Anda di halaman 1dari 4

REVIEW ARTIKEL

Menerangkan Fisiologi Vesikel Ekstraseluler


PENDAHULUAN

Vesikel ekstraseluler (EV) dibebaskan dari berbagai sel untuk


menargetkkan sel-sel penerima dalam penghantaran komunikasi dan mentransfer
bagian dari materi genetik dan protein. Sampai saat ini, peran yang beragam telah
diidentifikasi untuk EVS, mulai dari modulasi kekebalan, komunikasi neuron-glial,
untuk membendung interaksi jaringan sel pada luka, untuk proses patofisiologi
metastasis kanker. EVS mencakup spektrum yang luas dari vesikel yang
dikeluarkan oleh beberapa jenis sel dan istilah ini digunakan sebagai salah satu
kolektif. Ini termasuk exosomes, ectomes, oncosmes, tumpahan vesikel, dan
microvesikel. Dengan demikian, EVS mewakili spektrum yang luas dari vesikel
oleh beberapa jenis sel. Di antaranya, exosomes kecil (30-100 nm) vesikel yang
berasal dari jalur endosomal sementara mikrovesikel yang rinci berdasarkan sifat
fisik mereka atau komposisi protein. Karena tumpang tindih ini, kita membahas
hasil pencitraan dan fisiologi EVS mengacu kedua jenis EVS.
Pelacakan rekayasa EVS eksogen juga menjadi isu penting bagi diagnostik
dan terapeutik yang mereka gunakan pada kanker dan dalam pengobatan
regeneratif. EVS sebagai pembawa obat. Meskipun harapan yang tinggi dari
potensi terapeutik, kurangnya pengetahuan tentang in vivo perilaku EVS adalah
kelemahan utama. Pencitraan noninvasif memungkinkan kita untuk memahami
distribusi in vivo dan nasib EVS dan untuk menjelaskan kemampuan penargetan
mereka, dan pada penelitian ini meninjau pendekatan pencitraan ini dan
mengkritisi pembahasan fisiologi EVS yang terungkap oleh pencitraan dan
pelacakan.

TUJUAN

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk meninjau kemanjuan metode terbaru
dalam melakukan pelacakan dan pencitraan vesikel ekstraseluler in vitro dan kriti
membahas distribusi sistemik mereka, menargetkan, dan kinetika berdasarkan data
yang up-to-date dalam literatur.

