estimasi stereological dari jumlah total sel baru yang masih hidup di dentate
gyrus (Kempermann et al, 2002; Barat et al., 1991). Karena usia dan olahraga dapat
mempengaruhi volume vaskular (Fabel et al, 2003;. Hattiangady dan Shetty, 2008), daerah
SGZ dan GCL (mm2) yang sel-sel baru dihitung menggunakan software AxioVision 20X
(Carl Zeiss, Thornwood , NY) dan kemudian volume GCL diperoleh dengan menggunakan
prinsip Cavalieri untuk menghitung volume kerucut terpotong (Galea et al, 2000; Uylings et
al, 1986):.. volume = Σ (bagian) * ⅓I (h1 + √h1 * √ h2 + h2), di mana I adalah jarak antar
bagian (240 m) dan h1 dan h2 adalah dua daerah antar bagian yang volumenya dihitung.
Kami juga menegaskan bahwa kepadatan sel baru tercermin dari total perkiraan sel baru
karena potensi perubahan volume vaskular dan karena kita menghitung neurogenesis hanya
pada ½ dari hippocampus.
2.8.2. New cell phenotypes-Setidaknya 100 sel BrdU+ pada bagian quadruple fluorescen
mereka ditandai dengan x, y dan z-menggunakan Zeiss LSM 710 fully spectral laser
scanning confocal microscope equipped with 405 (digunakan untuk merangsang DAPI),

488 (digunakan untuk merangsang FITC), 510, 543 (digunakan untuk merangsang Cy3) dan
633 (digunakan untuk merangsang Cy5) diamati di perbesaran 40 x objek (dengan 2.3x
digital zoom) untuk mengukur proporsi yang menyatakan protein neuron atau glial. Sel
BrdU+ yang dianggap mengekspresikan protein neuronal atau glial "Z-dimension" yang
mengungkapkan bahwa nucleus BrdU / DAPI+ jelas dinyatakan oleh protein neuronal DCX
dan/atau NeuN, yang oligodendrocyte precursor protein NG2 atau astrocyte protein GFAP.
Jumlah sel BrdU+ dikalikan dengan % BrdU+ yang mengekspresikan setiap fenotipe sel
untuk menentukan jumlah neuron baru dan glia yang diproduksi di otak tua dan jumlah ini
terkait dengan water maze probe trial performance.
2.9. Multiplex quantification of cytokines

teks
$ Watermark
Konsentrasi sitokin imun dalam serum darah dan konsentrasi sitokin neuroimmune di
hippocampal dan sampel protein kortikal yang dihitung menggunakan Bio-Rad Bio-Plex
2000 Suspension sistem Array dan Merck Millipore Rat sitokin / kemokin kit (# RCYTO-
80K-PMX; Billerica, MA) sesuai dengan petunjuk kit. Kit ini sekaligus mendeteksi
konsentrasi berikut dari 24 analit secara bersamaan dalam satu sampel: IL-1α (6.23-20,000
pg / mL), IL-1β (2.32-20,000 pg / mL), IL-2 (3.67-20,000 pg / mL ), IL-4 (2.30-20,000 pg /
mL), IL-5 (2.89-20,000 pg / mL), IL-6 (9.80-20,000 pg / mL), IL-9 (12.85-20,000 pg / mL),
IL-10 (5.41-20,000 pg / mL), IL-12 (4.13-20,000 pg / mL), IL-13 (23.2-20,000 pg / mL), IL-
17 (1.61-20,000 pg / mL), IL-18 (4.78-20,000 pg / mL), eotaksin (3.27-20,000 pg / mL), G-
CSF (1.31-20,000 pg / mL), GM-CSF (13.11- 20.000 pg / mL), IP-10 (3.78-20,000 pg /
mL), leptin (21.50-100,000 pg / mL), GRO / KC (2.06-20,000 pg / mL), IFN- γ (4.88-20,000
pg / mL ), MCP-1 (3.81-20,000 pg / mL), TNF-α (4.44-20,000 pg / mL), MIP-1α(1.94-
20,000 pg / mL), RANTES (54.42-20,000 pg / mL), VEGF (4.93-20,000 pg /mL).
teks
$ Watermark
Semua standar, kontrol dan sampel di siapkan di atas es dan serum dan jaringan sampel
ditaruh piring terpisah. Tujuh standar (dengan konsentrasi yang diharapkan dari 20.000,
5.000, 1.250, 312,5, 78,13, 19,53 dan 4,88 pg / mL masing-masing analit kecuali leptin yang
diharapkan konsentrasi 100.000, 25.000, 12.500, 6250, 1562,5, 390,63 dan 24,41 pg / mL)
dengan pengenceran serial dengan kit assay buffer. Sampel serum diencerkan 1: 5 kit assay
buffer sementara sampel supernatan jaringan disimpan dan 25 volume µl setiap standar,
kosong, vendor-supplied diketahui mengontrol dan sampel yang di duplikat menjadi 96- well
filter plate (EMD Millipore; Billerica, MA). Kit serum matrix (25 µl) ditambahkan ke setiap
standar, kontrol dan sampel dalam piring serum kuantifikasi sementara dengan kit assay
buffer (25 µl) ditambahkan ke setiap standar, kontrol dan sampel pada piring sampel
jaringan hingga volume akhir 50 µl l. Sekitar 100 polystyrene beads masing-masing
teks
$ Watermark
diberikan 24 warna yang berbeda dan diinkubasi selama 18 jam pada shaker pada suhu 4°C.
Setiap antibodi primer terhadap suatu analit akan diabsorbsi pada 1 dari 24 set warna unik
addressed beads. Setelah beberapa kali mencuci di kit wash buffer di vakum filtrasi, beads
diinkubasi di antibodi biotinylated secondary selama 2 jam pada RT dan kemudian setelah
beberapa kali mencuci kit wash buffer di vakum filtrasi, di streptavidin-phycoerythrin
selama 30 menit pada RT sebelum disuspensi ke dalam sheath fluid (Bio-Rad, Hercules,
CA). Analit diidentifikasi dengan warna dan konsentrasi warna analit diukur dengan
phycoerythrin emission intensity menggunakan dual laser Bio-Rad BioPlex 2000 system
with Luminex xMAP technology (Bio-Rad, Hercules, CA). Data dikumpulkan menggunakan
BioPlex Manajer Software versi 4.1.
Sebuah kurva standar untuk setiap analit yang didapatkan dengan menggunakan model
logistik regresi non-linear lima parameter pada duplikat diamati pada konsentrasi standar.
Konsentrasi standar tunggal yang bekerja pada kasus yang duplicate % coefficient of
variation (CV) adalah > 10% dan % recovery (konsentrasi yang diamati/diharapkan) di
luar diterima kisaran 70-130%. Setelah konsentrasi kontrol positif dikonfirmasi pada
rentang yang diharapkan, konsentrasi sampel dibandingkan dengan kurva standar.

Sebelum analisis statistik, konsentrasi sampel duplikat dengan % CV < 10 yang seimbang.
Jika % CV untuk satu set duplikat adalah > 10% dan konsentrasi jatuh ± 2 standar deviasi dari
kelompok berarti konsentrasi terkecil dibuang. Kami membuang titik data yang terkecil satu
tikus pelari di analisis serum leptin dan titik data terluar dari tikus pelari berbeda dari analisis
serum MCP-1. Konsentrasi sitokin di bawah ambang batas yang terdeteksi diatur ke 0 dan
konsentrasi yang melebihi maksimum yang merupakan konsentrasi yang diharapkan
ditetapkan 20.000 pg / ml (atau 100.000 pg / ml untuk leptin). Data dinyatakan di serum
pg/mL atau pg/mg hippocampal atau jaringan kortikal.
2.10. Cytokine cluster analysis

Pathway or ‘Cluster’ analyses dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya (Baron dan
teks
$ Watermark
Kenny, 1986; Erickson dan Bank, 2011) untuk mengidentifikasi kelompok sitokin dengan
konsentrasi yang dapat berubah secara terkoordinasi (yaitu dalam kelompok) dan karena itu
diketahui perwakilan atau jalur sinyal baru. Pertama, analisis klaster dilakukan pada
konsentrasi sitokin yang terdeteksi dalam darah, hipokampus dan kompartemen kortikal
secara independen untuk konfirmasi kedua dan memperluas immune dan neuroimmune
cluster sinyal sitokin pada tikus berusia tua. Kedua, analisis klaster dilakukan pada
konsentrasi sitokin antara darah dan kompartemen kortikal dan antara darah dan
kompartemen hippocampal untuk mengkonfirmasi dan berpotensi mengungkapkan immune-
to-brain signaling pathways pada tikus berusia tua. Ketiga, kami menganalisis konsentrasi
sitokin antara kompartemen kortikal dan hippocampal apakah berlari memodulasi
neuroimmune cytokines secara lokal atau regional. Bonferroni-corrected alpha levels
ditetapkan untuk setiap analisis berdasarkan jumlah analit melebihi ambang deteksi.
teks
$ Watermark
Pasangan sitokin dengan konsentrasi dianggap statistik terkait dengan Spearman rank
correlation coefficients (r- values) setelah Bonferroni corrections dan diplot dalam urutan
yang terhubung dengan garis yang solid. Jika salah satu pasangan sitokin yang akan diplot
sudah diplot dalam sebuah cluster, maka titik keputusan tercapai dan kami memodifikasi
dengan prosedur yang sudah dilaporkan sebelumnya (Baron dan Kenny, 1986; Erickson dan
Bank, 2011). Sitokin unplotted ditambahkan ke cluster jika berhubungan secara signifikan
dengan semua sitokin yang sudah di cluster. Jika sitokin unplotted tidak statistik terkait
dengan salah satu atau lebih dari sitokin sudah berkerumun, maka pasangan sitokin akan
diplot sebagai cluster baru. Jika sepasang sitokin yang akan diplot sudah terhubung melalui
mediator potensial di cluster yang sudah diplot, maka sisa r-value minus dari r-value
pasangan yang di-plot antar sitokin yang akan di-plot dibandingkan terhadap Bonferroni
corrected p-value. Jika sisa r-value dari pasangan sitokin akan diplot tetap signifikan secara
statistik, sitokin yang terhubung dalam cluster yang ada pada garis putus-putus (tidak ada
teks
$ Watermark
mediator yang terdeteksi di penelitian saat ini).
2.11. Statistical Analyses

Semua analisa statistik menggunakan software STATISTICA (Versi 10; StatSoft, Tulsa,
OK) dan semua data direpresentasikan dalam angka sebagai kelompok rata-rata (± SEM). T-
tes digunakan untuk menguji pengaruh variabel independen (berlari) dari tindakan kesehatan
umum (berat tubuh, kecepatan berenang), kekuatan pembelajaran spasial dan memori (probe
trial discrimination index scores, number of platform crossings), neurogenesis (jumlah sel
baru, jumlah total neuron baru, jumlah total glia baru) dan konsentrasi sitokin (untuk
masing-masing 24 analit). Non-parametrik Mann Whitney U test digunakan untuk menguji
efek dari variabel independen (berlari) di persentase kategori sel BrdU+ mengekspresikan
fenotipe neuron atau glia dan menghambat akuisisi penghindaran dan retention latencies

yang ditetapkan 900 s untuk hewan yang tidak masuk sisi shock-dipasangkan chamber pada
akhir sesi. Repeated measures analyses of variance (ANOVA) menguji efek dari variabel
independen (berlari) dari ketergantungan yang dikumpulkan berulang kali, seperti akuisisi
spasial dan non-spasial lokasi platform (latencies dan path lengths). Newman Keuls post-hoc
tests digunakan untuk mengungkapkan perbedaan yang signifikan. Spearman rank
berhubungan dengan tes lari untuk menguji hubungan antara konsentrasi analit sitokin
termodulasi, behavioral measures dan measures of neurogenesis karena beberapa
konsentrasi analit berada di bawah ambang batas deteksi. α-level ditetapkan pada 0,05.
3. Hasil
3.1. Tikus usia tua yang berlari setiap hari mencari platform sama halnya dengan kontrol tetapi
teks
$ Watermark
berenang lebih cepat

Sejak path lengths berhubungan positif dengan latencies terlihat (semua r value ≥ 0,69;
semua p value <0,05) dan hidden (semua r value ≥ 0,85; semua p value <0,01) uji platform,
kami melaporkan analisis di path lengths untuk menghindari redundansi. Gambar 2A
menunjukkan path lengths di platform latihan yang terlihat. ANOVA menjelajahi efek
berlari yang terkondisi dan path lengths di platform yang terlihat menunjukkan tikus pelari
dan kontrol jarak berenang sama dengan platform yang terlihat (F(1,9) = 1,38; p = 0,27) di
blok latihan (F (4 , 36) = 1,56; p = 0,20 dan pengaruh interaksi: F (4,36) = 0,26; p = 0,90).
Karena kurva platform yang terlihat dapat relatif dangkal pada tikus berusia tua (lihat
Kumar et al, 2012; Speisman et al, 2012), perbandingan digunakan untuk mengkonfirmasi
tikus kontrol dan tikus pelari yang berenang lebih pendek dari path lengths 5th relative to
the 1st block (p values masing-masing <0,05,). Data ini menunjukkan bahwa tikus pelari
teks
$ Watermark
dan tikus kontrol sama dalam mencari dan berlari ke platform labirin air yang terlihat.
Pada % waktu yang dihabiskan berenang di anulus luar kolam antara tikus kontrol dan tikus
pelari dihitung ukuran kecemasan (Gambar. 2B). ANOVA menunjukkan dampak yang
signifikan dari blok latihan (F(4,36) = 5,32; p <0,01) tetapi tidak pada tikus pelari (F(1,9) = 0,67;
p = 0,44 dan pengaruh interaksi: F(4,36) = 1,59; p = 0,20) pada ukuran ini. Secara khusus,
semua tikus menghabiskan waktu kurang signifikan di anulus luar saat latihan dimulai (blok
1, 2> 3, 5 dan blok 2> 4; semua p value <0,05), menunjukkan bahwa tingkat kecemasan
menurun pada tikus berusia tua dengan latihan, terlepas dari riwayat olahraga.
Kecepatan berenang ditunjukkan di blok oleh tikus kontrol dan tikus pelari dicatat sebagai
ukuran kemampuan alat gerak (Gbr. 2C). Meskipun ANOVA mengungkapkan efek yang
signifikan secara statistik blok pelatihan (F (4,36) = 5,55; p <0,01) dan kecenderungan untuk
teks
$ Watermark
mengkondisikan berlari mempengaruhi kecepatan berenang (F (1,9) = 3,84; p = 0,08), efek ini
tidak signifikan secara interaksi statistik (F (4,36) = 0,37; p = 0,83). Meskipun tikus pelari
dikondisikan cenderung untuk berenang lebih cepat dari kontrol pada semua blok, semua
tikus berusia berenang lebih cepat saat latihan (blok 1> 3, 4 dan 5 dan blok 2> 5; semua p
value <0,05). Data ini menunjukkan bahwa latihan sehari-hari dapat mempotensiasi
kemampuan berenang yang meningkat atau mengurangi floating tendencies yang
ditunjukkan oleh tikus berusia tua di blok platform latihan yang terlihat. Konsisten dengan
temuan kami sebelumnya (59) dan gagasan bahwa induksi lari lebih bugar daripada
kekurangan makanan terkait dengan pengiriman operan dari makanan untuk kecepatan
berenang, berat tubuh pelari dibuat mirip dengan tikus kontrol pada awal eksperimen dan
cenderung sedikit menurun pada akhir percobaan (lihat Bagian 2.1 untuk berat tubuh).

