3B-2
GUÍA DE PRÁCTICAS
Autor:
LIMA – PERU
2017
La Toxicología es una nueva ciencia que tiene diferentes áreas, ya no es solamente la Toxicología
Forense, actualmente han cobrado importancia las áreas de la Toxicología ambiental,
ocupacional, industrial, clínica, medicamentosa, cosmética, alimentaria, de urgencia, la
ecotoxicología, la espacial, etc., por ello se da a conocer la presente Guía de Practicas del curso de
Toxicología y Química Legal, como un instrumento que facilite la enseñanza experimental.
Con ella queremos trasmitir a nuestros alumnos nuestra experiencia sobre los análisis
toxicológicos básicos en lo que se refiere a la extracción, detección, identificación y cuantificación
de las principales sustancias químicas que causan intoxicaciones, ya sea en muestras biológicas y
no biológicas, teniendo en cuenta sus propiedades fisicoquímicas, las cuales, pueden producir
intoxicación aguda o crónica; individual, colectiva o contaminación del medio ambiente que
ocasione riesgo a la población.
EL AUTOR
Laboratorio de toxicología forense, que investiga las sustancias tóxicas que causan la muerte,
o investiga los hechos legales donde se involucran sustancias Tóxicas.
Laboratorio de toxicología clínica, realiza los análisis básicos para él diagnóstico de sustancias
químicas que causan intoxicaciones agudas las cuales deben ser procesadas en el laboratorio
clínico de Toxicología a través de un análisis que permitan identificarlas en un tiempo corto
para poder hacer un pronto diagnostico que permita dar un rápido tratamiento antidotico y
salvar la vida del paciente intoxicado.
LOS URGENTES: Cuyo análisis no es superior a un tiempo de cuatro horas y sus reportes son
inmediatos, generalmente van dirigidos a médicos o instituciones de salud que están manejando
un paciente intoxicado agudo.
LOS DE MONITOREO O DIAGNÓSTICO: Cuyo tiempo puede llevar de 1 a 5 días generalmente son
análisis de mayor complejidad y se realizan como apoyo de diagnóstico diferencial, de control
terapéutico o investigación de campo, en estos casos no está de por medio la vida de una
persona.
Una Sistemática Analítica Toxicológica (SAT) puede definirse como el conjunto de procedimientos
analíticos, concisos, bien planeados, encaminados a poner de manifiesto la presencia o ausencia
de sustancias de relevancia toxicológica, en una muestra determinada.
1.2 Competencias
Explicar al alumno los objetivos e implicancias del Análisis Químico Toxicológico así como los
diferentes tipos de muestras problemas y su procesamiento.
Emplear el método descriptivo de asesoría permanente.
- Identificar el tipo de intoxicación. Toma de las muestras para el análisis toxicológico
- Enviar y recepcionar las muestras. Preparar los protocolos de envío y recepción de las
muestras. Actitud del perito.
- Procesamiento de los diferentes tipos de muestra para el análisis toxicológico adquiriendo los
conocimientos para diferenciar los tipos de agentes tóxicos que pueden causar intoxicaciones.
Cumplir y hacer cumplir las medidas de bioseguridad.
1.4 Procedimiento
El Peritaje Toxicológico de vísceras y tejidos de interés criminalistico, requiere de un adecuado
procedimiento en la toma de la muestra, en su fijación o preservación, embalaje y envío con la
solicitud específica de lo que se desea determinar en el examen a informar, para ello se hace
necesario considerar lo siguiente:
a.- Toda muestra de pieza anatómica, vísceras, fragmentos de tejido, órganos, coágulos
sanguíneos, etc. debe tener un tamaño significativo y remitirse al Laboratorio.
b.- En el caso de Exámenes Anatomopatológicos, todas las muestras como restos placentarios,
embrión, feto, órganos completos, etc. Deben remitirse fijados en formol al 1% que
resulta de mezclar una parte de formol puro vendido al 40% con nueve (09) partes de agua
corriente. El volumen del líquido fijador debe ser mayor que el de la muestra cubriéndola con
exceso. Si el órgano o víscera es de gran volumen puede cortársele con cuchillo para facilitar el
proceso de fijación.