KONSEP/IDE POKOK

1. Metode pelacakan untuk vesikel ekstraseluler pelabelan fluoresensi


Pelabelan fluoresensi langsung dari EVS telah banyak digunakan untuk
menyelidiki perilaku vivo EVS eksogen. Pelabelann fluoresensi bisa memberikan
gambar seluruh tubuh dengan kamera optik yang sangat sensitif serta gambar
mikroskopis fluoresensi. Dengan demikian, EVS yang dilabeli dengan pewarna
dapat digunakan secara luas untuk identifikasi mikroskopis dari EVS untuk
mengungkapkan pengantaran komunikasi dan untuk melacak secara sistemik dari
yang diberikan EVS. pewarna lipofilik termasuk PKH, DII, dan Dir yang biasanya
digunakan dan menghasilkan sinyal fluoresent yang stabil. Proses pelabelan sangat
sederhana dan tidak perlu menggunakan EVS rekayasa genetika. Teknik pencitraan
sederhana ini berguna untuk mengungkapkan lokasi spatiotemporal EVS eksogen
sistemik yang disuntikkan pada target tumor. Namun, pencitraan optik dibatasi
untuk EVS eksogen dan pewarna fluorescent bertahan dalam jaringan bahkan
setelah EVS yang terdegradasi. Hal ini karena label lipid tidak spesifik untuk EVS
utuh dan fluoresensi mungkin masih berada di EVS yang terdegradasi.
2. Sistem reporter bioluminescence
Reporter bioluminescence mampu mengungkap perilaku in vivo dari EVS
dengan sensitivitas yang sangat tinggi. rekayasa genetik protein bercahaya
(misalnya, Gaussia luciferase dikombinasikan dengan domain transmembran
seperti lactadherin) bisa mengungkapkan distribusi spatiotemporal EVS secara
kuantitatif pada hewan kecil tanpa latar belakang autofluoresensi. Sistem ini
memiliki kelemahan yakni sinyal pendaran yang lemah ketika lokasinya jauh di
dalam organ internal. Selanjutnya, mirip dengan fluoresensi reporter pencitraan,
sinyal bioluminescent tergantung pada protein reporter ekspresi. Prosedur
pelabelan ini rumit dibandingkan dengan pewarna fluorescence, yang membatasi
studi tentang distribusi in vivo dan nasib EVS dalam berbagai sel pada kondisi yang
berbeda.
3. Radionuklida dan resonansi pencitraan magnetik pencitraan pada vesikel
ekstraseluler
Pencitraan optik EVS (baik fluoresensi atau bioluminescence) memiliki
keterbatasan intrinsik redaman sinyal bahkan pada hewan yang kecil, dan
membutuhkan metode pencitraan noninvasif lainnya untuk aplikasi klinis.
Pelabelan radionuklida EVS adalah salah satu pilihan. Demikian pula untuk
bioluminescence pencitraan, sebuah reporter streptavidin dikombinasikan dengan
domain transmembran dinyatakan dalam EVS itu terkonjugasi dengan 125I-label
norbiotinamide metode radiolabeling langsung lainnya juga mencoba
menggunakan 111In-oxine, yang muncul sangat mirip dengan fluoresensi dye
label. Metode ini hanya digunakan untuk mengevaluasi ex vivo biodistribusi, tapi
EVS baru-baru 99mTc-HMPAO-label juga diuji untuk mendapatkan gambar
seluruh tubuh menggunakan emisi foton tunggal computed tomography (SPECT).

KESIMPULAN

Pencitraan EVS adalah bukti esensial untuk memahami fisiologi EVS dan
menerapkan EVS sebagai terapi untuk berbagai penyakit. Pelacakan sederhana dan
umum digunakan dilakukan dengan pelabelan lipofilik EVS baik menggunakan
pewarna fluorescent atau pewarna radiolabeled. Namun, pelacakan akurat EVS
terbatas karena nonspesifik pelabelan dan retensi atau resirkulasi label setelah
degradasi. Selanjutnya, pencitraan optik memiliki masalah kedalaman penetrasi
terbatas dan potensi toksisitas substrat dalam kasus luciferin. Di masa depan, untuk
aplikasi klinis EVS, pencitraan radionuklida dan MRI dapat digunakan sebagai
metode pencitraan non-invasif tanpa kelemahan ini.
Meskipun peran khas EVS sebagai pengantar komunikasi dimediasi oleh
komposisi kompleks dan spesifik lipid EV dan protein, distribusi sistemik dan
pembersihan belum mengungkapkan perbedaan sesuai dengan asal-usul EV dan
komposisinya. In vivo distribusi EVS tampaknya mirip dengan nanovesikel buatan
liposom. EVS cepat dibersihkan oleh RES atau dieksresikan melalui hati atau
ginjal, yang dapat membatasi jangkauan mereka ke jaringan terget tertentu;
modifikasi permukaan untuk mengurangi serapan spesifik juga munngkin
diperlukan untuk aplikasi klinis yang akhirnya EVS sebagai pilihan terapi. Studi
dari sekresi EVS oleh berbagai sel di bawah kondisi yang beragam menunjukkan
bahwa ada banyak himpunan bagian dari EVS terdiri dari materi genetik yang
berbeda dan protein termasuk penanda permukaan dan biomaterial lainnya. Jika
kita ingin membuat perpustakaan EVS menarik, termasuk peran mereka dalam
fisiologi dan potensi terapi masa depan mereka, informasi mengenai mereka
distribusi in vivo, pembersihan, dan kinetika harus dicatat untuk setiap subtipe dari
EVS. Untuk menjelaskan fisiologi berbagai himpunan bagian dari EVS, metode
baru dari isolasi dan pemurnian subset ini serta metode yang efisien untuk in vivo
karakterisasi mereka akan diperkukan untuk memahami komunikasi antar sel
pendonor EV dan sel reseptor atau organ jauh.