3.2. Latihan sehari-hari meningkatkan kemampuan spasial pada tikus berusia tua
Kami membandingkan pathlengths platform tersembunyi di blok latihan sebagai ukuran
kemampuan spasial (Gambar. 3A). ANOVA mengungkapkan bahwa pathlengths secara
signifikan berpengaruh terhadap kondisi pelari (F (1,9) = 20,89; p <0,01), blok latihan (F
(4,36) = 6,55; p <0,01) dan interaksi antara tikus pelari dan blok latihan (F (4,36) = 4.05; p
<0,01). Semua tikus berenang langsung ke hidden platform sejak latihan dimulai (blok 1, 2>
3,4 dan 5, nilai p <0,05), namun tikus pelari berenang langsung di semua blok gabungan
daripada kontrol (p <0,01). Tikus pelari dengan pathlengths lebih pendek dari kontrol pada
blok latihan 1, 4 dan 5 (nilai p <0,05), menunjukkan bahwa mereka memecahkan tugas
spasial lebih mahir dari kontrol. Namun, penampilan mereka lebih baik dari hidden platform
yang menunjukkan bahwa tikus pelari belajar lebih baik, ingat dan/atau menerapkan
teks
$ Watermark
informasi prosedural yang didapat selama visible platform pertama (Gerlai, 2001; Ormerod
dan Beninger, 2002). Oleh karena itu, kami menegaskan bahwa tikus pelari (-130,22 ± 37,53
cm / blok) ditunjukkan pada pathlength lebih curam daripada control (-5,36 ± 35,65 cm /
blok) di blok 2-5 across hidden training (garis putus-putus berwarna abu-abu pada Gambar
3A;. T (10) = 2.29; p <0,05).
Kami menghitung % waktu yang dihabiskan di anulus luar labirin pada hidden platform
trials oleh tikus pelari dan kontrol untuk menentukan apakah kecemasan berbeda-beda yang
dipengaruhi oleh latihan sebelumnya (Gambar 3B). ANOVA menunjukkan efek signifikan
tikus pelari (F (1,9) = 6.45; p <0,05) dan blok latihan (F (4,36) = 3,98; p <0,01) tetapi tidak ada
pengaruh interaksi (F (4,36) = 1,62; p = 0,19). Secara khusus, semua tikus menghabiskan
sedikit waktu di anulus luar sebagai progress latihan (blok 1, 2> 5, nilai p <0,05), namun
tikus pelari menghabiskan waktu kurang dari kontrol pada semua gabungan blok. Data ini
teks
$ Watermark
menunjukkan meskipun kecemasan berkurang dengan pelatihan pada semua tikus berusia
tua, latihan sebelumnya bisa mempotensiasi efek ini pada tikus yang berolahraga setiap hari.
Kami menghitung kecepatan berenang di hidden platform training blocks sebagai ukuran
kemampuan gerak tikus usia tua yang berlari AC dan kontrol (Gambar. 3C). Kecepatan
berenang secara signifikan dipengaruhi oleh kondisi pelari (F(1,9) = 13,07; p <0,01), blok
latihan (F(4,36) = 6.27; p < 0,01), dan interaksi antara tikus pelari dan blok latihan (F(4,36) =
3,87; p <0,01). Tikus pelari secara signifikan berenang lebih cepat ke hidden platform dari
kontrol pada semua gabungan blok (p <0,01) dan kecepatan berenang diatur pada platform
uji coba yang kemudian terlihat di semua visible platform trials (lihat di atas). Semua tikus,
kecepatan berenang menurun setelah blok pertama (semua p value <0,01), namun efek ini
sementara karena tikus pelari mempertahankan kecepatan mereka di blok, tikus kontrol
berenang secara signifikan lebih lambat setelah blok latihan pertama (blok 1> 2, 3, 4 dan 5;
semua p value <0,01) Data ini mendukung gagasan bahwa latihan sehari-hari dapat
teks
$ Watermark
meningkatkan efek latihan labirin air pada kemampuan berenang tikus usia tua, berpotensi
dengan meningkatkan stamina mereka.
3.3. Tikus berusia tua yang berolahraga menunjukkan memori yang lebih baik untuk platform
location on probe trials
60 s percobaan penyelidikan dilakukan segera setelah akhir hidden platform trial (Gbr. 4).
ANOVA menunjukkan bahwa semua tikus dikombinasikan diperlihatkan preferensi yang
signifikan kuadran (F (3,27) = 24,99; p <0,0001) dan preferensi kuadran signifikan
berinteraksi dengan kelompok (F (3,27) = 7,54; p <0,001) pada probe segera. Secara
signifikan, tikus pelari menghabiskan lebih banyak waktu di kuadran tujuan (p = 0,0003;.
Gambar 4A) dan waktu berkurang di kuadran yang berlawanan (p = 0,045), tetapi jumlah
waktu yang sama pada kuadran kiri (p = 0,32) dan kuadran kanan (p = 0,96) relatif terhadap
kontrol. Demikian pula, tikus pelari menunjukkan skor DI lebih signifikan daripada tikus
kontrol (t (9) = 4.17, p <0,01;. Gambar 4B) dan cenderung untuk menyeberang lokasi yang
pada platform latihan secara signifikan lebih sering (4.33 ± 0.71 menyeberangi)
dibandingkan kontrol (2,60 ± 0.51 penyeberangan) melakukan (t (9) = 1,90; p = 0,09).

Satu refresher block di hidden platform trials diberi setelah penelitian untuk meminimalkan
kemungkinan hubungan antar lokasi platform dan kabur dari kolam renang itu. T-test
dipasangkan pada blok 5 dan 6 hidden platform trials menegaskan bahwa tikus memiliki
path lengths sama panjang sebelum dan setelah penelitian (t (10) = 0,29, p = 0,78; 3A lihat
Gambar).
Percobaan penelitian kedua dilakukan 24 jam setelah blok 5 hidden platform trials. ANOVA
menunjukkan bahwa semua tikus dikombinasikan preferensi pada kuadran signifikan (F (3,27)
= 3,56; p= 0,027) dan preferensi interaksi kelompok (F (3,27) = 5.16; p = 0,006) pada 24 h
penelitian percobaan (Gambar. 4A). Secara khusus, tikus pelari secara signifikan
menghabiskan lebih banyak waktu di tujuan (p = 0,026), cenderung menghabiskan lebih
sedikit waktu di kuadran berlawanan (p = 0,052) dan menghabiskan jumlah waktu yang
teks
$ Watermark
sama di sebelah kiri (p = 0,416) dan kanan (p = 0,498) dibandingkan dengan kontrol.
Demikian pula, tikus pelari memiliki skor DI secara signifikan lebih baik daripada kontrol (t
(9) = 4,39; p <0,01; Gambar 4B) dan melintasi hidden platform trials pada penelitian secara
signifikan lebih sering daripada kontrol (5.17 ± 0.40 vs 1.20 ± 0.20 masing-masing
penyeberangan; t (9) = 8.28, p <0,01). Data ini menunjukkan bahwa tikus pelari belajar dan
ingat lokasi hidden platform trials lebih baik dari kontrol.
Akhirnya, analisis regresi jarak untuk keluar dari kolam renang di blok 5 dari latihan
dibandingkan dengan jarak untuk keluar dari blok 5 dari serta nilai indeks diskriminasi yang
diperoleh dari penelitian. Tidak ada hubungan yang menunjukkan bahwa diskriminasi
spasial tidak terkait dengan kinerja diskriminasi isyarat.
3.4 Inhibitory avoidance scores

Satu minggu setelah latihan visible platform water maze training, tikus dilatih dan diuji
teks
$ Watermark
dalam menghindari tugas penghambatan (Gambar. 4C). Tes Mann-Whitney U menegaskan

bahwa tikus pelari dan kontrol memasuki bagian gelap shock-yang di pasang di ruang
avoidance chamber sama-sama cepat selama tugas akuisisi (U = 0,01; Z = -1,19; p = 0,92).
Meskipun 1 jam latencies sama antar kelompok (U = 8.00; Z = -1,19; p = 0,24), tikus
pelari cenderung memiliki 24 jam latencies dibanding kontrol (U = 5.00; Z = 1,73; p =
0,08). Spearman Rank Correlation digunakan untuk membandingkan pembelajaran dan
memori pada discrimination index scores labirin air dan 1 dan 24 jam menghindari
avoidance retention latencies. Hasil penelitian menunjukkan hubungan antara retensi 24
jam di labirin air dan menghindari hambatan (r = 0.63, p <0,05).
3.5. Latihan sehari-hari meningkatkan neurogenesis pada tikus berusia tua dengan meningkatkan
jumlah sel baru
teks
$ Watermark
Jumlah sel-sel baru yang diperkirakan di dentate gyrus semua tikus menggunakan
stereological (Gambar. 5A, B dan E). T-test menegaskan jumlah total sel BrdU+ lebih tinggi
pada dentate gyrus tikus pelari daripada kontrol (t (9) = 3.44, p <0,01; gambar. 5E). Meskipun
latihan berpotensi meningkatkan volume vaskular dalam neurogenic niche, volume dentate
gyrus bahwa sel-sel baru diperkirakan sama dengan kontrol (4,32±0,17 mm3) dan tikus pelari
(4.53±0.30 mm3; t (9) = -0,57, p = 0.58). Seperti yang diharapkan dari data, kepadatan sel
baru juga lebih tinggi pada tikus pelari (514,77±40,95 sel/mm3) dibandingkan kontrol
(370,35±46,14 sel/mm3; t (9) = 2.35, p < 0,05). Karena tikus bertahan beberapa minggu
setelah disuntik BrdU, perbedaan-perbedaan ini bisa mencerminkan efek NPC dan/atau
kelangsungan hidup sel baru, tetapi konsisten dengan efek dari latihan fisik di NPC.
Kami mengkonfirmasi bahwa diferensiasi sel baru tidak terpengaruh dengan kondisi tikus
pelari dengan mengukur persentase sel BrdU+ mengekspresikan neuron immature neuronal
(DCX +), transitioning neuronal (DCX/NeuN+), mature neuronal (NeuN+),
oligodendroglial (NG2+), atau astroglial (GFAP+) phenotypes (Fig. 5C, D and F).

Mann Whitney U tests (nrunner = 6 and ncontrol =5 in all comparisons) menegaskan bahwa
persentase sel BrdU+ mengekspresikan immature neuronal (U=8, Z=1,187, p=0,024), transisi
neuron (U = 14,5, Z = 0,0 . p = 1,0), mature neuronal (U = 15,0, Z = 0,0, p = 1.00),
GFAP+(U = 13.0, Z = -0,274, p = 0,784) dan oligodendrocyte prekursor (U = 14,5, Z = 0,0,
p = 1,0) fenotipe serupa di antara tikus pelari dan tikus kontrol. Konsisten dengan waktu
hidup yang panjang yaitu 2,5-3 minggu setelah injeksi BrdU+, sebagian sel-sel baru (~ 70%)
mature neuronal phenotypes diikuti oleh astrocyte dan transitioning neuronal phenotypes
(masing-masing ~10%). Sangat sedikit sel-sel baru immature neuronal atau oligodendroglial
phenotypes (<3%) di dentate gyrus semua tikus (Gambar. 5). Perhatikan bahwa semua sel
BrdU/GFAP+ yang terdeteksi di luar zona subgranular dan menunjukkan sebuah astrocyte
daripada radial glial (atau sel induk saraf) - seperti morfologi.
teks
$ Watermark
Jumlah sel baru (Gambar. 5E) dikalikan dengan % neuron (immature, transitioning dan
mature), oligodendrocytes atau astrocytes (Gambar. 5F) untuk setiap tikus memperkirakan
jumlah total masing-masing fenotipe sel baru (Gambar. 5G) . Sehubungan dengan kontrol,
tikus pelari secara signifikan memiliki neuron baru (t (9) = 3,26; p <0,01), memiliki
astrocytes baru (masing-masing 157,41±31,27 dan 227,59±22,06; t (9) = -1,88; p = 0,09),
dan memiliki nomor yang sama dari oligodendrocyte precurors baru (masing-masing
26,31±16,55 dan 31,43±19,89; t (9) = -0,19; p = 0,85). Jumlah neuron baru cenderung
berhubungan positif dengan (p = 0,08;. Gambar 6A) dan 24 h (p = 0,059;. Gambar 6B)
water maze probe discrimination index scores.
3.6. Hubungan sitokin yang berbeda terdeteksi dalam serum, hippocampal dan cortical
compartments
teks
$ Watermark
Konsentrasi 24 sitokin yang diukur dalam serum darah dan hippocampal dan cortical protein
samples setiap perilaku tikus ditandai diukurnya neurogenesis (Tabel 1). Perhatikan bahwa
konsentrasi eotaxin, GRO-KC, IL-10, IL-13, IL-17, leptin, dan RANTES setidaknya lebih
tinggi di sirkulasi dibandingkan otak. IFNγ hanya terdeteksi dalam serum darah sedangkan
G-CSF, GM-CSF, IL1α, IL-2, IL-4, IL-5, IP-10 dan TNF terdeteksi di otak. Menariknya,
dari sitokin hanya terdeteksi di otak, G-SCF, GM-CSF, IL-10, dan IP-10 yang terdeteksi di
cortical tetapi tidak di hippocampal. ~2 kali lipat lebih tinggi dari IL-1β dan MCP-1
terdeteksi di hippocampal dibandingkan cortical sedangkan ~3 kali lipat konsentrasi lebih
tinggi dari IL-12 dan ~2 kali lipat konsentrasi lebih tinggi dari IL-2 dan IL-5 terdeteksi di
cortical dibandingkan hippocampal. Data ini menunjukkan bahwa pada tikus berusia tua,
konsentrasi sitokin sirkulasi tidak mencerminkan konsentrasi pusat. Selain itu, tampaknya
ada perbedaan regional dalam ekspresi central cytokines, kemungkinan mereka terpengaruh.
Kami selanjutnya menganalisis hubungan sitokin lebih dalam di antara serum darah,
teks
$ Watermark
hippocampal dan cortical compartments untuk mengeksplorasi ide-ide memprediksi sinyal

central cytokine dan regional perbedaan central cytokine yang mungkin diekspresikan lebih
pada sinyal lokal. Analisis jalur (lihat Metode Bagian 2.10) mengungkapkan kelompok yang
berbeda tapi tidak ada cluster antar kompartemen setelah penyesuaian Bonferroni untuk
beberapa perbandingan (Tabel 2a-c dan Gambar. 7). Dalam serum: 1) MCP-1 dan GRO-KC
dan 2) IL-6 dan IL-13 yang diidentifikasi sebagai kelompok independen. Dalam
hippocampus: 1) IL-17 dan VEGF, 2) IL-5 dan VEGF, 3) MCP-1, IL-2 dan VEGF, 4) MCP,
IL-2, TNF-α, MIP-1α dan IL-5, 5) IL-2 dan GRO-KC, 6) eotaxin, TNF dan IL-12, 7) IL-2
dan IL-4 dan 8) IL-4 dan IL-6 diidentifikasi sebagai kelompok independen. Di cortical: 1)
IL-2 dan GM-CSF, 2) GM-CSF dan IL-18, 4) GM-CSF dan IL-10, dan 5) IL-13 dan IL-4
diidentifikasi sebagai kelompok independen. Sementara hasil ini menunjukkan hubungan
yang kuat antara konsentrasi sitokin dalam masing-masing daerah otak dan di dalam serum,
tidak ada cluster muncul antara kompartemen ini. Kurangnya hubungan yang signifikan
antara konsentrasi serum dan sitokin otak menunjukkan bahwa faktor-faktor yang sirkulasi
tidak menyebar atau diangkut dalam jumlah yang terdeteksi pada hippocampal dan daerah
cortical pada tikus usia tua ditandai oleh peristiwa inflamasi (Erickson dan Bank, 2011).

