Descripción: En este proceso, el primer paso (A) consiste en ubicar el huevo en el ovoscopio. Aquí, se identifica la cavidad alantoidea y se procede a señalarla con un lápiz (B). Después, en el límite de esta cavidad se realiza un orificio por medio de una aguja (C). Posteriormente, se pone la inyección de 0,1 ml del inóculo viral por el orificio realizado anteriormente (D). Se procede a sellar el hueco con cera derretida de la vela (E). Se termina la inoculación y se procede a incubar el huevo por 3 días a 37°C (F). Tabla N. 1: Proceso de obtención de muestra y realización de Hemaglutinación Viral.
Descripción: Para la obtención de la muestra, en primer lugar, se debe eliminar la cáscara de la cavidad alantoidea con mucho cuidado (A), observándose al pollito en el huevo (B). Lo siguiente es retirar la membrana interna (C). Se toma la muestra desde el líquido alantoideo, en donde estarán los virus (D). Se pone una gota de cada muestra en una placa, en total 2 placas (E), en donde se realizará una placa de control positivo, otra de control negativo y la de la muestra. La placa de control positivo se realizará con una muestra diferente. Se mezcla y se espera el resultado de la hemaglutinación de la sangre, producto de los virus (F).
Figura No.1: Prueba de Hemaglutinación Viral. Descripción: La placa de la derecha representa el control positivo, la placa del centro es nuestro control negativo. Como se observa en la placa de la izquierdo no hubo hemaglutinación de la sangre, por lo tanto, la prueba es negativo; no existió suficiente cantidad vírica para que se produzco el fenómeno. Discusión: El virus de la enfermedad de Newcastle pertenece a la familia Paramoxiviridae con un genoma de ARN de cadena simple negativa, con una cápside helical. Tiene dos glicoproteínas, la HN (hemaglutinina y neuraminidasa) y la F, que es responsable de la fusión celular y la formación de células gigantes polinucleadas. El virus de la enfermedad de Newcastle tiene la capacidad de aglutinar los glóbulos rojos del pollo y algunas otras especies gracias a la proteína HN, aunque puede ser identificado por el anticuerpo homologo IH. (Moreno, 1994). Actualmente, el método mas adecuado para la siembra de virus en embriones de pollo es realizar una inyección en la cavidad alantoidea, para luego probar mediante técnicas de hemaglutinación, si es que ocurre tal la prueba será considerada como positiva y hay una gran posibilidad de la presencia de un virus, si no ocurre, entonces será considerada como negativa. (Rómulo, 2007). La detección viral directa es aquella que puede ser aplicada identificando el agente infeccioso directamente, los antígenos de superficie del virus, la presencia del material genético o la observación del virus directamente, mientras que las técnicas de detección viral indirecta son la detección de anticuerpos específicos antivirales por técnicas inmunológicas y la siembra in vitro. (Sandin, 2017). Referencias bibliográficas: Moreno, C. (1994). La enfermedad de Newcastle y algunos avances recientes de diagnóstico. México DF, México. Universidad Nacional Autónoma de México. Rómulo, A. (2007). Inoculación de virus en huevos embrionados. Lambayeque, Perú. Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo. Sandin, M. (2017). Métodos de estudio y diagnostico viral. Buenos Aires, Argentina. Universidad del Centro de la ciudad de Buenos Aires.