c.- Cuando se solicita Examen Toxicológico debe remitirse por separado muestra de vísceras,
estómago y contenido gástrico sin agregarle ninguna sustancia como preservador o fijador, ya
que estas sustancias tienen poder de interferencia en los análisis toxicológicos.
d.- El recipiente para cualquier muestra debe ser de vidrio o de plástico inerte de boca ancha y
con tapa esmerilada o de rosca cerrado y sellado con cinta adhesiva o esparadrapo, lacrado
y/o sellado. No utilizar recipientes metálicos. Las muestras de sangre donde se determinara el
Dosaje Etílico y Sustancias Estupefacientes y/o drogas afines; se enviarán en frasco vial llenos
con tapa a presión y rotulado con cinta adhesiva.
6 Mg. Jesús Lizano Gutiérrez
e.- En el oficio de remisión debe consignarse, nombre, edad, sexo de la persona o del cadáver;
naturaleza y tamaño aproximado de la muestra y región del cuerpo humano, de donde
procede la muestra. Señalar necesariamente en forma sumaria datos referenciales o
antecedentes del hecho.
Si se ha practicado necropsia es indispensable el Protocolo de Necropsia o en su defecto los
diagnósticos macroscópicos y conclusiones finales. Si el paciente hubiera estado en algún
Centro de Salud enviar la hoja clínica.
f.- Para el embalaje, el recipiente debe colocarse en una caja de madera o cartón grueso rodeado
de viruta, telas o papeles para evitar el movimiento y la consiguiente ruptura o derrame de la
muestra.
g.- Las muestras deberán ser transportados por Agencia o por un Efectivo Policial o el perito
toxicólogo debidamente acreditado, por ningún motivo enviar con personal civil ya que se
pondrá en duda la identidad de las muestras.
- Análisis general
* 50 % Análisis cuali-cuantitativo.
* 50 % Contramuestra.
1.5 Resultados
Los alumnos deben traer en la siguiente práctica una muestra correctamente embalada de
acuerdo a las caracteristicas de la muestra, del análisis solicitado y de las normas legales para un
análisis toxicológico.
1.6 Cuestionario
1. Normas legales que rigen el análisis toxicológico.
2. Procedimiento en caso de la exhumación de un cadáver.
3. Responsabilidad legal del profesional Químico-Farmacéutico en el análisis toxicológico.
1.2 Competencias
Practicar y evaluar el ingreso de los tóxicos para conocer las diferentes características
organolépticas de una muestra problema y su significancia.
Dar a conocer las técnicas de los Papeles Sensibles y su interpretación, para ello:
- Realizar los análisis preliminares y organolépticos.
- Preparar, ejecutar e interpretar los resultados de los papeles sensibles
- Aplicar las normas de bioseguridad al evaluar la separación de las muestras para el análisis
toxicológico y la aplicación de las técnicas preliminares.
1.4 Procedimiento
1.4.3. Se colocará la muestra, finamente picada, en un frasco de boca ancha y poner las tiras
reactivas humedecidas en el borde del frasco sin tocar la muestra ni entre ellas, añadir ácido
tartárico sin que contamine las tiras reactivas y tapar inmediatamente en forma hermética.
Esperar 15’.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica que tóxicos tenia
la muestra, el informe es individual.
1.2 Competencias
- Extraer los tóxicos volátiles de una muestra con un mínimo de pérdida
- Separar los tóxicos volátiles y gaseosos a través de la destilación simple y por arrastre de
vapor, en medio ácido y en medio alcalino.
- Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y gaseosas,
empleando equipos y materiales de seguridad.
Emplear el método conductivista de participación permanente
1.4 Procedimiento
- Se procederá a hacer una destilación en pH ácido (por adición de Ácido Tartárico c.s. y se
recibirá en un volumen. adecuado de NaOH 5 %.