Kurangnya hubungan yang signifikan antara hippocampal dan cortical compartments

menunjukkan bahwa sinyal neuroimmune seacara lokal. Tentu saja, kurang signifikan antar
kompartemen yang berhubungan hanya bisa mencerminkan ketatnya penyesuaian
Bonferroni, yang meningkatkan kemungkinan kesalahan tipe II.
3.7. Langkah-langkah perilaku dan neurogenesis berhubungan dengan konsentrasi sitokin

termodulasi dengan berlari
Untuk mengidentifikasi calon sitokin terkait dengan perilaku dan neurogenesis, pertama
kami mengidentifikasi sitokin yang diatur oleh latihan menggunakan Student’s t-tests (lihat
Tabel 1). Dibandingkan dengan kontrol, tikus pelari secara signifikan hippocampal lebih
rendah IL-1β (t (9) = 3.14; p < 0,05), sirkulasi MCP-1 (t (9) = 2.28; p ≤ 0,05) dan leptin yang
teks
$ Watermark
sirkulasi (t (9) = 4,06; p <0,01) tapi konsentrasi hippocampal lebih tinggi IL-18 (t (9) = -2,46,
p <0,05). Konsentrasi GRO-KC yang sirkulasi (t (9) = 2,08; p = 0,07) dan VEGF kortikal (t (9)
= 2.16, p = 0,06) lebih rendah sedangkan konsentrasi hippocampal GRO-KC (t (9) = -1,90, p
= 0,09) lebih tinggi di tikus pelari dibandingkan tikus kontrol.
Sitokin dengan konsentrasi yang signifikan dipengaruhi oleh kondisi tikus pelari pada tikus
berusia tua, beberapa termodulasi secara berhubungan (lihat Gambar. 7A dan Tabel 3).
Misalnya serum MCP-1, yang mengalami penurunan pada tikus pelari, yang berhubungan
positif dengan serum GRO-KC (p <0,01) dan kedua konsentrasi cenderung berhubungan
positif dengan serum leptin (p = 0,06 dan p = 0,08). Serum leptin sangat menurun pada tikus
pelari dan berhubungan positif dengan hippocampal IL-1β (p <0,05), tetapi cenderung
berhubungan negatif dengan hippocampal IL-18 (p = 0,06) dan hippocampal GRO-KC (p =
teks
$ Watermark
0,08). Hippocampal IL-1β mengalami penurunan pada tikus pelari dan berhubungan negatif
dengan hippocampal IL-18 (p <0,05) dan cenderung berhubungan positif dengan kortikal
VEGF (p= 0.07). Korelasi positif yang kuat terdeteksi antara hippocampal IL-18, yang
meningkat dengan berlari, dan hippocampal GRO-KC (p <0,01). Data ini menunjukkan
bahwa tikus pelari menjalankan himpunan modulasi dari sitokin dalam dan di antara serum,
hippocampal dan cortical compartments.
Selanjutnya kita memeriksa kekuatan hubungan antara variabel signifikan dipengaruhi oleh
kondisi tikus pelari (jumlah sel neuron baru, probe trial discrimination index scores dan 24
jam inhibitory avoidance retention latencies) menggunakan Spearman rank correlations
(lihat Tabel3). Menariknya, 24 jam retention latencies pada tugas penghindaran
penghambatan berhubungan positif dengan labirin air 24 jam probe discrimination index
scores (p <0,05). Data ini menunjukkan bahwa tugas-tugas ini keduanya sama sensitif
teks
$ Watermark
terhadap usia dengan penurunan kognitif dan efek yang menguntungkan dari kondisi berlari
dengan kemampuan spasial pada tikus usia tua. Seperti disebutkan sebelumnya, jumlah
neuron baru cenderung berhubungan positif (p = 0,08) dan 24 jam (p = 0,059) water maze
probe discrimination index scores (lihat Gambar. 8B dan Tabel 3).
Akhirnya, kami mencari hubungan antara sitokin, perilaku dan neurogenesis yang
dimodulasi oleh kondisi berlari (Tabel 3 dan Gambar. 8B). Jumlah sel neuron baru, yang
dipotensial oleh berlari, berhubungan negatif dengan tingkat serum leptin (p <0,01) tapi
positif dengan hippocampal IL-18 (p <0,001) dan hippocampal GRO-KC (p <0,01) dan
cenderung berhubungan negatif dengan hippocampal IL-1β (p = 0,06). Immediate probe
trial discrimination index scores, meningkat dengan berlari, berhubungan negatif dengan
level kortikal VEGF (p <0,05) dan tingkat sirkulasi dari leptin (p <0,05) MCP-1 (p <0,01)
dan GRO-KC (p <0,01) dan cenderung berhubungan negatif dengan hippocampal IL-1β (p =
0,06). 24 jam discrimination index scores berhubungan negatif dengan tingkat sirkulasi
leptin (p <0,01) dan hippokampal IL-1β (p < 0,05). Menariknya, kadar leptin serum

berhubungan negatif dengan skor langsung Indeks diskriminasi (p <0,05), discrimination

index scores 24 jam (p <0,01) dan nomor neuron baru (p <0,01). Tingkatan serum leptin
berhubungan positif dengan konsentrasi hippocampal IL-1β (p <0,05), dan konsentrasi
hippocampal IL-1β berhubungan negatif dengan 24 jam labirin air (p <0,05) dan pertunjukan
24 jam inhibitory retention (p <0,05). Kortikal VEGF cenderung berhubungan negatif dengan
24 jam inhibitory retention latencies (p = 0,06).
4. Diskusi
Tujuan penting penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi tanda penuaan biologis yang
memprediksi penurunan kognitif. Penelitian ini, kami mengukur hippocampal neurogenesis
teks
$ Watermark
dan mengidentifikasi potensi serum dan penanda pada tikus setelah meremajakan kognisi
mereka dengan terapi perilaku. Beberapa bulan makanan-motivasi menjalankan roda
peningkatan kemampuan tikus tua untuk cepat belajar pada hidden platform location dan
mempertahankan atau mengkonsolidasikan informasi spasial / kontekstual hippocampal
neurogenesis merupakan tanda baik dari otak usia tua yang mendapat latihan sehari-hari
dalam penelitian ini berhubungan dengan meningkatnya hippokampal IL-18 dan GRO-KC.
Penanda peradangan pusat dan perifer telah dihipotesiskan berkontribusi menurunkan
fungsi kognitif terkait usia dan kami menemukan bahwa latihan sehari-hari menurunkan
ekspresi hippocampal IL-1β, yang berhubungan negatif dengan labirin air dan inhibitory
avoidance memory scores. Karena sifat invasif mengidentifikasi penanda di jaringan otak,
banyak peneliti fokus mengidentifikasi penanda serum. Pada tikus berusia tua, leptin
muncul sebagai penanda serum yang berpotensi menurunkan kognisi dan plastisitas terkait
usia dan berhubungan negatif dengan labirin air dan jumlah sel neuron baru. Selain itu,
teks
$ Watermark
latihan sehari-hari menurunkan serum leptin dengan tingkat serum MCP-1 (CCL2) dan
GRO- KC (CXCL1) cenderung menurun. Menariknya, serum leptin, GRO-KC dan MCP-1
tingkatnya sama dengan kortikal VEGF (yang cenderung menurun dengan latihan sehari-
hari) berhubungan negative dengan water maze learning index. Data kami menunjukkan
bahwa latihan sehari-hari mungkin meremajakan kognisi dan neurogenesis pada tikus usia
tua dengan modulasi immune and neuroimmune signaling pathways.
Data kami menunjukkan bahwa protokol latihan yang digunakan dapat meremajakan
kognisi dan neurogenesis tikus tua dengan modulasi immune and neuroimmune signaling
pathways. Pentingnya, manfaat pembatasan kalori yang terkait dengan protokol latihan.
Latihan dan pembatasan kalori yang menguntungkan mempengaruhi sejumlah proses
biologis pada tikus berusia tua yang mencakup inflammatory signaling pathways (lihat
Chung et al., 2009). Namun, pada penelitian ini pembatasan kalori menghasilkan perubahan
berat badan sangat ringan kurang dari 10% (bandingkan berat dalam Bagian 2.1;. Bondolfi
teks
$ Watermark
et al, 2004;. Lee et al, 2000; Van der Borght et al. 2007), yang juga akan konsisten dengan
peningkatan latihan dalam kebugaran. Latihan ini dikenal untuk merangsang neurogenesis
pada tikus muda dan berusia tua (Albeck et al, 2006; Brown et al, 2003;. Kobila et al, 2011;
Parachikova et al, 2008; Van Praag et al, 2005) sedangkan efek dari pembatasan kalori pada
neurogenesis terbatas pada hewan muda (Lee et al, 2000;. Van der Borght, 2007; Bondolfi,
2004). Apapun, peradangan yang terkait dengan obesitas dan gaya hidup berkontribusi
terhadap penyakit penuaan dan pemahaman bagaimana olahraga dengan dan tanpa
pembatasan kalori mempengaruhi sinyal inflamasi menjadi penting bagi pengembangan
pengobatan.
Konsisten dengan penelitian sebelumnya yang dilakukan dengan menggunakan hewan
yang terisolasi secara sosial, running wheel meningkatkan kognisi (Albeck et al, 2006;
Parachikova et al, 2008; Van Praag et al., 2005) dan memperkuat tingkat basal
hippocampal neurogenesis tanpa mengubah persentase sel-sel baru dari neuronal atau
glial fates (Brown et al, 2003;.. Farmer et al, 2004; Kannangara et al., 2011; Kannangara
et al., 2009; Kronenberg et al., 2006; Mustroph et al., 2012; Snyder et al., 2009).

Meskipun paradigma beberapa injeksi kami dan masa hidup ~16-21 hari tidak dapat
dipisahkan antara efek latihan pada proliferasi NPC versus sel-sel baru bertahan hidup, data
ini konsisten dengan beberapa penelitian lain yang menunjukkan bahwa latihan fisik
meningkat proliferasi NPC (Kempermann et al., 2010; van Praag et al, 1999). Jumlah sel
neuron baru berhubungan positif dengan water maze probe trial discrimination index scores
tapi tidak menghindari retention latency scores. Yang penting, 900 s latency ceiling yang
digunakan pada inhibitory avoidance task melindungi hubungan antara memory of
contextual information dan jumlah sel neuron baru. Kami melaporkan bahwa jumlah sel
neuron baru sangat berhubungan dengan skor discrimination index pada tikus berusia tua di
lingkungan dan sosial dan kontrol mereka (Speisman et al., 2012). Sementara aktivitas fisik
biasanya dianggap menginduksi neurogenesis, pengayaan lingkungan biasanya dianggap
teks
$ Watermark
meningkatkan kelangsungan hidup dan berpotensi mengintegrasi neuron baru ke jaringan

hippocampal aktif (Deisseroth et al, 2004; Deng et al, 2010;. Gould et al, 1999a; Leuner et
al, 2006;.. Stephens et al, 2012, tetapi lihat Kobilo et al, 2011), mungkin lebih mendalam
membahas dampak integritas hippocampal (Kempermann et al, 2010)
Gambar 8 mengilustrasikan hubungan potensial antara serum penanda inflamasi dan

hippocampal cytokines terkait dengan kognisi dan neurogenesis. Latihan-modulasi sirkulasi
leptin level (Chennaoui et al, 2008;. Novelli et al, 2004.) Berhubungan negatif dengan maze
discrimination index scores, jumlah sel neuron baru dan ekspresi hippocampal IL-18 tapi
positif dengan ekspresi hipokampal IL-1β. Meskipun efek leptin’s pleiotropic ini biasanya
terkait dengan regulasi energi, penelitian terbaru menunjukkan bahwa leptin dapat langsung
merangsang proliferasi sel saraf progenitor baik in vitro dan in vivo (Garza et al., 2008;
Perez-Gonzalez et al.). Data ini akan menunjukkan bahwa serum leptin berpengaruh
teks
$ Watermark
terhadap hippocampal neurogenesis pada tikus usia tua melalui intermediary signaling
molecule atau kadar serum leptin terdeteksi pada tikus berusia tua melebihi yang ditemukan
pada hewan muda yang sehat ke titik mereka menjadi rugi. Konsisten dengan penelitian
terakhir, latihan menurunkan kadar leptin pada tikus usia tua kita. Leptin secara potensial
immune to brain signaling mediator (Hosoi et al., 2002) karena kadar leptin meningkat
dengan peripheral inflammatory stimuli (Mastronardi et al, 2005; Sarraf et al, 1997) yang
kebetulan menurunkan neurogenesis dan (Monje et al, 2003) pengobatan leptin
meningkatkan kadar otak hippocampal IL-1β (Hosoi et al., 2002). Atau, konsentrasi serum
leptin dalam penelitian ini mungkin hanya menjadi penanda untuk immune signaling
cascade mengandung molekul yang mempengaruhi neurogenesis.
Memang, level serum GRO-KC dan MCP-1 juga berkurang karena latihan, berhubungan
satu sama lain, dan mandiri (bersama dengan leptin) berhubungan dengan memperoleh
teks
$ Watermark
strategi pencarian spasial dalam labirin air (Tabel 1 dan 3 dan Gambar. 8). Penelitian
sebelumnya menunjukkan bahwa level MCP-1 yang tinggi dengan lemak diet tinggi -
induksi obesitas pada tikus muda, dapat dikurangi dengan latihan sehari-hari (Kizaki et al.,
2011). Baru-baru ini, Villeda dan rekan menemukan bahwa sirkulasi CCL2, bersama dengan
eotaxin (CCL11), MCP-5 (CCL12), MIP-3β (CCL19), haptoglobin dan β2 microglobulin
levels terkait dengan usia - gangguan neurogenesis dan kinerja dalam kerja / referensi
memory and contextual fear conditioning. Mereka menunjukkan bahwa sirkulasi eotaxin
levels bisa merusak neurogenesis, synaptic plasticity, working/reference memory and
contextual fear conditioning (Villeda et al., 2011). Kami tidak mendeteksi efek latihan pada
sirkulasi eotaxin levels, atau hubungan antara eotaxin levels dan langkah-langkah dari
neurogenesis atau kinerja labirin air pada tikus yang berusia tua. Namun, perubahan yang
berkaitan dengan usia pada sirkulasi eotaxin levels -tergantung atau berhubungan dengan
kognisi dan neurogenesis dengan interaksi variabel lain yang berbeda. Meskipun demikian,
mekanisme molekuler oleh faktor, seperti leptin, GRO-KC, MCP-1 dan mungkin eotaxin
levels berhubungan dengan tindakan kognisi dan plastisitas yang penting pada penelitian di
masa depan.

Temuan penting lain dari penelitian ini adalah perubahan compartmental specificity terkait
latihan - di cytokine levels. Setelah beberapa bulan latihan sehari-hari, level leptin menurun
hanya dalam serum dan IL-1β berkurang dan IL-18 meningkat hanya dalam hippocampal
(Tabel 1). Laporan sebelumnya juga menemukan bahwa olahraga treadmill setiap hari
menurunkan/mengurangi hippocampal, tapi tidak sirkulasi, cortical, cerebellar atau pituitary
level IL-1β pada tikus muda (Chennaoui et al., 2008). Data kami meperluas temuan ini ke
tikus usia tua, yang ditunjukkan di hippocampal, tapi tidak di kortikal atau sirkulasi IL-1β
yang berkurang dengan latihan. Selanjutnya, ekspresi hippocampal IL-1β berhubungan positif
dengan serum leptin dan berhubungan negatif dengan both water maze and inhibitory
avoidance memory scores (Tabel3 dan Gambar. 8). Leptin secara aktif diangkut melintasi
blood-brain-barrier (Morrison, 2009) dan penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa
teks
$ Watermark
pengobatan leptin meningkatkan IL-1β di hippocampus (Hosoi et al., 2002), memberikan

salah satu hubungan mekanisme untuk diamati. Selain itu, hubungan terbalik antara IL-1β dan
kognisi konsisten dengan semakin banyak pekerjaan yang menunjukkan bahwa level
hippocampal IL-1β yang tinggi mengganggu memori dan plastisitas sinaptik pada tikus usia
muda dan tua (Barrientos et al, 2009; Barrientos et al, 2006; Barrientos et al, 2003;.
Chennaoui et al, 2008;.. Hein et al, 2010;. O'Callaghan et al, 2009). Bersama data ini
menunjukkan konsentrasi hippocampal IL-1β merupakan biomarker yang diandalkan pada
penurunan mnemonic dan, bersama dengan leptin, target pengembangan sirkulasi obat
nootropic.
Berbeda dengan IL-1β, tingkat IL-18 dan GRO-KC meningkat dalam hippocampal pada
kelompok latihan. Hipokampus IL-18 dan konsentrasi GRO-KC berhubungan positif satu
sama lain dan mandiri dengan nomor neuron baru, sementara konsentrasi hippocampal IL-18
berhubungan negatif dengan konsentrasi hippocampal IL-1β (Gbr. 8). Latihan sehari-hari
teks
$ Watermark
telah terbukti sebelumnya untuk mempotensiasi hippocampal GROα (murine CXCL1) tingkat
mRNA di Tg2576 tikus usia tua yang mengekspresikan protein amiloid manusia (Parachikova
et al., 2008). Menariknya, tikus-tikus ini juga memperlihatkan peningkatan radial air kinerja
lengan labirin dan penurunan level hippocampal IL-1β (Nichol et al, 2008;.. Parachikova et
al, 2008). GRO-KC merangsang spinal cord oligodendrocyte tikus dewasa (Robinson et al.,
1998) dan fetal ventral midbrain precursor (Edman et al., 2008) proliferasi dan IL-18
mungkin menipiskan diferensiasi neuron di sel progenitor janin tikus (Liu et al., 2005), tapi
ini adalah laporan pertama dari hubungan antara kedua faktor dan perilaku NPC dewasa,
untuk pengetahuan kita. Laporan yang saling bertentangan menunjukkan bahwa IL-18
merupakan neuroprotection dan spatial ability (Ryu et al .; Yaguchi et al.) tetapi juga
berkaitan dengan usia - penurunan kognitif (Blalock et al., 2003; Mawhinney et al.). Data
kami menunjukkan bahwa latihan-meningkatkan level hippocampal IL-18 berhubungan
positif dengan jumlah sel neuron baru (yang berhubungan positif dengan kemampuan spasial
teks
$ Watermark
pada tikus usia tua; Tabel 2 dan Speisman et al, 2012) konsisten dengan gagasan.
Pertanyaannya tetap bagaimana IL-18 dapat dikaitkan dengan peningkatan fungsi
hippocampal. Salah satu kemungkinan adalah bahwa olahraga dapat meningkatkan kesehatan
hippocampal dan merangsang neurogenesis di otak tua dengan meningkatkan kesehatan
pembuluh darah (Palmer et al., 2000). GRO- KC dan IL-18 menunjukkan sifat pro-
angiogenik dan dihubungkan melalui ras-raf-ERK-MAPK signaling (Taman et al, 2001;..
Zhong et al, 2008). Meskipun kami tidak mengamati latihan - induksi pergeseran kadar
hippocampal VEGF, penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa tikus pelari memiliki
potensi hippocampal neurogenesis melalui kegiatan VEGF pada tikus muda (Fabel et al.,
2003; Tang et al., 2010) dan meningkatkan kadar hippocampal VEGF pada tikus usia tua
(Latimer et al., 2011). Namun, kadar VEGF diketahui berkurang/menurun di otak berusia tua
(Shetty et al., 2005) dan memerlukan peremajaan sebelum latihan dapat mempotensi
neurogenesis level luar basal (Gambar. 6 vs Speisman et al., 2012). Meskipun setiap analit
ada di hippocampus atau cortical (jumlah yang sama dari protein yang dipanen), volume
protein yang diperoleh dari ½ hippocampal atau cortical bisa telah terlalu kecil untuk
mengukur perubahan dalam konsentrasi analit tingkat rendah, seperti VEGF.

Klaster kami menganalisis lebih lanjut dan menunjukkan bahwa sinyal sitokin pada tikus
pelari usia tua dan tikus kontrol terkotak. Pada serum, kami menemukan hubungan positif
yang kuat antara GRO-KC dan MCP-1 dan antara konsentrasi IL-6 dan IL-13. Konsentrasi
dikoordinasikan dengan monosit / makrofag yang diturunkan oleh serum MCP-1 dan GRO-
KC dan telah dilaporkan dalam perbaikan luka-induksi angiogenesis dan dalam serum tikus
LPS-diperlakukan (Barcelos et al, 2004;. Erickson dan Bank, 2011) dan sirkulasi konsentrasi
IL-13 dan IL-6 dengan respon Th2 yang tinggi diduga terjadi akibat usia (Grolleau-Julius et
al., 2010). Meskipun IL-13 terdeteksi dalam kelompok kortikal dan GRO-KC dan MCP-1
terdeteksi di cluster hippocampal kami tidak mendeteksi hubungan antara-kompartemen
yang menunjukkan difusi langsung atau transportasi di blood-brain-barrier ke lokasi baik.
teks
$ Watermark
Di otak, kami mendeteksi hubungan konsentrasi sitokin yang berbeda di cortical dan
hippocampal. Di cortical, konsentrasi struktural dan fungsional homolog IL-13 dan IL-4,
yang disajikan oleh mikroglia dan biasanya terkait dengan anti-inflammatory dan
neuroprotective di otak yang berhubungan (Opal dan DePalo, 2000; Ponomarev et al., 2007;
Shin et al., 2004). Kortikal GM-CSF terdeteksi di cluster terpisah dengan IL-2, IL-10 dan
IL-18. Astrocytic GM-CSF bekerja pada reseptor diungkapkan oleh mikroglia dan
oligodendrocytes (Kimura et al., 2000). IL-2 dan reseptor protein diungkapkan oleh neuron,
glia dan mikroglia sementara IL-18 mRNA diungkapkan oleh mikroglia dengan reseptornya
yang diungkapkan oleh neuron, astrosit dan mikroglia di seluruh otak (Hanisch dan Quirion,
1995; Tambuyzer et al., 2009). Sementara hubungan antara L-2 dan GM-CSF tidak jelas,
IL-10 berkurang tapi IL-18 meningkatkan produksi GM-CSF oleh sel imun perifer dan IL-
10 dapat menekan microglial inflammatory responses (Lee et al., 2010).
teks
$ Watermark
Di hippocampal, VEGF berhubungan secara independen dengan IL-2 dan MCP-1, IL-5, dan
akhirnya IL-17. Produksi VEGF endotel dapat dirangsang oleh IL-2, dan mikroglia, sel
endotel atau sel otot polos MCP-1 dalam menanggapi cedera vaskular (Parenti et al., 2004).
IL-5 dan IL-17, sering dikaitkan dengan reaksi alergi, juga dapat merangsang produksi
VEGF. Menariknya, ekspresi cedera diinduksi MIP-1α, MCP-1, GM-CSF, dan TNF-α dan
dalam beberapa kasus IL-1β muncul untuk merekrut makrofag dan menginduksi fagositosis
(Ousman dan David, 2001). Konsentrasi terkoordinasi IL-2 dengan gugus ini menarik karena
IL-2 sering dikaitkan dengan pengakuan diri (Kolls dan Linden, 2004). IL-2 dan IL-4 adalah
co-diatur oleh latihan akut lengkap dalam otot dan dalam serum mungkin untuk merangsang
proses perbaikan (Rosa Neto et al., 2011). Hubungan antara IL-2 dan IL-4, IL-2 dan GRO-
KC, dan antara IL4 dan IL-6 yang kita deteksi dalam hippocampus belum dilaporkan di otak,
untuk pengetahuan kita. Penelitian selanjutnya diperlukan untuk menegaskan dan
teks
$ Watermark
memperluas tentang neuroimmune signaling pathways dan tes efek mereka di otak tikus usia
tua akan menjadi penting untuk memahami dampaknya terhadap kognisi dan plastisitas.
Tentu saja, perubahan regional di sistem sinyal lainnya berada di bawah eksplorasi di otak
usia tua (misalnya, lihat McQuail et al., 2012).
Implikasi
Latihan sehari-hari meningkatkan kemampuan spasial / kontekstual, dengan merangsang
plastisitas hippocampal dalam bentuk neurogenesis dan di modulasi oleh immune and
neuroimmune signaling. Latihan sehari-hari dikaitkan dengan penurunan ekspresi faktor
yang berhubungan negatif dengan belajar, memori, dan neurogenesis tetapi peningkatan
ekspresi faktor berhubungan positif dengan ukuran neurogenesis kami. Gambar bagaimana
immune and neuroimmune signaling berdampak pada perkembangan kognisi dan plastisitas.
Kami menambahkan gambaran ini dengan menunjukkan bahwa olahraga memodulasi faktor

dalam serum dan di otak, menunjukkan bahwa faktor kekebalan tubuh tidak berdifusi atau
diangkut ke dalam otak tikus yang berolahraga dan tikus kontrol usia tua. Kami juga
menemukan bahwa olahraga termodulasi faktor neuroimmune jelas di cortical dan
hippocampal, yang mendukung gagasan di otak, neuroimmune signaling spesifik. Serum
leptin muncul sebagai biomarker untuk kedua otak dan penuaan kognitif. Seiring dengan
serum leptin, kadar serum MCP-1 dan GRO-KC dapat memprediksi kemampuan spasial.
Kami mengkonfirmasi bahwa tingkat IL-1β hippocampal dapat menjadi penanda
kemampuan mnemonic dan kami menemukan bahwa level hippocampal IL-18 dan GRO-
KC berhubungan positif dengan neurogenesis. Singkatnya, pekerjaan kami menunjukkan
bahwa aktivitas fisik dapat membalikkan beberapa aspek penurunan kognitif yang berkaitan
dengan usia, dengan merangsang neurogenesis dan di modulasi oleh aspek yang
teks
$ Watermark
menguntungkan dan merugikan dari immune dan neuroimmune signaling. Data korelasional
kami menyediakan kerangka kerja secara sistematis memanipulasi molekul-molekul
immune dan neuroimmune signaling untuk menguji efek mereka pada kognisi dan
neurogenesis di umur pada percobaan berikutnya.
Acknowledgments
The authors thank Dr. Gerry Shaw for his gift of anti-chicken GFAP. The study was supported by grants from the
National Institutes of Health (AG014979, AG037984) to TCF, the Evelyn F McKnight Brain Research Foundation
and NIH grant AG038600 to TCF and BKO, and the Broad Foundation for Biomedical Research to BKO. RBS was
the recipient of a National Science Foundation Graduate Research Fellowship (DGE-0802270).
teks
$ Watermark
References
Aizawa K, Ageyama N, Yokoyama C, Hisatsune T. Age-dependent alteration in hippocampal
neurogenesis correlates with learning performance of macaque monkeys. Exp Anim. 2009; 58:403–
407. [PubMed: 19654438]
Albeck DS, Sano K, Prewitt GE, Dalton L. Mild forced treadmill exercise enhances spatial learning in
the aged rat. Behav Brain Res. 2006; 168:345–348. [PubMed: 16388860]
Barcelos LS, Talvani A, Teixeira AS, Cassali GD, Andrade SP, Teixeira MM. Production and in vivo
effects of chemokines CXCL1-3/KC and CCL2/JE in a model of inflammatory angiogenesis in
mice. Inflamm Res. 2004; 53:576–584. [PubMed: 15597153]
Baron RM, Kenny DA. The moderator-mediator variable distinction in social psychological research:
conceptual, strategic, and statistical considerations. J Pers Soc Psychol. 1986; 51:1173–1182.
[PubMed: 3806354]
teks
$ Watermark
Barrientos RM, Frank MG, Hein AM, Higgins EA, Watkins LR, Rudy JW, Maier SF. Time course of
hippocampal IL-1 beta and memory consolidation impairments in aging rats following peripheral
infection. Brain Behav Immun. 2009; 23:46–54. [PubMed: 18664380]
Barrientos RM, Higgins EA, Biedenkapp JC, Sprunger DB, Wright-Hardesty KJ, Watkins LR, Rudy
JW, Maier SF. Peripheral infection and aging interact to impair hippocampal memory consolidation.
Neurobiol Aging. 2006; 27:723–732. [PubMed: 15893410]
Barrientos RM, Sprunger DB, Campeau S, Higgins EA, Watkins LR, Rudy JW, Maier SF. Brain-
derived neurotrophic factor mRNA downregulation produced by social isolation is blocked by
intrahippocampal interleukin-1 receptor antagonist. Neuroscience. 2003; 121:847–853. [PubMed:
14580934]
Belarbi K, Arellano C, Ferguson R, Jopson T, Rosi S. Chronic neuroinflammation impacts the
recruitment of adult-born neurons into behaviorally relevant hippocampal networks. Brain Behav
Immun. 2012; 26:18–23. [PubMed: 21787860]
Ben-Hur T, Ben-Menachem O, Furer V, Einstein O, Mizrachi-Kol R, Grigoriadis N. Effects of
proinflammatory cytokines on the growth, fate, and motility of multipotential neural precursor cells.
Mol.Cell Neurosci. 2003; 24:623–631. [PubMed: 14664813]
Bizon JL, Lee HJ, Gallagher M. Neurogenesis in a rat model of age-related cognitive decline. Aging
Cell. 2004; 3:227–234. [PubMed: 15268756]

Speisman et al. Page 20
Blalock EM, Chen KC, Sharrow K, Herman JP, Porter NM, Foster TC, Landfield PW. Gene
microarrays in hippocampal aging: statistical profiling identifies novel processes correlated with
cognitive impairment. J Neurosci. 2003; 23:3807–3819. [PubMed: 12736351]
Bondolfi L, Ermini F, Long JM, Ingram DK, Jucker M. Impact of age and caloric restriction on
neurogenesis in the dentate gyrus of C57BL/6 mice. Neurobiol Aging. 2004; 25:33–40. [PubMed:
14675727]
Boyce RW, Dorph-Petersen KA, Lyck L, Gundersen HJ. Design-based stereology: introduction to
basic concepts and practical approaches for estimation of cell number. Toxicol Pathol. 2010;
38:1011–1025. [PubMed: 21030683]
Brown J, Cooper-Kuhn CM, Kempermann G, Van Praag H, Winkler J, Gage FH, Kuhn HG. Enriched
environment and physical activity stimulate hippocampal but not olfactory bulb neurogenesis. Eur
$watermark-text
J Neurosci. 2003; 17:2042–2046. [PubMed: 12786970]

Buckwalter MS, Yamane M, Coleman BS, Ormerod BK, Chin JT, Palmer T, Wyss-Coray T.
Chronically increased transforming growth factor-beta1 strongly inhibits hippocampal
neurogenesis in aged mice. Am J Pathol. 2006; 169:154–164. [PubMed: 16816369]
Cameron HA, McKay RD. Restoring production of hippocampal neurons in old age. Nat.Neurosci.
1999; 2:894–897. [PubMed: 10491610]
Cameron HA, McKay RD. Adult neurogenesis produces a large pool of new granule cells in the
dentate gyrus. J Comp Neurol. 2001; 435:406–417. [PubMed: 11406822]
Carter CS, Leeuwenburgh C, Daniels M, Foster TC. Influence of calorie restriction on measures of
age-related cognitive decline: role of increased physical activity. J Gerontol A Biol Sci Med Sci.
2009; 64:850–859. [PubMed: 19420296]
Chen J, Buchanan JB, Sparkman NL, Godbout JP, Freund GG, Johnson RW. Neuroinflammation and
disruption in working memory in aged mice after acute stimulation of the peripheral innate
$watermark-text
immune system. Brain Behav Immun. 2008; 22:301–311. [PubMed: 17951027]

Chennaoui M, Drogou C, Gomez-Merino D. Effects of physical training on IL-1beta, IL-6 and IL-1ra
concentrations in various brain areas of the rat. Eur Cytokine Netw. 2008; 19:8–14. [PubMed:
18299269]
Christensen H, Mackinnon A. The association between mental, social and physical activity and
cognitive performance in young and old subjects. Age Ageing. 1993; 22:175–182. [PubMed:
8503313]
Chung HY, Cesari M, Anton S, Marzetti E, Giovannini S, Seo AY, Carter C, Yu BP, Leeuwenburgh
C. Molecular inflammation: underpinnings of aging and age-related diseases. Ageing Res Rev.
2009; 8:18–30. [PubMed: 18692159]
Churchill JD, Galvez R, Colcombe S, Swain RA, Kramer AF, Greenough WT. Exercise, experience
and the aging brain. Neurobiol Aging. 2002; 23:941–955. [PubMed: 12392797]
Colcombe S, Kramer AF. Fitness effects on the cognitive function of older adults: a meta-analytic
$watermark-text
study. Psychol Sci. 2003; 14:125–130. [PubMed: 12661673]

Conde JR, Streit WJ. Microglia in the aging brain. J Neuropathol Exp Neurol. 2006; 65:199–203.
[PubMed: 16651881]
Coras R, Siebzehnrubl FA, Pauli E, Huttner HB, Njunting M, Kobow K, Villmann C, Hahnen E,
Neuhuber W, Weigel D, Buchfelder M, Stefan H, Beck H, Steindler DA, Blümcke I. Low
proliferation and differentiation capacities of adult hippocampal stem cells correlate with memory
dysfunction in humans. Brain. 2010; 133:3359–3372. [PubMed: 20719879]
Correa DD, DeAngelis LM, Shi W, Thaler H, Glass A, Abrey LE. Cognitive functions in survivors of
primary central nervous system lymphoma. Neurology. 2004; 62:548–555. [PubMed: 14981169]
Creer DJ, Romberg C, Saksida LM, van Praag H, Bussey TJ. Running enhances spatial pattern
separation in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 107:2367–2372. [PubMed: 20133882]
Crossen JR, Garwood D, Glatstein E, Neuwelt EA. Neurobehavioral sequelae of cranial irradiation in
adults: a review of radiation-induced encephalopathy. J Clin Oncol. 1994; 12:627–642. [PubMed:
8120563]
Cui L, Hofer T, Rani A, Leeuwenburgh C, Foster TC. Comparison of lifelong and late life exercise on
oxidative stress in the cerebellum. Neurobiol Aging. 2009; 30:903–909. [PubMed: 17976863]