- Luego, la misma muestra ácida se llevará hasta pH alcalino con c.s. de Hidróxido de amonio
10% y se recibirá en un volumen adecuado de HCl 5 %.
- Ambos destilados (ácido y alcalino) se guardarán para futuras prácticas.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica que tóxicos tenia
la muestra, el informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Tóxicos que se pueden hallar en al destilado ácido y en el alcalino
. Precauciones al realizar la micro destilación.
1.2 Competencias
- Aprender los diferentes métodos en el aislamiento de los tóxicos metálicos en muestras
problemas Realizar el Ensayo de láminas Metálicas. Realizar la destrucción de la materia
orgánica para aislar los tóxicos metálicos y no metálicos para llevarlos a su forma ionizada
por el método de la vía húmeda.
- Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y gaseosas,
empleando equipos y materiales de seguridad.
Emplear el método constructivista con participación permanente.
1.4 Procedimiento
Se explicará los diferentes tipos de tratamiento de las muestras problemas para aislar los
tóxicos metálicos en base a las características de estos
- Destrucción de la Materia Orgánica (DMO) (Técnica. Kahane)
Trabajar en campana extractora
* Muestra problema 5-10 g
* HNO3 Q.P. 10 mL
* HClO4 Q.P. 0,5 mL
* H2SO4 Q.P. 1 mL.
* Calor hasta disolución total.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de destrucción de la materia orgánica. El informe es
individual.
1.6 Cuestionario
. Precauciones para la extracción de los tóxicos metálicos.
. Función de cada reactivo en la técnica empleada.
1.2 Competencias
- Extraer los tóxicos orgánicos fijos de una muestra con un mínimo de pérdida.
- Extraer y separar los diferentes tóxicos orgánicos fijos de acuerdo a sus propiedades físico
químicas, en tóxicos ácidos fuertes, ácidos débiles, neutros y básicos.
- Evaluar los diferentes residuos obtenidos para su posterior identificación.
- Valorar la importancia de la separación de los tóxicos orgánicos fijos al más alto grado de pureza
por ser estos los que causan el mayor porcentaje de intoxicaciones y ser los más hábiles.
Emplear el método conductivista de participación permanente.
1.4 Procedimiento
- Se procederá a hacer una desproteinización según el método de Curry obteniéndose un
filtrado limpio. (Las cantidades son proporcionales).
* Muestra Problema (Vísceras) 100 G.
* Na2WO4 10% 120 mL.
* H2O d 180 mL.
* NaOH 10% 20 mL.
* H2SO4 2/3N 100 mL.
Baño maría hirviente por 15’, filtrar.
- Luego se hará una extracción con solventes orgánicos a pH ácido 3,5 (HCl Q.P.) Éter Etílico o
con un solvente inmiscible, se guarda la fase orgánica.
- Luego, el mismo filtrado, se llevará a pH alcalino con el NH4OH Q.P. (9.5) y se extraerá con otra
alícuota de Éter Etílico u otro solvente orgánico, se guarda la fase orgánica.
- La fase orgánica de la primera extracción (Acida) servir a para separar los tóxicos orgánicos ácidos
fuertes, ácidos débiles y neutros.
- Las fases orgánicas servirán para futuras prácticas.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la practica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
13 Mg. Jesús Lizano Gutiérrez
desventajas de los diferentes métodos de extracción de los tóxicos orgánicos fijos.
El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Tóxicos que se pueden hallar en el residuo ácido
. Tóxicos que se pueden hallar en el residuo alcalino
. Precauciones en la desproteinización y separación en residuos
1.2 Competencias
- Extraer e identificar el tóxico gaseoso monóxido de carbono.
- Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicación y el tratamiento de urgencia a
realizar.
- Mostrar las diferentes técnicas de determinación de Monóxido de Carbono en sangre
Emplear el método descriptivo de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se procederá a producir la muerte del ratón por asfixia para obtener sangre con
carboxihemoglobina, posteriormente se someterá ésta muestra a diversas pruebas (Rx. Alcalina,
Rx. al Ac.Tánico) contra datos de un standard.
- Producir la muerte del ratón por asfixia. (Dentro de un frasco con tapa hermética, donde se
genera CO).
- Toma de muestra de sangre por punción cardíaca.
- Rx Alcalina.
* A un vol. de sangre agregar 4 Vol. de agua y un Vol. de NaOH 10%, anotar el tiempo en que llega
a color chocolate
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el probable nivel de
intoxicación. El informe es individual.
1.2 Competencias
- Extraer e identificar el tóxico gaseoso Acido Cianhídrico.
- Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicación y el tratamiento de urgencia a
realizar.
- Demostrar la presencia de HCN o sus derivados en diferentes muestras.
- Mostrar las diferentes técnicas de determinación de Ácido Cianhídrico en sangre y vísceras.
Emplear el método descriptivo de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se procederá a realizar un machacado con las muestras problemas y posteriormente se
decantará, en el decantado se identificará la presencia de derivados del HCN mediante
- Rx de Grignard:
* Destilado (ligeramente alcalino) 5 mL.
* Ac. Pícrico (sol. saturada) V gotas.
* Calor hasta aparición de color rojizo.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el probable nivel de
intoxicación. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas.
. Posibles interferencias y procedimiento para detectarlas.
1.2 Competencias
- Determinar la alcoholemia e interpretar los resultados, evaluar los grados de ebriedad. Adquirir
destrezas para reconocer los grados de intoxicación y tratamiento de urgencia a realizar.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se procederá a destilar la muestra problema para obtener los alcoholes presentes,
posteriormente se les identificará y diferenciará mediante las reacciones respectivas
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el grado de alcoholemia y su
implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de las pruebas de la práctica.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Insecticidas en diferentes muestras problemas.
- Extraer, purificar e identificar por cromatografía en capa fina los plaguicidas organofosforados,
organocarbámicos y organoclorados. -Evaluar los diferentes métodos de extracción, purificación
e identificación de los plaguicidas.
- Adquirir destreza para extraer e identificar rápidamente los plaguicidas para darle el
tratamiento respectivo por ser los tóxicos que causan la mayor incidencia de muertes.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se trabajará con el residuo neutro de la práctica de aislamiento de los T.O.F., pero también
se puede trabajar con muestras problemas sin tratar mediante las técnicas de extracción rápida
(M.P. más n-Hexano c.s.p cubrir, agitar por 30’ y separar).
La determinación de los Insecticidas se realiza por C.C.F. y revelado diferencial con
diferentes reveladores.
- En una cromatoplaca de 20 x 20 cm estriada sembrar las muestras a una distancia superior a la
del nivel del sistema de solventes.
- Colocar la placa en la cámara de revelado y dejar correr aproximadamente el 70%.
- Sacar la placa y dejar secar, aplicar a cada zona los diferentes reveladores y observar la
coloración.
- Cloruro de Paladio: Manchas amarillas o rojas.
- Azul de Bromofenol: (previo rociado con Ácido Acético 5%) Manchas azules o marrones sobre
fondo amarillo.
- Difenilamina: Manchas verdes, castañas o violetas.
- p-Dimetilaminobenzaldehido : Manchas amarillas.
- Comparar los colores contra estándares.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
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desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el plaguicida encontrado y su
implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Valores tóxicos de los insecticidas estudiados
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Plomo en las muestras orgánicas previa DMO.
- Extraer y cuantificar espectrofotométricamente el plomo de líquidos biológicos.
- Interpretar toxicológicamente las concentraciones en líquidos biológicos, alimentos y medio
ambiente.
- Adquirir destreza para extraer y cuantificar el plomo teniendo en cuenta las medidas
de bioseguridad.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
La Determinación de Plomo se lleva a cabo por la Técnica Espectrofotométrica de Bambach
y Burkey, y comprende 3 etapas.
a. Extracción incial:
- M.P. (de DMO) 20-30 mL.