Deisseroth K, Singla S, Toda H, Monje M, Palmer TD, Malenka RC. Excitation-neurogenesis coupling
in adult neural stem/progenitor cells. Neuron. 2004; 42:535–552. [PubMed: 15157417]
Deng W, Aimone JB, Gage FH. New neurons and new memories: how does adult hippocampal
neurogenesis affect learning and memory? Nat Rev Neurosci. 2010; 11:339–350. [PubMed:
20354534]
Dupret D, Revest JM, Koehl M, Ichas F, De Giorgi F, Costet P, Abrous DN, Piazza PV. Spatial
relational memory requires hippocampal adult neurogenesis. PLoS One. 2008; 3:e1959. [PubMed:
18509506]
Edman LC, Mira H, Erices A, Malmersjö S, Andersson E, Uhlén P, Arenas E. Alpha-chemokines
regulate proliferation, neurogenesis, and dopaminergic differentiation of ventral midbrain
precursors and neurospheres. Stem Cells. 2008; 26:1891–1900. [PubMed: 18436867]
$watermark-text
Ekdahl CT, Claasen JH, Bonde S, Kokaia Z, Lindvall O. Inflammation is detrimental for neurogenesis
in adult brain. Proc Natl Acad Sci U S A. 2003; 100:13632–13637. [PubMed: 14581618]
Epp JR, Haack AK, Galea LA. Task difficulty in the Morris water task influences the survival of new
neurons in the dentate gyrus. Hippocampus. 2010; 20:866–867. [PubMed: 19693780]
Epp JR, Scott NA, Galea LA. Strain differences in neurogenesis and activation of new neurons in the
dentate gyrus in response to spatial learning. Neuroscience. 2011; 172:342–354. [PubMed:
20955769]
Erickson KI, Voss MW, Prakash RS, Basak C, Szabo A, Chaddock L, Kim JS, Heo S, Alves H, White
SM, Wojcicki TR, Mailey E, Vieira VJ, Martin SA, Pence BD, Woods JA, McAuley E, Kramer
AF. Exercise training increases size of hippocampus and improves memory. Proc Natl Acad Sci U
S A. 2010; 108:3017–3022. [PubMed: 21282661]
Erickson MA, Banks WA. Cytokine and chemokine responses in serum and brain after single and
repeated injections of lipopolysaccharide: multiplex quantification with path analysis. Brain Behav
$watermark-text
Immun. 2011; 25:1637–1648. [PubMed: 21704698]

Fabel K, Tam B, Kaufer D, Baiker A, Simmons N, Kuo CJ, Palmer TD. VEGF is necessary for
exercise-induced adult hippocampal neurogenesis. Eur J Neurosci. 2003; 18:2803–2812. [PubMed:
14656329]
Farmer J, Zhao X, van Praag H, Wodtke K, Gage FH, Christie BR. Effects of voluntary exercise on
synaptic plasticity and gene expression in the dentate gyrus of adult male Sprague-Dawley rats in
vivo. Neuroscience. 2004; 124:71–79. [PubMed: 14960340]
Felzien LK, McDonald JT, Gleason SM, Berman NE, Klein RM. Increased chemokine gene
expression during aging in the murine brain. Brain Res. 2001; 890:137–146. [PubMed: 11164776]
Foster TC, Kumar A. Susceptibility to induction of long-term depression is associated with impaired
memory in aged Fischer 344 rats. Neurobiol Learn Mem. 2007; 87:522–535. [PubMed: 17276704]
Foster TC, Sharrow KM, Kumar A, Masse J. Interaction of age and chronic estradiol replacement on
memory and markers of brain aging. Neurobiol Aging. 2003; 24:839–852. [PubMed: 12927766]
$watermark-text
Galea LA, Ormerod BK, Sampath S, Kostaras X, Wilkie DM, Phelps MT. Spatial working memory
and hippocampal size across pregnancy in rats. Horm Behav. 2000; 37:86–95. [PubMed:
10712861]
Garza JC, Guo M, Zhang W, Lu XY. Leptin increases adult hippocampal neurogenesis in vivo and in
vitro. J Biol Chem. 2008; 283:18238–18247. [PubMed: 18367451]
Gerlai R. Behavioral tests of hippocampal function: simple paradigms complex problems. Behav Brain
Res. 2001; 125:269–277. [PubMed: 11682118]
Gimeno D, Marmot MG, Singh-Manoux A. Inflammatory markers and cognitive function in middle-
aged adults: the Whitehall II study. Psychoneuroendocrinology. 2008; 33:1322–1334. [PubMed:
18774232]
Godbout JP, Chen J, Abraham J, Richwine AF, Berg BM, Kelley KW, Johnson RW. Exaggerated
neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral
innate immune system. FASEB J. 2005; 19:1329–1331. [PubMed: 15919760]
Gould E, Beylin A, Tanapat P, Reeves A, Shors TJ. Learning enhances adult neurogenesis in the
hippocampal formation. Nat.Neurosci. 1999a; 2:260–265. [PubMed: 10195219]
Gould E, Reeves AJ, Fallah M, Tanapat P, Gross CG, Fuchs E. Hippocampal neurogenesis in adult
Old World primates. Proc Natl Acad Sci U S A. 1999b; 96:5263–5267. [PubMed: 10220454]

Griffin R, Nally R, Nolan Y, McCartney Y, Linden J, Lynch MA. The age-related attenuation in long-
term potentiation is associated with microglial activation. J Neurochem. 2006; 99:1263–1272.
[PubMed: 16981890]
Grolleau-Julius A, Ray D, Yung RL. The role of epigenetics in aging and autoimmunity. Clin Rev
Allergy Immunol. 2010; 39:42–50. [PubMed: 19653133]
Grotendorst GR, Smale G, Pencev D. Production of transforming growth factor beta by human
peripheral blood monocytes and neutrophils. J Cell Physiol. 1989; 140:396–402. [PubMed:
2745570]
Hanisch UK, Quirion R. Interleukin-2 as a neuroregulatory cytokine. Brain Res Brain Res Rev. 1995;
21:246–284. [PubMed: 8806016]
Hattiangady B, Shetty AK. Aging does not alter the number or phenotype of putative stem/progenitor
$watermark-text
cells in the neurogenic region of the hippocampus. Neurobiol Aging. 2008; 29:129–147. [PubMed:
17092610]
Hein AM, Stasko MR, Matousek SB, Scott-McKean JJ, Maier SF, Olschowka JA, Costa AC,
O'Banion MK. Sustained hippocampal IL-1beta overexpression impairs contextual and spatial
memory in transgenic mice. Brain Behav Immun. 2010; 24:243–253. [PubMed: 19825412]
Holloszy JO, Smith EK, Vining M, Adams S. Effect of voluntary exercise on longevity of rats. J Appl
Physiol. 1985; 59:826–831. [PubMed: 4055572]
Hosoi T, Okuma Y, Nomura Y. Leptin regulates interleukin-1beta expression in the brain via the
STAT3-independent mechanisms. Brain Res. 2002; 949:139–146. [PubMed: 12213309]
Kannangara TS, Lucero MJ, Gil-Mohapel J, Drapala RJ, Simpson JM, Christie BR, van Praag H.
Running reduces stress and enhances cell genesis in aged mice. Neurobiol Aging. 2011; 32:2279–
2286. [PubMed: 20106549]
Kannangara TS, Webber A, Gil-Mohapel J, Christie BR. Stress differentially regulates the effects of
$watermark-text
voluntary exercise on cell proliferation in the dentate gyrus of mice. Hippocampus. 2009; 19:889–
897. [PubMed: 18958850]
Kempermann G, Fabel K, Ehninger D, Babu H, Leal-Galicia P, Garthe A, Wolf SA. Why and how
physical activity promotes experience-induced brain plasticity. Front Neurosci. 2010; 4:189.
[PubMed: 21151782]
Kempermann G, Gast D, Gage FH. Neuroplasticity in old age: sustained fivefold induction of
hippocampal neurogenesis by long-term environmental enrichment. Ann Neurol. 2002; 52:135–
143. [PubMed: 12210782]
Kimura M, Kodama T, Aguila MC, Zhang SQ, Inoue S. Granulocyte-macrophage colony-stimulating
factor modulates rapid eye movement (REM) sleep and non-REM sleep in rats. J Neurosci. 2000;
20:5544–5551. [PubMed: 10884338]
Kizaki T, Maegawa T, Sakurai T, Ogasawara JE, Ookawara T, Oh-ishi S, Izawa T, Haga S, Ohno H.
Voluntary exercise attenuates obesity-associated inflammation through ghrelin expressed in
$watermark-text
macrophages. Biochem Biophys Res Commun. 2011; 413:454–459. [PubMed: 21907183]

Kobilo T, Liu QR, Gandhi K, Mughal M, Shaham Y, van Praag H. Running is the neurogenic and
neurotrophic stimulus in environmental enrichment. Learn Mem. 2011; 18:605–609. [PubMed:
21878528]
Kohman RA, Rodriguez-Zas SL, Southey BR, Kelley KW, Dantzer R, Rhodes JS. Voluntary wheel
running reverses age-induced changes in hippocampal gene expression. PLoS One. 2011a;
6:e22654. [PubMed: 21857943]
Kohman RA, Deyoung EK, Bhattacharya TK, Peterson LN, Rhodes JS. Wheel running attenuates
microglia proliferation and increases expression of a proneurogenic phenotype in the hippocampus
of aged mice. Brain Behav Immun. 2011b; 26:803–810. [PubMed: 22056294]
Kolb B, Pedersen B, Ballermann M, Gibb R, Whishaw IQ. Embryonic and postnatal injections of
bromodeoxyuridine produce age-dependent morphological and behavioral abnormalities. J
Neurosci. 1999; 19:2337–2346. [PubMed: 10066283]
Kolls JK, Linden A. Interleukin-17 family members and inflammation. Immunity. 2004; 21:467–476.
[PubMed: 15485625]

Krabbe KS, Mortensen EL, Avlund K, Pilegaard H, Christiansen L, Pedersen AN, Schroll M,
Jorgensen T, Pedersen BK, Bruunsgaard H. Genetic priming of a proinflammatory profile predicts
low IQ in octogenarians. Neurobiol Aging. 2009; 30:769–781. [PubMed: 17913303]
Krabbe KS, Pedersen M, Bruunsgaard H. Inflammatory mediators in the elderly. Exp Gerontol. 2004;
39:687–699. [PubMed: 15130663]
Kronenberg G, Bick-Sander A, Bunk E, Wolf C, Ehninger D, Kempermann G. Physical exercise
prevents age-related decline in precursor cell activity in the mouse dentate gyrus. Neurobiol
Aging. 2006; 27:1505–1513. [PubMed: 16271278]
Kronenberg G, Reuter K, Steiner B, Brandt MD, Jessberger S, Yamaguchi M, Kempermann G.
Subpopulations of proliferating cells of the adult hippocampus respond differently to physiologic
neurogenic stimuli. J Comp Neurol. 2003; 467:455–463. [PubMed: 14624480]
$watermark-text
Kuhn HG, Dickinson-Anson H, Gage FH. Neurogenesis in the dentate gyrus of the adult rat: age-
related decrease of neuronal progenitor proliferation. J.Neurosci. 1996; 16:2027–2033. [PubMed:
8604047]
Kumar A, Rani A, Tchigranova O, Lee WH, Foster TC. Influence of late-life exposure to
environmental enrichment or exercise on hippocampal function and CA1 senescent physiology.
Neurobiol Aging. 2012; 33:828.e821–828.e817. [PubMed: 21820213]
Lambert TJ, Fernandez SM, Frick KM. Different types of environmental enrichment have discrepant
effects on spatial memory and synaptophysin levels in female mice. Neurobiol Learn Mem. 2005;
83:206–216. [PubMed: 15820856]
Latimer CS, Searcy JL, Bridges MT, Brewer LD, Popović J, Blalock EM, Landfield PW, Thibault O,
Porter NM. Reversal of glial and neurovascular markers of unhealthy brain aging by exercise in
middle-aged female mice. PLoS One. 2011; 6:e26812. [PubMed: 22046366]
Leasure JL, Decker L. Social isolation prevents exercise-induced proliferation of hippocampal
$watermark-text
progenitor cells in female rats. Hippocampus. 2009; 19:907–912. [PubMed: 19235230]

Lee J, Duan W, Long JM, Ingram DK, Mattson MP. Dietary restriction increases the number of newly
generated neural cells, and induces BDNF expression, in the dentate gyrus of rats. J Mol Neurosci.
2000; 15:99–108. [PubMed: 11220789]
Lee HJ, Kim C, Lee SJ. Alpha-synuclein stimulation of astrocytes: Potential role for
neuroinflammation and neuroprotection. Oxid Med Cell Longev. 2010; 3:283–287. [PubMed:
20972375]
Leuner B, Gould E, Shors TJ. Is there a link between adult neurogenesis and learning? Hippocampus.
2006; 16:216–224. [PubMed: 16421862]
Liu H, Jia D, Fu J, Zhao S, He G, Ling EA, Gao J, Hao A. Effects of granulocyte colony-stimulating
factor on the proliferation and cell-fate specification of neural stem cells. Neuroscience. 2009;
164:1521–1530. [PubMed: 19782730]
Liu YP, Lin HI, Tzeng SF. Tumor necrosis factor-alpha and interleukin-18 modulate neuronal cell fate
$watermark-text
in embryonic neural progenitor culture. Brain Res. 2005; 1054:152–158. [PubMed: 16054598]
Lugert S, Basak O, Knuckles P, Haussler U, Fabel K, Gotz M, Haas CA, Kempermann G, Taylor V,
Giachino C. Quiescent and active hippocampal neural stem cells with distinct morphologies
respond selectively to physiological and pathological stimuli and aging. Cell Stem Cell. 6:445–
456. [PubMed: 20452319]
Lum M, Croze E, Wagner C, McLenachan S, Mitrovic B, Turnley AM. Inhibition of neurosphere
proliferation by IFNgamma but not IFNbeta is coupled to neuronal differentiation.
J.Neuroimmunol. 2009; 206:32–38. [PubMed: 19027965]
Madronal N, Lopez-Aracil C, Rangel A, del Rio JA, Delgado-Garcia JM, Gruart A. Effects of enriched
physical and social environments on motor performance, associative learning, and hippocampal
neurogenesis in mice. PLoS One. 2010; 5:e11130. [PubMed: 20559565]
Magaki S, Mueller C, Dickson C, Kirsch W. Increased production of inflammatory cytokines in mild
cognitive impairment. Exp Gerontol. 2007; 42:233–240. [PubMed: 17085001]
Mastronardi CA, Srivastava V, Yu WH, Les Dees W, McCann SM. Lipopolysaccharide-induced leptin
synthesis and release are differentially controlled by alpha-melanocyte-stimulating hormone.
Neuroimmunomodulation. 2005; 12:182–188. [PubMed: 15905627]