- NH4 Citrato 40% 15 mL.
21 Mg. Jesús Lizano Gutiérrez
- Rojo de Fenol Tres gotas
- NH4OH 20% csp pH 7-8.
- KCN 10% 5 mL.
- Hidroxilamina 20% 1 mL.
- Ditizona extractora 16 mg % 5 mL.
- Agitar y separar la Ditizona.
b. Purificación:
- Ditizona.
- Sol Buffer 3-4 50 mL.
- Agitar y separar la fase acuosa.
c. Extracción final:
- Fase acuosa.
- Ditizona standard 8 mg% 15 mL.
- Sol. Amonio Cianurada 7 mL.
- Agitar y separar la fase orgánica. Leer a 520 nm contra blanco de CHCl3.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar que significa la concentración
encontrada y su implicancia legal. El informe es individual
1.6 Cuestionario
. Explique la función de cada reactivo en la técnica
. Valores normales y tóxicos de Plomo
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Mercurio en el residuo de la DMO en frio.
- Extraer y cuantificar espectrofotométricamente el mercurio de líquidos biológicos.
- Interpretar toxicológicamente sus concentraciones en líquidos biológicos, alimentos y medio
ambiente.
- Adquirir destreza para extraer y cuantificar mercurio teniendo en cuenta las medidas de
bioseguridad.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
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1.3 Materiales y equipos
. Residuo de la DMO en frio.
. Azul de Timol.
. HNO3 Q.P.
. Hidroxilamina 20%.
. Ditizona extractora 16 mg% (en CHCl3).
. HCl 0.25N.
. KBr 40%.
. Buffer 6.
. Ditizona standard 8 mg% (en CHCl3).
1.4 Procedimiento
La determinación de Mercurio se lleva a cabo mediante la Técnica Rspectrofotometrica de
Jacobs y Golman y comprende 3 fases.
a. Extracción inicial:
- M.P. 20 mL.
- Azul de Timol II Gtas.
- HNO3 q.p. csp pH 1.5.
- Hidroxilamina 20% 2 mL.
- Ditizona extractora 16mg% 5 mL.
- Agitar y separar la fase orgánica.
b. Purificación:
- Fase Orgánica.
- HCl 0.25N 50 mL.
- KBr 40% 5 mL.
- Agitar y separar la fase acuosa.
c. Extracción final:
- Fase acuosa.
- Buffer 6 10 mL.
- Ditizona standard 8 mg% 15 mL.
- Agitar y separar la fase orgánica y leer a 490 nm.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar que significa la concentración
encontrada y su implicancia legal. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Fundamento de la reacción.
. Función de cada reactivo de la técnica.
. Valores normales y tóxicos del Hg.
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Arsénico en una muestra.
- Determinar espectrofotométricamente el Arsénico.
- Interpretar toxicológicamente la concentración en líquidos biológicos, alimentos y medio
ambiente.
- Adquirir destrezas para realizar los análisis químico-toxicológicos y respetar las normas
de bioseguridad y ética.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
- Colocar la M.P. en el equipo de Vasac y Sedivec.
- HCl Q.P. 5 mL.
- KI 15% 2 mL.
- SnCl4 40% VIII Gtas.
- Reposo por 15’.
- CuSO4 2% 1 mL.
- Zn metálico 3 granallas.
- Reposo por 30’.
- Recibir en Dietilditiocarbamato de plata 0.5% 3 mL.
- Leer 540 nm.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar las ventajas y desventajas de los diferentes
métodos de identificación e indicar que significa la concentración encontrada y su implicancia
legal. El informe es individual.
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Cromo en una muestra problema.
- Determinar el Cromo e Interpretar toxicológicamente su concentración en líquidos biológicos,
alimentos y medio ambiente.