Mawhinney LJ, de Vaccari Rivero JP, Dale GA, Keane RW, Bramlett HM. Heightened inflammasome
activation is linked to age-related cognitive impairment in Fischer 344 rats. BMC Neurosci.
12:123. [PubMed: 22133203]
McQuail JA, Banuelos C, LaSarge CL, Nicolle MM, Bizon JL. GABA(B) receptor GTP-binding is
decreased in the prefrontal cortex but not the hippocampus of aged rats. Neurobiol Aging. 2012;
33:1124 e1121–1112 e1121. [PubMed: 22169202]
Monje ML, Toda H, Palmer TD. Inflammatory blockade restores adult hippocampal neurogenesis.
Science. 2003; 302:1760–1765. [PubMed: 14615545]
Monje ML, Vogel H, Masek M, Ligon KL, Fisher PG, Palmer TD. Impaired human hippocampal
neurogenesis after treatment for central nervous system malignancies. Ann Neurol. 2007; 62:515–
520. [PubMed: 17786983]
$watermark-text
Morrison CD. Leptin signaling in brain: A link between nutrition and cognition? Biochim Biophys
Acta. 2009; 1792:401–408. [PubMed: 19130879]
Mustroph ML, Chen S, Desai SC, Cay EB, Deyoung EK, Rhodes JS. Aerobic exercise is the critical
variable in an enriched environment that increases hippocampal neurogenesis and water maze
learning in male C57BL/6J mice. Neuroscience. 2012; 219:62–71. [PubMed: 22698691]
Nichol KE, Poon WW, Parachikova AI, Cribbs DH, Glabe CG, Cotman CW. Exercise alters the
immune profile in Tg2576 Alzheimer mice toward a response coincident with improved cognitive
performance and decreased amyloid. J Neuroinflammation. 2008; 5:13. [PubMed: 18400101]
Novelli M, Pocai A, Skalicky M, Viidik A, Bergamini E, Masiello P. Effects of life-long exercise on
circulating free fatty acids and muscle triglyceride content in ageing rats. Exp Gerontol. 2004;
39:1333–1340. [PubMed: 15489056]
O'Callaghan RM, Griffin EW, Kelly AM. Long-term treadmill exposure protects against age-related
neurodegenerative change in the rat hippocampus. Hippocampus. 2009; 19:1019–1029. [PubMed:
$watermark-text
19309034]
Opal SM, DePalo VA. Anti-inflammatory cytokines. Chest. 2000; 117:1162–1172. [PubMed:
10767254]
Ormerod BK, Beninger RJ. Water maze versus radial maze: differential performance of rats in a
spatial delayed match-to-position task and response to scopolamine. Behav Brain Res. 2002;
128:139–152. [PubMed: 11796159]
Ormerod BK, Lee TT, Galea LA. Estradiol initially enhances but subsequently suppresses (via adrenal
steroids) granule cell proliferation in the dentate gyrus of adult female rats. J Neurobiol. 2003;
55:247–260. [PubMed: 12672021]
Ormerod BK, Lee TT, Galea LA. Estradiol enhances neurogenesis in the dentate gyri of adult male
meadow voles by increasing the survival of young granule neurons. Neuroscience. 2004;
128:645–654. [PubMed: 15381292]
Ousman SS, David S. MIP-1alpha, MCP-1, GM-CSF, and TNF-alpha control the immune cell
$watermark-text
response that mediates rapid phagocytosis of myelin from the adult mouse spinal cord. J
Neurosci. 2001; 21:4649–4656. [PubMed: 11425892]
Palmer TD, Willhoite AR, Gage FH. Vascular niche for adult hippocampal neurogenesis. J Comp
Neurol. 2000; 425:479–494. [PubMed: 10975875]
Parachikova A, Nichol KE, Cotman CW. Short-term exercise in aged Tg2576 mice alters
neuroinflammation and improves cognition. Neurobiol Dis. 2008; 30:121–129. [PubMed:
18258444]
Parenti A, Bellik L, Brogelli L, Filippi S, Ledda F. Endogenous VEGF-A is responsible for mitogenic
effects of MCP-1 on vascular smooth muscle cells. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004;
286:H1978–H1984. [PubMed: 14693680]
Park CC, Morel JC, Amin MA, Connors MA, Harlow LA, Koch AE. Evidence of IL-18 as a novel
angiogenic mediator. J Immunol. 2001; 167:1644–1653. [PubMed: 11466388]
Perez-Gonzalez R, Antequera D, Vargas T, Spuch C, Bolos M, Carro E. Leptin induces proliferation
of neuronal progenitors and neuroprotection in a mouse model of Alzheimer's disease. J
Alzheimers Dis. 24(Suppl 2):17–25. [PubMed: 21335656]

Ponomarev ED, Maresz K, Tan Y, Dittel BN. CNS-derived interleukin-4 is essential for the regulation
of autoimmune inflammation and induces a state of alternative activation in microglial cells. J
Neurosci. 2007; 27:10714–10721. [PubMed: 17913905]
Prechel MM, Halbur L, Devata S, Vaidya AM, Young MR. Increased interleukin-6 production by
cerebral cortical tissue of adult versus young mice. Mech Ageing Dev. 1996; 92:185–194.
[PubMed: 9080398]
Qin L, He J, Hanes RN, Pluzarev O, Hong JS, Crews FT. Increased systemic and brain cytokine
production and neuroinflammation by endotoxin following ethanol treatment. J
Neuroinflammation. 2008; 5:10. [PubMed: 18348728]
Rachal Pugh C, Fleshner M, Watkins LR, Maier SF, Rudy JW. The immune system and memory
consolidation: a role for the cytokine IL-1beta. Neurosci Biobehav Rev. 2001; 25:29–41.
$watermark-text
[PubMed: 11166076]
Rafnsson SB, Deary IJ, Smith FB, Whiteman MC, Rumley A, Lowe GD, Fowkes FG. Cognitive
decline and markers of inflammation and hemostasis: the Edinburgh Artery Study. J Am Geriatr
Soc. 2007; 55:700–707. [PubMed: 17493189]
Reichenberg A, Yirmiya R, Schuld A, Kraus T, Haack M, Morag A, Pollmacher T. Cytokine-
associated emotional and cognitive disturbances in humans. Arch Gen Psychiatry. 2001; 58:445–
452. [PubMed: 11343523]
Robinson S, Tani M, Strieter RM, Ransohoff RM, Miller RH. The chemokine growth-regulated
oncogene-alpha promotes spinal cord oligodendrocyte precursor proliferation. J Neurosci. 1998;
18:10457–10463. [PubMed: 9852583]
Rola R, Fishman K, Baure J, Rosi S, Lamborn KR, Obenaus A, Nelson GA, Fike JR. Hippocampal
neurogenesis and neuroinflammation after cranial irradiation with (56)Fe particles. Radiat Res.
2008; 169:626–632. [PubMed: 18494546]
$watermark-text
Rosa Neto JC, Lira FS, Zanchi NE, Oyama LM, Pimentel GD, Santos RV, Seelaender M, Oller do
Nascimento CM. Acute exhaustive exercise regulates IL-2, IL-4 and MyoD in skeletal muscle
but not adipose tissue in rats. Lipids Health Dis. 2011; 10:97. [PubMed: 21668966]
Ryu HJ, Kim JE, Kim MJ, Kwon HJ, Suh SW, Song HK, Kang TC. The protective effects of
interleukin-18 and interferon-gamma on neuronal damages in the rat hippocampus following
status epilepticus. Neuroscience. 170:711–721. [PubMed: 20674684]
Sarraf P, Frederich RC, Turner EM, Ma G, Jaskowiak NT, Rivet DJ, Flier JS, Lowell BB, Fraker DL,
Alexander HR. Multiple cytokines and acute inflammation raise mouse leptin levels: potential
role in inflammatory anorexia. J Exp Med. 1997; 185:171–175. [PubMed: 8996253]
Shetty AK, Hattiangady B, Shetty GA. Stem/progenitor cell proliferation factors FGF-2, IGF-1, and
VEGF exhibit early decline during the course of aging in the hippocampus: role of astrocytes.
Glia. 2005; 51:173–186. [PubMed: 15800930]
Shin WH, Lee DY, Park KW, Kim SU, Yang MS, Joe EH, Jin BK. Microglia expressing
$watermark-text
interleukin-13 undergo cell death and contribute to neuronal survival in vivo. Glia. 2004;
46:142–152. [PubMed: 15042582]
Siwak-Tapp CT, Head E, Muggenburg BA, Milgram NW, Cotman CW. Neurogenesis decreases with
age in the canine hippocampus and correlates with cognitive function. Neurobiol Learn Mem.
2007; 88:249–259. [PubMed: 17587610]
Snyder JS, Glover LR, Sanzone KM, Kamhi JF, Cameron HA. The effects of exercise and stress on the
survival and maturation of adult-generated granule cells. Hippocampus. 2009; 19:898–906.
[PubMed: 19156854]
Speisman RB, Kumar A, Rani A, Pastoriza JM, Severance JE, Foster TC, Ormerod BK.
Environmental enrichment restores neurogenesis and rapid acquisition in aged rats. Neurobiol
Aging. 2012
Steiner B, Zurborg S, Horster H, Fabel K, Kempermann G. Differential 24 h responsiveness of Prox1-
expressing precursor cells in adult hippocampal neurogenesis to physical activity, environmental
enrichment, and kainic acid-induced seizures. Neuroscience. 2008; 154:521–529. [PubMed:
18502050]
Stephens CL, Toda H, Palmer TD, DeMarse TB, Ormerod BK. Adult neural progenitor cells reactivate
superbursting in mature neural networks. Exp Neurol. 2012; 234:20–30. [PubMed: 22198136]

Stranahan AM, Khalil D, Gould E. Social isolation delays the positive effects of running on adult
neurogenesis. Nat Neurosci. 2006; 9:526–533. [PubMed: 16531997]
Suh H, Consiglio A, Ray J, Sawai T, D'Amour KA, Gage FH. In vivo fate analysis reveals the
multipotent and self-renewal capacities of Sox2+ neural stem cells in the adult hippocampus.
Cell Stem Cell. 2007; 1:515–528. [PubMed: 18371391]
Tambuyzer BR, Ponsaerts P, Nouwen EJ. Microglia: gatekeepers of central nervous system
immunology. J Leukoc Biol. 2009; 85:352–370. [PubMed: 19028958]
Tan YF, Rosenzweig S, Jaffray D, Wojtowicz JM. Depletion of new neurons by image guided
irradiation. Front Neurosci. 2011; 5:59. [PubMed: 21541259]
Tang K, Xia FC, Wagner PD, Breen EC. Exercise-induced VEGF transcriptional activation in brain,
lung and skeletal muscle. Respir Physiol Neurobiol. 2010; 170:16–22. [PubMed: 19853064]
$watermark-text
Turrin NP, Gayle D, Ilyin SE, Flynn MC, Langhans W, Schwartz GJ, Plata-Salaman CR. Pro-
inflammatory and anti-inflammatory cytokine mRNA induction in the periphery and brain
following intraperitoneal administration of bacterial lipopolysaccharide. Brain Res Bull. 2001;
54:443–453. [PubMed: 11306198]
Uylings HB, van Eden CG, Hofman MA. Morphometry of size/volume variables and comparison of
their bivariate relations in the nervous system under different conditions. J Neurosci Methods.
1986; 18:19–37. [PubMed: 3540468]
Vallieres L, Campbell IL, Gage FH, Sawchenko PE. Reduced hippocampal neurogenesis in adult
transgenic mice with chronic astrocytic production of interleukin-6. J.Neurosci. 2002; 22:486–
492. [PubMed: 11784794]
Van der Borght K, Havekes R, Bos T, Eggen BJ, Van der Zee EA. Exercise improves memory
acquisition and retrieval in the Y-maze task: relationship with hippocampal neurogenesis. Behav
Neurosci. 2007; 121:324–334. [PubMed: 17469921]
$watermark-text
van Praag H, Christie BR, Sejnowski TJ, Gage FH. Running enhances neurogenesis, learning, and
long-term potentiation in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 1999; 96:13427–13431. [PubMed:
10557337]
van Praag H, Schinder AF, Christie BR, Toni N, Palmer TD, Gage FH. Functional neurogenesis in the
adult hippocampus. Nature. 2002; 415:1030–1034. [PubMed: 11875571]
van Praag H, Shubert T, Zhao C, Gage FH. Exercise enhances learning and hippocampal neurogenesis
in aged mice. J Neurosci. 2005; 25:8680–8685. [PubMed: 16177036]
Villeda SA, Luo J, Mosher KI, Zou B, Britschgi M, Bieri G, Stan TM, Fainberg N, Ding Z, Eggel A,
Lucin KM, Czirr E, Park JS, Couillard-Després S, Aigner L, Li G, Peskind ER, Kaye JA, Quinn
JF, Galasko DR, Xie XS, Rando TA, Wyss-Coray T. The ageing systemic milieu negatively
regulates neurogenesis and cognitive function. Nature. 2011; 477:90–94. [PubMed: 21886162]
Vorhees CV, Williams MT. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of
learning and memory. Nat Protoc. 2006; 1:848–858. [PubMed: 17406317]
$watermark-text
Weaver JD, Huang MH, Albert M, Harris T, Rowe JW, Seeman TE. Interleukin–6 and risk of
cognitive decline: MacArthur studies of successful aging. Neurology. 2002; 59:371–378.
[PubMed: 12177370]
West MJ, Slomianka L, Gundersen HJ. Unbiased stereological estimation of the total number of
neurons in thesubdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Anat Rec. 1991;
231:482–497. [PubMed: 1793176]
Xu YZ, Nygard M, Kristensson K, Bentivoglio M. Regulation of cytokine signaling and T-cell
recruitment in the aging mouse brain in response to central inflammatory challenge. Brain Behav
Immun. 2010; 24:138–152. [PubMed: 19765643]
Yaguchi T, Nagata T, Yang D, Nishizaki T. Interleukin-18 regulates motor activity, anxiety and spatial
learning without affecting synaptic plasticity. Behav Brain Res. 206:47–51. [PubMed: 19729040]
Ye SM, Johnson RW. Increased interleukin-6 expression by microglia from brain of aged mice. J
Neuroimmunol. 1999; 93:139–148. [PubMed: 10378877]
Zhong L, Roybal J, Chaerkady R, Zhang W, Choi K, Alvarez CA, Tran H, Creighton CJ, Yan S,
Strieter RM, Pandey A, Kurie JM. Identification of secreted proteins that mediate cell-cell
interactions in an in vitro model of the lung cancer microenvironment. Cancer Res. 2008;
68:7237–7245. [PubMed: 18757440]

Ziv Y, Ron N, Butovsky O, Landa G, Sudai E, Greenberg N, Cohen H, Kipnis J, Schwartz M. Immune
cells contribute to the maintenance of neurogenesis and spatial learning abilities in adulthood.
Nat Neurosci. 2006; 9:268–275. [PubMed: 16415867]
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text

Highlights
Daily exercise may rejuvenate age-impaired cognition and hippocampal neurogenesis by
modulating immune and neuroimmune signaling pathways.
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text