- Adquirir destrezas para realizar los análisis quimico-toxicológicos y respetar las normas
de bioseguridad y ética.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
El Cr se reconoce por la Técnica de Cazeneuve.
- M.P. 5 mL
- AgNO3 1% I Gta.
- K2S2O8 0.01 g
- Baño maría hirviente por 15’.
- HCl 0.1% V Gtas.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar la presencia o ausencia del
Cromo en la muestra problema. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Fundamento de la reacción.
. Función de cada reactivo de la técnica.
. Valores normales y tóxicos del Cr.
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de Talio en una muestra problema.
- Determinar el Talio e Interpretar toxicológicamente su concentración en líquidos biológicos.
- Adquirir destrezas para realizar los análisis químico-toxicológicos y respetar las normas
de bioseguridad y ética.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar la concentración
encontrada. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Fundamento de la reacción.
. Función de cada reactivo de la técnica.
. Valores normales y tóxicos del Tl.
1.2 Competencias
- Determinar la presencia de S.O.V. en diferentes muestras problemas.
- Extraer, purificar e identificar el benceno y cloroformo. Evaluar su presencia en líquidos
biológicos.
- Valorar su importancia como agente tóxico causal de intoxicaciones, y proponer medidas
de prevención y tratamiento.
Emplear el método constructivo permanente.
1.4 Procedimiento
Se realizará una destilación de las muestras problemas para obtener los solventes orgánicos
contenidos en las mismas (Tener bastante cuidado porque la mayoría son inflamables) y
posteriormente se les reconocerá por:
- Rx de Fujiwara (trabajar en campana extractora).
* Muestra problema 5 mL.
* NaOH 20% 1mL.
* Piridina Q.P. 1mL.
* Baño maría hirviente/2’.
* Observar coloración.
- Rx de p-Nitrofenol (por I.O.F.)
* Muestra problema 5 mL.
* NaOH 10% 5 mL.
* Baño maría hirviente/2’.
* Observar coloración.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones. El informe es
individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de las pruebas de la práctica.
. Posibles interferencias y manera de detectarlas.
1.2 Competencias
- Determinar los diferentes tipos de AINEs en la muestra procesada en la práctica de
Aislamiento de T.O.F.
- Extraer e identificar los derivados de las pirazolonas y el paracetamol por cromatografía en capa
fina. Extraer, purificar, identificar y cuantificar los salicilatos e interpretar toxicológicamente su
concentración en líquidos biológicos.
- Valorar su importancia como agente tóxico causal de intoxicaciones, y propone medidas
de prevención y tratamiento.
Emplear el método descriptivo de asesoria permanente.
1.4 Procedimiento
Se trabajará en el residuo ácido de la práctica de extracción de T.O.F., el residuo se
reconstituye con Etanol y se realizarán las siguientes determinaciones:
- Determinación de Salicilatos
* M.P. 5 mL.
* FeCl3 5% 2 mL.
* Observar la coloración.
- Cuantificación de Salicilatos.
* M.P. 1 mL.
* Rvo Trinder 5 mL.
* Agitar por 5’ y leer a 540 nm contra Standard de 5 mg %.
- Determinación de Pirazolonas:
* M.P. 1 mL.
* AgNO3 10% 0.5 mL.
* HCl 5N 1 mL.
* NaNO2 Q.P. 1 mg.
* Observar el color.
- Determinación de Paracetamol:
* M.P. 1 mL.
* o-Cresol 1% 1 mL.
* NH4OH 4M 2 mL.
* Observar la coloración.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones y la
concentración de salicilato encontrado. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Toxicidad de las sustancias analizadas.
. Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas.
. Concentraciones tóxicas de las sustancias determinadas.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas
1.2 Competencias
- Reconocer los diferentes depresores centrales más frecuentes en casos de intoxicación.
- Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados barbitúricos. Su dependencia y
su implicancia social.
- Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados benzodiazepínicos. Su dependencia
y su implicancia social.