$watermark-text
Gambar 1. Jadwal penelitian

Tikus jantan F344 (18 mo) dipilih secara acak sebagai satu kelompok perlakuan (running) (n=6) yakni berlari untuk
mendapatkan makanan selama 18 minggu waktu percobaan atau kelompk kontrol tnapa perlakuan berlari (sedentary) (n=6)
yang diberi makan ad libitum. Semua tikus menjalani latihan water maze (latihan labirin) dan diuji pada minggu ke-13
diikuti dengan latihan dan diuji untuk menghindari penghalang/hambatan pada minggu ke-14 . Pada minggu ke-16, tikus
disuntikan BrdU (50mg/kg/hari; i.p) perharinya selama 5 hari kemudian dikorbankan pada minggu ke-18 untuk mengukur
24 kekebalan tubuh (immune) dan neuroimmune sutokin bersamaan dengan neurogenesis hippocampal
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 2. kelompok perlakuan (runners) dan kelompok kontrol menunjukan kesamaan pada visible platform task
Data diatas menunjukkan nilai kelompok (± S.E.M). lingkaran abu-abu menggambarkan nilai kelompok kontrol dan persegi
hitam menggambarkan kondisi nilai pelari (perlakuan). (A) kelompok perlakuan dan kelompok kontrol ditempatkan dan
berlari di visible water maze platform dengan kemampuan yang sama (efek interaksi: p=0.90). perbandingan dilakukan
dengan menurunkan pathlength pada blok ke-5 dibandingkan dengan blok ke-1 pada kelompok kontrol (*p<0.50) dan
kelompok perlakuan (*p<0.50), menghasilkan kesamaan sensorimotor dan kemampuan prosedural diantara kelompok. (B)
Tanpa memperhatikan riwayat latihan (efek interaksi: p=0.20). jumlah waktu tikus diblok diturunkan dengan cara berenang
disekitar bagian luar annulus water maze sebagai dimulainya latihan(blok 1,2> 3 dan 5 dan blok 2>4: semua nilai p<0.05).
(C) Meskipun kelompok perlakuan cenderung untuk berenang lebih cepat di semua visible platform training blok yang
dikombinasi (p=0.08) secara signifikan semua (kelompok) tikus (efek interaksi: p=0.83) mengalami penurunan kecepatan
berenang pada percobaan (across trial) (p<0.01). secara spesifik, tikus yang telah berusia (aged) berenang lebih cepat di
blok 1 dibanding 3,4,5,dan pada blok 2 dibandingkan blok 5 (smeua nilai p<0.05)
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 3. kelompok perlakuan (conditioned runners) mengungguli kelompok kontrol pada water maze hidden
platform task
Data diatas menunjukkan nilai kelompok (± S.E.M). lingkaran abu-abu menggambarkan nilai kelompok kontrol dan persegi
hitam menggambarkan kelompok conditioned runner (perlakuan). (A) Semua tikus (kelompok) dikombinasikan berenang
lebih secara langsung di hidden water maze platform sebagai permulaan training ( blok 1>3 dan 4, semua nilai p<0.05),
tetapi kelompok perlakuan (conditioned runners) berenang lebih langsung dibandingkan kontrol tanpa memperhatikan blok
$watermark-text
training (p<0.01). terutama pada blok training ke-1, 4, 5 (semua nilai p<0.05). karena kelompok kontrol (runners)
mengungguli kelompok kontrol pada blok training ke-1, kami mengkonfirmasi untuk rata-rata pathlength slope yang curang
untuk kelompok perlakuan (runners) ( -130.22 ± 37.53 cm/blok) dibandingkan kelompok kontrol (-5.36 ± 35.65 cm/blok)
pada across hidden training block 2-5 (garis titik abu-abu; p<0.05). Hasil uji T-test berpasangan, bahwa tikus memiliki
kesamaan pathlength pada blok training ke 5 dan 6 setelah diberikan 1 jam probe trial untuk memperkuat hubungan antara
lokasi platform dan melarikan diri dari kolam renang (p=0.55). (B) meskipun kelompok perlakuan (conditioned runners)
secara signifikan menghabiskan waktu lebih sedikit di bagian luar annulus dibandingkan kontrol pada semua kombinasi
blok (p<0.05), semua kombinasi tikus dikurangi 1% dari waktu yang dihabiskan pada bagian luar annulus pada maze ( blok
1, 2 > 5; semua nilai p<0.05). (C) kelompok perlakuan ( conditioned runners swam) memiliki signifikasi lebih cepat
dibandingkan kelompok kontrol dalam hal berenang di platform tersembunyi pada blok yang tela dikombinasi (p<0.01) dan
sementara kelompok tersebut (perlakuan) mempertahankan kecepatan berenang dalam kondisi lebih cepat pada uji coba,
kelompok kontrol secara signifikan berenang lebih lambat daripada kelompok perlakuan di blok 2-5 (nilai semua p<0.01)
dan lebih lambat dibandingkan ketika berenang pada blok latihan pertama (blok 1>2,3,4,5; nilai semua p<0.01).
$watermark-text
Gambar4. kelompok kontrol (conditioned runners) memiliki memori yang lebih baik di water maze pada inhibitory
avoidance task
$watermark-text
(A) A 60 detik probe trial dilakukan segera setelah 24 jam pasca final hidden platform trial dan rata-rata persentase (%)
waktu yang dihabiskan pada tujuan kuadran (± S.E.M) digambarkan pada kelompok kontrol (batangan abu-abu) dan
kelompok perlakuan (conditioned runners) ( batangan hitam). Pada probe langsung (immediate probe) (**p=0.0003) dan
pada 24 jam probe (*p=0.026), kelompok perlakuan secara signifikan menghabiskan lebih banyak waktu pada tujuan
kuadran dibandingkan kelompok kontrol. (B) Skor indek diskriminasi individu (DI) dihitung pada kelompok kontrol
(lingkaran abu-abu) dan kelompok perlakuan (conditioned runner rats) (persegi hitam) dan kemudian di plotted . Skor
positif menggambarkan diskriminasi tujuan (goal) kuadran yang lebih baik (atau sebaliknya). Kelompok perlakuan
(conditioned runners) menghasilkan lebih baik untuk skor DI pada immediate (*p<0.01) dan 24 jam (*p<0.01) water maze
probe trials dibandingkan kelompok kontrol. (C) Akhirnya, tikus yang dilatih (batangan putih) dan tikus yang di uji selama
1 jam (batangan abu-abu terang) dan 24 jam (batangan abu-abu gelap) setelah di training pada inhibitory avoidance task.
Kelompok perlakuan dan kelompok kontrol dimasukan kebagian gelap dari kamar inhibitory avoidance untuk diberkan
rangsangan yang sama dengan cepat selama fase akuisisi (p=0.90). meskipun kedua kelompok memiliki nilai yang sama
pada 1 jam latensi retensi, kelompok perlakuan secara signifikan lebih lama dibandingkan kelompok kontrol dalam
$watermark-text
memasuki kembali 24 jam bagian gelap stelah training (p<0.05).

$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 5. Tikus pelari berpotensi terhadap hippocampal neurogenesis pada tikus usia tua.
(A) Mikrograf cahaya baru menunjukan (BrdU+, didalam coklat) sel terletak melalui GCL dan SGZ tikus berusia dibawah
10x diungkapkan oleh DAB. (B) menunjukkan bagian dari BrdU+ sel digambarkan dalam (A) dibawah tujuan 40x digunakan
untuk menghitung (C dan D) pada gambar confocal sampel sel-sel baru (BrdU/DAPI+, putih dan merah) mengekspresikan
protein neuronal DCX (warna biru) dan neun (hijau; |C| atau GFAP protein astrosit (warna biru; |D|) insets menunjukkan
masing-masing saluran independen dan skala bar mewakili 10µm. (A,B, dan E) lebih BrdU+ sel yang terdeteksi dalam girus
dentate dikondisikan vs kontrol ( *P<0,01) (C,D, dan F) persentase serupandari sel-sel baru di girus dentate dikondisikan.
Pelari dan kontrol saraf dewasa dinyatakan (DCXf (Neun+), transisi saraf (DCX/Neun+) saraf berumur (Neun+),
oligodendroglial (NG2+) atau Astroglial (GFAP+) protein. Konsisten dengan periode kelangsungan hidup -2 minggu, sel-sel
baru yang paling mengungkapakan fenotipe saraf yang matang, sehingga diikuti oleh fenotif saraf dan transisi. (G baru
perkiraan total ) jumlah neuron itu secara signifikan lebih tinggi dalam ber-pelari dibandingkan kontrol (*p<0,01). Data yang
bererti kelompok ±S.E.M diperoleh dari ber-pelari (bar hitam ) dan kontrol (bar abu-abu)
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 6. Probe uji partitur berhubungan dengan ukuran neurogenesis oada tikus usia tua
Spearman rank correlations pada total baru (BrdU+) DCX dan/atau Neun + nomor neuron dan nilai DI diperoleh tikus kontrol (kotak
abu-abu terang) dan ber-pelari (kotak hitam). Jumlah neuron baru cenderung untuk berkorelasi dengan skor DI (A) diperoleh dari
immediate probe trial (p= 0,008) dan nilai DI (B) yang diperoleh dari 24 jam probe trial ((p= 0.059)
$watermark-text
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 7. Cluster sitokin terdeteksi dalam serum, hipokampus dan sampel kortikal yang diperoleh dari tikus usia tua
Untuk mengkonfirmasi dan memperluas jalur sitokin dikenal, kita diperiksa sitokin dengan konsentrasi yang berubah secara
terkoordinasi. Pasangan sitokin diplotkan dalam urutan berdasarkan spearman nilai r dianggap signifikan secara statistik setelah
koreksi Bonferroni. Jika salah satu sitokin dalam sepasang berkorelasi sekitar yang akan dikelompokkan sudah bagian dari
merencanakan kelompok , dan sitokin unplotted berkorelasi dengan semua sitokin dalam di merencanakan kelompok , maka
pasangan telah ditambahkan kekelompok baru.protein adalah kode warna oleh fungsi utama diketahui mereka dan garis hijau dan
merah mewakili korelasi positif dan negatifmasing-masin. Kami mendeteksi 2 serum kelompok sitokin, 8 kelompok hippocampus
sitokin dan 4 kelompok kortikal pada tikus penuaan. Perhatikan bahwa tidak ada antara kompartemen kelompok indikasi jalur sinyal
kekebalan ke otak termodulasi dengan menjalnkan pada tikus berusia terdeteksi.
$watermark-text
$watermark-text
Gambar 8. Beberapa sitokin termodulasi secara terkoordinasi oleh tikus pelari pada tikus usia tua dan berhubungan dengan
$watermark-text
tindakan perilaku yang bergantung pada hippocampal dan hippocampal neurogenesis

Spearman rank correlations dijalankan pada sitokin kekebalan tubuh dan neuroimmune dengan konsentrasi yang
termodulasi dengan menjalankan (lihat tabel 1), skor DI labirin air, penghindaran penghambatan keadaan yang tenggelam
retensi dan jumlah total neuron baru. Sitokin diubah oleh latihan sehari-hari, beberapa yang termodulasi secara
terkoordinasi. Sitokin adalah kode warna untuk menujukkan prime, biasanya sistemik, fungsi mereka dikenal. Konsentrasi
meningkat menjalankan diplot dalam lingkaran hijau sementara mereka yang menurunkan diplot dlam lingkaran merah.
Sitokin berkorelasi negatif terkait dengan garis-garis merah sementara positif sitokin berkorelasi terkait dengan garis-garis
hijau. (B) menggambarkan hubungan antara sitokin, tindakan perilaku dan tindakan dari neurogenesis yang termodulasi
dengan menjalankan. Labirin air skor indeks deskriminasi, penghambatan menghindri 24 h latency retensi dan nomor
$watermark-text
neuron baru secara signifikan dipengaruhi olehdikondisikan berjalan. Perhatikan bahwa hanya korelasi yang signifikan
secara statistik (p <0,005) akan ditampilkan.
T
a
b
l
e
1
Beberapa hippocampal (pg/mg), cortical (pg/mg) and circulating (pg/mL) cytokines dimodulasi oleh latihan sehari-hari pada tikus
usia tua. Mean (±S.E.M.) values are reported.
SERUM HIPPOCAMPUS CORTEX
Controls Runners Controls Runners Controls Runners