- Toxicidad de los derivados fenotiazínicos. Tratamiento en casos de intoxicaciones.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se usarán los extractos obtenidos en el aislamiento de los tóxicos orgánicos fijos ( T.O.F.) y se
procederá a realizar las diferentes reacciones de reconocimiento o identificación, como se indica
a continuación.
a) Rx de reconocimiento de Barbitúricos:
- Rx de Parry-Coppangy:
* M.P. 5 mL.
* Co(NO3)2 5% en EtOH III Gts.
* Isopropilamin 5% en EtOH IV Gts.
* Observar la coloración.
- Rx de Zwiker:
* M.P. 5 mL.
* CuSO4 0.5% 0.5 mL.
32 Mg. Jesús Lizano Gutiérrez
* Agitar fuertemente
* Piridina 5% (CHCl3) 0.5 mL.
* Observar coloración de la fase orgánica.
b) Rx de reconocimiento de Benzodiacepinas:
- Rx de Bretton-Marshall :
* M.P. 1 mL.
* HCl 6N. 5 mL.
* Baño maría de Glicerina a 125 *C/ 45’.
* NaNO2 0.1% 0.25 mL.
* Agitar y reposo por 3’.
* NH4 Sulfamato 0.5% 0.25 mL.
* Agitar y reposo por 3’.
* N-Naftiletilendiamino.HCl 0.1% 0.25 mL.
* Observar la coloración (Se puede cuantificar leyendo a 550 nm).
c) Rx de reconocimiento de Fenotiazinas.
- Rx de Forrest:
* M.P. 5 mL.
* Rvo FPN V gotas.
* Observar la coloración.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones
encontradas. El informe es individual.
1.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de cada prueba.
. Posibles interferencias y manera de detectarlas.
14.2 Competencias
- Determinar la presencia de Corrosivos y Cáusticos.
- Extraer e identificar de las sustancias cáusticas y corrosivas.
- Adquirir destrezas para identificar las diferentes sustancias causticas y corrosivas teniendo
en cuenta las normas de bioseguridad y ética.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
14.4 Procedimiento
- Macerar la muestra problema en H2O por 30’ aproximadamente.
- Realizar las determinaciones de los diferentes corrosivos y cáusticos.
- Determinación de H2SO4:
* M.P. 5 mL.
* BaCl2 2% 2 mL.
* Observar la formación de precipitado.
- Determinación de HCl:
* M.P. 5 mL.
* AgNO3 1% 1 mL.
* Observar la formación de precipitado.
- Determinación de NH4OH:
* M.P. 5 mL.
* Hematoxilina 5 mg.
* Observar coloración
- Comparar los resultados contra los estándares.
14.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones
encontradas. El informe es individual.
14.6 Cuestionario
. Fundamento de la determinación de cada corrosivo y cáustico.
. Diferencias entre una corrosión por ácidos y álcalis.
14.2 Competencias
- Determinar la presencia de Marihuana en diferentes muestras.
- Identificar la marihuana por los métodos macroscópico y microscópico.
- Extraer, purificar e identificar por cromatografía en capa fina y colorimétricamente los
cannabinoides en líquidos biológicos y en la planta de marihuana.
- Adquirir destrezas para identificar los principios activos de la marihuana en líquidos biológicos
y la planta teniendo en cuenta las normas de bioseguridad y ética.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
14.4 Procedimiento
. Determinación de Marihuana.
- Rx de Duquenois.
* M.P. más Rvo de Duquenois csp cubrir, hacer un machacado y luego decantar, trabajar con el
líquido decantado.
* HCl q.p. 2 mL (en zona).
* Observar.
* CHCl3 2 mL.
* Agitar (La Marihuana debe pasar a la fase clorofórmica).
- C.C.F.
* Sembrar la muestra en la cromatoplaca y correr en Benceno.
* Revelar con Bencidina Diazotada (mezclar A. y B. y rociar).
* Observar la coloración y Rf.
- Cannabidiol Amarillo naranja 0.12.
- Delta9-THC Rojo naranja 0.71.
- Cannabinol Rojo castaño 0.38.
14.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones encontradas.
El informe es individual.
14.6 Cuestionario
1. Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas en la práctica.
1.2 Competencias
- Reconocer los diferentes alcaloides que generan intoxicaciones y dependencia más frecuentes.
- Evaluar las intoxicaciones producidas por la estricnina, brucina y atropina.
- Evaluar la dependencia que producen la morfina y codeína. Tratamiento en casos de
intoxicaciones.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
Se usarán los extractos obtenidos en el aislamiento de los T.O.F. y se procederá a realizar
las diferentes reacciones de reconocimiento.
. Rx de reconocimiento de Brucina:
- Rx con el ácido nítrico de coloración roja intensa, más una gota de cloruro estannoso el color vira
al violeta.
1.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe las ventajas y desventajas de los
diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones encontradas.
El informe es individual.
14.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de cada prueba.
. Posibles interferencias y manera de detectarlas.
14.2 Competencias
- Determinar la presencia de Cocaína en diferentes muestras.
- Identificar la Cocaína por métodos colorimétricos, cristalográficos y por cromatografía en capa
fina en muestras de tráfico ilícito de drogas y líquidos biológicos.
- Adquirir destrezas para identificar la cocaína, fibras y pelos para transformar los indicios
en pruebas de delito.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
14.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e interpretar las reacciones
encontradas. El informe es individual.
14.6 Cuestionario
. Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas en la práctica.
. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.
. Otras técnicas de determinación.
14.2 Competencias
- Identificar las manchas de sangre, esperma y calostro en diferentes soportes por métodos
colorimétricos, cristalográficos y por cromatografía en capa fina.
- Adquirir destrezas para identificar las manchas de sangre, semen y calostro para transformar
los indicios en pruebas del delito.
Emplear el método constructivo de asesoría permanente.
MANCHAS DE SANGRE
. Muestras problemas de manchas de sangre y esperma.
. Microscopio con micrómetro.
. Reactivo de Adler.
. Reactivo de Kastle Scheede Meyer.
. Reactivo de Teichmann.
. Reactivo de Bertrand.
. Reactivo de INPE.
. Reactivo de Takayama.
. Reactivo de Nina Adsvadurova.
. Metanol – Acido acético (99-1).
MANCHAS DE ESPERMA
. H2SO4 P.A.
. Lámpara de UV.
. Reactivo de Florence.
. Reactivo de Barberio.
. Reactivo de de May Grunwald Giemsa.
. HCl 0,1 M.
. Ninhidrina 0,2 % en etanol.
14.4 Procedimiento
. Diferenciación de las manchas de sangre y de esperma con los diferentes reactivos.
Se hará un montaje en los portaobjetos para observación microscópica de los diferentes cristales
que se obtienen de los extractos de las muestras de sangre y esperma.
Se realizará la diferenciación por cromatografía en capa fina de las muestras de sangre y esperma.
14.5 Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación y diferenciación. Interpretar las
reacciones y los resultados, y su implicancia legal. El informe es individual.
42 Mg. Jesús Lizano Gutiérrez
14.6 Cuestionario
. Características de la sangre y semen.
. Implicancias legales.
1.2 Competencias
- Diferenciar los cabellos, pelos y fibras.
- Diferenciar las fibras animales y vegetales. Identificar y diferenciar los pelos.
- Adquirir destrezas para identificar las fibras y pelos para transformar los indicios en pruebas
de delito.
Emplear el método constructivista de asesoría permanente.
1.4 Procedimiento
. Diferenciación de fibra vegetal y animal con el nitroprusiato de sodio. Se hará un montaje en los
portaobjetos para observación microscópica. Se deberá comparar los índices medulares para
diferenciación.
. Diferenciación de las diferentes clases de cutícula.
. Diferenciación de los diferentes canales medulares.
1.6 Cuestionario
. Características de los cabellos, fibras y pelos.
. Implicancias legales.