Eotaxin 55.06 ± 13.76 196.23 ± 147.02 2.37 ± 0.76 3.46 ± 0.87 1.90 ± 0.16 1.73 ± 0.27
G-CSF 0±0 2.23 ± 2.23 0±0 0±0 0.25 ± 0.04 0.17 ± 0.07
GM-CSF 0±0 0±0 0±0 0±0 1.09 ± 0.11 0.99 ± 0.33
GRO-KC 1322.52 ± 219.98 776.89 ± 154.63+ 13.36 ± 2.57 25.83 ± 5.55+ 9.82 ± 0.80 10.54 ± 2.28
IFN-γ 26.41 ± 18.51 415.65 ± 398.82 0±0 1.52 ± 1.29 0±0 0±0
IL-1α 0±0 233.95 ± 233.95 2.55 ± 2.55 14.81 ± 7.03 5.60 ± 1.06 4.96 ± 1.58
IL-1β 200.54 ± 174.94 222.88 ± 182.13 40.44 ± 3.46 22.27 ± 4.38** 13.07 ± 2.38 13.56 ± 1.82
IL-2 0±0 0±0 8.62 ± 5.09 13.73 ± 4.28 27.50 ± 1.75 22.47 ± 4.18
IL-4 0±0 47.56 ± 41.81 2.73 ± 0.90 4.88 ± 0.99 3.17 ± 0.33 2.63 ± 0.53
IL-5 0±0 18.32 ± 13.88 1.46 ± 1.01 1.73 ± 0.94 4.54 ± 0.56 3.84 ± 0.91
IL-6 67.57 ± 21.94 537.54 ± 498.29 17.31 ± 8,12 30.14 ± 10.05 14.02 ± 1.82 16.28 ± 4.19
IL-9 243.99 ± 137.04 190.51 ± 111.29 491.60 ± 301.67 588.73 ± 267.64 396.14 ± 50.08 385.10 ± 86.51
IL-10 59.89 ± 59.89 59.98 ± 59.98 0±0 0±0 4.56 ± 0.37 4.52 ± 1.78
IL-12 38.77 ± 21.73 68.30 ± 62.32 5.13 ± 1.50 7.60 ± 2.04 19.58 ± 3.29 17.99 ± 3.55
IL-13 108.00 ± 38.54 332.52 ± 282.22 2.68 ± 2.06 9.42 ± 3.66 6.06 ± 0.25 5.13 ± 1.05
IL-17 20.47 ± 8.29 29.24 ± 19.27 0.77 ± 0.40 0.68 ± 0.38 0.57 ± 0.09 0.48 ± 0.17
IL-18 351.01 ± 189.13 789.49 ± 422.74 105.42 ± 31.38 209.72 ± 28.51* 77.38 ± 3.90 70.00 ± 10.25
IP-10 0±0 53.56 ± 53.56 0±0 5.72 ± 5.00 1.57 ± 0.11 1.41 ± 0.19
Leptin 10001.90 ± 850.70 5414.09 ± 743.34** 17.84 ± 5.15 19.97 ± 6.43 10.39 ± 0.51 9.52 ± 1.86
MCP-1 719.92 ± 109.32 323.09 ± 134.99* 113.92 ± 68.04 138.22 ± 49.40 51.23 ± 3.85 39.93 ± 8.78
MIP-1α 5.67 ± 2.25 9.42 ± 6.61 0.61 ± 0.25 4.05 ± 3.09 0.34 ± 0.02 0.43 ± 0.09
RANTES 18364.54 ± 1635.46 11780.8 ± 3208.50 0±0 13.49 ± 6.72 17.22 ± 1.86 42.96 ± 16.84
TNF-α 0±0 2.40 ± 1.52 2.44 ± 1.09 3.27 ± 1.41 2.28 ± 0.06 2.20 ± 0.61
VEGF 21.80 ± 21.80 23.38 ± 23.38 3.46 ± 1.52 6.46 ± 2.68 1.91 ± 0.25 0.98 ± 0.33+
**
p<0.01,
Table 2
Spearman rank correlation coefficients (rs) between cytokine pairs detected in (A) serum, (B) hippocampal and (C) cortical compartments reveal clusters (see Fig. 7).
Speisman et al.
(A) SERUM
eotaxin GRO-KC IFN-γ IL-1β IL-6 IL-9 IL-10 IL-12 IL-13 IL-17 IL-18 leptin MCP-1 MIP-1α RANTES VEGF
eotaxin −0.06 0.67 −0.61 0.82 −0.12 −0.36 0.75 0.72 0.35 −0.57 −0.53 −0.08 −0.47 −0.09 −0.26
GRO-KC −0.06 0.07 −0.28 0.14 0.21 0.42 −0.04 −0.03 0.17 −0.04 0.56 0.96* 0.67 0.85 −0.24
IFN-γ 0.67 0.07 −0.46 0.58 −0.33 0.25 0.34 0.57 0.00 −0.46 −0.43 0.01 −0.03 0.03 −0.18
IL-1β −0.61 −0.28 −0.46 −0.52 0.44 0.14 −0.51 −0.55 −0.36 0.83 0.22 −0.27 −0.01 −0.48 0.51
IL-6 0.82 0.14 0.58 −0.52 −0.16 −0.35 0.85 0.88* 0.65 −0.52 −0.28 0.10 −0.23 0.14 −0.04
IL-9 −0.12 0.21 −0.33 0.44 −0.16 −0.04 −0.15 −0.47 −0.18 0.26 0.29 0.30 −0.11 −0.01 0.03
IL-10 −0.36 0.42 0.25 0.14 −0.35 −0.04 −0.60 −0.38 −0.46 0.22 0.02 0.41 0.69 0.40 −0.22
IL-12 0.75 −0.04 0.34 −0.51 0.85 −0.15 −0.60 0.85 0.69 −0.47 −0.15 −0.09 −0.55 −0.08 0.12
IL-13 0.72 −0.03 0.57 −0.55 0.88* −0.47 −0.38 0.85 0.55 −0.51 −0.17 −0.08 −0.37 0.04 0.04
IL-17 0.35 0.17 0.00 −0.36 0.65 −0.18 −0.46 0.69 0.55 −0.38 0.03 0.12 −0.05 0.21 −0.07
IL-18 −0.57 −0.04 −0.46 0.83 −0.52 0.26 0.22 −0.47 −0.51 −0.38 0.31 0.01 0.17 −0.35 0.61
leptin −0.53 0.56 −0.43 0.22 −0.28 0.29 0.02 −0.15 −0.17 0.03 0.31 0.65 0.26 0.44 0.29
MCP-1 −0.08 0.96* 0.01 −0.27 0.10 0.30 0.41 −0.09 −0.08 0.12 0.01 0.65 0.73 0.83 −0.20
MIP-1α −0.47 0.67 −0.03 −0.01 −0.23 −0.11 0.69 −0.55 −0.37 −0.05 0.17 0.26 0.73 0.68 −0.16
RANTES −0.09 0.85 0.03 −0.48 0.14 −0.01 0.40 −0.08 0.04 0.21 −0.35 0.44 0.83 0.68 −0.50
VEGF −0.26 −0.24 −0.18 0.51 −0.04 0.03 −0.22 0.12 0.04 −0.07 0.61 0.29 −0.20 −0.16 −0.50
(B) HIPPOCAMPUS
eotaxin GRO-KC IL-1α IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-9 IL-12 IL-13 IL-17 IL-18 leptin MCP-1 MIP-1α RANTES TNF-α VEGF
eotaxin 0.79 0.77 −0.10 0.84 0.84 0.81 0.88 0.85 0.89* 0.86 0.68 0.70 0.69 0.79 0.78 0.36 0.89* 0.82
GRO-KC 0.79 0.78 −0.25 0.90* 0.86 0.72 0.88 0.70 0.74 0.77 0.63 0.85 0.42 0.82 0.75 0.79 0.80 0.87
IL-1α 0.77 0.78 −0.03 0.69 0.66 0.69 0.85 0.65 0.83 0.75 0.56 0.71 0.64 0.56 0.70 0.60 0.69 0.72
IL-1β −0.10 −0.25 −0.03 −0.10 −0.30 0.13 −0.18 0.14 −0.05 −0.27 0.28 −0.60 0.01 0.06 0.04 −0.36 0.03 0.07
IL-2 0.84 0.90* 0.69 −0.10 0.90* 0.92* 0.84 0.83 0.79 0.68 0.77 0.68 0.42 0.95* 0.92* 0.53 0.94* 0.90*
IL-4 0.84 0.86 0.66 −0.30 0.90* 0.83 0.90* 0.79 0.78 0.66 0.68 0.70 0.47 0.86 0.80 0.56 0.86 0.87
Page 40
(B) HIPPOCAMPUS
eotaxin GRO-KC IL-1α IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-9 IL-12 IL-13 IL-17 IL-18 leptin MCP-1 MIP-1α RANTES TNF-α VEGF
Speisman et al.
IL-5 0.81 0.72 0.69 0.13 0.92* 0.83 0.77 0.88 0.78 0.57 0.88 0.43 0.44 0.89* 0.93* 0.33 0.91* 0.90*
IL-6 0.88 0.88 0.85 −0.18 0.84 0.90* 0.77 0.80 0.87 0.70 0.59 0.75 0.67 0.80 0.79 0.56 0.83 0.81
IL-9 0.85 0.70 0.65 0.14 0.83 0.79 0.88 0.80 0.71 0.55 0.88 0.40 0.59 0.88 0.84 0.12 0.82 0.87
IL-12 0.89* 0.74 0.83 −0.05 0.79 0.78 0.78 0.87 0.71 0.74 0.58 0.68 0.81 0.71 0.84 0.40 0.91* 0.72
IL-13 0.86 0.77 0.75 −0.27 0.68 0.66 0.57 0.70 0.55 0.74 0.49 0.84 0.49 0.53 0.54 0.58 0.69 0.70
IL-17 0.68 0.63 0.56 0.28 0.77 0.68 0.88 0.59 0.88 0.58 0.49 0.26 0.33 0.82 0.80 0.08 0.75 0.90*
IL-18 0.70 0.85 0.71 −0.60 0.68 0.70 0.43 0.75 0.40 0.68 0.84 0.26 0.45 0.50 0.53 0.83 0.61 0.56
leptin 0.69 0.42 0.64 0.01 0.42 0.47 0.44 0.67 0.59 0.81 0.49 0.33 0.45 0.41 0.59 0.05 0.62 0.38
MCP-1 0.79 0.82 0.56 0.06 0.95* 0.86 0.89* 0.80 0.88 0.71 0.53 0.82 0.50 0.41 0.89* 0.38 0.91* 0.90*
MIP-1α 0.78 0.75 0.70 0.04 0.92* 0.80 0.93* 0.79 0.84 0.84 0.54 0.80 0.53 0.59 0.89* 0.31 0.93* 0.80
RANTES 0.36 0.79 0.60 −0.36 0.53 0.56 0.33 0.56 0.12 0.40 0.58 0.08 0.83 0.05 0.38 0.31 0.36 0.49
TNF-α 0.89* 0.80 0.69 0.03 0.94* 0.86 0.91* 0.83 0.82 0.91* 0.69 0.75 0.61 0.62 0.91* 0.93* 0.36 0.85
VEGF 0.82 0.87 0.72 0.07 0.90* 0.87 0.90* 0.81 0.87 0.72 0.70 0.90* 0.56 0.38 0.90* 0.80 0.49 0.85
(C) CORTEX
eotaxin G-CSF GM-CSF GRO-KC IL-1α IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-9 IL-10 IL-12 IL-13 IL-17 IL-18 IP-10 leptin MCP-1 MIP-1α RANTES TNF-α VEGF
eotaxin 0.54 0.82 0.06 0.55 0.25 0.70 0.80 0.64 0.47 0.68 0.82 0.54 0.88 0.52 0.70 0.68 0.63 0.12 0.37 −0.23 0.60 0.83
G-CSF 0.54 0.41 0.62 0.63 0.15 0.58 0.62 0.48 0.58 0.17 0.44 0.63 0.57 0.48 0.30 0.68 0.71 −0.31 0.53 −0.12 0.63 0.72
GM-CSF 0.82 0.41 0.09 0.71 0.19 0.91* 0.84 0.45 0.55 0.62 0.93* 0.61 0.87 0.69 0.92* 0.73 0.55 0.03 0.18 −0.33 0.72 0.65
GRO-KC 0.06 0.62 0.09 0.29 0.16 0.19 0.31 0.24 0.05 −0.15 0.05 0.42 0.27 −0.09 0.14 0.56 0.55 −0.55 0.71 0.16 0.61 0.19
IL-1α 0.55 0.63 0.71 0.29 −0.25 0.80 0.87 0.66 0.73 0.47 0.67 0.82 0.75 0.74 0.62 0.52 0.38 0.14 0.10 −0.46 0.55 0.56
IL-1β 0.25 0.15 0.19 0.16 −0.25 0.10 −0.06 −0.28 0.03 0.19 0.35 −0.13 0.15 0.08 0.16 0.25 0.51 −0.50 0.50 −0.16 0.35 0.15
IL-2 0.70 0.58 0.91* 0.19 0.80 0.10 0.80 0.41 0.55 0.52 0.82 0.60 0.75 0.76 0.82 0.71 0.51 0.02 0.06 −0.38 0.75 0.73
IL-4 0.80 0.62 0.84 0.31 0.87 −0.06 0.80 0.82 0.59 0.65 0.83 0.83 0.95* 0.56 0.71 0.67 0.57 0.20 0.33 −0.44 0.67 0.68
IL-5 0.64 0.48 0.45 0.24 0.66 −0.28 0.41 0.82 0.43 0.64 0.51 0.75 0.75 0.24 0.37 0.30 0.30 0.35 0.24 −0.29 0.38 0.49
IL-6 0.47 0.58 0.55 0.05 0.73 0.03 0.55 0.59 0.43 0.34 0.64 0.72 0.60 0.80 0.45 0.33 0.41 −0.19 0.12 −0.29 0.32 0.38
IL-9 0.68 0.17 0.62 −0.15 0.47 0.19 0.52 0.65 0.64 0.34 0.77 0.32 0.63 0.51 0.43 0.25 0.38 0.39 0.12 −0.55 0.25 0.35
IL-10 0.82 0.44 0.93* 0.05 0.67 0.35 0.82 0.83 0.51 0.64 0.77 0.59 0.87 0.72 0.76 0.63 0.65 0.05 0.29 −0.51 0.61 0.56
Page 41
(C) CORTEX
eotaxin G-CSF GM-CSF GRO-KC IL-1α IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-9 IL-10 IL-12 IL-13 IL-17 IL-18 IP-10 leptin MCP-1 MIP-1α RANTES TNF-α VEGF
Speisman et al.
IL-12 0.54 0.63 0.61 0.42 0.82 −0.13 0.60 0.83 0.75 0.72 0.32 0.59 0.82 0.41 0.65 0.44 0.35 −0.09 0.24 −0.27 0.68 0.53
IL-13 0.88 0.57 0.87 0.27 0.75 0.15 0.75 0.95* 0.75 0.60 0.63 0.87 0.82 0.51 0.80 0.68 0.61 0.05 0.42 −0.36 0.74 0.71
IL-17 0.52 0.48 0.69 −0.09 0.74 0.08 0.76 0.56 0.24 0.80 0.51 0.72 0.41 0.51 0.51 0.45 0.44 −0.01 −0.02 −0.40 0.30 0.44
IL-18 0.70 0.30 0.92* 0.14 0.62 0.16 0.82 0.71 0.37 0.45 0.43 0.76 0.65 0.80 0.51 0.61 0.34 −0.12 0.07 −0.15 0.80 0.60
IP-10 0.68 0.68 0.73 0.56 0.52 0.25 0.71 0.67 0.30 0.33 0.25 0.63 0.44 0.68 0.45 0.61 0.85 −0.31 0.64 0.06 0.73 0.63
leptin 0.63 0.71 0.55 0.55 0.38 0.51 0.51 0.57 0.30 0.41 0.38 0.65 0.35 0.61 0.44 0.34 0.85 −0.37 0.83 −0.09 0.55 0.46
MCP-1 0.12 −0.31 0.03 −0.55 0.14 −0.50 0.02 0.20 0.35 −0.19 0.39 0.05 −0.09 0.05 −0.01 −0.12 −0.31 −0.37 −0.45 −0.51 −0.36 0.08
MIP-1α 0.37 0.53 0.18 0.71 0.10 0.50 0.06 0.33 0.24 0.12 0.12 0.29 0.24 0.42 −0.02 0.07 0.64 0.83 −0.45 0.07 0.40 0.23
RANTES −0.23 −0.12 −0.33 0.16 −0.46 −0.16 −0.38 −0.44 −0.29 −0.29 −0.55 −0.51 −0.27 −0.36 −0.40 −0.15 0.06 −0.09 −0.51 0.07 −0.13 −0.24
TNF-α 0.60 0.63 0.72 0.61 0.55 0.35 0.75 0.67 0.38 0.32 0.25 0.61 0.68 0.74 0.30 0.80 0.73 0.55 −0.36 0.40 −0.13 0.69
VEGF 0.83 0.72 0.65 0.19 0.56 0.15 0.73 0.68 0.49 0.38 0.35 0.56 0.53 0.71 0.44 0.60 0.63 0.46 0.08 0.23 −0.24 0.69
After Bonferroni adjusted α-levels: *p<0.00042 in serum, *p<0.00029 in hippocampus and *p<0.00020 in cortex.
Note that no between compartments clusters emerged after Bonferroni corrections.
Page 42
Table 3
Measures of several variables significantly modulated by daily exercise in aging rats correlate. Spearman rank correlation coefficients ( rs) were calculated
Speisman et al.
test the strength of the relationships between concentrations of serum (S), hippocampal (H) and cortical (C) cytokines, and measures of spatial and
hippoocampal neurogenesis that were significantly modulated by conditioned running.
SERUM HIPPOCAMPUS CORTEX NEUROGENESIS & BEHAVIOR
MCP-1 leptin GRO-KC IL-1β IL-18 GRO-KC VEGF New Neuron # Immed. DI 24 hr DI 24 hr IA
MCP-1 (S) 0.65+ 0.96*** 0.54 −0.36 −0.14 0.13 −0.53 −0.81** −0.39 −0.30
leptin (S) 0.65+ 0.56+ 0.76* −0.61+ −0.58+ 0.52 −0.77** −0.73* −0.78** −0.46
GRO-KC (S) 0.96*** 0.56+ 0.42 −0.29 −0.20 0.07 −0.41 −0.75** −0.48 −0.18
IL-1β (H) 0.54 0.76* 0.42 −0.60* −0.25 0.57+ −0.58+ −0.58+ −0.68* −0.63*
IL-18 (H) −0.36 −0.61+ −0.29 −0.60* 0.85*** −0.51 0.94*** 0.51 0.54 0.16
GRO-KC (H) −0.14 −0.58+ −0.20 −0.25 0.85*** −0.37 0.79** 0.38 0.41 −0.11
VEGF (C) 0.13 0.52 0.07 0.57+ −0.51 −0.37 −0.43 −0.64* −0.51 −0.60*
New Neuron # −0.53 −0.77** −0.41 −0.58+ 0.94*** 0.79** −0.43 0.59+ 0.55+ 0.18
Immed. DI −0.81** −0.73* −0.75** −0.58+ 0.51 0.38 −0.64* 0.59+ 0.47 0.45
24 hr DI −0.39 −0.78** −0.48 −0.68* 0.54 0.41 −0.51 0.55+ 0.47 0.62*
24 hr IA −0.30 −0.46 −0.18 −0.63* 0.16 −0.11 −0.60+ 0.18 0.45 0.62*
***
p < 0.001,
**
p<0.01,
*
p < 0.05 and
+
0.05 < p < 0.10.
Page 43

Ni Hms 415188 Translate

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Ni Hms 415188 Translate

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

NIH Public Access

Latihan fisik meningkatkan memori, stimulasi

Gainesville, FL, USA

dibutuhkan, neurogenesis dan kemampuannya dalam tugas tergantung hippocampus yang

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

2.2. Latihan labirin air dan pengujian

inter-trial interval [ITI]) yang membutuhkan prosedur dan kemampuan sensorimotor

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

2.3. Inhibitory avoidance training and testing

2.4. Bromodeoxyuridine Injections

2.6. Protein dari jaringan otak

2.7.1. Enzym substrate immunostaining-Sebelum pengolahan dan diantara langkah-langkah,

2.7.2. Fluorescent immunostaining -- Bagian dicuci berulang kali pada langkah-langkah

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

marker chondroitin sulfate proteoglycan (rabbit anti-NG2, 1:500; Chemicon, Temecula,

inkubasi di 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI;1:10.000; Calbiochem, San Diego, CA)

2.8. Cell quantification

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

2.9. Multiplex quantification of cytokines

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

2.10. Cytokine cluster analysis

mediator yang terdeteksi di penelitian saat ini).

2.11. Statistical Analyses

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

berenang lebih cepat

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

3.4 Inhibitory avoidance scores

dalam menghindari tugas penghambatan (Gambar. 4C). Tes Mann-Whitney U menegaskan

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

hippocampal dan cortical compartments untuk mengeksplorasi ide-ide memprediksi sinyal

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Kurangnya hubungan yang signifikan antara hippocampal dan cortical compartments

3.7. Langkah-langkah perilaku dan neurogenesis berhubungan dengan konsentrasi sitokin

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

berhubungan negatif dengan skor langsung Indeks diskriminasi (p <0,05), discrimination

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

meningkatkan kelangsungan hidup dan berpotensi mengintegrasi neuron baru ke jaringan

Gambar 8 mengilustrasikan hubungan potensial antara serum penanda inflamasi dan

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

pengobatan leptin meningkatkan IL-1β di hippocampus (Hosoi et al., 2002), memberikan

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

J Neurosci. 2003; 17:2042–2046. [PubMed: 12786970]

immune system. Brain Behav Immun. 2008; 22:301–311. [PubMed: 17951027]

study. Psychol Sci. 2003; 14:125–130. [PubMed: 12661673]

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Immun. 2011; 25:1637–1648. [PubMed: 21704698]

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

macrophages. Biochem Biophys Res Commun. 2011; 413:454–459. [PubMed: 21907183]

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

progenitor cells in female rats. Hippocampus. 2009; 19:907–912. [PubMed: 19235230]

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Otak Behav Immun.Penulis naskah; tersedia di PMC 2014 1 Februari.

Gambar 1. Jadwal penelitian

memasuki kembali 24 jam bagian gelap stelah training (p<0.05).

tindakan perilaku yang bergantung pada hippocampal dan hippocampal neurogenesis

usia tua. Mean (±S.E.M.) values are reported.

SERUM HIPPOCAMPUS CORTEX